תַקצִיר:שמן זרעי דלעת הוא תוצר לוואי, שופע בחומרים מזינים ורכיבים ביו-אקטיביים המקדמים מספר יתרונות בריאותיים. מחקר זה נועד להשוות את ההרכבים הכימיים, נוגדי החמצון והפעילות הפרמקולוגית של שמני זרעי דלעת המופקים מ-Cucurbita moschata Duch. אקס פויר. (PSO1) ו-Cucurbita moschata (דלעת יפנית) (PSO2) על ידי מיצוי אנזימטי מימי. תערובת אנזים המורכבת מפקטינאז, צלולאז ופרוטאז (1:1:1) שימשה בתהליך המיצוי האנזימטי. הרכב חומצות השומן של השמנים נקבע באמצעות ספקטרומטריית חומצת שומן מתיל אסטר/גז כרומטוגרפית-מסה. מבחני פעילות נוגדת חמצון נמדדו על ידי שימוש ברדיקל חופשי יציב דיפניל פיקרילהידראזיל, רדיקל קטיון 2,20 -אזינוביס-(3- ethylbenzothiazoline-6-סולפונט, כוח מפחית/נוגד חמצון ברזל ובדיקת תיאוציאנט ברזל. עיכוב של נחקרו אנזימים הקשורים להזדקנות העור ותהליך הלבנת העור. חומצה לינולאית הייתה מרכיב עיקרי בכל שמני זרעי הדלעת. בנוסף, זוהתה גם כמות משמעותית של חומצה אולאית, חומצה פלמיטית וחומצה סטארית. ל-PSO2 הייתה פעילויות נוגדות חמצון הגבוהות ביותר בהשוואה ל- PSO1 ושמני זרעי דלעת מסחריים (COM1 ו-COM2). גם PSO1 וגם PSO2 הפגינו השפעות מעכבות גבוהות יותר על היאלורונידאז, קולגנאז וטירוזינאז מאשר הפרסומות. לכן, מיצוי אנזימטי מימי עשוי להניב שמני זרעי דלעת בעלי נוגדי חמצון גבוהים יותר, אנטי-אייג'ינג ו פעילויות הלבנה. זה מועיל למחקרים תרופתיים נוספים ויכול לשמש כמזון פונקציונלי ליתרונות העור.

על פי מחקרים רלוונטיים,cistancheהוא צמח נפוץ המכונה "עשב הנס מאריך חיים". המרכיב העיקרי שלו הואcistanoside, בעל השפעות שונות כגוןנוגד חמצון, אנטי דלקתי, וקידום תפקוד מערכת החיסון. המנגנון בין cistanche ועור הַלבָּנָהטמון בהשפעה נוגדת החמצון של cistancheגליקוזידים. המלנין בעור האדם מיוצר על ידי חמצון של טירוזין המזוזז על ידיטירוזינאז, ותגובת החמצון דורשת השתתפות של חמצן, ולכן הרדיקלים החופשיים בחמצן בגוף הופכים לגורם חשוב המשפיע על ייצור המלנין. Cistanche מכיל ציסטאנוסיד, שהוא נוגד חמצון ויכול להפחית את יצירת הרדיקלים החופשיים בגוף, ובכךעיכוב ייצור המלנין.

