סקירה של מוצרים טבעיים פעילים ביולוגית מצמח מדברי Cistanche Tubulosa

איש קשר: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 דוא"ל:audrey.hu@wecistanche.com

Toshio Morikawa,*,a,b Haihui Xie,c,d Yingni Pan,a,e Kiyofumi Ninomiya,a,b Dan Yuan,e Xiaoguang Jia,c,f Masayuki Yoshikawa,a,c Seikou Nakamura,c

1. הקדמה

הסוגCistancheמורכבת מצמחים טפיליים השייכים למשפחת ה- Orobanchaceae. הם נצמדים בדרך כלל לשורשים של צמחים מקבעים בחול, כגון Haloxylon ammodendron, Haloxylon persicum, Kalidium foliated, Tamarix, וכו'.Cistancheמינים מופצים בעיקר בארצות צחיחות ומדבריות ברחבי אירואסיה וצפון אפריקה, כגון סין, איראן, הודו ומונגוליה.1-6) ביניהם, סין חוותה דיבור יבשתי חמור, במיוחד באזורים הצפון-מערביים, בפרט, הפנימית. אזורים אוטונומיים מונגוליה ושינג'יאנג.7,8) בניית יערות מחסה נחשבת לאחת הדרכים הטובות ביותר להפוך מדבריות לנווה מדבר כך שהמארחים המשותפים שלצמחי סיסטאנצ'הנחשבים כמועמדים מתאימים לתיקון חול. השילוב של טפילCistancheצמחים עם המארחים שלהם יכולים להוות לא רק סיכוי מזהיר לפיתוח נווה מדבר, אלא גם לתוצאות כלכליות יוצאות דופן, מכיוון ש-Cistanches Herba (Rou Cong-Rong בסינית), הגבעולים העסיסיים המיובשים שלצמחי סיסטאנצ'הלְרַבּוֹתCistanche deserticolaYC MA, Cistanche tubulosa (SCHENK) WIGHT,Cistancheסלסה (CA MEY) G. BECK, וCistancheSinensis BECK, הוא אחד מצמחי המאכל והמרפא המפורסמים ביותר.7-10) ביניהם, הגבעולים היבשים של סי.סלסה,C. deserticola, וC. tubulosaרשומים כסם גולמי "Nikujuyou" בפרמקופאה היפנית.7) באשר לפרמקופאה הסינית, הגבעולים המיובשים שלC.deserticolaוC. tubulosaמורשים,8) ומינים לא רשמיים אחרים, C. salsa ו-C. Sinensis משמשים גם באזורים מסוימים בסין עקב מחסור במשאבים.4)Cistanchesהרבה מהווה את אחד הצמחים היקרים ביותר ברפואה הסינית המסורתית (TCM), אשר משלים את תפקודי הכליות, מחזקת את תמצית הדם, ומרטיבה את המעי הגס לשחרור צואה. אחד מעולה ואף קיבל את השם "ג'ינסנג של המדבר" או "ג'ינסנג מדברי". 2-4) יתר על כן, הוא נרשם לעתים קרובות לטיפול במחלות כליות כרוניות, אימפוטנציה, אי פוריות נשית, מחלת לוקורריאה חולנית, מטרורגיה שופעת, ו עצירות סנילי ב-TCM.3)Cistanchesהרבה דיווחה על פעילויות תרופתיות צפויות לטיפול בהפרעות נוירודגנרטיביות11–14) כגון מחלת אלצהיימר,15) מחלת פרקינסון,16–18) ודמנציה של כלי דם.19) יתרה מכך, Cistanche Herba נמצא בשימוש נרחב כתוסף מזון בריאות ביפן, סין, ומדינות דרום מזרח אסיה.20) במהלך מחקרי האפיון שלנו על מרכיבים ביו-אקטיביים מצמחי מרפא שמקורם באזור האוטונומי שינג'יאנג ובאזורים שכנים בסין,21-30) דיווחנו על מחקר ממצה על מקורותC. tubulosa.21–26) כאן נסקור את המחקרים שלנו על מרכיבים כימיים מהגבעולים שלC. tubulosaכמו גם הפעילות הביולוגית שלהם.

2. מרכיבים כימיים

הגבעולים שלC. tubulosa(Kanka-nikujuyou ביפנית; איור 1), שהוא אחד הצמחים המורשים כמוCistanchesהרבה הן בפרמקופאות היפניות והן הסיניות, 7,8) שימשו באופן מסורתי לטיפול באימפוטנציה, סטריליות, לומבגו וחולשת גוף.1) בעבר, מספר השפעות טיפוליות של התמצית מגבעוליC. tubulosaדווחו במודלים ניסיוניים של בעלי חיים כגון אנטי-היפרגליקמיה,31)היפוליפידמי,31)היפוכולסטרולמית,32) ואנטי-דלקתיות,33) ושיפור של קוליטיס הנגרמת על ידי דקסטרן סולפט (DSS).34) יתרה מכך, מספר אירידואידים, מונוטרפנואידים, פנילאתנואידים וליגננים בודדו מסינית ופקיסטניתC. tubulosa.35–39) במהלך המחקרים הכימיים שלנו על הגבעולים שלC. tubulosa, דיווחנו בעבר על בידוד וקביעת מבנה של זנים של מונוטרפנואידים כולל אירידואידים, פנילתנואידים גליקוזידים ואסטרים סוכר קשורים, ובודדים אחרים כגון גליקוזידים פנילפרופנואידים, גליקוזידים של ליגנין, גליקוזידים אלקיל ואלכוהול סוכר.21-25)

