משלים במחלת כליות כתורם פוטנציאלי ליתר לחץ דם עורקי
Mar 17, 2022
איש קשר:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
ליסה-מרן פישר, ואח'
תַקצִיר
מַטָרָה:שקיעת משלים רווחת בביופסיות של כליות של חולים עם יתר לחץ דם עורקי ונפרופתיה יתר לחץ דם, אך עד כה לא הוכח קשר בין יתר לחץ דם לבין שקיעת משלים או מעורבות של משלים בפתוגנזה של נפרופתיה יתר לחץ דם.
שיטות:במחקר זה, ניתחנו שקיעת משלימים C1q ו-C3c במודל חולדות של עומס יתר ויתר לחץ דם על ידי כריתת כליה תת-טואלית (SNX) ובביופסיות כליה אנושיות בארכיון מ-217 חולים עם יתר לחץ דם ידוע ו-91 חולי ביקורת ללא היסטוריה של יתר לחץ דם באמצעות ניקוד חצי-כמותי של אימונוהיסטוכימיה C1q ו-C3c ומתאם עם פרמטרים של תפקוד כליות. כדי להתייחס לשאלה האם המשלים הופקד רק באופן פסיבי או מבוטא באופן פעיל על ידי תאי כליה, נותחו בנוסף ביטויי mRNA של C1q ו-C3.
תוצאות:תצהיר משלים גלומרולרי C1q ו-C3c היו גבוהים יותר באופן משמעותי בכליות של חולדות SNX עם יתר לחץ דם ובעלי יתר לחץ דם בהשוואה לחולים ללא יתר לחץ דם. לחץ דם עורקי ממוצע (BP) בחולדות SNX נמצא בקורלציה טובה עם כמות השקיעה הגלומרולרית של C1q ו-C3c ועם משקל החדר השמאלי, כפרמטר עקיף של לחץ דם גבוה. ניתוח mRNA כמותי הראה ש-C3 לא רק הופקד אלא גם מיוצר באופן פעיל על ידי תאים גלומרולריים של חולדות SNX עם יתר לחץ דם ובביופסיות כליות אנושיות. יש לציין, בחולים שלב CKD נמצא בקורלציה מובהקת עם עוצמת צביעה גלומרולרית C3c, אך לא לזו של C1q.
מסקנה: שקיעת משלים כלייתית נמצאת בקורלציה עם יתר לחץ דם ניסיוני וכן נוכחות של יתר לחץ דם במגוון שלשֶׁל הַכְּלָיוֹתמחלות. כדי לענות על השאלה, האם וכיצד בדיוק השלמה הכלייתית גורם לפתוגנזה של יתר לחץ דם עורקי אצל גברים, יש צורך במחקרים נוספים.
מילות מפתח:כליות, שקיעת משלים, יתר לחץ דם,שֶׁל הַכְּלָיוֹתמַחֲלָה
Cistanche יכול לטפלשֶׁל הַכְּלָיוֹתמַחֲלָה
מבוא
The complement system and its regulatory proteins are components of the innate immune system consisting of >20 גורמים מסיסים, הממלאים תפקיד חשוב ב(i) אופסוניזציה, (ii) גירוי של מסלולים דלקתיים שונים, ו-(iii) תמוגה אוסמוטי של פתוגנים ותאים פגומים במחלות רבות, במיוחד דלקתיות.כִּליָהמַחֲלָה[1]. מערכת המשלים מורכבת מ-3 מסלולים: (i) המסלול הקלאסי, המופעל על ידי כל מבנה המוכר על ידי C1q [2], (ii) מסלול הלקטין, המופעל כאשר דפוסי סכרידים מזוהים על ידי קומפלקסים של זיהוי דפוסים [3], וכן (iii) המסלול החלופי, המופעל באמצעות הידרוליזה ספונטנית של C3 [4].
2 העשורים האחרונים העצימו את הידע שלנו על מערכת המשלים ותפקידה בפתוגנזה של מערכתיים ומערכות שונות.שֶׁל הַכְּלָיוֹתמחלותכמו גלומרולונפריטיס פוסט-זיהומי (GN), נפרופתיה IgA (IgAN), לופוס נפריטיס (LN), GN ממברנופרוליפרטיבי ו-C3 גלומרולופתיה [1, 5]. תפקיד חשוב של מערכת המשלים וחוסר תפקוד שלה ידוע גם בפתוגנזה של מיקרואנגיופתיות טרומבוטיות, לרבות תסמונת אורמית המוליטית לא טיפוסית [6], IgA vasculitis (לשעבר Henoch-Schönlein purpura) [7], ויתר לחץ דם ממאיר [8]. בעוד שפתומנגניזם של מיקרואנגיופתיה טרומבוטית ידועים כבר [6, 7], הידע שלנו על המשמעות של מערכת המשלים ביחס ליתר לחץ דם, עדיין מעורפל יחסית. רוב החולים עם CKD מציגים לחץ דם מוגבר (BP) [9], אך הפתוגנזה המדויקת של יתר לחץ דם אינה ידועה. קיימים מספר מחקרים המתארים קשר בין פלזמה C3 ליתר לחץ דם [10, 11], בעוד שמחקר אחר לא הצליח לאשר את התצפיות הללו [12]. במודל יתר לחץ דם DOCA-מלח חולדות, שקיעת C3 גלומרולרית גדלה בחולדות DOCA-מלח וירדה על ידי טיפול נגד יתר לחץ דם, כלומר, ספירונולקטון וטיפול משולש עם הידרוכלורותיאזיד, סרפין והידראלזין [13]. מחקרים אחרונים המשתמשים במודלים פרה-קליניים של יתר לחץ דם הציעו תפקיד של השלמה בפתוגנזה של יתר לחץ דם [14] המתווך על ידי תאי חיסון שונים כמו מקרופאגים ותאי T מווסתים (Tregs) [15-17] והפעלה של מערכת הרנין-אנגיוטנסין המובילה ל שינויים פנוטיפיים בתאי שריר חלק של כלי הדם [18]. התפקיד המפורט של שקיעת השלמה הכלייתית בהתפתחות לחץ דם מוגבר עדיין לא ברור. לכן, במחקר זה, חקרנו את C1q, כתוצר מחשוף של הקלאסי, ואת C3c כסמן נפוץ של כל 3 מסלולי הפעלת המשלים בביופסיות כליות מחולים עם יתר לחץ דם ונורמוטי, כמו גם במודל עכברושים מבוסס של עומס יתר ואחריו. יתר לחץ דם על ידי כריתת כליה תת-טואלית (SNX).
