תמצית עשירה בפוליפנולים של עלי Ocimum Gratissimum מנעה השפעות רעילות של ציקלופוספאמיד על תפקוד הכליות של חולדות ויסטאר

לפרטים נוספים נא ליצור קשר עם:oscar.xiao@wecistanche.com

תַקצִיר

רקע כללי:Cyclophosphamide (CP) הוא אחד מהטיפולים הכימותרפיים החזקים והזולים המשמשים במסגרות קליניות נגד מגוון גידולים. עם זאת, הקשר שלו לרעילות נפרוטית מגביל את השימוש הטיפולי בו. Ocimum gratis simum leaf הוא צמח מרפא בעל יעילות פרמקולוגית וטיפולית רבות, כגון נוגדי חמצון, אנטי דלקתיים ואנטי אפופטוטיים.

שיטות: המחקר הנוכחי נועד להעריך את ההשפעה המגנה של Ocimum gratissimum (OG) נגד הפרעות בתפקוד הכליות הנגרמות על ידי CP בחולדות. חולדות טופלו מראש עם 400 מ"ג/ק"ג גוף של תמצית עוזב של Ocimum gratissimum (Ocimum G.) במשך 4 ימים ולאחר מכן 50 מ"ג/ק"ג גוף של CP ניתנו יחד מהיום 5 עד יום 7 יחד עם Ocimum G. סמנים של תפקוד כליות ולחץ חמצוני, צריכת מזון ומים, אלקטרוליטים, אלדוסטרון, התנפחות לויקוציטים, דלקת ושינוי היסטופתולוגי הוערכו.

תוצאות:דלקת כליות ברורה ופציעות כליות נצפו בקבוצות שטופלו ב-CP. עם זאת, מתן תמצית עלים של Ocimum G. מנע מתח חמצוני, פציעות בכליות, דלקת מוחלשת, ייצור אלדוסטרון מוגבר, ואיבוד של יוני נתרן ומים מופחת בחולדות. ריכוז הקראטינין, האוריאה והאלבומין בפלזמה נורמלו לאחר מתן תמצית Ocimum G. בחולדות שטופלו ב-CP. Ocimum G. גם הפחית את ריכוזי הפלזמה של Interleukin-(IL)-6, חלבון C-reactive ופעילות של myeloperoxidase ומלונדיאלדהיד בחולדות שטופלו ב-CP.

מסקנה: Ocimum G. מנע פגיעה בכליות ושיפר את תפקוד הכליות באמצעות עיכוב דלקת ורעילות CP הנגרמת על ידי חמצון. היעילות של Ocimum G. קשורה לנוכחות של פיטוכימיקלים שונים בצמח.

מילות מפתח:נוגד חמצון, קריאטינין, ציקלופוספמיד, עלה Ocimum gratissimum, כליות, נתרן.

