חריגות בתאי B ובתאי T בחולים עם מחסור סלקטיבי של IgA

תַקצִיר

רקע כללי

חסר IgA סלקטיבי (SIgAD) הוא השגיאה המולדת הנפוצה ביותר של חסינות עם אטיולוגיה כמעט בלתי ידועה. מחקר זה נועד לחקור את הערכים האבחוניים והפרוגנוסטיים הקליניים של תת-קבוצות לימפוציטים ותפקוד בחולי SIgAD סימפטומטיים.

שיטות

בסך הכל נכללו במחקר הנוכחי 30 חולי SIgAD זמינים מהמרשם האיראני ו-30 מטופלים בריאים תואמים למין. ניתחנו תת-קבוצות היקפיות של תאי B ו-T ומבחן שגשוג תאי T על ידי ציטומטריית זרימה בחולי SIgAD עם פנוטיפים קליניים קלים וחמורים.

תוצאות

התוצאות שלנו הצביעו על עלייה משמעותית בתאי B נאיביים ותאי מעבר וירידה חזקה בתאי B דמויי אזור שוליים ומתחלפים בחולי SIgAD. מצאנו שתת-קבוצות תאי T של תאי T של תקליטורי זיכרון תמימים ומרכזיים, כמו גם תאי Th1, Th2 ותאי T רגולטוריים, ירדו באופן משמעותי. מצד שני, חלה הפחתה משמעותית בתת-קבוצות של תאי T של תאי T8+ של זיכרון מרכזי ושל אפקטור, בעוד שהפרופורציות של תאי ה-T עם זיכרון אפקטור מובחנים באופן סופני (CD4+ ו-CD8+). (TEMRA) עלו משמעותית בחולים שלנו. למרות שחלק מקבוצות המשנה של תאי T ב-SIgAD חמור היו דומות, ירידה בתאי B-אזור השולי ותאי זיכרון מוחלפים ועלייה בתאי CD21low B של חולי SIgAD חמורים הייתה בולטת מעט. יתרה מכך, פעילות ההתפשטות של תאי T 4+ CD נפגעה מאוד בחולי SIgAD עם פנוטיפ חמור.

סיכום

לחולי SIgAD יש ליקויים סלולריים והומורליים מגוונים. לכן, הערכת תאי T ותאי B עשויה לסייע בהבנה טובה יותר של הפתוגנזה ההטרוגנית והערכת הפרוגנוזה של המחלה.

מילות מפתח

שגיאות מולדות של חסינות, כשל חיסוני ראשוני, מחסור סלקטיבי של IgA, תת-קבוצות של תאי B, תת-קבוצות של תאי T, ציטומטריית זרימה, פרוליפרציהבדיקה

cistanche tubulosa- לשפר את המערכת החיסונית

תמצית cistanche

מבוא

חסר IgA סלקטיבי (SIgAD) הוא הפרעת הכשל החיסוני העיקרי (PID) או שגיאות חסינות מולדות (IEI), המזוהות על ידי ריכוז סרום של IgA מתחת ל-7 מ"ג/ד"ל וריכוזים תקינים של IgG ו-IgM בחולים מעל גיל ארבע שנים . רוב חולי ה-SIgAD הם א-סימפטומטיים, אם כי חלקם מתבטאים בביטויים קליניים שונים, כולל זיהומים במערכת העיכול ובדרכי הנשימה, מחלות אלרגיות והפרעות אוטואימוניות. דווח על התקדמות המחלה לחסר חיסוני משתנה (CVID) בקבוצה נבחרת של חולי SIgAD עם חוסר בקטגוריות IgG או הפרעות אוטואימוניות [1]. טרם דווחו גורמים ספציפיים לפתוגנזה של SIgAD. עם זאת, פגמים בתהליך של רקומבינציה של IgA class switch (CSR), ייצור והפרשת IgA, כמו גם ההישרדות ארוכת הטווח של IgA, תאי זיכרון B מוחלפים ותאי פלזמה של חולי SIgAD זוהו במקרים לא פתורים [2 ]. פגמים בתהליכים אימונולוגיים אלו קשורים להפרעות בלימפוציטים של חולי SIgAD. לפיכך, הערכת הלימפוציטים, במיוחד תאי B ותאי T, יכולה להיות בעלת ערך ומועיל. מספר מחקרים הדגימו חריגות בתאי B ובתאי T בקבוצות מסוימות של חולי SIgAD [3, 4]. לגבי תת-קבוצות של תאי B, דווח על ירידה במספר תאי B בזיכרון המתחלפים, תאי פלזמה IgA ותאי B מווסתים IL-10+ מעבריים של חולי SIgAD [5-8]. מצד שני, דווח על פגם בחלק מקבוצות משנה של תאי T של מקרי SIgAD שקשור ללא מספיק תאי B המייצרים IgA [5, 8, 9]. אימונופנוטייפ ציטומטרי זרימה יכול למלא תפקיד חשוב באבחון, פרוגנוזה, סיווג וניהול של חולים עם SIgAD. לפיכך, בפעם הראשונה, שאפנו לחקור את תת-האוכלוסיות העיקריות של לימפוציטים B ו-T יחד עם הערכה של תפקוד תאי T, כדי להבהיר את המתאם בין מאפיינים אימונולוגיים וביטויים קליניים בחולים סימפטומטים עם SIgAD.

חומר ושיטות

חולים

סך של 30 חולי SIgAD סימפטומטיים זמינים (מהרישום האיראני IEI [10, 11]) ו-30 מטופלים בריאים תואמי גיל (HCs) נכללו במחקר הנוכחי. ה-HCs אושרו לאחר הערכות קליניות ומעבדתיות ללא כשל חיסוני או כל מחלה בסיסית. החולים הופנו למרכז רפואי לילדים (מרכז המצוינות לרפואת ילדים המזוהה עם אוניברסיטת טהראן למדעי הרפואה, טהראן, איראן). כל החולים אובחנו עם SIgAD על פי האגודה האירופית לליקויים חיסוניים [12]. המחקר אושר על ידי ועדת האתיקה של אוניברסיטת טהראן לרפואה והתקבלה הסכמה מדעת בכתב מכל האנשים (IR.TUMS.VCR.REC.1396.2018). ביטויים דמוגרפיים, קליניים ונתונים אימונולוגיים של החולים תועדו בטופס שאלון.

סיווג חולים

כדי להשוות נתונים דמוגרפיים, קליניים ואימונולוגיים, החולים סווגו לשתי קבוצות קשות וקלות (בהתבסס על ביטויים קליניים) וכן קבוצות בני משפחה ולא בני משפחה (בהתבסס על קרבות הורים). קריטריוני ההכללה המינימליים של חולה להיחשב סימפטומטי היו עשרה סימני אזהרה של קרן ג'פרי מודל. החולים חולקו לשתי קבוצות קלות וחמורות, שכן חולים עם זיהומים חמורים (למשל, זרם הדם, מערכת העצבים המרכזית וזיהומים עמוקים כמו אוסטאומיאליטיס ודלקת פרקים), אוטואימוניות או ממאירות סווגו בקבוצה החמורה וסיבוכים אחרים נחשבו כקבוצה מתונה. כיוון שדלקת ריאות וזיהומים אחרים בדרכי הנשימה שכיחים בחולי SIgAD ורצינו לבדוק זאת כפרמטר בין קבוצות קשות לקלות ולכן לא סיווגנו אותה בקבוצה הקשה.

