ההשפעה של אקטאוזיד כמגן תאים כדי לייצר כלב משובט

ג'י היי לי1☯, ג'ו לאן צ'ון1☯, קון ג'ונג קים1, און יאנג קים1, דונג-הי קים1, בו מיונג לי1, קיל וו האן1, קאנג-סון פארק1, קיונג-בון לי2, מין קיו קים1*

איש קשר:joanna.jia@wecistanche.com

Pls לחץ כאן לחלק 2

אקטאוזידבcistancheיש הרבהאפקטים

טבלה 5. ניתוח מיקרו-לווייני של הכלב המשובט.

טבלה 6. רצפי mtDNA של הכלב המשובט.

משופרים עם השימוש בתאים תורמים בשלב G0/G1 ביחס לשימוש בתאים תורמים בשלב G2/M [24-28], אם כי דווח כי תאים תורמים שנעצרו בשלב G2/M של מחזור התא יכולים לייצר חזירונים משובטים בני קיימא [44]. שלב מחזור התאים של תאי הגרעין התורמים ממלא תפקיד מכריע באירועי התכנות מחדש הבאים בעקבות SCNT. תאי גרעין תורמים שנעצרים בשלב G0/G1 יוזמים ביעילות את סינתזת הדנ"א הראשונה לאחר SCNT [28, 29, 45]. כדי לגרום לסנכרון מחזור התאים, נעשה שימוש במעכבים כימיים שונים, כולל אקטאוזיד, כדי להשיג סנכרון מחזור התאים [46, 47]. כמעכב CDK, אקטאוזיד משמש לעתים קרובות כדי להביא לסנכרון מחזור התא בשלב G0/G1. Lee et al. דיווחו כי אקטאוזיד עיכב את התקדמות מחזור התא מעבר לשלב G1, ובכך מנע התפשטות תאי לוקמיה. בנוסף, רמת ה-CDK הופחתה, אך הרמות של מעכבי CDK עלו באופן משמעותי [38].

ציסטנצ'הdeserticolaאקטאוזידיכול לשפר את מערכת החיסון ולהפחיתאפופטוזיס

המחקר הנוכחי השווה את ההשפעות של אקטאוזיד לשתי שיטות הסנכרון הנפוצות האחרות של תאים כדי לחקור את ההשפעה של סנכרון תאים על היעילות של SCNT. פיברובלסטים עובריים כלבים טופלו בריכוזים שונים של אקטאוזיד, הרעבת סרום ועיכוב מגע; אחוז התאים בשלב G0/G1 בשלוש קבוצות הטיפול הושווה. רעב בסרום נמצא כשיטה היעילה ביותר לסנכרון מחזור התאים בשלב G0/G1, ולא היה הבדל משמעותי בין עיכוב אקטאוזיד לעיכוב מגע. עם זאת, הרעבה בסרום גרמה לרמה גבוהה משמעותית של ROS. מחקרים קודמים דיווחו כי העלייה ב-ROS פוגעת בקרום התאים וגורמת לאפופטוזיס ובכך מפחיתה את היעילות של התפתחות העובר. יתר על כן, ROS מגביר את פיצול הדנ"א שמשרה את חסימת התא ומעכב את התפתחות העובר בבני אדם ובחזירים [48–51]. טיפול באקטאוזיד לא הראה הבדל בסנכרון מחזור התא בשלב G0/G1 בהשוואה לעיכוב מגע. עם זאת, אקטאוזיד גרם לפחות פעילות ROS באופן משמעותי בהשוואה לשתי שיטות הסנכרון האחרות של מחזור התא. בנוסף, טיפול באקטאוזיד גרם לפחות אפופטוזיס ונמק באופן משמעותי פחות מאשר עיכוב מגע ורעב בסרום. התוצאה תואמת גם את המחקרים הקודמים שהראו את התרחשותם של יותר אירועים אפופטוטיים לאחר סנכרון מחזור התאים עם הרעבת הסרום מאשר עם עיכוב מגע [32, 52]. במקביל לירידה בשיעור האפופטוזיס, קבוצת הטיפול באקטאוזיד הראתה גם הישרדות תאים גבוהה יותר מאשר קבוצת עיכוב המגע. הרעבה בסרום גרמה למוות תאי מסיבי הן בהשוואה לטיפול באקטאוזיד והן לעיכוב מגע.

