מהו התפקיד של תאי CD8 פלוס T בפיברוזיס כליות
Mar 20, 2022
איש קשר:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
המנגנון של תאי CD8 פלוס T להפחתת הצטברות מיופיברובלסטים במהלך פיברוזיס כלייתי
Min Gao, Jing Wang, Jianghua Zang, Yina An ו-Yanjun Dong
מבוא
מורכב ממודעת בינייםלַיֶפֶתוגלומרולוסקלרוזיס,פיברוזיס בכליותנצפית לעתים קרובות בשלב הסופי של מחלת כליות כרונית (CKD) ונחשבת לפרמטר נפוץ של סוגים שונים של CKD. המאפיינים הפתולוגיים העיקריים והאירועים המרכזיים שלפיברוזיס בכליותהם הפעלת פיברובלסט ביניים כלייתית והתרחבות מיופיברובלסט במחלת כליות חסימתית ותצהיר חריג ומוגזם של המטריצה החוץ-תאית, פתולוגיות הגורמות להרס של צינוריות כליות תקינות ומבנים אינטרסטיציאליים. גירויים ופציעות שונים (כולל Ang I, רמות גבוהות של גלוקוז, היפוקסיה, איסכמיה, אנדו או נפרוטוקסינים אקסוגניים ומולקולות חיסוניות) יכולים לגרום לנזק תאי רקמה ולביטוי של מוצרים מולקולריים רלוונטיים[1], הנחשבים לטריגרים מכריעים עבור דלקת לאחר פגיעה בכליות חריפה (AKI) [2]. לאחר פציעה, תאים דלקתיים קשורים מגוייסים למקום הפגוע על ידי דרגות הריכוז של גורמים כימוקטיים [3], כולל נויטרופילים, לימפוציטים, מונוציטים/מקרופאגים, תאים דנדריטים ותאי פיטום. בתהליך, גיוס תאי מערכת החיסון מועדף על ידי וויסות מוגברת של מולקולות הידבקות המופרשות על ידי סוגים שונים של תאים בתוך הכליה הפגועה [4]. סדרה זו של אירועים מייצרת ריכוז גבוה של ציטוקינים מקומיים ובונה מיקרו-סביבה דלקתית מתמשכת, ולאחר מכן מקדמת פיברובלסטים ומיופיברובלסטים לעבור הפעלה והתרחבות, מה שמוביל בסופו של דבר לפיברוגנזה כלייתית ולהצטברות ותקופת יתר של מטריקס (ECM) חוץ-תאית. מיופיברובלסטים ופיברובלסטים הם התאים המשפיעים העיקריים לייצור ECM. ה-ECM הוא מבנה דינמי ביותר הפועל כפיגום תמיכה עבור תאי פרנכימה בכליות. האיזון בין שקיעה ופירוק של ECM הוא הכרחי כדי לשמור על הומאוסטזיס של רקמות, בעוד שבירה של איזון זה גורםפיברוזיס בכליות.
cistanche למכירה
דלקת משמשת בדרך כלל כתהליך הגנה שמבטל נזקים ומקדם תיקון כליות. עם זאת, דלקת לא נפתרת גורמת ומתחילהפיברוזיס בכליות. בתגובה לכימוקינים המשתחררים על ידי תאי כליה פגועים, תאי T הטרוגניים נמשכים אל הכליה הפגועה במודל שלפיברוזיס בכליות[5-9]. עד כה, התפקידים של תאי T נחקרו אך ורק באמצעות טכניקות דלדול שונות [10-13]. מחקרים הולכים וגדלים הראו שתאי δT, תאי Th17 ותאי CD4 פלוס T מפעילים אפקט פרופיברוטי על כליות פגועות [11,14], ואילו Tregs מגן על הכליה מפני פציעה ולַיֶפֶת[15]. יש לציין, Tregs יכול להרוג את תאי החיסון המופעלים באמצעות גרנזים B או Fas-FasL[16-18], ולשלוט מקרופאגים של מעבר פנוטיפ כדי למנוע דלקת ולקדם תיקון רקמות [19-21]. התפקיד שלתאי CD8 פלוס Tבדלקת כליות ולַיֶפֶתפחות מוגדר. כאן אנו מראים כי הסתננות שלתאי CD8 פלוס Tקיים לאורך כל התהליך של דלקת כליות ולַיֶפֶתוממלא תפקיד מרכזי בוויסות הצטברות של מיופיברובלסטים בכליה הפגועה.
2. הצטברות מיופיברובלסט בכליותלַיֶפֶת
מיופיברובלסטים מעורבים במספר רב של מחלות פיברוטיות והצטלקות בעקבות פציעה. ניצול עכבר כתב מהונדס המבטא חלבון פלואורסצנטי ירוק משופר (GFP) המוסדר על ידי מקדם קולגן מסוג I alpha 1(colllal), Lin et al. זיהה את מקורותיהם של1-תאים מייצרים קוללה בכליה. התוצאות הראו שתאים המבטאים -SMA היו כ-75 אחוז מהתאים החיוביים ל-GFP [22]. לפיכך הוכח כי מיופיברובלסטים הם מקור עיקרי לייצור ECM בנגעים אלו, בעוד שהפיברובלסטים הם גם התורם העיקרי של ECM של רקמת חיבור. תפקיד חשוב נוסף של מיופיברובלסטים ופיברובלסטים הוא תחזוקה הומאוסטטית של ה-ECM של הכליה שבה הם שוכנים. פיברובלסטים מייצרים MMPs ו-TIMPs, המווסתים את הפירוק וההשקעה של ECM. במהלך שיפוץ כליות ופתרון דלקת, הביטוי של MMPs ו-TIMPs משנה את שיווי המשקל כדי להעדיף שקיעת ECM על פני סביבה מתפרקת מטריצה, ולאחר מכן מיופיברובלסטים מוסרים על ידי אפופטוזיס [23]. הפיברובלסטים הנותרים המפגינים מצב שקט עשויים לבוא מ-myofibroblasts שהופכים ופיברוציטים מדם היקפי [24].
