הקשר בין פעילות Xanthine Oxidoreductase לבין נפרופתיה הנגרמת על ידי חומצה אריסטולוכית

איש קשר:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

חלק Ⅱ: פעילות קסנטין אוקסדורדוקטאז של רקמות במודל עכבר של נפרופתיה של חומצה אריסטולוכית

Takeo Ishii, Tomohiro Kumagae, Hiromichi Wakui, Shingo Urate, Shohei Tanaka ועוד.

Xanthine oxidoreductase(XOR) הוא אנזים קריטי בחילוף החומרים של פורין ובייצור חומצת שתן, ומדווחים שרמותיו עולות בזמן לחץ, ובכך מעודדות נזק לאיברים. כאן, חקרנו את הפעילות של XOR(Xanthine oxidoreductase)בדגם עכבר שלחומצה אריסטולוכית (AA) נפרופתיה הנגרמת, סוג של מחלת כליות כרונית נפרוטוקסית (CKD). ירידה מתמשכת בתפקוד הכליות נצפתה בעכברים עד 4 שבועות לאחר 4 שבועות של AA(חומצה אריסטולוכית)(2.5 מ"ג ק"ג') מתן. היסטולוגיה כלייתית גילתה עלייה בפיברוזיס בין-סטיציאלי צינורי לאורך זמן. אמנם א.א(חומצה אריסטולוכית)הממשל לא שינה את XOR(Xanthine oxidoreductase)פעילות בפלזמה, הלב, הכבד או השריר, XOR(Xanthine oxidoreductase)הפעילות גדלה באופן מתמשך ברקמת הכליה. התוצאות שלנו מצביעות על כך שהעלייה הספציפית לרקמת הכליה ב-XOR(Xanthine oxidoreductase) פעילות מעורבת בהתקדמות של הפרעות tubulointerstitial, במיוחד פיברוזיס.

תמצית Cistanche מטפלת ביעילות במחלת כליות

לחץ כאן לחלק Ⅰ

דִיוּן

תוצאות המחקר הנוכחי הראו ש-XOR כליות(Xanthine oxidoreductase)הפעילות מוגברת, במקביל להתפתחות של תפקוד לקוי של הכליות ופיברוזיס ב-AA(חומצה אריסטולוכית)מודל עכבר נפרופתיה. באופן מסקרן, XOR כליות(Xanthine oxidoreductase)פעילות מוגברת באופן בר קיימא גם לאחר AA(חומצה אריסטולוכית)הזרקה, אשר עשויה להיות מעורבת ביצירת פיברוזיס כליות לטווח ארוך ב-AA(חומצה אריסטולוכית)נפרופתיה. א.א(חומצה אריסטולוכית)משולבת בתאי אפיתל צינוריים דרך תעלת האניונים האורגניים 1 (OAT1) המתבטאת על קרום הבסיס הצינורי הכלייתי [28,29]. אחרי א.א(חומצה אריסטולוכית)מתן, רמות ציקלין B1 תאי עולות, המשקף את עצירת מחזור התא של תאי אפיתל צינורי לפני מיטוזה, ואפופטוזיס מתרחשת לסירוגין [30]. המנגנון הזה הוא הסיבה למה זה AA(חומצה אריסטולוכית)מודל נפרופתיה הוא ספציפי לכליות ושימושי לחקר המנגנון של פיברוזיס בכליות. לא בדקנו עכברים מתחת לגיל 12 שבועות; עם זאת, עכברים אלה היו ככל הנראה מציגים דפוסים דומים של אפופטוזיס של תאי אפיתל צינורי כליה ונפילת קרום בסיס. עם זאת, לא ידוע אם מחזור תאי האפיתל מופעל מהר יותר בעכברים צעירים יותר. אפופטוזיס של תאי אפיתל צינוריים גורמת לעצירת מחזור התא של רשת הנימים הפריטבולרית (PTC), מה שגורם לכל הנפרון להפוך להיפוקסי, ובכך לעורר את הביטוי של HIF-1. תעלת OAT1 קיימת בעיקר על קרום הבסיס האפיתל הצינורי של הכליה, אך קיימת גם בכמויות קטנות בתאי כבד [28]. התוצאות שלנו הראו כי בעקבות AA(חומצה אריסטולוכית)אדמיניסטרציה, XOR(Xanthine oxidoreductase)ההפעלה התרחשה בעיקר בכליות ולא נצפתה ברקמות אחרות. Sun וחב'[31]העריכו את צפיפות ה-PTC וכן את הביטוי של HIF-1a ו-Vascular endothelial growth factor (VEGF) בחולדות נקבות שקיבלו AA בתזונה(חומצה אריסטולוכית)פעמיים ביום במשך שמונה שבועות. הם הראו ירידה בצפיפות PTC לאורך זמן, עלייה ב-HIF-1a ו-VEGF, וללא שיפור בביטוי VEGF. Sun et al. הגיע למסקנה כי ה-AA(חומצה אריסטולוכית) ירידה בתיווך ברשת ה-PTC הביאה לרמות גבוהות יותר של ביטוי HIF-1o.