דווח במודלים ניסיוניים של בעלי חיים כגון אנטי-היפרגליקמיה,31)היפוליפידמי,31)היפוכולסטרולמית,32) ואנטי-דלקתיות,33) ושיפור של קוליטיס הנגרמת על ידי דקסטרן סולפט (DSS).34) יתרה מכך, מספר אירידואידים, מונוטרפנואידים. , phenylethanoids ו-lignans בודדו מסינית ופקיסטניתC. tubulosa.35–39) במהלך המחקרים הכימיים שלנו על הגבעולים שלC. tubulosa,דיווחנו בעבר על הבידוד וקביעת המבנה של זנים של מונוטרפנואידים כולל אירידואידים, גליקוזידים פנילתנואידים, אסטרים של סוכר קשורים, ובודדים אחרים כגון גליקוזידים פניל-פרופנואידים, גליקוזידים של ליגנין, גליקוזידים אלקיל ואלכוהול סוכר.21-25)

3. מונוטרפנואידים

3.1. מונוטרפנואידים כולל אירידואידים

אירידואידים הם סוג של מונוטרפנואיד שנבנה מ10-שלד הפחמן של יחידות בונה איזופרן בעלות מערכת טבעות ציקלופנטנופיראן. תת-המעמד, סטרואידים, מבוקעים מהטבעת הציקרופרופן או הפיראן. אירידואידים וסקואיזידואידים נמצאים לרוב בצמחי מרפא כגליקוזידים, בעיקר גלוקוזידים. צמחי מרפא אלו שימשו באופן מסורתי כחומרי מחזק מר, תרופות הרגעה, משתנים, תרופות נגד שיעול, תרופות לפצעים, הפרעות עצבים ועור, השמנת יתר, אפילפסיה, אי שפיות, הרעלת נחשים, סוכרת והפרעות שומנים בדם. מספר סקירות על אירידואידים וסקואירידואידים המופיעים באופן טבעי כיסו היבטים של המגוון הכימי40-46) וזנים של פעילויות ביולוגיות ותרופתיות כגון אנטיבקטריאלי, אנטי פטרייתי, אנטי סרטני, אנטי סוכרת, אנטי היפר שומנים בדם, אנטי אוסטאופורוזיס, נוגד חמצון, אנטי פרוטוזואאלי, הפטופרוטק. , פעילויות אימונומודולטוריות, נוירו-פרוטקטיביות ונוירוגניות.44-50). במבנה שלנו מחקרים זיהוי והבהרה של מרכיבים אירידואידים מגזעיC. tubulosa, שבעה גליקוזידים אירידואידים חדשים ותשעה ידועים כגון קנקנוזידים A21) (1), B21) (2), C21) (3), D21) (4), L25) (5), M25) (6) ו-N25) (7), חומצה מוסאנוסידית51) (8), חומצה גניפוסידית51) (9), 8-חומצה אפילוגנית39) (10), 8-חומצה אפידאוקסילוגנית51) (11), איזואקטאוזיד78) (39), cis- acteoside79,80) (40), 2'-acetylacteoside78) (41), decaffeoylacteoside81) (42), tubuloside A78) (43), cistanche tubulosides B 82) (44) ו-B 82) (45), arenarioside83) (46) ), wie-gluroside51) (12), antirrhide52) (13), ajugol51) (14), bartsioside51) (15), ו-6-deoxycatalpol51) (16) וחדש ושלושה אירידואידים ידועים, kankanol21) ( 17), argyol53) (18), cistanin54) (19), ו-cistanchlorin54) (20) הושגו (תרשים 1). לגבי מונוטרפן גליקוזידים אליפטיים, שלוש תרכובות חדשות וארבע ידועות כגון קנקנוזידים E21) (21), O25) (22) ו-P25) (23), (2E,6Z)-8- -D-glucopyranosyloxy{{75 }},6- דימתיל-2,6-חומצה אוקטדצנונית55) (24), (2E,6E)-3,7-דימתיל-8- הידרוקסיאוקטדיאן -1-yl-O- -D-glucopyranoside56) (25), 8-הידרוקסי-יגרניול 8-O- -D-glucopyranoside57) (26), ובטולאלבוסיד A58) (27) התקבלו גם מהגבעולים של C. tubulosa (תרשים 2). ביניהם, הגליקוזידים הנורירידואידים, גלוקוזיד (12), ברציוסיד (15) ו-6-deoxycatalpol (16), בודדו כמרכיבים העיקריים מחומר צמחי זה.21,25)

