ניתוח הרכב של Cistanche Tubulosa: הפרדה ומבנה של פנילתנואיד גליקוזיד וניאוגנין גליקוזיד

איש קשר:joanna.jia@wecistanche.com

המרכיבים של Cistanche Tubulosa (Schrenk) Hook. ו. II.1) בידוד ומבנים של גליקוזיד פניליתנואיד חדש ושל גליקוזיד ניאוגנין חדש

Fumio Yoshizawa,* א Takeshi Deyama/ Nobuo Takizawa/ Khan UsmanghaniJ ומנסור אחמד6

Central Research Laboratories, Yomeishu Seizo Co., Ltd., a 2132-37 Nakaminowa, Minowa-machi, Kamiina-gun, Nagano 399-46, יפן והמחלקה לפרמקוגנוזה, הפקולטה לרוקחות, אוניברסיטת קראצ'י? קראצ'י-32, פקיסטן. התקבל ב-9 בנובמבר 1989

חדשפנילתנואיד גליקוזידבשם tubuloside E (I), וחדשנאולינן גליקוזיד, dehydrodiconiferyl alcohol yO-0-D-glucopyranoside (II), בודדו מכל הצמחים שלCistanche tubulosa (Schrenk) Hook. f. (Orobanchaceae), together with dehydrodiconiferyl alcohol 4-O-^-D-glucopyranoside (III), syringalide A 3'-a-L- rhamnopyranoside (IV), isosyringalide S'-a-L-rhamnopyranoside (V), (+ )-syringaresinol O-^-D-glucopyranoside (VI), ( + )-pinoresinol O-^-D-glucopyranoside (VII), liriodendron (VIII), 6-deoxycatalpol (IX), 8-epiIoganic acid (X), 20-hydroxyecdysone (XI), 8-hydroxygeraniol l-j?-D-glucopyranoside (XII) and syringin (XIII). The structure of tubuloside E (I) was established as 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethyl O-a-L-rhamnopyranosyl-(l ->3)-2-O-acetyl-4-Op-coumaroyl-^-D-glucopyranoside על בסיס עדויות כימיות ונתונים ספקטרליים.

מילות מפתח Cistanche tubulosa-, Orobanchaceae;פנילתנואיד גליקוזיד;אירידואיד; tubuloside E; דהידידוניפריל אלכוהול גליקוזיד; syringalide rhamnoside;נאולינן גליקוזיד; 13C-NMRMOE

phenylethanoid גליקוזיד ב cistanche

במאמר קודם, דיווחנו על הבידוד והקביעה המבנית של חדשפנילתנואידים גליקוזידים, tubulosides A一D מכל הצמחים שלCistanche tubulosa(שרנק) הוק. ו. (Orobanchaceae) בפקיסטן.

מאמר זה עוסק בבידוד ובהבהרה מבנית של חדשפנילתנואיד גליקוזיד, בשם tubuloside E (I), וחדשנאולינן גליקוזיד, dehydrodiconiferyl alcohol ■/-QgD-glucopyranoside (II), כמו גם בידוד של 11 תרכובות ידועות, dehydrodiconiferyl alcohol 4-OgD-glucopyranoside (III), syringalide A 3'-aL-rhamnopyranoside (IV), isosyringalide 3'-aL-rhamnopyranoside (V), (פלוס)-syringaresinol OgD- glucopyranoside(VI), (plus )-pinoresinol OgD-glucopyrano-side (VII), liriodendron (VIII), 6-deoxycatalpol (IX) , 8- חומצה epiloganic (X), 20-hydroxyecdysone (XI), 8-hydroxygeraniol 1-gD-glucopyranoside (XII) ו-Syringin (XIII). תרכובות VI, VIII一X, XII ו-XIII בודדו בעבר מסלסת Cistanche?'

Tubuloside E (I) בודד כאבקה אמורפית, C31H38O15 -3/2H2O, מעלות [a】D -134.0 (MeOH). ספקטרום האינפרא אדום (IR) הציע נוכחות של קבוצות הידרוקסיל (3430ס"מ-1), אסטר מצומד (1734 ס"מ-x), קשר כפול (1634 ס"מ-1) וטבעות ארומטיות ( 1608 ו-1518 ס"מ-1). ספקטרום התהודה המגנטית הגרעינית של פרוטון 0H-NMR) של I הראה אותות הנובעים מקבוצת מתיל של רמנוזה 0 1.07 (3H, d, J= 6 Hz)], קבוצת אצטוקסיל {{22} }.98 (3H, s)], פרוטונים מתילן בנזיליים 0 2.72 (2H, t, J—1 Hz)], פרוטון גלוקוזאנומרי 0 4.54 (1H, d, J{{ 32}} הרץ)], פרוטון רמנו-אומרי 0 5.00 (1H, br s)], שני פרוטונים אולפינים [<5 6.34,="" 7.66="" (1h="" each,="" d,="" j="16" hz)]="" and="" aromatic="" protons="" 0="" 6.50—7.46="">