רקע כללי

ציקלופוספמיד (CP) הוא תרכובת אנטי-נאופלסטית הקשורה לחרדל חנקן. הוא משמש בסביבה הקלינית לטיפול במגוון רחב של מחלות סרטן ובטיפול מדכא חיסון לאחר השתלת איברים, טיפול בהפרעות אוטואימוניות כגון דלקת מפרקים שגרונית, גרנולומטוזיס של וגנר ותסמונת נפריטית בילדים [1]. ללא קשר לספקטרום הרחב של שימושים קליניים בתרופה, ידוע ש-CP גורם לפציעות רבות של איברים תלויי מינון, אשר, לפיכך, מרסנות את השימוש הטיפולי שלה בסביבה הקלינית. מכיוון שהיה ידוע כמועיל בטיפול בתסמונת נפרוטית בילדים [1], לעומת זאת, בכמה מחקרים קודמים דווח כי הוא גורם נזק לשלפוחית ​​השתן [2, 3] וגורם לרעלת כליות בשימוש לא הולם עקב השימוש ב-CP מנת יתר [4-6]. מטבוליט פעיל של Te CP, 4-Hydroxycyclophospha-mide, עובר טאוטומריזציה חלקית לאלדוספוספמיד, שבתורו מתפרק על ידי פוספטאז במחזור הדם ובתא החי ומוליד שני מטבוליטים ציטוטוקסיים, חרדל זרחן ואקרולין [6]. הפעולה הטיפולית של חרדל פוספורמיד דווחה בעבר כאחראית להשפעות אנטי-גידוליות [6], בעוד שאקרוליין אחראי להשפעות ציטוטוקסיות של CP, כגון דלקת שלפוחית ​​​​השתר המדממת במהלך מתן התרופה [2, 7]. המטבוליט הרעיל של Te CP פוגע ברקמות החיות על ידי הפחתת מערכת נוגדי החמצון האנדוגניים של הרקמה באמצעות יצירת רדיקלים חופשיים של חמצן תגובתיים שהם מוטגנים לתאים חיים. דווח כי מתן מינון גבוה של CP מגביר את חמצון השומנים וגורם להפחתה בנוגדי החמצון האנזימטיים והלא אנזימטיים [7, 8]. מחקרים קודמים תיארו את השימושים המועילים של חומרים נוגדי חמצון יחד עם כימותרפיה במניעת תופעות הלוואי של התרופה על רקמות הגוף [7, 9, 10]. חומרים נוגדי החמצון כמו קולאווירון הוכיחו את עצמם כיעילים במניעת רעילות לב CP בחולדות [11]. לפיכך, השילוב של החומר נוגד חמצוןיחד עם תרופות כימותרפיות עשויות להיות גישה טיפולית פוטנציאלית למנוע או לעצור את ההתפתחות הציטוטוקסית של CP. Ocimum gratissimum (Ocimum G.) היא משפחה של Lamiaceae השייכת למיני צמחים עשבוניים. הוא ידוע כציפורן או בזיליקום אפריקאי באזורים טרופיים רבים (אסיה, הודו, ברזיל ומערב אפריקה וכו '). הוא נמצא בשפע בניגריה [12]. מדינות רבות במדינה זו (ניגריה) השתמשו ב- Ocimum G. כרוטב ומרק ירקות. נמצא כי העלים והפרחים של Ocimum G. מכילים פוליפנולים ותרכובות ביולוגיות אחרות [13, 14]. צמחים של Ocimum gratissimum משמשים לטיפול במחלות שונות כמו שלשולים, קוליטיס כיבית, חום וקטרר [14-17]. לצמח יתרונות תרופתיים רבים בשל יכולותיו האנטי דלקתיות, נוגדות חמצון, אנטיבקטריאליות, נוגדות סוכרת ואנטי מלריה [14, 18-20]. הפעילות האנטי-מיקרוביאלית של תמצית Ocimum G. נבדקה במבחנה נגד פתוגנים אנושיים שונים כמו דלקת ריאות Klebsiella, Staphylococcus aureus, Escherichia, Vibro spp, Enterobacter spp, Enterococcus faecalis וכו'. הפעילות האנטי-פטרייתית של השמן האתרי של Ocimum G תמציות צוינו במבחנה [19, 21, 22], ו- Ocimum G. שימש כמערער יתושים [23]. מחקר שנערך לאחרונה בבעלי חיים הציע את החשיבות של ההשפעה המגנה של תמציות Ocimum G. במניעת אי-סדירות בלחץ הדם מפני רעילות קובלט-כלוריד [24] וכן הפחתה של הפרעות לב הקשורות לפיברוזיס בכבד על ידי הורדת האינטרלוקין-6 מסלול איתות [25] או על ידי גרימת השפעות נוגדות חמצון [26]. תמצית עלים מימית של עלי Ocimum G. הראתה השפעות נוגדות חמצון נגד פגיעה לבבית-כלייתית הנגרמת על ידי קובלט כלוריד [24] ומנעה כיבי קיבה על ידי הפחתת הפרשת חומצת קיבה וכיבים [27]. כמו כן, חומצה אורסולית מתמציות Ocimum G. הדגימה פעילות נוגדת מגל [28] ואנטי סרטן [29, 30]. יתר על כן, השמנים האתריים של Ocimum G. הוכחו כמפגינים תכונות תלויות אנדותל, מרגיעות כלי דם בחולדות [31]. מחקרים in vivo ו-in vitro העריכו את eugenol, מרכיב תרופתי של Ocimum G., כדי להוריד את רמות הגלוקוז בדם באמצעות עיכוב של אלפא גלוקוזידאז [32]. יותר מכך, מחקר קליני קבע את הלימות הפרמקולוגית של Ocimum G. להפגין פעילות דומה כמו כלורהקסידין נגד רובד ודלקת חניכיים [33]. עם כל התכונות הללו של Ocimum G., שיערנו כי Ocimum G. עשוי להיות תרופה טיפולית אפשרית מתי להשתמש יחד עם CP כדי למנוע או להפסיק תופעות לוואי של CP. לכן, מחקר זה נועד לבחון את ההשפעות המועילות של תמצית עשירה בפוליפנולים של עלי Ocimum gratissimum על רעילות נפרו-הנגרמת כתוצאה מ-CP בחולדות Wistar זכרים.