3.2. פנילתנואידים גליקוזידים וסוכר קשור

אסטרים פנילתנואידים גליקוזידים הם סוג של תרכובת פנולית המאופיינת במבנה -glucopyranoside הנושאת חלק הידרוקסיפנילאתיל כאגליקון. תרכובות אלו מורכבות לרוב ממספר קבוצות אציל כגון חומצה קינמית, חומצה p-קומרית, חומצה קפאית, חומצה פרולית, היא חומצה פרולית וכו', ו/או סוכרים שונים (למשל, רמנוזה, קסילוזה, אפיוז, ארבינוז וכו'. ) מחובר לשארית הגלוקוז דרך קישורים אסטרים או גליקוזידיים, בהתאמה. הם נמצאו בעיקר במשפחות Scrophulariaceae, Oleaceae, Plantaginaceae, Lamiaceae ו- Orobanchaceae.59–61) ביניהם, echinacoside62,63) (28) ו-acteoside64–67) (29, הנקראים גם verbascoside, kusaginine), ו נציגים של הגליקוזידים פנילתנואידים שנחקרו היטב ודווחו כבעלי מספר תכונות ביו-אקטיביות חשובות כמו נוגד חמצון, הגנה על עצבים, ניקוי רדיקלי תחמוצת החנקן, פעילויות אנטי-פטוטוקסיות ואנטי-אוסטיאופורוטיות.2-4,6,59-61,68-77 ) כמרכיבים של פנילתנואיד גליקוזיד מהגבעולים של C. tubulosa, בודדנו את האכינאקוסיד78) (28) ואקטאוזיד78) (29) כמרכיבים העיקריים יחד עם תשע תרכובות חדשות ו-17 ידועות כגון קנקנוזידים F22) ( 30), G22) (31), H1 23) (32), H2 23) (33), I23) (34), J1 24) (35), J{ {36}}) (36), K1 24) (37), ו-K2 24) (38), isoacteoside78) (39), cis-acteoside79,80) (40), 2′ -acetylacteoside78) (41), decaffeoylacteoside81) (42), tubuloside A78) (43), cistan tubuloside B1 82) (44) ו-B2 82) (45), arenarioside83) (46), wiedemanninoside C84) (47), tubuloside B78) (48), syringalide A 3'-O- -L-rhamnopyranoside85) (49), cistantubuloside A82) (50), cistanoside G81) (51), salidroside81) (52), campneoside I86,87) ( 53), isocampneoside I88) (54), ו-campneoside II86,87) (55). יתר על כן, התקבלו גם אסטר סוכר חדש וידוע, קנקנוזה22 (56) ו-Cistanoside F89 (57) (תרשים 3).

3.3. מבודדים אחרים

כפי שמוצג בתרשים 4, הבידודים האחרים הושגו כגון: (i) פנילפרופנואידים: coniferin90) (58), syringin90) (59), ואלדהיד סינאפי 4-O- - D-glucopyranoside91) (60), (ii) ליגננים: ( בתוספת )-pinoresinol O- - D-glucopyranoside92) (61), eucommin A93) (62), isoeucommin94) (63), ו- (plus )-syringaresinol O{{ 20}}D-glucopyranoside95) (64), (iii) אלקיל גליקוזידים: (2R,3R)-בוטאן-2,3-דיול 2-O- - D-glucopyranoside96 ) (65), מזו-בוטן-2,3-דיול 2-O- - D-glucopyranoside96) (66), אתיל-D-glucopyranoside96) (67), וכן 3-מתיל-בוטן-1-ol -D-glucopyranoside96) (68), ו-(iv) אלכוהול סוכר: D-mannitol (69). מבין הבידודים, D-manni tol (69) נתן את תשואת הבידוד הגבוהה ביותר במחקר שלנו

4. פעילויות ביולוגיות

4.1. פעילות מרגיעה של כלי דם

ידוע היטב כי ריכוז גבוה של קטיון אשלגן (גבוה K פלוס) הנגרמת התכווצויות בשרירים חלקים הם תוצאה של עלייה ביון סידן תוך תאי (Ca2 פלוס), וחוסם תעלות סידן כגון ניפדיפין מעכב את תעלת הסידן התלויה במתח. , ובכך מעכבים התכווצויות ברצועות אבי העורקים מפושטות, אך הן מראים השפעות מעכבות חלשות על התכווצויות הנגרמות על ידי נוראדרנלין (NA).97) דיווחנו שמספר ססקוויטרפנואידים ודיאריל-הפטנואידים מבודדים מ- Zedoariae Rhizoma (Zingiberaceae) הראו השפעות על התכווצויות גבוהות של K. פלוס ברצועות אבי העורקים מבודדות של חולדה, בעוד שהן לא עכבו התכווצויות הנגרמות על ידי NA.98,99) לעומת זאת, הגליקוזידים הפנילאתנואידים העיקריים בגבעולים שלC. tubulosa,echinacoside (28) ו-acteoside (29), והבידודים הקשורים, צד לנקי F (30), isoacteoside (39), קנקנוזה (56) ו- cistanoside F (57), נמצאו כבעלי פעילות מרגיעת כלי דם הנגרמת על ידי התכווצויות NA ( טבלה 1), ואילו