באצטילציה, תרכובת I הניבה את האוקטאצטט (la), שספקטרום ה-H-NMR שלו הראה חמש קבוצות אצטוקסיל אליפטיות 0 1.87, 1.95, 2.02 (3H כל אחת, s), 2.10x2 (6H, s)] ו שלוש קבוצות אצטוקסיל ארומטיות [<5 2.27,="" 2.28,="" 2.31="" (3h="" each,="" s)].="" as="" shown="" in="" table="" i,="" the="" carbon="" nuclear="" magnetic="" resonance="" (13c-nmr)="" spectrum="" of="" i="" was="" almost="" identical="" with="" that="" of="" 2'-acetylacteoside="" (ib)「)except="" for="" the="" signals="" due="" to="" the="" ^-coumaric="" acid="">

במתנוליזה של I עם אצטיל כלוריד במתנול, methyl p-coumarate ו-3,{2}}dihydroxyphenethyl alcohol זוהו בכרומטוגרפיה שכבה דקה (TLC) וכרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC).

הידרוליזה חומצית של I עם 10 אחוז חומצה גופרתית העניקה גלוקוז ו-rhamnose ביחס של 1 ל-1.

From the above results, the structure of tubuloside E (I) was established as 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethy 1 O-a-L- rhamnopyranosyl-( 1 -^3)-2-(?-acetyl-4-O-/>-קומארויל-^- D-glucopyranoside.

תרכובת III בודדה כאבקה אמורפית, [a]D - 56.4 מעלות (MeOH). הידרוליזה אנזימטית של III העניקה אגליקון (Illb) כאבקה אמורפית, [0]270 -11300, [a]D -31.6 מעלות (MeOH) וגלוקוז. התרכובות Illb ו-III זוהו כ-dehydrodiconiferyl alcohol3,4) ו-4-O-#-D-glucopyranoside,3,4) שלו בהתאמה, בהשוואה לדגימות אותנטיות (ספקטרום TR,】H- ו-13C-NMR) .

תרכובת II בודדה כאבקה אמורפית, [a]D 一 7.4 מעלות (MeOH), שספקטרום ה-IR שלה הצביע על נוכחות של קבוצת הידרוקסיל (3430 ס"מ-1) וטבעת ארומטית (1614,1522,1502 ס"מ ט). ה〔H-NMR של II הראה אותות הנובעים משתי קבוצות מתוקסיל ארומטיות 0 3.74, 3.80 (3H כל אחת, s)], פרוטון בנזילי 0 5.45 (1H, d, J{{ 16}}Hz)], שני פרוטונים טרנס-אולפינים 0 6.17 (1H, dt, J= 16, 7 Hz), d 6.58 (1H, d, J= 16 Hz)] וחמישה פרוטונים ארומטיים 0 6.7一7.1 (5H, m)]. באצטילציה, תרכובת II הניבה את ההקסאצטט (Ila), שספקטרום ה-H-NMR שלו הראה חמישה אותות אצטיל אליפטיים 0 2.01, 2.03, 2.09, 2.06 (3H, 3H, 3H, 6H)]. הידרוליזה אנזימטית של II העניקה את האגליקון (lib) ואת הגלוקוז. תרכובת lib בודדה כאבקה אמורפית, [a]D פלוס 34.8 מעלות (MeOH), שספקטרום ה-IR, iH-ו-13C-NMR שלה היו כמעט זהים לאלו של Illb, למעט ערכי [a]D ודיכרואיזם מעגלי (CD ) ספקטרום.

התצורה המוחלטת של lib הובהרה על ידי השוואה של ספקטרום ה-CD שלו לזה של Illb ו-III, שהסטריאוכימיה שלהם אושרה בנתונים שפורסמו.4) ספקטרום ה-CD של lib הראה A& plus 14100 (270) ופלוס 15200 (283) בתור מקסימום חיובי, לעומת זאת, זה של אילב הראה את A& -11300 (270) ו--10990 (283) כמקסימום שלילי. עובדות אלו מצביעות על כך ש-lib ואילב הם אננטיומרים זה של זה. הסטריאוכימיה של lib חייבת להיות זו שמוצגת בתרשים 1.

לפיכך, תרכובת II נקבעה להיות מונוגלוקוזיד דה-הידרודיקו ניפריל אלכוהול. מיקום הגלוקוז

בהתאמה. השינויים של הפחמנים המתאימים במעבר ל-II מ-lib היו -4.4 ו-7.3 ppm פלוס, מה שהצביע על כך שחלק גלוקוזיל ב-II מקושר לקבוצת ההידרוקסיל באטום Cy'.5)

מהתוצאות שלעיל, תרכובת II נקבעה כ-dehydrodiconiferyl alcohol y'-O-^-D-glucopyranoside.