יתרונות תוסף cistanche-איך לחזק את המערכת החיסונית

לחץ כאן לצפייה במוצרי Cistanche Enhance Immunity

【בקש עוד】 דוא"ל:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

בדיקת תת-קבוצות לימפוציטים

תאים חד-גרעיניים בדם היקפיים (PBMCs) הופרדו מדגימות דם של 8 מ"ל שנאספו בצינורות נתרן הפרין באמצעות צנטריפוגה שיפוע צפיפות של Ficoll-Hypaque ב-600 גרם למשך 25 דקות ב-22 מעלות. עבור צביעה חוץ תאית, PBMCs פוצלו לשברי לוח 5- והוצבעו במשך 20 דקות ב-2-8 מעלות במקום חשוך כאשר כל קוקטייל הכיל את הנוגדנים החד שבטיים בריכוזים אופטימליים. לוח B1 נוצל כדי לקבוע זיכרון נאיבי (CD19+CD27−IgM+IgD+), זיכרון IgM בלבד (CD19+CD27+ IgM++IgD−), זיכרון (CD19+CD27+IgM−IgD−) ותאי B דמויי אזור שוליים (CD19+CD27+IgM++IgD+). לוח B2 שימש לזיהוי תאי CD21low B (CD19+CD21−/lowCD38−/lowIgM+++), פלזמהבלסט (CD19+CD21−/lowCD38++/{ {34}}IgM−) ותאי B מעבר (CD19+CD21+CD38++IgM+). פאנל T1 שימש לסיווג נאיבי (CD4+ או CD8+ ו-CD45RA+CCR7+), זיכרון אפקטורים (CD4+ או CD8+ ו CD45RA−CCR7−), זיכרון מרכזי (CD4+ או CD8+ו-CD45RA−CCR7+) ו-TEMRA (זיכרון אפקטור מובחן סופני) תאי T (CD4+ או CD8+ ו-CD45RA+CCR7−). לוח T2 שימש לסיווג תאי T רגולטוריים (TregsCD4+CD25+FOXP3+CD127-/low). עבור צביעה תוך תאית, בעקבות צביעת מולקולת פני השטח, הם תובעו וחוללו בכל FOXP3/Permeabilization buffer (eBioscience, US) בהתאם להוראות היצרן עבור הדברים הבאים: Anti-Human FOXP3 (PE), Anti-Human IL{{67} } (PE), Anti-Human IL-4 (APC) ו-Anti-Human IFN- (FITC). כל הנוגדנים ובקרות האיזוטיפ נרכשו מ-eBioscience, תאגיד אמריקאי. כדי להעריך תאי עוזר T (כולל T1, T2 ו-T17), 1×106 (תא/מ"ל) של PBMCs תופחו בתוך מדיום תרבית תאים של Roswell Park Memorial Institute (RPMI 1640), ולאחר מכן גירוי עם פורבול מיריסטאט אצטט (PMA) , 50 ng/mL, Sigma-Aldrich, ארה"ב) / ionomycin (1 ug/mL, Sigma-Aldrich), ובנוכחות ברפלדין (5 ug/mL, eBioscience). לאחר מכן, התאים הודגרו ב-37 מעלות בחממה של 5% CO2 ו-95% לחות למשך 5 שעות. התאים המגורים נשטפו עם מי מלח מבוצר פוספט (PBS), ובוצעה צביעת פני השטח עם CD4 אנטי אנושי (PerCp)-Cy5.5. נוגדנים לצביעת ציטוקינים תוך-תאיים (אנטי-IFN-FITC, אנטי-IL-17 PE ואנטי-IL-4 APC להערכת תת-קבוצות T ואנטי-FoxP3 PE להערכת Treg) נוספו והודגרו. בטמפרטורת החדר למשך 30 דקות. תאים נשטפו עם חיץ פרמיביליזציה, והוצעו מחדש במאגר צביעה קרה, והספירות נקבעו באמצעות ציטומטר זרימה BD FACSCalibur (BD Biosciences) (קובץ נוסף 1: טבלה S1). אסטרטגיית השער דומה למחקר הקודם שלנו [13, 14].

בדיקת התפשטות תאי T

כדי להעריך את התפשטות תאי T, PBMCs תורבו עם פלורסנט 5,6-carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE, Biolegend, ארה"ב). תמיסת מניות CFSE הוכנה על ידי המסת CFSE בדימתיל sulfoxide (DMSO) בריכוז של 5 mM/L, בהתבסס על הוראות היצרן. מלאי זה הוקפא במנות קטנות כדי למנוע מחזורי הקפאה והפשרה מוגזמים. CFSE התווסף לצינור בז רוחבי המכיל 500μL של תרחיף PBMC (5×106 תאים/מ"ל) במדיום תרבית תאים RPMI 1640 המכיל 10% FBS (סרום בקר עוברי, Biosera, צרפת) עם ריכוז סופי של 5 מיקרומטר ו-2 מ"מ L-גלוטמין, 100 U/mL פניצילין ו-100 ug/mL סטרפטומיצין (Lymphosep; Biosera, צרפת). הצינור הסתובב במהירות והסתחרר כדי להבטיח פיזור הומוגני. לאחר התיוג, השעיית התא הודגרה למשך 5 דקות ב-37 מעלות. לאחר מכן, 9 מ"ל של RPMI1640 המכיל 10% FBS נוספו לתרחיף התא והוא עבר צנטריפוגה ב-500 גרם למשך 5 דקות. התאים נשטפו שלוש פעמים ונוספו 1 מ"ל של RPMI1640 עם 10% FBS. לגבי גירוי ותאי T ספציפיים, נוגדן אנטי-CD3 (1 מיקרוגרם/מ"ל) נוסף ל-500 μL של PBS סטרילי, והצלחת הודגרה ב-37 מעלות צלזיוס למשך שעתיים. הצלחת המצופה נשטפה פעמיים עם PBS סטרילי והתאים המסומנים נוספו ישירות, ולבסוף, נוגדן אנטי-CD28 (2 מיקרוגרם/מ"ל) נוסף כממריץ לתאי T. הצלחת הודגרה ב-37 מעלות צלזיוס בחממה של 5% CO2 ו-95% לחות למשך 96 שעות [15-17]. באר לא מגורה נחשבה לבקרה לתאים שאינם מתרבים. לאחר 96 שעות, התאים נקצרו ונשטפו. לאחר צביעה עם Anti Human CD4 (PerCPCy5.5), התאים נותחו בסופו של דבר על ידי BD FACSCalibur™ Flow cytometer ותוכנת CellQuest Pro (BD, Biosciences, סן חוזה, קליפורניה, ארה"ב). ניתוח התפשטות בוצע על ידי השוואת שלושה קריטריונים, כולל אחוז התאים המחולקים (%חלוקה), המספר הממוצע של חלוקות תאים שעובר תא (אינדקס חלוקה), ומספר חלוקות תאים ממוצע המתרחשות בכל אוכלוסיית התאים הראשוניים. (אינדקס התפשטות) מאת תוכנת FlowJo 7.6.

