הנתיב להתקדמות במחקרים פרה-קליניים של מחלות ניווניות הקשורות לגיל: פרספקטיבה על מודלים של מכרסמים ו-HIPSC חלק 6

דוגמנות הזדקנות "במנה"

השראת חתימות תאים מורפולוגיות ופונקציונליות הקשורות לגיל. בעוד שמודלים של הפרעות נוירו-התפתחותיות (כגון ניוון שרירי עמוד השדרה, דלקת מוח ראשונית של הרפס סימפלקס) עם hiPSC הצליח, הרבה יותר קשה לשחזר במדויק פנוטיפים של מחלות של מחלות NDD הקשורות לגיל, כגון AD ו-PD.

דלקת המוח היא מחלה שכיחה הפוגעת במוח האנושי ואף עלולה להוביל למוות במקרים חמורים. לדלקת המוח יכולות להיות השפעות שליליות ביותר על מערכות רבות בגוף האדם, כגון מערכת העצבים ומערכת הנשימה. עם זאת, ההשפעה על הזיכרון היא דו-כיוונית.

דלקת המוח יכולה להשפיע על הזיכרון של גוף האדם. חלק מהחולים מאבדים הרבה זיכרון כשהמצב חמור. הסיבה לכך היא שדלקת המוח גורמת לנזק למוח האנושי, וכתוצאה מכך לבעיות בשידור ובקליטה של ​​אותות. זה עלול לגרום לבעיות זיכרון לטווח קצר ולטווח ארוך, התלויות במידת הנזק המוחי.

עם זאת, במהלך הטיפול בדלקת המוח, הזיכרון של גוף האדם יתאושש לאט. הסיבה לכך היא שבמהלך תהליך הטיפול, הרופאים יספקו למטופלים כמה תרופות מיוחדות כדי לשחזר בהדרגה את בריאותם של תאי העצב, ובכך לשפר את הזיכרון של גוף האדם.

זו גם תזכורת שלחלק מהאנשים הנוטים לדלקת המוח, חשוב מאוד גם להרפות ולחזק את מערכת החיסון, מה שיכול לעזור להם להתרחק מהסכנה של דלקת המוח. לדוגמה, השתתפו בפעילויות בריאות יותר, הימנעו מלהישאר ערים זמן רב ולאכול מזונות מזינים יותר.

בקיצור, למרות שדלקת המוח תשפיע על הזיכרון של גוף האדם, השפעה זו תוקל ככל שהטיפול יתקדם. התמודדות נכונה עם המחלה, שמירה על אורח חיים בריא וטיפול פעיל בה יכולים לגרום לנו לחיות חיים חיוביים יותר, לתת לנו להוקיר את החיים יותר ולבלות כל יום בשמחה. ניתן לראות שעלינו לשפר את הזיכרון. Cistanche יכול לשפר משמעותית את הזיכרון מכיוון שהוא יכול גם לווסת את איזון הנוירוטרנסמיטרים, כמו הגדלת רמות האצטילכולין וגורמי גדילה, החשובים מאוד לזיכרון וללמידה. בנוסף, Cistanche יכול גם לשפר את זרימת הדם ולקדם אספקת חמצן, מה שיכול להבטיח שהמוח יקבל מספיק תזונה ואנרגיה, ובכך לשפר את החיוניות והסיבולת של המוח.

לחץ על יודע תוספי מזון כדי להגביר את הזיכרון

תכנות מחדש של תאים סומטיים ליצירת hiPSCs מוחק את חתימות הגיל המולקולרי של תאי התורם ומחזיר אותם לשלבי התפתחות עובריים. 2,219,220 ככזה, התחום הגה מגוון אסטרטגיות המצאתיות להאצת הזדקנות ו/או התבגרות תאי כאמצעי להתגברות מגבלה זו, כולל ביטוי יתר חוץ רחמי של חלבונים הקשורים להזדקנות, כגון פרוגרין, 221 שגרם לקיצור מלאכותי של טלומרים, 222 וחשיפה לרעלים שונים הגורמים להפרעה בתפקוד המיטוכונדריאלי וללחץ חמצוני. מעבר מרובה של ה-NPCs כדי לחקות את תהליכי ההזדקנות הטבעיים.

