תמצית Herba Cistanche משפרת את יצירת ATP מיטוכונדריאלי בלבבות חולדה ובתאי H9c2
Mar 04, 2022
איש קשר: אודרי הוaudrey.hu@wecistanche.com
הוי יאן לאונג וקאם מינג קו
כדי לצטט מאמר זה: Hoi Yan Leung & Kam Ming Ko (2008) Herba Cistanche Extract Enhances Mitochondrial ATP Generation in Rat Hearts and H9c2 Cells, Pharmaceutical Biology, 46:6, 418-424, DOI: 10.1080/1388025080
תַקצִיר
כדי לחקור את הבסיס התרופתי של פעולת ה"יאנג-ממריץ" של צמחי סיסטאנצ'ה [הצמח השלם המיובש של Cistanche deserticola YC Ma (Orobanchaceae)], ברפואה הסינית, ההשפעות של תמצית המתנול של Herba Cistanche על יכולת יצירת ATP המיטוכונדריאלית היו. נבדק באמצעות מודל לב של עכברוש לשעבר ובדיקת תאי H9c2 באתרו. טיפול בתמצית Herba Cistanche הגביר את יכולת יצירת ATP המיטוכונדריאלית של שריר הלב באופן תלוי מינון בחולדות, כפי שהוערך על ידי מדידה חוץ גופית. הגירוי של יכולת יצירת ATP היה קשור לשיפור מקביל בהובלת אלקטרונים מיטוכונדריאלית הנתמך על ידי פירובט אך לא סוקסינאט. טיפול ב-Herba Cistanche הגביר גם את פעילויות המיטוכונדריה של שריר הלב וקומפלקס I ו-Complex III, כאשר מידת הגירוי בפעילות קומפלקס I הייתה גדולה יותר. טיפול ב-Herba Cistanche יצר עלייה תלויה במינון ובזמן ביכולת יצירת ATP המיטוכונדריאלי בתאי H9c2. התוצאות מצביעות על כך שטיפול ב-Herba Cistanche יכול להגביר את יצירת ATP המיטוכונדריאלי בלבבות של חולדה ex vivo ו-H9c2 באתרם, אולי באמצעות שיפור זרחן חמצוני.
מילות מפתח:ATP, Cistanche deserticola, תאי H9c2, לב, מיטוכונדריה.
מבוא
"המרצת יאנג", המגלמת את השיפור הכללי של תפקוד הגוף ברפואה הסינית, כרוכה בשימוש באנרגיה בהנעת תהליכים ביוכימיים שונים. בהקשר זה, ATP, שהוא המטבע האוניברסלי של אנרגיה בתדלוק תפקוד תאי, נוצר בעיקר באמצעות זרחון חמצוני במיטוכונדריה. הנחנו כי לצמחי מרפא "יאנג" יש את היכולת להגביר את יכולת ייצור ה-ATP המיטוכונדריאלי (Ko et al., 2004). זה נתמך על ידי הממצא האחרון שלנו שעשבי תיבול סיניים "ממריצים יאנג" אך לא "מזיני יין" יכולים לשפר את יכולת יצירת ה-ATP של שריר הלב בלבבות עכברים ex vivo (Ko et al., 2006). Herba Cistanche, הצמח הטפיל השלם המיובש (למעט הפרח) של Cistanche deserticola YC Ma (Orobanchaceae), מסווג כצמח ממריץ 'יאנג' ברפואה הסינית המסורתית (Chen, 1998), והוא מופיע כצמח הפופולרי ביותר. מרכיב במספר תכשירי פטנטים סיניים המשמשים להמרצת יאנג'. בסין וביפן נעשה שימוש נרחב ב-Herba Cistanche לטיפול במגוון תסמיני מחסור ביאנג. מחקרים פרמקולוגיים הצביעו על כך ש-Herba Cistanche יכולה לנקות רדיקלים חופשיים (Xiong et al., 1996), לייצר תרופות הרגעה (Lu, 1998), אנטי-הזדקנות (Lee et al., 1990), השפעות אנטי-נוצפיות ואנטי-דלקתיות (Lin et al., 2002 ), ולשפר את תפקוד החיסון (Wu et al., 2005). המרכיב הפעיל העיקרי של Herba Cistanche הוא phenylethanoid glycosides (Ouyang et al., 2003), אשר נמצאו כבעלי תכונות אנטיבקטריאליות, נוגדות סטרס ונוגדי חמצון (Xiong et al., 1998), כמו גם השפעות אנטי-אפופטוטיות על תרבית. נוירונים (Tian & Pu, 2005). במחקר הנוכחי, על מנת לחקור את הבסיס התרופתי של הפעולה הממריצה Yang של Herba Cistanche, נבדקו ההשפעות של טיפול ב-Herba Cistanche על יכולת יצירת ה-ATP במיטוכונדריה שבודדו מלבות חולדה ex vivo ו-H9c2 cardiomyocytes בתרבית באתרם. כדי לחקור את המנגנון הביוכימי העומד בבסיס הפעולה המשפרת את יצירת ה-ATP, נבדקו גם ההשפעות של טיפול ב-Herba Cistanche על הובלת אלקטרונים מיטוכונדריה ופעילויות מורכבות של I-IV בלבבות חולדות.