ניתוח סטטיסטי

תוכנת SPSS (גירסת Windows 16.0; SPSS Inc., Chicago, IL, US) שימשה לניתוח סטטיסטי. השתמשנו במבחן קולמוגורוב-סמירנוב כדי להעריך אם הנתונים התפלגו בצורה נורמלית. הממצאים הוצגו כערכים חציוניים (טווח בין-רבעוני [IQR], הוצג כטווח עם אחוזונים 25-75). לצורך השוואות נעשה שימוש במבחן כי-ריבוע או במבחן המדויק של פישר. לצורך השוואה של יותר משתי קבוצות, אם התפלגות הנתונים הייתה תקינה, נעשה שימוש ב-ANOVA, ואם התפלגות הנתונים לא הייתה נורמלית, נעשה שימוש במבחן של Kruskal Wallis. ההבדלים הללו נחשבו מובהקים סטטיסטית עבור ערכי P שהיו<0.05.

יתרונות cistanche לגברים - מחזקים את המערכת החיסונית

תוצאות

ממצאים דמוגרפיים, אימונולוגיים וקליניים

מבין כל חולי ה-SIgAD האיראנים הרשומים, 30 חולים זמינים (23 גברים ושבע נשים) גויסו במחקר הנוכחי. הגיל החציוני (IQR) של החולים היה 11 (7.3-16) שנים בזמן המחקר. קרבת משפחה הורית הייתה קיימת ב-16 (53.3% מהמטופלים). דלקת ריאות (42.3%) הייתה הביטוי הקליני השכיח ביותר בחולים שנחקרו, וגידול ממאיר לא אובחן בקבוצה זו. המאפיינים הדמוגרפיים, הקליניים והאימונולוגיים של חולים מסוכמים בטבלה 1. לאחר סיווג חולים על סמך פנוטיפים חמורים וקלים, הושוו נתונים דמוגרפיים, קליניים ואימונולוגיים (טבלה 1, איור 1). המטופלים עם פנוטיפים חמורים הפגינו יותר סיבוכים נשימתיים מאשר בקבוצה הקלה. פרמטרים אחרים לא הוכיחו הבדל משמעותי. אותן השוואות בוצעו בחולים עם ובלי קרבה, ולאף אחד מהם לא היה הבדל משמעותי. לעומת זאת, מטופלים עם פנוטיפים קלים הציגו שיעור מעט גבוה יותר של אלרגיה וביטויים במערכת העיכול עם רמת IgE מוגברת בסרום, דבר המצביע על מעבר מוגבר לכיוון ייצור IgE.

טבלה 1 השוואה של נתונים דמוגרפיים, קליניים ואימונולוגיים של חולי SIgAD עם פנוטיפים חמורים ומתונים

איור 1 השוואה של ביטויים קליניים בין SIgAD חמור וקל

קבוצות משנה של תאי B

חולי SIgAD הראו באופן משמעותי תדירות מוגברת של תאי CD{{0}} B [11.2% (9.4-13.07%) לעומת 7.2% (6-8.6%), p < 0.001], עם תאי B נאיביים מוגברים [71% (63.7–80%) לעומת 66.5% (56.2–71.1%), p=0.036] ותאי B מעבריים [ 8% (3.6-13.5%) לעומת 4.8% (2.6-9.5%), p=0.032] בהשוואה ל-HCs. לעומת זאת, האחוז של [2.3% (2-3.5%) דמויי אזור שוליים לעומת 3.4% (2.3-4.8%), p=0.022) ותאי B-זיכרון מוחלפים [3.5% (1.9 -5.5%) לעומת 6% (3.5-8.4%), p=0.006] היו נמוכים משמעותית מ-HCs. עם זאת, ירידה בזיכרון IgM בלבד ובפלזמה-בלסטים והעלאת תאי B-CD21low בחולים בהשוואה לאלו ב-HCs לא היו משמעותיים (איור 2). מעניין שחלק מההשוואות היו מובהקות בין הקבוצות הקליניות של החולים. אחוז תאי CD19+ B בפנוטיפים קלים וחמורים כאחד היה גבוה משמעותית מ-HCs [11.6% (8.7-13) לעומת 7.2% (6-8.6), p <0.0001, 10.8% (9.6-13.2) ) לעומת 7.2% (6-8.6), p < 0.0001], בהתאמה. חולי SIgAD חמורים הראו עלייה משמעותית באחוז תאי B-CD21low [1.5% (1-2.2) לעומת 2.7% (1.6-5.6), p=0.025], וירידה משמעותית באחוז גם של תת-קבוצות של אזור שוליים וגם של זיכרון B עם תת-קבוצות [3.4% (2.3-4.8) לעומת 2.2% [2, 3], p=0.040, 6% (3.5-8.4) לעומת 2.7% ( 1.7–4.7), p=0.003], בהתאמה. אחוז תאי B מעברי בחולי SIgAD קל היה גבוה יותר מ-HCs [10.7% (3.9-13.8) לעומת 4.8% (2.6-9.5), p=0.047] (איור 3). אחוז הזיכרון של IgM בלבד היה גבוה יותר באופן משמעותי בחולים עם קרבת משפחה מאשר באלה ללא קרבה. כמו כן, סיווגנו את התדירות של תת-קבוצות של תאי B של חולי SIgAD לשלוש קטגוריות: נורמלי, ירידה ועלייה בהתבסס על הטווח הנורמלי של HCs (טבלה 2). בהתבסס על ניתוח זה, הירידה הגדולה ביותר בתת-קבוצות של תאי B קשורה לתאי B בזיכרון שעברו החלפה (23%), בעוד שהעלייה הגדולה ביותר קשורה לתאי B נאיביים (27%) בחולי SIgAD. מלבד עלייה בתאי CD21low B בחולי SIgAD חמורים בהשוואה לחולי SIgAD קל.