הם לא עיכבו התכווצויות גבוהות שנגרמו מ-K פלוס22) (טבלה 2). ממצאים אלו הצביעו על כך שמרכיבים פעילים אלה מעכבים התכווצויות דרך תעלות סידן המופעלות על ידי קולטן, אך לא דרך תעלות סידן תלויות מתח. במיוחד, echinacoside (28) ואקטאוזיד (29) בעלי קבוצת 4'-O-caffeoyl בחלק 8-O- -D-glucopyranosyl עיכבו באופן משמעותי התכווצויות שנגרמו על ידי NA, תלוי זמן וריכוז, בעוד ש-isoacteoside (39) בעל קבוצת 6'-O-caffeoyl הראה פעילות חלשה יותר [echinacoside (28), acteoside (29) > צד isolate (39)]. יתר על כן, ההשפעות המרגיעות של אכינאקוסיד (28) ואקטאוזיד (29) נצפו בערך. 30 דקות לאחר הוספת NA בצורה שונה מזו של prazosin, אנטגוניסט לקולטן אדרנלין 1- (איור 2). יש ללמוד עוד יותר את מנגנוני הפעולה של התנהגות זו. 3.2. פעילות מגוננת על הכבד זיהום בנגיף הפטיטיס C וצריכה כרונית של אלכוהול הם גורמים עיקריים לפציעת כבד, שחמת וקרצינומה כבדית ברחבי העולם. ידוע כי גורם נמק גידול (TNF-) מתווך פגיעות באיברים באמצעות השראת תגובות דלקתיות תאיות. בכבד, ההשפעות הביולוגיות של TNF- היו מעורבות בפציעות כבד הקשורות לרעלני כבד, איסכמיה/פרפוזיה חוזרת, דלקת כבד נגיפית ומחלת כבד אלכוהולית או הפרעות הקשורות לאלכוהול. 100-102) לכן TNF- נחשב לגורם חשוב. מטרה בניסיון לגלות חומרים אנטי דלקתיים ומגנים על הכבד. המודל של D-galactosamine (D-GalN)/lipopolysaccharide (LPS) המושרה בכבד מוכר כמתפתח באמצעות תגובות אימונולוגיות.103) מודל זה גורם לפציעת כבד בשני שלבים. ראשית, הביטוי של מעכבי חלבוני אפופטוזיס (IAPs) מעוכב על ידי מתן D-GalN באמצעות דלדול של uridine triphosphate בהפטוציטים. שנית, מתווכים פרו-דלקתיים כגון תחמוצת החנקן (NO), מיני חמצן תגובתיים (ROS) ו-TNF- משתחררים ממקרופאגים המופעלים על ידי LPS (תאי קופפר). אפופטוזיס של הפטוציטים המושרה על ידי TNF- ממלא תפקיד חשוב בפגיעת כבד הנגרמת על ידי D-GalN/LPS.104) במחקרים הקודמים שלנו על תכונות הגנת הכבד של תרכובות המתקבלות ממשאבי טבע, דיווחנו כי sesquiterpenoids,105-108) diarylheptanoids,105 -108) ספונינים, 109) קומינים, 110) חומצה אמידים, 111-113) טריטרפנואידים, 114) לימונואידים, 115) וסטילבנואידים116) הפגינו השפעות הגנה משמעותיות מפני פציעות כבד שנגרמו על ידי D-GalN/LPS בעכברים. תמצית המתנול מהגבעולים שלC. tubulosaוהגליקוזידים הפנילאתנואידים העיקריים שלו, אכינאקוסיד (28), אקטאוזיד (29) ואיזואקטאוזיד (39), הראו השפעות מעכבות על העליות בסרום אספרטאט אמינוטרנסמינאז (AST) ו-alanine aminotransaminase (sALT), סמנים של פגיעה בכבד, המושרה על ידי D -GalN/LPS בעכברים23) (טבלה 3). יש לציין כי הבידודים הללו (28, 29 ו-39) היו שווים לכורכומין 117-119) שהתקבלו מכורכום (Curcuma longa) וחזקים יותר מסיליבין 120-124) שהתקבלו מגדילן חלב (Silybum marianum), שניהם מוכרים היטב. מוצרים להגנת הכבד המופיעים באופן טבעי. כדי לאפיין את המנגנונים האחראים לפעילות הגנונית על הכבד, נבדקו ההשפעות המעכבות של הבידודים על ציטוטוקסיות הנגרמת על ידי D-GalN בהפטוציטים של עכברים בתרבית ראשונית. באמצעות בדיקת חוץ גופית זו, דיווחנו בעבר על מספר מרכיבים פעילים ממשאבי הטבע הבאים כמו Curcuma zedoaria, 105–108) Anastatica hierochuntica, 125) Cyperus longus, 126) Erycibe expansa, 127) Angelica furcijuga, 110,128) Camelli Sedum sarmentosum, 130,131) Rhodiola sachalinensis, 132) Sinocrassula India, 133) Hedychium coronarium, 134) Piper Chaba, 111-113) Potentilla anserina, 114) Cassia auriculata, 1355) ו Shorea rorea. 116) לגבי המבודדים שלC. tubulosa, several phenylethanoid glycosides, echinacoside (28, IC50= 10.2 µM), acteoside (29, 4.6 µM), Lankan side G (31, 14.8 µM), isoacteoside (39, 5.3 µM), 2′-acetylacteoside (41, 4.8 µM), tubulosides A (43, 8.6 µM) and B (48, 14.6 µM), and syringalide A 3′-O-α-L-rhamnopyranoside (49, 71.2 µM), and lignans, (+)-pinoresinol O-β-D-glucopyranoside (61, 48.5 µM) and (+)-syringaresinol O-β-D-glucopyranoside (64, 98.4 µM) showed inhibitory activity, whereas none of the monoterpenoids including iridoid constituents led to a reduction in cytotoxicity at concentrations of up to 100 µM23) (Table 4). The hepatoprotective activities of phenylethanoid glycosides (28, 29, 31, 39, 41, 43, and 48) were greater than that of commercial silybin (IC50= 38.8 µM).115,116) Furthermore, the structural requirements of the phenylethanoid glycosides for hepatoprotective activity were: (i) the aglycone part was essential for activity [echinacoside (28) >> kankanose (56, > 100 µM); acteoside (29) >>cistanoside F (57, > 100 µM)]; (ii) האגליקון בעל קבוצת הדיהידרוקסי 3,4- הראה פעילות חזקה יותר מזו בעלת קבוצת 4-הידרוקסי [isoacteoside (39) > kankanoside G (31)]; (iii) החלק 