המערכת האנדוקנבינואידית והכליות: מפיזיולוגיה כלייתית לפציעה ומחלות

איש קשר: emily.li@wecistanche.com

ג'ניס טי צ'ואה¹ et al

תַקצִיר

מבוא:כמו השכיחות שלכִּליָההמחלה ממשיכה לעלות ברחבי העולם, ישנן עדויות מצטברות לכךכִּליָהפציעהותִפקוּד לָקוּי, בין אם חריפה או כרונית, קשורה לתוצאות שליליות עיקריות, כולל תמותה. בינתיים, אפשרויות טיפוליות יעילות בטיפול חריףכִּליָהפציעה (AKI) וכרוניתכִּליָהמַחֲלָה(CKD) היו דלילים. רבים מהטיפולים היעילים המשמשים באופן שגרתי לפתולוגיות שונות בחולים ללא מחלת כליות לא הצליחו להוכיח יעילות באלה עם הפרעה בתפקוד הכלייתי. לפיכך, קיים צורך דחוף בגילוי מסלולים חדשים שניתן למקד לטיפולים קליניים חדשניים ויעילים במצבי מחלת כליות.

דיון: יש כעת עדויות מצטברות לכך שהמערכת האנדוקנבינואידית (EC) ממלאת תפקיד בולט בהומאוסטזיס ותפקוד נורמלי של הכליות. בנוסף, מחקרים רבים עדכניים תיארו מנגנונים שבאמצעותם שינוי במערכת ה-EC יכול לתרום לנזק ולמחלות בכליות. אלה כוללים תפקיד פוטנציאלי לקולטני קנבינואידים בנזק טובולוגלומרולרי ובפיברוזיס, שהם מאפיינים נפוצים של AKI, דלקת כליות אינטרסטיציאלית, גלומרולופתיה ומצבים אחרים המובילים ל-AKI ו-CKD.

מסקנה: ממצאים אלו מצביעים על כך שמניפולציה של מערכת ה-EC עשויה להיות אסטרטגיה טיפולית יעילה לטיפול בכִּליָהמַחֲלָהופציעה. עם זאת, נדרשים מחקרים מכניסטיים נוספים כדי לשרטט באופן מלא את תפקידה של מערכת זו בתנאים שונים המשפיעים עלכליות. יתר על כן, בעוד שרוב הספרות הנוכחית מתמקדת בתפקידה של מערכת ה-EC בכללותה בפתופיזיולוגיה של הכליה, מחקרים עתידיים יצטרכו גם להבהיר את התרומה של כל מרכיב במערכת זו, כולל המתווכים של EC, בפתוגנזה שלכִּליָהמַחֲלָהותפקידם הפוטנציאלי כחלק מאסטרטגיה טיפולית.

מילות מפתח: חריפהכִּליָהפציעה; כְּרוֹנִיכִּליָהמַחֲלָה; אנדוקנבינואיד; לַיֶפֶת;דַלֶקֶת; נפרופתיה

מניעת מחלת כליות כרונית

מבוא

הכליות ממלאות תפקיד מרכזי בהומאוסטזיס תקין של הגוף באמצעות מגוון תפקודים, כולל הסרת תוצרי לוואי של חילוף החומרים, פינוי רעלים, ויסות מצב נפח הגוף, אלקטרוליטים והמודינמיקה מערכתית וייצור הורמונים כמו אריתרופויאטין וויטמין D פעיל. לפיכך, אין זה מפתיע שפגיעה בכליות קשורה לתחלואה ותמותה משמעותיים. הדבר האחרון נכון בין אם הירידה בתפקוד הכלייתי היא חלק מתהליכים חריפים כגון פגיעה בכליות חריפה (AKI) עקב נמק צינורי, או תהליך כרוני יותר כגון מחלת כליות כרונית (CKD) הנגרמת מיתר לחץ דם (HTN) או סוכרת. יתר על כן, המנגנונים האחראים לפגיעה כלייתית הם מורכבים וניתנים למגוון. בעוד שמנגנונים אלו מסווגים באופן קבוע על סמך סוג הפציעה (חריפה או כרונית) והחלק האנטומי של הנפרון המושפע (כולל הגלומרולוס, הצינוריות, המזנגיום, כלי הדם), קיימת חפיפה לא משמעותית בין הקטגוריות הללו. לדוגמה, יש עדויות המצביעות על כך ש-AKI יכול לגרום ל-CKD. בנוסף, קיימת חפיפה תכופה בין אתרי הפגיעה האנטומיים השונים בהתחשב בכך שנזק לחלק אחד של הנפרון לאורך זמן יכול לגרום לפגיעה באתרים אחרים. לדוגמה, בעוד שמחלת כליות סוכרתית מתבטאת לעיתים קרובות עם פגיעה גלומרולרית ופרוטאינוריה, על פני תקופה ממושכת היא גורמת גם לנזק טובולי-בין-מערכתי ופיברוזיס המוביל ל-CKD מתקדם ולמחלת כליות סופנית. לכן, הבנת המסלולים הבסיסיים ששינויים בהם עלולים לגרום לצורות שונות של פגיעה וכלייתית יכולה למלא תפקיד חשוב בהמצאת טיפולים יעילים למניעה וטיפול במחלת כליות. בהקשר זה, ישנן עדויות מצטברות המצביעות על כך שהמערכת האנדוקנבינואידית (EC) ממלאת תפקיד מרכזי בפיזיולוגיה כלייתית תקינה. בנוסף, ישנם נתונים המוכיחים ששינויים במסלול זה יכולים להוביל לפתוגנזה של מחלת כליות חריפה וכרונית כאחד. לכן, הערכה של המערכת יכולה להיות תחום גילוי מבטיח, שעשוי לגרום ליצירת טיפולים חדשים שעשויים להיות מכוונים לטיפול בצורות שונות של מחלות כליה.