איור 2 ניתוח כמותי של אחוזי משנה של תאי B ותאי T בחולי SIgAD ובקרות בריאות. החציון מיוצג על ידי קו אופקי. הנתונים נותחו באמצעות מבחן Mann-Witney U. *עמ'<0.05, statistical significance between patients and HCs. HC Healthy control

קבוצות משנה של תאי T

הפרדת המשנה של תאי T CD4+ חשפה הפחתה משמעותית בסך תאי ה-CD4+ [36.5% (30.8-41.2%) לעומת 40.1% (37.3-47.2%), p{{14 }}.038)], תאי זיכרון מרכזי [11% (7.3-13.1%) לעומת 24.5% (16-29%), p<0.0001), T1 [7.7% (5.2–9.9%) vs. 12% (7.8–16%), p=0.002], T2 [0.3% (0.2–0.4%) vs. 0.6% (0.4–1.3%), p<0.0001] and Tregs [0.3% (0.03–0.7%) vs. 1.4% (1.1– 1.6%), p<0.0001] in patients compared with HCs. Oppositely, the percentage of TEMRA [9.5% (5.7–16.4%) vs. 2% (1.3–6.2%), p<0.0001] was meaningfully higher than HCs. Moreover, decreased effector memory and T17, and increased naïve helper T cells in patients in comparison with HCs were not significant (Fig.  2). Regarding the percentage of CD8+ T cell subsets, central memory [0.6% (0.3–0.8%) vs. 3% (2–6%), p<0.0001] and effector memory [12.3% (7.6–22.1%) vs. 23.9% (19.5– 27.2%), p<0.0001] were markedly diminished in patients compared with HCs. On the other hand, the percentage of cytotoxic TEMRA [44.1% (28.4–55.7%) vs. 24.4% (20– 31%), p<0.0001] was significantly higher than HCs. However, increased total CD8+ T cells and decreased naïve CD8+ T cells were not significant in patients compared to those in HCs (Fig. 2). Regarding the comparison of the percentage of CD8+ T cells subsets between severe SIgAD patients with HCs, naïve T cells, effector, and central memory cells demonstrated a significant reduction. Also, there was a significant decrease in the percentage of total CD4+ T-cells, central memory, T1, T2, and regulatory T cells, whereas TEMRA in both CD4+ and CD8+ T cells demonstrated an increase. On the other hand, the percentage of effector and central memory cells within CD8+ T cells, as well as central memory, TEMRA, T1, and regulatory T cells within CD4+ T cell subsets demonstrated a significant decrease in mild forms of SIgAD compared to HCs. In contrast, we found an increase in TEMRA CD8+ T cells and T2 CD4+ T cells in mild patients compared to controls (Fig.  3). Comparisons of the percentages of all T cell subsets between SIgAD patients with and without consanguinity have not indicated any significant difference. We also categorized the frequency of T cell subsets of SIgAD patients into three categories: normal, decreased, and increased based on a normal range of HCs (Table  2). Based on this analysis, the most decrease in T cell subsets is related to Tregs (67%), while the most increase is related to CD8+ TEMRA (37%) in SIgAD patients. Flow cytometry results of B cell and T cell subsets in 30 SIgAD patients have shown separately in Additional file 1: Tables S2 and S3. To evaluate the impact of the T cell subset on the switching process of B cells and the production of different Ig subtypes we performed a correlation analysis. Surprisingly only IgG but not IgM and IgE were significantly associated with specific T cell subsets (negative association with naïve CD4 and naïve CD8 T cells and positive association with CD4+ TEM and T17 cells, Additional file 1: Table S4) indicating the independent association of IgM to IgE from co-stimulation of T cell subsets in our patient cohorts. Moreover, correlation analysis of absolute counts and percentage of subsets should significant direct correlation in all measured parameters (Additional file 1: Table S5).

איור 3 ניתוח כמותי של אחוזי משנה של תאי B ותאי T בחולי SIgAD קשים ומתונים. החציון מיוצג על ידי קו אופקי. הנתונים נותחו באמצעות מבחן Mann-Witney U. *עמ'<0.05, statistical signifcance between severe and mild patien

טבלה 2 התפלגות של פרופורציות נורמליות, מוגברות וירידה של תאי T ותאי B בכל חולי SIgAD. N=30

התפשטות תאי T

הנתונים שנוצרו על ידי תרביות שכותרתו CFSE נותחו כדי לכמת את התפשטות תאי T CD4+. לא היה הבדל מובהק במדד החלוקה (DI), במדד התפשטות (PI) ובאחוז המחולק (PD) בין חולי SIgAD ל-HCs (איור 4). מעניין שכאשר השווינו את האינדקסים הללו בין חולי SIgAD עם פנוטיפים חמורים וקלים, מצאנו שהחציון DI ו-PD בחולי SIgAD חמורים בהשוואה למקרים קלים בוטל באופן משמעותי [0.1 (0 .08–0.4) לעומת 0.5 (0.3–0.8), p=0.019 ו-12.2 (8.4– 26.4) לעומת 42.5 (26.8–52.6), p=0.009, בהתאמה]. עם זאת, לא היה הבדל משמעותי ב-PI בין קבוצות חמורות ומתונות (איור 4). מצד שני, השוואות של DI, PI ו-PD בין חולי SIgAD עם ובלי קרבה לא היו מובהקות.

איור 4 השוואה של מדדי שגשוג לימפוציטים מסוג T בחולי SIgAD קשים ומתונים. החציון מיוצג על ידי קו אופקי. *עמ'<0.05, statistical significance between severe and mild patients

דִיוּן

SIgAD הוא ה-IEI הנפוץ ביותר עם ביטויים קליניים שונים. לחולים אלה יש ספקטרום שונה של ביטויים קליניים. בהתאם לכך, מחקרים אימונולוגיים בחולים עם ספקטרום שונה של ביטויים קליניים מועילים. הביטוי הקליני השכיח ביותר ב-IEIs, במיוחד ב-SIgAD, הוא זיהומים חוזרים בדרכי הנשימה [18-20]. מצאנו כי דלקת ריאות היא הסיבוך השכיח ביותר בחולים התסמינים הרשומים שלנו. זיהומים חוזרים בדרכי הנשימה מתבטאים בדרך כלל בצורה של זיהומים בדרכי הנשימה העליונות ועשויים להישאר ללא אבחנה למשך מספר שנים; עם זאת, חלק מחולי SIgAD מפגינים פנוטיפים חמורים יותר כגון ברונכיאקטזיס או ברונכיוליטיס שנמחק, מה שמאלץ חקירה אימונולוגית בחולים אלו [21]. בהתחשב בכך שזיהומים חוזרים בדרכי הנשימה דווחו כגורם החשוב ביותר לתחלואה ומוות בילדים עם IEIs, במיוחד מחסור נוגדנים ראשוני [22, 23], אבחון מוקדם וניהול של הפרעות נשימה הקשורות ל-SIgAD חשובים מאוד [24, 25] . צוין כי חריגות בתת-קבוצות של תאי B נצפו בחלק מחולי SIgAD [3, 4]. התוצאות שלנו הצביעו על עלייה משמעותית בתאי B נאיביים ותאי מעבר וירידה חזקה בתאי B דמויי אזור שוליים ומתחלפים. דפוס תאי B חריג זה מרמז על פגמים בשלבים הסופיים של התמיינות תאי B, בדומה לחולי CVID [26]. בהתחשב בכך ש-CVID ו-SIgAD חולקים רקע גנטי כמעט דומה ועשויים להצטבר כמקרים מרובים בתוך משפחה, דמיון זה צפוי. באופן כללי, יותר ממחצית מחולי IEI הרשומים ברישום האיראני הם בעלי קרבה הורית, אך שיעור זה עדיין פחות שכיח בחולי SIgAD. בחולים איראניים SIgAD בהשוואה לחולים מערביים, קרבת משפחה שכיחה יותר. למרות שגורמים מונוגנטיים עשויים להתקיים, זה עדיין לא זוהה למרות רצף הדור הבא במספר חולים [27]. זיהינו הפחתה בתאי B דמויי אזור שוליים ומתחלפים, במיוחד בחולי SIgAD חמורים, כפי שדווח בעבר [28]. לאחרונה דיווחנו על הפחתה דומה בתאי זיכרון B דמויי אזור שוליים ומתחלפים בחולי CVID [14].

