ניתוח של פעילות נטרול נוגדנים נגד גרסאות SARS-CoV-2 וקורונה אנושית עונתית NL63, HKU1 ו-229E שנגרמו על ידי שלוש פלטפורמות חיסון נגד COVID-19
Oct 26, 2023
תַקצִיר: זיהומי נגיף הקורונה, שהגיעו לשיאם במגפת הקורונה 2 (SARS-CoV-2) בתסמונת הנשימה החמורה החמורה האחרונה שהחלה ב-2019, הדגישו את החשיבות של חיסונים יעילים לגרימת תגובת נוגדנים עם פעילות ניטרלית צולבת. חיסוני COVID-19 פותחו במהירות כדי להפחית את הנטל של זיהומי SARS-CoV-2 וחומרת המחלה. הגנה צולבת מזיהומים עונתיים בנגיף הקורונה האנושי (hCoV) עלתה השערה אך היא עדיין שנויה במחלוקת. כאן, חקרנו את הפעילות המנטרלת נגד SARS-CoV-2 הקדמוני ואת הווריאציות של דאגה (VOCs) אצל אנשים שחוסנו בשתי מנות של BNT162b2, mRNA-1273 או AZD1222, עם או בלי היסטוריה של זיהום SARS-CoV-2. פעילות מנטרלת נוגדנים ל-SARS-CoV-2 וה-VOCs הייתה גבוהה יותר בנבדקים שחוסנו BNT162b2-שהיו נגועים בעבר ב-SARS-CoV-2 והעניקו הגנה בספקטרום רחב. גרסת Omicron BA.1 הייתה העמידה ביותר מבין ה-VOCs. חיסון נגד COVID-19 לא העניק הגנה מפני hCoV-HKU1. לעומת זאת, נוגדנים המושרים על ידי חיסון mRNA-1273 הראו חיזוק בפעילות המנטרלת שלהם נגד hCoV-NL63, בעוד שחיסון AZD1222 הגביר את נטרול הנוגדנים נגד hCoV-229E, מה שמרמז על הבדלים פוטנציאליים באנטיגניות ובאימונוגניות של הספייק השונה מבנים המשמשים בין פלטפורמות חיסון שונות. נתונים אלה מצביעים על כך שעשויים להיות אפיטופים משותפים בין ה-HCoVs וחלבוני ה-SARS-CoV-2.
מילות מפתח: SARS-CoV-2; עוֹנָתִי; HKU1; 229E; NL63; נִטרוּל
cistanche tubulosa- לשפר את המערכת החיסונית
1. הקדמה
בדצמבר 2019, התפרצות נגיף קורונה חדש בשם תסמונת נשימה חריפה נגיף קורונה 2 (SARS-CoV-2) התפשטה במהירות ברחבי העולם, וכתוצאה מכך מגיפה עולמית [1]. מאז, מאמצים בינלאומיים ליצור תרופה מתאימה הובילו לפיתוח של פלטפורמות חיסון מרובות ותרופות אנטי-ויראליות אחרות. לעלייה ההדרגתית של וריאנטים הייתה השפעה מופחתת על היעילות של נטרול נוגדנים שהועלו על ידי זיהום קודם של SARS-CoV-2 או על ידי חיסון [2,3]. ארגון הבריאות העולמי (WHO) סיווג את הווריאציות המטרידות כווריאציות של דאגה (VOC), בעוד וריאנטים אחרים שאינם עומדים באותם קריטריונים נופלים תחת וריאנטים של עניין (VOI) או וריאנטים בחקירה (VUI). הייתה כמות ניכרת של התמקדות בגרסאות ובמאפיינים שלהן, כגון התחמקות נוגדנים ושיעורי שכפול, כאשר מחקרים רבים משווים גרסאות ויכולת הנטרול שלהן [4-8], ככל שהמגיפה ממשיכה להתקדם.
