מחקר התערבות של פנילאתיל אלכוהול גליקוזידסין ציסטאנצ'ה על תסמונת פרימנופאוזה מודל בעלי חיים Ⅲ

ניסוי 2

השפעה שלCistanche פנילטנול גליקוזידעל עכברגיל המעברמודל חומרים ושיטות

חומרים ניסיוניים

1.1 חיות ניסוי

עכברים בדרגת SPF, מיני קונמינג, נקבה, 20-25g, מסופקים על ידי Wuhan Institute of Biological Products. מספר תעודה: 42000400000611; מספר תעודת מעבדה SYXK (Yu) 2010-001. 1.2 תרופות ניסיוניות

Cistanche deserticola phenylethanol glycoside הוכן לפי שיטת ניסוי 1, והתכולה הגיעה ל-66.47%. קפסולת Gengnian'an, מרכיבים: Rehmannia glutinosa, Rehmannia glutinosa, Alisma, Ophiopogon japonicus, Scrophulariaceae, קליפת אדמונית, Poria cocos, אם הפנינה, curculigo, Schisandra chinensis, מגנטיט, Polygonum multiflorum multiflorum, polygonum multiflorum multiflorum, polygonum multiflorum. . פונקציות ואינדיקציות: להזין את היין ולהכניע את היאנג, להקל על צרות ולהרגיע את הנפש. משמש לגלי חום והזעה בגיל המעבר, סחרחורת, טינטון, עצבנות ונדודי שינה. מפרטים: 0.3 גרם לקפסולה. שימוש ומינון: אוראלי, 3 כמוסות בכל פעם, 3 פעמים ביום. יצרן: Shanxi Tianxing Pharmaceutical Co., Ltd. מספר אצווה ייצור: 121104. מספר אישור: National Drug Approval No. Z14021848.

איזופלבונים סויה וויטמין E רכות, רשימת מרכיבים: אבקת איזופלבונים סויה, ויטמין E, שמן חמניות, ג'לטין, גליצרין, מים, טרטרזין, טיטניום דו חמצני. מרכיבים ותכולה איקוניים: כל 100 גרם מכיל 55.2 מ"ג של איזופלבונים סויה (מחושבים כגניסטאין) ו-608.5 מ"ג של ויטמין E. פונקציות בריאותיות: הגברת צפיפות העצם. הוראות ומינון: קח כמוסה אחת 2 פעמים ביום עם מים חמים. מפרט: 500mg×100 כמוסות. יצרן: Weihai Ziguang Biotechnology Development Co., Ltd. מספר אצווה ייצור: 13070302. מספר אישור: National Food Health G20080032.

תוצאה 1 השפעה על פעילויות אוטונומיות במודל הפרימנופאוזה של עכברים

התוצאות של מבחן הפעילות האוטונומית של עכברים בכל קבוצת ניסוי מוצגות בטבלה 2 ובאיור 2.

1.3 ריאגנטים ניסיוניים

נתרן קרבוקסימיל תאית, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Manufacturing Co., Ltd., מספר אצווה: 20120418; פניצילין נתרן להזרקה, North China Pharmaceutical Co., Ltd., מפרט: 4 מיליון יחידות, מספר אצווה ייצור: c1206807; תמיסת פורמלדהיד (כיתה אנליטית), Yantai City Shuangshuang Chemical Co., Ltd., מספר אצווה ייצור: 20130902; הזרקת 0.9% נתרן כלורי, Chenxin Pharmaceutical Co., Ltd.; מפרט: 250 מ"ל, מספר אצווה ייצור: 1301265303;

כלורלי הידרט, Tianjin Guangfu Fine Chemical Research Institute, מספר אצווה 20120827; ערכת זיהוי עכבר E2 ELISA, חברת מו"פ, מספר אצווה: 20131001A; ערכת זיהוי עכבר T ELISA, חברת מו"פ, מספר אצווה: 20131001A; ערכת בדיקה לגילוי עכבר LH ELISA, חברת מו"פ, מספר אצווה: 20131001A;