אנא לחץ כאן כדי ללמוד עוד

חומרים ושיטות

הזרקת Cyclophosphamide (200 מ"ג/10 מ"ל) נרכשה ממעבדת Celon (Hyderabad, הודו); הזרקת קטמין הידרוכלוריד (50 מ"ג/10 מ"ל) נרכשה מחברת Popular Pharmaceuticals Ltd., (Gazipur, בנגלדש); ערכות בדיקה לפרמטרים ביוכימיים התקבלו מ-Randox Laboratories Limited, (Crumlin, בריטניה), וכו'. נרכשו 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), מתנול, נתרן קרבונט, Trolox וריאגנט Folin-Ciocâlteu מ- Merck & Co., Kenilworth, NJ, ארה"ב. המכשירים בהם נעשה שימוש כוללים את ספקטרומטר גז כרומטוגרפיה-מסה (GCMS-QP2010 SE, Shimadzu Corporation, קיוטו, יפן), וספקטרופוטומטר גלוי אולטרה סגול (Beckman, DU 7400, ארה"ב), מכשיר Soxhlet, מאייד סיבובי, מיקרוסקופ (Olympus CH; , טוקיו, יפן); מצלמה (Leica DM 750).

הכנת תמצית פוליפנול של Ocimum gratissimumleaves

עלי Ocimum gratissimum נאספו מגן ב-Usi, מדינת אקיטי, ניגריה. הושגו הרשאות מוסדיות רלוונטיות לאיסוף Ocimum gratissimum. המחקר הנוכחי תואם את ההנחיות הבינלאומיות, הלאומיות ו/או המוסדיות לשימוש בחלקים שונים של הצמח. דגימות הצמח אומתו על ידי מר אומולה, האוצר במחלקה לצמחי מרפא, אוניברסיטת אובפמי אוולובו, איל-איפה, שם הופקדה דגימת שובר (1945) בצמח הצמח של האוניברסיטה. תמצית עשירה בפוליפנול התקבלה מעלי Ocimum G. (900g) לפי שיטות המיצוי הקודמות שלנו של הצמח [14]. נעשה שימוש במתנול להשגת תוצר המיצוי הסופי, תמצית עשירה בפוליפנול של עלי Ocimum gratissimum (PREOG) בלחץ מופחת ב-40 מעלות באמצעות מאייד סיבובי. תרכיז התמצית שהתקבל יובש בהקפאה בעזרת lyophilizer. השאריות (8{{40}}.85 גרם) נשמרו בכלי פטרי עם כיסוי הדוק ואוחסנו ב-20 מעלות עד שהיה צורך במחקר. תמצית ה-OG שהתקבלה הומסה במים (0.2 מ"ל/מנה) וניתנה לחולדות לפי המינון המתוכנן. ניתוח כרומטוגרפיית גז-ספקטרומטריית מסה של תמציות OG (GC-MS) ההרכב הכימי של התמצית שהתקבל נבדק באמצעות כרומטוגרפיית גז-ספקטרומטריית מסה (GC-MS). צ'אבס וחב'. השיטה [34] אומצה בשינוי קל. עמודת נימי סיליקה מאוחה (עובי סרט של 30×0.25 HP-5Ms, 0.25μm) המכילה הליום כגז הנשא (קצב זרימה של 1/mL) שימשה לקביעת התרכובות. טמפרטורת התנור של 40 מעלות נקבעה והוחזקה למשך 5 דקות, ולאחר מכן גדלה בהדרגה ב-3 מעלות/דקה עד ל-270 מעלות. 