לחץ על מוסף Cistanche Tubulosa

למידע נוסף:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

1. הקדמה

הדלעת היא מהסוג Cucurbita ומשפחת Cucurbitaceae, צמח נפוץ ומפורסם שתורבת בצפון מקסיקו והתפשט לאירופה, מערב אמריקה ואסיה [1]. דלעת נחשבת למזון פונקציונלי המכיל בשפע רכיבים תזונתיים כגון חלבון, פחמימות, שומנים, סיבים וכו', יחד עם תרכובות פיטוכימיות כגון טוקופרולים, קרוטנואידים ו-סיטוסטרול [2]. הפיטונוטריינטים מחלקים שונים של הדלעת נמצאו כבעלי פעילות פרמקולוגית [2]. תמצית קליפת דלעת הראתה השפעות מועילות של פצעי צריבה במודלים של בעלי חיים [3]. עיסת דלעת הדגימה פעילות נוגדת חמצון, אנטי דלקתית ואנטי אנגיוגנזה [2], כמו גם פעילות נוגדת עייפות בעכברים [4]. בנוסף, זרעי דלעת הם מקור טבעי טוב לחומצות שומן חיוניות ופיטוסטרולים אשר מורידים את הסיכון לתמותה קרדיווסקולרית [5,6]. שמן זרעי דלעת הוא תוצר לוואי של עיבוד זרעי דלעת, העשירים בחומצות שומן שונות ובתרכובות ביו-אקטיביות כגון -קרוטנים, -טוקופרול, ויטמין B, לוטאין, פיטוסטרולים ומינרלים נוספים [7,8]. השמן מפעיל השפעות נוגדות חמצון, אנטי דלקתיות, אנטיבקטריאליות וריפוי פצעים [1,9]. יתר על כן, יש לו כמה יתרונות בריאותיים נגד מחלות, כגון יתר לחץ דם, סוכרת וסרטן [8,10].

פותחו שיטות שונות להפקת שמן זרעים, ביניהן שיטות מכניות כמו כבישה קרה [11] ומיצוי בלחץ גבוה [12]. מיצוי ממס של שמן זרעים באמצעות ממיסים אורגניים כגון הקסאן, אתיל אצטט, אצטון ומתנול תועדה גם כן [13,14]. מיצוי בעזרת אנזים היא שיטה חלופית לתעשיית השמן הצומח מכיוון שזו טכנולוגיה ידידותית לסביבה ובטוחה. המנגנון העיקרי של מיצוי אנזימטי מימי הוא הידרוליזה ושבירה של דפנות התא של חומר צמחי, מה שמוביל ליותר חדירות ושחרור רכיבים ביו-אקטיביים, כולל שלב השמן [15]. תערובות אנזימים שונות המיושמות במיצוי זה מורכבות מפקטינאזות, צלולאזות, המיצלולאזות, ארבינוז, -גלוקנאז וקסילאנזה [16,17]. התנאים האופטימליים של תערובת אנזים, למשל, טמפרטורה, pH, זמן תגובה, גודל החלקיקים וריכוז האנזים, שיפרו גם את פעילות האנזים [16]. כיום, נעשה שימוש נרחב בשיטה זו להפקת שמן מפירות וזרעי צמחים רבים [18,19]. כמה מחקרים קודמים הדגימו את המצב האופטימלי של שמן זרעי דלעת להשגת תפוקה גבוהה ופעילויות פרמקולוגיות יעילות [20,21].

נכון לעכשיו, אנשים צורכים שמן זרעי דלעת בקינוחים או רטבים לסלט, והוא גם מרכיב פופולרי בקוסמטיקה. הזדקנות העור היא תהליך ביולוגי מורכב המתאפיין בהתקמטות, אובדן גמישות, אובדן לחות ומרקם מחוספס הנגרמים מלחץ חמצוני, נזק ל-DNA והצטברות מתקדמת של תוצר סופי של גליקציה [22]. חומצה היאלורונית, קולגן ואלסטין, שהם מרכיבים חשובים בעור, יכולים להתפרק על ידי אנזימים היאלורונידאז, קולגנאז ואלסטאז, בהתאמה, וכתוצאה מכך להזדקנות העור. מספר שמנים צמחיים, כגון שמן זית, שמן זרעי חמניות, שמן זרעי ענבים ושמן חוחובה שימשו לתכונות קוסמטיות של העור לשמירה על לחות, שיפור תפקוד מחסום העור ומניעת הזדקנות העור [23]. בנוסף, פיגמנטציה של העור היא פנוטיפ משתנה ומורגש בבני אדם הכרוך במלנוגנזה ומווסת על ידי האנזים טירוזינאז [24]. נכון לעכשיו, תמציות צמחים שונות נבדקו עבור קוסמטיקה ותרופות כדי להפחית את ייצור המלנין, הפועלים כחומרי הלבנה [25,26].