במחקר הנוכחי, א.א(חומצה אריסטולוכית)מתן גרם לירידה משמעותית במשקל הגוף, כמו גם לירידה בתפקוד הכליות. אינדקס מסת גוף נמוך יותר קשור לתמותה גבוהה יותר בחולים עם CKD. ידוע כי קכקסיה אורמית היא הגורם לירידה במשקל ב-CKD, כשהיא קשורה לחמצת ודלקת. בנוסף, לחולים עם CKD יש לעיתים קרובות סרקופניה, הקשורה לסיכון מוגבר לתמותה ולסיבוכים קרדיו-וסקולריים. למרות שלא בדקנו צריכת מזון של עכברים ופרופילי שרירי השלד במחקר הנוכחי, AA(חומצה אריסטולוכית) ייתכן שירידה במשקל נגרמת כתוצאה מקצ'קסיה וסרקופניה. קצ'קסיה הנגרמת על ידי אורמיה הוצעה כדי להפחית את צריכת המזון ומשקל הגוף. מצד שני, העלייה באדיפוגנזה וליפוגנזה שהתרחשה במקביל לעלייה ב-XOR(Xanthine oxidoreductase)פעילות, הקשורה להתקדמות ביטוי הגנים C/EBP או PPARy ו-SREBF1, העלתה כי תגובה זו היא מנגנון הגנה מפני ירידה במשקל.

ראינו גם שא.א(חומצה אריסטולוכית)מתן הגדיל באופן עקבי את רמות הביטוי HIF-1, ככל הנראה עקב פירוק רקמות. ביחד, תוצאות אלו מצביעות על היפוקסיה נפרונית ועלייה ב-XOR(Xanthine oxidoreductase)עשוי לחפוף. רמות ביטוי גבוהות מתמשכת של XOR(Xanthine oxidoreductase)ברקמת הכליה נגרמו על ידי AA(חומצה אריסטולוכית) אפופטוזיס מושרה של האפיתל הצינורי. היפוקסיה של רקמות הובילה לפירוק ATP, ובכך הפעילה את XOR(Xanthine oxidoreductase). XOR מוגבה(Xanthine oxidoreductase)פעילות נצפתה לא רק יחד עם פירוק ATP, אלא במהלך נזק לרקמות שנגרם על ידי ייצור ROS. נדרשת חקירה נוספת כדי לקבוע אם XOR(Xanthine oxidoreductase)עורר נזק לגוף באמצעות ייצור של עקה חמצונית. XOR(Xanthine oxidoreductase)הוא האנזים המגביל את הקצב במטבוליזם של פורין. הוא מייצר חומצת שתן ו-ROS, האחרון שבהם מייצר סטרס חמצוני.