60:1 נקבע כיחס פיצול. נקבעה טמפרטורה של 180 מעלות לחלקי החיבור ומקורות היונים, ולספקטרומטר המסה נקבעה טמפרטורת ממשק של 240 מעלות. עבור כמות אנרגיית היינון, נעשה שימוש ב-70 eV, בעוד שמצב השפעת האלקטרון (EI) נבחר כדי לייצר ספקטרום מסה יציבות וניתנות לשחזור, וטווח ערכים של 50-650m/z שימש להפעלת דגימות. זמן ההשהיה של MS לפני הסריקה היה 5 דקות. התרכובות שהתקבלו הוצגו בטבלה 2. קביעת התוכן הפנולי הכולל התוכן הפנולי הכולל (TPC) של התמציות הוערך באמצעות טכניקת Folin-Ciocâlteu כפי שתוארה על ידי Gulcin et al. [35], עם כמה שינויים. בקצרה, 100μL (0.5mg/mL) של תמציות עשירות בפוליפנול של Ocimum G. הוכנסו לצינורות רגילים נפרדים. בערך 500μL (1 אחוז v/v) של מגיב פנול Folin-Ciocâlteu נוספו לכל צינור המכילה את תמצית Ocimum G. והצינורות הורשו לעמוד למשך 5 דקות. ואז הסתחרר. לאחר מתן עמידה למשך 5 דקות, נוספו כ-400 μL (20 אחוזים משקל/ממדים) של נתרן קרבונט למנות, אשר הודגרו בחושך בטמפרטורת החדר למשך 90 דקות. לפיתוח הצבע. הספיגה של כל תערובת הוערכה עם ספקטרופוטומטר גלוי אולטרה סגול (Beckman, DU 7400, ארה"ב) ב-765nm. תמיסת נתרן קרבונט ללא כל תוספת של מגיב פנול Folin-Ciocâlteu שימשה כריק. עבור עקומת הכיול, נעשה שימוש בתקני חומצה גאלית. TPCs של הדגימות נקבעו מהרגרסיה הליניארית של תקני החומצה הגאלית. התוצאות הוצגו כשווי החומצה הגלית (GAE) לגרם של משקל יבש של תמצית Ocimum gratissimum (mg GAE/g). ההליך נערך בשלושה עותקים (n=3). בדיקת DPPH לניקוי רדיקלים חופשיים פעילות ניקוי הרדיקלים החופשיים של התמצית נקבעה לפי השיטה שתוארה על ידי RakMai וחב'. [36], עם שינויים קלים. כ-2 מ"ל של תמיסת DPPH– מתנול (180 מיקרומול/ליטר) נוספה וערבבה עם התמצית ב-0.1 מ"ג/מ"ל. המנות הודגרו בחושך ב-25 מעלות. הספיגה של המדגם נקבעה באמצעות ספקטרופוטומטר ב-517nm במרווחי זמן שונים בין 0 ל-60 דקות. מנות של התמציות ללא תוספת של תמיסת מתנול DPPH שימשו כחסר. Trolox, אנלוגי סינתטי שלוִיטָמִיןE, שימש כביקורת חיובית. המשוואה שלהלן שימשה להערכת תכונות הניקוי של התמציות. ההליך בוצע בשלושה עותקים (n=3). כאשר דגימה היא תמצית בתוספת DPPH, Ablank היא התמצית בלבד, ביקורת היא הספיגה של תמיסת הבקרה (המכילה רק DPPH). טיפול בבעלי חיים עשרים ושמונה (28) חולדות Wistar זכרים במשקל 120-180 גרם שימשו למחקר. טיי נרכש מאחזקת בעלי החיים של המכללה למדעי הבריאות, אוניברסיטת אובפמי אוולובו, איל-אייף. כל החולדות הוחזקו בכלובים קונבנציונליים למשך שבוע אחד כדי להתאקלם למצב הסביבתי בדרגה 28-32 והותר להם גישה חופשית לתזונה ולמי שתייה נקיים. הניסוי אושר על ידי הוועדה לאתיקה של מחקר בריאות (HREC) של אוניברסיטת Obafemi Awolowo והמחקר תואר בהתאם להנחיות ARRIVE (בעלי חיים במחקר: דיווח על ניסוי in vivo) [37].

