יעילות הטיפול המשולב בלמינריה ג'פוניקה ותמציות Cistanche Tubulosa בצמיחת שיער

איש קשר: emily.li@wecistanche.com

Kyungha Shin1# et al

מאז נשירת שיער בקרקפת גדלה לאחרונה אפילו בקרב צעירים, ופוגעת קשות באיכות החיים של אנשים,צמיחת שיער-השפעות מעוררות של תמצית Laminaria japonica (LJE) וCistanche tubulosaתמצית (CTE) נחקרה. לאחר אישור השלב האנאגן של זקיקים תחת גילוח, עכברי C57BL/6 זכרים הוחלו דרמלית עם 3% מינוקסידיל או ניתנו דרך הפה עם השילובים של LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)למשך 21 ימים. מינוקסידיל מקדם צמיחה מחודשת של השיער והגברת פעילויות ה-Glutamyl transpeptidase (-GTP) ו-ALP phosphatase (ALP). בנוסף, רמות גורם הגדילה של מינוקסידיל (EGF) וגורם גדילת אנדותל כלי דם (VEGF). ניהול משותף של LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)ב-54 מ"ג/ק"ג LJE בתוספת 162 מ"ג/ק"ג, CTE (Cistanche tubulosaלחלץ)הפעיל השפעות מקדמות סינרגטיות על צמיחת השיער מחדש, בדומה ל-3 אחוז מינוקסידיל. LJE הגביר את פעילות ALP באופן מועדף, בעוד CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)הגדילו את פעילויות ה-GTP וה-ALP וכן את ביטויי ה-EGF וה-VEGF. מודל דלקת בכיס אוויר In vivo, הפרשת כלי דם המושרה על ידי קרגנין, ועלייה בריכוזי תחמוצת החנקן והפרוסטגלנדין E2 באקסודאטים דוכאו סינרגטית על ידי מתן משותף של LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ). בנוסף, חדירת תאי דלקת עוכבה באופן מהותי על ידי הטיפול המשולב. התוצאות מצביעות על טיפול אוראלי משולב עם LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)מינונים ויחסים לא מתאימים מונעים נשירת שיער ומשפרים התקרחות, אשר עשויה להיות חלקית בתיווך על ידי הפעילות האנטי דלקתית שלהם.

מילות מפתח צמיחת שיער, דלקת, Laminaria japonica,Cistanche tubulosa, טיפול משולב

Cistanche tubulosaלחלץ פונקציות רבות

לאחרונה, נשירת שיער בקרקפת הולכת וגוברת אפילו בקרב צעירים, ופוגעת קשות באיכות החיים של האדם. למרות שהתקרחות אינה אחת מהבעיות הבריאותיות, היא עלולה לגרום ללחץ חברתי עמוק פסיכולוגי לא נוח. לכן, יש עניין רב לפתח חומרים מונעים ו/או טיפוליים חדשים לנשירת שיער וצמיחה מחודשת. למרות השוק של מיליארדי דולרים, ישנם כמה מוצרים זמינים כעת יעילים [1].
זקיקי שיער מחדשים את עצמם במהלך תקופות רכיבה על אופניים של צמיחה (אנאגן), רגרסיה (קטגן), מנוחה (טלוגן) ונשירה (אקסוגן) [2]. במהלך הקטגן, הרבה מתאי הזקיק עוברים מוות תאי מתוכנת (אפופטוזיס) [3], מה שמקטין את גודל הזקיק כאשר הזקיקים נכנסים לטלוגן. הפעלה של תאי גזע אפיתל שפועלים לעתים רחוקות על אופניים הממוקמים באזור הבליטה של ​​הזקיקים גורם להתחדשות זקיקים בתחילת השלב האנאגן הבא [4]. צאצאים של תאי גזע יוצרים מטריצה ​​זקיקית חדשה במהלך האנאגן המוקדם, וציר השיער ומעטפת השורש הפנימית נגזרים מתאי המטריצה ​​הבלתי מובחנים יחסית אלה [5]. ידוע היטב כי גודל זקיק השערה ומשך שלב האנאגן קובעים את גודל (קוטר) ואורך ציר השערה, בהתאמה. צמיחה מחזורית זו של שיער מווסתת על ידי גורמי גדילה מגוונים.

מינוקסידיל, פינסטריד ופרופסיה זמינים מסחרית כדי להאט את נשירת השיער ולהקל על צמיחת שיער מחדש. מינוקסידיל הוא מרחיב כלי דם שהפעיל תופעת לוואי כדי להקלצמיחת שיער[6] אשר עשויה להיות בשל פעילותו של אספקת חומרי הזנה ופתיחת תעלות אשלגן [7,8]. מינוקסידיל יעיל להתקרחות אנדרוגנית, בין שאר טיפולי התקרחות, אם כי יעילותו נעלמת תוך חודשים לאחר הפסקת הטיפול. לשם השוואה, פינסטריד ופרופסיה, תרופות לטיפול בהיפרפלזיה שפירה של הערמונית וסרטן הערמונית, נרשמו במדינות רבות עבור התקרחות אנדרוגנית (התקרחות גברית). פינסטריד ופרופסיה הם אנטיאנדרוגנים סינתטיים, המעכבים רדוקטאז מסוג II 5-, אנזים ההופך טסטוסטרון לדיהידרוטסטוסטרון (DHT) בתאי הפפילה בתחתית זקיקי השיער [9].