תוסף תוסף cistanche-הגברת חסינות

מצד שני, למרות שראינו ירידה משמעותית בזיכרון המתחלף בחולי Ataxia Telangiectasia (AT), אך נצפתה עלייה חדה בתאי B דמויי אזור השוליים [29]. חולי SIgAD, במיוחד קבוצה של חולים עם ביטויים קליניים חמורים (זיהום חוזר ואינטנסיבי ואוטואימוניות), הם בעלי תאי B עם מיתוג נמוך יותר [28, 30, 31]. הוצע כי הירידה בתת-אוכלוסיית תאי B בזיכרון המתחלפת נובעת מפגמים ברמת תהליך החלפת רקומבינציה (CSR) של נוגדנים, הנגרמים על ידי מחסור אנזימטי, או חריגות ברשתות הציטוקינים והקולטנים שלהם [28]. חלק מחולי SIgAD עם התקדמות פנוטיפ חמורה ל-CVID, המשקפת תת-קבוצה זו של SIgAD עשויה לחלוק עם CVID פתוגנזה חיסונית נפוצה, במיוחד בפיתוח שלב ה-CSR. בהתאם לכך, תאי B עם זיכרון מוחלפים נחשבים לסמן ביולוגי אבחנתי בחולים [28]. עם זאת, התדירות של תאי B בזיכרון המתחלפים היא נורמלית בקרב ילדים באוכלוסיית המחקר שלנו, והירידה נצפתה יותר בחולים מבוגרים; מה שמצביע על כך שהזדקנות כנראה מובילה להתקדמות של SIgAD ל-CVID, במיוחד בחולים עם ביטויים קליניים חמורים (נתונים לא מוצגים). מצד שני, תאי אזור שוליים B הם אוכלוסייה מיוחדת של תאי B המייצרים IgM להגנה מפני זיהומים, במיוחד חיידקים מובלעים [32]. למרות שמחקרים קודמים הראו שמספר תאי B דמויי אזור שוליים בחולי SIgAD לא היה שונה בהשוואה לבקרות רגילות [33], עם זאת, השגנו הפחתה משמעותית בתאי B דמויי אזור שוליים במקרים שלנו, בדומה ל- דיווח קודם בחולי CVID [34]. הפחתת תת-קבוצות של תאי B שוליים בחולים אחרים עם פגמים בייצור נוגדנים יכולה להיות קשורה לסיכון מוגבר לזיהום כגון דלקת ריאות וירידה ברמות IgM בסרום, בדומה לחולי CVID [35]. מצאנו תאי CD21low B מוגברים בהשוואה לבקרה, בעיקר בחולי SIgAD חמורים. מחקרים קודמים דיווחו על עלייה בתאי CD21low B הן בחולי SIgAD [3] והן בחולי CVID [36], ומחלות אוטואימוניות אחרות [37]. לאחרונה דווח גם על עלייה ב-CD21low בחולי AT [29]. עלייה במספר תאי CD21low קשורה ישירות לא רק לאוטאימוניות אלא גם לזיהום [36]. מצד שני, חשיפה כרונית לזיהום ויראלי עלולה להוביל להמרה של תאי B מגיבים לאנטיגן לתאי B CD21low חוסר תגובה [38]. כדי להבהיר את הסיבה לתאי CD21low B מורחבים; יש צורך לבצע חקירות נוספות עבור תת-אוכלוסיית תאי B זו. בהתחשב בתת-האוכלוסיה הגבוהה של תאי CD21low B בחולי CVID והתקדמות של חלק מהחולים עם SIgAD ל-CVID, הקבוצה הקשה של חולי SIgAD עם תאי CD21low B מוגברים יפתחו CVID. לכן, הם צריכים מעקב קבוע יותר כדי להעריך את מהלך המחלה. תאי B מעבריים נמצאים בשלב ביניים בהתפתחות בין תאים לא בשלים במח עצם לבין תאי B בוגרים בטחול [39]. במחקר הנוכחי, ראינו גידול משמעותי בתאי B מעברי בחולי SIgAD שלנו, במיוחד בחולי SIgAD חמורים, למרות שמספר תאי B מעברי בילדים עם SIgAD היה תקין (לא מוצגים נתונים). לאחרונה ראינו ירידה משמעותית בתאי B המעבר AT [29]. בניגוד למחקרים קודמים שהראו ירידה בתאי B מעברי [8, 28, 40], חולים מבוגרים הצביעו על עלייה קלה של תאי B מעברי. יתרה מכך, Lemarquis et al. הראה ירידה בפעילות התפקודית של תאי B מעבריים על סמך ייצור IL-10 וגירוי CpG [40]. בהתחשב בפגם בשלבים הסופניים של תאי B ב-SIgAD, נראה שעלייה בתאי B מעבר ותאי B נאיביים של המטופלים שלנו נובעת ממנגנון פיצוי שמגביר התפתחות מוקדמת של תאי B. לגבי תוצאות שונות בין המחקר שלנו לאחרים, נראה שההבדל הזה נובע מתהליכי בחירה שונים, שכן כל החולים שלנו היו סימפטומטיים, בעוד שאחרים חקרו חולי SIgAD בצורה הטרוגנית אסימפטומטית ותסמונתית. לגבי תת-קבוצות של תאי T, ראינו ירידה במספר תאי ה-CD4+ T, תאי T1, T2 ו-Treg, ועלייה ב-TEMRA בתאי CD4+ וגם בתאי CD8+. בהתאם לתוצאות שלנו, מחקרים קודמים הראו עלייה והפחתה באוכלוסיית לימפוציטים מסוג CD8+ ו-CD4+ T, בהתאמה [4]. כמו כן, מצאנו שזיכרון מרכזי בתאי T4+ ו-CD8+ וזיכרון אפקטור בלימפוציטים מסוג CD8+ פחתו בחולי SIgAD בהשוואה ל-HCs. ראינו עלייה משמעותית בתת-קבוצת תאי TEMRA באוכלוסיית לימפוציטים CD4+ וגם CD8+, במיוחד בחולי SIgAD חמורים. TEMRA היא תת-קבוצת זיכרון שלישית של תאי T ברקמות דלקתיות פריפריאליות המבטאות CD45RA אך חסרות ביטוי של CCR7 או CD27. בבני אדם, הצטברות תאי TEMRA מושפעת מזיהומים כרוניים, כגון CMV [41, 42]. עלייה בתת-קבוצות של תאי T שהופסקו עשויה לנבוע מתגובה תאית כרונית לזיהומים בחולים אלה; אולם יש לבצע מחקרים נוספים לגבי תופעה זו. בהתאם לתוצאות שלנו, Nechvatalova et al. הדגימו תאי CD4+ ו-CD8+ מורחבים TEMRA בחולי SIgAD שהיו קשורים לזיהום ב-CMV [43]. לא בדקנו זיהום ב-CMV בחולי SIgAD, אך עלייה במספר תאי TEMRA במטופלים שלנו עשויה להיות קשורה לזיהומים כרוניים. לאחרונה הערכנו תגובות נוגדנים ספציפיות ל-PPSV-23 בחולים עם SIgAD ו-AT וגילינו של-18.6% מחולי SIgAD ו-81.3% מחולי AT הייתה תגובה לא מספקת. מספר הפלזמהבלסטים, תאי אזור שוליים B, תאי B מעבר, תאי CD8+ תמימים, ואחוז תאי CD8+ T, תאי זיכרון B של IgM ותאי זיכרון B מוחלפים בחולי SIgAD היו נמוך משמעותית בקבוצה שאינה מגיבה מאשר בקבוצת המגיבים. למרות שחסר נוגדנים ספציפי שכיח יותר בחולי AT מאשר בחולי SIgAD [44]. תאי T מווסתים ממלאים תפקיד חשוב בייצור נוגדני IgA על ידי שינוי הפרשת גורם גדילה-ביתא (TGF-) [45-47]. מצאנו ירידה משמעותית ב-Tregs בחולים שלנו בהתאם למחקרים קודמים שפורסמו [48], אם כי מחקר אחד דיווח על עלייה ב-Tregs בחולי SIgAD [43]. כמו כן, דווח על מתאם בין תאי Treg מופחתים לבין חומרת מחלת SIgAD, במיוחד אצל אנשים עם אוטואימוניות, לבין מחסור ב-IgA CSR בחולים עם ביטויים קליניים חמורים [30, 48]. התדירות הנמוכה של תאי Treg ותת-קבוצות אחרות של תאי T, כולל T1 ו-T2 בחולים שלנו, עשויה לנבוע מהגירי תימוס נמוכים שנגרמו על ידי thymopoiesis פגום או אפופטוזיס מוגברת של תאים אלה [49]. בדיקה תפקודית של תאי T על ידי גירוי מיטוגני או אנטיגני היא תכונה חשובה באבחון של הפרעות חיסוניות וכשלים חיסוניים שונים [50]. באופן מסורתי, יש פרוטוקול אחד להערכת תפקוד תאי T המבוסס על ספיגת [3H] תימידין בעקבות גירוי PHA באמצעות רכיבים רדיואקטיביים הזקוקים לתנאי מעבדה ספציפיים, והוא גם אינו ספציפי לתאי T מכיוון שהוא יכול לעורר מספר תאי חיסון אחרים. נו. מצד שני, החולשה החשובה ביותר היא שלא ניתן היה להשיג מידע על תת-קבוצות ספציפיות של תאים. בדיקת התפשטות CFSE היא בחירה מעשית להערכת תגובות תאי T לאנטיגן או מיטוגן בחולי IEI, במיוחד SIgAD למיקוד ניתוחי פגמים פוטנציאליים נוספים של תאי T בחולים אלה [51]. עד כה, יש מעט דיווחים על פגמים בתגובה של תאי T בחולי SIgAD. כצפוי, המחקר שלנו אינו מגלה שום הבדל משמעותי בתגובת תאי T בין מטופלים ובקרות. עם זאת, כאשר סיגלנו את החולים לשתי קבוצות על סמך פנוטיפים חמורים וקלים, חולים חמורים הצביעו על ירידה בשגשוג תאי T בהשוואה לחולים קלים. תוצאה זו יכולה להיות ממצא חשוב לסיווג חולי SIgAD לצורך הכרת הפרוגנוזה של המטופל. לאחרונה דיווחנו כי שגשוג תאי T נפגע באופן ניכר בהשוואה לביקורות הבריאות בחולי CVID וחולי AT [29, 52]. יתר על כן, זה מצביע על כך שיש לעקוב אחר חולי SIgAD עם שגשוג תאי T פגום לניהול רפואי מדויק. אנו ממליצים על מחקרים נוספים להערכת פעולת תפקוד תאי T עבור חולי SIgAD בהתבסס על פנוטיפים חמורים ומתונים במחקרים אחרים. מגבלות הניסוי כללו מספר קטן של חולים סימפטומטיים, חוסר זמינות של רבים מהם ו-e, ואפילו שיפור של חלק מהחולים.