המקור המדויק של myofibroblasts במהלךפיברוזיס בכליותשנוי במחלוקת מאוד. מחקר ניכר על מקורם של מיופיברובלסטים במהלךפיברוזיס בכליותהשתמשה בטכנולוגיות איתור שושלת ואיתור סמנים ולבסוף הציעה כי מיופיברובלסטים עשויים לנבוע מתאי אבות מגוונים (איור 1). נכון לעכשיו, מקורות מזוהים מרובים כוללים הפעלה של פיברובלסטים גרים [25,26], שגשוג או/ו התמיינות של פריציטים [22] ,27,28], מעבר אפיתל-מזנכימלי (EMT)[29-31], מעבר אנדותל-מזנכימלי (Endo-MT)[32,33], ותאים שמקורם במח עצם [10,34-40 ], שהפעלת פיברובלסטים תושביה היא התורמת העיקרית [26]. מחקר נוסף וקלאסי הראה כי 35 אחוז מהמיופיברובלסטים במודל חד-צדדי של חסימת השופכן (UUO) שלפיברוזיס בכליותנגזרו ממח העצם [41]. לאחרונה הוכח שהפרופורציה מורכבת מהתמיינות של תאי גזע מזנכימליים (MSCs)[42], מעבר פיברוציטים לפיברובלסט [36,37] ומעבר מקרופאג למיופיברובלסט (MMT)[39,43]. בנוסף, יש תרומה של EMT (5 אחוזים), Endo-MT (10 אחוזים) ופיברובלסט אינטרסטיציאלי (50 אחוז). סמנים נפוצים של פריציטים, כגון PDGFR- ו-NG2, אינם ספציפיים לחלוטין לפריציטים, כך שעדיין יש להבהיר האם הפריציטים שזוהו והפיברובלסטים הבין-סטיליים הם אותן אוכלוסיות [44]. בנוסף, פיברובלסטים מקומיים, תאים שמקורם במח עצם ופריציטים פריוואסקולריים עשויים להיות המקורות העיקריים לפיברובלסטים ומיופיברובלסטים פעילים במהלך השעות הראשונות לאחר UUO[22], בעוד שלא חושבים על מיופיברובלסטים שמקורם ב-EMT ו-Endo-MT. להופיע עד שבעה ימים לאחר UUO. חשוב לציין שמטריצת הקולגן רגישה לפרוטוליזה בשלב מוקדם שלפיברוזיס בכליות. לכן, בשלב מוקדם,לַיֶפֶתהוא הפיך ומונעלַיֶפֶתיכול להיות חלק יעיל מהטיפול. נושא חשוב נוסף הוא שקריותרפיה מבוססת MSC מושכת תשומת לב גוברת הודות ליכולת של MSCs לשמש להגנה מפנילַיֶפֶתבמחלת כליות [45].
יש לציין שמעבר MMT ופיברוציטים לפיברובלסט עדות לכך שמיופיברובלסטים עוברים מתאי מוח עצם. MMT יכול להיות נקודת ביקורת מרכזית להתקדמות של דלקת לא פתורה לכליה פתוגניתלַיֶפֶת. נושא חשוב נוסף הוא מעבר פיברוציטים לפיברובלסט פנימהפיברוזיס בכליותפתוגנזה. שאלה ארוכת שנים בתחום זה היא הקשר בין פיברוציטים שמקורם במח עצם לבין מקרופאגים המייצרים קולגן. בשל היעדר סמנים בלעדיים לתאים אלו, זיהוי פיברוציטים ממונוציטים, מקרופאגים, פיברובלסטים ומיופיברובלסטים הוא בעייתי במיוחד. תצפיות אחרונות מספקות תנופה נוספת להבהרת האופן שבו ניתן להבחין בין פיברוציטים על ידי פנוטיפ Gr1CD115-Collagen It מהתאים האחרים, ונחשבים כמתפתחים במח העצם מתאי מבשר מיאלואידים ונודדים לאתרי פציעה שבהם הם מתמיינים ל פיברובלסטים ולקדםפיברוזיס בכליות [35,37,46].
איור 1. המקורות התאיים של מיופיברובלסטים בפיברוזיס כליות
התהליך שלפיברוזיס בכליותמווסת בעיקר ברמת שעתוק גנים בתגובה לאותות פיברוטיים חוץ-תאיים מרובים. גורמי גדילה חיוניים כוללים גורם גדילה משתנה (TGF-), גורם גדילה שמקורו בטסיות דם (PDGF), גורם גדילה פיברובלסט בסיסי (FGF2), גורם גדילה של רקמת חיבור (CTGF), גורם גדילה אפידרמיס (EGF) ואנגיוטנסין II. TGF- 1 נחשב כמתווך העיקרי של הפתולוגיה שלפיברוזיס בכליות, בעוד שאינטרפרון (IFN-), גורם גדילה של הפטוציטים (HGF) וחלבון מורפוגנטי עצם 7 (BMP-7) מעכבים את ייצור רכיבי המטריצה בעיקר על ידי מניעת פעולת TGF- 1 [47-53 ]. בנוסף, מיופיברובלסטים ופיברובלסטים עשויים להפריש גם גורמים דלקתיים התורמים להתפתחות של מיקרו-סביבה דלקתית [54,55], כגון TGF- 1, IL-1, אינטרלוקין-6 (IL -6), IL-13, IL-33 וכימוקינים [56,57]. לפיכך, המיקרו-סביבה הדלקתית ממלאת תפקיד מכריע בהשראת הצטברות מיופיברובלסטים בפיברוזיס בכליות.