תרכובות IV ו-V בודדו כאבקה אמורפית (IV, C29H36O14 • 5/2H2O; V, C29H36O14- 1/2H2O). ספקטרום ה-IR הציעו נוכחות של קבוצות הידרוקסיל (3400 ס"מ7), קשר כפול (1634 ס"מ-1), וטבעות ארומטיות (1606 ו-1518 ס"מ-1). באצטילציה, תרכובות IV ו-V העניקו את האוקטאצטט ( IVa, Va), שספקטרום ה-1H-NMR שלו הראה חמישה אותות אצטוקסיל אליפטיים ושלושה אותות אצטוקסיל ארומטי, בהתאמה. תרכובות IVa ו-Va זוהו כ-syringalide A 3'-aL-rhamnopyranoside octaacetate ו- isosyringalide 3'-aL-rhamnopyranoside octaacetate, בהתאמה על ידי השוואה של (以 IR ו-】H-NMR) עם דגימות אותנטיות. ו-'H- ספקטרום 13C-NMR של IV ו-V תמך במבנים אלה (ראה ניסוי). תרכובות VI-XIII זוהו כ-( פלוס )-מזרקים- esinol O-少-D-glucopyranoside (VI),2c) (plus )-pinoresinol O- jS-D-glucopyranoside (VII),7) ליריודנדרין (VIII),2Z,) 6-de-oxycatalpol (IX),2c) 8-חומצה אפילוגנית (X),2fl) {{50} }hydro-xyecdysone (XI),8) 8-hydroxygeraniol 1-0-D-glucopyrano-side (XII)ו-Syringin (XIII),2d) בהתאמה, בהשוואה לדוגמאות אותנטיות

נִסיוֹנִי

נקודות ההיתוך נקבעו על מכשיר מיקרו-היתוך של Mitamura ואינן מתוקנות. סיבובים אופטיים נמדדו עם JASCO DIP-140 פולארימטר דיגיטלי. ספקטרו IR תועדו עם ספקטרופוטומטר של Hitachi 279-30 IR וספקטרו אולטרה סגול (UV) עם ספקטרופוטומטר של Hitachi 200-20. ספקטרום CD תועדו עם JASCO J-20 ספקטרופוטומטר CD וספקטרום מסה (MS) עם JEOL JMS-100. 'H-NMR ו-13C-NMR תועדו עם מכשיר JEOL FX-90Q (89.55 ו-22.5 מגה-הרץ, בהתאמה).

שינויים כימיים ניתנים בסולם d (ppm) עם tetramethylsilane (TMS) כתקן פנימי. הקיצורים המשמשים לנתוני תהודה מגנטית גרעינית (NMR) הם כדלקמן; s, סינגלט; ד, כפולה; t, שלישייה; ש, רביעייה; br, רחב. כרומטוגרפיית גז (GC) בוצעה על מכשיר Shimadzu GC-4CM עם גלאי יינון להבה. HPLC בוצע על מכשיר Hitachi 655A-11. סיליקה ג'ל (Wako gel C-300) שימש לכרומטוגרפיה עמודה. צלחות מצופות מראש של סיליקה ג'ל 60 F254 (Merck) שימשו עבור TLC והגילוי בוצע על ידי ריסוס של 10 אחוז H2SO4 ולאחר מכן חימום.

בידוד

צמחים שלמים שלcistanche tubulosa(7 ק"ג), שנאספו בדצמבר 1986, בקראצ'י, פקיסטן, חולצו עם MeOH (20 1 x 2) תחת ריפלוקס. התמצית רוכזה בלחץ מופחת והשאריות הושעו במים. תרחיף זה חולץ עם EtOAc רווי במים. שכבת המים הוכפפה לעמודת Diaion HP-20 (Nippon Rensui Co.) ונשטפה עם H2O, ולאחר מכן נפלטה עם MeOH. eluate MeOH (140 גרם) עבר כרומטוגרפיה על עמודת פוליאמיד C-200 (Wako Pure Chemical) באמצעות H2O ולאחר מכן MeOH כדי לתת שני שברים (שבר 1, H2O eluate; חלק 2, MeOH eluate). חלק 1 רוכז כדי לתת שארית. השארית עברה כרומטוגרפיה על עמודת סיליקה ג'ל באמצעות CHCl3-MeOH-H2O שוב ושוב. לאחר כרומטוגרפיה חוזרת של HPLC (עמודה, Develosil ODS-10, 20 x 250 מ"מ; ממס; H2O-CH3CN או H2O-MeOH), בודדו 10 תרכובות [II (45mg), III (40mg), VI (35mg) ), VII (43mg), VIII (12mg), IX (8mg), X (10mg), XI (20mg), XII (10mg) ו-XIII (3.6mg)]. חלק 2 טופל באותו אופן כמו חלק 1 ונתן תרכובות I (150 מ"ג), IV (10 מ"ג) ו-V (lOmg).