ערכת זיהוי עכבר FSH ELISA, חברת מו"פ, מספר אצווה: 20131001A. 1.4 מכשירים ניסויים

משקל אלקטרוני, Shanghai Minqiao Medical Instrument Co., Ltd., דגם: JY601; מאזן אנליטי אלקטרוני, חברת Ohaus (Shanghai), דגם: AR1140/C; צנטריפוגה שולחנית במהירות גבוהה, Shanghai Anting Scientific Instrument Factory, דגם: TGL-168; אמבט מים תרמוסטטי חשמלי, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., דגם: HWS12; בודק פעילות אוטונומית של עכבר, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., דגם: ZZ-6; מד הימנעות כהה מעכבר, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., דגם: BA-200; צנטריפוגה מקורר במהירות גבוהה, Zhongjia Branch of HKUST Innovation Co., Ltd., דגם: KDC-160HR; פיפטה מתכווננת, Shanghai Leibo Analytical Instrument Co., Ltd.;

קורא Microplate, חברת BIO-RAD האמריקאית, דגם: 680;

מיקרוסקופ חשמלי, חברת OLYMPUS יפן, דגם: BX61

כמה זמן לוקח ל-CISTANCHE לעבוד?

2 שיטות ניסוי

2.1 דוגמנות וניהול תרופות

שיטת דוגמנות: קח 100 עכברי קונמינג נקבות במשקל 23-25g, בחר באקראי 12 עכברים כקבוצה הריקה, ובצע ניתוח מדומה, והעכברים הנותרים משמשים ליצירת מודלים של גיל המעבר . לאחר השקילה, העכברים הורדמו על ידי הזרקה תוך צפקית של 10% הידרט כלורלי (0.03 מ"ל/10 גרם) וקובעו בתנוחת הבטן. לאחר מכן, השיער נחתך מהחלק האחורי של העכבר מתחת לצלע האחרונה בצומת הקו האמצעי ובמרחק של כ-1 ס"מ מהחלק החיצוני של עמוד השדרה, ולאחר מכן חיטוי וחתך. העור ושרירי הגב נפתחים כ-0.5-1ס"מ, וניתן לראות מסת שומן מבריק לבן חלבי בשדה החתך, והשחלה מוטבעת בו. השתמשו בפינצטה קטנה כדי לאחוז בעדינות את מסת השומן ולשלוף אותה מהחתך, להפריד את מסת השומן, ותראו קבוצה של שחלות דקות, לא סדירות, צהובות-אדומות. בעת החיתוך יש לקשור תחילה את החצוצרות (כולל שומן) מתחת לשחלות עם חוטים דקים, ולאחר מכן להסיר את השחלות. לאחר הניתוח מחזירים את קרני הרחם אל חלל הבטן, תופרים את השרירים והעור ומוציאים את שתי השחלות באותו אופן. לאחר הניתוח, החיות גודלו בקפידה ופניצילין 200,000 u/kg (0.1 מ"ל כל אחד) הוזרק לשריר כדי למנוע זיהום, פעם ביום למשך 3 ימים רצופים. בדיקת כתם נרתיק בוצעה בכל עכבר 5 ימים לאחר הניתוח, פעם ביום במשך 5 ימים רצופים כדי לקבוע האם השחלות הוסרו לחלוטין. העכברים שהראו תגובה אסטרואידית במריחה הושלכו, ו-72 עכברים שסורסו לחלוטין חולקו באופן אקראי ושווה ל-6 קבוצות למטרות ניסוי, כלומר קבוצת מודל,קבוצת קפסולות Gengniang'an, קבוצת קפסולות רכות איזופלבון סויה, וקבוצה גדולה. , מינונים בינוניים וקטנים שלCistanche פנילטנול גליקוזידקְבוּצָה. שיטת הכנה: {{0}}.5% CMC שיטת הכנה: שקלו 4 גרם נתרן קרבוקסימטיל תאית וערבבו אותם עם מים מזוקקים לקבלת 800מ"ל. המינונים של מינונים גדולים, בינוניים וקטנים של קבוצת Cistanche phenylethanol glycoside היו 20{{30}}mg/kg, 100mg/kg ו-50mg/kg בהתאמה (נפח מתן 0.1ml/ 10 גרם). שיטת הכנה: שוקלים 2000 מ"ג, 1000 מ"ג ו-500 מ"ג של Cistanche phenylethanoid glycoside בהתאמה, ממיסים אותו עם כמות קטנה של 0.5% CMC, ואז מתקנים את הנפח ל-100 מ"ל, מערבבים היטב, וזהו. קפסולות Gengniangan (675 מ"ג/ק"ג, מעורבבות עם מים מזוקקים ל-67.5 מ"ג/מ"ל, 0.1 מ"ל/10 גרם, שווה ערך לפי 15 מהמינון הקליני); שיטת הכנה: קח 9 כמוסות Gengniangan, השתמש תחילה בכמות קטנה של 0.5% CMC Dissolve, לאחר מכן התאם את הנפח ל-40 מ"ל, וערבב היטב כדי לקבל את המינון של תרחיף כמוסות Gengnianan (675 מ"ג/ק"ג). קפסולה רכה ויטמין E של איזופלבון פולי סויה (250 מ"ג/ק"ג, השתמש במים מזוקקים להכנת 25 מ"ג/מ"ל, 0.1 מ"ל/10 גרם, שווה ערך לפי 15 מהמינון הקליני); שיטת הכנה: קח 2 כמוסות איזופלבון פולי סויה, השתמש תחילה בכמות קטנה של 0.5 Dissolve %CMC, לאחר מכן התאם את הנפח ל-40 מ"ל, וערבב היטב כדי לקבל את המינון של תרחיף קפסולת איזופלבון סויה (250 מ"ג/ק"ג).