אסטרטגיה זו מהווה אלטרנטיבה אטרקטיבית בהשוואה לשיטות קודמות שתוארו לעיל, שכן היא מפחיתה את הפנוטיפים המלאכותיים הפוטנציאליים, תוצאה של חשיפה לרעלנים או ביטוי חוץ רחמי, והיא מבוססת על תהליך טבעי יותר לגרימת הזדקנות במודלים תאיים של NDDs."המרה ישירה" של תאים סומטיים למודלים נוירונים.

לחלופין, פותחו שיטות הידועות כ"שושלת/המרה ישירה" או "דיפרנציאציה טרנספרנציונלית" כדי לשמור על גיל התורם ולשמור על החתימות המולקולריות "המיושנות".

גישה זו מבוססת על תכנות מחדש ישיר של תאים סומטיים אנושיים, כגון פיברובלסטים, לנוירונים באמצעות אספקת גורמי שעתוק שונים ספציפיים לשושלת תאים ללא שלב ביניים של דה-דיפרנציאציה ל-hiPSCs. 225-227. נוירונים (iNs) ישירות מפיברובלסטים עובריים של עכברים228 ואסטרוציטים אנושיים229 כאמצעי לייצור מערכת מודל מתאימה יותר לחקר ניוון עצבי אנושי הקשור לגיל.

אכן, שיטות אלו מאפשרות שימור של השפעות ההזדקנות על הגנום. בסופו של דבר, יש לשקול קווים מנחים לטיפול במגבלות הביולוגיות והטכניות הקשורות לעבודת hiPSC, במיוחד הבדלים בין תורמי hiPSC, אימות של טוהר התרבות הנגזרת ויציבות גנטית. כדי לשלוט על השונות במודלים שמקורם ב-hiPSC ולהבטיח תוצאות חזקות ושיחזור ברמה גבוהה.

כיוונים עתידיים ביישומי hiPSC בהקשר של NDDs רפואה מותאמת וסקר תרופות

AD ו-PD מפגינים שונות והטרוגניות גבוהה בסימפטומים; לפיכך, פתולוגיות אלו עשויות לייצג כל אחת קבוצה של תת-סוגים של מחלות, 230,231 מהווה שיקול קריטי בתכנון ניסויים קליניים בעת התקדמות DMT משוער דרך צינור פיתוח התרופות.

Kondo et al.232 הראו ש-hiPSCs שמקורם בחולי fAD ו-sAD הפגינו היענות תרופתית שונה לטיפול בחומצה דוקוסהקסאנואית (DHA), תרופה שנכשלה בעבר בניסויים קליניים של AD.

נתונים אלה מעידים על תת-סוגים שונים של AD בעלי תגובות קליניות שונות לטיפול. לפיכך, יש צורך לרבד את משתתפי המחקר כדי להשיג תועלת בניסויים קליניים, מה שמרמז על כך שמספר טיפולים שנכשלו בניסויים קליניים עשויים עדיין להיות בעלי פוטנציאל להיות יעילים בתת-סוגים מוגדרים מסוימים של AD.

השיפור של המודלים הפרה-קליניים הנוכחיים יקל על הערכה מדויקת של תרופות קיימות וחדשות על ידי הגדרת מדדי תוצאות טובים יותר ו/או אוכלוסיות חולים מתאימות.

Kondo et al.232 הדגימו עוד את התועלת של מודלים AD-נגזרים מ-hiPSC להקרנה בתפוקה גבוהה של פאנל של תרכובות טיפוליות משוערות תוך שימוש בפנוטיפים של מחלה שנקבעו בעבר כמדדי תוצאה, כלומר, היכולת להפחית את היחס Ab42:Ab40 בנוירונים שמקורם ב-13 קווי hiPSC לחולי AD.

שש תרכובות עופרת הצליחו להפחית באופן משמעותי את Ab42:Ab40 עצבי; עם זאת, אחת התרכובות המכילה "קוקטייל" של קרומולין, טופירמט וברומוקריפטין רק הצילה מחלה זו פנוטיפין נוירונים hiPSC שמקורם בחולי FAD.232 רגישות גנטית של המטופל לגורמים סביבתיים שונים נחקרה גם במודלים של PD שמקורם ב-hiPSC, אשר הייתה הפוך עם GT,174,233 מתן אימות הוכחה למושג לגישה אישית להתערבות טיפולית.

בסך הכל, פיתוח נוסף של טכנולוגיית hiPSC עשוי בסופו של דבר לאפשר לחוקרים לרבד חולים על סמך רקע גנטי ספציפי של גורמי סיכון כדי להעריך את התגובות השונות של תת-אוכלוסיות גנטיות לטיפול.