6'-O- -D-glucopyranosyl הפחית את הפעילות [אקטאוזיד (29) > echinacoside (28); 2'-אצטילקטאוזיד (41) > tubuloside A (43)]; (iv) החלק 8-O- -D-glucopyranosyl בעל קבוצת 4'-O-caffeoyl הראה פעילות חזקה יותר מזה שיש לו קבוצת 6'-O-caffeoyl [אקטאוזיד (29) גדול מ- או שווה לאיזואקטאוזיד (39); 2'-אצטילקטאוזיד (41) > tubuloside B (48)]; ו-(v) הכנסת החלק 2'-O-acetyl הפחיתה את הפעילות [אקטאוזיד (29) גדול או שווה ל-2'-אצטילקטאוזיד (41); isoacteoside (39) > שולחן B (48)]. לאחר מכן, השפעות של תמצית המתנול מהגבעולים שלC. tubulosa and its principal phenylethanoid glycosides, echinacoside (28), acteoside (29), and isoacteoside (39), on NO and TNF-α production, as markers of macrophage activation in LPS-activated mouse peritoneal macrophages128) were examined. The methanol extract and these constituents (28, 29, and 39) showed neither NO nor TNF-α production inhibitory activities (IC50>100 µM, נתונים לא מוצגים).23) ממצא זה הוביל אותנו להציע שהם לא השפיעו על ייצור יתר של NO ו-TNF- ממקרופאגים המופעלים על ידי LPS. כדי להבהיר את ההשפעות על הרגישות של הפטוציטים ל-TNF-, הוערכה ירידה בכדאיות התא של תאי L929 רגישים ל-TNF- - המושרים על ידי TNF-. כפי שמוצג בטבלה 5, מספר פנילאתנואידים גליקוזידים, אכינאקוסיד (28, IC50= 31.1 µM), אקטאוזיד (29, 17.8 מיקרומטר), איזואקטאוזיד (39, 22.7 מיקרומטר), 2'-אצטילאקטאוזיד (41.7 מיקרומטר), 2'-אצטילאקטאוזיד (41.7 מיקרומטר). ), בצד השולחן A (43, 23.2 מיקרומטר), וציסטנטובולוסיד B1 (44, 21.4 מיקרומטר) הראו פעילות חזקה יחסית, שהייתה גדולה מזו של סיליבין (60.4 מיקרומטר). 23) בנוסף, נמצא כי הבידודים הבאים מפעילים משמעותית פעילות (עמ'< 0.01):="" kankanoside="" a="" (1,="" inhibition:="" 16.3="" ±="" 2.0%="" at="" 100="" µm),="" mussaenosidic="" acid="" (8,="" 44.7="" ±="" 8.7%),="" 8-epideoxyloganic="" acid="" (10,="" 10.7="" ±="" 0.4%),="" 8-hydroxy-geraniol="" 8-o-β-d-glucopyranoside="" (26,="" 21.3="" ±="" 2.4%),="" tubuloside="" b="" (48,="" 39.2="" ±="" 6.3%),="" syringalide="" a="" 3′-o-α-lrhamnopyranoside="" (49,="" 22.2="" ±="" 6.4%),="" cistan="" tubuloside="" a="" (50,="" 11.2="" ±="" 1.1%),="" and="" (+)-pinoresinol="" o-β-d-glucopyranoside="" (61,="" 22.3="" ±="" 1.6%).="" although="" their="" activities="" were="" weaker="" than="" those="" of="" the="" above-mentioned="" principle="" phenylethanoid="" glycosides,="" the="" main="" active="" constituents="" are="" considered="" to="" be="" echinacoside="" (28),="" acteoside="" (29),="" and="" isoacteoside="" (39),="" etc.="" the="" structural="" requirements="" of="" the="" phenylethanoid="" glycosides="" for="" their="" activity="" were:="" (i)="" the="" aglycone="" part="" was="" essential="" for="" activity="" [echinacoside="" (28)="">> kankanose (56, >100 µM)]; (ii) the aglycone having the 3,4-dihydroxy group showed stronger activity than that having the 4-hydroxy group [echinacoside (28) > cistantubuloside A (50, >100 µM); acteoside (29) > syringalide A 3′-O-α-L-rhamnopyranoside (49, >100 µM); isoacteoside (39) > kankanoside G (31, >100 µM)]; (iii) the 6′-O-β-D-glucopyranosyl moiety reduced the activity [acteoside (29) > echinacoside (28); 2′-acetylacteoside (41) ≥ tubuloside A (43)]; (iv) the 8-O-β-D-glucopyranosyl part having the 4′-O-caffeoyl group showed stronger activity than that having the 6′-O-caffeoryl group [acteoside (29) > isoacteoside (39); 2′-acetylacteoside (41) > tubuloside B (48, >100 מיקרומטר); ו-(v) הכנסת החלק 2'-O-אצטיל הפחיתה את הפעילות [אקטאוזיד (29) וטובולוזיד B (48) > 2'-אצטילקטאוזיד (41)]. דרישות אלו היו דומות לאלו שהוזכרו לעיל בנוגע להשפעות המעכבות על ציטוטוקסיות הנגרמת על ידי D-GalN בהפטוציטים של עכברים בתרבית ראשונית. ממצאים אלו מצביעים על כך שמנגנוני הפעולה האפשריים להשפעות ההגנה על הכבד של הגליקוזידים הפנילאתנואידים מגבעולים שלC. tubulosaהם: (i) ירידה בציטוטוקסיות הנגרמת על ידי D-GalN [echinacoside (28), אקטאוזיד (29), צד לנקי (31), איזואקטאוזיד (39), 2'-אצטילאקטאוזיד (41), וטובולוזידים A (43) ו-B (48)], ו-(ii) הפחתת הציטוטוקסיות המושרה על ידי TNF- - [echinacoside (28), acteoside (29), isoacteoside (39), 2'-acetylacteoside (41), tubuloside A (43) , ו-cistanche tubuloside B1 (44)]. ביניהם, נמצא כי הגליקוזידים הפנילאתנואידים העיקריים, אכינאקוסיד (28), אקטאוזיד (29) ואיזואקטאוזיד (39), מעכבים את העלייה ברמות AST ו- sALT בסרום במינונים של 25-100 מ"ג/ק"ג, לאוס (po). ) נגד פגיעה חריפה בכבד הנגרמת על ידי D-GalN/LPS ב

