השפעות של ציסטנצ'ה גליקוזידים על תפקוד מערכת החיסון של עכברי מודל הזדקנות המושרים על ידי D-גלקטוז
Mar 08, 2022
איש קשר: אודרי הו וואטסאפ/כ"ס: 0086 13880143964 דוא"ל:audrey.hu@wecistanche.com
〔תקציר〕 אובייקטיבי:
לחקור את המנגנון האימונולוגי של השפעת האנטי-אייג'ינג של ציסטנצ'ה גליקוזידים על עכברים מזדקנים הנגרמים על ידי D-גלקטוז.שיטותשיטת השילוב 3 H-TdR שימשה לקביעת יכולת הטרנספורמציה של לימפוציטים, הבדיקה האדומה הנייטרלית שימשה לקביעת התפקוד הפאגוציטי של מקרופאגים פריטוניאליים של עכברים, שיטת האימונופלואורסצנציה שימשה לאיתור תת-קבוצות לימפוציטים, והרדיואימוניות שימשה לקביעת רמת IL-2 בדם ההיקפי.: שיטת שחרור האנזים Trace NAG למדידת פעילות תאי NK.,תוצאותהתפקוד החיסוני של עכברים מזדקנים המושרים על ידי D-גלקטוז ירד באופן משמעותי, מה שהתבטא ביכולת של טרנספורמציה של לימפוציטים, תכולת דם היקפי IL-2, תא T CD4+ ותכולת תאי T CD8+, תפקוד פגוציטי של מקרופאגים פריטונאליים ופעילות תאי NK.: ירידה (P<>את הציסטנצ'ה של הגליקוזידיכול לשפר את יכולת הטרנספורמציה של לימפוציטים, את תכולת הדם ההיקפי IL-2, פונקציה פאגוציטית של מקרופאגים פריטונאליים, פעילות תאי NK, CD4 + T ו- CD8 + תוכן תאי T (P<0.05). 0.="" 05).="">מסקנההסיסתמה של הגליקוזיד יכולה לשפר באופן משמעותי את תפקוד מערכת החיסון של עכברים מזדקנים הנגרמים על ידי D-גלקטוז, לשחזר או להתקרב למצבם של עכברים צעירים, ולהשפיע על עיכוב ההזדקנות.:
[מילות מפתח]:ציסטנצ'ה סה"כ גליקוזידים; D-גלקטוז; מודל הזדקנות; חסינות
ציסטנצ'ה של הגליקוזיד:אנטי אייג'ינג
ציסטנצ'ההיא התרופה הנפוצה ביותר בפורמולות אנטי-אייג'ינג ואריכות ימים. ציסטנצ'ה סה"כ גליקוזידים (GCS) הוא המונח הכללי לסוג של גליקוזידים פנילתנואידים בציסטנצ'ה והוא הפעילות הביולוגית העיקרית המופקת מהציסטנצ'ה המייצרת מלח בצפון רכיב שינג'יאנג [1], הוכח כי ל-GCS יש אפקט חמצון אנטי-שומני [2], אך ישנם מעט דיווחי מחקר עלמנגנון חיסוני אנטי אייג'ינג.
1. חומרים ושיטות
1. 1 קיבוץ בעלי חיים ורפואה
60 עכברי קונמינג, זכר ונקבה, בני 3 חודשים, במשקל 18-21 גרם, המסופקים על ידי חדר החיות של המכון למוצרים ביולוגיים, משרד הבריאות. העכברים בכל קבוצה שוכנו באותו חדר בכלובים נפרדים, והם היו חופשיים לאכול ולשתות. בעלי החיים חולקו באופן אקראי לשלוש קבוצות: קבוצת הביקורת לנוער, קבוצת המודל המזדקן וקבוצת הניהול לדוגמה, עם 20 בעלי חיים בכל קבוצה. GCS הופק וזוהה על ידי המחלקה לפיטוכימיה, בית הספר לרוקחות, אוניברסיטת ג'יאמוסי על פי הספרות [1].
שפר את מערכת החיסוןתוסף ציסטנצ'ה
1.2 שיטה
לקבוצה הצעירה הוזרק מלח רגיל תת עורי בצוואר במשך 30 יום בכל יום וקיבלה מים חמים במשך 15 יום מהיום ה-15. לעכברים בקבוצת המודל המזדקנת הוזרק D-גלקטוז (אוטו-קלקטוז) 100 מ"ג/ק"ג באופן תת עורי על העורף מדי יום. משקל גוף במשך 30 ימים רצופים. בקבוצת ניהול המודל, D-גלקטוז 100 מ"ג/ק"ג משקל גוף הוזרק באופן תת עורי על העורף מדי יום, ו-GCS 125 מ"ג·ק"ג-1·ד-1 ניתנו באותו זמן מהיום ה-15, והממשל ניתן ברציפות במשך 15 יום. כל בעלי החיים הוקרבו בו זמנית ביום ה-30, ונקבעו מדדי תצפית שונים.