תמצית Cistanche Deserticola
חומרים ושיטות
כימיקלים, תרבית תאים וחומרי צמחים ATP, ADP ו-3-[4,5-dimethylthiozol-2-yl]-2,5-diphenyl- tetrazolium bromide ( MTT) נרכשו מ-Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, ארה"ב). תמיסת לוציפראז (ATPlite) התקבלה מ-PerkinElmer (בוסטון, MA, ארה"ב). המדיום (DMEM) וסרום בקר עוברי (FBS) של Dulbecco נרכשו מ-GIBCO BRL Life Technologies (Grand Island, NY, ארה"ב). קו תאים H9c2 נרכש מ-ATTC (Rockville, MD, ארה"ב). Herba Cistanche סופק על ידי סוחר צמחי מרפא מקומי (Lee Hoong Kee). העשב אושר על ידי הספק, ודגימת שובר (HKUSTY00301) הופקדה במחלקה לביוכימיה, אוניברסיטת הונג קונג למדע וטכנולוגיה (HKUST).
מיצוי צמחים
Herba Cistanche (100 גרם) נחתך לחתיכות קטנות ולאחר מכן חולץ על ידי חימום תחת ריפלוקס ב-300 מ"ל מתנול
ב-65◦C למשך שעתיים. ההליך חזר על עצמו פעמיים. התמצית שנאגרה יובשה על ידי אידוי הממס בלחץ מופחת, ותמצית המתנול של Herba Cistanche התקבלה בתשואה של 39 אחוז (w/w). ניתוח כימי הצביע על כך שתמצית המתנול של Herba Cistanche הכילה סך כל ספונינים, סך פלבנואידים, סך ליגננים ופוליסכרידים בריכוזים של 1.62 אחוז (w/w), 0.08 אחוז, 0.15 אחוזים ו-75.6 אחוזים, בהתאמה.
טיפול בחיות
חולדות זכר ספראג-דאולי בוגרות (8-10 שבועות; 250-300 גרם) נשמרו במחזור של 12-שעות כהה/אור בחדר מבוקר אוויר/לחות, בערך 22◦C והותרו מזון ומים באופן חופשי. במתקני הטיפול בבעלי חיים
ב-HKUST. פרוטוקולי ניסוי אושרו על ידי ועדת פרקטיקת המחקר ב-HKUST.
טיפול תרופתי
בעלי חיים חולקו באופן אקראי לקבוצות, עם חמש עד שש חיות בכל אחת. בקבוצות הטיפול, חולדות ניתנו תוך קיבה עם תמצית המתנול של Herba Cistanche (מומס/מורח במים) במינונים יומיים הולכים וגדלים ({{0}}.031-0.5 גרם/ק"ג) למשך 3 ימים. חיות בקרה קיבלו מים בלבד. 24 שעות לאחר המינון האחרון, הלב התקבל מחיות מורדמות בפנוברביטל ועבר ניתוח ביוכימי.
