גליקוזידים פנילתנואידים אצילים, אכינאקוסיד ואקטאוזיד מ- Cistanche tubulosa משפרים את סבילות הגלוקוז בעכברים

למידע נוסף:ali.ma@wecistanche.com

Toshio Morikawa, et al

תַקצִיר

פנילתנואידים גליקוזידים,echinacoside(1) ואקטאוזיד(2), מרכיבים עיקריים בסטמים שלCistanche tubulosa(Orobanchaceae), עיכבו את העלייה ברמות הגלוקוז בדם לאחר הארוחה בעכברים עמוסי עמילן במינונים של 250-500 מ"ג/ק"ג po תרכובות אלו (1 ו-2) שיפרו משמעותית את סבילות הגלוקוז בעכברים העמוסים בעמילן לאחר שבועיים של מתן רציף במינונים של 125 ו/או 250 מ"ג/ק"ג ליום בלי לגרום לשינויים משמעותיים במשקל הגוף או בצריכת המזון. בנוסף, מספר מרכיבים מCistanche tubulosa, כולל 1 (IC50=3.1 lM), 2 (1.2 lM), isoacteoside (3, 4.6 lM), 20-acetylacteoside (4, 0.071 lM), tubuloside A (5, 8.8 lM) ו-B (9, 4.0 lM), syringalide A3-OaL-rhamnopyranoside (10, 1.1 lM), campneoside I (13, 0.53 lM), וקנקנוסיד J1 (14, 9.3 lM), הפגינו פעילות מעכבת אלדוזה רדוקטאז חזקה של עדשת חולדה. בפרט, העוצמה של תרכובת 4 הייתה דומה לזו של epalrestat (0.072 lM), מעכב אלדוזה רדוקטאזין קליני.

מילות מפתח אכינאקוסייד, אקטאוזיד, אפקט לשיפור סבילות לגלוקוז, מעכב אלדוזה רדוקטאז,Cistanche tubulosa

לחץ ליתרונות ותופעות לוואי של Cistanche tubulosa ומוצרי Cistanche

מבוא

פנילתנואידים גליקוזידים(PhGs) הם סוג של תרכובות פנוליות המאופיינות במבנה b-glucopyranoside הנושא חלק הידרוקסיפנילאתיל כאגליקון. תרכובות אלו מורכבות לרוב ממספר תחליפים כגון חומצות ארומטיות (למשל, חומצה קינמית, חומצה קומרית, חומצה קפאית, חומצה פרולית, חומצה פרולית וכו') ו/או סוכרים שונים (למשל, רמנוזה, קסילוזה, אפיוז, ארבינוז וכו') המחוברים לשארית הגלוקוז באמצעות קישורים אסטרים או גליקוזידיים, בהתאמה. למרות שה-PhG מופצים באופן נרחב בממלכת הצמחים, רובם נמצאו במשפחות Scrophulariaceae, Oleaceae, Plantaginaceae, Lamiaceae ו- Orobanchaceae [1–3].אכינאקוסייד(1) [4, 5]ואקטאוזיד(2, הנקראים גם verbascoside, kusaginin, andorobanchin) [6-9] הם נציגים של ה-PhGs שנחקרו היטב ודווחו כבעלי מספר תכונות ביו-אקטיביות חשובות כגון פעולות נוגדות חמצון, הגנה עצבית, ניקוי רדיקלי תחמוצת חנקן, פעילויות אנטי-טוקסיות ואנטי-אוסטיאופורוטיות. [1–3, 10–14].

בעבר, דיווחנו על הזיהוי והמאפיינים הביולוגיים של מרכיבים מהגבעולים שלCistanche tubulosa(Schrenk) R. Wight (Orobanchaceae) [15-19], המרכיבים העיקריים הם 1 ו-2. גילינו ש-PhGs אלה הדגימו פעילות מרגיעה של כלי דם באבי העורקים מבודדים מבודדים שנכוו על ידי נוראדרנלין [15]. החלק העיקרי שלCistanche tubulosa(Kanka-nikujuyou ביפנית) שימש באופן מסורתי באזורים טיבטיים כדי לקדם את זרימת הדם [20, 21], וממצא זה מספק הוכחות מדעיות לשימוש המסורתי שלCistanche tubulosa.