3. פנוטיפים מגוונים של תאי CD8 פלוס T בדלקת כליות ופיברוזיס
במיקרו-סביבה הדלקתית, מגוון גורמים פרו-דלקתיים כגון TNF-, IFN-, IL-6, IL-1, IL-23, IL-17, C3, C5a, C5b ומתווכים אנטי דלקתיים, כולל IL-4, TGF- , IL-10, heme oxygenase 1, resolving ו-protetin D1 מופרשים על ידי אוכלוסיות תאים תושבים ומגוייסים. הביטוי וההשפעות של גורמים דלקתיים אלה מציגים את המאפיינים של תלות בזמן ובריכוז, שהם גורמים מכריעים של שלבי הפציעה והתיקון [58]. לשיווי המשקל בין מתווכים פרו ואנטי דלקתיים יש השפעה משמעותית על היקף הפגיעה והתיקון של הרקמה, מחליט על הכיוון המתמשך בין דלקת לא נפתרת לשלב ההחלמה, ובסופו של דבר מוביל לכִּליָהלַיֶפֶתאו שיקום. מנקודת מבט קלינית, זה מרמז על הבנה טובה יותר של שליטה באיזון בכליה הפגועה, מה שעשוי להוביל לגישות התערבות קשורות יותר למיקודלַיֶפֶתוצלקות.
במהלך דלקת בשלב מוקדם שלפיברוזיס בכליות, תאי CD8 פלוס Tלשחק תפקיד מרכזי באיזון של המיקרו-סביבה הדלקתית. בתגובה לפגיעה כלייתית חריפה וכרונית, הגיוס וההפעלה של לימפוציטים T קודמים בדרך כלל לזרימה של מקרופאגים לכליות הפצועות [12]. בינתיים, מח העצם מגביר את הייצור והשחרור של מונוציטים למחזור הדם ההיקפי 59]. הצטברות תאי CD8 T עולה מהיום הראשון ומגיעה לשיא ביום 5 לאחר פציעה של UUO [60]. ראוי לציין כי היעדרתאי CD8 פלוס Tלא השפיע על הביטוי של MCP-1, MIP-1a, MIP-1 ו-RANTES בעכברים שטופלו ב-UUO [13], מכיוון שתת-אוכלוסיות אחרות של תאי T יכלו לפצות על ההיעדר. CD4 פלוס תאי T ותאי CD8 פלוס Tלייצר כימוקינים מרובים כדי לגרום לגיוס מונוציטים, כגון KC, MCP-1, MIP-1, MIP-1 ו-RANTES[12,54]. בתגובה לגורם מגרה מושבה 1(CSF1), מונו-ציטים מגויסים יכולים להתרבות בכליה, מה שמגביר את התגובה הדלקתית [61-63]. IFN- ו-TNF- המופרשים על ידיתאי CD8 פלוס Tליזום מסלולי איתות רלוונטיים כדי לגרום לקיטוב מקרופאגים לכיוון הפנוטיפ M1 שיכול לייצר רמה גבוהה יותר של ציטוקינים פרו-דלקתיים, כגון TNF- ו-IL-1, IL-6 וכימוקינים כמו MCP-1[ 64].תאי CD8 פלוס Tותאי Th2 מפרישים IL-4 ו-IL-13, ולאחר מכן גורמים לפנוטיפ ה-Ml שהוחדר להשתנות למקרופאגים M2 הפרופיברוטיים המעורבים בתיקון והתחדשות הכליות, שהם מקור עיקרי ל-TGF ונוגדי דלקת. ציטוקינים, כגון IL-10, IL-1 [65]. ההפעלה המתמשכת של TGF- מעוררת מעבר מקרופאגים מהפנוטיפ M2a למיופיברובלסטים בתוך הכליה הפגועה (MMT)[38,39,66-69]. ראוי לציין שמקרופאגים M2 הם תאי המשפיעים העיקריים לייצור TGF- 1, אשר ממלאים תפקיד מכריע בהפעלה של פיברובלסטים מהותיים והצטברות של מיופיברובלסטים באמצעות הנעת EMT [53,70-73], Endo- MT [74-76], מעבר פיברוציטים לפיברובלסט [10,35-37, מעבר מקרופאג למיופיברובלסט (MMT)[39,43,66,77] והתפשטות פריציטים [22,27] . בנוסף, מקרופאגים M2 מפרישים IGF-1 ו-PDGF כדי לשמור על הישרדותם של מיופיברובלסטים ולהקל על התפשטות והפעלה של פיברובלסטים מקומיים [78,79]. התערוכה של פנוטיפים מגוונים של תאי CD8t בדלקת ולַיֶפֶתמוביל חוקרים לזהות תת-קבוצות שונות של תאי CD8 פלוספיברוזיס בכליותולחשוף את תפקידם.