שיטות
דגם בעלי חיים
לחקירה של שקיעת משלים כלייתית, פגיעה כלייתית ושינויים לבביים בבעלי חיים בעלי יתר לחץ דם, השתמשנו במודל החולדות, המאופיין בהיפר סינון גלומרולרי ועומס יתר עקב הפחתת נפרון, גלומרולוסקלרוזיס מוקדית וגלובלית, צלקות tubulointerstitial ו- CKD מתקדם באופן משמעותי. BP מוגבר. חולדות הוחזקו במתקן ספציפי ללא פתוגנים בסביבה מבוקרת טמפרטורה ואור והייתה לה גישה חופשית למזון סטנדרטי (sniff Spezialdiäten GmbH, Soest, גרמניה) ומים. החולדות הוחזקו על מצעים קלאסיים מעץ אספן (סניף Spezialdiäten GmbH, Soest, גרמניה) בכלובי מקרולון מסוג IV (Tecniplast Deutschland GmbH, Hohenpeißenberg, גרמניה) עם אוכלוסייה מקסימלית של 3. למודל אינדוקציה, 12 זכרים Dark Agouti (DA/ HanRj, Janvier, Le Genest-Saint-Isle, צרפת) חולדות בגיל 12-14 שבועות עברו SNX בפרוטוקול דו-שלבי, החל בניתוח חסר השראה ואחריו כריתה סטנדרטית במשקל של הקוטב העליון והתחתון מהכליה הנותרת שבוע אחד. מאוחר יותר. למטרה זו, החיות קיבלו Buprenovet (באייר, לברקוזן, גרמניה) במינון של 0.05 מ"ג/ק"ג משקל גוף לפני הניתוח. לאחר הרדמה עם איזופלורן, האגף הימני גולח, חוטא ב-KO-DAN tincture forte (Schülke & Mayr GmbH, Norderstedt, גרמניה), האגף נפתח בחתך של 1.5 ס"מ והכליה הורמה בזהירות החוצה וקיבועה עם 2 סטריליות. ספוגיות ולאחר מכן קשירת אספקת הדם הכלייתית והשופכן והסרה של הכליה. החתך הבטני נסגר בתפר נספג ותפר רציף וכן נסגר העור בתפרי כפתורים בודדים. שבוע לאחר מכן, הכליה השמאלית הוסרה החוצה בדיוק כפי שתואר עבור הכליה הימנית. לאחר מכן עורק הכליה הוצמד בקליפס אטראומטי והקוטב העליון והתחתון של הכליה נכרת באזמל ומשטח החתך נסגר עם ספוג קולגן (Resorba medical GmbH, נירנברג, גרמניה). לבסוף, הכליה הנותרת הוחזרה למקומה המקורי והחתך בבטן נסגר כמתואר לעיל. פעילות לאחר הניתוח, צריכת נוזלים, משקל, מרקם הפרווה והתנהגות החיות הוערכו אך לא הראו סימנים לכאב לאחר הניתוח. עם זאת, משכך כאבים נשמר לפחות מעל 3 ימים לאחר הניתוח. בקרות קיבלו ניתוח דמה (דמה, n=11). בסוף הניסוי, בעלי חיים אוכסנו במשך 24 שעות בכלובים מטבוליים כדי לאסוף שתן למדידת פרוטאינוריה באמצעות Bio-Rad Protein Assay (Bio-Rad Laboratories GmbH, מינכן, גרמניה). הספיחה נמדדה בדגימות שתן מדוללות ב-PBS ב-595 ננומטר בקורא microplate, ופרוטאינוריה חושבה באמצעות עקומה סטנדרטית מתקני אלבומין בסרום בקר שנעו בין 0.15 ל-2 מ"ג (Thermo Scientific, Rockford, IL, ארה"ב). לאחר 12 שבועות, חולדות הורדמו לאחר מדידת לחץ דם תוך עורקי למשך 30 דקות באמצעות החדרת צנתר ל-A. carotid באמצעות מערכת מעבדת כוח של מכשירי AD (ADInstruments Ltd., אוקספורד, בריטניה). לבסוף, הכליות והלבבות נקצרו ופוצלו לשני חלקים, אחד הוקפא במהירות לצורך ניתוח RNA והחלק השני עבר עיבוד לאימונוהיסטוכימיה. דם נאסף לאיתור קריאטינין בסרום באמצעות מנתח אוטומטי (Beck man Instruments, Brea, CA, ארה"ב).
Cistanche יכול לטפלשֶׁל הַכְּלָיוֹת מַחֲלָה
ניתוח mRNA כמותי
RNA הכולל מכליות חולדה בודד באמצעות עמודות RNeasy Mini (Qiagen, Hilden, גרמניה). תגובות שעתוק הפוך ו-PCR בזמן אמת בוצעו באמצעות Power SYBR Green במערכת 7500 Fast Real-Time PCR (שתיהן Applied Biosystems, Weiterstadt, גרמניה) לפי הוראות היצרן. נתוני PCR בזמן אמת נותחו באמצעות תוכנת SDS v1.3 (Applied Biosystems), וביטוי יחסי של רמות ה-mRNA של גן היעד חושב באמצעות שיטת delta Ct ההשוואתית [19]. נורמליזציה נערכה כנגד רמות ה-rRNA האנדוגניות של 18S שהוחלו על השינויים היחסיים בקיפול. נעשה שימוש בפריימרים הבאים: 18 שניות (fw 5′TTGATTAAGTCCCTGC-CCTTTGT3′; rev 5′CGATCCGAGGGCCTCACTA3′); C3 (fw 5′ TGCGGCTGGAGAGTGAAG3′; rev 5′ TTACTGGCTGGAATC-TTGATGG3′) [20]; ו-C1qB (fw 5′TCATAGAACACGAGGAT TCCATACA3′; rev 5′GACCCAGTACAGCTGCTTTGG3′) [20].
אימונוהיסטוכימיה
עבור ביופסיות כליות אימונוהיסטוכימיה או SNX וכליות דמה של חולדה, דגימות נקבעו בפורמלין, הוטמעו בפרפין וחתכו לקטעים של 1 מיקרומטר והוצבעו במכתמת Ventana Benchmark (Roche Diagnostics Deutschland GmbH, Mannheim, גרמניה) תוך שימוש בפרוטוקול הבא. : שליפת אנטיגן נעשתה באמצעות עיכול pronase E למשך 40 דקות ב-37 מעלות. לאחר חסימה עם בלוק אבידין-ביוטין (Vector Laboratories, Burlingame, קליפורניה, ארה"ב), קטעי סרום עיזים רגילים ו-bloto (1:5) הודגרו למשך שעה אחת ב-37 מעלות באמצעות הנוגדנים הבאים מדוללים 1 אחוז BSA ב-50 mM Tris pH 7.4: C1q, נוגדן פוליקלונלי ארנב נגד C1q אנושי (A0126; DAKO Deutschland, המבורג, גרמניה) ו; C3c, נוגדן פוליקלונלי של ארנב נגד C3c אנושי (A0062; DAKO Deutschland). לאחר כביסה ב-50 mM Tris pH 7.4, זוהו נוגדנים ראשוניים קשורים באמצעות "ערכת זיהוי DAB אוניברסלית בתצוגה אולטרה-תצוגה" (Roche Diagnostics Deutschland GmbH, Mannheim, גרמניה). בקרות שליליות כללו מחיקה או החלפה של הנוגדן הראשוני בריכוזים מקבילים של נוגדן מונוקלונלי עכברי לא רלוונטי או IgG של ארנב קדם-אימוני.
דגימות רקמת כליה אנושית
בשלב ראשון, עוקבה לא נבחרה של 308 ביופסיות ארכיוניות משובצות פרפין רצופות (המחלקה לנפרופתולוגיה, Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg [FAU]) נותחה עבור שקיעת משלים כלייתית באמצעות אימונוהיסטוכימיה עם נוכחות והשוואה בין מקרים. או היעדר יתר לחץ דם עורקי בהתאם לתיקים הקליניים, ללא קשר לראשונישֶׁל הַכְּלָיוֹתמַחֲלָה. רק ביופסיות מחולים עם יתר לחץ דם ומטופלים ללא יתר לחץ דם עם לחץ דם מתועד קלינית נכללו. בנוסף, 46 אפס ביופסיות מהשתלות כליה מושתלות שנתרמו מתורמים חיים ללא יתר לחץ דם שימשו כביקורת.