Laminaria japonica, Undaria pinnatifida ו-Cladosiphon okamuranus, בתפוצה רחבה במדינות רבות, שימשו כתרופות טיפוליות ברפואה המזרחית במשך תקופה ארוכה. במחקרים קודמים, פוקואידן, קומפלקס פוליסכריד סולפט, הוצא וזוהה מאצות הים ואושר כבעל פעילות נוגדת חמצון, אנטי קרישה, אנטי סרטנית ואנטי דלקתית [10,11]. לאחר מכן, הוכחו השפעות מועילות של פוקואידן על מחלות דלקתיות, איסכמיה, תפקוד לקוי של מערכת החיסון וגידולים [12,13]. מצד שני,Cistanche tubulosaתמצית (CTE) הייתה בשימוש נרחב גם לתרופות מסורתיות בסין. CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)משפר את זרימת הדם על ידי הורדת רמות הכולסטרול בדם [14]. לאחרונה דווח כי CTE הפחית את הייצור של גורם גידול-נמק (TNF-) ואינטרלוקין-4 (IL-4) שהם גורמים עיקריים לייצור תחמוצת החנקן (NO) במסלול הדלקתי [15]. הדגמנו גם שפוקואידן מתמצית Laminaria japonica (LJE) ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)דלקת מוחלשת סינרגטית במבחנה ובאינבו [16]. יש לציין כי הוכח שיש קשר הדוק של דלקת עור (במיוחד בלוטת הדמע) עם התקרחות [17]. לפיכך, מתעוררים היבטים אנטי דלקתיים של טיפול בהתקרחות [18].
בהתבסס על פעילויות השיפור על זרימת דם ודלקת, אנו חוקרים את היעילות המשולבת של LJE ו-CTE（Cistanche tubulosa לחלץ)עַלצמיחת שיערומנגנון(ים) הבסיסיים, בהשוואה ל-3 אחוז מינוקסידיל (Hyundai Pharmaceutical, סיאול, קוריאה), ידוע היטבצמיחת שיערמשפר.

Cistanche tubulosaתמצית טובה עבורצמיחת שיער

חומרים ושיטות

חומרים

LJE ו-CTE (Cistanche tubulosaלחלץ)הושגו מ-Misuba RTech Co., Ltd (Asan, קוריאה). אבקה מיובשת של Laminaria japonica חולצה במים מטוהרים ב-60oC למשך 24 שעות, סוננה דרך קרום 0.45 מיקרומטר, חיטוי ויבש בריסוס.Cistanche tubulosaהופץ ב-80 אחוז אתנול, חוטא, רוכז ומיובש. LJE ו-CTE (Cistanche tubulosaלחלץ)נשמרו ב-4oC, ערבבו (1:3) והומסו במים מטוהרים לפני השימוש, וניתנו דרך הפה בנפח של 5 מ"ל/ק"ג.
חיות
זכר C57BL/6 עכברים עבורצמיחת שיערעכברי מחקר וזכר ICR למחקר דלקת נרכשו מה-Daehan Biolink (Eumseong, קוריאה), ושוכנו בחדר עם תנאי סביבה קבועים (23±2ºC; 45-65 אחוזי לחות יחסית; 12-אור שעה -מחזור כהה; 150-300 בהירות לוקס). הזנת גלולה ומים מטוהרים היו זמינים באופן חופשי. כל הניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים (IACUC) של האוניברסיטה הלאומית של צ'ונגבוק (CBNU), קוריאה, ונערכו על פי נוהלי הפעולה הסטנדרטיים (SOP) של המרכז לחקר בעלי חיים במעבדה, CBNU.

טיפול לצמיחת שיער

לאחר אישור שלב האנאגן על ידי התבוננות בצבע עור ורוד בצורה הומוגנית בעור האחורי של עכברי C57BL/6 (בני 6 שבועות, n=8/קבוצה) לאחר הגזירה בשלב הטלוגן, השיער היה מגולח [1,19 ,20]. מיום המחרת נבחרו עכברים ללא שריטות נראות דרך הפה
מטופלים ב-LJE (18 או 54 מ"ג/ק"ג), CTE (54 או 162 מ"ג/ק"ג), או בתערובת שלהם (18 פלוס 54 או 54 פלוס 162 מ"ג/ק"ג) פעם ביום למשך 21 ימים. מינונים נמוכים של LJE (18 מ"ג/ק"ג) ו-CTE (54 מ"ג/ק"ג) הגיעו ממינונים אנושיים משוערים של 100 מ"ג לגוף (70 ק"ג) ו-300 מ"ג/גוף לאחר תרגום שטח פנים של משקל הגוף (ק"מ{{14} } עבור אדם/Km=3 עבור עכבר), בהתאמה. מינונים גבוהים של LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)נקבעו ל-3 קפלים, לבד או בשילוב, כדי להעריך השפעות סינרגיות מרביות [16]. מינוקסידיל (3 אחוזים, 0.2 מ"ל) הוחל באופן מקומי פעם ביום על העור המגולח באותו לוח זמנים עם טיפול LJE/CTE.