4. תפקידם של תאי CD8 פלוס T בכליותלַיֶפֶת
מחקר משנת 2010 לא מצא השפעה משמעותית עלתאי CD8 פלוס Tבפיברוזיס בכליות[9]. טפיינר וחב'. הראו שתאי CD4 פלוס T אבל לאתאי CD8 פלוס Tלשחזר את חומרת ה-UUOלַיֶפֶת. לאחר בנייה מחדש של עכברי RAG-/7 עם תאי CD4 פלוס T אותאי CD8 פלוס Tבמודל של כליה חסומה, השחזור עם תאי CD4 פלוס T משתקםלַיֶפֶת, אבל בנייה מחדש של עכברי RAG-/- עםתאי CD8 פלוס Tלא משפיע בצורה משמעותיתשֶׁל הַכְּלָיוֹתלַיֶפֶת. שוקל להרכיב מחדשתאי CD8 פלוס Tעשוי להיות חסר אינטראקציה עם תאי CD4 פלוס T כדי לעורר את השפעתם in vivo, Tapmeier et al. הניח את זהתאי CD8 פלוס Tלשחק תפקיד אנטי-פיברוטי פוטנציאלי במודל UUO.
עדויות אחרונות מהקבוצה שלנו ואחרות תומכות ברעיון שהסתננות מוגברת שלתאי CD8 פלוס Tמחליששֶׁל הַכְּלָיוֹתלַיֶפֶתבעכברים. מחסור ב-CD8 מחמירשֶׁל הַכְּלָיוֹתלַיֶפֶת, ואילו העברה מאמצת שלתאי CD8 פלוס Tלתוך CD8 KO עכברים יורדפיברוזיס בכליותבעכברים שטופלו ב-UUO 【13,60】. Zhao et al. מציע ש-IFN- -מפיקתאי CD8 פלוס Tמצטברים בכליה החסימתית כדי להגן מפני UUOפיברוזיס בכליות[80]. אסטקסנטין גורם לגיוס והסתננות שלתאי CD8 פלוס Tעל ידי העלאת ויסות CCL5. נתונים מ-Prediman et al. לחשוף כי דלדול שלתאי CD8 פלוס Tמגביר את ביטוי הגנים הפיברוטי הכלייתי בעכברי apoE-/7 המושרים באנגיוטנסין I(AngII).תאי CD8 פלוס Tמווסת על ידי חיסון p210 (פפטיד הקשור ל-apoB-100) יכול לשפר יתר לחץ דם המושרה על ידי AngIl ושֶׁל הַכְּלָיוֹתלַיֶפֶת[81]. ממצאים אלה מצביעים על תפקיד אנטי-פיברוטי ומגן כליות פוטנציאלי שלתאי CD8 פלוס Tולעמוד בבסיס הצורך להגדיר את התפקיד ולהבין את המנגנון של תאי CD8 פלוס T בתוכםפיברוזיס בכליות. נתונים של Liu וחב' מצביעים על כך שלימפוציטים מסוג CD4 פלוס T, במיוחד תאי Th2, תורמים להתקדמות שלפיברוזיס בכליות[11]. מספר מחקרים קודמים העלו ש-IL-2, TNF-a, IFN- ו-IL-12 יכולים לעכב התפתחות של פיברוציטים אנושיים ועכברים, בעוד ש-I-4, IL-13 קידם את ההתמיינות של פיברוציטים מאבותיהם [10,82,83]. תאי CD4 פלוס T מבודדים מכליות חסומות של עכברי CD8 KO מקדמים יותר מעבר מונוציטים לפיברובלסט במבחנה מאשר תאי CD4 פלוס T מבודדים מכליות חסומות של עכברי WT . כדי לקבוע אםתאי CD8 פלוס Tאינטראקציה עם תאי CD4 פלוס T כדי להפעיל את השפעתם במהלךלַיֶפֶת, תאי CD4 פלוס T התרוקנו בעכברי CD8 KO או עכברי CD8 KO ששוחזרו בתאי CD8 על ידי שימוש ב-CD4 Ab חד שבטי לבחינת אזורים פיברוטייםלַיֶפֶתרמות חלבון קשורות בכליות UUO [13]. בהתאם לתוצאות של טפמאייר, מצאנו את זהתאי CD8 פלוס Tלא משפיעים בצורה משמעותיתלַיֶפֶתבהיעדר תאי CD4 פלוס T. דלדול תאי CD4 פלוס T מופחתלַיֶפֶתבכליה חסומה, ללא קשר לנוכחות או היעדרתאי CD8 פלוס T.
יתרונות גברים cistanche
5. IFN- -ייצור תאי CD8 פלוס T בפיברוזיס כלייתי
מספר מחקרים קודמים גם הציעו שלימפוציטים CD8 פלוס T יכולים למלא תפקיד ביצירת חסינות Th1 ובעיכוב תגובת Th2 [84-86]. הדו"ח הקודם שלנו הציע שהמחסור ב-CD8 עולהלַיֶפֶתעל ידי קידום התמיינות תאי CD4 פלוס T ל-Th2 [13]. בודדנו תאי CD4 פלוס T מהכליות החסומות של עכברי WT ו-CD8 KO ובחנו ביטוי mRNA של סמני Th1 IFN-y ו-T-bet ושל סמני Th2 IL-4 ו-GATA3. ביטוי IFN-y ו-T-bet mRNA ירד, בעוד שביטוי IL-4 ו-GATA3 גדל בתאי CD4 פלוס T מבודדים מכליות CD8 KO UUO בהשוואה לתאי WT CD4 פלוס T. נתונים אלו מצביעים על דלדול שלתאי CD8 פלוס Tמקדם התמיינות של תאי CD4 פלוס T לפנוטיפ Th2.