באמצעות ייצור ROS, ציטוקינים פרו-דלקתיים בתחום הפירין של משפחת NLR המכיל 3 (NLRP3) inflammasome/IL-1 מסלול מעוררים במקרופאגים [32]. בינתיים, מסלול NRLP3/IL-1 מופעל גם על ידי מונוסודיום אורט, המחמיר את הפגיעה הכלייתית באמצעות שקיעת רקמה של גבישי חומצת שתן [32-34]. Yisireyili et al.[35]דיווחו כי עכברי C57BL/6 בעומסים במתח, XOR(Xanthine oxidoreductase)רמות הביטוי של , MCP-1 ו-TNF- עלו ברקמת השומן הקרבית, עם עלייה בצביעה של רקמות F4/80 ו-CD68, אשר ניתן היה לבטל עם febuxostat. עמוד ואח' [36] העריך את ה-XOR(Xanthine oxidoreductase)פעילות המושרה על ידי ציטוקינים דלקתיים בתאי אפיתל חלב אנושיים. XOR(Xanthine oxidoreductase)הפעילות גדלה בעיקר בטיפול ב-IFN-y, אך לא נצפתה תגובה עם IL-6. יש להניח כי פיברוזיס מתקדם באמצעות גירוי משופר של מסלול TGF- על ידי טרנסגלוטמינאז מסוג 2 (TG2), המעודד ביטוי קולגן I-IV במשפר השרשרת הקלה של גורם גרעיני kappa של תאי B משופעלים (NF-kB)[{{7} }]. כשלומדים א.א(חומצה אריסטולוכית)נפרופתיה בעכברים עם רקע C57BL/6, Scarpellini et al. [41 דיווח כי סינדקן-4, המעודד פיברוזיס, מחצין TG2 לממברנת התא. זה גורם להיווצרות קומפלקס עם TGF- ומוביל להתקדמות של פיברוזיס בכליות. אפקט זה מוחלש באופן משמעותי בעכברי נוקאאוט סינדקאן-4. דווח כי מעכב הפרוטאזומיב בורטזומיב מעכב פיברוזיס באמצעות עיכוב TGF [30]. TGF- ממלא תפקיד חשוב בטרנספורמציה של פיברובלסט ב-AA(חומצה אריסטולוכית)נפרופתיה באמצעות מנגנון פיברוטי [4]]. ב-AA שלנו(חומצה אריסטולוכית)לימוד,TGF ו-XOR(Xanthine oxidoreductase)באו לידי ביטוי בו-זמנית, אך ככל הנראה מנגנון פיברוטי זה הושרה באמצעות ביטוי TGF באמצעות XOR פעיל(Xanthine oxidoreductase). הביטוי של גנים TGF ו-Col I קודם בתגובה לטיפול ב-AA(חומצה אריסטולוכית), שהציע מנגנון פעולה פיברוטי. יתרה מכך, הביטוי של HIF-la, מרכיב של הגורם הגורם להיפוקסיה, עלה במקביל ל-XOR(Xanthine oxidoreductase)הפעלה במסלול הפיברוטי, שכתוצאה מכך הגביר את הלחץ החמצוני ברקמות.

הממצאים של ניסוי זה מצביעים על כך שייצור מיני חמצן תגובתי (ROS) עם הפעלת ה-NADPH אוקסידאז התרחש במקביל ל-XOR(Xanthine oxidoreductase)הפעלה בתגובה לנמק של רקמות שנגרם על ידי היפוקסיה של רקמות, ואחריה התקדמות למסלול הפיברוטי. בנוסף, התצפיות המיקרוסקופיות הראו כי XOR(Xanthine oxidoreductase)הפעילות והאזור הפיברוטי היו בקורלציה מובהקת (איור 6C), מה שמצביע על כך ש-XOR(Xanthine oxidoreductase)עלול היה לגרום נזק חלקי לגוף. עם זאת, יש צורך בבדיקה נוספת.