הכנת שברי מיטוכונדריה ומדידה של יכולת ייצור ATP (ATP-GC) ex vivo
דגימות רקמת הלב השמאלי נכרתו ונשטפו במאגר איזוטוני קר כקרח (0.32 M סוכרוז, 1 מ"מ EDTA, 50 מ"מ Tris/HCl, pH 7.4). חלקי המיטוכונדריה הלבביים הוכנו על ידי צנטריפוגה דיפרנציאלית במאגר איזוטוני ב-4◦C. הומוגגת לב של 10 אחוז (w/v) הוכנה על ידי הומוגנית של רקמת החדר הטחונה עם הומוגגניזר מזכוכית טפלון ב-4000 סל"ד למשך 20-30 פעימות שלמות. ההומוגנית עברה צנטריפוגה ב-600 גרם למשך 10 דקות כדי להסיר גרעינים ופסולת תאים. לאחר מכן הסופרנטנט עבר צנטריפוגה ב-8000 גרם למשך 30 דקות כדי לשקוע את המיטוכונדריה (Evan, 1992). הכדורים הושעו מחדש ב-1 מ"ל מהמאגר האיזוטוני והרכיבו מחדש את חלקי המיטוכונדריה. ה-ATP-GC המיטוכונדריאלי של בעלי חיים לא מטופלים נמדד בשיטת Leung et al. (2005).
מדידה של הובלת אלקטרונים מיטוכונדריה
מדידת הובלת אלקטרונים במיטוכונדריה מבודדת, המבוססת על הפחתת MTT, בוצעה כמתואר על ידי Cohen וחב'. (1997). מיטוכונדריה הוכנו בריכוז חלבון של 1 מ"ג/מ"ל עם חיץ דגירה (250 מ"מ סוכרוז, 50 מ"מ HEPES, 10 מ"מ KH2PO4, 2 מ"מ MgCl2, 1 מ"מ EGTA, pH 7.4) . מנה (40 μL) של המיטוכונדריה מעורבב עם 100 μL כל אחד של 15 מ"מ פירובט או 0.5 מ"מ סוצ'ינט ו-0.42 מ"ג/מ"ל MTT. תערובת התגובה הודגרה ב-37◦C למשך 10 דקות תוך ניעור עדין. לאחר הדגירה, תערובת התגובה הופסקה על ידי הוספה של 100 μL חיץ תמוגה (10 אחוז, w/v, נתרן דודציל סולפט ו-45 אחוז דימתילפורמאמיד, מותאם ל-pH 4.7 עם חומצה קרחונית). לאחר עמידה של 5 דקות, קריאות הספיגה של תערובת התגובה נלקחו עם קורא לוחות מיקרוטיטר (Bio-Rad, Hercules, CA, ארה"ב) ודווחו כהבדל בין 570 ננומטר ל-630 ננומטר. הנתונים הובאו כאחוז מהערך הממוצע של קבוצת הביקורת (כלומר, Herba Cistanche – ללא טיפול).
תרבית תאים
תאי H9c2, שורת תאים קבועה שמקורה ב-My-oblasts של הלב (Hescheler et al., 1991), תורבתו כמונו-שכבות ב-DMEM בתוספת של 10 אחוז (v/v) FBS. המדיום הכיל גלוקוז (4.5 גרם/ליטר) וגלוטמין (4.5 מ"מ), בתוספת NaHCO3 (17 מ"ל), פניצילין (100 IU/mL) וסטרפטומיצין (100 מיקרוגרם/מ"ל). כל התאים גודלו תחת אטמוספירה של 5 אחוז (v/v) CO2 באוויר ב-37◦C. המדיום הוחלף במדיום טרי כל יומיים או שלושה. מלאי של תאים גודל בבקבוק תרבית של 75 ס"מ ופוצל לפני המפגש ביחס תת-טיפוח של 1:10. עבור בדיקת ATP-GC, תאי H9c2 נזרעו בצפיפות של 2.5 104 תאים/באר לתוך 24-צלחת באר. לאחר הצמדת התא, תמצית Herba Cistanche (מומסת בתמיסת מלח מפוצלת פוספט; PBS) הונחה במדיום, והתאים הודגרו לפרקי זמן גדלים (2-16 שעות). תאי בקרה (לא מטופלים) קיבלו את ה-PBS בלבד.