תצפית גסה בצמיחת שיער

בימים במרווחים של 3-ימים לאחר הגילוח ובמהלך הטיפול, העכברים הורדמו קלות עם דיאתיל אתר, ותצלומים צולמו על צדם האחורי. היחס בין צמיחת שיער מחודשת (אזור שצמח מחדש/אזור מגולח) בצילומים נותח באמצעות מערכת ניתוח תמונה ממוחשבת (Imageinside, Daejeon, קוריאה).

בדיקה מיקרוסקופית של זקיקי שיער

בימים 14 ו-21, העכברים הוקרבו בהרדמה עמוקה עם דיאתיל אתר, ועור הגב שלהם הוסרו [1]. עור הגב נחתך לשני חלקים. חלקי רקמה מקובעים בפורמלין, מוטבעים בפרפין (קוטר של 5 מיקרומטר) של חלק אחד נצבעו בהמטוקסילין-אאוזין כדי לבחון את מספר זקיקי השיער והממצאים ההיסטולוגיים. החלק השני של הרקמה הוקפא בחנקן נוזלי לצורך בדיקת אנזימים ובדיקת אימונו.

בדיקת פעילות האנזים

רקמת העור הומוגגה ב-4 נפחים של חיץ פוספט (pH 7.4). ההומוגנית עברה צנטריפוגה ב-3,000 סל"ד למשך 20 דקות, והסופרנטנט שימש לבדיקת פעילויות -גלוטמיל טרנספפטידאז (-GTP) ופוספטאז אלקליין (ALP) באמצעות p-nitrophenyl phosphate (PNPP)-DEAV כ מצע [1,21].

Cistanche tubulosa

כימות גורמי גדילה

גורם גדילה אפידרמיס (EGF) ופקטור גדילת אנדותל כלי דם (VEGF) כומתו באמצעות ערכות בדיקת חומרי ספיגה (ELISA) (R&D Systems, Minneapolis, ארה"ב) לפי הוראות היצרן [1,22].

טיפול בדלקת

עכברי ICR (בני 7 שבועות, n=8/קבוצה) טופלו דרך הפה עם LJE (18 או 54 מ"ג/ק"ג), CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)(54 או 162 מ"ג/ק"ג), או התערובת שלהם (18 פלוס 54 או 54 פלוס 162 מ"ג/ק"ג) פעם ביום למשך 7 ימים [16]. ביום הראשון של LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)בטיפול, העכברים הוזרקו תת עורית עם 10 מ"ל של אוויר סטרילי לתוך הצד האחורי כדי ליצור כיס [16,23,24]. לאחר יומיים ו-5 ימים, הוזרק מחדש לכיס 5 מ"ל אוויר. שעה לאחר ה-LJE וה-CTE האחרונים（Cistanche tubulosaלחלץ)טיפול, 1 מ"ל של קרגנין (1 אחוז במי מלח; Sigma-Aldrich, St. Louis, ארה"ב) או הרכב שלו (מי מלח) הוזרק לתוך השקית.

ניתוח היציאות

כיס האוויר נשטף עם 1 מ"ל של תמיסת מלח קרה 6 שעות לאחר הזרקת קרגנין, והנפח הנקי של נוזל השטיפה נרשם [16]. המספר הכולל של תאים דלקתיים כולל נויטרופילים, מונוציטים ולימפוציטים נקבע באמצעות מונה קולטר.

הריכוזים של NO ושל פרוסטגלנדין E2 (PGE2) נקבעו על ידי ריאגנט Griess (Sigma-Aldrich) ואנזים immunoassay (EIA) באמצעות ערכת Crelate-EIA (Assay Designs, Ann Arbor, ארה"ב), בהתאמה [16].

ניתוח סטטיסטי

הנתונים מוצגים כממוצע ± שגיאת תקן. המובהקות הסטטיסטית נקבעה על ידי ניתוח חד-כיווני של שונות, ואחריו מבחן ההשוואה המרובה של Tukey שלאחר מכן. ערכי P<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

תוצאות

יישום של מינוקסידיל (3 אחוזים), חומר ייחוס, הקל בצורה ניכרת עלצמיחת שיערשל עכברי C57BL/6, המציגים כיסוי כמעט מלא (92.4 אחוזים) של האזור המגולח (איורים 1, 2B) בהשוואה ל-29.2 אחוזים בצמיחה רגילה (איורים 1, 2A) ביום 21. אם כי פחות יעיל מיישום מינוקסידיל , טיפול דרך הפה של LJE גם הקל עלצמיחת שיער, מה שמוביל לכיסוי של 33.5 ו-69.1 אחוזים ב-18 ו-54 מ"ג/ק"ג, בהתאמה (איורים 1, 2C, 2D). CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)היה יעיל גם בשיפורצמיחת שיער, להגיע לכיסוי של 73.6 ו-80.4 אחוזים ב-54 ו-162 מ"ג/ק"ג, בהתאמה (איורים 1, 2E, 2F). יש לציין, טיפול משולב במינונים גבוהים של LJE (54 מ"ג/ק"ג) ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)(162 מ"ג/ק"ג) שיפר להפליא אתצמיחת שיערמהיום ה-12, דומה להשפעה של מינוקסידיל (איורים 1, 2H), אם כי מינונים נמוכים של LJE (18 מ"ג/ק"ג) ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)(54 מ"ג/ק"ג) מפעילים אפקט סינרגטי רק בשלב המוקדם (איורים 1, 2G).