cistanche tubulosa- לשפר את המערכת החיסונית
SARS-CoV-2 שייך למשפחת Coronaviridae הכוללת SARS-CoV-1 [9], וירוס הנשימה של המזרח התיכון (MERS) [10], וארבעה קורונווירוסים אנושיים 229E, HKU-1 , NL63 ו-OC43 [11] (איור 1A). בעוד של-SARS-CoV-1 ו-MERS היו התפרצויות שגרמו למחלה קשה בבני אדם [12], ארבעת נגיף הקורונה האחרים, המכונה בדרך כלל וירוסים עונתיים או אנושיים (HCoVs), גורמים בדרך כלל למחלה קלה הדומה להצטננות. [11,13]. עם זאת, במקרים נדירים, ה-HCoVs עלולים לגרום למחלות קשות [14-16]. SARS-CoV-2, יחד עם NL63, משתמש באנזים 2 הממיר אנגיוטנסין (ACE2) כקולטן העיקרי שלו לכניסה לתאים [17,18]. למרות שה-HKU1 ו-OC43 קשורים יותר ל-SARS-CoV-2, הם נקשרים לחומצות סיאליות כאמצעי כניסה [19], בעוד ש-229E הקשור יותר רחוק משתמש באמינופיפטאזה אנושית (hAPN) [20]. (איור 1B).
איור 1. עץ פילוגנטי של החברים במשפחת Coronaviridae. * מציין חלבוני ספייק ששימשו במחקר זה (A). מבנים של חלבוני ספייק של SARS-CoV-2 ושלושה מה-HCoV העונתיים; HKU1, NL63 ו-229E, אשר שימשו במחקר זה (B). (קודי PDB: 6VXX, 60HW, 6U7H, 5I08 ו-5SZS). אפור מציין את תחום S2, ואילו כחול בהיר הוא התחום ה-N-טרמינלי של תת-היחידה S1, וכחול כהה מייצג את תת-היחידה הנותרת S1. ל-NL63 יש קטע נוסף בצבע צהבהב המייצג אזור ייחודי בתחום S1 שלא נצפה בנגיפים אחרים [21].
בתחילת המגיפה, היה ויכוח לגבי האפשרות שלנוגדנים שהועלו נגד ה-HCOV יש תפקיד כלשהו בהגנה מפני SARS-CoV-2 [22-25]. מאז, העניין הגובר ב-HCoVs הוביל לעלייה בהבנה של התגובה החיסונית שהם יוצרים. מספר פרסומים שחקרו את ההשפעה של HCoVs הסתמכו על שימוש במבחני קשירה כגון מבחני אימונוסורבנטיים מקושרים אנזים (ELISA) המודדים את קשירת הנוגדנים אך לא הבהירו את יכולות הנטרול שלהם. יתר על כן, הדור המוצלח של פלטפורמות חיסונים שונות שימש כדי להגן על אנשים מפני זיהום ומחלות קשות [26], אם כי היעילות שלהם פוחתת ככל שעולים וריאנטים חדשים וחמקניים יותר חיסוניים [27]. כאן, אנו משתמשים בווירוסים פסאודוטיפיים מבוססי lentiviral של SARS-CoV-2, ה-VOCs/VOI ו-HCoVs, כדי למדוד את חוזקם של נוגדנים מנטרלים המושרים על ידי שתי מנות של BNT162b2 (Pfizer), AZD1222 (Astrazeneca), או mRNA-1273 (Moderna) נגד SARS-CoV-2 וגרסאות B.1.1.7 (Alpha), B.1.351 (Beta), P.1 (Gamma), B.1.617.2 ( Delta), B.1.525 (Eta) ו-B.1.1.529 (Omicron BA.1) (איור 2), והאם כל אחד מהחיסונים הללו מסוגל להגביר נוגדנים מנטרלים נגד HCoVs 229E, HKU1 או NL63.
איור 2. גרסאות SARS-CoV-2 ספייק מוטציות בשימוש במחקר זה.
2. חומרים ושיטות
2.1. איסוף סרום מטופל/מידע אתי
דגימות סרה נאספו מ-36 נבדקים בריאים שחוסנו. המחקר אושר על ידי הוועדה האתית של בית החולים המדעי בסן רפאלה (מספר פרוטוקול 68/INT/2020). כל החולים שנרשמו נתנו הסכמה מדעת בכתב.