מערכת ה-EC מורכבת מליגנדים אנדוגניים שמקורם בחומצות שומן, הקולטנים שלהם והאנזימים הדרושים לביו-סינתזה ופירוק שלהם.1 ה-ECs המאופיינים היטב הם N-arachidonoyl ethanolamide, הידוע גם בשם anandamide (AEA), ו-{{4} }arachidonoyl sn-glycerol (2-AG).2 מולקולות אלה שמקורן בשומנים נוצרות לפי דרישה על ידי חילוף החומרים של פוספוליפידים ממברניים בתגובה לגירויים שונים, כולל סידן תוך תאי מוגבר או הפעלת קולטן מטבוטרופית.3 לאחר הייצור, הם נקשרים לקולטני הקנבינואידים המקומיים בצורה אוטוקרינית או פאראקרינית, אם כי ניתן למצוא ריכוזים מדידים של ליגנדים אלו בדם, בנוזל השדרה ובלימפה.4 בעוד שהפעולות האנדוקריניות הפוטנציאליות של תרופות אלו נותרו תחום של מחקר פעיל, זה ידוע היטב שהם פועלים מקומית על ידי קשירה לשני קולטני קנבינואידים שנחקרו בהרחבה, תת-סוג קנבינואיד-1 (CB1)ותת-סוג-2 (CB2).5 AEA ו-2-AG יכולים לאחר מכן להיות ta מתקבלת על ידי תאים באמצעות מנגנון קליטה בעל זיקה גבוהה6,7 ומתפורר במהירות באמצעות פעולת האנזימים, חומצת שומן אמיד הידרולאז (FAAH) ומונואצילגליצרול ליפאז (MGL), בהתאמה.1

בעוד שתפקידה של מערכת ה-EC היה בתחילה מוקד של מחקר מקיף במערכת העצבים המרכזית, במהלך שני העשורים האחרונים, מספר לא מבוטל של מחקרים אישרו את נוכחותה וחשיבותה באיברים ההיקפיים, כולל הכליות. בהקשר זה, זוהו ברקמת הכליה ריכוזים ניכרים של ECs, המכונות הנדרשות לביוסינתזה ופירוק שלהם, כמו גם קולטני CB.8,9 ההשפעות הנוצרות מפעולות מערכת זו במצבים נורמליים ופתולוגיים של עם זאת, הכליות לא הוגדרו במלואן בהתחשב במורכבויות הרבות הכרוכות בייצור ובפירוק של ליגני EC.8-11 בנוסף, ההתפלגות הדיפרנציאלית והפעולות של קולטני CB1 ו-CB2 במבנים ובתתי סוגים שונים של תאים בכליה יכולים בסופו של דבר יביאו לתוצאות איתות מגוונות שקשה יהיה לחזות את ההשפעה הכוללת שלהן. בהתאם לכך, זיהוי התפקידים הפיזיולוגיים והפתופיזיולוגיים של המערכת בתחום הנפרולוגיה נותר תחום חקר פעיל.

מערכת EC ופיזיולוגיה כלייתית תקינה

הוכח כי CB1 ו-CB2 שייכים לקבוצה של שבעה קולטני G-מוצמדים בתחום הטרנס-ממברני התלויים תפקודית בהפעלה של חלבוני Gi/G0 heterotrimeric.11 למרות שהפעלת שני הקולטנים גורמת ל- עיכוב האנזים adenylyl cyclase ופעילות מוגברת של חלבון קינאז (MAPK) המופעל על ידי מיטוגן, הוכח גם שהפעלת CB1 מגרה סינתאז תחמוצת החנקן ושולטת ישירות בהפעלת תעלות יונים. האחרונים כוללים את תעלות האשלגן החיצוניות המתקנות פנימה וסוג A, תעלות אשלגן חיצוניות מסוג D ותעלות סידן מסוג N ו-P/Q.^10,12,13למרות תת-היחידה המשותפת של חלבון G המשותפת בין קולטני CB1 ו-CB2, הפעלתם יכולה לייצר השפעות ביולוגיות מנוגדות במצבים נורמליים וחולים, בין היתר בשל השפע והלוקליזציה של קולטני הקנבינואידים הללו והליגנדים ה-EC שלהם.

בעוד שקולטן CB1 נחשב בתחילה כממוקם למערכת העצבים המרכזית וההיקפית,^12,14הוכח שהוא קיים באיברים היקפיים כגון הכליות.15,16 לדוגמה, נוכחותם של קולטני CB1 פונקציונליים הוכחה בצינוריות מפותלות פרוקסימליות, צינוריות דיסטליות ותאים משולבים של צינור האיסוף בכליה האנושית13 ( איור 1). יתר על כן, ביטוי קולטן CB1 נמצא גם בחלקים אחרים של הנפרון במכרסמים, כגון העורקים האפרנטיים והפושרים, 17 איברים עולים עבים (TAL) של הלולאה של Henle,18 וגלומרולי,^19–23כמו גם בתתי סוגים שונים של תאי כליה כגון פודוציטים גלומרולריים, 24,25 תאי אפיתל צינוריים, 13,15,20,21,24,26-29 ותאים מזן תרבותיים.^30,31באופן דומה, הביטוי של קולטני CB2, למרות שבעבר חשבו שהוא בעיקר בתאי מערכת החיסון,32 הוכח גם ברקמת הכליה.33 לדוגמה, ביטוי קולטן CB2 הותאם לפודוציטים,²⁵תאי צינורית פרוקסימליים,^26,33,34, ותאים mesangial31 בדגימות קליפת הכליה של בני אדם וחולדות.

בנוסף לביטוי דיפרנציאלי של קולטני CB ברקמות ובתאים שונים, הוויסות המורכב של הביוסינתזה והפירוק של הרמות הבסיסיות הגבוהות של ECs בכליה באמצעות אנזימים במורד הזרם תורם להשפעות האיתות המגוונות של הליגנדים הללו.^{20,31,35–39}בעוד שקליפת הכליה הציגה רמות דומות של AEA ו-2-AG, הוכח כי AEA מועשר במדולה של הכליה בהשוואה לקליפת המוח, בעוד שרמות ה-2-AG במדולה היו דומות לאלו של שני ה-ECs בקליפת המוח.39 יתר על כן, AEA קיים בתאי אנדותל וכליות מתורבתים ברמות נמוכות וניתן לסנתז אותו מחומצה ארכידונית ואתנולמין ולקטבול על ידי AEA amidase בתתי סוגים אלה של תאי כליה.³¹הוכח שהביטוי של FAAH מוגבר בקורטקס הכלייתי (למשל, בגלומרולוס, במערכת הצינוריות ובצינורות האיסוף) בהשוואה לרמות הביטוי הנמוכות שלו במדולה.³⁹

בהתחשב בלוקליזציה המגוונת של ה-ECs והקולטנים שלהם, כמו גם המורכבות הכרוכה בסינתזה ובקטבוליזם שלהם, מערכת זו יכולה למלא תפקידים שונים בכליותפוּנקצִיָה. בתנאים רגילים, מערכת ה-EC מסוגלת לווסת הומאוסטזיס כלייתי כפי שהוכח על ידי השליטה שלה בהמודינמיקה הכלייתית, ספיגה חוזרת של נתרן צינורית והפרשת חלבון בשתן. השפעות אלו ניתנו בעיקר באמצעות הפעלת הקולטן CB1.17,18,31,39-41 בסעיפים הבאים, אנו מתארים כמה השפעות של הפעלת מערכת EC על התפקוד הפיזיולוגי הכלייתי (איור 1).