איור 1. מהלך זמן של צמיחת שיער מחדש של עכברים שטופלו במינוקסידיל, או תמצית Laminaria japonica (LJE) ו/אוCistanche tubulosaתמצית (CTE). ,

○רגיל; ●, יישום מינוקסידיל (3 אחוזים); △, 18 מ"ג/ק"ג LJE; ▼, 54 מ"ג/ק"ג LJE; □, 54 מ"ג/ק"ג CTE; ■, 162 מ"ג/ק"ג CTE; ◇, 18 מ"ג/ק"ג LJE בתוספת 54 מ"ג/ק"ג CTE; ◆, 54 מ"ג/ק"ג LJE בתוספת 162 מ"ג/ק"ג CTE（Cistanche tubulosaלחלץ).

איור 2. ממצאים גולמיים מייצגים של צמיחת שיער מחדש של עכברים שטופלו במינוקסידיל, או תמצית Laminaria japonica (LJE) ו/אוCistanche tubulosaתמצית (CTE) ביום 21.

א, רגיל; ב, מינוקסידיל (3 אחוזים) יישום; C, 18 מ"ג/ק"ג LJE; D, 54 מ"ג/ק"ג LJE; E, 54 מ"ג/ק"ג CTE（Cistanche tubulosaלחלץ); F, 162 מ"ג/ק"ג CTE; G, 18 מ"ג/ק"ג LJE בתוספת 54 מ"ג/ק"ג CTE; H, 54 מ"ג/ק"ג LJE בתוספת 162 מ"ג/ק"ג CTE（Cistanche tubulosaלחלץ).

בהשוואה לזקיקי שיער רגילים (איור 3A), יישום מינוקסידיל שיפר את שלמות זקיקי השיער, והראה זקיקים גדולים יותר ופירות שיער עבות יותר (איור 3B). תופעות כאלה נמצאו גם בעור של עכברים שטופלו ב-LJE ו/או ב-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)(איורים 3C-3H). במיוחד, היעילות לחיזוק זקיק השיער של טיפול משולב של LJE ו-CTE (Cistanche tubulosaלחלץ)היה דומה לזה של מינוקסידיל.

איור 3. ממצאים מיקרוסקופיים מייצגים של צמיחת שיער מחדש של עכברים שטופלו במינוקסידיל, או תמצית Laminaria japonica (LJE) ו/אוCistanche tubulosaתמצית (CTE) ביום 21.

א, רגיל; ב, מינוקסידיל (3 אחוזים) יישום; C, 18 מ"ג/ק"ג LJE; D, 54 מ"ג/ק"ג LJE; E, 54 מ"ג/ק"ג CTE（Cistanche tubulosaלחלץ); F, 162 מ"ג/ק"ג CTE（Cistanche tubulosaלחלץ); G, 18 מ"ג/ק"ג LJE בתוספת 54 מ"ג/ק"ג CTE; H, 54 מ"ג/ק"ג LJE בתוספת 162 מ"ג/ק"ג CTE

מריחת מינוקסידיל העלתה את הפעילות של -GTP המשרה את זקיקי השיער לשלב אנגן ב-90-120 אחוזים בימים 14 ו-21, בהשוואה לרמת העור הרגיל (איור 4). LJE (54 מ"ג/ק"ג) גם הגביר את פעילות האנזים, אם כי היו שינויים גבוהים. CTE הפעיל השפעות דומות, והגביר משמעותית את פעילות -GTP ביום 14. מעניין, טיפול משולב של LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)הגדילה עוד יותר את פעילות האנזים גבוהה מזו כאשר נעשה שימוש בתמציות בלבד.
פעילות ALP, סמן של צמיחת עצם ואנגיוגנזה, עלתה משמעותית בעור בימים 14 ו-21 לאחר יישום מקומי של מינוקסידיל (איור 5). LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)גם הגדילה את פעילות ALP לאחר מתן פומי באופן תלוי מינון. יש לציין שפעילות האנזים הוגברה באופן סינרגטי על ידי טיפול משולב עם LJE ו-CTE.

איור 4. השפעות של מינוקסידיל (MXD, 3 אחוזים), או תמצית Laminaria japonica (LJE) ו/אוCistanche tubulosaתמצית (CTE) (במ"ג/ק"ג) על פעילות -Glutamyl transpeptidase (-GTP) בימים 14 (A) ו-21 (B) של הטיפול.

*שונה באופן משמעותי מבקרה רגילה (נור) (עמ'<>

איור 5. השפעות של מינוקסידיל (MXD, 3 אחוזים), או תמצית Laminaria japonica (LJE) ו/אוCistanche tubulosaתמצית (CTE) (במ"ג/ק"ג) על פעילות פוספטאז אלקליין (ALP) בימים 14 (A) ו-21 (B) של הטיפול.