Tubuloside E (I)

אבקה אמורפית, [a]p3 -134.0 מעלות (c= 1.5, MeOH). אנאלי. מחושב עבור C31H38O15 -3/2H2O: C, 54.98; ח, 6.10. נמצא: C, 55.01; H, 5.98. IR cm-1: 3430,1732, 1634, 1608,1518. ]H・NMR (MeOH-4) 3: 1.07 (3H, d, J=6Hz, CH3 של rhamnose), 1.98 (3H, s, OAc), 2.72 (2H, t, J{ {37}}Hz, Ar-CH2~), 4.54 (1H, d, J=8Hz, Hl של גלוקוז), 5.00 (1H, brs, Hl של rhamnose), 6.34 ( 1H, d, J= 16Hz, Ar-CH=CH-), 6.5一6.8 (3H, ארומטי H), 6.80 (2H, d, J-9Hz, H{ {65}}; H-5'), 7.46 (2H, d, J=9Hz, H-2; H-6Z), 7.66 (1H, d, J= 16 Hz, Ar—CH=CH—). 13C-NMR: טבלה L

Dehydrodiconiferyl Alcohol y^-O-^-D-GIucopyranoside (II)

אבקה אמורפית, [a]^5 -7.4 מעלות (c= 1.6, MeOH). IR cm"1: 3430, 1614, 1522, 1502. UV h ננומטר: 227 (sh), 280. H・NMR (DMSO-rf6) J: 3.74, 3.80 (3H כל אחד, s, OCH3), 5.45 (1H, d,丿=6Hz, Ha), 6.17 (1H, dt,丿=16, 7Hz, H-#), 6.58 (1H, d〃= 16Hz; H-az) , 6.7-7.1 (5H, m, H ארומטי). 13C-NMR: טבלה I.

Dehydrodiconiferyl Alcohol 4-Oj8-D-Glucopyranoside (III)

אבקה אמורפית, [a]^5 -56.4.(c= 1.1, MeOH). IR cm-1: 3400, 1604, 1566, 1502. UV 11 ננומטר; 222, 277. XH-NMR (DMSO-(76) 6: 3.76, 3.82 (3H כל אחד, s, OCH3), 5.52 (1H, d, J-7 Hz, Ha), 6.18 (1H, dt, J=16, 7 הרץ, H-^), 6.49 (1H, d,<7=16 hz,="" h-"),="" 6.7—7.2="" (5h,="" m,="" aromatic="" h).="" 13c-nmr:="" table="">

Syringalide A 3'-(xL-Rhamnopyranoside (IV)

אבקה אמורפית, אנאלית. חישוב עבור C29H36O14 • 5/2H2O: C, 56.11; H, 5.94. נמצא: C, 56.4{{107}}; H, 6.04. IR cm— אחוז 3400, 1606, 1518. 】H・NMR (MeOH-J4) d: 1.15 (3H, d, J-6 Hz, CH3 של rhamnose), 2.90 (2H, t, J{{27 }} Hz, Ar-CH2-), 4.46 (1H, d, J=8Hz, Hl של גלוקוז), 5.27 (1H, brs, Hl של rhamnose), 6.35 (1H, d, J-16Hz, Ar—CH=CH—), 6.6—7.3 (3H, ארומטי H), 7.68 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH {{54 }} CH-). 13C-NMR (CD3OD) 8: 130.6 (Cl), 116.1 (C-2), 130.8 (C-3, 156.6 (C-4), 116.1 (C-6 ), 72.1 (Ca, rham-2, 3), 36.2 (C-8), 127.6 (Cr), 114.6 (C2), 149.6 (C・3'), 146.6 (C{{94 }}'),116.4 (C-5'), 123.1 (C-6'),168.2 (C・a'),115.2 (C书),147.0 104.0 (glu-1), 76.0

(glu-2), 81.5(glu-3), 70.3 (glu-4), 75.9 (glu-5), 62.3 (glu-6), 102.8 (rham-1), 73.7 (rham-4), 70.5 (rham-5), 18.3 (rham-6).