מסקנות

התוצאות שלנו הצביעו על פגמים משמעותיים בדפוסי תאי B הדומים לחולי CVID. בהתחשב בכך ש-CVID וצורות חמורות של SIgAD חולקות פנוטיפים קליניים ואימונולוגיים כמעט דומים וככל הנראה רקע גנטי, רעיון זה צפוי. בהתבסס על ניתוחי פנוטיפ, ראינו עוד כמה חריגות בחולי SIgAD עם פנוטיפים חמורים כמו תת-אוכלוסיה גבוהה של תאי CD21low B ופגם בשגשוג תאי T. בהתאם לכך, חולים קשים מתבטאים במספר גבוה יותר של זיהומים בדרכי הנשימה בהשוואה ל-SIgAD קל, כאשר מספר רב של אלו הסובלים מסינוסיטיס, דלקת אוזן, דלקת ריאות ו-b, bronchiectasis, מה שמצביע על המשך מעקב וטיפול מדויק יותר בחולים אלו. האבות של המחקר הנוכחי מציעים שחקירת תת-קבוצות של תאי B ו-T יכולה להיות מועילה להבנה טובה יותר של הפתוגנזה והפרוגנוזה של המחלה.

הפניות

1. Aghamohammadi A, Mohammadi J, Parvaneh N, Rezaei N, Moin M, Espanol T, et al. התקדמות של מחסור סלקטיבי ב-IgA לכשל חיסוני משתנה שכיח. Int Arch Allergy Immunol. 2008;147(2):87–92.

2. Bagheri Y, Sanaei R, Yazdani R, Shekarabi M, Falak R, Mohammadi J, et al. הפתוגנזה ההטרוגנית של מחסור סלקטיבי באימונוגלובולינים. Int Arch Allergy Immunol. 2019;179(3):232–46.

3. Nechvatalova J, Pikulova Z, Stikarovska D, Pesak S, Vlkova M, Litzman J. תת אוכלוסיות B-לימפוציטים בחולים עם מחסור סלקטיבי ב-IgA. J Clin Immunol. 2012;32(3):441–8.

4. ליצמן J, Vlková M, Pikulová Z, Štikarovská D, Lokaj J. T ו-B לימפוציטים תת-אוכלוסיות וסמני הפעלה/הבחנה בחולים עם חסר סלקטיבי של IgA. Clin Exp Immunol. 2007;147(2):249–54.