מחקרים מתמשכים על המאפיינים הביו-אקטיביים של חומר הצמח הזה גילו ש-PhGs עיקריים אלו הם בעלי פעילות היפוגליקמית ומשפרים את סבילות הגלוקוז לעכברים טעוני עמילן. יתר על כן, חלק מה-PhGs בודדו מCistanche tubulosa(1-18) נמצאו בעלי פעילות מעכבת פוטנטלוז רדוקטאז.

אכינאקוסיידבCistanche tubulosa

תוצאות ודיון

בעבר [15], דיווחנו על הבידוד והמאפיינים הביולוגיים של מרכיבים של תמציות מתנול של גזעים יבשים מCistanche tubulosa, כולל 1, 2, isoacteoside (3), 20-acetylacteoside (4), tubuloside A (5) ו-B (9), ו-salidroside (18). Wiedemanninoside C (6), קנקנוזידים H1(7) ו-H2 (8) syringalide A 30-OaL-rhamnopyranoside(10), קנקנוסיד I (11), ציסטנטובולוסיד A (12), קמפנאוזיד I (13) וקנקנוזידים J1 (14), J2 (15), K1 (16) ו-K2 (17), בודדו בנוסף מהגבעולים הטריים של אותו חומר [16, 17] (איור 1).

ראשית, נבדקו ההשפעות של PhGs העיקריים (1 ו-2) על העלייה לאחר הארוחה ברמות הגלוקוז בדם בעכברים העמוסים בעמילן. הפעילות של 1 ו-2 במינונים של 250-500 מ"ג/ק"ג פו הייתה משמעותית (טבלה 1). בניסוי זה, מעכב a-glucosidase מעיים, acarbose, אשר שימש כביקורת חיובית, הראה עיכוב סביר (טבלה 1).

כדי לבחון את ההשפעות של 1 ו-2 על סבילות לגלוקוז, עליית רמת הגלוקוז בדם נבדקה בעכברים העמוסים בעמילן לאחר שבועיים של מתן רציף. במינונים של 125 ו/או 250 מ"ג/ק"ג ליום, הן 1 והן 2, שיפרו משמעותית את סבילות הגלוקוז (טבלה 2) מבלי לשנות באופן משמעותי את משקל הגוף או צריכת המזון (לא מוצגים נתונים). תוצאות אלו הצביעו על כך ש-1 ו-2 היו יעילים הן בעיכוב עליית גלוקוז לאחר ארוחה והן בשיפור סבילות לגלוקוז.

כדי לבחון את אופן הפעולה של פעילויות אנטי-היפרגליקמיות הללו, נבדקו ההשפעות של 1 ו-2 על a-glucosidases במעי הדק של חולדה, maltase ו-sucrase. במקביל, ההשפעות המעכבות של מרכיבים אחרים (3-18) מ-Cistanche tubulosaנבדקו גם נגד אנזימים אלה. זיהינו בעבר מלח סולפוניום סוכר דק, סלצינול (אחד ממעכבי הגלוקוזידאז החזקים ביותר המתרחשים באופן טבעי; IC50=6.0 ו-1.3 lM נגד מלטאז וסוכרוז, בהתאמה) [22-24], אשר הועסק גם כביקורת חיובית במחקר זה. 1 (IC50=149ו-174 lM) ו-2 (188 ו-152 lM) הראו פעילויות מעכבות אנזים דומות (טבלה 3). עם זאת, הפעילות שלהם הייתה פחותה בהרבה מאלה של הביקורות החיוביות, סלצינול ואקרבוז (IC50=6.0 ו-1.3, ו-1.7 ו-1.5 lM, בהתאמה). ראוי לציין שבין ה-PhGs המבודדים, 3 (IC50=70.4 ו-152 lM) ו-9(88.2 ו-175 lM), שיש להם חלק טרנס-קפאואיל במיקום 60-של הגלוקופירנוסיל הפנימי חלקם, מעוכב בינוני של מלטאז וסוקראז, בעוד שה-regioisomers 2 ו-4 שלהם ([300 lM), שיש להם את ה-caffeoylmoiety במיקום 40-, הראו פחות פעילות נגד אנזימים אלה.