גישות רגנרטיביות לניוון עצבי

היכולת של נוירונים במוח להתחדש בתגובה לפציעה היא מינימלית; עם נוירוגנזה של מבוגרים מוגבלת לכמה אזורי מוח נבחרים ובמחלות המאופיינות בניוון עצבי כרוני, כגון AD ו-PD, הליקויים הקוגניטיביים וההתנהגותיים הנובעים מכך הם בלתי הפיכים.

הדרכים המרגשות ביותר שצצות מתוך טכנולוגיית hiPSC הן אסטרטגיות הנדסת רקמות שמטרתן לחדש רקמות עצביות שאבדו באמצעות השתלת hiPSCs.

אסטרטגיות טיפוליות מהפכניות אלו ממנפות את היכולת של hiPSC להתמיינות למספר תת-סיווגים של תאי עצב ותאי גליה. בעוד שהרעיון של השתלה של hiPSCs כדי לעורר התחדשות רקמות נמצא עדיין בשלב מוקדם, זהו תחום מתפתח במהירות, ועדויות אחרונות הוכיחו שהשתלה של HiPSCand ESCs יכול להיות מועיל עבור מחלות מרובות, כולל ניוון מקולרי הקשור לגיל234,235 ופציעה בחוט השדרה.236

עם יותר רלוונטיות כאן, ניסוי קליני שנערך לאחרונה על ידי Song וחב',237, שכלל השתלת נוירונים מסוג DA עצמיים שמקורם ב-hiPSC בחולי PD, שיחזר למעשה ליקויים מוטוריים בפעם הראשונה. מחקר פורץ דרך זה מספק הוכחה לקונספט שטכניקות השתלה מבוססות hiPSC כאלה מספקות את הפלטפורמה המושלמת לטיפול רגנרטיבי מוצלח במחלות NDD.

עם זאת, חשוב להכיר בכך שהשתלת HiPSC מלווה באתגרים שונים, לרבות הסיכון לגידולים ודחיית שתל על ידי המטופל.238,239 כדי למתן את המכשול הזה, מפותחות כיום מגוון אסטרטגיות התחמקות חיסוניות להתגברות על דחייה חיסונית.24140.

בשילוב עם תכונות ההתחדשות העצמית שלהם, ל-hiPSCs יש הרבה תכונות רצויות ביותר עבור רפואה רגנרטיבית מותאמת אישית והופכים את האדם למועמד אידיאלי לטיפולים מבוססי-התחדשות בהפרעות במערכת העצבים המרכזית.242–245 השתלת hiPSCs פותחת אסטרטגיות טיפוליות לטיפול לא רק בהחלמה של רקמות אבודות. אלא גם הצורך ב-DMT באמצעות תאים מתוקנים גנטית.

ה-hiPSCs, שמקורם בחולים, יכולים לעבור טיפול משנה גנים במבחנה, למשל באמצעות טכנולוגיית CRISPR-Cas9, לתיקון ממוקד של הגן שעבר מוטציה.

לאחר מכן, ניתן היה להחליף את התאים המתוקנים גנטית בחולה הקליני. מבנים כאלה שמשנים את ה-DNA יישארו באופן אידיאלי אפיזומלי ויושבתו מעצמם עד שהרקמה הושתלה למטופל כדי להפחית את ההסתברות להשפעות מחוץ למטרה.

מפת דרכים להגשת מוצרי חקירה חדשים (IPs) לטיפול ב-PD ו-AD

סקירה כללית של צינור הפיתוח הנוכחי עבור כתובות IP

המחקרים הפרה-קליניים לטיפולים חדשים ב-PD ו-AD הם חשובים בצנרת הפיתוח של IPs. המטרות של תוכנית פרה-קלינית מקיפה לטיפול סלולרי ו-GT IPs (CGTIPs) כוללות את הדברים הבאים: (1) ביסוס סבירות ביולוגית (בחירת יעד); (2) זיהוי רמות מינון פעילות ביולוגית (פיתוח ואופטימיזציה של תרכובות עופרת); (3) בחירת רמת מינון התחלתי פוטנציאלית, לוח זמנים להסלמה במינון ומשטר המינון לניסויים קליניים; ו-(4) ביסוס היתכנות ובטיחות סבירה של דרך ניהול קלינית המוצעת על ידי CGT-IP (ROA).