Isosyringalide S^aL-Rhamnopyranoside (V)

אבקה אמורפית, אנאלית. מחושב עבור C29H36O14-1/2H2O: C, 56.31; H, 5.96. מצאתי; C, 56.4{{70}}; H, 6.04. IR 唸cm-1: 3420, 1608, 1518. XH-NMR (MeOH-J4) d: 1.09 (3H, d,丿=6Hz, CH3 של rhamnose), 2.80 (2H, t, J-6 Hz, Ar-CH2-), 4.40 (1H, d, J=8Hz, Hl של גלוקוז), 5.23 (1H, br s, Hl של rhamnose), 6.37 (1H, d, J-18Hz, AsCH=C旦'一),6.6-7.2 (3H, ארומטי H), 7.71 (1H, d, 丿=18Hz, Ar -CH=CH-y 13C-NMR (CD3OD) S: 131.4 (Cl), 116.3 (C-2), 144.5 (C-3X 146.0 (C-4 ), 117.0 (C-5), 121.2 (C-6), 72.2 (Ca), 36.5 (C/), 127.1 (Cr), 116.8 (C-2\ 69, 131.2 (C-3\ 5'),161.2 (C-4'),168.2 (CH), 114.7 (C-^), 147.5 (Cy), 104.1 (glu-1), 76.1 (glu-2), 81.5 (glu-3),

70.2 (glu-4), 75.9 (glu-5), 62.3 (glu-6), 102.8 (rham-1), 72.1 (rham-2, 3 ), 73.7 (ראם-4), 70.6 (ראם-5), 18.4 (ראם-6).

( בתוספת )-Syringaresinol Oj?-D-Glucopyranoside (VI)

אבקה אמורפית, [a]g5 —14.4.(c=0.1, MeOH). אנאלי. חישוב עבור C28H36O13: C, 57.93; H, 6.25. נמצא: C, 58.01; H, 6.26. IRv^cm-1: 3430, 1600, 1518. 】H・NMR (DMSO"6).: 3.78 (12H, s?OCH3 x 4), 6.60,6.66 (2H כל אחד, s, H ארומטי).

(בתוספת)-Pinoresinol O-^-D-Glucopyranoside (VII)

אבקה אמורפית, [a]^5 פלוס 38.9 מעלות (c=0.6, MeOH). אנאלי. חישוב עבור C26H32O11 T/2H2O: C, 58.97; H, 6.28. נמצא: 58.94; H, 6.29. IR cm-1: 3425, 1606, 1516. 】H-NMR (C5D5N) W 3.77, 3.80 (3H כל אחד, s, OCH3), 6.9-7.7 (6H, m, H ארומטי).

ליריודנדרון (VIII)

מחטים חסרות צבע (MeOH), mp 255一257 מעלות, [a]p5 -9.2 מעלות (c=L3, פירידין). IR cm-1: 3400, 1598, 1510. XH-NMR (DMSO/6)<5: 3.78="" (12h,="" s,="" och3x4),="" 6.67="" (4h,="" s,="" aromatic="">

6-Deoxycatalpol (IX)

מחטים חסרות צבע (MeOH), mp 204-206 מעלות, [a]p5 -50.1 מעלות (c=0.7, MeOH). אנאלי, חישוב עבור C15H22O9: C, 52.02; H, 6.40. נמצא: C, 52.12; H, 6.41. IR 唸cm-1: 3400, 1658. 】H・NMR (D2O) 3:

ל. 3-1.9 (1H, m, H-6), 2.1-2.7 (3H, m, H-5, H-6, H-9), 3.65 (1H, s-like, H-7), 3.90, 4.35 (2H, ABsystem, J=13Hz, H-10), 4.92 (1H, d, J=7 Hz, ארומרי H), 5.10 (1H, dd, J=6, 4Hz, H-4), 5.12 (1H, d, J-10Hz, Hl), 6.38 (1H, dd, 1Hz, H-3).

{{0}}מחטים חסרות צבע של חומצה אפלוגנית (X) (MeOH), mp 147一149 מעלות , [a]p5 - 135.0 מעלות (c= 1.0, פירידין ). אנאלי. חישוב עבור C16H24O10 H2O: C, 48.73; H, 6.65. נמצא: C, 48.60; H, 6.70. IR v;cm-1: 3400, 1680, 1640, 1430. 】H・NMR (C5D5N)<5: 1.18="" (3h,="" d,="" j="7Hz," ch3),="" 2.2—2.5="">

m, H-6), 2.60 (1H, m, H-8), 3.08 (1H, dt, J=3, 8.5Hz, H-9), 3.58 ( 1H, m, H-5), 5.40 (1H, d, J=7.5Hz, H אנומרי), 5.91 (1H, d〃=3Hz, Hl), 7.92 (1H , s, H-3).