צוין כי XOR(Xanthine oxidoreductase)עשוי לווסת את האדיפוגנזה והתמרה מזנכימית באפיתל הצינורית הכלייתית [42]. עם זאת, לא הובהר אם ה-XOR(Xanthine oxidoreductase)הגן מווסת באופן שלילי את שקיעת טיפות השומן ואת הטרנספורמציה המזנכימית, או שהם נובעים ממשקע קסנטין ברקמת הכליות כאשר XOR(Xanthine oxidoreductase)מדולדל. לא חקרנו את מנגנון השומנים בדם, אבל המחקר שלנו הראה שהשינויים העיקריים ברקמת הכליה היו אפופטוזיס, ירידה בתאי אפיתל צינוריים ופיברוזיס. לא צוין שקיעת טיפות שומנים. ב-AA הזה(חומצה אריסטולוכית)מודל, אדיפוגנזה וליפוגנזה עלו במקביל ל-XOR(Xanthine oxidoreductase)פעילות, בניגוד ל-XOR(Xanthine oxidoreductase)דֶגֶם. תוצאה זו העלתה כי האדיפוגנזה והליפוגנזה המתרחשות עם התקדמות הגנים C/EBP או PPARy ו-SREBF1 היו תוצאה של cachexia או דלקת שנגרמה על ידי ROS, ולא העבודה של XOR(Xanthine oxidoreductase)בצורה ישירה.

חן ואח' [43] דיווח כי XOR(Xanthine oxidoreductase)הפעילות נחלשה בתאים שקטים של C/EBP; לכן, הגן C/EBP נמצא במעלה הזרם של XOR(Xanthine oxidoreductase)גֵן. בנוסף, בדגם העכבר ob/ob, XOR(Xanthine oxidoreductase)דלדול גנים נצפתה מעכבת אדיפוגנזה; בהתבסס על זה, XOR(Xanthine oxidoreductase)נחשבה לשכבה במעלה הזרם של ה-PPAR? גֵן. XOR(Xanthine oxidoreductase)מוצע כיעד טיפולי לתסמונת מטבולית עם יתר אוריקמיה. ב-AA שלנו(חומצה אריסטולוכית)ביטוי הגנים של מודל, PPARy, C/EBP ו-SREBFl עלו במקביל ל-XOR(Xanthine oxidoreductase)פעילות. תוצאה זו הציעה כי XOR(Xanthine oxidoreductase)אדיפוגנזה או ליפוגנזה מופעלת, או, להיפך, כי קצ'קסיה או עקה חמצונית הנגרמת על ידי AA(חומצה אריסטולוכית)הביא להפעלה של גנים אדיפוגנטיים או ליפוגנטיים כמנגנון הגנה; נדרשת חקירה נוספת בנקודה זו. ניהול AA(חומצה אריסטולוכית)גרם לאפופטוזיס והיפוקסיה נפרון עם ביטוי גבוה של HIF-1, וגרם להתקדמות למסלול הפיברוטי דרך TGF- ו-Col 1. XOR(Xanthine oxidoreductase)הושרה בעיקר על ידי היפוקסיה עם עקה חמצונית, חשוד עוד יותר לייצר ROS באמצעות רמות גבוהות של NADPH אוקסידאז, מה שמרמז על XOR(Xanthine oxidoreductase)השתתף במנגנון הפיברוטי. נדרשת חקירה נוספת על מנגנון זה כדי להבהיר האם אדיפוגנזה וליפוגנזה נגרמה על ידי XOR(Xanthine oxidoreductase)או מוגבר כתוצאה מנזק לרקמות. המגבלה העיקרית של מחקר זה היא גדלי הקבוצות הקטנות. עם זאת, ראינו הבדלים ברורים בסמנים שנבדקו, מה שמצביע על כך שיש צורך בחקירה נוספת של התערבויות טיפוליות. מחקרים נוספים צריכים להעריך את ההשפעה של XOR(Xanthine oxidoreductase)עיכוב לגבי דיכוי פיברוזיס במחלות כליות פרוגרסיביות. מגבלה נוספת היא שלא חקרנו את מנגנון השומנים בדם ביסודיות ולא יכולנו למדוד את הסמן המטבולי של השומנים בדם. עם זאת, השינויים העיקריים שנצפו ברקמות הכליות היו אפופטוזיס, ירידה במספר תאי האפיתל הצינוריים ופיברוזיס, בעוד שקיעת טיפות שומנים לא הוצגה. יתר על כן, הערכנו את ביטוי הגן הכלייתי של אדיפוגנזה ו-lipogenesis, שאפשרו לנו להעריך את חילוף החומרים של שומנים לפי AA(חומצה אריסטולוכית)מִנהָל. ב-AA הזה(חומצה אריסטולוכית)במודל, אדיפוגנזה התקדמה במקביל לעלייה ב-XOR(Xanthine oxidoreductase)פעילות, בניגוד למה שנצפה ב-XOR(Xanthine oxidoreductase)דֶגֶם. תוצאה זו הציעה כי XOR(Xanthine oxidoreductase)לא הפעיל תפקיד מגן ישיר על רקמות הכליות, והעובדה שהאדיפוגנזה שהתרחשה עם התקדמות ביטוי הגנים C/EBPo או PPARY ו-SREBF1 נבעה מדלקת שנגרמה על ידי ROS, הציעה כי התגובה האדיפוגנטית או הליפוגנטית הזו היא מנגנון הגנה.