5. Lemarquis AL, Einarsdottir HK, Kristjansdottir RN, Jonsdottir I, Ludviksson BR. תאי B מעבר ותגובות TLR9 פגומים בחסר סלקטיבי של IgA. אימונול קדמי. 2018;9:909.

6. Celiksoy M, Yildiran A. השוואה של תת-קבוצות של תאי B בחסרים חיסוניים ראשוניים מתקדמת עם ילדים בריאים תואמים למחסור נוגדנים. אלרגול אימונופתול. 2016;44(4):331–40.

7. Marasco E, Farroni C, Cascioli S, Marcellini V, Scarsella M, Giorda E, et al. הפעלה של תאי B עם CD40L או CpG מודדת את התפקוד של תת-קבוצות של תאי B ומזהה פגמים ספציפיים בחולים עם חוסר חיסוני. Eur J Immunol. 2017;47(1):131–43.

8. Lemarquis AL, Theodors F, Einarsdottir HK, Ludviksson BR. מיפוי של מסלולי איתות המקושרים ל-sIgAD מגלה פגיעה בהפעלה של תאי B-STAT3 של IL-21-. אימונול קדמי. 2019;10:403.

9. Borte S, Pan-Hammarstrom Q, Liu C, Sack U, Borte M, Wagner U, et al. Interleukin-21 משחזר את ייצור האימונוגלובולינים ex vivo בחולים עם כשל חיסוני משתנה נפוץ ומחסור סלקטיבי של IgA. דָם. 2009;114(19):4089–98.

10. Abolhassani H, Kiaee F, Tavakol M, Chavoshzadeh Z, Mahdaviani SA, Momen T, et al. עדכון רביעי על הרישום הלאומי האיראני של ליקויים חיסוניים ראשוניים: שילוב של אבחנה מולקולרית. J Clin Immunol. 2018;38(7):816–32.

11. Aghamohammadi A, Rezaei N, Yazdani R, Delavari S, Kutukculer N, Topyildiz E, et al. קונצנזוס רישום המזרח התיכון וצפון אפריקה על טעויות מולדות של חסינות. J Clin Immunol. 2021;41(6):1339–51.

12. Seidel MG, Kindle G, Gathmann B, Quinti I, Buckland M, van Montfrans J, et al. האגודה האירופית לליקויים חיסוניים (ESID) רושמת הגדרות עבודה לאבחון קליני של טעויות מולדות בחסינות. J Allergy Clin Immunol Pract. 2019;7(6):1763–70.

13. Shad TM, Yousef B, Amirifar P, Delavari S, Rae W, Kokhaei P, et al. חריגות משתנות בתת-קבוצות של תאי T ו-B באטקסיה טלנגיאקטזיה. J Clin Immunol. 2020:1–13.

14. TofghiZavareh F, Mirshafey A, Yazdani R, Keshtkar AA, Abolhassani H, Bagheri Y, et al. תת-קבוצות לימפוציטים בקורלציה עם פרופיל קליני בחולי CVID ללא פגמים מונוגניים. מומחה Rev Clin Immunol. 2021;17(9):1041–51.

15. Moeini Shad T, Yousef B, Amirifar P, Delavari S, Rae W, Kokhaei P, et al. חריגות משתנות בתת-קבוצות של תאי T ו-B באטקסיה טלנגיאקטזיה. J Clin Immunol. 2021;41(1):76–88.

16. Azizi G, Mirshafey A, Abolhassani H, Yazdani R, Ghanavatinejad A, Noorbakhsh F, et al. חוסר האיזון של תת-קבוצות עוזרות T במחזור ותאי T מווסתים בחולים עם חוסר LRBA: מתאם עם חומרת המחלה. J Cell Physiol. 2018;233(11):8767–77.

17. Azizi G, Mirshafey A, Abolhassani H, Yazdani R, Jafarnezhad-Ansariha F, Shaghaghi M, et al. מחזורי משנה של תאי T עוזרים ותאי T מווסתים בחולים עם כשל חיסוני משתנה שכיח ללא המחלה המונוגנית הידועה. J Investig Allergol Clin Immunol. 2018;28(3):172–81.

18. Reisi M, Azizi G, Kiaee F, Masiha F, Shirzadi R, Momen T, et al. הערכה של סיבוכים ריאתיים בחולים עם הפרעות כשל חיסוני ראשוני. Eur Ann Alergy Clin Immunol. 2017;49(3):122.

19. Cerutti A, Chen K, Chorny A. תגובות אימונוגלובולינים בממשק הרירי. עננו ר' אימונול. 2011;29:273–93.

20. Bagheri Y, Babaha F, Falak R, Yazdani R, Azizi G, Sadri M, et al. IL-10 גורם להפרשת TGF-, הגברה של קולטן TGF- II והפרשת IgA בתאי B. Eur Cytokine Netw. 2019;30(3):107–13.

21. Ozkan H, Atlihan F, Genel F, Targan S, Gunvar T. IgA ו/או IgG subclass חוסר בילדים עם זיהומים חוזרים בדרכי הנשימה והקשר שלו עם נזק ריאתי כרוני. J Investig Allergol Clin Immunol. 2005;15(1):69–74.

22. Tavakol M, Jamee M, Azizi G, Sadri H, Bagheri Y, Zaki-Dizaji M, et al. גישה אבחנתית לחולים עם חשד לכשל חיסוני ראשוני. מטרות תרופתיות להפרעה חיסונית של Endocr Metab. 2020;20(2):157–71.

23. Resnick ES, Moshier EL, Godbold JH, Cunningham-Rundles C. תחלואה ותמותה בחסר חיסוני משתנה נפוץ לאורך 4 עשורים. דָם. 2012;119(7):1650–7.

24. Yazdani R, Abolhassani H, Asgardoon M, Shaghaghi M, Modaresi M, Azizi G, et al. סיבוכים ריאתיים זיהומיים ולא זיהומיים בחולים עם הפרעות כשל חיסוני ראשוני. J Investig Allergol Clin Immunol. 2017;27(4):213–24.

25. Ahmadi M, Nouri M, Babaloo Z, Farzadi L, Ghasemzadeh A, Hamdi K, et al. טיפול באימונוגלובולין תוך ורידי (IVIG) מווסת Th17 בדם היקפי ותאי T מווסתים בחולי הפלה חוזרת: ניסוי קליני לא אקראי, פתוח. אימונול לט. 2017;192:12–9.

26. Yazdani R, Seify R, Ganjalikhani-Hakemi M, Abolhassani H, Eskandari N, Golsaz-Shirazi F, et al. השוואה של סיווגים שונים עבור חולים עם כשל חיסוני משתנה נפוץ (CVID) באמצעות מדידה של תת-קבוצות של תאי B. אלרגול אימונופתול (מאדר). 2017;45(2):183–92.