*שונה באופן משמעותי מבקרה רגילה (נור) (עמ'<>

בניתוח של EGF, ידועצמיחת שיערגורם, יישום Minoxidil הגביר את רמת ה-EGF ב-3.5 קיפולים של בקרה רגילה בשני הימים 14 ו-21 (איור 6). LJE (18 מ"ג/ק"ג) העלה את ה-EGF רק ביום 21, בעוד ש-CTE (162 מ"ג/ק"ג) הגדיל מאוד את ייצורו בימים 14 ו-21. מעניין לציין שהטיפול המשולב של LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)אפילו במינונים נמוכים הפגינו השפעות סינרגיות ניכרות.

טיפול במינוקסידיל גם העלה את רמת ה-VEGF ב-50-80 אחוז מעל ערך הבקרה (איור 7). למרות ש-LJE לא היה יעיל, CTE (Cistanche tubulosaלחלץ)הפעיל השפעות משפרות יוצאות דופן. בנוסף, טיפול משולב של LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)הציג פעילות סינרגטית בשלב המוקדם ביום ה-14.

איור 6. השפעות של מינוקסידיל (MXD, 3 אחוזים), או תמצית Laminaria japonica (LJE) ו/אוCistanche tubulosaתמצית (CTE) (במ"ג/ק"ג) על תכולת גורם הגדילה האפידרמיס (EGF) בימים 14 (A) ו-21 (B) של הטיפול.

*שונה באופן משמעותי משליטה רגילה (נורה) (P<>

איור 7. השפעות של מינוקסידיל (MXD, 3 אחוזים), או תמצית Laminaria japonica (LJE) ו/אוCistanche tubulosaתמצית (CTE) (במ"ג/ק"ג) על תכולת גורם גדילה אנדותל כלי דם (VEGF) בימים 14 (A) ו-21 (B) של הטיפול.

*שונה באופן משמעותי מבקרה רגילה (נור) (עמ'<>

הזרקת קרגנין לתוך כיס האוויר של עכבר ICR הגדילה את נפח האקסודאט בתוך השקית פי 6 מרמת הבקרה (טבלה 1). הפרשה מוגברת כזו נחלשה באופן משמעותי על ידי טיפול ב-LJE (18 ו-54 מ"ג/ק"ג) או CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)(54 ו-162 מ"ג/ק"ג). יש לציין, טיפול משולב עם LJE ו-CTE הפחית עוד יותר את נפח האקסודאט, בהשוואה להשפעות האישיות. מספר התאים הדלקתיים גדל באופן דרסטי על ידי הזרקת קרגנין: רמות הבקרה של פי 34.6, 4.2 ו-24.9 עבור נויטרופילים, מונוציטים ולימפוציטים, בהתאמה (טבלה 1). עם זאת, LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)הפחית באופן משמעותי את התאים הדלקתיים באופנים תלויי מינון, שבהם LJE היה עדיף במידת מה על CTE（Cistanche tubulosaלחלץ). כצפוי, השפעות סינרגיות בחדירת התאים הדלקתיים הושגו על ידי מתן משותף של LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ).
במקביל לחדירת התאים הדלקתיים לכיס, תכולת ה-NO ו-PGE2 בכיס גדלה באופן דרסטי גם בעקבות הזרקת קרגינן (טבלה 1). בהשוואה להשפעה הקלה של LJE, CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)הוריד באופן ניכר את ריכוז ה-NO. טיפול משולב ב-LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)הפחית עוד יותר את רמת NO באופן תלוי מינון. באופן דומה, רמת ה-PGE2 המוגברת דוכאה סינרגטית על ידי הטיפול המשולב של LJE ו-CTE (טבלה 1).

דִיוּן

לראש האדם יש בממוצע 100,000 זקיקי שיער. במהלך החיים, כל זקיק גדל ונשיר בערך 20 פעמים, מראה נשירת שיער יומית של 100 קווצות [25]. נשירת שיער לרבות התקרחות והתקרחות היא מצב מעיק עבור גברים ונשים, במיוחד בחברה המודרנית. לכן, ישנה חשיבות רבה לפתח טיפולים חדשים המונעים נשירת שיער ומגבירים צמיחת שיער מחודשת. מבחינה זו, הרפואה האלטרנטיבית משכה עניין של החוקרים.