מדידה של ATP-GC באתרו
לאחר תקופות הדגירה המצוינות עם תמצית Herba Cistanche בריכוזים הולכים וגדלים (5{{10}}-300 מיקרוגרם/מ"ל), בוצעה בדיקת ATP-GC. המדיום נשאב והתאים טופלו עם דיגיטונין (50 מיקרוגרם/מ"ל) במאגר דגירה (120 מ"מ KCl, 5 מ"ל KH2PO4, 2 מ"מ EGTA, 10 מ"מ HEPES, 0.1 מ"מ MgCl2, 0.5 אחוז BSA, pH 7.4) דקה ב-37◦C. לאחר שאיבת הדיגיטונין, גלוטמט (5 מ"מ), מלאט (5 מ"מ) ו-ADP (60 מיקרומטר) נוספו לתאים ליצירת ATP מיטוכונדריאלי, אשר נוטר במרווחי זמן הולכים וגדלים שנעו בין 0 ל-15 דקות. התגובה הופסקה על ידי תוספת של 60 μL של חומצה פרכלורית (30 אחוזים, משקל/V), ותערובות התגובה עברו צנטריפוגה ב-600 גרם למשך 10 דקות בטמפרטורה של 4◦C. מנה (120 μL) של הסופרנטנט מעורבב עם 90 μL של 1.4 M KHCO3 לנטרול. התערובות עברו צנטריפוגה שוב ב-600 גרם בטמפרטורה של 4◦C, והסופרנטנטים נמדדו עבור תכולת ATP כפי שתואר קודם לכן. ה-ATP-GC של התאים הלא מטופלים נאמד על ידי חישוב השטח מתחת לעקומה של הגרף (AUC1) תוך התווים של ATP שנוצר (nmol/mg חלבון) כנגד זמן (0-15 דקות) ומתבטא ביחידות שרירותיות. עבור תאים שטופלו ב-Herba Cistanche, ערכי AUC1 של עלייה בזמני הדגירה (3, 5, 7, 10 ו-15 דקות) נורמלו לערך בקרה ממוצע בהתאמה מדגימות לא מטופלות והובאו כאחוז ביקורת. לאחר מכן, השטח מתחת לעקומה (AUC2) של הגרף המתווה ערכי בקרת אחוזים מול זמן הדגירה (3-15 דקות) חושב והובע ביחידות שרירותיות. הנתונים של קבוצות שטופלו ב-Herba Cistanche הובאו כאחוז מהביקורת מהמשוואה:
[AUC2(HerbaCistanche - מטופל)/AUC2(לא מטופל)]×100 אחוז .
מדידות של פעילויות I-IV מורכבות וציטראט סינתאז
פעילות קומפלקס I-III של שרשרת אלקטרונים מיטוכונדריאלית (ETC) נמדדה בשיטות ספקטרופוטומטריות באמצעות מצעים ספציפיים למתחם (NADH עבור קומפלקס I, succinate עבור קומפלקס II, ו-decylubiquinol עבור קומפלקס III) כמתואר (Grad & Lemire, 2004; Hsu et. al., 2005; Mark et al., 2001). פעילות Complex IV נמדדה באמצעות ערכת בדיקת ציטוכרום c oxidase מבית Sigma. פעילות סינתאז ציטראט מיטוכונדריאלי נמדדה בשיטת Srere (1969).
בדיקת חלבון
ריכוזי החלבון של חלקי המיטוכונדריה וליזטים של תאים נקבעו באמצעות ערכת בדיקת חלבון BioRad באמצעות אלבומין בסרום בקר כסטנדרט ({{0}}.038-0.600 מ"ג/מ"ל).