סנכרון מחזור התאים של תורם הגרעין בשלב G0/G1 הוא צעד מכריע בעובר SCNT מוצלח ובסופו של דבר בייצור בעלי חיים משובטים. ROS נחשב לאחד הגורמים העיקריים למוות תאי ואפופטוזיס במהלך התפתחות העובר. במחקר זה, אקטאוזיד נחקר כדי לקבוע אם זו תהיה שיטה חלופית שימושית לגרימת סנכרון מחזור תאי שלב G0/G1 בפיברובלסטים עובריים כלבים כתאים תורמים גרעיניים. אינדוקציה של סנכרון מחזור התאים על ידי טיפול אקטאוזידי בתאים תורמים גרעיניים הפחיתה ROS ואפופטוזיס, מה שתרם לשיפור ההתפתחות החוץ גופית של עוברי SCNT. עוברים ששוכפלו באמצעות תאים תורמים שטופלו באקטאוזיד הועברו לכלבות אם פונדקאיות וכלב משובט בריא אחד הופק בהצלחה, מה שלא קרה עם עוברים מקבוצת עיכוב המגע.

לסיכום, מחקר זה הראה כי acteoside, שהוא מעכב CDK, גורם לסנכרון מחזורי תאים מוצלח של הפיברובלסטים הכלביים בשלב G0/G1 לשימוש כתאים תורמים גרעיניים, וגם מגן עליהם מפני אפופטוזיס על ידי הפחתת עקה חמצונית. ההשפעה הציטופונית של אקטאוזיד, בשילוב עם היכולת לסנכרן מחזור התאים, תרמה לשיפור היכולת ההתפתחותית במבחנה של עוברי SCNT. לכן, acteoside יהיה מגיב יעיל כדי לשפר את יעילות השיבוט כדי לייצר בעלי חיים משובטים.

Acteoside in cistancheיכול לטפלכליהשיפור המחלהכליותפונקציה

תודות

המחבר רוצה להודות לד"ר ג'ון האמונד מ-USDA-ARS על הצעותיו המדעיות ותמיכתו בכתיבת כתב היד.

תרומת הכותבים

הגה ותכנן את הניסויים: JHL JLC MKK. ביצע את הניסויים: JHL KJK EYK DHK BML KWH KSP. ניתח את הנתונים: JLC KBL. ריאגנטים/חומרים/כלי ניתוח שנתרמו: KJK EYK DHK BML KWH KSP. כתב את המאמר: JHL JLC. מימון רכישה ופיקוח: MKK.

אקטאוזיד בcistancheיכול לשפרזכרון

הפניות

1. אומיאמה K, הונדה K, Matsunami H, Nakano K, Hidaka T, Sekiguchi K, et al. ייצור של צאצאים סוכרתיים באמצעות זרע אפידידימלי בהקפאה על ידי הפריה חוץ גופית וטכניקות הזרעה תוך-גופיות בחזירים מהונדסים. כתב העת של רבייה והתפתחות. 2013; 59(6):599–603. PMID: 23979397; PubMed Central PMCID: PMC3934148.

2. שימאטסו Y, ימאדה K, Horii W, Hirakata A, Sakamoto Y, Waki S, et al. ייצור של NIBS משובט (מכון ניפון למדע ביולוגי) ואלפא-1, 3-גלקטוזיל-טרנספראז נוקאאוט MGH חזירים מיניאטוריים על ידי העברה גרעינית של תאים סומטיים באמצעות גזע NIBS כפונדקאים. Xenotransplantation. 2013; 20(3):157–64. doi: 10.1111/Xen.12031 PMID: 23581451; PubMed Central PMCID: PMC3815503.

3. קאנג א', וו ג'י, מא ה', לי י', טיפנר-הדג'ס ר', טאצ'יבאנה מ', ואחרים. תכנות מחדש של הגרעין על ידי ציטופלסמה אינטרפאזית של עוברי עכברים דו-תאיים. טבע. 2014; 509(7498):101–4. doi: 10.1038/ nature13134 PMID: 24670652; PUBMed מרכז PMCID: PMC4124901.

4. קים EY, סונג DH, פארק MJ, פארק HY, לי SE, צ'וי HY, ואחרים. שיבוט לאחר המוות של בקר שחור ג'ג'ו בסכנת הכחדה (בקר מקומי קוריאני): פוריות וכימיה בסרום אצל שור ופרה משובטים וצאצאיהם. כתב העת של רבייה והתפתחות. 2013; 59(6):536–43. PMID: 23955237; PubMed Central PMCID: PMC3934153.