בשלב שני, התמקדנו בהשוואה של קבוצות נפוצות נבחרות שלשֶׁל הַכְּלָיוֹתמחלות, כלומר בקרות (אפס-ביופסיות; n=46), IgAN (n=65), GN קרומי (MGN, n=18), LN (n=10), מוקד גלומרולוסקלרוזיס סגמנטלית (FSGS, n=17) ונפרופתיה סוכרתית (DN, n=28) וכתוצאה מכך תת-קבוצה מייצגת של 184 ביופסיות. בתת-קבוצה זו נותחו ביתר פירוט הקשר בין יתר לחץ דם עורקי ותצהיר משלים בהקשר של נפרופתיות נפוצות שונות. המאפיינים הבסיסיים של המטופלים מתוארים בטבלה 1.
הערכה היסטופתולוגית
אבחון ביופסיית כליות בוצע על ידי 3 נוירופתולוגים מנוסים מאוד, במהלך אבחון שגרתי עם דיון קונצנזוס על כל המקרים המעורפלים (כולל MBH ו-KA). הערכה של מורפולוגיה מפורטת של ביופסיות כליות אנושיות נעשתה על ידי מדען מנוסה מאוד (CD) באמצעות ניקוד גלומרולוסקלרוזיס למחצה כמותי, ניקוד פגיעה בצינורית וציון פגיעות כלי דם (VSI) על קטעי פרפין צבועים ב-PAS כפי שתואר קודם [21]. פיברוזיס אינטרסטיציאלי/אטרופיה צינורית (IF/TA) דורגה לפי סיווג BANFF לביופסיות של השתלות כליה [22]
הערכה של רטרוספקטיבה
נתונים קליניים נאספו פרמטרים קליניים שהיו זמינים בנקודת הזמן של הביופסיה הכלייתית. הפרמטרים הבאים נכללו עבור ניתוח מתאם עם ציוני C1q ו-C3c, לוקליזציה משלימה וציוני פציעה באמצעות תוכנת SPSS: גיל המטופל, נוכחות או היעדר יתר לחץ דם וסוכרת, פרוטאינוריה, קריאטינין בסרום, אוריאה בסרום, כולסטרול בסרום, חלבון בסרום. , וגורמים משלימים C3 ו-C4 בסרום. למרבה הצער, מידע על משך הזמן שלשֶׁל הַכְּלָיוֹתמַחֲלָהand current medication was not consistently available and could therefore not be systematically analyzed. In renal patients, BP is measured regularly and particularly before performing a kidney biopsy. BP measurements and grading was done according to the KDIGO guidelines for renal patients [23]. Proteinuria was measured by analysis of a 24 h urine collection and significant proteinuria was defined as urinary protein excretion >300 מ"ג ליום. ב-2/3 מכל המקרים, פרוטאינוריה ניתנה כ-g/24 שעות שתן. רק לחלק מהחולים הייתה פרוטאינוריה שתועדה על ידי מדידות שתן נקודתיות, ועבור מעט מאוד חולים, לא היו נתונים זמינים על פרוטאינוריה. מכיוון שבקושי ניתן להשוות ערכי חלבון 24 שעות ונקודתיים, כללנו רק מטופלים עם איסוף שתן במשך 24 שעות עבור מתאם של פרוטאינוריה עם שקיעת משלים. על מנת לתקן עוד יותר את הממצאים שלנו, חילקנו את החולים גם לפי מחלקות CKD שונות באמצעות נוסחת CKD-EPI לחישוב GFR [24] ואת מחלקות CKD לפי סיווג KDIGO 2012 [25].
Cistanche יכול לטפלשֶׁל הַכְּלָיוֹת מַחֲלָה
הערכה חצי כמותית של שקיעת משלימים בביופסיות כליות
צביעת משלים על ידי אימונוהיסטוכימיה בביופסיות כליה דורגה בנפרד ב- glomeruli וב- tubulointerstitial compartment. הציונים הכמותיים למחצה {{0}}-4 מתארים את עוצמת ה-C3c או C1q הניתנים לצפייה בביופסיות של כליה בהגדלה של ×200. ציון 0 מציין שאין משקעים, ציון 1: צביעה חלשה המשפיעה על עד 25 אחוז מהתא הנחקר. ציון 2: כתמים בינוניים המשפיעים על עד 50 אחוז או כתמים חזקים פנימה<25% of="" the="" compartment.="" score="" 3:="" substantial="" staining="" affecting="" up="" to="" 75%="" of="" the="" investigated="" compartment.="" score="" 4:="" highest="" staining="" intensity="" affecting="">75 אחוז מהתא הנחקר.
C1q ו-C3 mRNA בביופסיות כליות אנושיות
נתונים עבור C1q ו-C3 ב- glomeruli ו- tubulointerstitium של ביופסיות כליות אנושיות עם מחלות שונות הוערכו ממסד הנתונים של Nephroseq באמצעות מערך הנתונים Ju CKD [26].
ניתוח סטטיסטי
לאחר בדיקת התפלגות ערכים נורמלית באמצעות מבחן Kolmogorov-Smirnov, הנתונים נותחו באמצעות מבחן Mann-Whitney להשוואה של 2 קבוצות ומבחן Kruskal-Wallis עם מבחן Multiple Comparison של Dunn כמבחן פוסט-הוק להשוואה של מספר קבוצות. בכל המבחנים, p < 0.05="" התקבל="" כמובהק="" סטטיסטית.="" המבחן="" של="" spearman="" שימש="" לבדיקת="" המתאם="" של="" שקיעת="" משלים="" עם="" ציוני="" פגיעה="" בכליות="" ונתונים="" קליניים.="" ניתוחים="" סטטיסטיים="" בוצעו="" באמצעות="" spss="" עבור="" תוכנת="" windows="" (גרסה="" 19.0="" spss,="" ibm,="" מינכן,="" גרמניה)="" או="" graphpad="" prism="" 8="" עבור="" תוכנת="" windows="" (גרסה="" 8.3,="" graphpad="" software="" inc.,="" san="" diego,="" ca,="">
תוצאות
שקיעת השלמה הכלייתית C3c ו-C1q קיימת במודל של חולדות יתר לחץ דם של CKD יציב ומתאם עם שינויים כלייתיים ולבביים