לסיכום, תוצאות המחקר הנוכחי הראו כי רקמות XOR(Xanthine oxidoreductase)פעילות, הנגרמת על ידי קטבוליזם המושרה על ידי היפוקסיה ברקמות, הופעלה באופן עקבי ב-AA(חומצה אריסטולוכית) מודל CKD של נפרופתיה מושרה. יתר על כן, XOR ספציפי לכליות(Xanthine oxidoreductase)הפעלה הייתה קשורה לנזק לאיברים ולהתפתחות נגע פיברוטי בכליות. לפיכך, א.א(חומצה אריסטולוכית)מודל נפרופתיה יכול להיות שימושי כדי להמשיך ולחקור מנגנון מניעה נגד XOR(Xanthine oxidoreductase) שינויים פיברוטיים בכליות המתווכים המובילים למחלת כליות סופנית.

בדיקת פלבנואידים

הפניות

1 Lee SY,Kim SI and Choi ME (2015) מטרות טיפוליות לטיפול במחלות כליה פיברוטיות. Transl Res 165,512-530.

2 Gilbertson EL,Krishnasamy R, Foote C, Kennard AL, Jardine MJ and Grey NA (2019)נטל הטיפול ואיכות החיים בקרב מטפלים במבוגרים המקבלים דיאליזה תחזוקה: סקירה שיטתית.Am/ Kidney Dis 73,{{3} }.

3 Stiborova M, Arlt VM and Schmeiser HH(2016)Balkan endemic nephropathy: a update on its etiology.Arch Toxicol 90,2595-2615.

4 Martinek V, Barta F, Hodek P, Frei E, Schmeiser HH, Arlt VM and Stiborova M (2017) השוואה של חמצון של חומרים מסרטניםחומצה אריסטולוכיתI ו-II על ידי ציטוכרומים מיקרוזומליים P450 במבחנה: גישות ניסיוניות ותיאורטיות. Monatsh Chem 148,1971-1981.

5 Yang CS,Lin CH, Chang SH ו-Hsu HC(2000)

דלקת כליות אינטרסטיציאלית מתקדמת במהירות מתקדמת הקשורה לתרופות צמחיות סיניות. Am J Kidney Dis 35,313-318.

6 Nortier JL and Vanherweghem JL(2007) למטופלים הנוטלים טיפול בצמחי מרפא - לקחים מחומצה אריסטולוכיתnephropathy.Nephrol Dial Transplant 22,1512-1517. 7 Mazzali M, Hughes J,Kim YG, Jefferson JA, Kang

7 DH, Gordon KL, Lan HY, Kivlighn S וג'ונסון RJ (2001) חומצת שתן מוגברת מגבירה את לחץ הדם בחולדה על ידי מנגנון חדשני של קריסטל בלתי תלוי. יתר לחץ דם 38, 1101-1106.

8 Reboldi G, Verdecchia P, Saladini F, Pane M, Beilin LJ, Eguchi K,Imai Y,Kario K, Ohkubo T, Pierdomenico SD et al.(2019) ערך ניבוי נוסף של חומצת שתן גבוהה לאירועים קרדיווסקולריים בדם אמבולטורי Pressure International Study.J Clin Hypertens 21,966-974.