5. ג'אנג ג'י, קים ח"כ, לי לפנה"ס. המצב הנוכחי ויישומים של העברה גרעינית של תאים סומטיים בכלבים. תריוגנולוגיה. 2010; 74(8):1311–20. doi: 10.1016/j.theriogenology.2010.05.036 PMID: 20688377.

6. מסטרומונאקו GF, המלך WA. שיבוט במינים של ידידים מן החי, שאינם מקומיים ובסכנת הכחדה: האם הטכנולוגיה יכולה להפוך למציאות מעשית? רבייה, פוריות והתפתחות. 2007; 19 (6):748–61. PMID: 17714629.

7. וילמוט I, שנייק איי, מקוויר ג'יי, קינד איי.ג'יי, קמפבל KH. צאצאים בני קיימא שמקורם בתאי יונקים עובריים ובוגרים. טבע. 1997; 385(6619):810–3. doi: 10.1038/385810a0 PMID: 9039911.

8. Wakayama T, Perry AC, Zuccotti M, Johnson KR, Yanagimachi R. התפתחות מלאה של עכברים מביציות מלוכדות שהוזרקו להן גרעיני תאי קומולוס. טבע. 1998; 394(6691):369–74. doi: 10.1038/ 28615 PMID: 9690471.

9. Cibelli JB, Stice SL, Golueke PJ, קיין ג'יי ג'יי, ג'רי ג'יי, בלקוול סי ואחרים. עגלים מהונדסים משובטים המופקים מפיברובלסטים עובריים שאינם מעוברים. מדע. 1998; 280(5367):1256–8. PMID: 9596577.

10. פולג'אבה IA, חן SH, Vaught TD, Page RL, Mullins J, Ball S, et al. חזירים משובטים המיוצרים על ידי העברה גרעינית מתאים סומטיים בוגרים. טבע. 2000; 407(6800):86–90. doi: 10.1038/35024082 PMID: 10993078.

11. Agarwal A, Gupta S, Sharma R. עקה חמצונית והשלכותיה על אי פוריות נשית – נקודת המבט של קלינאית. ביו-רפואה רבייתית באינטרנט. 2005; 11(5):641–50. PMID: 16409717.

12. אגרוואל א', גופטה ס', שארמה RK. תפקיד העקה החמצונית ברבייה הנשית. ביולוגיה של הרבייה ואנדוקרינולוגיה: RB&E. 2005; 3:28. doi: 10.1186/1477-7827-3-28 PMID: 16018814; PubMed PMCID מרכזי: PMC1215514.

13. Goud AP, Goud PT, Diamond MP, Gonik B, Abu-Soud HM. מיני חמצן תגובתי והזדקנות ביציות: תפקיד של סופראוקסיד, מי חמצן וחומצה היפוכלורית. ביולוגיה ורפואה של רדיקלים חופשיים. 2008; 44(7):1295–304. doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2007.11.014 PMID: 18177745; PUBMed PMCID מרכזי: PMC3416041.

14. פארק SH, צ'ו HS, יו IJ. השפעת נוזל פוליקולרי בקר על מיני חמצן תגובתי וגלוטתיון בביציות, אפופטוזיס וביטוי גנים הקשורים לאפופטוזיס של בלסטוציסטים המיוצרים במבחנה. רבייה בחיות בית = Zuchthygiene. 2014; 49(3):370–7. doi: 10.1111/RDA.12281 PMID: 24592966.

15. You J, Lee J, Hyun SH, Lee E. L-carnitine treatment במהלך הבשלת ביציות משפר את התפתחותם במבחנה של עוברי חזירים משובטים על ידי השפעה על סינתזת גלוטתיון תוך תאית וביטוי גנים עובריים. תריוגנולוגיה. 2012; 78(2):235–43. doi: 10.1016/j.theriogenology.2012.02.027 PMID: 22578613.

16. You J, Kim J, Lim J, Lee E. Anthocyanin מגרה התפתחות חוץ גופית של עוברי חזירים משובטים על ידי העלאת רמת הגלוטתיון התוך-תאי ועיכוב מיני חמצן תגובתי. תריוגנולוגיה. 2010; 74(5):777–85. doi: 10.1016/j.theriogenology.2010.04.002 PMID: 20537699.

17. Das ZC, Gupta MK, Uhm SJ, Lee HT. תוספת של אינסולין-טרנספרין-סלניום למדיום תרבית העובר משפרת את ההתפתחות החוץ גופית של עוברי חזירים. זיגוטה. 2014; 22(3):411–8. doi: 10. 1017/S0967199412000731 PMID: 23506698.