שקיעת משלים נחקרה במודל של חולדות עם יתר לחץ דם של CKD, כלומר, חולדות כהות אגוטי כהות (SNX) שהושגו כליל, שבו ממוצע לחץ הדם העורקי 12 שבועות לאחר השראת המודל היה מובהק (p < 0.0="" 01)="" גדל="" (175.7="" ±="" 21.0="" מ"מ="" כספית)="" בהשוואה="" לבקרות="" המופעלות="" בדמה="" (135.8="" ±="" 2.8="" מ"מ="" כספית)="" (איור="" 1a).="" פרוטאינוריה="" הייתה="" גם="" גבוהה="" משמעותית="" ב-snx="" בהשוואה="" לביקורות="" המופעלות="" בדמה="" (78.5="" ±="" 16.6="" לעומת="" 8.9="" ±="" 0.8="" מ"ג/24="" שעות).="" מודל="" עומס="" יתר="" זה="" של="" חולדות="" של="" יתר="" לחץ="" דם="" ואי="" ספיקת="" כליות="" מתקדמת="" נראה="" מתאים="" לבחון="" שינויים="" הקשורים="" ליתר="" לחץ="" דם="" בתצהיר="" ובביטוי="" של="" משלים="" כליות.="" שקיעת="" c3c="" ו-c1q="" גלומרולרית="" נעדרה="" בחולדות="" ביקורת="" נורמוטנסיבית="" המופעלות="" בדמה="" (איור="" 1b,="" c),="" ועלתה="" משמעותית="" בחולדות="" snx="" עם="" יתר="" לחץ="" דם="" (איור="" 1d,="" e,="" g,="" h).="" בחולדות="" snx,="" גורם="" המשלים="" c3c="" לא="" רק="" הופקד="" ברקמת="" הכליה="" אלא="" גם="" הועלה="" בצורה="" משמעותית="" ברמת="" ה-mrna="" (איור="" 1f).="" ביטוי="" כליות="" c1q="" mrna="" הראה="" נטייה="" לרמות="" גבוהות="" יותר="" בחולדות="" snx="" מאשר="" בבקרות,="" אך="" הבדל="" זה="" לא="" הגיע="" למשמעות="" (איור="" 1i).="" באופן="" מעניין,="" בחולדות,="" גם="" תצהיר="" c3c="" ו-c1q="" הגלומרולרית="" נמצאה="" בקורלציה="" גבוהה="" עם="" bp="" עורקי="" ממוצע="" (איור="" 2a,="" d)="" והיפרטרופיה="" לבבית="" כפי="" שהוערכה="" לפי="" משקל="" lv="" (איור="" 2b,="" e).="" יתרה="" מזאת,="" במודל="" snx,="" שקיעת="" השלמה="" הכלייתית="" נמצאת="" בקורלציה="" עם="" פגיעה="" בכליות="" כמו="" גם="" לתפקוד="" הכלייתי.="" גלומרולרי="" c3c,="" כמו="" גם="" שקיעת="" c1q,="" הראו="" מתאם="" חזק="" עם="" קריאטינין="" בסרום="" (איור="" 2c,="" f)="" ופרוטאינוריה="" (איור="" 2g,="" h).="" המתאם="" של="" קריאטינין="" בסרום="" וגם="" של="" פרוטאינוריה="" עם="" משלים="" לא="" היה="" מפתיע="" שכן="" שני="" הפרמטרים="" הראו="" גם="" מתאם="" חזק="" זה="" עם="" זה="" במודל="" החולדות="" הזה="" (איור="" 2i).="" לפיכך,="" הנתונים="" שלנו="" במודל="" חולדות="" של="" ckd="" יתר="" לחץ="" דם="" עקב="" הפחתת="" מסת="" הכליות="" ועומס="" יתר="" הצביעו="" על="" קשר="" בין="" שקיעת="" משלים="" כלייתי="" ויתר="" לחץ="" דם.="" לכן,="" מטרתנו="" לאשר="" את="" הממצאים="" הללו="" בקבוצה="" אנושית="" של="" חולים="" עם="" יתר="" לחץ="" דם="" לעומת="" חולים="" נורמוטיים,="" בהם="" בוצעה="" ביופסיה="" כלייתית="" מסיבות="">
שקיעת משלים אינה תלויה במחלת הכליות הבסיסית
כאן השתמשנו בגישה של 2 שלבים: ראשית, כללנו את כל החולים עם ערך לחץ דם מדווח ללא תלות בבסיסכִּליָהמַחֲלָה(n=308, ראה טבלה 1 לפרטים). יש לציין כי 217 מתוך 308 חולים (70.5 אחוזים) דווחו כסובלים מיתר לחץ דם. שנית, לניתוח נוסף, התמקדנו בתת-קבוצות של הצורות הנפוצות ביותר של GN, כלומר, IgAN, MGN ו-LN, ו-2 תיווך מורכב שאינו אימוני.שֶׁל הַכְּלָיוֹתמחלותכלומר DN וגלומרולוסקלרוזיס מוקדית (FSGS). 46 אפס-ביופסיות מהשתלות כליה מושתלות שנתרמו מתורמים חיים עם נורמוטנס שימשו כקבוצת ביקורת (ראה טבלה 1).
כדי לחקור קשר פוטנציאלי בין יתר לחץ דם והשלמה כלייתית, נותח שקיעת C1q ו-C3c בתא הגלומרולרי וה-tubulointerstitial על ידי ניקוד חצי-כמותי של צביעות אימונוהיסטולוגיות. הכמות והעוצמה של צביעת C1q ו-C3c השתנו מאוד בביופסיות שנחקרו (לפרטים ראה איור 3). בתא ה-tubulointerstitial, C3c הופקד לאורך ממברנות הבסיס הצינוריות ובתוך המטריצה הבין-סטיציאלית (איור 3G), בעוד שצביעת C1q הייתה בדרך כלל חלשה והוגבלה לאינטרסטיטיום (איור 3H).
שקיעת C3c גלומרולרית גדלה ברביםשֶׁל הַכְּלָיוֹתמחלות, כולל IgAN, MGN, LN ו-FSGS, בהשוואה לביופסיות אפס נורמוטיסיביות (איור 4A). בסך הכל, שקיעת C1q הגלומרולרית הייתה חלשה יותר מ-C3c הגלומרולרית. זה גדל באופן משמעותי ב-IgAN, MGN, LN ו-DN, אבל לא FSGS בהשוואה לבקרות אפס ביופסיה (איור 4B). מעניין לציין כי המשלים C3 ו-C1q לא רק הופקדו בכליות חולות אלא גדל גם ביטוי mRNA בכליות מקומי. נתוני Nephroseq הראו ששניהם, ביטוי mRNA של C3 ו-C1q, היו מווסתים באופן משמעותי ב-IgAN, LN, DN ו-FSGS בהשוואה לקבוצת הביקורת, כלומר, תורמים חיים בריאים (איור 4C, D). ביטוי mRNA של C1q היה נמוך מביטוי C3. שקיעת C3c של Tubulointerstitial גדלה אף היא בהשוואה לאפס ביופסיות ברובןשֶׁל הַכְּלָיוֹתמחלות(איור 4E), בעוד C1q לא היה שונה באופן משמעותי מבקרות אפס ביופסיה (נתונים לא מוצגים). לסיכום, שקיעת משלים כלייתית מסומנת היא ממצא שכיח אצל שוניםכִּליָהמחלות. לאחר מכן, חקרנו את הרלוונטיות הפוטנציאלית של לחץ דם גבוה על שקיעת משלים כלייתית.
איור 3. שקיעת C3c ו-C1q בביופסיות כליות. ביופסיות כלייתי אנושיות נצבעו עבור C3c (A, C, E, G) ו-C1q (B, D, F, H) באמצעות אימונוהיסטוכימיה (צביעה חומה). תמונות מייצגות של שקיעת גלומרולרית וטובולו-בין-מערכתית של C3c ו-C1q מציגות דוגמאות של ציונים שונים של שקיעת משלים. אין צביעה עבור C3c בביופסיות אפס (A) ו-C1q בנמק צינורי חריף (B). דוגמאות לתצהיר C3c גלומרולרי ב-NP יתר לחץ דם/איסכמי, ציון 1 (C) ותצהיר C1q בכיתה II LN, ציון 2 (D). תצהיר C3c בולט יותר ב-IgAN, ציון 4 (E) ותצהיר C1q, ציון 4, במקרה אחר של Class II LN (F). שקיעה בתא tubulointerstitial של C3c בדלקת כליות אינטרסטיציאלית, ציון 4 (G) ו-C1q שקיעה, ציון 4 (H) במקרה של GN postinfectious. פסי קנה מידה מייצגים 100 מיקרומטר. LN, לופוס נפריטיס; GN, גלומרולונפריטיס.