ניתוח סטטיסטי
כל הנתונים הובאו כשגיאת התקן הממוצעת של הממוצע (SEM). הם נותחו על ידי ניתוח חד כיווני של שונות (ANOVA). השוואות מרובות לאחר ההופעה נעשו עם LSD. ערכי P<0.05 were="" regarded="" as="" statistically="">
תוצאות
השפעות של טיפול ב-Herba Cistanche על ATP-GC המיטוכונדריאלי של שריר הלב בחולדות
כפי שמוצג באיור 1, טיפול בתמצית Herba Cistanche במינונים של עד 0.5 גרם/ק"ג העלה את ATP-GC המיטוכונדריאלי של שריר הלב באופן תלוי מינון בחולדות, כאשר מידת הגירוי הייתה 89 אחוזים. במינון של 0.5 גרם/ק"ג.
השפעות הטיפול ב-Herba Cistanche על הובלת אלקטרונים מיטוכונדריאלי בלבבות חולדה
מידת הובלת אלקטרונים במיטוכונדריה מבודדות נמדדה על ידי ניטור הפחתת MTT. המצע ששימש לבדיקה היה פירובט או סוקסינאט. כפי שמוצג באיור 2a, טיפול ב-Herba Cistanche הגדיל באופן תלוי מינון את מידת הובלת אלקטרונים מיטוכונדריאלית הנתמכת על ידי פירובט בלבבות חולדה, כאשר הגירוי האופטימלי ניתן לצפייה במינונים של 0.5 גרם/ק"ג. עם זאת, לא זוהו שינויים משמעותיים בהיקף הובלת אלקטרונים מיטוכונדריאלית הנתמכת על ידי succinate בלבבות חולדה שטופלו ב-Herba Cistanche (איור 2b).
השפעות הטיפול ב-Herba Cistanche על פעילות מורכבת נשימתית המיטוכונדריה בלבבות חולדה
כפי שמוצג באיור 3, טיפול ב-Herba Cistanche במינון האופטימלי של 0.5 גרם/ק"ג העלה משמעותית את פעילויות ה-Complex I (34 אחוז) ו-Complex III (22 אחוזים) בלבבות חולדות. הפעילות של ציטראט סינתאז, אנזים מפתח למחזור החומצות הטריקרבוקסיליות, לא הושפעה מטיפול ב-Herba Cistanche (איור 3). ניתוח ה-Western blot הצביע על כך שרמות החלבון של קומפלקס I ו-III לא הושפעו מטיפול ב-Herba Cistanche (נתונים לא מוצגים).
מהלך הזמן של שינויים המושרים על ידי Herba Cistanche במיטוכונדריה ATP-GC בתאי H9c2
שינויים ב-ATP-GC נבדקו בתאים שטופלו ב-Herba Cistanche (50 ו-150 מיקרוגרם/מ"ל) לאחר 2 עד 16 שעות של דגירה. כפי שמוצג באיור 4, טיפול ב-Herba Cistanche העלה את ה-ATP-GC באופן תלוי-זמן ובאופן דו-פאזי בתאי H9c2, כאשר הגירוי המקסימלי (44 אחוז ו-89 אחוז, בהתאמה) נצפה לאחר דגירה של 8 שעות עבור שני ריכוזי התרופה. ה-ATP-GC חזר לאחר מכן לערכי בקרה לא מטופלים כאשר זמן הדגירה הוארך ל-16 שעות. התחלה מוקדמת יותר של גירוי התרחשה כאשר התאים טופלו בריכוז גבוה יותר (150 מיקרוגרם/מ"ל) של תמצית Herba Cistanche.
ריכוז-תלות של הרבה
עלייה הנגרמת על ידי Cistanche ב-ATP-GC בתאי H9c2
תאי H9c2 טופלו בריכוזים הולכים וגדלים (50-300 מיקרוגרם/מ"ל) של תמצית Herba Cistanche במשך 4 שעות. איור 5 מראה שטיפול ב-Herba Cistanche העלה את ה-ATP-GC באופן תלוי ריכוז, כאשר הגירוי המקסימלי (82 אחוז) ניתן לצפייה בריכוז של 300 מיקרוגרם/מ"ל.