18. פארק ES, הוואנג WS, ג'אנג ג'י, צ'ו ג'יי קיי, קאנג SK, לי לפנה"ס ואחרים. שכיחות אפופטוזיס בעוברי שיבוט ושיפור ההתפתחות על ידי טיפול בתאים סומטיים תורמים עם מעכבי אפופטוזיס פוטטיביים. רבייה והתפתחות מולקולרית. 2004; 68(1):65–71. doi: 10.1002/mrd.20046 PMID: 15039949.

19. Jang G, Park ES, Cho JK, Bhuiyan MM, Lee BC, Kang SK, et al. התפתחות עובר קדם-צמחית ושכיחות של אפופטוזיס בלסטומרים בעוברי העברה גרעינית של תאי סומטיים של תאי שור משוחזרים עם תאים תורמים בתרבית ארוכת טווח. תריוגנולוגיה. 2004; 62(3–4):512–21. doi: 10.1016/j. theriogenology.2003.11.022 PMID: 15226007.

20. Uhm SJ, Gupta MK, Yang JH, Lee SH, Lee HT. סלניום משפר את היכולת ההתפתחותית ומפחית אפופטוזיס אצל פרתנוטים חזיריים. רבייה והתפתחות מולקולרית. 2007; 74 (11):1386–94. doi: 10.1002/mrd.20701 PMID: 17342738.

21. ג'ונג YW, Hossein MS, Bhandari DP, קים YW, קים JH, פארק SW, ואחרים. ההשפעות של סלניום טרנספרין-טרנספרין אינסולין בנוזל זקיקים מוגדר וחזירי בתוספת מדיה IVM על הפריה חוץ גופית ועל ייצור עוברים SCNT. מדע הרבייה של בעלי חיים. 2008; 106(1–2):13–24. doi: 10.1016/j.anireprosci. 2007.03.021 PMID: 17482776.

22. קאנג JT, קו OJ, קוון DK, פארק HJ, ג'אנג ג'י, קאנג SK, ואחרים. השפעות של מלטונין על הבשלה חוץ גופית של ביצית חזירית וביטוי של RNA של קולטן מלטונין בתאי קומולוס וגרנולוזה. כתב עת לחקר האצטרובל. 2009; 46(1):22–8. doi: 10.1111/j.1600-079X.2008.00602.x PMID: 18494781.

23. Ozawa M, Nagai T, Fahrudin M, Karja NW, Kaneko H, Noguchi J, et al. הוספת גלוטתיון או תיאורדוקסין למדיום תרבית מפחיתה את מצב החמצן מחדש התוך-תאי של עוברי IVM/IVF חזיריים, וכתוצאה מכך התפתחות משופרת לשלב הבלסטוציסט. רבייה והתפתחות מולקולרית. 2006; 73 (8):998–1007. doi: 10.1002/mrd.20533 PMID: 16700069.

24. קמפבל KH. שקילות גרעינית, העברה גרעינית ומחזור התא. שיבוט. 1999; 1(1):3– 15. doi:10.1089/15204559950020058 PMID: 16218826.

25. Boquest AC, Day BN, Prather RS. ניתוח מחזור התאים הציטומטריים של זרימה של תאי פיברובלסט עובריים בתרבית. ביולוגיה של רבייה. 1999; 60(4):1013–9. PMID: 10084979.

26. Kasinathan P, Knott JG, Wang Z, ג'רי DJ, Robl JM. ייצור עגלים מפיברובלסטים G1. טבע ביוטכנולוגיה. 2001; 19(12):1176–8. doi: 10.1038/nbt1201-1176 PMID: 11731789.

27. Urakawa M, Ideta A, Sawada T, Aoyagi Y. בחינה של שיטת סנכרון מחזור תאים שונה והעברה גרעינית של בקר באמצעות תאים פיברובלסטים מסונכרנים בשלב G1 מוקדם. תריוגנולוגיה. 2004; 62(3–4):714–28. doi: 10.1016/j.theriogenology.2003.11.024 PMID: 15226025.

28. מיאמוטו K, הושינו Y, Minami N, Yamada M, Imai H. השפעות סנכרון מחזור התאים של התורם על התפתחות עוברית וסינתזת DNA בעוברי העברה גרעינית חזירית. כתב העת של רבייה והתפתחות. 2007; 53(2):237–46. PMID: 17132911.