המודינמיקה הכלייתית

בתנאים פיזיולוגיים רגילים, מערכת ה-EC ממלאת תפקיד קריטי בוויסות ההמודינמיקה הכלייתית. לדוגמה, הוכח כי מתן תוך ורידי של AEA הפחית את קצב הסינון הגלומרולרי והגדיל את כמות הדם הכלייתית במכרסמים, ללא תלות בשינויים בלחץ הדם.17 מחקרים חוץ-גופיים הראו ש-AEA יכול להרחיב כלי דם אפרנטיים או efferent arterioles juxtamedullary17,31 באמצעות תהליך תלוי CB1-, מעוכב בדרך כלל על ידי סינתאז תחמוצת החנקן,31 כדי לווסת את קצב הסינון הגלומרולרי (GFR). הפעולות של מערכת האותות AEA מבוצעות ככל הנראה באמצעות תאים מנזגיאליים, אשר מסוגלים לייצר ולבצע חילוף חומרים של AEA,31 וכן באמצעות היפרפולריזציה של תאי שריר חלק באמצעות הפעלת תעלות אשלגן.42 יש לציין כי ישנם גם מנגנונים שאינם תלויי קולטן CB1 שבאמצעותם ECs יכולים לתווך אפקט מרחיב כלי דם ולפיכך לווסת את המודינמיקה הכלייתית.43 מחקרים עתידיים צריכים להבהיר עוד יותר את תפקידם של המנגנונים האחרונים בהומאוסטזיס פיזיולוגי תקין של כליות.

הובלת נתרן צינורית

ל-AEA הוכחה השפעה רגולטורית על הובלת נתרן צינורית. ב-TAL המדולרי של הלולאה של Henle, הוכח כי AEA (באמצעות אינטראקציה עם קולטן CB1) מגרה את ייצור תחמוצת החנקן, מה שמוביל לעיכוב של הובלת נתרן דרך הטרנספורטר האפיקלי Na plus /H plus ו-Na plus /K plus /2Cl-co -טרנספורטר. זה היה קשור גם לצריכת חמצן מופחתת בחלק ה-TAL של הנפרון.¹⁸זה מצביע על כך שהפעלה של קולטני CB דרך AEA יכולה לווסת את זרימת הדם הכלייתית, כמו גם טיפול צינורי במומסים, מה שיכול בסופו של דבר להשפיע על פינוי מלח ומים מהכליות.

הפרשת חלבון בשתן ומודולציה

כדי לבחון את תפקידם של קולטני CB1 גלומרולרי בוויסות הפרשת חלבון בשתן, Hsu et al. השתמשו בעכברים וחולדות מהונדסים CB1 שטופלו באגוניסט סלקטיבי של CB1.⁴⁰ הפעלת קולטן CB1 בכליה, ובמיוחד בפודוציטים ובתאי המזנגיה של הגלומרולוס, הגבירה את הפרשת החלבון בשתן.⁴⁰הפעלה מוגברת וביטוי יתר של CB1 נמצאו גם מגבירים את רמות הביטוי של גורם הגדילה של האנדותל (VEGF) ובעקבות כך מפחיתים את רמות הגן והחלבון של nephrin, דבר המצביע על מסלול אפשרי לחוסר ויסות פודוציטים ופרוטאינוריה.⁴⁰

מערכת EC ומחלות כליות

תפקידה של מערכת ה-EC בפתולוגיה ותפקוד לקוי של הכליות הוא תחום מחקר מתפתח, אשר נחקר בעיקר בהקשר של קולטני CB. שינויים בביטוי ובפעילות של קולטן CB התגלו במחלות כליה שונות כגון נפרופתיה סוכרתית, CKD וסוגים שונים של פגיעה בכליות (איור 2). יחד, מחקרים אלה על פתופיזיולוגיה של הכליות מצביעים על כך שהכוונה למערכת ה-EC עשויה להיות בעלת ערך אבחנתי ותרפויטי (טבלאות 1 ו-2).

נפרופתיה סוכרתית

ידוע היטב שלסוכרת יש סיבוכים כלייתיים גדולים, כולל מחלת כליות מתקדמת ופתולוגיה, מצב המכונה נפרופתיה סוכרתית. נפרופתיה סוכרתית מאופיינת בהיפרטרופיה גלומרולרית והיפרפילטרציה, שעלולים לגרום לאלבומינוריה, פיברוזיס בכליות, ירידה ב-GFR ומחלת כליות סופנית.^44,45מספר מחקרים בחנו את תפקידה של מערכת ה-EC בפגיעה בפודוציטים, תאי צינוריות וצינוריות הקשורים לסוכרת, כמו גם את התפקוד של הפעלת קולטן CB על התוצאות השליליות של נפרופתיה סוכרתית (איור 2).

הערכת מודלים של עכברים של מחלת כליות סוכרתית ורקמות כליות מבני אדם עם נפרופתיה סוכרתית מתקדמת הראתה רמות גבוהות של ביטוי קולטן CB1 בכליה, ובמיוחד בפודוציטים גלומרולריים ותאי mesangial.^19,30בנוסף, מחקרים חוץ-גופיים הראו וויסות עלייה של קולטן CB1 עם חשיפה לריכוזי גלוקוז ואלבומין מוגברים בתאי mesangial30 ותאי אבובת פרוקסימליים, בהתאמה.¹⁵ יתר על כן, נמצא כי הקולטן theCB1 מתבטא יתר על המידה בפודוציטים גלומרולריים בעכברי ניסוי עם נפרופתיה סוכרתית.^19,24ההשלכות הפוטנציאליות של השינויים האחרונים הוצגו במחקר אחר שמצא כי היפרליפידמיה, כפי שנגרמה על ידי נפרופתיה סוכרתית, יכולה להיות קשורה לאפופטוזיס המושרה על ידי חומצה פלמיטית בתאים צינוריים פרוקסימליים. פעולות אלו מתווכות באמצעות ביטוי קולטן CB1 מווסת.²⁹

לאור העדויות המצביעות על תפקיד מזיק לקולטן CB1 בנפרופתיה סוכרתית, מספר מחקרים חקרו את התועלת של אנטגוניסטים/אגוניסטים הפוכים של CB1 כאפשרות טיפולית פוטנציאלית למחלת כליות סוכרתית.^{15,20,24,46,47}