2. חומרים ושיטות

2.1. חומרים צמחיים

2.2. כימיקלים וריאגנטים 

2.3. מיצוי אנזימטי מימי

שמני זרעי דלעת משני C. moschata Duch. Ex Poir ו-C. moschata (דלעת יפנית) הופקו בשיטת מיצוי אנזימטי מימי תוך שימוש בפרמטרים של הידרוליזה אנזימטית ממחקר קודם של Kanopka וחב'. (2016), כולל ריכוז אנזים, יחס אנזים למצע, טמפרטורת תגובה, pH וזמן תגובה [21]. שלושה סוגים שונים של אנזימים, כולל פקטינאז, צלולאז ופרוטאז, שולבו ביחס משקל של 1:1:1 ליצירת קוקטייל מרוכז של אנזימים. לאחר מכן, קוקטייל התרכיז שהתקבל היה מדולל במים DI כדי ליצור תערובת אנזימטית מימית של 2 אחוזים w/w. לאחר מכן נוספו גרעיני הדלעת חסרי הקליפה לתערובת האנזימטית המימית שהתקבלה ביחס משקל של 1:1. לאחר מכן התערובת נטחנה דק באמצעות בלנדר Moulinex DB81 בטמפרטורת החדר עד להומוגניות. ה-pH של התמיסה שהתקבלה הותאם לאחר מכן ל-4.7 באמצעות 0.1M HCl והודגרה ב-54 ◦C למשך 15 שעות. לאחר התקררות התמיסה לטמפרטורת החדר, היא עברה צנטריפוגה ב-11,500 × גרם למשך 10 דקות. השכבה העליונה של הסופרנטנטים, שהייתה שלב השמן, נאספה. הקרם שנוצר בתהליך המיצוי לא עבר אמולסיה אלא הוסר על ידי סיפון באמצעות מיקרופיפטה. שאריות זרעי הדלעת הוסרו על ידי סינון דרך נייר פילטר Whatman No.1 תחת ואקום [21]. שמן זרעי דלעת מבית C. moschata Duch. Ex Poir (PSO1) ו-C. moschata (דלעת יפנית) (PSO2) נשמרו במיכלים סגורים היטב ועמידים לאור בטמפרטורת החדר עד לניסויים נוספים.

2.4. קביעת ההרכב הכימי של שמן זרעי דלעת באמצעות שיטת חומצת שומן מתיל אסטר/גז כרומטוגרפית-מסה ספקטרומטרית (FAME/GC/MS)

2.5. קביעת פעילות נוגדת חמצון

2.5.1. 2,2-דיפניל-1-Picrylhydrazyl (DPPH) Assay Radical Scavenging

פעילות סילוק DPPH רדיקלית (DPPH• ) נקבעה על ידי שימוש בשיטה שנקבעה על ידי Chaiyana וחב'. (2017) [27]. בקצרה, 20 μL של דגימות שמן (PSO1, PSO2, COM1, COM2) וחומצה לינולאית מומסת ב-DMSO עורבבו עם 180 μL של תמיסה אתנולית של 167 μM DPPH בצלחת 96- ולאחר מכן הודגרו במשך 30 דקות בשעה טמפרטורת החדר בחושך. חומצה אסקורבית (1 מ"ג/מ"ל) שימשה כביקורת חיובית. הצפיפות האופטית (OD) נמדדה ב-520 ננומטר על ידי שימוש בקורא מיקרופלט (Microlate readers EZ Read 2000, Biochrome, אנגליה). הניסויים נעשו בשלושה עותקים ובוצעו בשלושה עצמאיים. אחוז עיכוב DPPH חושב באמצעות משוואה (1):

עיכוב DPPH ( אחוז )={[(ODA − ODB) − (ODC − ODD)]/(ODA − ODB)} × 100, (1)

2.5.2. 2,20 -אזינו-ביס-3-אתילבנציאזולין-6-מבחן חומצה סולפונית (ABTS)