9 Kuwabara M, Hisatome I, Niwa K, Hara S, Roncal Jimenez CA, Bjornstad P, Nakagawa T,Andres-Hernando A, Sato Y, Jensen Tet al. (2018) חומצת שתן היא סמן סיכון חזק לפיתוח יתר לחץ דם כתוצאה מיתר לחץ דם: 5-מחקר עוקבה יפני שנתי. יתר לחץ דם 71, 78-86.

10 Dalbeth N, Merriman TR and Stamp LK(2016)Gout. Lancet 388, 2039-2052.

11 Biscaglia S, Ceconi C,Malagu M, Pavasini R and Ferrari R(2016) חומצת שתן ומחלת עורקים כליליים: קישור חמקמק שראוי לתשומת לב נוספת. Int J Cardiol213,28-32.

12 Johnson RJ, Sanchez-Lozada LG, Mazzali M, Feig DI, Kanbay M and Sautin YY (2013) מהם הטיעונים המרכזיים נגד חומצת שתן כגורם סיכון אמיתי ליתר לחץ דם? יתר לחץ דם 61, 948-951.

13 Bray RC(1988)הביוכימיה האנאורגנית של molybdoenzymes.Q Rev Biophys 3,299-329.

14 Vorbach C, Scriven A ו-Capecchi MR(2002) גן משק הביתxanthine oxidoreductaseהכרחי למעטפת והפרשת טיפות שומן חלב: שיתוף גנים בבלוטת החלב המניקה. Genes Dev 16, 3223-3235.

15 Nishino T(1994) ההמרה של xanthine dehydrogenase ל-xanthine oxidase ותפקיד האנזים בפגיעות reperfusion.J Biochem 116,1-6.

16 McCord JM(1985) רדיקלים חופשיים שמקורם בחמצן בפגיעה ברקמות פוסטאיסכמיות.NEngl J Med 312,159-163.

17 Saugstad OD(1988) היפוקסנטין כאינדיקטור להיפוקסיה: תפקידו בבריאות ובמחלות באמצעות ייצור רדיקלים חופשיים. Pediatr Res 23,143-150.

18 Hille R and Nishino T(1995) מבנה ומנגנון פלבופרוטאינים.4. Xanthine oxidase ו-xanthine dehydrogenase. FASEB.J 9,995-1003.

19 Bender D and Schwarz G (2018) סינתזת תחמוצת חנקן תלויה בניטריט על ידי אנזימים מוליבדן. פברואר תן1 592,2126-2139.

20 Kushiyama A, Nakatsu Y, Matsunaga Y,Yamamotoya T,Mori K, Ueda K,Inoue Y,Sakoda H, Fujishiro M, Ono Het al.(2016)תפקיד של דלקת הקשורה למטבוליזם של חומצת שתן בפתוגנזה של מרכיבי תסמונת מטבולית כגון טרשת עורקים וסטאטהפטיטיס לא אלכוהולית. Mediators Inflamm 2016,8603164. 21 Ishii T,Taguri M, Tamura K and Oyama K (2017) הערכת היעילות שלxanthine oxidoreductaseמעכבים בחולי המודיאליזה באמצעות מודל מבני שולי. Sci Rep 7,14004. 22 Huang L, Scarpellini A, Funck M, Verderio EAM ו

Johnson TS(2013) פיתוח מודל של מחלת כליות כרונית בעכברי C57BL/6 עם רלוונטיות לפתולוגיה אנושית. Nephron Extra 3,12-29.

23 Wakui H, Tamura K, Masuda S,Tsurumi-Ikeya Y, Fujita M, Maeda A, Ohsawa M,Azushima K,Uneda K, Matsuda M et al.(2013)Enhanced angiotensin-associated protein in renal tubule מדכא אנגיוטנסין- יתר לחץ דם תלוי. יתר לחץ דם 61,1203-1210.