תמצית Cistanche עלייה בייצור ATP
דִיוּן
הגברת הפעילות התאית לשיפור תפקוד הגוף כגון התכווצות שרירים ותגובות חיסוניות על ידי המרצת Yang מחייבת את העלייה בצריכת ATP, אשר בתורה נתמכת על ידי זרחון חמצוני מיטוכונדריאלי. במחקר הנוכחי, נמצא כי טיפול ב-Herba Cistanche מגביר באופן תלוי מינון את יכולת יצירת ה-ATP המיטוכונדריאלית ex vivo בלבבות חולדה. תצפית זו עולה בקנה אחד עם הממצא הקודם שלנו שבין עשבי התיבול הסיניים הממריצים את יאנג, טיפול ב-Herba Cistanche הפיק מידה גדולה יותר של גירוי על יצירת ATP מיטוכונדריאלי בלבבות עכברים (Ko et al., 2006). השיפור ביצירת ATP המיטוכונדריאלי היה מקביל לעלייה בהובלת אלקטרונים המיטוכונדריאלית המונעת על ידי פירובט אך לא סוקסינאט, כפי שהוערכה על ידי הפחתת MTT. תוצאות שהתקבלו מהמדידה הקינטית של קומפלקס מיטוכונדריאלי I–IV הצביעו על כך שהפעילות של שני הקומפלקסים I ושל III עלתה בלבבות שטופלו ב-Herba Cistanche, כאשר מידת הגירוי בפעילות קומפלקס I גדולה מזו של קומפלקס III. מכיוון שפעילותו של ציטראט סינתאז, אנזים מפתח במחזור החומצה הטריקרבוקסילית, לא הושפעה, שיפור יכולת יצירת ה-ATP המיטוכונדריאלי על ידי טיפול ב-Herba Cistanche עשוי להיות מיוחס בעיקר לגירוי של פעילויות מורכבות I ו/או III. רוב דרישות ה-ATP של הלב נענות על ידי מיטוכונדריה, הנשענות כמעט לחלוטין על חמצון I (NADH) המקושר מורכב של חומצת שומן וגלוקוז (Stanley et al., 1997; Taegtmeyer, 1998). קומפלקס I, אשר מפגין פעילות נמוכה יותר מאשר קומפלקסים נשימתיים אחרים, נחשב לגורם חשוב בוויסות של זרחון חמצוני. לפיכך, לגירוי או עיכוב פעילות מורכבת I יכולה להיות השפעה גדולה על האנרגטיקה הלבבית. למרות שניתוח ה-Western blot לא גילה שינויים כלשהם ברמת החלבון של שני קומפלקסים אלה (לא מוצגים נתונים), הפעילות המוגברת של האנזים עשויה לנבוע מהשינויים בסטטוס תיול חלבון ו/או בסביבת השומנים (Davey et al., 1998; Paradies et al., 2004).
תמצית Herba Cistancheיכול לייצר את האפקט המשפר את יצירת ה-ATP בתאי H9c2 בתרבית באתרם. ההתחלה המוקדמת יחסית של פעולת הגירוי שנוצרת על ידי טיפול ב-Herba Cistanche, במיוחד במינון גבוה, עולה בקנה אחד עם התצפית ממחקרים לשעבר שהצביעו על כך שסביר להניח שהסינתזה של חלבונים מורכבים I ו-III אינה מעורבת ביצירת ATP. פעולה. ההדגמה של שיפור המושרה על ידי Herba Cistanche במצב יצירת ATP באתרו תומכת בתפיסה שהעלייה ביכולת יצירת ATP המיטוכונדריאלית, כפי שהוערכה על ידי מדידה ex vivo, עשויה רק לשקף אפקט מקביל שנוצר על ידי מצב הטיפול התרופתי in vivo. המדידה של יצירת ATP במיטוכונדריה מבודדות ובתאים מתורבתים תוך שימוש במלאט וגלוטמט כמצעים היא מדד עקיף של נשימה מיטוכונדריאלית מצב 3 (Chen et al., 2003). באמצעות אותו בדיקת ATP ביולוגית, קצב יצירת ה-ATP המיטוכונדריאלי ברקמות שונות של חולדות לא מטופלות, כפי שדווח קודם לכן במעבדה שלנו (Leung et al., 2005), התאים היטב לנתונים שפורסמו לאחרונה (Drew & Leeuwenburgh, 2003 ). קיבולת ייצור ה-ATP הוערכה על ידי שילוב דו-שלבי של שינויים תלויי זמן ברמת ה-ATP הן במבחני ex vivo והן במבחני in situ. לכן ההשפעה המעוררת המושרה על ידי התרופה שנצפתה הוגדלה לשם השוואה. השיפור של יכולת יצירת ATP על ידי טיפול ב-Herba Cistanche במיטוכונדריה של לב חולדה ex vivo היה מקביל לגירוי של יצירת ATP בתאי H9c2 באתרם. בהתחשב בנוכחות של פעילות משפרת יצירת ATP בצמחי מרפא סיניים ממריצים יאנג, כולל Herba Cistanche, בלבבות עכברים ex vivo (Ko et al., 2006), התוצאות מצביעות על כך שהמדידה של יכולת יצירת ATP בתאי H9c2 ב האתר עשוי לשמש כבדיקה תרופתית עבור צמחי מרפא סיניים ממריצים יאנג או פורמולת צמחים.