Cistanche נגד עייפות

מחקרים היסטופתולוגיים

הרקמות נחתכו למקטעים בעובי {{0}} מיקרומטר על ידי מיקרוטום, קבועים על השקופיות והוצבעו ב-PAS. השקופיות נצפו תחת מיקרוסקופ אור (Olym pus CH; Olympus, טוקיו, יפן) וצילומי מיקרו צולמו במצלמת Leica DM 750 בהתראות מג' של ×400. קטע רקמות הכליה הוערך על ידי פתולוג מוסמך שסווור לפרוטוקול הניסוי. נזק גלומרולרי נמדד בין דרגות 0 ל-4 על ידי הערכת שגשוג mesangial, עובי הממברנה הבסיסית ושינויים פיברינואידים. נזק צינורי נמדד בין דרגות 0 ל-4 על ידי הערכה של ניוון ואקוולרי, פיזור, ניוון צינורי, נמק צינורי פרוקסימלי והיווצרות גבס. תערוכות דלקתיות טובוליות-בין-סטיתיאליות קיבלו ניקוד בין דרגות 0 ל-2 על ידי הערכת מגוון התאים הדלקתיים במדיום והנוכחות של הסתננות בתוך אפיתל האבוביות (טבלה 1) [44]. ציון נזק לכליות כולל של 0-2 ייצג ללא רעילות נפרוטוקסית קלה, 3-6 רעילות נפרוטוקסית בינונית ו-7-10 רעילות נפרוטואלית חמורה [44].

תוצאות

ניתוח כרומטוגרפיית גז-ספקטרומטריית מסה, תוכן פנולי ויכולת ניקוי DPPH של תמצית עלי Ocimum gratissimum ניתוח GC-MS חשף כמה תרכובות ביו-אקטיביות של תמצית עלי Ocimum gratissimum (טבלה 2). התוכן הפוליפנולי של התמצית זוהה באמצעות שיטת Folin-Ciocâlteu (טבלה 2). התוכן הפנולי הכולל (TPC) (80.36±0.50mg GAE/100g) שהושג בתמצית Ocimum G. גילה שתמצית Ocimum gratissimum עשירה בתוכן פנולי. יכולת ניקוי ה-DPPH של התמצית הוערכה גם על ידי חישוב ערך IC50, המתייחס לכמות התמצית המסוגלת לסלק 50 אחוז מהרדיקלים החופשיים הכלולים בתערובת התגובה. ערך ה-IC50 (22.12±0.43 מ"ג/מ"ל) של התמצית היה גבוה וזה סימן את הגבוהנוגד חמצוןפעילות של עלי Ocimum gratissimum. לפיכך, התפקוד של תכולת הפנולים הגבוהה של הצמח הוכח ביכולתו לנטרל פעילות רדיקלים חופשיים (טבלה 2).

השפעת PREOG ו-cyclophosphamide על פינוי קריאטינין

ירידה משמעותית בפינוי הקראטינין הכלייתי נצפתה בקבוצת ה-CP בלבד בהשוואה לביקורת (p<0.05). however,="" the="" preog-treated="" groups="" revealed="" a="" significant="" increase="" in="" the="" creatinine="" clearance="" when="" compared="" with="" cp="" alone="" treated="" group=""><0.05)>