מחקר מוקדם הראה ש-IFN-y המופרש על ידי תאי רוצח טבעיים (תאי NK) מעכב את ההפעלה של פיברובלסטים לפנוטיפ המיופיברובלסט ומפחיתפיברוזיס בכליות[87]. באופן עקבי, Fariba et al. הציע את ה-IFN-y-peptidomimetic fibro Feron המכוון ל-PDGF R המביע יתר על המידה מיופיברובלסטים מוחלשיםפיברוזיס בכליות[88]. ריו וחב'. הראה שאינטרפרון- משפר את ההשפעה האנטי-פיברוטית של תאי גזע מזנכימליים (MSCs) על ניסוייםפיברוזיס בכליות, וזה באמצעות הפרשת פרוסטגלנדין E2 כי MSCs יכולים להפעיל אפקט מגן על חולדות הנתונות לפציעת איסכמיה-פרפוזיה (IRI) ו-UUO[89]. בשנים האחרונות מחקרים של Patricia et al. מציעים שמלבד NK(דרך IFN-y) ותאי דנדריטים (דרך IL-12), לימפוציטים CD8 פלוס T, כמקור נוסף ל-IFN-y, משפר באופן דומה את התפתחות הפנוטיפ CD4 פלוס Th1 【90】.IFN- מעדיף התמיינות תאי Th1 של תאי CD4 פלוס T ומעכב התמיינות תאי Th2 [91,92]. של פתק,תאי CD8 פלוס Tלייצר רמה גבוהה יותר של תאי IFN- מאשר CD4 פלוס T לאחר הפעלת TCR 【90】. יתר על כן, IFN- מפעיל השפעה אנטי פיברוטית על כליות פגועות באמצעות עיכוב הפעלה ושגשוג של פיברובלסטים והפחתת סינתזת קולגן [93]. זה עשוי להיות חשוב לשיפור ההבנה של מנגנונים וטיפולים שלפיברוזיס בכליותלחקור את המאפיינים המבטאים של ציטוקינים במהלך התהליך הפתולוגי. נתונים מהמחקר הקודם שלנו הצביעו על התפקידים שלתאי CD8 פלוס Tבדלקת כליות ולַיֶפֶת, כאשר IFN- ממלא תפקיד מפתח במנגנון הוויסות של תאי CD8 פלוס T בתהליך הפתולוגי [13]. אנחנו בודדנותאי CD8 פלוס Tמעכברי IFN-y KO והזריקו אותם או WTתאי CD8 פלוס Tלתוך עכברי CD8 KO. התוצאות הראו כי WTתאי CD8 פלוס Tיכול להפחית את ההתמיינות של תאי CD4 פלוס T ל-Th2 ופיברוזיס בכליות, ואילו בנייה מחדש על ידי IFN-KOתאי CD8 פלוס Tלא פגעלַיֶפֶתאו מעבר של Th1 לפנוטיפ Th2. באופן עקבי, חלק מהנתונים של הקבוצה שלנו ואחרים הצביעו על כך ש-IFN-y מופרש על ידיתאי CD8 פלוס Tמעכב את המעבר של תא Th1 לתאי Th2, ובכך הפחית את הקיטוב של מקרופאגים M2 ומעבר מקרופאג למיופיברובלסט או מעבר מונוציט לפיברובלסט, ובהמשך מחליש את היקףפיברוזיס בכליות(איור 2) [11,13].
6. הפונקציות של תת-קבוצות CD8 פלוס תאי T אשר מזוהות על ידי CD44, CD25 ו-CD62L על הצטברות מיופיברובלסטים בפיברוזיס כליות
נכון לעכשיו, תאי אפקטורי CD8 פלוס T מחולקים לשתי תת-אוכלוסיות לפי הפרשת ציטוקינים. סוג 1תאי CD8 פלוס T（Tc1） מפריש IFN-, בעוד סוג 2תאי CD8 פלוס T(Tc2) מפרישים בעיקר IL-4 ו-IL-5 [94]. למרות ששתי תת-אוכלוסיות תאי האפקטור זוהו בדם היקפי אנושי ובחולים עם הפרעות קליניות שונות [95-99], שלהם תפקידים והשפעות על דלקת כליות ולַיֶפֶתלהישאר יחסית לא מוגדר. זיהינו שתי תת-קבוצות של תאי CD8 פלוס T במודל עכבר של UUO-inducedפיברוזיס בכליות, Tc1 (CD44 בתוספת CD25-CD62L-)ו-Tc2 (CD44 בתוספת CD25highCD62Llow), אשר מפעילים השפעות מגוונות בבניית סביבה דלקתית ופרופיברוטית. בשלב הדלקת המוקדם, תאי Tcl הם האוכלוסייה העיקרית. Tcl ו-Tc2 מפרישים כימוקינים שמגייסים מקרופאגים. בנוסף, Tcl ו-Tc2 יכולים להגביר את הפרשת הכימוקינים של מקרופאגים ופיברובלסטים שחדרו. בעקבות הפיתוח שללַיֶפֶת, תאי CD8 פלוס T עוברים לפנוטיפ Tc2, אשר מפריש רמה גבוהה יותר של IL-4 ו-IL-13 מאשר Tc1 כדי לגרום להצטברות של מקרופאגים M2 ומיופיברובלסטים בכליה החסומה (איור 2). התוצאות שלנו הראו שמקרופאגים שטופלו ב-Tc1-מפעילים פיברובלסטים כדי להפריש גורמים דלקתיים ולייצר עודף ECM. ראוי לציין כי Ic1 ו-Tc2 הפרישו שניהם IFN-y כדי לעכב את המעבר של תאי CD4* T לפנוטיפ Th2, ובכך הפחיתו את הביטוי של IL-4 ו-IL-13 ואת הצטברות M2a מקרופאגים פנוטיפיים ומיופיברובלסטים [67,68,100]. בנוסף, כמה מחקרים הוכיחו שנראה כי תת-אוכלוסיות תאי Th1 המייצרות IFN- קשורות להשפעה הציטוטוקסית שלתאי CD8 פלוס T [101].