במודל עכברים המושרה על ידי סטרפטוזוטוצין (STZ) של נפרופתיה סוכרתית, אלבומינוריה הופחתה כתוצאה מחסימת קולטן CB1 באמצעות אנטגוניסט סלקטיבי לקולטן CB1.19 ממצאים דומים דווחו גם במודלים גנטיים של עכברים של נפרופתיה סוכרתית.^23,24נמצא כי הפחתה ניכרת בפרוטאינוריה התרחשה באמצעות שימור פודוציטים גלומרולריים ושיקום הביטוי של חלבוני הפודוציטים nephrin, podocin ו-zonula occludens-1.19,24 בנוסף, נמצא גם אנטגוניזם של CB1. קשור לירידה באפופטוזיס צינורי גלומרולרי ופרוקסימלי, מה שמוביל בסופו של דבר לשיפורים בתפקוד הכליות.^19,21,29

בחולדות שומניות סוכרתיות של צוקר (ZDF), המפתחות סוכרת מסוג 2 עקב השמנת יתר הנגרמת על ידי קולטן לפטין לא מתפקד, מתן כרוני של אגוניסט הפוך לקולטן CB1 שיקם GFR, הפחית פרוטאינוריה ושיפר את הסמנים לבריאות הפודוציטים באמצעות אפנון של הרנין -מערכת אנגיוטנסין ועיכוב אפופטוזיס.²⁴

בעוד שמחלת כליות סוכרתית קשורה לביטוי מוגבר של הקולטן CB1 בחלקים שונים של הנפרון, ישנן גם עדויות לכך שביטוי קולטן CB2 מופחת באופן משמעותי. לדוגמה, נפרופתיה סוכרתית הנגרמת על ידי STZ בעכברים קשורה להורדת הוויסות של ביטוי קולטן CB2 של פודוציטים גלומרולריים.48 באופן דומה, יש ירידה בביטוי של הקולטן CB2 בתאי אבובת פרוקסימליים בעקבות חשיפה לריכוזים גבוהים של אלבומין וגלוקוז.34יתר על כן, CB2 הפעלת קולטן הוכחה כמשפרת אלבומינוריה, משחזרת ביטוי חלבון פודוציטים, מפחיתה חדירת מונוציטים ומקטינה את הביטוי של סמנים פרופיברוטיים כליות25,33 בחולדות עם נפרופתיה הקשורה להשמנה. CB2 אגוניזם בנפרופתיה סוכרתית שמנה BTBR ob/ob זן עכברים גם הפחית אלבומינוריה, השפר את ביטוי נפרין לא תפקודי בפודוציטים, והפחתת התרחבות המטריצה ​​המזנגאלית, הצטברות פיברונקטין ונזק טרשתי.⁴⁹

מחקרים אלו מוכיחים כי אנטגוניזם של קולטני CB1 והפעלה של קולטני CB2 באמצעות ליגנדים פרמקולוגיים סלקטיביים קשורים לשיקום המבנה והתפקוד הכלייתי, במיוחד אלבומינוריה וביטוי של סמנים דלקתיים, במודלים גנטיים וניסיוניים של נפרופתיה סוכרתית.

מחלת כליות הקשורה להשמנה

השמנת יתר קשורה ופועלת כגורם סיכון להתפתחות נפרופתיה סוכרתית,50 עם אנשים שמנים בעלי סיכון גבוה יותר להתקדם למחלת כליות סופנית.⁵¹מחקר של Jenkin et al.33 חשף את התפקיד של הפעלת קולטן CB2 בהפחתת התקדמות הפרעות בתפקוד הכליות הקשורות להשמנה על ידי הפחתת פרוטאינוריה, פינוי קריאטינין וסמנים פיברוטיים בכליות. לעומת זאת, חולדות ZDF שטופלו באגוניסט הפוך CB1 הראו שיפור במבנה ותפקוד הכליות.²⁴באופן מפתיע, חולדות אלו הראו גם עלייה ניכרת במשקל הגוף בהשוואה ליציבות המשקל של עכברי הביקורת, אשר חשבו כי נובעת מהתפתחות היפר-גליקמיה קיצונית בבקרות שטופלו ברכב.24 במחקר נפרד, הוכח אנטגוניזם של CB1 להפחתת אוריה של אלבומין, להפחית התרחבות מסנגיאלית ולשפר את הביטוי של חלבוני כליות פרופיברוטיים ופרו-דלקתיים בדגמי עכברים רזים וסובלים מהשמנת יתר.²³ממצאים אלו מצביעים על כך שההשלכות של מודולציה של CB1 בסוכרת יכולות להיות שונות על סמך המודל הניסיוני, נוכחות השמנת יתר ונוכחות היפרגליקמיה.

במחקרים אחרים שהשתמשו בחולדות עם השמנת יתר הנגרמת על ידי דיאטה, ביטוי קולטן CB1 בכליה מווסת במיוחד, וטיפול באנטגוניסט לקולטן CB1 הפחית משקל, לחץ דם סיסטולי, לפטין בפלסמה, אלבומינוריה ורמות קריאטינין בפלסמה. זה קשור לשיפור של גלומרולופתיה. 16 יתרה מכך, מחקרים המשתמשים בחולדות צוקר שמנות הראו שהאגוניסט ההפוך CB1, rimonabant, משפר פרוטאינוריה במודל חיה של נפרופתיה הנגרמת על ידי השמנת יתר.²¹טיפול ברימונבנט שיקם חלקית פינוי קריאטינין, הפחתת גלומרולוסקלרוזיס ופיברוזיס צינורי-בין-סטיציאלי, והורדת נזקי צינוריות והיפרטרופיה כלייתית.²¹כמו כן, יש לציין שייתכן שממצאים אלו תוכננו על ידי ההשפעות של רימונבנט ואינם קשורים למערכת ה-EC. בעוד שהשמנה בחולדות fa/fa צוקר נגרמת ממוטציה של הקולטן ללפטין, רימונבנט פועלת להגברת ספיגת הלפטין בכליה, מה שהוכח כמפחית את הפעילות המטבולית הפרוקסימלית של הצינורית.⁵²לכן, ייתכן ששיפור בתפקוד הכלייתי בשיעורים אלו התרחש עקב מנגנונים הקשורים לתפקידו של הלפטין במטבוליזם של תאי אבובות פרוקסימליים,^52–54בניגוד לפעולה ישירה על מערכת ה-EC.