1. 2. 1 ניסוי טרנספורמציה של לימפוציטים
תרחיף תא הטחול של העכבר הותאם לריכוז תאים של 2×106, וקון A שימש כתמריץ לתרבית במבחנה במשך 5 ימים, ויכולת הטרנספורמציה שלו נבדקה בשיטת שילוב 3 H-Td R. התוצאות מבוטאות כמדד הגירוי SI (קבוצת גירוי SI=ConA/קבוצת ביקורת).
1. 2. 2 תפקוד פאגוציטי של מקרופאגים פריטוניאליים בעכבר (בדיקה אדומה נייטרלית [3])
לאסוף את נוזל הצפק של העכברמקרופאג'השעיה באופן אספטי. לאחר צנטריפוגה, צפו את המשקעים בתווך תרבית התאים. השתמש בהמוציטומטר כדי לספור ולהתאים את ריכוז התאים של התמיסה ל-2×106. מניחים אותו באינקובטור בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך שעתיים. יש להשליך את התאים הסופר-נאטנטיים והלא-דבקים., קח את מקרופאג'ים הדופן והוסף 0.1% מלח פיזיולוגי אדום נייטרלי ל-37 מעלות צלזיוס והמשך תרבית במשך 30 דקות, השליך את האדום הנייטרלי ושטפו שוב ושוב את המקרופאגים עם 37°C PBS, דילול עם 50% חומצה אצטית ו-50% אתנול, הגדר 722 ספקטרופוטומטר קולורימטרי באורך גל של 540 ננומטר, ערך ספיגה נמדד A.
1. 2. 3 זיהוי תת-קבוצות לימפוציטים
יש ליטול 0.1 מ"ל של 1×107/מ"לתרחיף לימפוציטיםהוסף 10 μl עכבר נגד עכבר CD3, CD4, ו- CD8 נוגדנים חד שבטיים בהתאמה, לערבב היטב, לדגום היטב, לדגום ב 4°C למשך 30 דקות, 1% FC S ב- PBS (0. 2M, pH7.4) לשטוף 3 פעמים, זיהוי ציטומטריה של זרימה: ציטומטר זרימת לייזר (FACScan, חברת USA BD), לייזר ארגון, אורך גל עירור 488 ננומטר, ספקטרום זיהוי FITC 480 ~ 630 ננומטר, ספירת 800 / s תאים,, 200,000 תאים בסך הכל. התוצאות נותחו ותועדו באמצעות מחשב HP340 ותוכנה מקצועית LYSI SII..
1. 2. 4 קביעת IL-2 בדם היקפי על ידי רדיואימונואסאי
קח 1 מ"ל של דם מגלגלי העין של העכבר במבחנה. לאחר הקרישה, הסרום מופרד. על פי פעולת הערכה, מספר CPM נמדד על הדלפק.
1. 2. 5 פעילות תאי NK
קח דם עין העכבר באופן אספטי והוסף הפרין לטיפול בקרישה. עיין בספרות [4] לקבלת פרטים. 1.3 עיבוד סטטיסטי הנתונים הניסיוניים מבוטאים כ±s, מעובדים על ידי תוכנת S AS, ומנותחים על ידי ניתוח שונות, מבחן F ומבחן t.
היתרון של ציסטנצ'ה: לשפר את החסינות
2. תוצאות
2.1 ההשפעות של GCS על יכולת הטרנספורמציה של לימפוציטים ותת-קבוצות של תאי T בכל קבוצת עכברים מוצגות בטבלה 1.
טבלה 1. ההשפעה של GCS על יכולת הטרנספורמציה של לימפוציטים ותת-קבוצות של תאי T בכל קבוצת עכברים (n = 16,x±s)
| קבוצה | CD4+ | CD8+ | CD4+ /CD8+ | סי |
| קבוצת ביקורת לנוער (אנ') | 38.7±4.1 | 33.5±3.1 | 1.16±0.12 | 70.0±7.2 |
| קבוצת מודלים מזדקנת (II.) | 29.5±3.71) | 27.0±2.31) | 1.09±0.11 | 58.2±2.41) |
| קבוצת ניהול מודל (III.) | 37.6±4.02) | 32.8±2.92) | 1.15±0.12 | 68.2±6.42) |
בהשוואה ל- I.: 1) P<0.05, 2)="" p.="" 05;="" compared="" with="" ⅱ:="" 2)="" p=""><0.05; the="" same="" as="" the="" table="">
2.2 ההשפעות של GCs על הפונקציה הפאגוציטית, תוכן IL-2 ופעילות תאי NK של מקרופאגים פריטונאליים בכל קבוצת עכברים מוצגות בטבלה 2.