2.2. עץ פילוגנטי ועלילת דמיון
שחזור פילוגנטי עם סבירות מקסימלית המבוססת על יישור קודון גן ספייק, נבנה באמצעות עץ (גרסה 1.6.12) [28] עם 10,000 שכפולים מהירים במיוחד של אתחול [29] ו-TVM+F+I +מודל החלפה G4, נבחר באמצעות ModelFinder [30]. עלילת הדמיון ברצף נבנתה על ידי יישור רצפי חלבון ספייק של SARS CoV-2 (QHD43416.1), HKU1 (YP_173238.1) 229E (NP_073551.1) ו-NL63 ( YP_003767.1), באמצעות mat (גרסה 7.453) [31] (אפשרות של צמד גנים) והוצגה באמצעות חבילת D3 JavaScript המיושמת ב-observable (https://observablehq.com/@spyros-lytras/seasonal cov -Spike נגיש ב-3 בנובמבר 2022).
2.3. תרבית רקמה
תאי כליה עוברית אנושית 293T/17 (HEK293T/17) ותאי הפטוציטים אנושיים Huh- 7 נשמרו ב-DMEM בתוספת של 10% סרום בקר עוברי ו-1% פניצילין/סטרפטומיצין. תאי אוגר שחלתי סיני (CHO) נשמרו ב-Ham's F12 בתוספת של 10% סרום בקר עוברי ו-1% פניצילין/סטרפטומיצין. תאים הועברו באופן שגרתי כדי למנוע התכנסות על ידי שטיפה בתמיסת מלח מוגפת בפוספט וניתוק עם טריפסין-EDTA. כל התאים הודגרו ב-37 ◦C ו-5% CO2.
מערכת חיסון מגבירה צמח cistanche
2.4. הפקת וירוס פסאודוטייפ
כל הפסאודוטיפים (PVs) נוצרו כפי שתואר קודם [32]. בקצרה, 1000 ng של pc-DNA 3.1+ פלסמיד הנושא את השפיץ של SARS-CoV-2, גרסאות אלפא, בטא, דלתא, גמא, אטא, אומיקרון בא. 1, או HCoVs 229E, HKU1 ו-NL63 מעורבב עם 1000 ng של פלסמיד p8.91 המקודד ל-HIV Gag-pol ו-1500 ng של פלסמיד pCSFLW המכיל את גן הדיווח Renilla Firefly luciferase והועברו יחד ל-HEK293T בשילוב תאי HEK293T. בצלוחיות T-75 באמצעות FuGENE-HD. HKU-1 דרש שלב נוסף של הוספת 1.5 U של neuraminidase אקסוגני (Sigma) ב-10 מ"ל של DMEM מחודש 24 שעות לאחר ההעברה. כדי לקצור את הווירוסים הפסבדוטייפ, המדיה נשאבה 48 שעות לאחר יום של טרנספקציה וסוננה באמצעות מסנן 0.45 מיקרומטר תאית אצטט. כל ה-PVs נחלקו ונשמרו ב-80 ◦C לאחסון. לאחר ניסיונות חוזרים ונשנים, לא הצלחנו לעשות פסאודוטייפ של HCoV OC43.
2.5. טיטרציה של וירוס פסאודוטייפ
כל ה-PVs עבר טיטרציה כפי שתואר קודם [32]. תאי מטרה עבור SARS-CoV-2, גרסאות ו-HCoV NL63 הוכנו יום לפני הטיטרציה על ידי העברת ACE-2 ו-TRSSMP2. תאי CHO שימשו כתאי מטרה עבור HKU-1, ותאי Huh-7 שימשו כתאי מטרה עבור 229E. בקצרה, 50 μL של PV שנקטף נוספו בשורה העליונה של צלחת לבנה עם תחתית F 96-(Nunc), ודוללו באופן סדרתי באמצעות DMEM או Ham's F-12 עבור HKU-1 PVs בחצי צעדים לשורה התחתונה של הצלחת לפני הוספת 10,000 תאי יעד בכל באר. צלחות הוחזרו לחממה למשך 48 שעות לפני תמוגה עם ריאגנט Bright-Glo ובדיקת פעילות הגן של luciferase reporter ביחידות קו יחסי (RLU) באמצעות Glo-Max luminometer. טיטר PV מדווחים ב-RLU/mL.
cistanche tubulosa- לשפר את המערכת החיסונית
לחץ כאן לצפייה במוצרי Cistanche Enhance Immunity
【בקש עוד】 דוא"ל:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
2.6. מבחני מיקרו-ניטרול פסאודוטייפ (pMN).