20-Hydroxyecdysone (XI)

מוצק גבישי, mp 241一242 מעלות , [a]p5 פלוס 70.0 מעלות (c= LI, MeOH). אנאלי. חישוב עבור C27H44O7: C, 67.47; H, 9.23. נמצא: C, 67.28; H, 9.18. IR cm-1: 3440, 1646. XH-NMR (C5D5N) 1.06 (3H, s, H-19), 1.20 (3H, s, H-18), 1.36 (6H, s, H-26, H-27)? 1.58 (3H, s, H-21), 6.24 (lH,d, J=2Hz, H-7). 13C-NMR (C5D5N): 38.0 (Cl),

68.2 (C-2, C-3), 32.5 (C・4), 51.5 (C-5), 203.7 (C-6), 121.8 (C-7), 166.3 (C-8), 34.6 (C-9), 38.8 (C-10), 21.3 (C-ll), 31.9 (C {{30}}), 48.2 (C-13), 84.4 (C-14), 32.1 (C-15), 21.6 (C-16 ), 50.2 (C-17), 18.0 (C-18), 24.6 (C-19), 77.0 (C-20), 21.8 (C-21 ), 77.7 (C-22), 27.6 (C-23), 42.7 (C-24), 69.8 (C-25), 30.1 (C-26 , 27).

8-Hydroxygeraniol 1-^-D-GIucopyranoside (XII)

מחטים חסרות צבע (MeOH), mp 58-60 מעלות, [a]^5 -40.1.(c=L2, MeOH). אנאלי. חישוב עבור C16H28O71/2H2O: C, 56.29; H, 8.56. נמצא: C, 56.40; H, 8.50. IR cm"1: 3350, 1670, 1446. XH-NMR (C5D5N)<5: 1.72,="" 1.59="" (3h="" each,="" s,="" ch3),="" 2.04="" (4h,="" brm,="" h-4,="" h-5),="" 4.80="" (1h,="" d,="" j="7.5Hz," anomeric="" h),="" 5.56="" (2h,="" brt,="" j="7Hz,">

סירינגין (XIII)

מחטים חסרות צבע (MeOH), mp 188一189 מעלות, [a]^5 - 15.3 מעלות (c=0.4, MeOH). אנאלי. חישוב עבור C17H24O9: C, 55.13; H, 6.53. נמצא: C, 54.83; H, 6.50. IR cm-1: 3400, 1592, 1514. 'H-NMR (DMSO/6)W 3.78 (6H, s, OCH3 x 2), 6.3-6.5 (2H, m, —CH=CH—), 6.72 (2H, s, H ארומטי).

אצטילציה של תרכובת I (50 מ"ג) הומסה בפירידין (1 מ"ל) ואנהידריד אצטית (1 מ"ל) ונשארה בטמפרטורת החדר למשך הלילה. תערובת התגובה נשפכה למי קרח, ולאחר מכן חולצה עם EtOAc. תמצית EtOAc רוכזה בוואקום והשארית עברה כרומטוגרפיה על עמודת סיליקה ג'ל באמצעות בנזן-אצטון (5:1) כדי לתת את האוקטאצטט (la) (35 מ"ג). IR cm"1: 1760, 1638, 1604, 1508. iH-NMR(CDC13)(5: 1.02 (3H, d, J=6Hz, CH3 of Rhamnose), 1.87, 1.95, 2.02 (3H כל אחד, s, OAc), 2.10 (6H, s, OAc x 2), 2.27, 2.28, 2.31 (3H כל אחד, s, Ar-OAc), 2.90 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH{ {43}}), 6.38 (1H, d, J=16Hz, AR~CH=CH-), 6.80-7.15 (3H, m, Hz ארומטי), 7.24 (2H, d, J-9 הרץ, H-3\ H・5'), 7.55 (2H, d,丿=9Hz, H-2, H-6), 7.72 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-).

אצטילציה של II ו-III

תרכובות II ו-III (20 מ"ג כל אחת) עברו אצטילציה באותו האופן המתואר עבור תרכובת I והעניקו את ההקסאצטטים [Ila (12mg), Illa (15mg)]. אילה: IR 唸顋 ס"מ-1: 1754, 1608, 1506. 】H・NMR (CDC13) 5: 2.01, 2.03, 2.09 (3H כל אחד, s, OAc), 2.06 (6H, s, OAc) ), 2.30 (3H, s, OAc), 3.84 (3.95 (3H כל אחד, s, OCH3), 5.54 (1H, d,丿=6Hz, Ha), 6.05 (1H5 dt, J{{38} }, 7Hz, H-^), 6.53 (1H, d, «/= 16Hz, H-a'), 6.8一7.1 (5H, m, H ארומטי). אילה: IR v^cm 1: 1760, 1604, 1516. 】H-NMR (CDC13)<5: 2.05="" (9h,="" s,="" oac="" x="" 3),="" 2.08="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.11="" (3h,="" s,="" oac),="" 3.80,="" 3.92="" (3h="" each,="" s,="" och3),="" 5.51="" (1h,="" d,="" j="7Hz," h-a),="" 6.14="" (1h,="" dt,="" j="16," 7hz,="" h-#),="" 6.62="" (1h,="" d,丿="16Hz,">

(5H, m, H ארומטי).