7. השפעה ציטוטוקסית של תאי CD8 פלוס T על פיברובלסטים
לימפוציטים T ציטוטוקסיים עלולים להרוג תאים סרטניים, תאים נגועים ותאים פגומים. תאי CD8 T הם ציטוטוקסיים ברביםלַיֶפֶתמחלות, כגון כבדלַיֶפֶת[102], טרשת מערכתית [103], ריאותלַיֶפֶת[104], ריפוי פצעים [105] וגידול [106]. נתונים מסוימים מראים שתאי T יכולים לגרום לאפופטוזיס פיברובלסט [107-110]. עם זאת, האם ההשפעה הציטוטוקסית שלהם מפחיתהפיברוזיס בכליותלא נחקר היטב.
קיימות שתי דרכים ישירות לציטוטוקסיות בתיווך CTL לתאי מטרה. תאי CD8 T פעילים מייצרים ליגנד FAS המקיים אינטראקציה עם FAS על תא המטרה, וכתוצאה מכך אפופטוזיס של תאי המטרה באמצעות הפעלה של קספס-8 וקספאז-3. הדרך האחרת שבה משתמשים בתאי אפקטור ציטוטוקסיים של CD8 פלוס היא באמצעות שחרור תלוי סידן של גרגירים ליטיים מיוחדים, כולל בעיקר פרפורין וגרנזימים. פרפורין מתפלמר ליצירת נקבוביות טרנסממברניות בממברנת תא המטרה, מה שמאפשר דיפוזיה של גרנזימים לתוך הציטוזול, ובכך מתחיל אפופטוזיס של תא המטרה באמצעות הפעלה של קספאז-3 [111,112].
CD11c הוא סמן המשמש לזיהוי ואפיון תת-קבוצות של תאים דנדריטים (DC) [113]. בשנת 1987, מחקר אחד דיווח לראשונה כי ציטוטוקסיתאי CD8 פלוס Tיכול לבטא CD1lc [114]. CD1lctתאי CD8 פלוס Tמציגים השפעות ציטוטוקסיות חזקות במבחנה ובאינבו [115]. חן וחב'. מצא שמגיב לזיהום חיידקי, CD11ctתאי CD8 פלוס Tמהווים אוכלוסייה הטרוגנית הניתנת לחלוקה נוספת ל-CD11chighתאי CD8 פלוס Tו-CD11clowתאי CD8 פלוס T. הראשונים יכולים להרוג ישירות את תאי ה-CD4 פלוס T המשופעלים הן במבחנה והן ב-vivo, בעוד שהאחרונים יכולים להפריש IFN בשפע ולעורר אפופטוזיס של תאי המטרה EL4(EG7) שעברו OVA באמצעות perforin [107. באופן דומה, הפרדנו תאי CD11c'CD8 פלוס T ותאי CD11c-CD8 פלוס T מהכליה בעכברים שהיו נתונים ל-UUO, זיהינו ביטויי mRNA של גנים הקשורים לציטוטוקסיות, כגון פרפורין 1, גרנזים A, גרנזים B וליגנד FAS ב שני תאי CD8T וזיהה איזה סוג תא עבר אפופטוזיס. התוצאות הצביעו על כךתאי CD8 פלוס Tהופצו סביב פיברובלסטים, והם קשורים לאפופטוזיס פיברובלסטים. CD1lctתאי CD8 פלוס Tיכול לבטא רמות גבוהות יותר של הגנים הקשורים לציטוטוקסיות מאשר CD11c-תאי CD8 פלוס T. יש לציין, CD1lctתאי CD8 פלוס Tלשחק תפקיד מרכזי בהריגת פיברובלסטים (איור 2), אם כי תאי CD1lc-CD8 פלוס T יכולים גם לגרום לאפופטוזיס פיברובלסט. לרוע המזל, לא זיהינו עוד כיצד שני התאים בהתאמה מציגים השפעות ציטוטוקסיות על פיברובלסטים. נדרשת הבנה רבה יותר של הכוונה לאפופטוזיס של פיברובלסטים מופעלים ומיופיברובלסטים כדי לפתח אמצעים טיפוליים להקלהפיברוזיס בכליות.