בדיקת pMN בוצעה כפי שתואר קודם לכן. בקצרה, סרי הבראה עורבבו עם DMEM או Ham's F-12 בדילול ראשוני של 1:40 ולאחר מכן הודללו 2-בסדרה בצלחת לבנה בעלת תחתית שטוחה 96- עד סופית דילול של 1:5120. כל הדגימות חזרו על עצמם בשני עותקים. לאחר מכן נוספו PVs לכל באר בקלט של 1 × 106 RLU/mL. הצלחות הוחזרו לחממת תרבית הרקמה למשך שעה אחת, לפני הוספה של תאי יעד ACE-2/TRSSMP2 HEK293T או תאי CHO שהועברו מראש עבור תאי HKU-1 ו-Huh-7 עבור 229E, בצפיפות של 1 × 104 תאים לבאר. צלחות הוחזרו לחממה למשך 48 שעות לפני תמוגה עם ריאגנט Bright-Glo ובדיקת פעילות הגן של luciferase reporter ביחידות קו יחסי (RLU) באמצעות Glo-Max luminometer. IC50s חושבו באמצעות תוכנת GraphPad Prism 8 באמצעות עקומת רגרסיה לא ליניארית כמתואר ב- [33].
2.7. ניתוח סטטיסטי
נעשה שימוש במבחנים בדירוג צמד של Wilcoxon כדי להעריך את המשמעות של נבדקים תואמים. בדיקת Kruskal-Wallis ANOVA שימשה להערכת מובהקות בעת השוואת טיטר IC50 בין שלוש פלטפורמות חיסון. כל הבדיקות שימשו בתוכנת GraphPad Prism 8.
3. תוצאות
3.1. מאפייני עוקבה
כדי להעריך את פוטנציאל הנטרול של נוגדנים ספציפיים ל-SARS-CoV-2 נגד SARS CoV-2 VOCs ו-hCoVs, סרום שהתקבל מ-BNT162b2- במינון כפול שחוסנו (n=13), נבדקו אנשים שחוסנו ב-AZD1222- (n=16) ו-mRNA-1273- (n=7) עם וללא היסטוריה של זיהום ב-SARS-CoV-2 ( שולחן 1).
טבלה 1. מאפיינים דמוגרפיים וקליניים של העוקבה.
3.2. נטרול של גרסאות SARS-CoV-2
תחילה ביצענו מבחני pMN כדי לנתח את גודל תגובות נוגדנים מנטרלות נגד SARS-CoV -2 וגרסאות קדומות, ללא קשר לסוג החיסון (איור 3A). התוצאות שלנו הראו כי Omicron BA.1 היה ה-VOC הכי פחות מנוטרל (24-פיפול ירידה, p =< 0.0001). As expected, we observed the samples from individuals with prior infection had higher neutralisation titers compared with immunologically naïve subjects. The serum from previously infected individuals (Figure 3B), neutralized the Alpha variant more effectively compared with the ancestral strain, as it showed a 1.3-fold decrease in median IC50 titre, followed by Eta and Delta variants, (3.4- and 4.5-fold decrease, respectively). Beta and Gamma variants were more resistant to neutralization (10.9- and 9.7-fold decrease, respectively), and Omicron BA.1 reached a 16.1-fold decrease compared with ancestral SARS-CoV-2. Notably, the majority of these subjects had received the BNT162b2 vaccine. Taken together, these results suggested that in vaccinated subjects the pre-existing immunity raised by natural infection with SARS-CoV-2, or a VOC is more effective in protecting against the spectrum of variants that emerged later over time, compared with immunity triggered by vaccination only. However, the recently emerged variants evolved mechanisms to evade the neutralizing antibody response.