שלבים אלה חיוניים בהכנת המוצרים עבור בקשת חקירה חדשה (IND) והגשת בקשה לרישיון ביולוגי (BLA). (1) מעורבות ויעילות עם יעדים נמוכים ו-(4) פרופיל בטיחות לא מספק הם בין הסיבות השכיחות ביותר לכשלים של ה-CGT-IPs לטיפול ב-PD ו-AD (איור 2).

יתרה מזאת, סקירה רטרוספקטיבית עדכנית של עיכוב או דחיית אישור של גופים רפואיים חדשים על ידי ה-FDA בין השנים 2000 ו-2012 מצביעה על כך שניסוח לא מקיף של יעילות היעד וקביעת פרופיל בטיחות התרופה מייצגים גורמים עיקריים העומדים בבסיס הכישלון של תוכניות לפיתוח תרופות עבור NDDs. כולל AD ו-PD.246

מחקר זה גם הודיע ​​לחשש כי ניתן לתרגם נמוך למדי במעבר ממחקרים פרה-קליניים מבוססי בעלי חיים לניסויים קליניים בבני אדם. חשוב לציין שה-FDA מודע היטב לחסרונות הללו. ה-FDA יצר לאחרונה הנחיות הממליצות למזער את השימוש בבעלי חיים עבור אימות IP. לדוגמה, בהקשר של תאימות נמוכה למין ספציפי של המוצר הקליני, ה-FDA מתיר בדיקה של מערכות אימות חלופיות עם מאפיינים אנלוגיים ומתאימים.

הופעת ה-hiPSCs שמקורם ב-AD ו-PD והפלטפורמות הקשורות המתוארות בסקירה זו עשויות לספק מערכת ניסויית חלופית כזו לפיתוח CGT-IPs משוער. בהתאם להמלצות אלו, ביצוע מחקרים חוץ גופיים המכסים קביעת בטיחות, אופטימיזציה של מינון, מבחני פונקציונליות. , אימונופנוטייפ, הערכה מורפולוגית, נתוני טוקסיקולוגיה מוקדמים, פרמקוקינטיקה ופרמקודינמיקה של ה-IP עשויים לספק את דרישת ה-FDA לקביעת הרלוונטיות הביולוגית של המוצר.

יתר על כן, עם השימוש במחקרים חוץ גופיים, hiPSCs יהיו מועילים בעיקר לזיהוי בעיות בטיחות אפשריות ומנגנון פעולה (MOA) של CGT-IPs מחקריים. שיקולים אלה תואמים היטב את הנחיות ה-FDA הממליצות לשלב את העקרונות של "3Rs", לטיפוח פרוטוקולי שיטות בדיקה המעודדים צמצום, חידוד והחלפה של שימוש בבעלי חיים, כהמשך להוראות החלות של חוק רווחת בעלי חיים לתיקונים של 1976 (7 USC2131 ואילך).

הרעיון של החלפת מצבי בעלי חיים תומך בתועלת של תוכניות מודלים חוץ גופיים של AD ו-PD. יש לשקול את התאמתם של מאמצים אלה בצורה רחבה יותר עם הערכת "אפקט ההסטה מחדש", אם בכלל, על היכולת של תוכנית הבדיקות הפרה-קליניות לספק נתונים נחוצים לגבי הבטיחות והפעילות של המוצר CGT-IP.

הדיון לעיל מציע את האפשרות ליצור פורטפוליו מוקדם של התוכנית הטיפולית להתקדמות IND תוך שימוש בעיקר בבדיקות ותיקוף במבחנה, במיוחד בהקשר של בדיקות פרה-קליניות, כמו גם נקודת ביקורת לניסוי קליני שלב 1a (איור 2). יתר על כן, ניתוחים מתקדמים, לרבות הערכות בטיחות והרעילות מגבילות מינון, עשויים להסתמך, לפחות חלקית, על מדידות חוץ גופיות.

נתוני בטיחות, פרמקוקינטית, פרמקודינמית, סבילות וסמנים ביולוגיים, הרלוונטיים לקלינית, יודיעו לאחר מכן על החלטות קליניות שלאחר מכן לגבי כתובות IP חדשות. לפיכך, יש לשקול ביצוע מחקרים הכרחיים בבעלי חיים על מנת לטפל בכל הבעיות הקיימות רק לאחר שפיתוח מוצר CGT-IP מתקדם למחקר פרה-קליני בשלב מאוחר יותר.