שיטת אחסון: לקרר, לשמור על חום במהלך השימוש.

שיטת מתן: לבעלי חיים בכל קבוצה ניתנו תרופות מתאימות ביום העשירי לאחר הניתוח. לקבוצת הקפסולות Gengnian'an ניתנה דרך הפה תרחיף כמוסה Gengniang'an 675 מ"ג·ק"ג-1, ולקבוצת הקפסולות הרכות של איזופלבון סויה ניתנה דרך הפה 250 מ"ג·ק"ג-1 תרחיף כמוסה רכה של איזופלבון סויה, וכן גדול, בינוני ומנות קטנות של בנזן Cistancheהיו מנוהלים. קבוצת האתנול גליקוזידים ניתנה דרך הפה במינונים גדולים, בינוניים וקטנים של Cistanche phenylethanoid glycoside 200mg·kg-1, 10mg·kg-1, 50mg·kg{ {5}}, 0.1 מ"ל/10 גרם בהתאמה. הקבוצה הריקה וקבוצת המודל טופלו באותו נפח של תמיסת CMC של 0.5% פעם ביום במשך 21 ימים רצופים.

ערכת זיהוי עכבר FSH ELISA, חברת מו"פ, מספר אצווה: 20131001A. 1.4 מכשירים ניסויים

משקל אלקטרוני, Shanghai Minqiao Medical Instrument Co., Ltd., דגם: JY601; מאזן אנליטי אלקטרוני, חברת Ohaus (Shanghai), דגם: AR1140/C; צנטריפוגה שולחנית במהירות גבוהה, Shanghai Anting Scientific Instrument Factory, דגם: TGL-168 ; אמבט מים תרמוסטטי חשמלי, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., דגם: HWS12; בודק פעילות אוטונומית של עכבר, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., דגם: ZZ-6; מד הימנעות כהה מעכבר, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., דגם: BA-200; צנטריפוגה מקורר במהירות גבוהה, Zhongjia Branch of HKUST Innovation Co., Ltd., דגם: KDC-160HR; פיפטה מתכווננת, Shanghai Leibo Analytical Instrument Co., Ltd.;

קורא Microplate, חברת BIO-RAD האמריקאית, דגם: 680;