עכברים (vide ante), וההשפעות המעכבות הללו הוצעו כתלות בציטוטוקסיות הפחתת הנגרמת על ידי D GalN והפחתת הרגישות של הפטוציטים ל-TNF-. כפי שסוכם באיור 3, תוצאות אלו מצביעות על כך שמנגנוני הפעולה שונים מאלה של לא רק כורכומין וסיליבין אלא גם של piperine111-113) וטרנס-רזברטרול,116) אשר נחקרו כמוצרים טבעיים המגנים על הכבד במחקר הקודם שלנו. .

3.3. פעילות משפרת סובלנות לגלוקוז סוכרת מאופיינת בשכיחות גבוהה של מחלות לב וכלי דם, ונראה כי שליטה לקויה בהיפרגליקמיה משחקת תפקיד משמעותי בהתפתחות מחלות לב וכלי דם בסוכרת. יש יותר ויותר עדויות לכך שהמצב שלאחר הארוחה הוא גורם תורם חשוב להתפתחות טרשת עורקים. בסוכרת, השלב שלאחר הארוחה מאופיין בעלייה מהירה וגבוהה ברמות הגלוקוז בדם, והאפשרות שהעליות ההיפרגליקמיות הללו לאחר הארוחה עשויות להיות רלוונטיות לפתופיזיולוגיה של סיבוכי סוכרת מאוחרים זוכה לאחרונה לתשומת לב רבה. לכן שיפור היפרגליקמיה לאחר ארוחה עשוי להוות חלק מהאסטרטגיה למניעה וניהול של מחלות לב וכלי דם בסוכרת.136) דיווחנו בעבר כי מספר מועמדים לטיפול אנטי-סוכרתי הושגו ממשאבים טבעיים כגון Kochia scoparia, 137) Borassus

flabellifer, 138) Solanum lycocarpum, 139) Sinocrassula India, 140) Shorea roxburghii, 141) Helichrysum arenarium, 142) ו-Sala CIA reticulata, S. oblonga, ו-S. chinensis143-148) ב-postprandial glycemrated hyperloaded and / או דגמי עכברים. בניסויים אלה, ההשפעות של הגליקוזידים הפנילאתנואידים העיקריים מגזעיC. tubulosa, echinacoside (28) ו-acteoside (29), על העלייה שלאחר הארוחה ברמות הגלוקוז בדם בעכברים העמוסים בעמילן נבדקו. כפי שמוצג בטבלה 6, שני הגליקוזידים של פנילאתנואידים (28 ו-29) דיכאו באופן משמעותי עליות ברמות הגלוקוז בדם במינונים של 250-500 מ"ג/ק"ג, po 26. לאחר מכן, ההשפעות של אכינאקוסיד (28) ואקטאוזיד (29) על הגלוקוז סבילות הוערכה בעכברים טעוני עמילן לאחר שבועיים של מתן רציף. כפי שמוצג בטבלה 7, שני הגליקוזידים של פנילתנואידים (28 ו-29) נמצאו כמשפרים באופן משמעותי את סבילות הגלוקוז ללא שינויים משמעותיים במשקל הגוף ובצריכת המזון (לא מוצגים נתונים). תוצאות אלו מצביעות על כך שאכינאקוסיד (28) ואקטאוזיד (29) עשויים להיות יעילים בדיכוי עליית גלוקוז לאחר ארוחה ושיפור סבילות לגלוקוז.26) כדי לאפיין את אופן הפעולה של דיכוי פעילות העלאת הגלוקוז לאחר ארוחה, השפעות מעכבות אנזימטיות של המבודדים מה- נובעים שלC. tubulosaבמעי הדק של חולדה הוערכו גלוקוזידאזות כגון מלטאז וסוקראז. מספר גליקוזידים של פנילאתנואידים, אכינאקוסיד (28, IC50= 149 ו-174 מיקרומטר נגד מלטאז וסוקראז, בהתאמה), אקטאוזיד (29, 188 ו-152 מיקרומטר), קנקנוזידים J1 (35, 130 ו-242 מיקרומטר, ו-J236, ו-J236) 131 ו