שימוש בזן עכבר חדש החסר קולטני CB1 בתאי אבובות פרוקסימליות של הכליה, Udi et al.⁵⁵מצא שמחיקת קולטן CB1 לא הגנה על העכברים מההשפעות המטבוליות המזיקות הקשורות להשמנה, אלא הפחיתה באופן משמעותי את הצטברות שומנים בכליה שנגרמה מהשמנת יתר. יתר על כן, הגירוי של קולטני CB1 בתאי אבובות פרוקסימליות כליות נמצא קשור לירידה בהפעלה של קינאז כבד בכבד וירידה בפעילות של חלבון קינאז המופעל על ידי AMP, כמו גם מופחתת חמצון חומצת שומן בטא.⁵⁵ממצאים אלו מצביעים על קשר פוטנציאלי בין קולטן CB1 של תאי אפיתל צינורי פרוקסימלי של הכליה לבין ההשפעות הפתולוגיות של ליפוטוקסיות כלייתית הנגרמת על ידי השמנת יתר ונפרופתיה.

לסיכום, הממצאים הקשורים לקולטן CB1 מדגישים את הפוטנציאל החלקי שלו לפעול כמטרה טיפולית למחלת כליות הנגרמת על ידי השמנת יתר. נדרשים מחקרים נוספים כדי לוודא את היעילות של מווסת CB1 בכליה כדי לשפר תפקוד לקוי של הכליות ללא תלות בהשפעותיו על המשקל.

מחלת אינטרסטיציאלית כלייתית ופיברוזיס

הראו שהקולטן CB1 מווסת בהפרעות כליות אחרות המסומנות על ידי דלקת אינטרסטיציאלית ופיברוזיס, כולל דלקת נפריטיס אינטרסטיציאלית חריפה.²⁰שימוש בחסימה חד צדדית בשופכה (UUO) כמודל ניסיוני לפיברוזיס כליות בעכברים, Lecruet al.²⁰הראה שביטוי קולטן CB1 היה מווסת בבעלי חיים UUO בהשוואה לביקורות. זה קשור גם לעלייה ניכרת בתוכן האמיתי של 2-AG. טיפול בעכברי UUO עם rimonabant הפחית את סינתזה-1 של חלבון chemoattractant מונוציטים והפחתת חדירת מקרופאגים.²⁰כמו כן, הוכח שהפעלת קולטן CB1 הובילה לרמות VEGF משופרות, אשר הפחיתו לאחר מכן את ביטוי הנפרין ואת רמות החלבון.⁴⁰

פגיעה חריפה בכליות

ישנן עדויות מצטברות המצביעות על התפקיד החשוב של קולטני CB1 ו-CB2 והאפנון שלהם בפתוגנזה של צורות שונות של AKI. לגבי AKI איסכמי, לאגוניסטים סלקטיביים לקולטן CB1 ו-CB2 נמצאה השפעה תלוית מינון במניעת נזק צינורי בעקבות איסכמיה כלייתית/פגיעה חוזרת בכליות עכברים.⁵⁶עם זאת, במחקר נפרד, מתן קנבידיול, מרכיב לא פסיכואקטיבי של קנאביס עם תכונות פרמקולוגיות מוגדרות בצורה גרועה, הוביל להפחתה בפגיעה בצינורית הכלייתית בחולדות בעקבות איסכמיה/פרפוזיה כלייתית דו-צדדית.⁵⁷קנאבידיול הפחית משמעותית את העלייה ברמות הקראטינין בסרום ורמות מלונדאלדהיד וכליות ותחמוצת חנקן הקשורות למצב זה.⁵⁷ במחקר עדכני יותר, הוכח כי אגוניסט לקולטן CB2 שמקורו בטריאזול ממלא תפקיד מגן בפגיעה כלייתית דלקתית בעקבות איסכמיה/פרפוזיה כליה דו-צדדית.⁵⁸

סדרה של מחקרים הדגימה את התפקיד המזיק של CB1 ואת ההשפעות המגנות של הפעלת CB2 על מודל נפרוטוקסי של AKI בפגיעה כלייתית הנגרמת על ידי ציספלטין.35,59-61 מעכב קולטן CB135 או הפעלת קולטן CB259,60 לחץ חמצוני ודלקת מוגבלים. ונזק צינורי מופחת בכליות של בעלי חיים עם AKI המושרה על ידי ציספלטין. בנוסף, ß-Caryophyllene, אגוניסט טבעי של קולטן CB2, מוגן בהתאם למינון מפני ההשפעות המזיקות של נפרוטוקסיות הנגרמת על ידי ציספלטין.⁶¹

תורם עיקרי נוסף ל-AKI, הקשור לתחלואה ותמותה משמעותיים, הוא פגיעה בכליות הקשורה לאלח דם (SA-AKI).62,63 במחקר המשתמש במודל עכבר קשירה וניקור (CLP) של אלח דם, נוקאאוט של קולטן CB2 עכברים הפגינו תמותה מוגברת, פגיעה בריאותית, בקטרמיה, גיוס נויטרופילים וירידה בפעילות p38 MAPK באתר הזיהום.⁶⁴טיפול עם אגוניסט סלקטיבי לקולטן CB2 הפחית את ההשפעות הנגרמות על ידי CLP, כגון דלקת, נזק לריאות וגיוס נויטרופילים, ובסופו של דבר שיפר את ההישרדות.⁶⁴ממצאים אלו עולים בקנה אחד עם ראיות המדגימות שבעקבות לוקליזציה של CB2 ללוקוציטים, הוכח שהפעלתם מפחיתה הפעלה, הידבקות והגירה של תאי אנדותל הנגרמת על ידי גורם נמק גידולי לויקוציטים, כמו גם מאפננים פרו-דלקתיים.^65–68לכן, אפנון קולטן CB2 עשוי לייצג יעד טיפולי חדש בטיפול ב-SA-AKI.^5,69,70

המנגנון/ים שבאמצעותם קולטני הקנבינואידים מווסתים או משחזרים את הישרדות תאי צינור בעקבות נזק אקוטי אינם מוגדרים היטב בשלב זה. עם זאת, הבדלים מולקולריים ברמות ה-mRNA והחלבון של קולטן קנבינואידים20,35,71 כמו גם הבדלים בתוצאה הפיזיולוגית של הפעלת הקולטן קשורים ככל הנראה לסוג ה-AKI ולריבוי והלוקליזציה של הקולטנים.