לדוגמה, אם מתרחשים שינויים בייצור/פורמולציה, כך שההשוואה של מוצר ה-CGT בשלב מאוחר יותר למוצר המשמש בשלב המוקדם (נבדק במבחנה), ייתכן שיהיה צורך במחקרים נוספים in vivopreclinical כדי לגשר בין שני המוצרים. מחקרי גישור כאלה מאפשרים לנתונים שנאספים עם המוצר בשלב מוקדם לתמוך בפיתוח בשלב מאוחר יותר או ברישיון.

ככזה, אנו מציעים שלפני תחילת המחקרים הפרה-קליניים המובהקים בסביבה של בעלי חיים, יש לבצע מחקרים חוץ גופיים לזיהוי בעיות בטיחות אפשריות ו-MOA של מוצר CGT-IP מחקרית (איור 2).

עם זאת, אנו מציעים להשלים את המחקרים במבחנה עם הערכות של סוללת פנוטיפים פיזיולוגיים ותפקודיים של המוצר לאחר מתן in vivo. ההערכות יבחנו באופן ספציפי את השיפור של פנוטיפים סטנדרטיים של מחלות שנקבעו במודלים של מחלות מבוססי-hiPSC, כפי שהוכח קודם לכן.140,174,193,233

בהתאם לכך, תוכנית הבדיקות הפרה-קליניות צריכה לשלב גישה נקודתית ורב-פקטוריאלית כדי להשיג הבנה של הסבירות הביולוגית של השימוש בתוצר CGT הנבדק באוכלוסיות חולי AD ו-PD המיועדות. כדי לנתח את תהליך הסמכת מוצר GT להגשת IND, אנו ממליצים לפנות ל-FDA בשלבים המוקדמים ביותר של פיתוח המוצר, באמצעות מנגנון טרום-קדם-IND, שהוא דיון בלתי מחייב ובלתי רשמי בין סוקרים מהפרמקולוגיה/טוקסיקולוגיה סניף הארגון והחוקר.

העצות שניתנו על ידי המרכז להערכה ומחקר ביולוגיים (CBER)/המשרד לטיפולי סלולר, רקמות וגנים (OCTGT) יהיו חשובות ביותר לשקול בעת הכנת פרוטוקולים סופיים למחקרים פרה-קליניים מוגדרים, כמו גם בהכנת חלקים שונים במסמך התדריך עבור פגישה לפני IND.

מיני בעלי החיים שנבחרו להערכת פעילות ביולוגית ובטיחות צריכים להפגין תגובה ביולוגית למוצר ה-CGT הנבדק, בדומה לזה הצפוי בבני אדם, כדי להפיק נתונים להנחות תכנון ניסויים קליניים.

השיקולים לקביעת המינים הרלוונטיים כוללים את הדברים הבאים: (1) השוואה של פיזיולוגיה ואנטומיה לזו של בני אדם; (2) מתירנות/רגישות לזיהום על ידי, שכפול מחדש של וקטורים ויראליים או וקטורים מיקרוביאליים עבור GT; (3) סבילות חיסונית למוצר CGT אנושי או טרנסגן אנושי המתבטא על ידי מוצר GT; ו-(4) כדאיות השימוש במערכת/הליך הלידה הקליני המתוכנן.

הערות חותכות

המרדף אחר DMTs יעיל מבחינה קלינית עבור NDDs הקשורים לגיל, כגון AD ו-PD, נתקל בכשל משמעותי, למרות למעלה מ-40 שנות מחקר. מספר גורמים אחראים להעדר של AD ו-PD DMT, ומודלים לא מספקים של מחלות פרה-קליניות מהווים מגבלה גדולה.

אף על פי כן, לא ניתן לעצור ניסויים קליניים של מועמדי DMT משוערים בזמן ההמתנה למודל ה-NDD ה"מושלם". תקנות IND הנוכחיות עלולות להפריע למחקר הנוכחי והעתידי על טיפולי NDD על ידי הסתמכות יתר על נתונים שנוצרו ממודלים של בעלי חיים לא מספקים, ולהאט עוד יותר את ההתקדמות לקראת השגת DMT.