מיקרוסקופ חשמלי, חברת OLYMPUS יפן, דגם: BX61

2 שיטות ניסוי

2.1 דוגמנות ומתן תרופות

שיטת דוגמנות: קח 100 עכברי קונמינג נקבות במשקל 23-25g, בחר באקראי 12 עכברים כקבוצה הריקה, ובצע ניתוח מדומה, והעכברים הנותרים משמשים ליצירת מודלים של גיל המעבר . לאחר השקילה, העכברים הורדמו על ידי הזרקה תוך צפקית של 10% הידרט כלורלי (0.03 מ"ל/10 גרם) וקובעו בתנוחת הבטן. לאחר מכן, השיער נחתך מהחלק האחורי של העכבר מתחת לצלע האחרונה בצומת הקו האמצעי ובמרחק של כ-1 ס"מ מהחלק החיצוני של עמוד השדרה, ולאחר מכן חיטוי וחתך. העור ושרירי הגב נפתחים כ-0.5-1ס"מ, וניתן לראות מסת שומן מבריק לבן חלבי בשדה החתך, והשחלה מוטבעת בו. השתמשו בפינצטה קטנה כדי לאחוז בעדינות את מסת השומן ולשלוף אותה מהחתך, להפריד את מסת השומן, ותראו קבוצה של שחלות דקות, לא סדירות, צהובות-אדומות. בעת החיתוך יש לקשור תחילה את החצוצרות (כולל שומן) מתחת לשחלות עם חוטים דקים, ולאחר מכן להסיר את השחלות. לאחר הניתוח מחזירים את קרני הרחם אל חלל הבטן, תופרים את השרירים והעור ומוציאים את שתי השחלות באותו אופן. לאחר הניתוח, החיות גודלו בקפידה ופניצילין 200,000 u/kg (0.1 מ"ל כל אחד) הוזרק לשריר כדי למנוע זיהום, פעם ביום למשך 3 ימים רצופים. בדיקת כתם נרתיק בוצעה בכל עכבר 5 ימים לאחר הניתוח, פעם ביום במשך 5 ימים רצופים כדי לקבוע האם השחלות הוסרו לחלוטין. העכברים שהראו תגובת אסטרואי במריחה הושלכו, ו-72 עכברים שסורסו לחלוטין חולקו באופן אקראי ושווה ל-6 קבוצות למטרות ניסוי, כלומר קבוצת מודל, קבוצת קפסולות Gengniang'an, קבוצת קפסולות רכות איזופלבון סויה וקבוצה גדולה. , מינונים בינוניים וקטנים שלCistanche פנילטנול גליקוזידקְבוּצָה. שיטת הכנה: 0.5% CMC שיטת הכנה: שקלו 4 גרם נתרן קרבוקסימטיל תאית וערבבו אותם עם מים מזוקקים לקבלת 800 מ"ל. המינונים של מינונים גדולים, בינוניים וקטנים שלCistanche פנילטנול גליקוזידהקבוצה היו 200mg/kg, 10{{20}}mg/kg ו-50mg/kg בהתאמה (נפח ניהול 0.1 מ"ל/10 גרם). שיטת הכנה: שוקלים 2000 מ"ג, 1000 מ"ג ו-500 מ"ג של Cistanche phenylethanoid glycoside בהתאמה, ממיסים אותו עם כמות קטנה של 0.5% CMC, ואז מתקנים את הנפח ל-100 מ"ל, מערבבים היטב, וזהו. קפסולות Gengniangan (675 מ"ג/ק"ג, מעורבבות עם מים מזוקקים ל-67.5 מ"ג/מ"ל, 0.1 מ"ל/10 גרם, שווה ערך לפי 15 מהמינון הקליני); שיטת הכנה: קח 9 כמוסות Gengniangan, השתמש תחילה בכמות קטנה של 0.5% CMC Dissolve, לאחר מכן התאם את הנפח ל-40 מ"ל, וערבב היטב כדי לקבל את המינון של תרחיף כמוסות Gengnianan (675 מ"ג/ק"ג). קפסולה רכה ויטמין E של איזופלבון פולי סויה (250 מ"ג/ק"ג, השתמש במים מזוקקים להכנת 25 מ"ג/מ"ל, 0.1 מ"ל/10 גרם, שווה ערך לפי 15 מהמינון הקליני); שיטת הכנה: קח 2 כמוסות איזופלבון פולי סויה, השתמש תחילה בכמות קטנה של 0.5 Dissolve %CMC, לאחר מכן התאם את הנפח ל-40 מ"ל, וערבב היטב כדי לקבל את המינון של תרחיף קפסולת איזופלבון סויה (250 מ"ג/ק"ג).