פעילות סילוק רדיקלים קטיוניים של ABTS (ABTS• plus ) נמדדה בשיטה הקולורימטרית לפי Chaiyana וחב'. (2017) ו-Paradee et al. (2019) [27,28] עם שינוי קל. ABTS• plus נוצר על ידי הוספת 2 מ"ל של 7 מ"מ ABTS עם 3 מ"ל של 2.45 מ"מ אשלגן פרסולפט והודגר במשך 16-24 שעות בטמפרטורת החדר בחושך. ה-ABTS• plus שהתקבל היה מדולל לאחר מכן באתנול כדי לקבל OD של 0.7 ± 0.1 ב-750 ננומטר. בקצרה, 20 μL של דגימות שמן (PSO1, PSO2, COM1, COM2) וחומצה לינולאית מומסת ב-DMSO עורבבו עם 180 μL של ABTS• בתוספת תמיסה אתנולית בצלחת באר 96- והודגרו במשך 5 דקות בטמפרטורת החדר . ה-OD נמדד ב-750 ננומטר באמצעות קורא מיקרו-לוחות (קוראי מיקרופלייט EZ Read 2000, Biochrome, אנגליה). חומצה אסקורבית (1 מ"ג/מ"ל) שימשה כביקורת חיובית. העקומה הסטנדרטית הופקה על ידי התוות הספיגה ב-750 ננומטר לעומת ריכוזים שונים של Trolox שנעים בין 2.5-30 מיקרוגרם/מ"ל. פעילות ההסרה של ABTS• פלוס חושבה מתוך עקומת התקן של Trolox (R2=0.9922) והובאה כיכולת נוגדת חמצון שווה ערך ל-Trolox (TEAC). הניסויים נעשו בשלושה עותקים ובוצעו בשלושה עצמאיים.

2.5.3. בדיקת כוח נוגד חמצון מפחית ברזל (FRAP).

כוח נוגד חמצון מפחית ברזל (FRAP) של כל אחת מהדגימות נקבע באמצעות מבחן FRAP כפי שתואר במחקר קודם של Chaiyana וחב'. (2017) ששונו מעט מ-Saeio et al. (2011) [27,29]. מגיב FRAP נוצר טרי על ידי ערבוב של חיץ אצטט של 300 מ"מ (pH 3.6), 10 מ"מ 2,4,6 טריפירידיל-ס-טריאזין (TPTZ) ב-40 מ"מ HCl ו-20 מ"מ FeCl3 ביחס של 10:1:1. במחקר זה, 20 µL של דגימות שמן (PSO1, PSO2, COM1, COM2) וחומצה לינולאית עורבבו עם 180 µL של ריאגנט FRAP בצלחת 96- היטב והודגרו במשך 5 דקות בטמפרטורת החדר בחושך. ה-OD נמדד ב-595 ננומטר באמצעות קורא microplate (קוראי Microplate EZ Read 2000, Biochrome, אנגליה). חומצה אסקורבית (1 מ"ג/מ"ל) שימשה כביקורת חיובית. העקומה הסטנדרטית הופקה על ידי התוות הספיגה ב-595 ננומטר לעומת ריכוזים שונים של סולפט ברזל (FeSO4) שנעים בין 0.003-0.5 מ"מ. ערך FRAP חושב על פי עקומת FeSO4 הסטנדרטית (R2=0.9965) וביטא כקיבולת שווה (EC1). הניסויים נעשו בשלושה עותקים ובוצעו בשלושה עצמאיים.

2.5.4. בדיקת Ferric Thiocyanate (FTC).