איור 4. שיקוע וביטוי של משלים כליות בשונהכִּליָהמחלות. ניתוח חצי-כמותי של צביעה גלומרולרית C3c (A) ו-C1q (B) בנבחרותשֶׁל הַכְּלָיוֹתמחלות. IgAN, MGN, LN, DN, FSGS וביופסיות מהשתלות כליה מושתלות שנתרמו מתורמים ללא יתר לחץ דם (0-ביופסיה) שימשו כביקורת. נתונים ממסד הנתונים של Nephroseq הראו ביטוי mRNA גלומרולרי C3c (C) ו-C1q (D) בשֶׁל הַכְּלָיוֹתמחלותוקבוצת הביקורת בהתאמה, כלומר, HLD. בתא tubulointerstitial, התגלה בעיקר C3c (E) בביופסיות כליות מחולים עם מחלות שונות. הבדלים משמעותיים מסומנים בכוכביות: *p < 0.05;="" **p="">< 0.01="" ו-***p="">< 0.001="" מצביעים="" על="" הבדלים="" משמעותיים="" לעומת="" אפס="" ביופסיות.="" gn,="" גלומרולונפריטיס;="" mgn,="" gn="" קרומי;="" ln,="" לופוס="" נפריטיס;="" fsgs,="" גלומרולוסקלרוזיס="" מוקדית="" סגמנטלית;="" dn,="" נפרופתיה="" סוכרתית;="" hld,="" תורם="" חיים="" בריא;="" igan,="" iga="">
שקיעת C3c ו-C1q הכלייתית מוגברת משמעותית בשיעור יתר לחץ דם בהשוואה לחולים נורמוטיים
כדי לחקור אם נוכחות של לחץ דם גבוה בחולים קשורה לתצהיר משלים כליות, ניתחנו ביופסיות של חולים נורמוטיים ויתר לחץ דם עם גורמים בסיסיים שונים.כִּליָהמחלותוהשוו אותם עם שקיעת משלים באפס-ביופסיות מהשתלות כליה מושתלות שנתרמו מתורמים ללא יתר לחץ דם (אפס-ביופסיות). ב-IgAN, ה-GN הנפוץ ביותר באזורנו [27], רק לביופסיות מחולים עם יתר לחץ דם היה גבוה יותר באופן משמעותי ב-C3c של גלומרולרי (איור 5A) ו-tubulointerstitial C3c (איור 5C), כמו גם שקיעת C1q גלומרולרית (איור 5E). לעומת אפס ביופסיות. כאשר השוו את תצהיר C3c (איור 5B, D) ו-C1q (איור 5F) בביופסיות כליות של העוקבה הכוללת, דגימות נורמוטיות והן דגימות יתר לחץ דם הראו תגובתיות מוגברת משמעותית בהשוואה לביקורות. יתרה מכך, בביופסיות של חולים עם יתר לחץ דם גלומרולרי ו-tubulointerstitial, C3c היה גבוה באופן מובהק מחולים נורמוטיים (איור 5B, D). מאחר שמשקיעת C1q צינורית הייתה נמוכה בכל הביופסיות שנחקרו, לא ראינו הבדלים בין הקבוצות לא ב-IgAN (איור 5G) ולא בניתוח של כל המקרים שנחקרו (איור 5H). לכן, הנתונים שלנו מצביעים על כך שדווקא שקיעת C3c רלוונטית במצבי יתר לחץ דםשֶׁל הַכְּלָיוֹתמחלות.
איור 5. שקיעת משלים כלייתית בביופסיות כליות מחולים עם יתר לחץ דם ונורמוטי. שקיעת C3c נותחה בביופסיות מחולים עם IgAN (A, C) וכל הביופסיות שנחקרו עםשֶׁל הַכְּלָיוֹתמחלות(B, D) נפרדו בחולים עם לחץ דם תקין ולחץ דם גבוה בהשוואה לביופסיות משתלים מושתלים של כליה שנתרמו מתורמים ללא יתר לחץ דם (אפס ביופסיות) כביקורות בתא הגלומרולרי (A,B) והטובולו-אינטרסטיציאלי (C,D). באופן דומה, שקיעת C1q נותחה גם בביופסיות מחולים עם IgAN (E,G) וכל הביופסיות שנחקרו עםכִּליָהמחלות(F, H) בתא הגלומרולרי (E, F) וה-tubulointerstitial (G, H). הבדלים משמעותיים מסומנים בכוכביות: *p < {{0}}.05;="" **p="">< 0.01="" ו-***p="">< 0.001="" מצביעים="" על="" הבדלים="" משמעותיים.="" לחץ="" דם,="" לחץ="">
שקיעת משלים כלייתית קשורה לפגיעה ותפקוד כליות
הערכת השינויים ההיסטופתולוגיים, כפי שהוערכו על ידי גלומרולוסקלרוזיס (איור 6A), ציון פגיעה טובולו-בין-מערכתית (איור 6B) ו-VSI (איור 6C), הראתה פגיעה כלייתית משמעותית גבוהה יותר בביופסיות מחולים עם יתר לחץ דם מתועד מאשר חולים עם נורמוטנסיה. מידת שקיעת ה-C3c הגלומרולרית הייתה בקורלציה חיובית עם גלומרולוסקלרוזיס (איור 6D) ו-tubulointerstitial C3c עם פגיעה tubulointerstitial (איור 6E) ו-VSI (איור 6F), מה שמעיד על כך שהשקעת משלים קשורה לפגיעה כרונית בכליות. בנוסף, פיברוזיס אינטרסטיציאלי/אטרופיה צינורית (IF/TA) היה גבוה יותר באופן מובהק בביופסיות כליות של חולים עם יתר לחץ דם (איור 6G) ובקורלציה טובה עם מידת שקיעת ה-C3c הצינורית (איור 6J). תפקוד הכליות, כפי שהוערך על ידי קריאטינין בסרום, היה נמוך משמעותית גם בחולים עם יתר לחץ דם (איור 6H) ובקורלציה עם שקיעת C3c גלומרולרית (איור 6K). לא זוהה הבדל מובהק בין חולים נורמוטיים ליתר לחץ דם לגבי פרוטאינוריה (איור 6I). עם זאת, היה מתאם חלש בין פרוטאינוריה וגלומרולרי C3c (r=0.238; p=0.008; איור 6L). תוצאות אלו אישרו קשר בין פגיעה בכליות, תפקוד, שקיעת משלים ויתר לחץ דם.
לבסוף, חקרנו את המידה שבה תצהיר משלים היה תלוי בשלב ה-CKD. כצפוי, הגיל הממוצע של החולים עלה עם שלב CKD גבוה יותר (איור 7A). לעומת זאת, שיעור החולים עם יתר לחץ דם היה בלתי תלוי בשלב ה-CKD (איור 7B) המאשר את הממצאים לעיל. גלומרולרי (איור 7C) וצינורי C3c (איור 7D) היו נמוכים משמעותית בשלבי CKD 1 ו-2 מאשר שלבי CKD גבוהים יותר, בעוד שלא נצפה קשר כזה עבור C1q (איור 7E, F).