שיטת אחסון: לקרר, לשמור על חום במהלך השימוש.

שיטת ניהול: לבעלי חיים בכל קבוצה ניתנו תרופות מתאימות ביום ה-10 לאחר הניתוח. קבוצת הקפסולות Gengnian'an קיבלה דרך הפה תרחיף Gengniang'an כמוסה 675 מ"ג·ק"ג-1, ולקבוצת הקפסולות הרכות של סויה איזופלבון ניתנה דרך הפה 250 מ"ג·ק"ג-1 איזופלבון סויה השעיית קפסולה רכה, ומנות גדולות, בינוניות וקטנות של בנזן Cistanche ניתנו. קבוצת האתנול גליקוזידים ניתנה דרך הפה במינונים גדולים, בינוניים וקטנים של Cistanche phenylethanoid glycoside 200mg·kg-1, 10mg·kg-1, 50mg·kg-1, 0.1ml/10g בהתאמה. הקבוצה הריקה וקבוצת המודל טופלו באותו נפח של תמיסת CMC של 0.5% פעם ביום במשך 21 ימים רצופים.

2.2 פריטי תצפית ושיטות זיהוי

מספר הפעילויות הספונטניות של עכברים בכל קבוצה תוך 5 דקות נמדד ביום ה-18 למתן. זמן האחזור של העכברים שנכנסו לחדר החושך בפעם הראשונה ומספר הזעזועים החשמליים שהתקבלו תוך 5 דקות מכניסתם לחדר החושך נמדדו ביום ה-19 עד ה-20 למתן. שעתיים לאחר המנה האחרונה (12 שעות ללא מזון או מים), העכברים נשקלו, גלגלי העיניים שלהם הוסרו, דם נאסף, הסרום הופרד ותכולת E2, T, LH ו-FSH בסרום. נמדד; העכברים הוקרבו לאחר מכן על ידי נקע בצוואר הרחם וניתחו. , הסר את התימוס, הטחול ורקמת הרחם, שקלו את משקלם הרטוב וחשבו את מדד האיברים (איבר אינדקס איברים=משקל איברים רטוב מ"ג/משקל עכבר g), ולאחר מכן הסר את בלוטת יותרת המוח; לתקן את התימוס, הטחול, הרחם ובלוטת יותרת המוח על תמיסת פורמלין 10%, מוטבעת בפרפין, חתוכה, כתמת HE, והשינויים המורפולוגיים של הרקמה של כל קבוצה נצפו במיקרוסקופ אור.

2.2.1 מבחן על מספר הפעילויות העצמאיות

העכברים בכל קבוצה הוכנסו למנגנון הפעילות הרצונית, תחילה הותאמו לסביבה למשך דקה אחת, ולאחר מכן נמדד מספר הפעילויות הרצוניות תוך 5 דקות.

2.2.2 מבחן הימנעות מחושך

הכניסו את העכברים בכל קבוצה לקופסת הבדיקה כאשר זנבותיהם פונים אל הפתח הקטן אל חדר החושך, וערכו אימון. לאחר 24 שעות, תקופת החביון של העכברים שנכנסו לחדר החושך בפעם הראשונה ומספר הזעזועים החשמליים שהתקבלו תוך 5 דקות לאחר הכניסה לחדר החושך נמדדו מחדש.