2.6. קביעת פעילות אנטי אייג'ינג

2.6.1. פעילות אנטי-Hyaluronidase

מדידת פעילות אנטי-hyaluronidase בוצעה כפי שתואר בעבר על ידי Chaiyana וחב'. (2020) [31]. ראשית, 20 µL של דגימות שמן (PSO1, PSO2, COM1, COM2) ערבבו עם 100 µL של תמיסה של 15 U/mL של hyaluronidase והודגרו ב-37 ◦C למשך 10 דקות. לאחר הדגירה, נוספו 100 μL של חומצה היאלורונית בגודל 0.03 אחוזים, משקל/V, שהומס במאגר פוספט של 20 מ"מ (pH 5.35), ולאחר מכן הודגרה ב-37 מעלות צלזיוס למשך 45 דקות. לאחר מכן, 1 מ"ל של 0.1 אחוז אלבומין בסרום בקר נוספה והודגרה בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. ה-OD נקבע ב-600 ננומטר באמצעות גלאי רב-מודים (Beckman Coulter DTX880, Fullerton, CA, ארה"ב). חומצה אולאנולית (0.25 אחוזים w/v) שימשה כביקורת חיובית. הניסויים נעשו בשלושה עותקים ובוצעו בשלושה עצמאיים. אחוז עיכוב ההיאלורונידאז חושב באמצעות משוואה (3):

2.6.2. פעילות אנטי-קולגנאז

מדידת פעילות אנטי-קולגנאז בוצעה על פי התהליך שנקבע על ידי Chaiyana וחב'. (2019) ו-Thring et al. (2009) עם שינויים קלים [32,33]. בקצרה, 20 μL של דגימות שמן (PSO1, PSO2, COM1, COM2) ערבבו עם 20 μL של תמיסת 0.1 U/mL קולגנאז מ- Clostridium histolyticum והודגרו ב-37 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות. לאחר הדגירה, 80 μL של חיץ טריצין 50 mM (400 mM NaCl ו-10 mM CaCl2, pH 7.5) ו-40 μL של N-[3-(2-furyl) acryloyl]-Leu-Gly- נוספה תמיסת מצע Pro-Ala (FALGPA). ה-OD זוהה מיד ב-340 ננומטר ולאחר מכן נמדד ברציפות במשך 20 דקות באמצעות קורא מיקרו-לוחיות (קוראי Microplate EZ Read 2000, Biochrome, אנגליה). חומצה אולאנולית (1 אחוז משקל/V) שימשה כביקורת חיובית. הניסויים נעשו בשלושה עותקים ובוצעו בשלושה עצמאיים. אחוז עיכוב הקולגנאז חושב באמצעות משוואה (4):

2.6.3. פעילות אנטי אלסטאז

מדידת פעילות אנטי אלסטאז בוצעה על פי התהליך שנקבע על ידי Chaiyana וחב'. (2019) ו-Thring et al. (2009) עם שינויים קלים [32,33]. בקצרה, 10 μL של דגימות שמן (PSO1, PSO2, COM1, COM2) ערבבו עם 40 μL של תמיסת 0.03 U/mL אלסטאז מהלבלב החזירי, ולאחר מכן 50 μL של 200 mM Tris-HCL חיץ (pH 8.0) ו-1 נוספו תמיסת מצע N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN) 0.8 מ"מ. ה-OD זוהה מיד ב-410 ננומטר ולאחר מכן נמדד ברציפות במשך 20 דקות באמצעות קורא מיקרו-לוחות (קוראי Microplate EZ Read 2000, Biochrome, אנגליה). חומצה אולאנולית (1 אחוז משקל/V) שימשה כביקורת חיובית. הניסויים נעשו בשלושה עותקים ובוצעו בשלושה עצמאיים. אחוז עיכוב האלסטאז חושב באמצעות משוואה (5):

2.7. קביעת פעילות אנטי טירוזינאז

אפקט ההלבנה של תמצית טבעית נקבע על ידי מדידת פעילות אנטי טירוזינאז שבוצעה על פי Saeio et al. (2011) ו-Laosirisathian et al. (2020) [29,34]. L-tyrosine ו-L-DOPA היו הסובסטרטים של האנזים טירוזינאז במחקר זה. בקצרה, 10 μL של דגימות שמן (PSO1, PSO2, COM1, COM2) ערבבו עם 30 μL של טירוזינאז בצלחת 96-, ולאחר מכן הודגרו בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר הדגירה, נוספו 100 μL מהמצע, שהם 2.5 מ"מ של L-tyrosine או L-DOPA, והודגרו במשך 30 דקות. ה-OD נקבע ב-450 ננומטר באמצעות קורא מיקרו-לוחות (קוראי מיקרופלייט EZ Read 2000, Biochrome, אנגליה). חומצה קוג'ית (20 מיקרוגרם/מ"ל) שימשה כביקורת חיובית. הניסויים נעשו בשלושה עותקים ובוצעו בשלושה עצמאיים. אחוז עיכוב טירוזינאז חושב באמצעות משוואה (6):