איור 6. שקיעת משלים כלייתית בביופסיות אנושיות בקורלציה עם נזק ותפקוד כלייתי. הנזק הכלייתי כפי שהוערך על ידי GSI (A), TSI (B) ו-VSI (C) גדל באופן משמעותי בחולים עם BP ו-GSI גבוהים בקורלציה עם שקיעת C3c גלומרולרית (D), TSI בקורלציה עם tubulointerstitial C3c (E) ו-VSI מתאם עם tubulointerstitial C3c (F). IF/TA (G) וקריאטינין בסרום (H) עלו בחולים עם יתר לחץ דם, בעוד שהפרוטאינוריה הייתה דומה בשתי הקבוצות (I). Tubular C3c נמצא בקורלציה עם IF/TA (J) וגלומרולרי C3c עם קריאטינין בסרום (K) ובמידה חלשה יותר גלומרולרי C3c עם פרוטאינוריה (L). הבדלים משמעותיים מסומנים בכוכביות: **p < 0.01="" ו-***p="">< 0.001="" מצביעים="" על="" הבדלים="" משמעותיים="" בין="" חולים="" עם="" לחץ="" דם="" תקין="" ולחץ="" דם="" גבוה="" או="" מתאמים="" מובהקים.="" לחץ="" דם,="" לחץ="" דם;="" gsi,="" גלומרולוסקלרוזיס;="" tsi,="" פציעה="" tubulointerstitial;="" vsi,="" פגיעה="" בכלי="" הדם;="" if/ta,="" פיברוזיס="" אינטרסטיציאלי/אטרופיה="">
איור 7. שקיעת C3 כלייתית בביופסיות אנושיות, אך לא יתר לחץ דם נמצא בקורלציה לשלב CKD. הגיל הממוצע של חולים עם CKD עלה עם עלייה בשלב CKD (A), בעוד שאחוז החולים עם יתר לחץ דם לא היה קשור לשלב CKD (B). C3c (C, D) אך לא C1q (E, F) בקורלציה יפה עם שלבי CKD שונים. גלומרולאר C3c (C), צינורית C3c (D), גלומרולרית C1q (E) וצינורית C1q (F). הבדלים משמעותיים מסומנים בכוכביות: *p < 0.{{10}}5;="" **p="">< 0.01;="" ו-***p=""><0.001 מצביעים="" על="" הבדלים="" משמעותיים="" בין="" קבוצות="" המחוברות="">
דִיוּן
התקדמות שלשֶׁל הַכְּלָיוֹתמַחֲלָה, במיוחד נזק tubulointerstitial, הוכח כמתווך, לפחות בחלקו, על ידי הפעלת משלים [28], אך תפקידו של שקיעת המשלים ביתר לחץ דם ונזק כלייתי עדיין לא ברור. במחקר שלנו, מצאנו שקיעת כליות מוגברת של גורמי משלים, במיוחד של C3c, אשר נמצאה בקורלציה חזקה עם פגיעה בכליות מוגברת ותפקוד כליות נחות. בנוסף, בתדירות גבוהה מאודכִּליָהמַחֲלָהקשורה להופעת יתר לחץ דם שבעצמו קשור לסיכון מוגבר למחלות לב וכלי דם ולהתקדמות של CKD [9]. כאן, הראינו שקיעה כלייתית גבוהה יותר של מוצרי מחשוף משלימים C1q, כסמן של מסלול ההפעלה הקלאסי, ו-C3c, מרכיב של כל 3 מסלולי ההפעלה, בכליות מחולי יתר לחץ דם עם שונותשֶׁל הַכְּלָיוֹתמחלותמאשר חולים נורמוטיים. ישנן עדויות לכך שהמשלים ממלא תפקיד חשוב בהתפתחות והחמרה של יתר לחץ דם, אך תפקידו של שקיעת המשלים הכלייתי בתהליך זה אינו ידוע. בביופסיות כליות אנושיות ובמודל החולדות יתר לחץ הדם שלנו, התברר ש-C3c ניתן לזיהוי בתדירות גבוהה יותר מ-C1q מה שמרמז שהמסלול הקלאסי אינו אחראי בלעדית להפעלת משלים בשֶׁל הַכְּלָיוֹת מַחֲלָה. עם זאת, נמצא כי C1q מעורב באופן קריטי בשיפוץ עורקים יתר לחץ דם באמצעות הפעלה של איתות -קטנין [29]. השאלה האם המשלים גורם ליתר לחץ דם או יתר לחץ דם מפעיל את המשלים נותרה עד היום לא ברורה. במחקר זה, ראינו מתאם חזק של שקיעת משלים כלייתי, במיוחד של פקטור C3c, עם מידת הפגיעה והתפקוד הכלייתי. סביר להניח שיתר לחץ דם מוביל להפעלה נוספת של מערכת המשלים, אך ישנם כמה דיווחים התומכים בהשערה כי המשלים אינו רק משני ליתר לחץ דם אלא גם סיבתי. במחקר אורך עם מעקב של 15 שנים, השכיחות של יתר לחץ דם הייתה גבוהה משמעותית בחולים עם רמות גבוהות של משלים C3 בפלזמה בקו הבסיס, מה שמצביע על תפקיד לפלזמה C3 בפתוגנזה של יתר לחץ דם [10]. בנוסף, לחולים עם יתר לחץ דם עורקי עמיד לטיפול היו רמות C3 בפלזמה גבוהות משמעותית בהשוואה לחולים עם יתר לחץ דם מבוקר [11]. לעומת זאת, במחקר עוקבה המבוסס על אוכלוסייה עלייה בפלסמה C3 הייתה קשורה לשכיחות מוגברת של האשפוז הראשון עקב CKD אך ללא תלות ב-BP [12]. עם זאת, המחקר האחרון הוגבל לחקירה של רמות C3 בפלזמה, בעוד שביטוי מקומי של גורמי משלים והפעלת משלים לא נחקר. מוצרי מחשוף C3, כלומר C3c, לא רק הופקדו באופן פסיבי אלא גם C3 mRNA התבטא מקומית בכליות חולות מחולי יתר לחץ דם וחולדות SNX. עם זאת, לא קבענו את המקור של C3 הכלייתי, אך ישנם דיווחים שמלבד הכבד, רוב ה-mRNA של C3 מתבטא במונוציטים ומקרופאגים [30]. בנוסף, דווח על פיברובלסטים, תאי אפיתל ואנדותל כמקורות C3- פוטנציאליים חוץ-כבדיים [31]. הפעלת המשלים נראתה גם במודל של יתר לחץ דם המושרה על ידי אנגיוטנסין II בעכברים. בחולדות בעלות יתר לחץ דם באופן ספונטני, מחסור ב-C3 יכול לבטל יתר לחץ דם רגיש למלח [18], מה שמעיד על כך ש-C3 מעורב באופן קריטי במסלולים להשראת יתר לחץ דם. עם זאת, השפעות אלה יכולות להיות מתווך גם בהמשך הזרם במפל המשלים. שימוש בעכברים חסרי קולטן C5a (C5aR) Zhang et al. [32] הוכיח כי איתות C5aR ממלא תפקיד פתולוגי בדלקת לב ועיצוב מחדש. למרות שעיכוב C5aR לא השפיע על לחץ הדם המוגבר שנגרם על ידי אנגיוטנסין II, ניתן להפחית נזק לבבי, כפי שהוערך על ידי היפרטרופיה לבבית, דלקת ופיברוזיס פרי כלי דם [33]. במודל החולדות SNX שלנו של יתר לחץ דם, אישרנו שתצהיר משלים כליות מתאם היטב עם נזק לכליות, אך גם עם היפרטרופיה לבבית ולחץ דם. יתר לחץ דם המושרה על ידי משלים היה מתווך באמצעות קולטני משלים עבור C3a ו-C5a. Tregs רגולטוריים יכולים לעכב את ההפעלה של Tregs המשפיעים ומפעילים השפעות אנטי דלקתיות. במודל המושרה על ידי אנגיוטנסין II של יתר לחץ דם, Tregs הוכח כמאפנן חשוב של לחץ דם ומניעת נזק לאיברי הקצה [15, 34]. טיפול באנגיוטנסין II גירוי ביטוי של קולטן C3a ו-C5a ב-Tregs שהוביל למספר מופחת של Tregs בעכברים מסוג פרא, אך לא בעכברי נוק-אאוט כפול של קולטני C3a ו-C5a [35]. בנוסף, עכברי נוק-אאוט כפולים אלה פיתחו יתר לחץ דם קהה ופחות פיברוזיס כלייתי ופציעה גלומרולרית [35]. קשר של הפעלת משלים ופגיעה גלומרולרית ופיברוזיס כליות, כפי שהוערך על ידי גלומרולוסקלרוזיס ו-IF/TA, אושר גם במחקר הביופסיה שלנו. מבחינה מכאנית, עליית BP נגרמה על ידי הפעלה מתווכת C3- של מערכת רנין-אנגיוטנסין בתאי שריר חלק בכלי הדם עם מולקולות במורד הזרם כגון TGF-ß/PDGF-A ועל ידי שינוי הפנוטיפ של תאים mesenchymal ואינדוקציה של אפיתל. מעבר -למזנכימלי [31]. איתות משלים היה ממוקד גם במחלות יתר לחץ דם אחרות. בהריון תקין, הפעלת המשלים קיימת אך היא מוגזמת בהפרעות יתר לחץ דם בהריון ונראה כי פולימורפיזם גנטי של חלבונים משלימים נוטים לרעלת הריון [36]. עיכוב של איתות משלים על ידי טיפול עם קולטן משלים מסיס 1 הביא ליתר לחץ דם מוחלש במודל איסכמיה שליה של רעלת הריון [37].