אקטרוסידבCistanche tubulosa

הפעילות המעכבת של ה-PhGs נגד מלטאז של מעיים אנושי נבדקה גם ב-microsomalfraction. כתוצאה מכך, נמצאו 1 (IC50=125 lM), 2 (154 lM), 3(117 lM), 5 (63 lM), 9 (139 lM) ו-15 (168 lM) המציגים פעילות זו . עם זאת, תרכובות אלו היו הרבה פחות פעילות מאקרבוז (15.2 ליטר).

בעבר, זיהינו מספר פלבנואידים [25-31], סטילבנואידים [25, 32], נגזרות של חומצה כינית [30], וטרפנואידים [33] כמעכבי אלדוזה רדוקטאז חזקים. בעבודה זו, נבדקו גם ההשפעות המעכבות של ה-PhGs המבודדים (1-18) אלדוזה רדוקטאז של עדשת עכברים. ידוע כי אלדוזרדוקטאז הוא אנזים מפתח המזרז הפחתת גלוקוז לסורביטול במסלול עיבוד הפוליול. סורביטול אינו מתפזר בקלות על פני קרומי התא, והצטברות תוך תאית של סורביטול הייתה מעורבת בסיבוכים כרוניים של סוכרת כגון קטרקט [25].

ראשית, תמצית מתנול מגבעולים טריים שלCistanche tubulosaנמצא כמדגים פעילות מעכבת חזקה (IC{{0}}.8 lg/mL). בין ה-PhGs המבודדים, נצפתה פעילות מעכבת אלדוזה רדוקטאז של עכברוש עם 1 (IC50=3.1 lM), 2 (1.2 lM), 3 (4.6 lM), 4 (0).{{24 }}71 lM), 5 (8.8 lM), 9 (4.0 lM), 10 (1.1 lM), 13 (0.53 lM) ו-14 (9.3 lM) (טבלה 3). תרכובת 4, במיוחד, הראתה את הפעילות החזקה ביותר, שהייתה שווה ערך לזו של epalrestat (0.0072 lM), מעכב אלדוזה רדוקטאז בשימוש קליני.

לסיכום,echinacoside(1) ואקטאוזיד(2), PhGs העיקריים נובעים שלCistanche tubulosaנמצאו כמעכבים את העלייה ברמות הגלוקוז בדם לאחר הארוחה בעכברים העמוסים בעמילן במינונים של 250-500 מ"ג/ק"ג po. אלו שני PhGs גם עיכבו באופן משמעותי את עליית הגלוקוז בדם בעכברים העמוסים בעמילן לאחר שבועיים של מתן במינונים של 125 ו/או 250 מ"ג/ק"ג/יום po, מבלי לייצר שינויים משמעותיים במשקל הגוף או בצריכת המזון. תוצאות אלו הצביעו על כך ש-1 ו-2 היו יעילים לא רק בעיכוב עליית גלוקוז לאחר ארוחה אלא גם בשיפור סבילות לגלוקוז. עם זאת, פעילות מעכבת ה-a-glucosidase שלהם לא הייתה ראויה לתשומת לב. לפיכך, עיכוב של a-glucosidase בקושי תרם לפעילות האנטי-היפרגליקמית שלהם. יש ללמוד עוד יותר את מודל הפעולה המפורט. בין ה-PhGs המבודדים, 1-3, 5, 9 ו-15 עיכוב בינוני של עכברוש ו-אנושי a-glucosidases מעיים. בניגוד לעיכוב מתון זה, PhGs 1-5, 9, 10, 13 ו-14 עיכבו ביעילות אלדוזה רדוקטאז של עדשת חולדה. בפרט, הפעילות של תרכובת 4 הייתה בסדר גודל דומה לזו של אפאלסטאט, מעכב בשימוש קליני.

שיטה נסיונית

חומר צמחי

גבעולים שלCistanche tubulosaשטופחו ב-Urumqi, מחוז שינג'יאנג, סין נאספו בספטמבר 2007. חומר הצמח זוהה על ידי אחד המחברים (X. Jia, נשיא מכון שינג'יאנג למטריה רפואית סינית ו-Ethodrug). דגימת שובר של צמח זה רשומה בקובץ שלנו מַעבָּדָה.