228 µM), isoacteoside (39, 70.4 ו-152 µM), וטובולוזידים A (43, 200 ו-220 µM) ו-B (48, 88.2 ו-175 µM) הראו פעילות לא מעכבת אנזימטית, בעוד המבודדים הראו פעילות בריכוזים של עד 300 µM26) (טבלה 8). יתר על כן, הפעילות שלהם הייתה פחותה בהרבה מאלה של הגורמים החיוביים כגון אקרבוז בשימוש קליני (1.7 ו-1.5 מיקרומטר) 147,149-151) ואחד מעכבי הטבעת החזקים ביותר, סלאצינול (6.0 ו-1.3 מיקרומטר), 147,149,151), ו-neokotalanol (1.6 ו-1.5 µM).147,149,150) כפי שמוצג בטבלה 9, פעילויות מעכבות אנזימטיות של אכינאקוסיד (28), אקטאוזיד (29), איזואקטאוזיד (39) וטובולוזידים A (43) ו-B (48) על שונות - גלוקוזידאזות שמקורן בשמרים (Saccharomyces

נצפו גם חיידקים (Bacillus stearothermophilus) ומעי דק אנושי. באשר לערכי ה-IC50 עבור מלטאז של המעי הדק האנושי, הפנילאתנואידים הללו (28, 29, 39, 43, 48, IC50= 117–163 µM) היו הרבה פחות פעילים מאקרבוז (15.2 µM).26) על הבסיס. מהעדויות הנזכרות לעיל, התרומה של פעילות מעכבת הגלוקוזידאז של הגליקוזידים פנילטנואידים נמצאה כמגבילה כדרך הפעולה של ההשפעות המדכאות על עליית גלוקוז לאחר הארוחה וההשפעות המשפרות את סבילות הגלוקוז. כדרך הפעולה האפשרית, דיווחנו לאחרונה כי נצפתה השפעות מעכבות של אכינאקוסיד (28) ואקטאוזיד (29) על ספיגה מתווכת של גלוקוז 1-תלויה בנתרן.152) אופן פעולה מפורט יותר צריך ללמוד עוד.

אלדוזה רדוקטאז הוא אנזים מפתח במסלול הפוליול המזרז את הפחתת הגלוקוז לסורביטול. ברקמה רגילה, לאלדוז רדוקטאז יש זיקה מצע נמוכה לגלוקוז, ולכן ההמרה של גלוקוז לסורביטול מזורזת מעט. עם זאת, בסוכרת, הזמינות המוגברת של גלוקוז ברקמות שאינן רגישות לאינסולין כגון עדשה, עצב ורשתית מובילה להיווצרות מוגברת של סורביטול דרך מסלול הפוליול. סורביטול אינו מתפזר בקלות על פני קרומי התא וההצטברות התוך תאית של סורביטול הייתה מעורבת בסיבוכים הכרוניים של סוכרת כגון קטרקט, נוירופתיה ורטינופתיה. ממצאים אלה מצביעים על כך שלמעכב אלדוזה רדוקטאז עשוי להיות יכולת למנוע ו/או לטפל במספר סיבוכים סוכרתיים.153) כמעכבי אלדוזה רדוקטאז חזקים ממשאבי טבע, זיהינו מספר פלבנואידים, 154-160) stilbenoids,141,154 ) טרפנואידים,161) ונגזרות חומצה כינית.159) כפי שמוצג בטבלה 8, מספר פנילאתנואידים גליקוזידים, echinacoside (28, IC{{10}}.1 µM), אקטאוזיד (29, 1.2 µM), קנקנוסיד J1 (35, 9.3 מיקרומטר), איזואקטאוזיד (39, 4.6 מיקרומטר), 2'-אצטילקטאוזיד (41, 0.071 מיקרומטר), טובולוזידים A (43, 8.8 מיקרומטר) ו-B ( 48, 4.0 µM), syringalide A 3'-O- -L-rhamnopyranoside (49, 1.1 µM), ו-campneoside I (53, 0.53 µM) הראו פעילות מעכבת אלדוזה רדוקטאז של עכברוש. במיוחד, 2′-אצטילקטאוזיד (41) היה החזק והמקביל ביותר לזה של epalrestat (0.072 µM), מעכב אלדוזה רדוקטאז בשימוש קליני.