24 Wakui H,Uneda K, Tamura K, Ohsawa M, Azushima K,Kobayashi R, Ohki K, Dejima T,Kanaoka T, Umemura Set al.(2015)Renal tubule angiotensin I type I receptor-associated protein מקדם natriuresis ומעכב מלח -עליית לחץ דם רגישה. Am Heart Assoc 4,e001594.

25 Ohsawa M, Tamura K, Wakui H, Maeda A, Dejima T, Kanaoka T, Azushima K, Uneda K, Tsurumi-Ikeya Y, Kobayashi R et al.(2014) מחיקת החלבון הקשור לקולטן אנגיוטנסין II מסוג l מגבירה ספיגה מחדש של נתרן בכליות ומחמירה יתר לחץ דם בתיווך אנגיוטנסין II. כליות אינט 86,570-581.

26 Tsurumi Y,Tamura K, Tanaka Y, Koide Y, Sakai M, Yabana M, Noda Y, Hashimoto T, Kihara M, Umemura S et al.(2006)מולקולת אינטראקציה של קולטן AT1, ATRAP, מועברת יחד עם קולטן AT1 ב צינוריות הכליה של העכבר. Kidney Int 69,488-494.

27 Murase T, Nampei M, Oka M, Ashizawa N, Matsumoto K, Miyachi A and Nakamura T(2016)Xanthine oxidoreductaseבדיקת פעילות ברקמות באמצעות מצע יציב המסומן עם איזוטופ וכרומטוגרפיה נוזלית ברזולוציה גבוהה של ספקטרומטריית מסה.J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 1008,189-197.

28 Chang SY, Weber EJ, Sidorenko VS, Chapron A, Yeung CK, Gao C, Mao Q, Shen D,Wang J, Rosenquist TA et al.(2017)מודל כבד-כליה אנושי מבהיר את המנגנונים שלחומצה אריסטולוכיתnephrotoxicity.JCI Insight 2, e95978.

29 Baudoux TE, Pozdzik AA, Arlt VM, De Prez EG, Antoine MH, Quellard N, Goujon JM and Nortier JL (2012)Probenecid מונע נמק צינורי חריף במודל עכבר שלחומצה אריסטולוכיתנפרופתיה. Kidney Int 82,1105-1113.

30 Zeniya M, Mori T, Yui N, Nomura N, Mandai S, Isobe K, Chiga M, Sohara E, Rai T and Uchida S (2017) מעכב הפרוטאזום בורטזומיב מחליש פיברוזיס כליות בעכברים באמצעות דיכוי TGF{{2 }}. Sci Rep 7,13086.

31 Sun D,FengJ,Dai C,SunL, Jin T,MaJand Wang L (2006)תפקיד של אובדן נימים פריטובולרי והיפוקסיה בפיברוזיס פרוגרסיבי של tubulointerstitial במודל של חולדהחומצה אריסטולוכיתnephropathy.AmJ Nephrol 26,363-371.

32 Ives A, Nomura J,Martinon F,Roger T,LeRoy D, Miner JN, Simon G, Busso N and So A (2015)Xanthine oxidoreductaseמווסת את הפרשת מקרופאג ILL עם הפעלת NLRP3 inflammasome. Nat Commun 6,6555.

33 Liu Q,Zhang D, Hu D,Zhou X and Zhou Y(2018) תפקיד המיטוכונדריה בהפעלת NLRP3 inflammasome.Mol Immunol 103,115-124.

34 Yabal M, Calleja DJ, Simpson DS and Lawlor KE (2019) להדגיש את המיטוכונדריה: תובנות מכניסטיות לגבי הפעלת NLRP3 inflammasome.J Leukoc Biol 105, 377-399.

35 Yisireyili M, Hayashi M, Wu H, Uchida Y, Yamamoto K, Kikuchi R, Shoaib Hamrah M, Nakayama T, Wu Cheng X, Matsushita T et al.(2017) Xanthine oxidase inhibition by febuxostat attenuates stress-induced hyperlucosemia,g חוסר מטבוליזם, ומצב פרוטרומבוטי בעכברים. Sci Rep 28,1266.