אצטילציה של IV ו-V

תרכובות IV ו-V עברו אצטילציה באותו האופן המתואר עבור תרכובת I והעניקו את האוקטאצטטים [IVa, Va]. IVa: IR 唸児 cmT: 1754, 1636, 1514. 】H・NMR (CDC,) W 1.03 (3H? d, J=6Hz, CH3 של rhamnose), 1.87, 1.94, 1.99 s, OAc), 2.09 (6H, s, OAcx2), 2.28 (6H, s, OAcx2), 2.30 (3H, s, OAc), 2.86 (2H, t, J=6 .6Hz, Ar■-CH?—), 3.67 (2H, t, J=7.2Hz Ar-CH2~CH2-), 6.35 (1H, d, J=16Hz , AsCH=CU—), 6.87—7.35 (3H, m, Ar—7.09 (4H, q, J=8.6Hz, A2/B2/type), 7.65 (1H, d, J =16Hz, Ar CH=CH ). Va: IR cm-1: 1750, 1636, 1608, 1514. ^-NMR (CDC13) 1.03 (3H, d,<7= 6="" hz,="" ch3="" for="" rhamnose),="" 1.87,="" 1.94,="" 2.02="" (3h="" each,="" s,="" oac),="" 2.09="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.28="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.31="" (3h,="" s,="" oac),="" 2.86="" (2h,="" t,="" j="6.6" hz,="" ar-ch2-),="" 3.73="" (2h,="" t,=""><7=6.6 hz,="" ar="" ch2-ch2-),="" 6.34="" (lh,d,="" j="16" hz,="" ar—ch="" —="" ch—),="" 6.78—7.20="" (3h,="" m,="" ar—h),="" 7.31="" (4h,="" q,=""><7=8.5>

A2zB/type), 7.71 (1H, d, «/=16Hz, Ar-CH=CH ).

מתנוליזה של I

תרכובת I (כ-1 מ"ג) הוזרקה עם מתנולי 5 אחוז CH3COC1 (2 מ"ל) למשך 30 דקות, ולאחר מכן התאדה המגיב בוואקום. הנוכחות של מתיל p-coumarate ו-3,4-dihydroxyphenethyl alcohol בשארית זוהתה על ידי TLC [CHCl3-MeOH (10:1)] ו-HPLC [עמודה, Develosil ODS -7 (4.6 x 250 מ"מ); ממס, 55 אחוז MeOH; גלאי (UV), 220 ננומטר; קצב זרימה, 1.0 מ"ל/דקה]. מתיל p-קומרט; Rf 0.82, ;R (min) 8.8, 3,4-dihydroxyphenethyl alcohol;母0.31, tR (min) 3.2.

חומצה הידרוליזה של IA

תמיסה של תרכובת I (2 מ"ג) ב-10 אחוז H2SO4 (1 מ"ל) חוממה באמבט מים רותחים למשך 30 דקות. התמיסה הועברה דרך עמודת Amberlite IR -45 ורוכזה כדי לתת שארית, שהופחתה עם נתרן בורוהידריד (כ-3 מ"ג) למשך שעה. תערובת התגובה הועברה דרך עמודת Amberlite IR-120 ורוכזה ליובש. חומצת בור הוסרה על ידי זיקוק עם MeOH והשארית בוצעה באצטיל עם אנהידריד אצטית (טיפה אחת) ופירידין (טיפה אחת) ב-100 מעלות למשך שעה. הריאגנטים התאדו בוואקום. גלוציטול אצטט ורמניטול אצטט זוהו ביחס של 1 ל-1 מתרכובת I על ידי GC. מצב: עמודה, 1.5 אחוז OV-17, 3 מ"מ x 1.5 מ'; טמפרטורת עמודה, 180 מעלות; גז נשא, N2 (30 מ"ל/דקה). tR (דקות): 2.0 (רמניטול אצטט), 5.5 (גלוציטול אצטט).