8. כמה מגבלות של מחקר ופרספקטיבה קיימים
תאי CD8 פלוס Tממלאים תפקיד מרכזי בתגובה החיסונית הסתגלותית. הפעלה של תאי CD8 פלוס T מתרחשת באמצעות זיהוי קומפלקס היסטו-תאימות מפתוגן שמקורו בפתוגן מסוג I(pMHC-I) של תאים מציגי אנטיגן (APCs)[116]. עם זאת, המנגנון שלCD8ועודT cell הפעלה בפיברוזיס בכליותהנגרמת על ידי דלקת סטרילית אינה מובהרת. הפנוטיפ והתפקוד שלתאי CD8 פלוס Tשינויים עם המיקרו-סביבה הדלקתית. מגבלה אחת של מחקרים נוכחיים היא שהאיזון שלתאי CD8 פלוס Tתת-קבוצות בעכברים עםפיברוזיס בכליותאינו ברור. איך לשפרפיברוזיס בכליותעל ידי איזוןתאי CD8 פלוס Tקבוצות משנה עשויות להיות שאלה שיש לקחת בחשבון. נתונים מ- Schumacher et al. להוכיח שהיכולת לזהות גידולים עצמיים מוגבלת לכ-10 אחוז מהחדירת הגידולתאי CD8 פלוס T[117]. מחקר קודם אימת כי תאי CD11c פלוס CD8 פלוס מהווים 58 אחוזיםCD8 פלוס T תאיםאוכלוסיה בכליות החסומות. האפיון המוגבל של שני CD1lctתאי CD8 פלוס Tו-CD1lc-תאי CD8 פלוס Tאוכלוסיות לפי הפנוטיפ הבסיסי שלהן היא מגבלה נוספת. ואכן, איננו מאשרים שאוכלוסיות אלו הן כולן תאי T ציטוטוקסיים פונקציונליים, ולא מצליחים לוודא כמה מהתאים הללו מתואמים בהכרח עם מספר תאי T ציטוטוקסיים. CD1lctתאי CD8 פלוס Tעשוי לבטא סמנים אחרים ולבצע פונקציות אחרות. תאי CD8 פלוס T יכולים להרוג תאי גידול באמצעות האפקט הציטוטוקסי. מצאנו שתאי CD8 פלוס T מציגים גם השפעות ציטוטוקסיות על פיברובלסטים, אך לא ידוע אם ההשפעה הציטוטוקסית היא ספציפית. שיערנו ש-TCR של תאי T ציטוטוקסיים מזהה מיופיברובלסטים שמסביב שנמצאים במצב מופעל יתר ומזדקן. ניתוח RNA-seg ו-mass spectrometry עשוי לעזור לחשוף את המסתורין הללו על ידי השוואת ההטרוגניות הגנטית והתפקודית של תת-קבוצות מגוונות של תאי CD8 T.
איור 2. ויסות של מעבר מקרופאג ל-myofibroblast.(1) בתגובה לפגיעה בכליות, מח העצם מגביר את הייצור והשחרור של מונוציטים לדם ההיקפי. מונוציטים במחזור הדם מגוייסים לכליה הפגועה, תהליך התלוי בכימוקינים המופרשים בחלקם על ידי לימפוציטים מסוג T ומקרוציטים תושבים [118,119]. מונוציטים מגויסים יכולים להתרבות בכליה כדי להגביר את התגובה הדלקתית. （2） IFN- המיוצר על ידי לימפוציטים Th1 ו-CD8 בתוספת T מעודדים קיטוב מקרופאגים לכיוון פנו-סוג M1 פרו-דלקתי [85,90]. (3) המקרופאגים שהסתננו מאמצים פנוטיפ M2 אנטי דלקתי בתגובה ל-IL4 ו-IL13 אשר מתבטאים על ידי תאי Th2 ו-Tc2 [82]. ההפעלה המתמשכת של TGF- מעוררת מעבר מקרופאגים מפנוטיפ M2a למיופיברובלסטים בתוך הכליה הפגועה (MMT)[38,39,66-69]. מיופיברובלסטים שמקורם ב-MMT מעוררים הצטברות ותצהיר של ECM ובהמשך מקדמים התפתחות שלפיברוזיס בכליות[38,39,43]. (4) במהלך תהליך זה, שתי קבוצות משנה שלתאי CD8 פלוס Tתאי Tcl ו-Tc2 מפרישים IFN-y כדי לעכב את ההתמיינות של תאי Th2, מה שיכול למנוע קיטוב מוגזם של תאי M2a המושרה על ידי תאי Th2 [34]. (5) תאי Tc1 ו-Tc2 יכולים להפריש גורמים הקשורים לציטוטוקסיות כדי לגרום לאפופטוזיס של פיברובלסטים, ובהמשך לדכא את ההתרחבות של מיופיברובלסטים.
יתרונות גברים cistanche
9. מסקנות
המחקר הקודם שלנו גילה את זהתאי CD8 פלוס Tלהשתתף בכל דלקת הכליות ולַיֶפֶתלעבד ולהפחית את הצטברות myofibroblasts במהלךשֶׁל הַכְּלָיוֹתלַיֶפֶתבשתי דרכים:(1)ייצור IFN-yתאי CD8 פלוס Tלהפחית את ההתמיינות של תאי CD4 פלוס T לתאי Th2 כדי לשלוט בדלקת ולַיֶפֶת. (2) CD11ctתאי CD8 פלוס Tבכליות חסומות עלול לגרום לאפופטוזיס פיברובלסט. זה עשוי להיות מועיל למניעה וטיפול שלפיברוזיס בכליותלווסת את המספר והתפקוד של תאי CD8T בתקופות שונות של פיברוגנזה. עוד ועוד מחקר על ההשפעה שלתאי CD8 פלוס Tלוויסות דלקת כליות והחלשהלַיֶפֶתיהיה צורך.