חיות

עכברי ddY זכרים (6 או 10 שבועות) נרכשו מ- KiwaLaboratory Animal Co., Ltd., Wakayama, יפן. החיות אוכסנו בטמפרטורה קבועה של 23 ± 2 מעלות ולאחר מכן הוזנו במאכל מעבדתי סטנדרטי (MF;Oriental Yeast Co., Ltd., טוקיו, יפן). החיות צמו במשך 20-24 שעות לפני תחילת הניסוי, אך ניתנה להם גישה חופשית למי ברז. כל הניסויים בוצעו עם עכברים בהכרה אלא אם צוין אחרת. פרוטוקול הניסוי אושר על ידי הוועדה לחקר בעלי חיים ניסויים באוניברסיטת Kinki.

השפעות מעכבות של 1 ו-2 על רמות הגלוקוז בדם בעכברים העמוסים בעמילן

תערובת של כל דגימת בדיקה ועמילן a (1 גרם/ק"ג) מורחבת בתמיסת שיטה של ​​5 אחוז (w/v) (20 מ"ל/ק"ג) ניתנה דרך הפה לעכברים בצום (6 ו'). דגימות דם (בערך 0.1 מ"ל) נאספו מה-infraorbital venousplexus בהרדמת אתר 0.5, 1 ו-2 שעות לאחר מתן דרך הפה. הדם שנאסף ערבב מיד עם נתרן הפרין (5 יחידות/שפופרת). לאחר צנטריפוגה של דגימות הדם, רמת הגלוקוז בפלזמה נקבעה אנזימטית על ידי בדיקת גלוקוז CII Wako (Wako Pure Chemical Industries Ltd., אוסקה, יפן). מעכב a-glucosidase acarbose במעיים שימש כתרכובת אפרפרנס.

השפעות שיפור של סבילות לגלוקוז לאחר מתן 2 שבועות של 1 ו-2 בעכברים העמוסים בעמילן

כל דגימת בדיקה ניתנה פעם ביום (10:00-12:00) במשך שבועיים לעכברים בני שבוע 10-האכלו מאכל מעבדתי סטנדרטי (MF; Oriental Yeast בע"מ.). משקל הגוף נמדד כל יום לפני מתן דגימת הבדיקה. לאחר צום במשך 20 שעות, תמיסת עמילן (1 גרם/ק"ג) ניתנה דרך הפה לעכברים ב-20 מ"ל/ק"ג. באותו הליך, נאספו דגימות דם (כ-0.1 מ"ל) ורמות הגלוקוז בפלזמה נקבעו כפי שתוארו מֵעַל.

השפעות מעכבות על a-glucosidases של מעי חולדה

הניסויים בוצעו לפי השיטה המתוארת בדוחות הקודמים שלנו עם שינוי קל [23, 24]. לפיכך, הוכנו שלפוחיות גבול של מברשת המעי הדק של חולדה והתרחפים שלהן במאגר 0.1 Mmaleate (pH 6.0) שימשו כגלוקוזידאזות במעי הדק של מלטאז וסוקראז. דגימת בדיקה הומסה בדימתיל סולפוקסיד (DMSO), והתמיסה שהתקבלה דוללה ב-0.1 M חיץ מלאט להכנת תמיסת דגימת הבדיקה (ריכוז של DMSO 10 אחוז). תמיסת סובסטרט במאגר המלטוז (מלטוז 74 מ"מ, סוכרוז 74 מ"מ, 50 מ"ל), תמיסת דגימת הבדיקה (25 ליטר), ותמיסת האנזים (25 ליטר) ערבבו ב-37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות, ולאחר מכן חוממו מיד על ידי רתיחה מים למשך 2 דקות כדי לעצור את התגובה. ריכוזי הגלוקוז נקבעו בשיטת גלוקוז אוקסידאז. הריכוז הסופי של DMSO בתמיסת הבדיקה היה 2.5 אחוז ולא זוהתה השפעה של DMSO על הפעילות המעכבת. מעכבי a-glucosidase המעיים acarbose ו-salacinol שימשו כתרכובות ייחוס.