עם הופעת ה-hiPSCs שמקורו במטופל, התחום נכנס לעידן חדש בחקר ה-NDD, המאפשר חקירות פרה-קליניות בהקשר של הרקע הגנטי של כל מטופל, שהוא המפתח בפיתוח DMT למחלות גנטיות מורכבות. בשילוב עם טכניקות חדשות של עריכה ואספקה ​​של גנים, hiPSCs מייצגים ערכת כלים פרה-קלינית מתפתחת ומבטיחה המאפשרת מודלים של מחלות וגילוי תרופות.

מסקנה, בעוד שהתועלת של מודלים של מכרסמים היא בעלת ערך במספר היבטים של הערכה פרה-קלינית, כגון הערכת פרופיל בטיחות, פעילות ביולוגית מערכתית ותוצאות תפקודיות, עלינו (1) להכיר ביתרונות של מודלים של NDD שנוצרו מ-hiPSCs ולשקול את התועלת שלהם כהשלמה. פלטפורמה להערכת יעילות טיפולית במחקרים פרה-קליניים, (2) עבודה על שיפור מודלים מבוססי בעלי חיים ותאים עדכניים - ומודלים מותאמים שיהיו ישימים להערכת טיפולי רפואה מדויקת, ו- (3) להגדיר את תוצאות הטיפול הניתנות למדידה של ההתערבות הטיפולית ובהתאם , בחר את מערכת/מערכות הדגם המתאימים ביותר.

מידע משלים

מידע משלים ניתן למצוא באינטרנט בכתובתhttps://doi.org/10.1016/j.ymthe.2021.01.001.

הפניות

1. Prince, M., Wimo, A., Guerchet, M., Ali, G.-C., Wu, Y.-T., and Prina, M. (2015). World Alzheimer Report 2015 The Global Impact of דמנציה ניתוח של שכיחות, שכיחות, עלות ומגמות (מחלת אלצהיימר בינלאומית).

2. Murray, CJL, Vos, T., ולופז, A.; GBD 2015 Disease and Injury Incident and Prevalence Collaborators (2016). שכיחות גלובלית, אזורית ולאומית, שכיחות ושנים חיים עם מוגבלות עבור 310 מחלות ופציעות, 1990-2015: ניתוח שיטתי עבור מחקר הנטל העולמי של מחלות 2015. Lancet 388, 1545–1602.

3. Qiu, C., Kivipelto, M., and von Strauss, E. (2009). אפידמיולוגיה של מחלת אלצהיימר: התרחשות, גורמים מכריעים ואסטרטגיות להתערבות. דיאלוגים Clin.Neurosci. 11, 111–128.

4. לוי, ג' (2007). הקשר של מחלת פרקינסון עם הזדקנות. קֶשֶׁת. נוירול. 64,1242–1246.

5. Hebert, LE, Weuve, J., Scherr, PA, and Evans, DA (2013). מחלת אלצהיימר בארצות הברית (2010-2050) נאמדה באמצעות מפקד האוכלוסין של 2010. נוירולוגיה 80, 1778–1783.

6. האגודה לאלצהיימר (2020). 2020 עובדות ונתונים על מחלת אלצהיימר. דמנט אלצהיימר. 16, 391–460.

7. Wimo, A., Guerchet, M., Ali, GC, Wu, YT, Prina, AM, Winblad, B., Jönsson, L., Liu, Z., and Prince, M. (2017). העלויות העולמיות של דמנציה 2015 והשוואות לשנת 2010. דמנט אלצהיימר. 13, 1–7.

8. Cummings, JL, Morstorf, T., and Zhong, K. (2014). צינור פיתוח תרופות למחלת אלצהיימר: מעט מועמדים, כישלונות תכופים. מחלת אלצהיימר ת'ר. 6, 37.

9. Dong, J., Cui, Y., Li, S., and Le, W. (2016). טיפולים פרמצבטיים נוכחיים וטיפולים אלטרנטיביים במחלת פרקינסון. Curr. Neuropharmacol. 14, 339–355.

10. סטוקר, TB (2018). מחלת פרקינסון: פתוגנזה והיבטים קליניים., JCGreenland, ed. (Codon Publications). https://doi.org/10.15586/codonpublications. מחלת פרקינסון.2018.

11. Hung, SY, ו-Fu, WM (2017). מועמדים לתרופות בניסויים קליניים למחלת אלצהיימר. J. Biomed. Sci. 24, 47.

12. Lang, AE, and Espay, AJ (2018). שינוי מחלה במחלת פרקינסון: גישות נוכחיות, אתגרים ושיקולים עתידיים. יום שני אי-סורד. 33,660–677.

For more information:1950477648nn@gmail.com