הפניות
1. Kurzhagen, JT;Dellepiane,S.Cantaluppi, V.; Rabb, H.AKI: גורם סיכון מוכר יותר ויותר להתפתחות והתקדמות CKD. J.Nephrol.2020, 33, 1171-1187. [CrossRef] [PubMed]
2. Chen, GY;Nunez, G. Inflammation Sterile: חישה ותגובה לנזק.Nat.Rev.Immunol.2010,10,826-837. [CrossRef] [PubMed]
3.Chung, ACK;Lan, HY Chemokines בפגיעה כלייתית. . Soc.Nephrol.2011,22,802-809.[CrossRef][PubMed]
4. רטליף, ב"ב; רבדי, מ"מ; ואסקו, ר.; יאסודה, ק.; Goligorsky, MS Messengers ללא גבולות: מתווכים של תגובה דלקתית מערכתית ב-AKI. ג'יי אמ. Soc. Nephrol.2013, 24,529-536. [CrossRef] [PubMed]
5. רוברטסון, ה.; עלי, ש.; מקדונל, BJ; ברט, לספירה; Kirby, JA תפקוד לקוי של שתל כליות כרוני: התפקיד של מעבר תאי אפיתל צינורי לתאי T בתיווך תאי T. J.Am.Soc. Nephrol.2004,15, 390-397. [CrossRef][PubMed]
6. Kitagawa, K.; וואדה, ט; Furuichi, K.; השימוטו, ה.; אישיוואטה, י: אסאנו, מ.; Takeda, M.; כוזיאל, וושינגטון; Matsushima, K.; מוקאידה נ.; et al. חסימה של CCR2 משפרת את הפרוגרסיבילַיֶפֶתבכליה. אמ. J. Pathol.2004,165, 237-246. [CrossRef]
7. Eis, V.; לאקאו, ב.; Vielhauer et al. קולטן כימוקין CCR1 אבל לא CCR5 מתווך גיוס לויקוציטים ואחריופיברוזיס כליותלאחר חסימה חד צדדית של השופכה. ריבה. Soc. Nephrol.2004,15, 337-347. [CrossRef]
8. P Anders, HJ; Vielhauer, V; פרינק, מ; Linde Y et al, אנטגוניסט לקולטן כימוקין CCR-1 מפחיתפיברוזיס בכליותלאחר קשירת שופכן חד צדדית. ג'יי קלין. תחקור. 2002, 109,251-259. [CrossRef]
9. טפמאייר, TT; פחד, א.; בראון, ק.; Chowdhury, P; שקים, ש; שירין, נ"ס; וונג, W. תפקיד מרכזי של תאי CD4 פלוס T בפיברוזיס בכליותבעקבות חסימת השופכה. כליות אינט. 2010, 78, 351-362. [CrossRef]
10. Niedermeier, M;Reich, B.∶Gomez, MR;Denzel, A.; Schmidbauer, K.;Göbel,N.;Talke, Y.;Schweda, F;Mack, M. CD4 plus T cells שולטים בהתמיינות של Grl פלוס מונוציטים לפיברוציטים. פרוק. Natl.Acad.Sci.USA 2009, 106, 17892-17897. [CrossRef]
11. ליו, ל.; קו, פ; זנג, ש; פיי, ג.; לי י; ליאנג, ה; שו, ג.; Chen, S.CD4 פלוס לימפוציטים T, במיוחד תאי Th2, תורמים להתקדמות שלפיברוזיס כליות. אמ. J. Nephrol.2012, 36, 386-396. [CrossRef]
12. פנג, X.; שיאו, ז'; ג'אנג, ג'; לי,י.; דונג, י; Du, J.IL-17A המיוצר על ידי תאי δ T ו-Th17 מקדםפיברוזיס בכליותבאמצעות חדירת לויקוציטים בתיווך RANTES לאחר חסימת כליות. I. פאתול. 2015.235,79-89. [CrossRef]
13. דונג, י.; יאנג, מ.; ג'אנג, ג'; פנג, X.; צ'נג, ג'; Cui, T.; Du, J.Depletion ofתאי CD8 פלוס Tמחמיר את מעבר מונוציטים לפיברובלסט המושרה על ידי CD4 בתוספת תאי Tפיברוזיס כליות. I. Immunol. 2016. 196.1874-1881. [CrossRef]
14. קורן, T.;Betelli,E.; Oukka, M;Kuchroo, VKIL-17 ו-Th17 Cells.Annu.Rev.Immunol.2009, 27, 485-517. [CrossRef]
15. Do Valle Duraes, F;Lafont, A.;Beibel, M.;Martin, K.; Darribat, K.;Cuttat,R.; וולדט, א.; נאומן, יו.; ויצ'ורק, ג.; גאליש, ש; et al. גינון תאים חיסוני מגלה תפקיד מגן על תאי T מווסתים במהלך פגיעה בכליות ולַיֶפֶת.JCI Insight 2020,5. [CrossRef]
16. Gondek, DC; לו, LF; Quezada, SA; Sakaguchi, S.; Noelle, RJ חוד החנית: דיכוי בתיווך מגע על ידי תאים רגולטוריים CD4 פלוס CD25 פלוס כרוך במנגנון תלוי גרנזיים B, בלתי תלוי ב-perforin. I. Immunol. 2005,174,1783-1786.[CrossRefl
17. ג'נג, ל.; שארמה, ר.; גאסקין, פ; פו, SM; Ju, STA תפקיד חדש של IL-2 בדלקת אוטואימונית ספציפית לאיבר מעבר לנקודת הביקורת הרגולטורית של תאי T: גם נוק-אאוט של IL-2 וגם מוטציית Fas מאריכים את תוחלת החיים של עכברי Scurfy אך באמצעות מנגנונים שונים. J. Imunol.2007, 179, 8035-8041.[CrossRef]
18. Strauss,L.;Bergmann, C.;Whiteside,TL Human במחזור CD4 פלוס CD25highFoxp3 פלוס תאי T רגולטוריים הורגים תאי CD8 פלוס אוטולוגיים אך לא CD4 פלוס מגיבים על ידי אפופטוזיס בתיווך Fas.J.Immunol.2009,182, {{9 }}.[CrossRef]
הערה:האמור לעיל אינו רשימת הפניות מלאה