השפעות מעכבות על מלטאז מעיים אנושי

מיקרוזום של מעי דק אנושי (אצווה MIC318017, נרכש מ-BIOPREDIC International, Rennes, France) ב-0.1 M maleate buffer (pH 6.0) שימש לקביעת פעילות a-glucosidase של המעי הדק של maltase . באמצעות הליך דומה, נמדדה ההשפעה של פעילות מעכבת מלטאזין כמתואר לעיל.

השפעות מעכבות על אלדוזה רדוקטאז עדשת חולדה

הניסויים בוצעו לפי השיטה המתוארת בדוחות הקודמים שלנו [25-33] עם שינויים קלים. לפיכך, הנוזל הסופרנטנט של הומוגנט של עדשות חולדה שימש כאנזים גולמי. ההשעיה האנזימית דוללה כדי לייצר כ-2 ננומול/באר של nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADP) בתגובה הבאה. תערובת הדגירה הכילה חיץ פוספט 135 mM (pH 7.0), Li2SO4100 mM, ניקוטינמיד מופחת אדנין דינוקלאוטידפוספט (NADPH) 0.03 mM, DL-glyceraldehyde 1 mMas substraat 20 ליטר של חלק אנזים, עם דגימת בדיקה, בנפח כולל של 100 ליטר. התגובה התחילה על ידי הוספת NADPH ב-30 מעלות צלזיוס. לאחר 30 דקות, התגובה הופסקה על ידי הוספה של 30 ליטר HCl0.5 M. לאחר מכן, נוספו 100 ליטר NaOH 6 M המכילים imidazole10 mM, והתמיסה נוספה מחומם ב-60 C למשך 20 דקות כדי להמיר NADP למוצר ניאון. הקרינה נמדדה באמצעות קורא מיקרו-צלחות פלואורסצנטי (SH-9000, CORONA) באורך גל עירור של 360 ננומטר ואורך גל פליטה של ​​460 ננומטר. כל דגימה הומס ב-DMSO. המדידות בוצעו בכפולות, וערכי IC50 נקבעו בצורה גרפית. epalrestat מעכב אלדוזה רדוקטאז שימש כתרכובת ייחוס.

סטָטִיסטִיקָה

הערכים הובאו כממוצע ± SEM. לצורך ניתוח סטטיסטי, נעשה שימוש בניתוח חד-כיווני של שונות ואחריו המבחן של דאנט. תודות עבודה זו נתמכה בחלקה על ידי Grant-in-Aid for Scientific Research מאת Japan Society for the Promotion of Science (JSPS) KAKENHI a Grant Number 24590153 ו האיגוד הרפואי יפן-סין על התמיכה הכספית

מתוך: 'גליקוזידים פנילתנואידים אצילים,echinacoside, ואקטאוזידמCistanche tubulosaלשפר את סבילות הגלוקוז בעכברים' מאת Toshio Morikawa, et al

---J Nat Med (2014) 68:561–566 DOI 10.1007/s11418-014-0837-9

הפניות

1. Jime'nez C, Riguera R (1994) פנילתנואידים גליקוזידים בצמחים: מבנה ופעילות ביולוגית. Nat Prod Rep 11:591–606

2. Fu G, Pang H, Wong YH (2008) phenylethanoid גליקוזידים המתרחשים באופן טבעי: מוביל פוטנציאלי לטיפולים חדשים. Curr Med Chem 15:2592–2613
3. He J, Hu XP, Zeng Y, Li Y, Wu HQ, Qiu RZ, Ma WJ, Li T, Li CY, He ZD (2011) מחקר מתקדם בנושאאקטאוזידלכימיה וביו-אקטיביות. J Asian Nat Prod Res 13:449–464
4. Stoll A, Renz J, Brack A (1950) Isolierung und konstitution des echinacosids, eines glykosids aus den wurzeln von Echinacea angustifolia DC 6. mitteilung u¨ber antibakterielle stoffe. Helv Chim Acta 33:1877–1893
5. Becker H, Hsieh WC, Wylde R, Laffite C, Andary C (1982) Structure ofechinacoside. Z Naturforsch C: Biosci 37C:351–353
6. Scarpati ML, Dell MF (1963) בידוד מ-Verbascum sinuatum של שני גלוקוזידים חדשים, verbascoside ו- isoverbascoside. אן צ'ים 53:356–367
7. Birkofer L, Kaiser C, Thomas U (1968) Sugar esters. IV.אקטאוזידוניאואקטאוזיד, אסטרים של סוכר מ-Syringa vulgaris. Z Naturforsch, B: Chem Sci 23:1051–1058