27. Aghamohammadi A, Abolhassani H, Rezaei N. מחלות כשל חיסוני ראשוני באיראן: עבר, הווה ועתיד. Arch Iran Med. 2021. https://doi. org/10.34172/aim.2021.18.

28. Aghamohammadi A, Abolhassani H, Biglari M, Abolmaali S, Moazzami K, Tabatabaeiyan M, et al. ניתוח של תאי זיכרון B עם מיתוג בחולים עם מחסור ב-IgA. Int Arch Allergy Immunol. 2011;156(4):462–8.

29. Yousef B, Amirifar P, Delavari S, Rae W, Kokhaei P, Abolhassani H, et al. חריגות משתנות בתת-קבוצות של תאי T ו-B באטקסיה טלנגיאקטזיה. J Clin Immunol. 2020. https://doi.org/10.1007/s10875-020-00881-9.

30. Abolhassani H, Gharib B, Shahinpour S, Masoom SN, Havaei A, Mirminachi B, et al. אוטואימוניות בחולים עם חסר סלקטיבי של IgA. J Investig Allergol Clin Immunol. 2015;25(2):112–9.

31. Arkwright PD, Abinun M, Cant AJ. אוטואימוניות במחלות כשל חיסוני ראשוני בבני אדם. דָם. 2002;99(8):2694–702.

32. Cerutti A, Cols M, Puga I. תאי אזור B בשוליים: סגולות של לימפוציטים המייצרים נוגדנים כמו מולדים. Nat Rev Immunol. 2013;13(2):118–32.

33. Bukowska-Straková K, Kowalczyk D, Baran J, Siedlar M, Kobylarz K, Zembala M. תא B-cell בדם ההיקפי של ילדים עם סוגים שונים של מחסור חיסוני הומורלי ראשוני. רפואת ילדים 2009;66(1):28–34.

34. Karaman SBES, Gülez N, Genel F. המשמעות של תת-קבוצות של תאי B בחולים עם היפוגמגלבולינמיה לא מסווגת וקשר עם דרישה להחלפת אימונוגלובולינים תוך ורידי. איראן J Immunol. 2018;15(1):1–13.

35. Patuzzo G, Mazzi F, Vella A, Ortolani R, Barbieri A, Tinazzi E, et al. ניתוח אימונופנוטיפי של לימפוציטים B בחולים עם כשל חיסוני משתנה שכיח: זיהוי של CD23 כסמן שימושי בהגדרת המחלה. ISRN Immunol. 2013. https://doi.org/10. 1155/2013/512527.

36. Patuzzo G, Barbieri A, Tinazzi E, Veneri D, Argentino G, Moretta F, et al. אוטואימוניות וזיהום בחסר חיסוני משתנה שכיח (CVID). Autoimmun Rev. 2016;15(9):877–82.

37. Rakhmanov M, Keller B, Gutenberger S, Foerster C, Hoenig M, Driessen G, et al. תאי B במחזור CD21low בחוסר חיסוני משתנה נפוץ מזכירים תאי B דמויי רקמות, דמויי רקמות. Proc Natl Acad Sci. 2009;106(32):13451–6.

38. Isnardi I, Ng YS, Menard L, Meyers G, Saadoun D, ​​Srdanovic I, et al. קולטן משלים 2/CD21-תאי B תמימים אנושיים מכילים בעיקר שיבוטים לא מגיבים. דָם. 2010;115(24):5026–36.

39. Sims GP, Etinger R, Shirota Y, Yarboro CH, Illei GG, Lipsky PE. זיהוי ואפיון של תאי B מעבר אנושיים במחזור. דָם. 2005;105(11):4390–8.

40. Lemarquis AL, Einarsdottir HK, Kristjansdottir RN, Jonsdottir I, Ludviksson BR. תאי B מעבר ותגובות TLR9 לקויות בחסר סלקטיבי של IgA. אימונול קדמי. 2018. https://doi.org/10.3389/fmmu.2018. 00909.

41. Willinger T, Freeman T, Hasegawa H, McMichael AJ, Callan MF. חתימות מולקולריות מבדילות בין זיכרון מרכזי אנושי לבין תת-קבוצות של זיכרון CD8 T. J Immunol. 2005;175(9):5895–903.

42. מרטין MD, סמנכ"ל Badovinac. הגדרת תא T זיכרון CD8. אימונול קדמי. 2018;9:2692.

43. Nechvatalova J, Pavlik T, Litzman J, Vlkova M. תאי זיכרון T עם התמיינות סופנית מוגברת בחולים עם כשל חיסוני משתנה שכיח וחוסר IgA סלקטיבי. Cent Eur J Immunol. 2017;42(3):244–51.

44. Khanmohammadi S, Shad TM, Delavari S, Shirmast P, Bagheri Y, Azizi G, et al. הערכה של תגובות נוגדנים ספציפיות בחולים עם חסר סלקטיבי של IgA ואטקסיה טלנגיאקטזיה. מטרות תרופתיות להפרעה חיסונית של Endocr Metab. 2022;22(6):640–9.

45. Cazac BB, Roes J. TGF- קולטן שולט בהיענות תאי B ואינדוקציה של IgA in vivo. חֲסִינוּת. 2000;13(4):443–51.

46. ​​Van Vlasselaer P, Punnonen J, De Vries J. Transforming factor growth-beta מכוון את מעבר IgA בתאי B אנושיים. J Immunol. 1992;148(7):2062–7.

47. Cerutti A, Rescigno M. הביולוגיה של תגובות אימונוגלובולין A במעי. חֲסִינוּת. 2008;28(6):740–50.

48. Soheili H, Abolhassani H, Arandi N, Khazaei HA, Shahinpour S, Hirbod Mobarakeh A, et al. הערכה של תאי T מווסתים טבעיים בנבדקים עם מחסור סלקטיבי של IgA: מרעיון בכיר ועד הזדמנויות חדשות. Int Arch Allergy Immunol. 2013;160(2):208–14.

49. Yazdani R, Fatholahi M, Ganjalikhani-Hakemi M, Abolhassani H, Azizi G, Hamid KM, et al. תפקידה של אפופטוזיס בחסר חיסוני משתנה נפוץ ובמחסור סלקטיבי באימונוגלובולין A. מול אימונול. 2016;71:1–9.

50. McCusker C, Warrington R. כשל חיסוני ראשוני. כל Asth Clin Immun. 2011;7(ספק 1):S11.

51. Marits P, Wikström AC, Popadic D, Winqvist O, Thunberg S. הערכה של תפקוד לימפוציטים T ו-B בפרקטיקה קלינית באמצעות בדיקת שגשוג מבוססת ציטומטריית זרימה. קלינ אימונול. 2014;153(2):332–42.

52. TofghiZavareh F, Mirshafey A, Yazdani R, Keshtkar AA, Abolhassani H, Mahdaviani SA, et al. ניתוח אימונופנוטי ותפקודי של תת-קבוצות לימפוציטים בחולי כשל חיסוני נפוצים ללא פגמים מונוגניים. Scand J Immunol. 2022;96(1):e13164.