מגבלות הלמידה
למרות שניסינו לחזק את הממצאים שלנו בביופסיות כליות אנושיות שונותשֶׁל הַכְּלָיוֹתמחלותעם ובלי יתר לחץ דם עורקי על ידי שילוב של מודל חיה מתאים כדי להוכיח קשר בין שקיעת משלים ברקמת כליה ליתר לחץ דם, עלינו להכיר במספר מגבלות והטיות בחירה. במחקר האנושי, אנו מתמודדים עם המגבלה של קבוצה משתנה עם מספר רב של מבלבלים שונים שלא ניתן לזהות או לשלול בבירור. על מנת להתייחס להיבט זה וכדי להרמוניה את קבוצת המחקר, ניתחנו גם את המתאם של השלמה עם פיברוזיס כליות (IF/TA) כסמן פונדקאי לאובדן נפרון והתקדמות של הבסיס.שֶׁל הַכְּלָיוֹתמַחֲלָהכמו גם עם שלבי CKD שבהם נוכל להראות ממצאים דומים. יתרה מכך, נתונים על משך המחלות המתאימות או הטיפול הרפואי הנוכחי לא היו זמינים באופן שיטתי, מה שמותיר היבטים אלה כמבלבל פוטנציאלי נוסף שעלינו להזכיר. מכיוון שהרחקנו רשמית את אותם חולים מעטים ללא לחץ דם מתועד קליני, סביר להניח שלחולים אלו אין יתר לחץ דם או יתר לחץ דם נשלט עד כדי מעקב קבוע שעלול לגרום להטיית בחירה. בניגוד לניסוי בבעלי חיים בקבוצה האנושית שלנו פרוטאינוריה בזמן הביופסיה הכלייתית לא דווחה באופן עקבי עבור כל החולים ולכן יכולנו לכלול רק 2/3 מכלל החולים עבור הניתוחים המתואמים אשר עשויים להשפיע על חלק מהתוצאות. יש לציין, פרוטאינוריה לא הייתה גבוהה יותר באופן משמעותי בחולי כליות עם וללא לחץ דם גבוה, מה שהופך הטיה משמעותית של פרוטאינוריה לבלתי סביר.
סיכום
יחד, המחקר שלנו מדגיש קשר חזק של שקיעת משלים עם יתר לחץ דם, אך גם נזק לכליות בבני אדם ובניסוייםשֶׁל הַכְּלָיוֹתמַחֲלָה. למרות שלא יכולנו לענות על השאלה האם שקיעת משלים גורמת להתפתחות יתר לחץ דם, הנתונים תומכים במעורבות של הפעלת משלים בפתוגנזה או בהתקדמות של יתר לחץ דם במגווןכִּליָה מחלות, מרמז על תפקיד פוטנציאלי לאסטרטגיות מעכבות משלים לניהול עתידי של מקרים עמידים לטיפול של יתר לחץ דם ושֶׁל הַכְּלָיוֹתמַחֲלָה. עם זאת, נדרשים מחקרים נוספים כדי להתייחס לתפקיד המדויק של המשלים בפתוגנזה של מחלות יתר לחץ דם.
Cistanche יכול לטפלמחלת כליות
מתוך: 'השלמה פנימהשֶׁל הַכְּלָיוֹתמַחֲלָהכתורם פוטנציאלי ליתר לחץ דם עורקי' מאתליסה-מרן פישר, ואח'
---Kidney Blood Press Res 2021;46:362–376
הפניות
1 Couser WG. מושגים בסיסיים ותרגום של מחלות גלומרולריות בתיווך חיסוני. J Am Soc Nephrol. 2012 Mar;23(3):381–99.
2 Kojouharova M, Reid K, Gadjeva M. תובנות חדשות לגבי המנגנונים המולקולריים של הפעלת משלים קלאסית. מול אימונול. 2010 אוגוסט;47(13):2154–60.
3 Dobo J, Pal G, Cervenak L, Gal P. התפקידים המתפתחים של פרוטאזות סרין (MASPs) הקשורות ל-mannose, במסלול הלקטין של משלים ומעבר לכך. Immunol Rev. 2016 Nov;274(1):98–111.
4 Pangburn MK, Schreiber RD, Muller-Eber hard HJ. היווצרות ה-C3 convertase הראשוני של מסלול המשלים האלטרנטיבי. רכישת פעילויות דמויות C3b על ידי הידרוליזה ספונטנית של התיואסטר המשוער ב-C3 יליד. J Exp Med. 1981 בספטמבר 1;154(3):856–67.
5 Ricklin D, Hajishengallis G, Yang K, Lambris JD. משלים: מערכת מפתח למעקב חיסוני והומאוסטזיס. נאט אימונול. 2010 ספטמבר;11(9):785–97.
6 Nozal P, Lopez-Trascasa M. נוגדנים עצמיים נגד חלבוני מסלול משלים חלופי בפתולוגיות כליות. נפרולוגיה. 2016 ספטמבר-אוקטובר;36(5):489–95. 7 Lau KK, Suzuki H, Novak J, Wyatt RJ. פתו בראשית של Henoch-Schönlein purpura nephritis. רופא ילדים נפרול. ינואר 2010;25(1):19–26.
8 Wenzel U, Turner JE, Krebs C, Kurts C, Har rison DG, Ehmke H. מנגנונים חיסוניים ביתר לחץ דם עורקי. J Am Soc Nephrol. 2016 Mar;27(3):677–86.
9 Drawz PE, Beddhu S, Kramer HJ, Rakotz M, Rocco MV, Whelton PK. מדידת לחץ דם: נקודת מבט של KDOQI. Am J Kidney Dis. 2020 Mar;75(3):426–34.
10 Engstrom G, Hedblad B, Berglund G, Janzon L, Lindgarde F. רמות פלזמה של משלים C3 קשורות להתפתחות יתר לחץ דם: מחקר עוקבה אורך. J Hum יתר לחץ דם. 2007 אפריל;21(4):276–82.
11 מגן ה', משעל ג', פסקין ג', גליק ז, יוספי ג', כידון מ' ועוד. יתר לחץ דם עורקי עמיד קשור לרמות גבוהות יותר בדם של משלים C3 וחלבון C-reactive. ג'יי קלין יתר לחץ דם. 2008 ספטמבר;10(9):677–83.