29. Koo OJ, Hossein MS, Hong SG, Martinez-Conejero JA, Lee BC. סנכרון מחזור התאים של פיברובלסטים של אוזניים כלביות להעברה גרעינית של תאים סומטיים. זיגוטה. 2009; 17(1):37–43. doi: 10.1017/S096719940800498X PMID: 19032801.

30. צ'ו ג'יי קיי, לי לפנה"ס, פארק ג'י, לים ג'יי-אם, שין ש"י, קים קיי ואחרים. התפתחות של ביציות בקר המשוחזרות עם תאים סומטיים שונים של תורמים עם או בלי רעב בסרום. תריוגנולוגיה. 2002; 57(7):1819– 28. PMID: 12041686.

31. Kues WA, Carnwath JW, Paul D, Niemann H. סנכרון מחזור התא של פיברובלסטים עובריים חזיריים על ידי חסך בסרום יוזם צורה לא קונבנציונלית של אפופטוזיס. שיבוט ותאי גזע. 2002; 4 (3):231–43. doi: 10.1089/15362300260339511 PMID: 12398804.

32. צ'ו SR, אוק SA, יו ג'יי ג'יי, מוהאנה קומאר ב', צ'ו SY, רו ג'יי ג'יי. השפעות של מפגש, טיפול ברוסקוביטין ורעב בסרום על סנכרון מחזור התאים של פיברובלסטים עובריים בקר. רבייה בחיות בית = Zuchthygiene. 2005; 40(2):171–6. doi: 10.1111/j.1439-0531.2005.00577.x PMID: 15819970.

33. האשם MA, בהנדרי DP, קאנג SK, לי לפנה"ס, סוק HW. ניתוח מחזור התאים של גוראל בתרבית מבחנה (Naemorhedus caudatus) פיברובלסטים של עור בוגר. ביולוגיה של התא הבינלאומית. 2006; 30(9):698–703. doi: 10.1016/j.cellbi.2006.04.008 PMID: 16793292.

34. Goissis MD, Caetano HV, Marques MG, de Barros FR, Feitosa WB, Milazzotto MP, et al. השפעות של מחסור בסרום וציקלוהקסימיד על מחזור התאים של פיברובלסטים עובריים חזיריים במעבר נמוך וגבוה. רבייה בחיות בית = Zuchthygiene. 2007; 42(6):660–3. doi: 10.1111/j.1439-0531.2006. 00839.x PMID: 17976076.

35. ארודה AL, ויירה CJ, סוזה DG, אוליביירה RF, קסטיליו RO. Jacaranda cuspidifolia Mart. (Bignoniaceae) כסוכן אנטיבקטריאלי. כתב עת של מזון רפואי. 2011; 14(12):1604–8. doi: 10.1089/jmf. 2010.0251 PMID: 21663482.

36. אווילה JG, דה ליברנט JG, מרטינז A, מרטינז G, Munoz JL, Arciniegas A, et al. אופן הפעולה של Buddleja cordata verbascoside נגד סטפילוקוקוס אאורוס. כתב עת לאתנופרמקולוגיה. 1999; 66 (1):75–8. PMID: 10432210.

37. Pendota SC, Aderogba MA, Ndhlala AR, Van Staden J. פעילויות אנטי-מיקרוביאליות ואצטילכולין אסטראז של תמציות עלים של Buddleja salviifolia (L.) Lam. תמציות עלים ותרכובות מבודדות. כתב עת לאתנופרמקולוגיה. 2013; 148(2):515–20. doi: 10.1016/j.jep.2013.04.047 PMID: 23665162.

38. Wu SC, Chen RJ, Lee KW, Tung CC, Lin WP, Yi P. Angioembolization כחלופה יעילה להמוסטאזיס בדימום טראומה מסכן חיים בלתי ניתן לתיקון: מקרה מבחן. כתב העת האמריקאי לרפואת חירום. 2007; 25(8):988 ה1–5. doi: 10.1016/j.ajem.2007.02.039 PMID: 17920998.

39. לי BC, קים MK, ג'אנג ג'י, הו HJ, יודה F, קים HJ, ואחרים. כלבים משובטים מתאים סומטיים בוגרים. טבע.2005; 436(7051):641. doi: 10.1038/436641a PMID: 16079832.