2.8. ניתוח סטטיסטי

כל הנתונים הוכחו כממוצע ± סטיית תקן (SD). המובהקות הסטטיסטית נותחה באמצעות ניתוח חד-כיווני של שונות (ANOVA) ואחריו המבחן הפוסט-הוק של Tukey באמצעות GraphPad Prism (גרסה 8.0, תוכנת GraphPad), ו-p < 0.05 נחשב משמעותי סטטיסטית.

3. תוצאות ודיון

3.1. אופי שמן זרעי דלעת

במחקר זה, השתמשנו במיצוי אנזימטי מימי במקום מיצוי ממס אורגני כדי להפיק שמן זרעי דלעת מ-C. moschata Duch. Ex Poir (PSO1) ו-C. moschata (PSO2) כי זהו תהליך פשוט, יעיל ופרודוקטיבי [15,21]. PSO1 היה נוזל חום כהה עם צמיגות נמוכה, ואילו PSO2 היה נוזל חום ירקרק עם צמיגות נמוכה. לשני שמני זרעי הדלעת היה ריח אופייני להם. התשואות של PSO1 ו-PSO2 היו 17.7 אחוז v/w ו-15.6 אחוז v/w, בהתאמה. מלבד השמן, דווח כי זרעי דלעת מכילים מגוון תרכובות תזונתיות. ההרכבים הקרובים של C. moschata היו בעיקר פחמימות (39.51 אחוזים), ואחריהם שומן (28.49 אחוז), חלבון (19.23 אחוז), מים (7.67 אחוז) ואפר (5.18 אחוז), בהתאמה [35]. עם זאת, בהשוואה למחקרים הקודמים באמצעות ממס וכבישה מכנית, המחקר הנוכחי חשף תשואות נמוכות יותר של שמן C. moschata. אף על פי שחילוץ ממס תואר כשיטת מיצוי השמן היעילה ביותר, תוך מיצוי של עד 98 אחוז מהשמנים מזרעים, ישנן כמה בעיות הנוגעות לשאריות הממס ולטוהר השמן המופק [36]. בנוסף, הממס שהופעל בתהליך המיצוי השפיע על תפוקת השמן שנוצר. מיצוי עם הקסאן, אתר נפט, בנזן נפט, ציקלוהקסאן, אתר איזופרופיל, אתיל אצטט, טטרהידרופורן, פרופאן-2-ול ואצטון הניב 43.4-64.4 אחוזים [37,38]. לכן, כבישה קרה הייתה עדיפה על מיצוי ממס. עם זאת, כבישה קרה עלולה לגרום למורכבויות מסוימות בשלב הראשוני של שימוש במכבש בורג [39]. לכן, מיצוי אנזימטי מימי יכול להיות שיטת מיצוי חלופית מכיוון שהיא הניבה תכולת שמן זרעי דלעת גבוהה יותר (36.0 אחוזים) בהשוואה לשמן בכבישה קרה (33.5 אחוז) [21]. למרות שתהליך מיצוי אנזימטי מימי היה מסובך יותר מהכבישה הקרה, הוא כולל עלות השקעה זולה יחסית, ירידה מתמשכת בעלות תכשירי האנזים המסחריים, פוטנציאל לבודד בו-זמנית רכיבים פיטוכימיים ייחודיים ובעלי ערך, כמו גם טיפול הרצון הנרחב ביישום טכנולוגיות ירוקות [21]. מחקרים ראשוניים תיארו כי מספר אנזימים כגון צלולאזות, פקטינאזות, המיצלולאזות ופרוטאזות שימשו לעתים קרובות להרס מבנה דופן תאי הצמח כדי לשפר מיצוי ביו-אקטיבי מצמחים [16,17]. לכן, תכננו את המחקר הזה כדי להפיק שמן זרעים על ידי שימוש בתערובת אנזימים המכילה פקטינאז, צלולאז ופרוטאז (1:1:1) כפי שתואר בעבר על ידי Kanopka וחב'. (2016), מי שביצע את תנאי ההידרוליזה האנזימטית כדי להשיג את התשואה הגבוהה ביותר של שמן זרעי דלעת [21]. יתר על כן, שיטה זו מציגה חלופות בטוחות יותר ובעלות קיימא יותר מבחינה סביבתית למיצוי ממסים, המכונה כאן "מיצוי ירוק".