8. Andary C, Wylde R, Laffite C, Privat G, Winternitz F (1982) Structures of varbascoside ו-orobanchoside, אסטרים של סוכר חומצה קפאית מ- Orobanche rapum-genistae. פיטוכימיה 21:1123–1127
9. Sakurai A, Kato T (1983) גליקוזיד חדש, קוסאגינין מבודד מ- Clerodendron trichotomum. Bull Chem Soc Jpn 56:1573–1574
10. Lee KJ, Woo ER, Choi CY, Shin DW, Lee DG, You HJ, Jeong HG (2004) אפקט מגן שלאקטאוזידעל רעילות כבד הנגרמת על ידי פחמן טטרכלוריד. Life Sci 74:1051–1064
11. Jia C, Shi H, Jin W, Zhang K, Jiang Y, Zhao M, Tu P (2009) Metabolism ofechinacoside, נוגד חמצון טוב, בחולדות: בידוד וזיהוי של מטבוליטים המרה שלו. Drug Metab Dispos 37:431–438
12. Jia Y, Guan Q, Guo Y, Du C (2012)אכינאקוסיידמגרה שגשוג תאים ומונעת אפופטוזיס של תאים בתאי MODE-K אפיתל במעי על ידי ויסות-על של ביטוי גורם גדילה משתנה. J Pharmacol Sci 118:99–108
13. Li F, Yang Y, Zhu P, Chen W, Qi D, Shi X, Zhang C, Yang Z, Li P 2012)אכינאקוסיידמקדם התחדשות עצם על ידי הגדלת יחס OPG/RANKL בתאי MC3T3-E1. Fitoterapia 83:1443–1450
14. Li F, Yang X, Yang Y, Guo C, Zhang C, Yang Z, Li P (2013) פעילות אנטי-אוסטיאופורטית שלechinacosideבחולדות שעברו ניתוח שחלות. Phytomedicine 20:549–557
15. Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S, Muraoka O (2006).Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem 14:7468–7475
16. Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Matsuda H, Yoshikawa M, Yuan D, Muraoka O (2010) אמינוגליקוזידים פנילתנואידים Acylated עם פעילות הגנה על הכבד מצמח המדברCistanche tubulosa. Bioorg Med Chem 18:1882–1890
17. Pan Y, Morikawa T, Ninomiya K, Imura K, Yuan D, Yoshikawa M, Muraoka O (2010) מרכיבים ביו-אקטיביים מתרופות טבעיות סיניות. XXXVI. ארבעה אוליגוגליקוזידים פניליתנואידים חדשים, קנקנוזידים J1, J2, K1 ו-K2, מגבעולים שלCistanche tubulosa. Chem Pharm Bull 58:575–578
18. Xie H, Morikawa T, Matsuda H, Nakamura S, Muraoka O, Yoshikawa M (2006) מרכיבי מונוטרפן מCistanche tubulosa: מבנים כימיים של קנקנוזידים AE וקנקנול. Chem Pharm Bull 54:669–675
19. Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Yuan D, Yoshikawa M, Hayakawa T, Muraoka O (2010) Iridoid and acyclic monoterpene glycosides, kankanosides L, M, N, O, and P fromCistanche tubulosa. Chem Pharm Bull 58:1403–1407
20. Kobayashi H, Oguchi H, Takizawa N, Miyase T, Ueno A, Usmanghani K, Ahmad M (1987) New phenylethanoid glycosides fromCistanche tubulosa(שרנק) הוק. ו. I. Chem Pharm Bull 35:3309–3314
21. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH (2009) The hypocholesterolemic effects ofCistanche tubulosaתמצית, תרופה סינית מסורתית גסה, בעכברים. Am J Chin Med 37:1125–1138