היבטים מורפולוגיים, היסטוכימיים וביוכימיים הקשורים להזדקנות של התקרחות גברית נחשפו על ידי סדרה של מחקרים על מקוק זנב גדם. בהתקרחות גברית, שלב הטלוגן היה ממושך, בעוד ששלב האנאגן התקצר. לפיכך, נחשב כי לשיפור נשירת השיער, תחזוקה של התארכות זקיקי השיער המתרחשת מאנגן מוקדם לאמצע אנגן חשובה מאוד [26]. במחקר הנוכחי, הדגמנו אתצמיחת שיער-הקלת פעילות של טיפול משולב LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ). והכי חשוב, המרשם המשולב של LJE (54 מ"ג/ק"ג) ו-CTE (162 מ"ג/ק"ג) הפגין פעילות מצוינת לצמיחת שיער, למרות מתן פומי של התמציות. יש לציין כי ההשפעה של טיפול משולב הייתה דומה לזו של יישום עורי של ריכוז גבוה (3 אחוזים) של תרכובת מטוהרת מינוקסידיל, אם כי הריכוזים של החומרים הפעילים של LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)בעור לאחר מתן דרך הפה לא אושר.
בעור העכבר הרוכב על אופניים, פעילות -GTP בולטת במהלך anagen אך פוחתת מאוד במהלך הטלוגן [27]. בעור, האנזים קיים אך ורק במעטפת השורש החיצונית והפנימית של זקיקי השיער מתחת לרמת בלוטות החלב שבהן חסר -GTP [27]. לשם השוואה, ה-ALP מתבטא בצורה בולטת ביחידות הפילוסביות, והפעילות גוברת באזור צמיחת השיער מחדש. ALP כגורם אנגיוגני משפר את אספקת התזונה לפפילות העוריות ובכך משרה עובי במהלך anagen [28]. עם זאת, אושר שפעילות ה-ALP ירדה בעור ההתקרחות [21]. במחקר המכניסטי, תרכובת הייחוס מינוקסידיל שיפרה באופן ניכר את הפעילות של -GTP ו-ALP, מה שמרמז שמינוקסידיל מסייעצמיחת שיערלא רק על ידי השראת זקיקי שיער
לשלב האנאגן אלא גם על ידי שיפור זרימת הדם באמצעות אנגיוגנזה. מאז LJE הגדילה את פעילות ALP, מוצע כי LJE מציג השפעה מועילה עלצמיחת שיערבאמצעות הפוטנציאל האנגיוגני שלו, כפי שהסיק ממחקר קודם שלפוקואידן, מרכיב פעיל של LJE, יש פעילות משפרת את זרימת הדם [29]. לשם השוואה, CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)שפר את פעילות ה-GTP וה-ALP, דבר המעיד על השפעותיו על השראת שלב האנאגן וכן על שיפור זרימת הדם. על פי הפעולות הסינרגטיות על אנזימי -GTP ו-ALP, מאמינים שניתן להשיג צמיחת שיער גבוהה יותר על ידי מתן משותף של LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ).
ידוע היטב כי ציטוקינים וגורמי גדילה מגוונים כולל EGF ו-VEGF מעורבים בוויסות מורפוגנזה וצמיחת שיער [30,31]. מעניין לציין שלגורמים שמקורם בתאי פפילה עוריים יש פעילות כימוטקטית על התאים שמסביב, מה שמוביל, בתורו, לקידום שלצמיחת שיער[32]. EGF מתבטא בקשר עם התפתחות זקיקי שיער [33,34]. למרות שהביטוי הן של EGF והן של הקולטן שלו (EGFR) במעטפת השורש החיצונית מווסת למטה עם השלמת הצמיחה של הזקיקים, הביטוי שלהם מתאושש כאשר התאים הזקיקים נכנסים לשלב האנאגן. VEGF ממלא תפקיד חשוב המעורב באנגיוגנזה במהלך התגובה הדלקתית והתפתחות הגידול [35]. במיוחד, רשת כלי הדם קשורה קשר הדוק למחזור צמיחת השיער [36-38]. לכן, אושר שביטוי הגנים של VEGF משתנה בהתאם למחזור השיער האנושי [39].

מהתוצאות במחקר הנוכחי מוסבר כיצמיחת שיערההשפעה המעודדת של מינוקסידיל עשויה להיות בגלל ה-EGF וה-VEGF הפוטנציאליים שלו, המאפשרים את צמיחת הזקיק וכן את האנגיוגנזה. למרות ש-LJE לא השפיע על ביטוי VEGF, הוא העלה את תכולת ה-EGF בעור לאחר מתן אוראלי. לשם השוואה, CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)היה יעיל בביטוי הן של EGF והן של VEGF. במיוחד, LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)הפעילו השפעות תוספות על ביטוי גורמי הגדילה.

בנוסף להתארכות השערות, שלמות זקיקי השיער השתפרה להפליא בעקבות טיפול במינוקסידיל, LJE ו/או CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)בבדיקה המיקרוסקופית. בשלב המוקדם של נשירת שיער והתקרחות בחולים אנושיים ובמודלים של בעלי חיים, שלמות הזקיקים נפגעה ועובי ציר השערה הופחת, בעוד שלמות הזקיק ועובי השער התאוששו בשערות מתחדשות. מעניין שהשפעות חיוביות כאלה על שלמות וצמיחה מחודשת של רכיבי שיער הושגו עם מתן אוראלי של LJE פלוס CTE（Cistanche tubulosaלחלץ), שבה ההשפעה הייתה דומה לזו של מריחה מקומית של ריכוז גבוה של מינוקסידיל. לכן, צפוי שהשילוב לצריכה פומית של LJE בתוספת CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)יכול להיות מרשם נוח יחסית לשימוש עורי במינוקסידיל.
במודל ההתקרחות העכבר, חדירת לימפוציטים רגישים לסטרואידים סביב זקיקי השיער היא שכיחה, המציגה דפוס דומה לאימונותרפיה של התקרחות אנושית עם דלקת בבלוטת הדמעות [17,40]. במחקר הנוכחי, דלקת עור הנגרמת על ידי קרגנין הוחלשה במידה ניכרת על ידי LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)יַחַס; כלומר, הפרשת כלי הדם וחדירת התאים הדלקתיים דוכאו באופן סינרגטי. בניתוח כמותי, מתווכים דלקתיים עיקריים NO ו-PGE 2 נשלטו באופן מהותי לאחר מתן משותף פומי של LJE ו-CTE (Cistanche tubulosaלחלץ). מעניין שמכיוון ש-LJE הציג פעילות אנטי-דלקתית גבוהה מזו של פוקואידן מטוהר למחצה [16], ההנחה היא שייתכן שיש מרכיב(ים) פעילים נוספים, מלבד פוקואידן, ב-LJE.