40. Hase M, Hori T, Kawakami E, Tsutsui T. Plasma LH ורמות פרוגסטרון לפני ואחרי הביוץ ותצפית על זקיקי השחלות על ידי מערכת אבחון אולטרה-סאונד בכלבים. כתב העת למדעי הרפואה הווטרינרית / האגודה היפנית למדעי הווטרינריה. 2000; 62(3):243–8. PMID: 10770594.

41. צ'וי YH, לי לפנה"ס, לים JM, קאנג SK, הוואנג WS. אופטימיזציה של מדיום תרבית לעוברי בקר משובטים והשפעתה על תוצאות ההריון והלידה. תריוגנולוגיה. 2002; 58(6):1187–97. PMID: 12240921.

42. קים KS, ג'ונג HW, פארק CK, הא ג'יי. התאמת סמני AFLP לחקר הקשרים הגנטיים בין כלבים ילידים קוריאנים. גנים ומערכות גנטיות. 2001; 76(4):243–50. PMID: 11732633.

43. Oback B, Wells D. תאים תורמים לשיבוט גרעיני: רבים נקראים, אך מעטים נבחרים. שיבוט ותאי גזע. 2002; 4(2):147–68. doi: 10.1089/153623002320253328 PMID: 12171706.

44. Lai L, Park KW, Cheong HT, Kuhholzer B, Samuel M, Bonk A, et al. חזיר מהונדס מבטא את החלבון הפלואורסצנטי הירוק המשופר המיוצר על ידי העברה גרעינית באמצעות פיברובלסטים שטופלו בקולכיצין כתאים תורמים. רבייה והתפתחות מולקולרית. 2002; 62(3):300–6. doi: 10.1002/mrd.10146 PMID: 12112592.

45. שופרו י, ראובינוף בי. סנכרון מחזור התא לצורך העברה גרעינית של תאים סומטיים (SCNT). שיטות בביולוגיה מולקולרית. 2011; 761:239–47. doi: 10.1007/978-1-61779-182-6_16 PMID: 21755453.

46. ג'אנג F, ג'יה Z, דנג Z, Wei Y, Zheng R, Yu L. אפנון במבחנה של פעילות הטלומראז, אורך הטלומרים ומחזור התאים בתאי MKN45 על ידי ורבסקוזה. פלנטה מדיקה. 2002; 68(2):115–8. doi: 10.1055/ s-2002-20255 PMID: 11859459.

47. לי KW, קים HJ, לי YS, פארק HJ, צ'וי JW, הא ג'יי, ואחרים. Acteoside מעכב את התפשטות תאי הלוקמיה HL-60 פרומיאלוציטיים אנושיים באמצעות גרימת עצירת מחזור התא בשלב G0/G1 והתמיינות למונוציטים. קרצינוגנזה. 2007; 28(9):1928–36. doi: 10.1093/Marcin/bgm126 PMID: 17634406.

48. Kitagawa Y, Suzuki K, Yoneda A, Watanabe T. השפעות של ריכוז חמצן ונוגדי חמצון על היכולת ההתפתחותית במבחנה, ייצור מיני חמצן תגובתי (ROS), ופיצול DNA בעוברים חזיריים. תריוגנולוגיה. 2004; 62(7):1186–97. doi: 10.1016/j.theriogenology.2004.01.011 PMID: 15325546.

49. Yoneda A, Suzuki K, Mori T, Ueda J, Watanabe T. השפעות של דליפידציה וריכוז חמצן על התפתחות חוץ גופית של עוברים חזיריים. כתב העת של רבייה והתפתחות. 2004; 50 (3):287–95. PMID: 15226593.

50. Guerin P, El Mouatassim S, Menezo Y. עקה חמצונית והגנה מפני מיני חמצן תגובתי בעובר שלפני ההשתלה ובסביבתו. עדכון רבייה אנושית. 2001; 7(2):175– 89. PMID: 11284661.

51. יאנג HW, הוואנג KJ, קוון HC, קים HS, צ'וי KW, הו KS. זיהוי מיני חמצן תגובתי (ROS) ואפופטוזיס בעוברים מקוטעים אנושיים. רבייה אנושית. 1998; 13(4):998– 1002. PMID: 9619561.

52. Khammanit R, Chantakru S, Kitiyanant Y, Saikhun J. השפעת הרעבה בסרום ומעכבים כימיים על סנכרון מחזור התא של פיברובלסטים עוריים כלבים. תריוגנולוגיה. 2008; 70(1):27–34. doi: 10. 1016/j.theriogenology.2008.02.015 PMID: 18423836.