3.2. הרכב כימי של שמן זרעי דלעת

לצורך ניתוח הרכב חומצות שומן, שמן זרעי דלעת באמצעות מיצוי אנזימטי מימי (PSO1 ו-PSO2) הושווה ונותח יחד עם שמן זרעי דלעת מסחרי (COM1 ו-COM2) שהופק על ידי מיצוי בכבישה קרה. הרכבי חומצות השומן של PSO1, PSO2, COM1 ו-COM2 מוצגים בטבלה 1. כל דגימות שמן זרעי הדלעת כללו חומצות שומן רב בלתי רוויות (PUFA), חד בלתי רוויות (MUFA) וחומצות שומן רוויות. חומצה סיס-לינולאית (C18:2) הייתה המרכיב העיקרי בכל דגימות השמן. COM2 הכיל את התוכן הגבוה ביותר של חומצת שומן (51.74 אחוזים), ואחריו COM1 (48.00 אחוזים ), PSO1 (39.09 אחוזים) ו-PSO2 (37.63 אחוזים), בהתאמה. באופן דומה, חומצה ציס-אולאית (C18:1) הייתה קיימת באחוז גבוה, במיוחד ב-PSO2 (37.45 אחוזים), ואחריה COM1 (33.39 אחוז), PSO1 (31.22 אחוז) ו-COM2 (28.64 אחוז). חומצות שומן רוויות כגון חומצה פלמיטית (C16:0) וחומצה סטארית (C18:0) נמצאו בכמויות קטנות בלבד בכל אחת מדגימות השמן. כמו כן נצפו וזוהו כמויות עקבות של PUFA, MUFA וחומצות שומן רוויות אחרות.

בספרות, חומצה לינולאית ידועה גם כאומגה-6, חומצת שומן חיונית שאינה יכולה להיות מסונתזת על ידי גוף האדם, אלא מתקבלת רק על ידי צריכה תזונתית. חומצה לינולאית היא רכיב תזונתי חשוב לתפקודים בריאותיים בבני אדם, הכוללת מבשר לסרמידים שהם מרכיב עיקרי של ממברנות תא, ויטמין D ומגוון הורמונים [40,41]. מחקרים בבעלי חיים הראו שמחסור בחומצה לינולאית יכול לגרום לעור קשקשי ומגרד [23]. בנוסף, חומצה לינולאית משמן צמחי תמכה בריפוי פצעי עור, יחד עם מניעת דלקת עור ואקנה [23]. יתרה מכך, חומצה אולאית, או אומגה-9, הייתה מועילה במניעת סרטן, מחלות אוטואימוניות ודלקתיות [42]. ואכן, חומצה אולאית הפחיתה באופן משמעותי את ייצור תחמוצת החנקן במקום הפצע, וכתוצאה מכך סגירת פצעים מהירה יותר [43]. נתונים אלה תומכים בכך ששמן זרעי דלעת, המעשיר חומצה לינולאית (אומגה-6) ​​וחומצה אולאית (אומגה-9), מציג יתרונות בריאותיים פוטנציאליים.