2.2.3 שיטת קביעת ערכה

השג דגימות בסרום: השתמש במבחנות ללא פירוגנים ואנדוטוקסינים. הימנע מכל גירוי תאים במהלך הניתוח. לאחר איסוף הדם, צנטריפוגה אותו ב-3000 סל"ד למשך 10 דקות כדי להפריד במהירות ובזהירות בין הסרום לתאי הדם האדומים. שיטת בדיקת ערכת זיהוי ELISA אסטרדיול עכברים (E2) ELISA: הוצא את הרצועות הנדרשות משקית נייר האלומיניום שעבר איזון בטמפרטורת החדר למשך 20 דקות, ואטום את הרצועות הנותרות בשקית אטימה עצמית, והחזר אותן ל-4 מעלות. . הגדר בארות סטנדרטיות ובארות מדגם, והוסף 50 μL של תקנים בריכוזים שונים לכל באר סטנדרטית. תחילה, הוסף 10 μL מהדגימה לבדיקה לתוך באר הדגימה, ולאחר מכן הוסף 40 μL של דילול דגימה (כלומר, הדגימה מדוללת 5 פעמים); אל תוסיף אותו לבאר הריקה. פרט לבאר הריקה, הוסף 100 μL של נוגדן זיהוי שכותרתו חזרת פרוקסידאז לכל באר של הבאר הסטנדרטית ובדוק היטב, ואטום את התגובה היטב עם סרט איטום. דגירה באמבט מים של 37 מעלות או באינקובטור למשך 60 דקות. זורקים את הנוזל, מייבשים על נייר סופג, ממלאים כל שקע בתמיסת כביסה ומניחים לעמוד למשך דקה. מנערים את נוזל הכביסה, מייבשים על נייר סופג וחוזרים על שטיפת הצלחת 5 פעמים. תחילה הוסף 50 μL כל אחד מהמצעים A ו-B לכל באר, ודגירה ב-37 מעלות בחושך למשך 15 דקות. הוצא את צלחת האנזים, הוסף 50 μL של תמיסת עצור לכל באר, ותוך 15 דקות, מדוד את ערך הספיגה (ערך OD) של כל באר באורך גל של 450 ננומטר. לפי ריכוז התוצר הסטנדרטי וערך ה-OD המתאים, צייר את עקומת רגרסיית המוצר הסטנדרטית, וחשב את ערך הריכוז של כל דגימה לפי משוואת העקומה. הריכוז הסופי הוא הריכוז הנמדד בפועל כפול מקדם הדילול. ביניהם, הריכוזים של מוצרים סטנדרטיים (S0-S5) הם 0, 4, 8, 16, 32 ו-64 pmol/L. הריכוזים של ערכת זיהוי העכבר (עכבר) טסטוסטרון (T) ELISA תקן (S0-55) הם 0, 50, 100, 200, 400 ו-800pg/mL;

הריכוזים של ערכת הזיהוי של העכבר (עכבר) הורמון luteinizing (LH) ELISA (S{0}}) הם 0, 0.5, 1, 2, 4, 8mIU/mL;

הריכוזים של העכבר (עכבר) הורמון מגרה זקיקים (FSH) ELISA זיהוי ערכת תקן (S0-55) הם 0, 5, 10, 20, 40 ו-80mIU/mL.

2.3 שיטות עיבוד סטטיסטיות

לניתוח נתונים, נעשה שימוש בחבילת סטטיסטיקה רפואית SPSS17.0 לעיבוד סטטיסטי של נתונים. נתוני המדידה הובעו כממוצע ± סטיית תקן (-x±s). ניתוח השונות בכיוון אחד שימש להשוואה בין קבוצות. שיטת ה-LSD שימשה לבדיקת הומוגניות של שונות. , מבחן Games-Howell שימש עבור שונות לא אחידה, ומבחן Ridit שימש עבור נתוני ציונים.

איור 3 השפעת ה-Cistanche phenylethanol glycoside על התקופה הסמויה של ניסוי הימנעות מחושך במודל גיל המעבר של עכברים

איור 4 איור 4 ההשפעה של Cistanche phenylethanol glycoside על מספר זעזועים חשמליים בניסוי הימנעות מחושך של מודל העכבר בגיל המעבר. ניתן לראות מטבלה 3 ואיורים 3~4 שבהשוואה לקבוצה הריקה, תקופת הדגירה ומספר הזעזועים החשמליים של העכברים בקבוצת המודל הופחתו באופן משמעותי (P<0.01), reflecting the decline in memory in the mouse perimenopausal model. Compared with the model group, Gengnianan, soybean isoflavones, and large and medium doses of Cistanche phenylethanoid glycosides could significantly increase the latency of the dark avoidance test in mice, reduce the number of electric shocks (P<0.01), and improve the memory of mice.