יחד, התוצאות מצביעות על טיפול אוראלי משולב עם LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)משפר את נשירת השיער על ידי וויסות מעלה של גורמי גדילה ופעילויות אנזימים קשורות ובחלקו באמצעות פוטנציאל אנטי דלקתי. לכן, מוצע כי שילוב כולל LJE ו-CTE（Cistanche tubulosaלחלץ)מינונים ויחסים קליניים לא מתאימים יכולים להיות מתכון מועמד לחולי נשירת שיער.

Cistanche tubulosaלחלץ מוצרים

תודות

מחקר זה נתמך כלכלית על ידי פיתוח התעשייה המוביל באזור הכלכלי של משרד התעשייה המוביל בצ'ונגצ'ונג, המכון של קוריאה לקידום טכנולוגיה (KIAT) ומשרד כלכלת הידע (MKE), ובחלקו על ידי תוכנית פיתוח טכנולוגיות מזון בעל ערך מוסף גבוה. , משרד החקלאות, המזון והכפר (MAFRA; מספר מענק 113034-3).

ניגוד עניינים

המחברים מצהירים כי אין ניגוד עניינים פיננסי לפרסום תוצאות אלו.

מתוך: 'יעילות הטיפול המשולב של תמציות Laminaria japonica ו- Cistanche tubulosa בצמיחת שיער' על ידיKyungha Shin1# et al

--- Lab Anim Res 2015: 31(1), 24-32http://dx.doi.org/10.5625/lar.2015.31.1.24

הפניות

1. Kim JS, Kang BS, Park HJ, Kim DY, Hwang SY, Nam SY, Yun YW, Lee BJ. קידום ההשפעה של תערובות תמציות צמחים על צמיחת שיער מחדש בעכברי C3H/HeJ. J Biomed Res 2009; 10(3): 99-108.
2. Paus R, Cotsarelis G. הביולוגיה של זקיקי השיער. N Engl J Med 1999; 341(7); 491-497.
3. Cotsarelis G. זקיק השיער: מת לתשומת לב. Am J Pathol 1997; 151(6): 1505-1509.
4. Cotsarelis G, Sun TT, Lavker RM. תאים שומרי תווית שוכנים באזור הבליטה של ​​יחידת ה-pilosebaceous: השלכות על תאי גזע זקיקים, מחזור שיער וסרטן העור. תא 1990; 61(7): 1329-1337.
5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Morphogenesis וחידוש זקיקי שיער מתאי גזע מבוגרים. תא 2001; 104(2): 233-245.
6. Burton JL, Marshall A. Hypertrichosis עקב מינוקסידיל. Br J Dermatol 1979; 101(5): 593-595.
7. Meisheri KD, Cipkus LA, Taylor CJ. מנגנון הפעולה של הרחבת כלי דם הנגרמת על ידי מינוקסידיל סולפט: תפקיד להגברת החדירות K פלוס. J Pharmacol Exp Ther 1988; 245(3): 751-760.
8. Buhl AE, Waldon DJ, Baker CA, Johnson GA. מינוקסידיל סולפט הוא המטבוליט הפעיל הממריץ את זקיקי השיער. J Invest Dermatol 1990; 95(5): 553-557.
9. קאופמן KD, Dawber RP. Finasteride, סוג 2 5מעכב אלפא רדוקטאז, בטיפול בגברים עם התקרחות אנדרוגנטית. Expert Opin Investig Drugs 1999; 8(4): 403-415.
10. פלדמן SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. תכונות אנטי-ויראליות של שברי פוקואידן מ-Leathesia difformis. Phytomedicine 1999; 6(5): 335-340.
11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. יכולת נוגדת חמצון ונוגדת קרישה פוטנציאלית של שברי פוקואידן במשקל מולקולרי נמוך המופקים מ- Laminaria japonica. Int J Biol Macromol 2010; 46(1): 6-12.
12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan משפר את זרימת הדם הכלייתית בשלב המוקדם של פגיעה כלייתית באיסכמיה/פרפוזיה חוזרת בחולדה. J Physiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.
13. Li N, Zhang Q, Song J. הערכה טוקסיקולוגית של פוקואידן המופק מ- Laminaria japonica בחולדות Wistar. Food Chem Toxicol 2005; 43(3): 421-426.
14. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH. ההשפעות ההיפוכולסטרולמיות של תמצית Cistanche tubulosa, תרופה סינית מסורתית, בעכברים. Am J Chin Med 2009; 37(6): 1125-1138.
15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. השפעה מעכבת של אקטאוזיד מבודד מ-Cistanche tubulosa על שחרור מתווך כימי וייצור ציטוקינים דלקתיים על ידי תאי RBL-2H3 ו-KU812. Planta Med 2010; 76(14): 1512-1518.
16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. השפעות אנטי דלקתיות סינרגטיות של Laminaria japonica fucoidan ותמצית Cistanche tubulosa. Lab Anim Res 2012; 28(2): 91-97.
17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. הקשר של דלקת בבלוטת הדמעות עם alopecia areata. אורביט 2015; 34(1): 45-50.
18. Brzezinska-Wcislo L, Bergler-Czop B, Wcislo-Dziadecka D, LisSwiety A. היבטים חדשים של הטיפול בהתקרחות אראטה. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31(4): 262-265.
19. Hattori M, Ogawa H. ניתוח ביוכימי שלצמיחת שיערמההיבטים של הזדקנות ופעילויות אנזימים. J Dermatol 1983; 10(1): 45-54.
20. Lee SH, Lee HJ, Baek IJ, Yon JM, Nam SY, Lee BJ, Yun YW, Kim YB, Hwang SY, Hong JT. השפעת תחליב הקרקפת DREAMMO® עלצמיחת שיערקידום במודל התקרחות של עכברים C57BL/6. Lab Anim Res 2006; 22(1): 91-96.
21. Handjiski BK, Eichmüller S, Hofmann U, Czarnetzki BM, Paus R. Alkaline phosphatase פעילות ולוקליזציה במהלך מחזור השיער העכברי. Br J Dermatol 1994; 131(3): 303-310.
22. Cross MJ, Dixelius J, Matsumoto T, Claesson-Welsh L. VEGF רצפטור אותות. Trends Biochem Sci 2003; 28(9): 488-494.
23. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB. השפעות אנטי דלקתיות של תמצית אתנול של אנג'ליקה ג'יגה במודל של דלקת שקיק אוויר של קרגנין. Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.
24. Kim D, Park D, Kyung J, Yang YH, Choi EK, Lee YB, Kim HK, Hwang BY, Kim YB. השפעות אנטי דלקתיות של תמצית סופר-קריטית של Houttuynia cordata במודל דלקת של שקיק-אוויר. Lab Anim Res 2012; 28(2): 137-140.
25. Rebora A. פתוגנזה של התקרחות אנדרוגנית. J Am Acad Dermatol 2004; 50(5): 777-779.
26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, מתחם חדש עבורצמיחת שיערקידום דגמי עכברים in vitro ו-in vivo. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 213-218.
27. Kawabe TT, Kubicek MF, Johnson GA, Buhl AE. שימוש בפעילות גמא-גלוטמיל טרנספפטידאז כסמן של מחזור שיער והשראת אנגן בזקיקי שיער עכברים. J Invest Dermatol 1994; 103(1): 122-126.
28. Hamada K, Suzuki K. הערכת מדדים ביוכימיים כסמן מחזור שיער בעכברי C3H. Exp Anim 1996; 45(3): 251-256.
29. Park SJ, Lee KW, Lim DS, Lee S. הפוליסכריד הסולפטד פוקואידן מעורר התמיינות אוסטאוגנית של תאי גזע שמקורם בשומן אנושי. Stem Cells Dev 2012; 21(12): 2204-2211.