ליגנדים EC בבריאות הכליות ובמחלות. בעוד שרבים מהמחקרים העריכו את תפקידה של מערכת ה-EC בהומאוסטזיס כליות ובפתופיזיולוגיה התמקדו בקולטני CB ובאפנון שלהם, חשוב לזכור שההשפעות הכוללות של הפעלה ועיכוב של מערכת ה-EC תלויות בגורמים שונים, רק חלק ממנו קשור לפעילות של קולטני CB. לדוגמה, המפעילים האנדוגניים הראשיים של קולטני ה-CB, AEA ו-2-AG, נמצאים בריכוזים משמעותיים בכליה8,9; עם זאת, תגובות פיזיולוגיות שעוררו ליגנדים אלה בתנאים נורמליים או פתולוגיים לא הובהרו במלואם. יתר על כן, מחקרים מפורטים על האופן שבו רמות גבוהות או מופחתות של ליגנדים אלה עשויות להשפיע על תפקוד הכליות והפתולוגיה הם נדירים. לדוגמה, ידוע היטב ש-AEA ממלא תפקיד באפונון של המודינמיקה הכלייתית.17,31 עירוי של ליגנד זה נמצא קשור להרפיית כלי דם של עורקים אפרנטיים סמוכים בחוץ,31 דם כליות מוגבר עוקב במכרסמים,17 ו שינוי של הובלת נתרן צינורית.18 בעוד שהשפעות אלו עשויות להיות מתווך בחלקן באמצעות הפעלה של קולטני CB1 ו-CB2, חשוב להדגיש שממצאים אלו מצביעים על ההשפעה הכוללת של ליגנד זה וקשה לזהות בדיוק אילו קולטנים מופעלים בכל אחד מהם. קטע של הנפרון. יתר על כן, ישנן השפעות בלתי תלויות בקולטן CB שאינן מובאות בחשבון כאשר תפקידם של ליגנדים אלו היה אמור להיבדק רק בהקשר של קולטני CB.

מחקרים אחרונים החלו להתייחס לנקודה חשובה זו על ידי ניסיון להגדיר את ההשפעה של ליגנדים אלו במצבי מחלת כליות. Biernacki et al.72 תיארו שינויים במערכת ה-EC ב-HTN ראשוני ומשני, וציינו שמצבים אלו הביאו ללחץ חמצוני כליות באמצעות עלייה במיני חמצן תגובתיים (ROS) ורמות מופחתות של אנזימים נוגדי חמצון. למרות הפעילות המוגברת של FAAH ו-MGL בחולדות עם יתר לחץ דם ראשוני ומשני, רמות AEA ו-2-AG בכליה עלו באופן משמעותי.72 הגדלת רמות אנדוגניות של AEA על ידי עיכוב תרופתי של האנזים הפירוק שלו, FAAH, עם נמצא כי מעכב FAAH סלקטיבי, URB597, הביא לעיכוב יצירת ROS בשני הסוגים של חולדות עם יתר לחץ דם. השפעות אלו היו מתווך באמצעות שיפור בהגנה נוגדת חמצון בכליה הראשית של חולדה ספונטנית יתר לחץ דם (SHR) דרך מסלול Nrf2, כמו גם באמצעות תגובות פרו-דלקתיות מופחתות בחולדות עם יתר לחץ דם שניוני (מלח DOCA).72 יתר על כן, URB597 הגדיל את ROS- תוצרי חמצון תלויים של פוספוליפידים ורמות של ECs בשני סוגי הכליות עם יתר לחץ דם, מה שהביא לביטוי מוגבר של קולטן CB בחולדות SHR וביטוי משופר של קולטני CB2 ו-TRPV1 ב-DOCA-saltrats.72 טיפול כרוני בחולדות בקרה נורמוטנסיבית Wistar הגביר באופן דומה עם URB597 חמצון פוספוליפידים בכליה, דומה למתן של חולדות מלח DOCA.72 לפיכך, בעוד שמערכת ה-EC ממלאת תפקיד מגן ב-HTN, מתן מעכב aFAAH לא שינה באופן משמעותי את המצבים הפרו-דלקתיים או החמצוניים הנגרמים על ידי HTN ראשוני , ורק יצר חוסר איזון בין ECs, חמצונים וגורמים מעודדי דלקת ב-HTN שניוני, pot מוביל בסופו של דבר להתפתחות של תפקוד לקוי של הכליות.

בהתייחס למצבי כליות אחרים, כגון AKI, מחקרים הראו תגובות שונות לפגיעה בכליות ברמות הביטוי של EC. Moradi et al.73 הוכיחו כי פגיעת איסכמיה/פרפוזיה של הכליה קשורה לעלייה משמעותית בתכולת ה-2-AG הכלייתית באמצעות מודל של עכבר איסכמיה/פרפוזיה דו-צדדית של AKI. נמצא שהעלייה בריכוז 2-AG בכליות בעקבות מתן מעכבי MGL הביאה לשיפור בציון ה-BUN בסרום, הקראטינין והפגיעה בצינוריות; עם זאת, הביטוי של גן mRNA של דלקת בכליות וסמני מתח חמצוני לא השתנה. לעומת זאת, במודל נפרוטוקסי המושרה על ידי ציספלטין של AKI, ציספלטין הגביר את רמות AEA אך לא 2-AG ברקמת הכליה.35

עד כה, המנגנונים והתנאים שבהם מופעלים קולטני CB על ידי ECs בכליה - ובהמשך מפל האותות הנובעים מהפעלה זו - לא תוארו במלואם. מחקרים הראו תוצאות סותרות המתארות את התפקיד של הפעלת קולטני AEA ו-CB1 בתיווך פגיעה בפודוקציטים גלומרולריים. Jourdan et al.74 הראו שחשיפה כרונית של פודוציטים בתרבית אנושית לגלוקוז גבוה הביאה לוויסות עלייה משמעותי בביטוי הגנים של קולטן CB1, אשר קשור גם לעלייה ב-AEA הסלולרי וב-2-AG. זה קשור לסימנים של דלקת ופגיעה בפודוציטים, המתבטאת בירידה בפודוצין ובנפרין ובביטוי מוגבר של גן desmin.74 לעומת זאת, Li et al.75 דיווחו על תפקודי ההגנה של AEA בעקבות פגיעה בפודוציטים הנגרמת על ידי L-homocysteine(Hcys). AEA חסמה הפעלת Hcysinduced NLRP3 inflammasome בפודוציטים מתורבתים ותפקוד לקוי של פודוציטים, בסופו של דבר מונעת נזק גלומרולרי.75 לכן, בעוד שהמחקר הקודם הוכיח שעלייה בביטוי הגנים של קולטן CB1 מלווה בהגברת ויסות ב-AEA ו-2-AG היא הקשור לפגיעה בפודוציטים, המחקר האחרון מצביע על כך ש-AEA מפעיל השפעות הגנה ואנטי דלקתיות בפודוציטים. יש צורך במחקרים עתידיים כדי לחקור את תפקידם של ליגנים EC בהפעלת קולטן CB בתנאים מגוונים בבריאות הכליה ובמחלות.