3 השפעות על אינדקס איברים במודל פרימנופאוזה של עכברים

מדדי התימוס, הטחול והרחם של עכברים בכל קבוצת ניסוי מוצגים בטבלה 4 ובאיור 5.

כפי שניתן לראות מטבלה 4 ואיור 5, בהשוואה לקבוצה הריקה, אינדקס הרחם של העכברים בקבוצת המודל היה נמוך משמעותית (P<0.01), indicating that removal of the ovaries caused uterine atrophy in the perimenopausal model mice, and removal of the ovaries resulted in insufficient estrogen secretion. Causes immune organ atrophy in perimenopausal mice. Compared with the model group, soy isoflavones, Gengnianan, large and medium doses of Cistanche phenylethanol glycoside can significantly improve the thymus, spleen and uterine index (P<0.01), and low dose Cistanche phenylethanol glycoside can significantly improve the perimenopausal model. Mouse uterine index (P<0.05). 4 Effects on serum sex hormone levels in mouse perimenopausal model

תוכן של E2, T, FSH ו-LH בסרום של עכברים בכל קבוצה. ראה טבלאות 5~6 ואיורים 6~9. ניתן לראות מטבלאות 5~6 ואיורים 6~9 שבהשוואה לקבוצה הריקה, הרמות של E2 ו-T בסרום של עכברים בקבוצת המודל ירדו באופן משמעותי (P<0.01), and the levels of LH and FSH were significantly increased (P<0.01). , indicating that removal of ovaries leads to disorders of sex hormone levels in the serum of perimenopausal model mice and the perimenopausal mouse model was successfully replicated. Compared with the model group, each administration group can significantly reduce the elevated LH level in serum (P<0.01); large and medium doses of Cistanche phenylethanol glycoside, Gengniangan, and soybean isoflavones can significantly increase the levels of perimenopausal mice. E2 and T levels in the serum of the early-stage model (P<0.01) and reduced elevated FSH and LH levels in the serum. Low-dose Cistanche phenylethanol glycoside can significantly increase serum E2 levels and reduce serum FSH levels (P<0.05); low-dose Cistanche phenylethanoid glycoside has a tendency to increase serum T levels.

4 השפעות על רמות הורמוני המין בסרום במודל גיל המעבר של עכברים

תוכן של E2, T, FSH ו-LH בסרום של עכברים בכל קבוצה. ראה טבלאות 5~6 ואיורים 6~9.

ניתן לראות מטבלאות 5~6 ואיורים 6~9 שבהשוואה לקבוצה הריקה, הרמות של E2 ו-T בסרום של עכברים בקבוצת המודל ירדו באופן משמעותי (P<0.01), and the levels of LH and FSH were significantly increased (P< 0.01), indicating that removal of ovaries leads to disorder of sex hormone levels in the serum of perimenopausal model mice, and the perimenopausal mouse model was successfully replicated. Compared with the model group, each administration group can significantly reduce the elevated LH level in serum (P<0.01); large and medium doses of Cistanche deserticola phenylethanol glycoside, Gengniannian, and soybean isoflavones can significantly reduce the level of LH in mice. E2 and T levels in serum of perimenopausal model (P<0.01) and reduced elevated FSH and LH levels in serum. Low-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly increase serum E2 levels and reduce serum FSH levels (P<0.05); low-dose Cistanche deserticola phenylethanoid glycoside has a tendency to increase serum T levels. 5. Effects on organ tissue morphology in perimenopausal model mice

תוצאות התצפית הפתולוגיות וההיסטולוגיות של הרחם, התימוס, הטחול ובלוטת יותרת המוח של עכברים בכל קבוצת ניסוי הן כדלקמן. התמונות הפתולוגיות מוצגות בנספח 1 עבור התמונות הפתולוגיות של עכברים בגיל המעבר.