22. Yoshikawa M, Morikwa T, Matsuda H, Tanabe G, Muraoka O (2002) מבנה סטריאו מוחלט של מעכב a-glucosidase חזק, salacinol, עם מבנה מלח פנימי של סוכר סולפוניום סולפט מ-Salacia reticulata. Bioorg Med Chem 10:1547–1554
23. Muraoka O, Morikawa T, Miyake S, Akaki J, Ninomiya K, Yoshikawa M (2010) קביעה כמותית של מעכבי a-glucosidase חזקים, salacinol ו-kotalanol, במינים של Salasia באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית-ספקטרומטריית מסה. J Pharm Biomed Anal 52:770–773
24. Muraoka O, Morikawa T, Miyake S, Akaki J, Ninomiya K, Pongpiriyadacha Y, Yoshikawa M (2011) ניתוח כמותי של neosalacinol and neokotalanol, עוד שני מעכבי a-glucosidase חזקים ממינים Salacia, על ידי LC-MS עם יון- כרומטוגרפיה זוגית. J Nat Med 65:142–148
25. Matsuda H, Morikawa T, Toguchida I, Yoshikawa M (2002) דרישות מבניות של פלבנואידים ותרכובות קשורות לפעילות מעכבת אלדוזה רדוקטאז. Chem Pharm Bull 50:788–795
26. Yoshikawa M, Morikawa T, Murakami T, Toguchida I, Harima S, Matsuda H (1999) Medicinal flowers. מעכבי אלדוזה רדוקטאז ושלושה ססקוויטרפנים חדשים מסוג eudesmane, kikkanols A, B ו-C, מפרחי Chrysanthemum Indicum L. Chem Pharm Bull 47:340–345
27. Matsuda H, Morikawa T, Toguchida I, Harima S, Yoshikawa M (2002) Medicinal flowers. VI. מבנים סטריאו מוחלטים של שני גלוקוזידים פלבנון חדשים וגליקוזיד פנילתנואיד מפרחי חרצית אינדיקום ל.: פעילותם המעכבת עבור אלדוזה רדוקטאז של עדשת חולדה. Chem Pharm Bull 50:972–975
28. Yoshikawa M, Murakami T, Ishiwada T, Morikawa T, Kagawa M, Higashi Y, Matsuda H. J Nat Prod 65:1151–1155
29. Matsuda H, Morikawa T, Yoshikawa M (2002) מרכיבים אנטי-סוכרתיים ממספר תרופות טבעיות. Pure Appl Chem 74:1301–1308
30. Xie H, Wang T, Matsuda H, Morikawa T, Yoshikawa M, Tani T (2005) מרכיבים ביו-אקטיביים מתרופות טבעיות סיניות. XV. השפעה מעכבת על אלדוזה רדוקטאז ומבנים של saussureosides A ו-B מ- Saussurea medusa. Chem Pharm Bull 53:1416–1422
31. Morikawa T, Xie H, Wang T, Matsuda H, Yoshikawa M (2008) מרכיבים ביו-אקטיביים מתרופות טבעיות סיניות. XXXII. Aminopeptidase N ומעכבי אלדוזה רדוקטאז מ-Sinocrassula indica: מבנים של סינוקראסוסידים B4, B5, C1 ו-D1-D3. Chem Pharm Bull 56:1438–1444
32. Morikawa T, Chaipech S, Matsuda H, Hamao M, Umeda Y, Sato H, Tamura H, Kon'i H, Ninomiya K, Yoshikawa M, Pongpiriyadacha Y, Hayakawa T, Muraoka O (2012) Antidiabetogenic oligostilbenoids and {{ 2}}אתיל-4-פניל-3,4-דיהידרואיזוקומרינים מקליפת ה- Shorea roxburghii. Bioorg Med Chem 20:832–840
33. Morikawa T, Kishi A, Pongiriyadacha Y, Matusda H, Yoshikawa M (2003) מבנים של טריטרפנים חדשים מסוג פרידלאן ו-eudesmane-type sesquiterpene ואלדוזה רדוקטאז מעכבי Salacia Chiensis. J Nat Prod 66:1191–1196