הידרוליזה אנזימטית של תרכובת II ו-III II

(13 מ"ג) או III (40 מ"ג) עבר הידרוליזה עם צלולאז (40 מ"ג) במים (1 מ"ל) למשך שעתיים ב-37 מעלות. תערובת התגובה חולצה עם EtOAc. תמצית EtOAc רוכזה בוואקום כדי לתת את השאריות, שעברה כרומטוגרפיה ב-HPLC [עמודה, Develosil ODS-10 (20 x 250 מ"מ); מֵמֵס. II: H2O-CH3CN (77.5:22.5); III: H2O-CH3CN (80:20); גלאי (UV), 205 ננומטר; קצב זרימה, 6.0 מ"ל/דקה] כדי לתת lib (3.3 מ"ג), Illb (5.7 מ"ג). lib: [a]^5 פלוס 34.8 מעלות (c=0.3, MeOH). CD (c=3.3mg/10ml, MeOH) [0]25 (nm): 1740 (330), 15200 (283), 14100 (270), 0 (247), - 16700 (232 ). IR 唸E; ס"מ"1: 3380, 1606, 1520, 1500. UV ננומטר: 276. MS m/z ( אחוז ): 358 (M plus , 53), 340 (M plus -H2O, 100), 338 (58), 325 ( 47), 310 (23), 162 (41), 151 (36), 137 (59). XH-NMR (אצטון-J6)<5: 3.55="" (1h,="" brt,=""><7=6hz, h-g),="" 3.84,="" 3.87="" (3h="" each,="" s,="" och3),="" 4.19="" (2h,="" brd,="" j-5hz,="" h-yz),="" 5.56="" (1h,="" d,="" j="6," 5="" hz,="" h-a),="" 6.23="" (1h,="" dt,=""><7=16, 5="" hz,="" h-#),="" 6.56="" (1h,="" brd,="" j="16Hz," hh),="" 6.7—7.1="" (5h,="" m,="" aromatich).="" 13c-nmr:="" tablel.iiib:="" [a]-31.6°="" (c="0.6," meoh).="" cd="" (c="2.28mg/lOml," meoh)="" [0]25="" (nm):="" 2200="" (330),="" 0="" (310),="" -10990="" (283),="" -11300="" (270),="" 0="" (242),="" 5650="" (232).="" 0-nmr="" (acetone-j6)=""><5: 3.84,="" 3.87="" (3h="" each,="" s,="" och3="" x="" 2),="" 4.19="" (2h;="" brd,="" j="5Hz," h"'),5.56="" (1h,="" d,丿="6.5" hz,="" h-a),="" 6.23="" (1h,="" dt,丿="16," 5="" hz,="" h・#),="" 6.52="" (1h,="" d,="" j="16" hz,="" h-az),="" 6.7一7.1="" (5h,="" m,="" aromatic="" h).="" 13c-nmr:="" table="" i.="" the="" ir="" and="" uv="" spectra="" were="" similar="" with="" that="" of="">

הכרהאנו אסירי תודה לפרופ' א. אואנו וד"ר ט. מיאסה, אוניברסיטת שיזווקה, על מדידות ה-NMR וה-CD, ועל הצעותיהם החשובות, ולד"ר מ. קיקוצ'י, מכללת טוהוקו לרוקחות, על אספקתן. דוגמאות אותנטיות.

הפניות והערות

1) H. Kobayashi, H. Oguchi, N. Takizawa, T. Miyase, A. Ueno, K. Usmanghani, andM. אחמד, כם. פארם. Bull., 35,3309 (1987).

2) א) H. Kobayashi and J. Komatsu, Yakugaku Zasshi, 103, 508 (1983); ב) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase, and S. Fukushima, Chem. פארם, בול., 33, 1452 (1985); ג) אידם, שם, 33, 3645 (1985); ד) ה' קאראסאווה, ה' קובאיאשי, נ' טקיזאווה, ט' מיאסה, וס' פוקושימה, יאקוגאקו זשי. 106, 721 (1986).

3) HD Ludemann and H. Nimz, Die Makromolekulare Chemie., 175, 2393 (1974).

4) א) H. Achenbach, J. Grob, XA Dominguez, G. Cano, JV Star, LC Brussolo, G. Munoz, F. Salgado, and L. Lopez, Phytochemistry. 26, 1159 (1987); ב) AN Binns, RN Chen, HN Wood, and DG Lynn, Proc. נאטל. אקד. Sci. ארה"ב, 84, 980 (1987); ג) DG Lynn, RH Chen, KS Manning, and HN Wood, Ibid., 84, 615 (1987).

5) T. Deyama, T. Ikawa, S. Kitagawa, and S. Nishibe, Chem. פארם. Bull., 35, 1803 (1987).

6) M. Kikuchi, Y. Yamauchi, and F. Tanabe, Yakugaku Zasshi, 107, 350 (1987).

7) M. Chiba, S. Hisada, S. Nishibe, and H. Thieme, Phytochemistry, 19, 335 (1980).

8) א) ה' היקינו, י' היקינו, פורטשריטט. Chem. Org. נטורסט, 28, 256 (1970); ב) RW Miller, J. Clardy, J. Kozlowski, KL Mikolajczak, RD Plattner, RG Powell, CR Smith, D. Weisleder, and Q.-T. Zheng, Planta Medica, 1985, 40.