4. מסקנה

בסקירה זו, המחקרים האחרונים שלנו על מרכיבים כימיים מהגבעולים שלC. tubulosaכמו גם הפעילויות הביולוגיות שלהם, כגון תרופות להרפיית כלי דם, הגנה על הכבד וסבילות לגלוקוז, סוכמו. באשר למרכיבים הכימיים, 20 אידיוטים (1–20) כולל שמונה חדשים, קנקנוזידים A–D (1–4), L–N (5–7), וקנקנול (17), שבעה אליפטיים גלוקוזידים מונוטרפנואידים (21-27) כולל שלושה חדשים, קנקנוזידים E (21), O (22) ו-P (23), 28 גליקוזידים פנילתנואידים (28-55) כולל תשעה חדשים, קנקנוזידים F (30), G ( 31), H1 (32), H2 (33), I (34), J1 (35), J2 (36), K1 (37) ו-K2 (38), שני אסטרים סוכר (56 ו-57) כולל חדש אחד, קנקנוזה (57), שלושה גליקוזידים של פניל ​​פרופנואידים (58-60), ארבעה גליקוזידים של ליגנין (61-64), ארבעה גליקוזידים אלקיל (65-68) ואלכוהול סוכר (69) בודדו מתמצית המתנול. זוהו העקרונות הפעילים של כלי הדם, כמה גליקוזידים של פנילאתנואידים כמו אכינאקוסיד (28) ואקטאוזיד (29), והבידודים הקשורים, קנקנוסיד F (30), איזואקטאוזיד (39), קנקנוז (56) וציסטנוסיד F (57). . הם עוררו התכווצויות הנגרמות על ידי NA באבי העורקים החזה מבודדים של חולדה, אך לא עיכבו התכווצויות גבוהות שנגרמו מ-K פלוס. ממצאים אלו מצביעים על כך שמרכיבים פעילים אלו מעכבים את ההתכווצויות באמצעות תעלת סידן המופעלת על ידי קולטן, אך לא באמצעות תעלת סידן תלוית מתח. במיוחד, אכינאקוסיד (28) ואקטאוזיד (29) עיכבו באופן משמעותי את התכווצויות הנגרמות על ידי NA, זמן וריכוז (10-100 מיקרומטר), באופן שונה מזה של פרזוזין. הגליקוזידים הפנילאתנואידים העיקריים, אכינאקוסיד (28), אקטאוזיד (29) ואיזואקטאוזיד (39), הפגינו אפקט מגונן על הכבד כנגד פגיעה חריפה בכבד שגרמה ל-D-GalN/LPS בעכברים במינונים של 25-100 מ"ג. ק"ג, po כדי לאפיין את מנגנוני הפעולה, הבידודים נבדקו מחקרים במבחנה בהערכת השפעתם על (i) ציטוטוקסיות הנגרמת על ידי D-GalN בהפטוציטים עכברים מתורבתים ראשונית: (ii) ייצור NO ו/או TNF- המושרה על ידי LPS ב מקרופאגים פריטוניאליים של עכברים: ו-(iii) TNF- -השראת ציטוטוקסיות בתאי L929. מנגנוני הפעולה של הגליקוזידים הפנילאתנואידים העיקריים הללו (28, 29 ו-39) היו תלויים בירידה בציטוטוקסיות הנגרמת על ידי D-GalN ובהפחתת הרגישות של הפטוציטים ל-TNF-. יתר על כן, נמצא כי echinacoside (28) ו-acteoside (29) מדכאים עלייה בגלוקוז לאחר ארוחה ומשפרים את סבילות הגלוקוז על ידי מודלים של עכברים עמוסים בעמילן במינון יחיד ו2-שבוע. יתר על כן, אחד ממרכיבי הפנילאתנואיד גליקוזיד, 2'-אצטילקטאוזיד (41, IC50= 0.071 µM) הראה פעילות מעכבת אלדוזה רדוקטאז חזקה, שהייתה שוות ערך לזו של epalrestat בשימוש קליני (0.072 µM). בנוסף, אופיינו מספר דרישות מבניות של הגליקוזידים של פנילאתנואידים לפעילותם הביולוגית הנ"ל. בהתבסס על העדויות שנאספו,C. tubulosaומרכיביו, בפרט echinacoside (28) ואקטאוזיד (29), עשויים להיות שימושיים לטיפול במחלות אורח חיים שונות כגון יתר לחץ דם, סוכרת, הפטיטיס וכו'.

תודותעבודה זו נתמכה בחלקה על ידי משרד החינוך, התרבות, הספורט, המדע והטכנולוגיה (MEXT)-התוכנית הנתמכת עבור קרן המחקר האסטרטגי באוניברסיטאות פרטיות, 2014–2018, יפן (S1411037, TM), כמו גם ה-JSPS KAKENHI, יפן [מספרי מענק 18K06726 (TM), 18K06739 (KN) ו-16K08313 (OM)].

ניגוד ענייניםהמחברים אינם מצהירים על ניגוד עניינים.