36 Page S, Powell D, Benboubetra M, Stevens CR, Blake DR, Selase F, Wolstenholme AJ and Harrison R(1998)Xanthine oxidoreductaseבתאי אפיתל חלב אנושיים: הפעלה בתגובה לציטוקינים דלקתיים. Biochim Biophys Acta 1381,191-202.

37 Mirza A, Liu SL, Frizell E, Zhu J, Maddukuri S, Martinez J, Davies P, Schwarting R, Norton P and Zern MA(1997) תפקיד עבור רקמות טרנסגלוטמינאז בפגיעות כבד ובפיברוגנזה, וויסות שלה על ידי NF- kappaB.Am J Physiol 272, G281-G288.

38 Shweke N, Boulos N, Jouanneau C, Vandermeersch S, Melino G, Dussaule JC, Chatziantoniou C, Ronco P and Boffa JJ(2008) Transglutaminase של רקמות תורם לפיברוזיס כליות אינטרסטיציאלי על ידי העדפת הצטברות של קולגן פיברילרי באמצעות הפעלת חדירת TGF- .Am J Pathol 173,631-642.

39 Verderio EA, Johnson TS ו-Griffin M(2005) Transglutaminases בריפוי פצעים ודלקת. Prog Exp Tumor Res 38,89-114.

40 Johnson TS, Skill NJ, El Nahas AM, Oldroyd SD, Thomas GL, Douthwaite JA, Haylor JL and Griffin M (1999) Transglutaminase transcription and antigen translocation in experimental renal scarring.J Am Soc Nephrol 10, 2146-2157.

41 Scarpellini A, Huang L, Burhan I, Schroeder N,Funck M,Johnson TS ו-Verderio EA(2014)Syndecan-4 נוק-אאוט מוביל להפחתת טרנסגלוטמינאז חוץ-תאי-2 ומגן מפני פיברוזיס טובולו-בין-סטיציאלי. J Am Soc Nephrol 25,1013-1027.

42 Ohtsubo A, Matsumura K, Sakagami K, Fuji K, Tsuruya K, Noguchi H, Rovira II, Finkel T and Iida M (2009)Xanthine oxidoreductaseדלדול גורם לפיברוזיס אינטרסטיציאלי בכליות באמצעות הצטברות שומנים חריגה ופורין באבוביות הכליות. יתר לחץ דם 54, 868-876.

43 Cheung KJ, Tzameli I,Pissios P, Rovira I, Gavrilova O, Ohtsubo T, Chen Z, Finkel T, Flier JS and Friedman JM(2007)Xanthine oxidoreductaseהוא מווסת של פעילות אדיפוגנזה ו-PPAR.Cell Metab 5,115-128.

הערה: עשב המרפא הסיני המסורתי cistanche (המכונה גם "עשב הדרקון" ו"ג'ינסנג המדבר"), גדל רק במדבריות הצחיחים והחמים. כאחד מתשעת עשבי התיבול האלמותיים, Cistanche (cistanche tubulosa/cistanche deserticola/cistanche deserticola/cistanche deserticola/cistanche desertliving cistanche/cistanche salsa) מכיל מרכיבים יעילים עשירים כגון אכינאקוסיד, אקטאוזיד, גלוקוזידים פניליתנואידים מלאים, פלבנואידים, מרכיבים אפקטיביים של ריבוי סוכרים וכו'. עשב מזין וחומר מזון לחסינות של אנשים, איברים פנימיים ותאי מוח ונוירונים וכו'. מחקרים פרמקולוגיים מודרניים אישרו את ההשפעות הבאות של cistanche (היתרונות של cistanche): שיפור חסינות; לשפר את התפקוד המיני ותפקוד הכליות; נוגד עייפות; נוגד הזדקנות; לשפר את הזיכרון; מחלת אנטי-פרקינסון; מחלת אנטי-אלצהיימר; נוגד חמצון; קלות-עצירות; אנטי דלקתי; לקדם את צמיחת העצם, הלבנת עור; להגן על הכבד; וכו '