טבלה 2. השפעת GCS על הפונקציה הפאגוציטית, פעילות תאי NK ותכולת IL-2 של מקרופאגים פריטוניאליים בכל קבוצת עכברים (n = 16,x±s)
| קבוצה | Mф בולע ערך אדום נייטרלי A540nm | תוכן IL-2 (ng /ml) | פעילות תאי NK (%) |
| קבוצת ביקורת לנוער (אנ') | 0. 143± 0. 031 | 10. 68± 2. 12 | 26. 3± 3. 8 |
| קבוצת מודלים מזדקנת (II.) | 0. 089± 0. 0121) | 6. 87± 1. 451) | 15. 9± 4. 11) |
| קבוצת ניהול מודל (III.) | 0. 141± 0. 0272) | 9. 98± 1. 562) | 24. 1± 3. 72) |
3. דיון
בניסוי זה הופחתו התפקוד הפאגוציטי של מקרופאגים פריטוניאליים ופעילות תאי NK של עכברי מודל ההזדקנות (P<0.05). gcs="" can="" increase="" the="" phagocytic="" function="" and="" nk="" cell="" activity="" of="" peritoneal="" macrophages="" in="" aging="" model="" mice=""><0.05), which="" is="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" from="" this,="" it="" can="" be="" inferred="" that="" gcs="" can="">לשפר את מערכת החיסון התאית הלא ספציפית של הגוף ואת תפקודי ויסות מערכת החיסוןולשפר את האנטי-גידולים והאנטי-זיהומיםשל הגוף המזדקן היא אחת הדרכים לעכב את ההזדקנות [4]. IL-2 הוא ציטוקין הכרחי להתרבות והתמיינות של לימפוציטים מסוג T, והוא יכול לווסת את תפקודיהם של לימפוציטים, מונוציטים-מקרופאגים ותאי NK. IL-2 יכול לקדם את התפשטות והבחנה של לימפוציטים T, לווסת אתתגובה חיסוניתלגרום לפעילות Tc, ולקדם ייצור נוגדנים ואינטרפרון-α.,הוא ממלא תפקיד חשוב במערכת החיסון. בניסוי זה, תכולת IL-2 של עכברי מודל הזדקנות ירדה (P<0.05). after="" gcs="" were="" given,="" the="" il-2="" content="" increased=""><0.05), which="" was="" close="" to="" the="" youth="" model="" group,="" indicating="" that="" gcs="" produced="" il="" by="" increasing="" t="" lymphocytes.="" -2,="" enhance="" the="" immune="" function="" of="" elderly="" mice="" and="" achieve="" the="" effect="" of="" delaying="" immune="" aging.="" the="" content="" of="" cd4+="" t="" cells="" and="" cd8+="" t="" cells="" decreased="" significantly="" with="" increasing="" age.="" the="" low="" t="" cell="" function="" was="" also="" manifested="" by="" the="" decline="" of="" specific="" antigen="" and="" mitogen="" con="" a,="" and="" the="" decline="" of="" the="" ability="" of="" t="" cells="" to="" divide="" repeatedly.="" in="" this="" experimental="" model,="" the="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4+="" t="" cell="" and="" cd8+="" t="" cell="" content="" of="" the="" mouse="" was="" reduced="" (p=""><0.05), and="" gcs="" increased="" the="" mouse="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4="" +="" t="" cell="" and="" cd8="" +="" t="" cell="" content="" (p=""><0.05). 05),="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" it="" shows="" that="" gcs="" can="" make="" the="" body="" resist="" aging="" and="" tend="" to="" be="" younger="" by="" promoting="" the="" proliferation="" of="" lymphocytes="" and="">שיפור התפקוד החיסוני התאי הספציפי של עכברים.
שפר את תוסף החסינות cistanche
4. הפניות
1. דו ניאנשנג, וואנג הונג. בידוד וזיהוי של גליקוזידים פנוקסיאתנול מציסטנצ'ה [J]. מחקר ופיתוח מוצרים טבעיים, 1993; 5(4): 7-8.
2. לי לינלין, וואנג שיאוואן, וואנג שופיי ואחרים. חמצון אנטי שומנים והשפעות אנטי קרינה של סך הגליקוזידים של ציסטנצ'ה 〔J〕. כתב העת הסיני למאטריה מדיקה הסינית, 1997; 22(6): 364-367.
3. שו שויון, ביאן רוליאן. מתודולוגיה ניסויית של פרמקולוגיה [M]. מהדורה שנייה. בייג'ינג: בית ההוצאה לאור לבריאות העם, 1994: 1221.
4. ליו שיונגבו, ליו קאייו, יאנג שיו-יון ואחרים. זיהוי פעילות תאי NK בשיטת שחרור מיקרו-NAG [J]. כתב העת למדעי המעבדה הקלינית, 1996; 14(2): 66-67.