סיכום

נמצא שמערכת ה-EC מווסתת מגוון תפקודים בבריאות הכליה ובמצבי מחלה. רכיבים שונים של מערכת ה-EC, כלומר הקולטנים CB1 ו-CB2 והמפעילים הפיזיולוגיים העיקריים שלהם (AEA ו-2-AG), הוקמו למגוון תתי סוגים של תאי כליה על פני מינים שונים. כתוצאה מכך, ההפעלה או העיכוב של CB1 ו-CB2 יכולים להשפיע באופן משמעותי על תפקוד הכליות עם השפעות מועילות או שליליות. ביטוי שונה של קולטן CB הוכח במספר מחלות כליה, כולל נפרופתיה, CKD ו-AKI. ממצאים אלו הובילו לחקירה של מניפולציה של קולטני CB באמצעות חומרים תרופתיים, אשר הצביעו בחלקם על קולטני ה-CB כיעדים טיפוליים פוטנציאליים לתפקוד כליות. תוצאה חשובה של מחקרים אלה הייתה ההדגמה שקולטני CB1 ו-CB2 פועלים דרך מסלולים נפרדים ומווסתים מטרות שונות במורד הזרם בכליה, למרות התפלגות הומוגנית ברובה במערכת הכלייתית.

לאחרונה, מערכת ה-EC נחקרה על הקשר שלה עם מגוון מצבי מחלת כליות. יחד, מחקרים אלו מצביעים על כך שיש לבחון את הפעילות בנפרד מהאינטראקציות שלהם עם קולטני CB, שכן תוצאות סותרות נראו בתגובות הביולוגיות שעוררו ECs ובהפעלת הקולטנים שלהם.

לסיכום, התמקדות משמעותית הושמה בהערכת תפקידם של קולטני CB בתפקוד הכליות, הומאוסטזיס ופתופיזיולוגיה. בעוד שהמאמצים הללו תרמו באופן משמעותי להבנתנו את תפקיד מערכת ה-EC בכליות, נותרו תחומי הזדמנויות חשובים למחקר עתידי, במיוחד תפקידם של ליגנדים EC כמתווכים של פעילות מערכת ה-EC. נכון לעכשיו, תפקידם בפיזיולוגיה של הכליות ובפתופיזיולוגיה נותר להבהיר במלואו. יתר על כן, ההשלכות הקליניות והרלוונטיות של שינוי מערכת EC יצטרכו להעריך עוד יותר.76 לפיכך, בעוד שהנתונים הנוכחיים מצביעים על כך שאפנון תפקוד ופעילות מערכת EC עשוי לספק התערבות טיפולית בת קיימא לתפקוד לקוי של הכליות, מחקרים עתידיים חיוניים כדי להבהיר עוד יותר את מנגנונים שבאמצעותם ECs וקולטני CB משתתפים בפיזיולוגיה ובמחלות הכליות, כמו גם ההקשר הקליני שבו הגירוי או הדיכוי שלהם עלולים להוביל להשפעות מועילות או מזיקות בכליה.

תודות

התוכן של מאמר זה הוא באחריותם הבלעדית של המחברים ואין לראות בשום אופן כמדיניות או פרשנות רשמית על ידי המחלקה האמריקאית לענייני חיילים משוחררים או ממשלת ארה"ב. HM נתמך על ידי פרס לפיתוח קריירה ממשרד המחקר והפיתוח של המחלקה לענייני ותיקים, 1 IK CX 001043-01A2.

הצהרת גילוי מחבר

אין אינטרסים פיננסיים מתחרים.

הפניות

1. Howlett AC. הקולטנים לקנבינואידים. פרוסטגלנדינים אחרים ליפידים מדיט. 2002;68–69:619–631.

2. DiPatrizio NV, Piomelli D. השומנים החסכנים: אנדוקנבינואידים והשליטה העצבית של שימור אנרגיה. מגמות Neurosci. 2012;35:403–411.

3. Pacher P, Batkai S, Kunos G. המערכת האנדוקנבינואידית כיעד מתפתח של טיפול תרופתי. Pharmacol Rev. 2006;58:389–462.

4. Hillard CJ. אנדוקנבינואידים במחזור: מאיפה הם מגיעים ולאן הם הולכים? נוירופסיכופרמקולוגיה. 2018;43:155–172.

5. Munro S, Thomas KL, Abu-Shaar M. אפיון מולקולרי של קולטן היקפי לקנבינואידים. טֶבַע. 1993;365:61–65.

6. פאולר סי ג'יי. הפרמקולוגיה של מערכת הקנבינואידים - שאלה של יעילות וסלקטיביות. מול נוירוביול. 2007;36:15–25.

7. Beltramo M, Stella N, Calignano A, et al. תפקיד פונקציונלי של הובלת אננדמיד בזיקה גבוהה, כפי שנחשף על ידי עיכוב סלקטיבי. מַדָע. 1997; 277:1094–1097.

8. Kondo S, Kondo H, Nakane S, et al. 2-Arachidonoylglycerol, אגוניסט אנדוגני לקולטן לקנבינואידים: זיהוי כאחד המינים העיקריים של מונו-אצילגליצרולים ברקמות חולדות שונות, ועדויות ליצירתו באמצעות CA2 פלוס מנגנונים תלויים ובלתי תלויים. FEBS Lett. 1998;429:152–156.

9. Ritter JK, Li G, Xia M, et al. אננדמיד ומטבוליטים שלו: מהם תפקידיהם בכליה? Front Biosci (Schol Ed). 2016;8:264–277.

10. Hryciw DH, McAinch AJ. קולטני קנבינואידים בכליה. Curr Opin Nephrol Hypertens. 2016;25:459–464.

11. Howlett AC, Blume LC, Dalton GD. קולטני קנבינואידים CB(1) והחלבונים הקשורים אליהם. Curr Med Chem. 2010;17:1382–1393.

12. פרטווי RG. הפרמקולוגיה של קולטני קנבינואידים והליגנדים שלהם: סקירה כללית. Int J Obes (לונדון). 2006;30 Suppl 1:S13–S18.

13. Larrinaga G, Varona A, Perez I, et al. ביטוי של קולטני קנבינואידים בכליה אנושית. היסטול היסטופתול. 2010;25:1133–1138.

14. Osei-Hyiaman D, DePetrillo M, Pacher P, et al. הפעלה של אנדוקנבינואידים בקולטני CB1 בכבד מגרה את סינתזת חומצות השומן ותורמת להשמנה הנגרמת על ידי תזונה. J Clin Invest. 2005;115:1298–1305.