מהממצאים שלנו, שמן זרעי דלעת (PSO1, PSO2, COM1 ו-COM2) היה מורכב מחומצות שומן רבות כולל חומצה לינולאית (C18:2), חומצה אולאית (C18:2), חומצה פלמיטית (C16:0) וחומצה סטארית (C18:0) שהם מרכיבים נפוצים הנמצאים בשמן זרעי דלעת [44]. חומצה לינולאית (אומגה-6) וחומצות אולאית (אומגה-9) היו דומיננטיות בכל דגימות השמן. הכמות הגבוהה ביותר של חומצה לינולאית הייתה COM2, ואחריה COM1, PSO1 ו-PSO2, בהתאמה. כמו כן, הכמות הגבוהה ביותר של חומצה אולאית הייתה PSO2, ואחריה COM1, PSO1 ו-COM2. תוצאות אלו מסבירות כי למיצוי אנזימטי מימי של שמן זרעי דלעת הייתה חומצה לינולאית מעט נמוכה יותר, אך לא חומצה אולאית מאשר מיצוי בכבישה קרה. הסיבה לתכולה הנמוכה יותר של חומצה לינולאית בזרעי דלעת ממיצוי אנזימטי מימי מאשר בדגימות שמן מסחריות נבעה מהבדל בתהליך המיצוי. מחקרים קודמים מצאו חוסר עקביות בכמות חומצות השומן הבלתי רוויות, במיוחד חומצה אולאית וחומצה לינולאית, בשמנים של זרעי דלעת ממיצויים שונים [39]. תכולת החומצה האולאית נעה בין 28.19 אחוז בשמן זרעי דלעת בכבישה קרה ל-30.56 אחוז בשמן זרעי דלעת המופק על ידי פנטאן, בעוד שתכולת החומצה הלינולאית נעה בין 43.86 אחוז בשמן זרעי דלעת המופק על ידי פנטאן. עד 46.67 אחוזים בשמן זרעי דלעת בכבישה קרה [39]. מלבד שיטות מיצוי שונות, הממסים המשמשים בתהליך המיצוי והטמפרטורה במהלך הבשלת הזרעים השפיעו גם על תכולת החומצה הלינולאית של זרעי הצמח. מחקר קודם הדגיש כי אתר נפט הניב שמן פשתן עם תכולת לינולאית נמוכה (26.2 אחוזים), בעוד ש-n-hexane הניב תוצאות סותרות עם תכולת חומצה לינולאית של 46.5 אחוזים [45]. בנוסף, חומצה לינולאית עומדת ביחס הפוך לטמפרטורה במהלך הבשלת זרעי חמניות [46].

בנוסף, מחקר יחסי גילה שההרכב הכימי מבחינת הרכב חומצות השומן גילה שחומצות לינולאית ואולאית נמצאות ב-47.45 אחוז ו-35 אחוזים, בהתאמה, בשמן זרעי דלעת (C. maxima) המופק באמצעות דיאתיל אתר [47] . לפי אקין ואח'. (2018), תכולת החומצה הלינולאית נעה בין 53.19 אחוזים ל-53.27 אחוזים, ואחריה חומצה אולאית, שהייתה קיימת גם בכמויות גבוהות שנעו בין 27.52 אחוז ל-27.59 אחוזים בכבישה קרה של מיצוי שמן זרעי C. pepo L. [48 ]. לכן, מיצוי אנזימטי מימי במחקר זה השיג גם תשואות נמוכות יותר של חומצות שומן מאשר מיצוי ממס ומיצוי בכבישה קרה שהוזכרו במחקרים קודמים. בהשוואת זנים, מצאנו ש-PSO1 (C. moschata Duch. Ex Poir) הראה כמות גבוהה יותר של חומצה לינולאית מאשר PSO2 (C. moschata, או, דלעת יפנית). באופן מגוון, PSO2 הציג כמות גבוהה יותר של חומצה אולאית מאשר PSO1. חשוב לציין, שינויים בפרופילים של חומצות שומן ובכמויות של שמן זרעי דלעת היו תלויים במקורם של זנים מסוימים, בתנאי האקלים ובניהול לאחר הקציר [49]. מלבד הבדלים בפרופילי חומצות השומן של שמני זרעי דלעת המתקבלים משיטות מיצוי שונות, דווח כי השמנים מטכנולוגיה אנזימטית מימית עשירים בפיטסטרול ובטוקופרול [50]. לכן, PSO1 ו-PSO2, אשר הופקו בשיטת המיצוי הירוקה, מוצעים כשמנים חלופיים לזרעי דלעת ליישומים נוספים.

למידע נוסף: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501