לסיכום, טיפול בתמצית Herba Cistanche יכול לשפר את יכולת יצירת ה-ATP המיטוכונדריאלי בלבבות של חולדה ex vivo ובתאי H9c2 באתרם. הממצאים תומכים בהנחה שלנו שהבסיס התרופתי של המרצת יאנג כרוך בשיפור תפקודי הגוף באמצעות גירוי ייצור ATP המיטוכונדריאלי.
תמצית Herba Cistanche משפרת את יכולת יצירת ה-ATP המיטוכונדריאלית
הפניות
Chen P (1998): עשבי תיבול טוניק. סדרת TCM מתקדמת. בייג'ינג, סין, הוצאת המדע, עמ' 233–320.
Chen Q, Vazquez EJ, Moghaddas S, Hoppel CL, Lesnefsky EJ (2003): ייצור מיני חמצן תגובתיים על ידי מיטוכונדריה: תפקיד מרכזי של קומפלקס III. J Biol Chem 278: 36027– 36031.
Cohen G, Farooqui R, Kesler N (1997): מחלת פרקינסון: קשר חדש בין מונואמין אוקסידאז וזרימת אלקטרונים מיטוכונדריה. Proc Natl Acad Sci USA 94: 4890–4894.
Davey GP, Peuchen S, Clark JB (1998): ספי אנרגיה במיטוכונדריה במוח. מעורבות פוטנציאלית בניוון עצבי. J Biol Chem 273: 12753–12757.
Drew B, Leeuwenburgh C (2003): שיטה למדידת ייצור ATP במיטוכונדריה מבודדות: ייצור ATP במיטוכונדריה במוח ובכבד של חולדות פישר-344 עם הגבלה על גיל וקלוריות. Am J Physiol Regul Integr Comp Phys- iol 285: R1259–R1267.
Evan WH (1992): בידוד ואפיון של ממברנות ואברוני תאים. בתוך: Rickwood D, ed. צנטריפוגה הכנה: גישה מעשית. ניו יורק, הוצאת אוניברסיטת אוקספורד, עמ' 223–270.
Grad LI, Lemire BD (2004): מוטציות מיטוכונדריה קומפלקס I ב-Caenorhabditis elegans מייצרות חוסר ציטוכרום c אוקסידאז, עקה חמצונית וחמצת לקטית המגיבה לוויטמינים. Human Mol Genetics 13: 303–314.
Hescheler J, Meyer R, Plant S, Krautwurst D, Rosenthal W, Schultz G (1991): אפיון מורפולוגי, ביוכימי ואלקטרופיזיולוגי של קו משובט (H9c2) מלב חולדה.Circ Res 69: 1476–1486.
Hsu M, Srinivas B, Kumar J, Subramanian R, Andersen J (2005): דלדול גלוטתיון הגורם לעיכוב סלקטיבי של מיטוכונדריאלי קומפלקס I בתאים דופמינרגיים הוא דרך מסלול מתווך NO שאינו מערב פרוקסיניטריט: השלכות על מחלת פרקינסון. J Neurochem 92: 1091–1103.