15. Jenkin KA, McAinch AJ, Zhang Y, et al. ביטויים מוגברים של קולטן קנבינואיד 1 ו-G חלבון צמוד קולטן 55 בתאי אבובות פרוקסימליים וכל הכליה חשופה למצבי סוכרת. Clin Exp Pharmacol Physiol. 2015;42:256–262.

16. Jenkin KA, O'Keefe L, Simcocks AC, et al. מתן כרוני של AM251 משפר את האלבומינוריה ואת המבנה הצינורי הכלייתי בחולדות שמנות. J אנדוקרינול. 2015;225:113–124.

17. Koura Y, Ichihara A, Tada Y, et al. Anandamide מקטין את קצב הסינון הגלומרולרי באמצעות הרחבת כלי דם דומיננטית של עורקים efferent בכליות חולדה. J Am Soc Nephrol. 2004;15:1488–1494.

18. Silva GB, Atchison DK, Juncos LI, et al. Anandamide מעכב צריכת חמצן הקשורה לתחבורה בלולאה של Henle על ידי הפעלת קולטני CB1. Am J Physiol Renal Physiol. 2013;304:F376–F381.

19. Barutta F, Corbelli A, Mastrocola R, et al. חסימת קולטן קנבינואיד 1 משפרת את האלבומינוריה בנפרופתיה סוכרתית ניסיוני. סוכרת. 2010;59:1046–1054.

20. Lecru L, Desterke C, Grassin-Delyle S, et al. קולטן קנבינואיד 1 הוא מתווך עיקרי של פיברוזיס בכליות. כליות אינט. 2015;88:72–84.

21. Janiak P, Poirier B, Bidouard JP, et al. חסימה של קולטני CB1 לקנבינואידים משפרת את תפקוד הכליות, את הפרופיל המטבולי והגברת ההישרדות של חולדות צוקר שמנות. כליות אינט. 2007;72:1345–1357.

22. Lin CL, Hsu YC, Lee PH, et al. הפרעה בקולטן קנבינואיד 1 של PPARgamma2 מגבירה את השראת היפרגליקמיה של דלקת מסנגיאלית ופיברוזיס בגלומרולי כליות. י מול מד (ברל). 2014;92:779–792.

23. Nam DH, Lee MH, Kim JE, et al. חסימה של קולטן קנבינואיד 1 משפרת עמידות לאינסולין, מטבוליזם של שומנים ונפרופתיה סוכרתית בעכברי db/db. אנדוקרינולוגיה. 2012;153:1387–1396.

24. Jourdan T, Szanda G, Rosenberg AZ, et al. פעילות יתר של קולטן לקנבינואיד 1 בפודוציטים מונעת נפרופתיה סוכרתית מסוג 2. Proc Natl Acad Sci US A. 2014;111:E5420–E5428.

25. Barutta F, Piscitelli F, Pinch S, et al. תפקיד מגן של קולטן קנבינואיד מסוג 2 במודל עכבר של נפרופתיה סוכרתית. סוכרת. 2011; 60:2386–2396.

26. Jenkin KA, McAinch AJ, Grinfeld E, et al. תפקיד של קולטני קנבינואידים בהיפרטרופיה פרוקסימלית צינורית אנושית. Cell Physiol Biochem. 2010;26:879– 886.

27. Tam J, Cinar R, Liu J, et al. אגוניזם הפוך לקולטן קנבינואיד היקפי-1 מפחית השמנת יתר על ידי היפוך עמידות לפטין. Cell Metab. 2012; 16:167–179.

28. Sampaio LS, Taveira Da Silva R, Lima D, et al. המערכת האנדוקנבינואידית בתאי הכליה: ויסות של הובלת Na(plus) על ידי קולטני CB1 דרך מסלולי איתות נפרדים של תאים. בר ג'יי פרמקול. 2015;172:4615–4625.

29. Lim JC, Lim SK, Han HJ, et al. קולטן קנבינואיד 1 מתווך אפופטוזיס המושרה על ידי חומצה פלמיטית באמצעות מתח רשתית אנדופלזמית בתאי צינורות פרוקסימליים של הכליה האנושית. J Cell Physiol. 2010;225:654–663.

30. Lim JC, Lim SK, Park MJ, et al. קולטן קנבינואיד 1 מתווך אפופטוזיס גבוה המושרה על ידי גלוקוז באמצעות לחץ רשתית אנדופלזמית בתאי מנזגיאליים של חולדה בתרבית ראשונית. Am J Physiol Renal Physiol. 2011;301:F179– F188.

31. Deutsch DG, Goligorsky MS, Schmid PC, et al. ייצור ופעולות פיזיולוגיות של אננדמיד בכלי הדם של כליית החולדה. J Clin Invest. 1997;100:1538–1546.

32. Lee SF, Newton C, Widen R, et al. ביטוי דיפרנציאלי של mRNA קולטן קנבינואיד CB(2) בתת אוכלוסיות של תאי חיסון של עכברים ובעקבות גירוי תאי B. Eur J Pharmacol. 2001;423:235–241.

33. Jenkin KA, O'Keefe L, Simcocks AC, et al. השפעות כליות של מניפולציה תרופתית כרונית של קולטני CB2 בחולדות עם השמנה הנגרמת על ידי תזונה. בר ג'יי פרמקול. 2016;173:1128–1142.

34. Jenkin KA, McAinch AJ, Briffa JF, et al. ביטויי קולטן קנבינואידים 2 בתאי אבובת פרוקסימליים אנושיים מווסתים על ידי אלבומין בלתי תלוי באיתות ERK1/2. Cell Physiol Biochem. 2013;32:1309–1319.

35. Mukhopadhyay P, Pan H, Rajesh M, et al. קולטני קנבינואידים CB1 מקדמים מתח חמצוני/חנקתי, דלקת ומוות של תאים במודל של נפרופתיה עכברת. בר ג'יי פרמקול. 2010;160:657–668.

36. Koga D, Santa T, Fukushima T, et al. קביעה ספקטרומטרית מסה ספקטרומטרית יינון כימי לחץ כרומטוגרפי נוזלי של אננדמיד והאנלוגים שלו במוח של חולדה וברקמות היקפיות. J Chro- motor B Biomed Sci Appl. 1997;690:7–13.

37. Matias I, Petrosino S, Racioppi A, et al. חוסר ויסות של רמות אנדוקנבינואידים היקפיים בהיפרגליקמיה והשמנת יתר: השפעת דיאטות עתירות שומן. מול תא אנדוקרינול. 2008;286(1–2 משלים 1): S66–S78.

38. Long JZ, LaCava M, Jin X, et al. דיוקן אנטומי וזמני של מצעים פיזיולוגיים לחומצת שומן אמיד הידרולאז. J Lipid Res. 2011; 52:337–344.