12 Bao X, Borne Y, Muhammad IF, Schulz CA, Persson M, Orho-Melander M, et al. משלים C3 ואשפוז אירוע עקב כרוניכִּליָהמַחֲלָה: מחקר עוקבה מבוסס אוכלוסיה. BMC Nephrol. 21 בפברואר 2019; 20(1):61.
13 Klanke B, Cordasic N, Hartner A, Schmieder RE, Veelken R, Hilgers KF. לחץ דם לעומת השפעות מינרלוקורטיקואידים ישירות על דלקת כליות ופיברוזיס בלחץ דם DOCA-מלח. השתלת חוגה של Nephrol. 2008 Nov;23(11):3456–63.
14 Chen L, Fukuda N, Shimizu S, Kobayashi H, Tanaka S, Nakamura Y, et al. תפקידו של משלים 3 ביצירת רנין במהלך ההתמיינות של תאי גזע מזנכימליים לתאי שריר חלק. Am J Physiol Cell Physiol. 2020 מאי 1;318(5): C981–C990.
15 Kvakan H, Kleinewietfeld M, Kadri F, Park JK, Fischer R, Schwarz I, et al. תאי T רגולטוריים משפרים את הנזק למכונית הנגרמת על ידי אנגיוטנסין II. מחזור. 2009 ביוני 9;119(22): 2904–12.
16 Ruan CC, Ge Q, Li Y, Li XD, Chen DR, Ji KD, et al. קיטוב מקרופאגים בתיווך משלים ברקמת השומן הפריווסקולרית תורם לפגיעה בכלי הדם בעכברי דיאוקסיקורטיקוסטרון אצטט-מלח. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2015 Mar;35(3):598–606.
17 קרני EF. יתר לחץ דם: תפקידם של C3aR ו-C5aR בתאי Treg. נט ר' נפרול. 2018 אפריל; 14(4):214.
18 Negishi E, Fukuda N, Otsuki T, Katakawa M, Komatsu K, Chen L, et al. מעורבות של משלים 3 ביתר לחץ דם רגיש למלח על ידי הפעלה של מערכת רנין-אנגיוטנסין הכלייתית בחולדות בעלות יתר לחץ דם ספונטנית. Am J Physiol Renal Physiol. 1 בדצמבר 2018; 315(6):F1747–F1758.
19 Dimmler A, Haas CS, Cho S, Hattler M, Forster C, Peters H, et al. מיקרודיסקציה של לכידת לייזר ו-PCR בזמן אמת לניתוח של ביטוי גן אנדותלין גלומרולרי-1 במסנגיוליזה של חולדה אנטי-Thy 1.1 ו-Habu Snake Venom glomerulonephritis. דיאגן מול פאתול. 2003 יוני;12(2):108–17.
20 Diez M, Abdelmagid N, Harnesk K, Strom M, Lidman O, Swanberg M, et al. זיהוי אזורי גנים המווסתים תגובה מיקרוגליאלית דלקתית ב-CNS של חולדה לאחר פגיעה עצבית. J Neuroimmunol. 2009 ביולי 25;212(1– 2):82–92.
21 Hainz N, Thomas S, Neubert K, Meister S, Benz K, Rauh M, et al. מעכב הפרוטאזום בורטזומיב מונע לופוס נפריטיס במודל העכבר NZB/W F1 על ידי שימור הארכיטקטורה הגלומרולרית והטובולו-בין-מערכתית. Nephron Exp Nephrol. 2012; 120(2):ה47–58.
22 Solez K, Racusen LC. סיווג Banff נבדק מחדש. כליות אינט. 2013 פברואר;83(2):201–6.
23 הנחיות לתרגול קליני של KDIGO לניהול לחץ דם במחלות כרוניותכִּליָהמַחֲלָה. Kidney Int Suppl. דצמבר 2012; 2(5):343.
24 Levey AS, Stevens LA, Schmid CH, Zhang YL, Castro AF 3rd, Feldman HI, et al. משוואה חדשה להערכת קצב הסינון הגלומרולרי. אן מתמחה מד. 2009 מאי 5;150(9):604–12.
25 קבוצת KCW. הנחיות לתרגול קליני של KDIGO 2012 להערכה וניהול של מחלות כרוניותכִּליָהמַחֲלָה. Kidney Int Suppl. 2013;3:1–150.
26 Ju W, Greene CS, Eichinger F, Nair V, Hodgin JB, Bitzer M, et al. הגדרת ספציפיות של סוג תא ברמת התעתיק במחלות אנושיות. Genome Res. 2013 Nov;23(11):1862–73.
27 Barratt J, Feehally J, Smith AC. פתוגנזה של נפרופתיה IgA. סמינ נפרול. 2004 מאי;24(3):197–217.
28 Hsu SI, Couser WG. התקדמות כרונית של נזק tubulointerstitial בפרוטאינורישֶׁל הַכְּלָיוֹתמַחֲלָהמתווכת על ידי הפעלת משלים: תפקיד טיפולי למעכבי משלים? J Am Soc Nephrol. 2003 יולי;14(7 משלים 2): S186–91.
29 Sumida T, Naito AT, Nomura S, Nakagawa A, Higo T, Hashimoto A, et al. הפעלה המושרה על ידי משלים C1q של איתות -קטנין גורמת לשיפוץ עורקים יתר לחץ דם. נאט קומון. 2015;6:6241.
30 de Bruijn MH, Fey GH. רכיב משלים אנושי C3: רצף קידוד cDNA ומבנה ראשוני נגזר. Proc Natl Acad Sci US A. 1985 Feb;82(3):708–12.
31 Chen L, Fukuda N, Matsumoto T, Abe M. תפקידו של משלים 3 בפתוגנזה של יתר לחץ דם. Hypertens Res. 2020 באפריל; 43(4):255–62.
32 Zhang C, Li Y, Wang C, Wu Y, Cui W, Miwa T, et al. קולטן משלים 5a מתווך דלקת לב הנגרמת על ידי אנגיוטנסין II ועיצוב מחדש. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2014 יוני;34(6):1240–8.
33 Zhang C, Li Y, Wang C, Wu Y, Du J. Antagonist of C5aR מונע שיפוץ לב ביתר לחץ דם המושרה על ידי אנגיוטנסין II. Am J Hypertens. 2014 יוני;27(6):857–64.
34 Barhoumi T, Kasal DA, Li MW, Shbat L, Lau rant P, Neves MF, et al. לימפוציטים מווסתים T מונעים יתר לחץ דם הנגרם כתוצאה מאנגיוטנסין II ופגיעה בכלי הדם. לַחַץ יֶתֶר. 2011 Mar;57(3):469–76.
35 Chen XH, Ruan CC, Ge Q, Ma Y, Xu JZ, Zhang ZB, et al. מחסור בקולטני משלים C3a ו-C5a מונע יתר לחץ דם המושרה על ידי אנגיוטנסין II באמצעות תאי T מווסתים. Circ Res. 2018 במרץ 30;122(7):970–83.
36 Regal JF, Burwick RM, Fleming SD. מערכת המשלים ורעלת הריון. Curr Hypertens Rep. 2017 אוקטובר 18;19(11):87.
37 Regal JF, Lund JM, Wing CR, Root KM, Mc Cutcheon L, Bemis LT, et al. אינטראקציות בין מערכות המשלים והאנדותלין בהריון תקין ובעקבות איסכמיה שליה. מול אימונול. אוקטובר 2019; 114: 10–8.