דִיוּן

במחקר הנוכחי, קיימות אינדיקציות לרמות מוגברות בפרמטרים של עקה חמצונית כמו חמצון שומנים, מי חמצן (H2O2) ותחמוצת חנקן (NO), מה שמצביע על כך שהשומנים הממברניים והחלבון של הכליה של החולדות שטופלו עם CP בלבד נפגע. כמו כן, הפעילות של אנזימים נוגדי חמצון כגון סופראוקסיד דיסמוטאז וקטלאז ורמת נוגד חמצון לא אנזימטי, גלוטתיון מופחת ירדו בקבוצה שטופלה ב-CP בלבד. הירידה בנוגדי חמצון בתאי הכליה של החולדות שטופלו ב-CP בלבד הייתה אינדיקציה לחוסר איזון חיזור-הומאוסטזיס. CP הוכח בעבר כגורם לנזק חמצוני, דלקת ונמק תאים או אפופטוזיס לאחר הפעלה וקידום של מיני חמצן תגובתיים (ROS) באמצעות המטבוליט שלו, אקרוליין [7, 11, 14], אשר לאחר מכן מפעילים את הנטרול וההפחתה שלהגנה נוגדת חמצוןהיכולות של האורגניזמים המושפעים [10, 11, 45]. במחקר זה, ייצור היתר של ROS עולה על האנדוגנייכולת נוגדת חמצון, גורם ללחץ חמצוני, ובעקבות כך פוגע בתאי הכליה של החולדות שטופלו ב-CP כפי שבא לידי ביטוי ברמות המוגברות של סמנים של עקה חמצונית וירידה ברמות שלפרמטרים נוגדי חמצון. כמו כן, התצוגה ההיסטולוגית של חולדות אלה הראתה נזק גלומרולרי ונמק צינורי של תאי הכליה. יתר על כן, חוסר איזון חיזור מעורר ייצור יתר של ציטוקינים פרו-דלקתיים [3, 14]. הוא הבחין בייצור יתר של ROS גרם להתחמצנות שומנים ולגיוס של ציטוקינים פרו-דלקתיים ובמקביל הפעיל נזק דלקתי לתאי הכליה. הערכת IL-6 במחקר זה עלתה משמעותית בחולדות שטופלו ב-CP, מה שמעיד על התקף מתח חמצוני ודלקת של תאי הכליה. נמצא שהעלייה ב-IL-6 מעוררת ו/או מגרה את הכבד להתחיל בתגובת פאזה חריפה שגורמת לעלייה בייצור C-reactive protein (CRP) במחזור ובמתווכים ביו-אקטיביים אחרים [46]. CRP גדל באופן משמעותי בחולדות שטופלו ב-CP והרמה המוגברת של סמן ביולוגי זה הייתה אינדיקציה למערכת הגנה מוקדמת מפני זיהומים, מידע ונזק לרקמות [47, 48]. העלייה ברמת ה-CRP במחקר זה אישרה עוד יותר את ביצוע הדלקת בחולדות שטופלו ב-CP בלבד. CP נצפה כגורם להפחתה של נוגדי החמצון האנדוגניים של הכליה, כגון ניצול יתר של GSH על ידי הכליה עקב הצטברות של תוצרי מטבוליט של cyclophosphamide בתאי הצינורית הכלייתית [9]. כתוצאה מתהליך זה, הכליה של חולדות שטופלו ב-CP בלבד עלולה להגביר את התגובה החיסונית כנגד התאים שלה, מה שגרם לאחר מכן לדלקת כפי שמוצג על ידי העלייה ב-CRP בפלזמה. בהסכמה, ל-CP יש פוטנציאל לגרום לדלקת ולנזק אימונולוגי סביר בכליות של חולדות שטופלו ב-CP.

סיכום

לסיכום, התוצאות מהממצאים הנוכחיים הראו שתמצית עשירה בפוליפנולים של Ocimum gratissimum מנעה תופעות לוואי שליליות של CP על תפקוד הכליות באמצעות הפחתת סטרס חמצוני, מנעה ייצור יתר של ציטוקינים מעודדי דלקת, וניפוח לויקוציטים, ושיפור של אנזימטיים נוגדי חמצון. פעילות של רקמות הכליה. יתרה מכך, אושר כי CP גרמה להפחתה בהפרשת אלדוסטרון, והקלה על איבוד יתר של נתרן ומים דרך שתן בחולדות. עם זאת, תמצית של Ocimum G. משופרת בתפקוד הכליות הגדילה את ייצור האלדוסטרון, ומנעה איבוד יתר של נתרן ומים בחולדות שטופלו ב-CP. נוכחותם של פוליפנול ונוגדי חמצון בעלים של Ocimum gratissimum הופכים אותו למועמד מושלם לטיפול ו/או למניעה של ההשפעה הנפרוטוקסית של ציקלופוספמיד.

הפניות

1. Chabner BA, Ryand DP, Pax-Ares L, Garcis-Carbonero, Calaresi P. Anti-neoplastic agents. בתוך: Harnam JG, Libmirde LE, עורכים. גודמן וגילמן הם הבסיס התרופתי של הטיפולים. מהדורה 10. ניו יורק: מקגרו היל; 2001. עמ'. 1389–459.