5.1 השפעה על מורפולוגיה של רקמת הרחם של עכברים מדגם פרימנופאוזה

בהתאם לדרגות השונות של השינויים באנדומטריום, בבלוטות ובשריר הרחם של עכברים בכל קבוצת ניסויים, נעשה שימוש בסטנדרטים כמותיים למחצה כדי לחלק את מורפולוגיה של הרקמה הפתולוגית לארבע רמות. הרחם של העכברים בכל קבוצת ניסויים נמדד. תוצאות התצפית מוצגות בטבלה 7. טבלה 7 השפעת Cistanche deserticola phenylethanol glycoside על שינויים פתולוגיים ברחם בעכברים מודל פרימנופאוזה יחידה: בלבד

"-" תאי אפיתל רירית הרחם, הבלוטות, השריר והסרוסה כולם תקינים; "+" תאי האפיתל והבלוטות של רירית הרחם מתנוונים, והשריר והסרוסה תקינים; "++" אפיתל רירית הרחם התאים והבלוטות מנוונים חלקית, שכבת השריר מנוונת מעט, והסרוזה תקינה; "+++" תאי אפיתל ובלוטות רירית הרחם מנוונים באופן משמעותי, והסרוסה תקינה.

לאחר בדיקת Ridit, ניתן לראות מהטבלה לעיל שבהשוואה לקבוצה הריקה, הרחם של עכברים בקבוצת המודל הראה נגעי רקמה פתולוגיים משמעותיים (P<0.01). Compared with the model group, soy isoflavone vitamin E soft capsules, Gengnianan capsules, and high-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly improve the uterine pathological tissue lesions of mice (P<0.01), and medium-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can Significantly improved uterine pathological tissue lesions in mice (P<0.05). 5.2 Effect on thymus and spleen tissue morphology in mouse perimenopausal model

השתמש במיקרומטר כדי למדוד את עובי החלקים העבים והצרים ביותר של קליפת התימוס של כל עכבר בכל קבוצת ניסוי כדי לקבל את הממוצע; השתמש במיקרומטר כדי למקם את קו הבסיס על קשרית הטחול, ולמדוד את שני העוביים כשהעורק המרכזי הוא המרכז. עובי גושי הטחול משני הצדדים חושב וממוצע; התוצאות מוצגות בטבלה 8 ובאיור 10.

טבלה 8 השפעות של Cistanche deserticola phenylethanol glycoside על שינויים פתולוגיים של תימוס וטחול בעכברים מודל פרימנופאוזה (-x±s)

כפי שניתן לראות מטבלה 8 ואיור 10, בהשוואה לקבוצה הריקה, עובי קליפת התימוס ונפח קשריות הטחול בקבוצת המודל הופחתו באופן משמעותי (P<0.01), indicating that the thymus and spleen volumes atrophied after the perimenopausal model was created in mice. Compared with the model group, high-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly thicken the thymic cortex (P<0.01), and medium-dose Cistanche deserticola phenylethanoid glycoside can significantly thicken the thymic cortex (P<0.05). Each medication group could significantly increase the volume of splenic nodules. 5.3 Effect on pituitary tissue morphology in mouse perimenopausal model

שדה הראייה בהגדלה גבוהה מכסה שטח של 10000 מיקרומטר

2. מדדו את מספר התאים הבזופילים ותאי יותרת המוח הקדמיים במסגרת המיקרו-מלבנית. התוצאות מוצגות בטבלה 9 ובאיורים 11-12.

ניתן לראות מטבלה 9 ואיורים 11-12 שבהשוואה לקבוצה הריקה, מספר התאים הבזופילים ותאי יותרת המוח הקדמיים בקבוצת המודל הופחת באופן משמעותי (P<0.01), indicating that after the perimenopausal model was created in mice, secretion of The cellular source of gonadotropins is reduced. Compared with the model group, each medication group could significantly increase the number of pituitary basophil cells (P<0.01). Except for the low-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside group, all other medication groups could significantly increase the number of anterior pituitary cells (P<0.01). P<0.01).