30. Danilenko DM, Ring BD, Pierce GF. גורמי גדילה וציטוקינים בהתפתחות זקיקי שיער ובמחזוריות: תובנות עדכניות ממודלים של בעלי חיים והפוטנציאלים לטיפול קליני. מול מד היום 1996; 2(11): 460-467.
31. Ozeki M, Tabata Y. In vivo קידם את הצמיחה של זקיקי שיער עכברים על ידי שחרור מבוקר של גורמי גדילה. Biomaterials 2003; 24(13): 2387-2394.
32. Fujie T, Katoh S, Oura H, Urano Y, Arase S. ההשפעה הכימוטקטית של גורם שמקורו בתא פפילה עורי על תאי מעטפת השורש החיצוניים. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 206-212.
33. Stenn KS, Paus R. בקרות של רכיבת זקיקי שיער. Physiol Rev 2001; 81(1): 449-494.
34. Chapman RE, Hardy MH השפעות של גורם גדילה אפידרמיס של עכבר המוזרק תוך עור ומיושם מקומי על צמיחת צמר, עור וזקיקי צמר של כבשי מרינו. Aust J Biol Sci 1988; 41(2): 261-268.
35. Dvorak HF, Brown LF, Detmar M, Dvorak AM. גורם חדירות כלי דם/גורם גדילה אנדותל כלי דם, חדירות יתר של כלי דם ואנגיוגנזה. Am J Pathol 1995; 146(5): 1029-1039.
36. Ellis RA, Moretti G. דפוסי כלי דם הקשורים לזקיקי שיער קטגן בקרקפת האדם. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448-457.
37. Stenn KS, Fernandez LA, Tirrell SJ. התכונות האנגיוגניות של זקיק השיער של העכברושים קשורות לנורה. J Invest Dermatol 1988; 90(3): 409-411.
38. Yano K, Brown LF, Detmar M. Control ofצמיחת שיערוגודל הזקיק על ידי אנגיוגנזה בתיווך VEGF. J Clin Invest 2001; 107(4): 409-417.
39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. הפצה של שלבי זקיק שיער אדישים של VEGF mRNA על ידי הכלאה של פלואורסצנטי באתרו בשילוב עם מיקרוסקופיה לייזר קונפוקלית. בתוך: מחקר שיער למילניום הבא (Van Neste DJJ, ed), Elsevier, אמסטרדם, 1996; עמוד 407-12.
Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. . J Invest Dermatol 1999; 113(1): 61-68.