2. Chabner BA, et al. חומרים אנטי-נאופלסטיים. בתוך: Brunton LL, Lazo JS, Parker KL, עורכים. גודמן וגילמן הם הבסיס התרופתי של הטיפולים. מהדורה 11. ניו יורק: מקגרו היל; 2006. עמ'. 1322–8. 1694.
3. Ge B, Yang D, Wu X, Zhu J, Wei W, Yang B. השפעות Cytoprotective של ליפוזום חומצה glycyrrhetinic נגד דלקת שלפוחית ​​השתן הנגרמת על ידי ציקלופוספמיד באמצעות עיכוב מתח דלקתי. Int Immunopharmacol. 2018;54:139–44.
4. Sinanoglu O, Yener AN, Ekici S, Midi A, Aksungar FB. ההשפעות המגננות של ספירולינה על רעילות נפרוטוקסית הנגרמת על ידי ציקלופוספמיד ואורוטוקסיות בחולדות. Basic Transl Sci. 2012.
5. Caglayan C, Temel Y, Kandemir FM, Yildirim S, Kucukler S. Naringin מגן מפני רעילות כבד הנגרמת על ידי ציקלופוספאמיד ורעילות נפרו באמצעות אפנון של עקה חמצונית, דלקת, אפופטוזיס, אוטופגיה ונזקי DNA. Environ Sci Pollut Res Int. 2018;25(21):20968–84.
6. Zhang J, Tian Q, Yung S, Chuen S, Zhou S, Duan W, et al. מטבוליזם והובלה של אוקסאזפוספורינים וההשלכות הקליניות. Drug Metab Rev. 2005;37:611–703.
7. Famurewa AC, Edeogu CO, Ofor FI, Besong EE, Akunna GG, Maduagwuna EK. ירידה בוויסות של חוסר איזון חיזור ואיתות iNOS/NF-ĸB/caspase-3 עם תוספת אבץ מונעת urotoxicity של דלקת שלפוחית ​​הדם המושרה על ידי ציקלופוספמיד בחולדות. Life Sci. 2021;266:118913.
8. Oyagbemi AA, Omobowale TO, Saba AB, Olowu ER, Dada RO, Akinrinde AS. חומצה גאלית משפרת נוירוטוקסיות הנגרמת על ידי ציקלופוספמיד בחולדות ויסטאר באמצעות פעילות ניקוי רדיקלים חופשיים ושיפור במערכת ההגנה נוגדת החמצון. J Suppl. 2016;13:402–19.
9. אברהם פ, אייזק ב. ההשפעות של גלוטמין דרך הפה על רעילות נפרוטוקס הנגרמת על ידי ציקלופוספמיד בחולדות. Hum Exp Toxicol. 2010;30(7):616–23.
10. שריף IO. מנגנון הגנה עצבית שלקוורצטיןנגד ציקלופוספא-עכברים הנגרמת urotoxicity: השפעה על עקה חמצונית וסמנים דלקתיים. J Cell Biochem. 2018;119(9):7441–8. 11. Omole JG, et al. אפקט מגן של קולאווירון על רעילות לב הנגרמת על ידי ציקלופוספמיד בחולדות. J Evid Based Integr Med. 2018;23:1
11. אפרים KD, Jacks TW, Sodipo OA. מחקרים היסטופתולוגיים על הרעילות של Ocimum gratissimum משאירים תמצית על כמה איברים של ארנבות. Afr J Biomed Res. 2003;6:21–5.
12. Akinmoladun AC, Ibukun EO, Emmanuel A, Obuotor EM, Farombi EO. מרכיב פיטוכימי ופעילות נוגדת חמצון של תמצית מהעלים של Ocimum gratissimum. מאמרי מדע. 2007;2:163–6.
13. Alabi QK, Akomolafe RO, Omole JG, Adefsayo MA, Ogundipe OL, Aturamu A, et al. תמצית עשירה בפוליפנול של עלי Ocimum gratissimum משפרת דלקת המעי הגס באמצעות מחכה של פגיעה ברירית המעי הגס ומווסת ייצור ציטוקינים פרו-דלקתיים ולחץ חמצוני בחולדות. Biomed Pharmacother. 2018;103:812–22.
14. Ofah VN, Chikwendu UA. השפעות נגד שלשולים של תמצית עלי Ocimum gratissimum בחיות ניסוי. J Etnopharmacol. 1999;68:327–30.