Ko KM, Leon TYY, Mak DHF, Chiu PY, Du Y, Poon MKT (2006): פעולה פרמקולוגית אופיינית של צמחי מרפא סיניים 'יאנג-ממריצים': שיפור יכולת יצירת ATP של שריר הלב. Phytomedicine 13: 636-642.
Ko KM, Mak DH, Chiu PY, Poon MKT (2004): בסיס פרמקולוגי של 'יאנג-המרצת' ברפואה הסינית. Trends Pharmacol Sci 25: 3–6.
Lee CJ, Chuan S, Lee SL (1990): מחקר על השפעת האנטי אייג'ינג של Cistanche deserticola Ma. Shanghai J Trad Chin Med 11: 22–23.
Lei L, Song ZH, Tu PF, Li YZ, Wu LJ, Chen FK (2001): ויסות מטבולי של phenylethanoid גליקוזידים מ-Herba cistanches במעיים של כלבים. Yao Xue Xue Bao 36: 432–435
Leung HY, Chiu PY, Poon MKT, Ko KM (2005): פורמולת צמחי מרפא סינית ממריצה יאנג משפרת את היכולת התפקודית המיטוכונדריה ויכולת נוגדת החמצון ברקמות שונות של חולדות זכר ונקבה. Rejuven Res 8: 238–247.
Lin LW, Hsieh MT, Tsai FH, Wang WH, Wu CR (2002): פעילות אנטי-ציספטיבית ואנטי דלקתית הנגרמת על ידי Cistanche deserticola במכרסמים. J Ethnopharmacol 83: 177–182.
Lu MC (1998): מחקרים על השפעת ההרגעה של Cistanche deserticola. J Ethnopharmacol 59: 161–165.
Mark A, Birch M, Douglass MT (2001): בדיקת פעילות קומפלקס נשימתי מיטוכונדריאלי במיטוכונדריה המבודדות מתאי אדם ורקמות. Meth Cell Biol 65: 97-117.
Ouyang J, Wang X, Zhao B, Yuan X, Wang Y (2003): השפעות של יסודות אדמה נדירים על צמיחת תאי Cistanche deserticola וייצור של גליקוזידים פנילתנואידים. J Biotech 102: 129–134.
Paradies G, Petrosillo G, Pistolese M, Di Venosa N, Federici A, Ruggiero FM (2004): ירידה בפעילות קומפלקס מיטוכונדריאלי I בלב חולדה איסכמית/רפרפוזית: מעורבות של מיני חמצן תגובתיים וקרדיוליפין. Circ Res 94: 53–59.
Srere PA (1969): ציטראט סינתאז. מעגל החומצה הציטרית. Meth Enzymol 13: 3-11.
Stanley WC, Lopaschuk GD, Hall JL, McCormack JG (1997): ויסות של חילוף החומרים של פחמימות שריר הלב בתנאים נורמליים ואיסכמיים. פוטנציאל להתערבויות פרמקולוגיות. Cardiovasc Res 33: 243–257.
Taegtmeyer H (1998): חילוף החומרים של מצע האנרגיה כמטרה לטיפול תרופתי בשריר לב איסכמי ו-reperfused. מטאב לב 1: 5-9.
Tian XF, Pu XP (2005): פנילתנואידים גליקוזידים מסלסה Cistanches מעכבים אפופטוזיס המושרה על ידי יון 1-מתיל-4- פנילפירידיניום בנוירונים. J Ethnopharmacol 97: 59–63.
Wu XM, Gao XM, Tsim KW, Tu PF (2005): ארבינוגלקטן מבודד מגבעולים של Cistanche deserticola גורם להתרבות של לימפוציטים מתורבתים. Int J Biol Macromol 37: 278–282.
Xiong Q, Hase K, Tezuka Y, Tani T, Namba T, Kadota S (1998): פעילות מגוננת על הכבד של פנילאתנואידים מ- Cistanche deserticola. Planta Med 64: 120–125.
Xiong Q, Kadota S, Tani T, Namba T (1996): השפעות נוגדות חמצון של פנילאתנואידים מ- Cistanche deserticola. ביול פארם בול 19: 1580–1585.