איור 3. היכולת של נוגדנים בסרום לנטרל SARS-CoV-2 ו-VOC מאנשים שחוסנו בשתי מנות של BNT162b2, AZD1222 או mRNA-1273. נטרול תגובת נוגדנים כנגד SARS-CoV-2 והגרסאות הקדומות, אצל אנשים שנדבקו בעבר (כחול) ואנשים לא נגועים (אדומים) המקבלים שתי מנות של חיסוני BNT162b2, AZD1222 או mRNA-1273 (A) . נעשה שימוש בניתוח סטטיסטי של בדיקות דירוג חתומות של Wilcoxon להשוואת SARS-CoV-2 מול כל וריאנט (A). פרופילי נטרול של סרום מ-BNT162b2-נבדקים שחוסנו עם היסטוריה של זיהום קודם. לא נעשה שימוש במבחן סטטיסטי עבור BNT162b2 בלוח C בשל גודל המדגם הקטן עם שונות גדולה. (ב). פרופילי נטרול של שלושת סוגי החיסונים כנגד גרסאות (C) והשוואה בין פלטפורמות חיסונים. (ד) בדיקות דירוג חתומות של Wilcoxon עם התאמה-זוגות חתומים שימשו ניתוח סטטיסטי להשוואת SARS-CoV-2 מול כל וריאנט בפאנל C. Kruskal–Wallis ANOVA שימש לניתוח סטטיסטי בפאנל D. ns {{23} } לא מובהק, * p < 0.05, ** p < 0.01, *** p < 0.001, **** p פחות מ-0.0001 או שווה לו.
לאחר מכן ניתחנו נבדקים שלא חוו זיהום ב-SARS-CoV-2 לפני מתן החיסון (איור 3C). היעילות של כל פלטפורמת חיסון נותחה ביחס ליכולת לנטרל הן את הזן הקדמוני והן את הגרסאות שלו. ראינו שלסרום מהנבדקים שחוסנו BNT162b2- היה חציון טיטר IC50 גבוה בהשוואה לאלו שהתקבלו מאנשים שחוסנו mRNA-1273- ו-AZD1222-. בעוד שוריאנט האלפא לא הראה בריחה חיסונית באף אחד מהנבדקים שחוסנו, כל ה-VOCs היו עמידים לנטרול נוגדנים בדרגות שונות (איור 3C). לא הצלחנו לחלץ ציוני מובהקות משמעותיים מדגימות BNT162b2 עקב דגימות מעטות (n=5) עם פיזור גדול מאוד בטיטר IC50. לא ראינו הבדל מובהק סטטיסטית בין שלוש פלטפורמות החיסונים ביחס ליכולותיהן לנטרל את גרסאות ה-Alpha, Eta, Beta, Gamma ו-BA.1. לעומת זאת, ההבדל הגדול ביותר בין שלושת סוגי החיסונים נצפה עם גרסאות קדומות ודלתא, שכן mRNA-1273 הראה ירידה של פי 1.6- ו-1.4- בחציון טיטר IC50, בהתאמה , בהשוואה ל-BNT162b2, בעוד ש-AZD1222 הראה ירידה של פי 3.8- ו-4.1- (איור 3D).
3.3. נטרול של HCoVs עונתיים
כדי לקבוע אם חיסון נגד SARS-CoV-2 עשוי להגן נגד HCoVs עונתיים, שאלנו האם לזיהום קודם ב-SARS-CoV-2 יש השפעה כלשהי על נטרול מתווכת נוגדנים של HCoVs (איור 4A) ). לא ראינו עליות מובהקות סטטיסטית בטיטרים מנטרלים כנגד 229E או HKU-1 בין אנשים שנדבקו בעבר ב-SARS-CoV-2 לבין אנשים נאיביים. לעומת זאת, ירידה מובהקת סטטיסטית בטיטרים מנטרלים כנגד NL63 לאחר מתן המנה השנייה נמצאה בנבדקים מחוסנים שחוו זיהום SARS-CoV-2 (p=0.033) בהשוואה לנאיביים (p {{ 16}}.063). לאחר מכן הערכנו האם אחת או יותר מפלטפורמות החיסונים תגביר את הטיטרים כנגד ה-HCoVs בכל הנבדקים, ללא קשר למצב הזיהום הקודם שלהם (איור 4B). בסך הכל, בנבדקים מחוסנים, טיטרי נטרול הנוגדנים החציוניים נגד NL63 היו גבוהים יותר בהשוואה לאלו נגד 229E ו-HKU1, ללא קשר לפלטפורמת החיסון (איור 4B). יש לציין כי NL63 משתמש ב-ACE2 כקולטן לכניסה לתאי המטרה, וכך גם SARS-CoV-2. לסוג החיסון לא הייתה השפעה על הגברת פעילויות הנטרול נגד שלושת נגיף הקורונה העונתיים שחקרנו לאחר מתן המנה השנייה, למעט NL63 ו-HKU1. טיטר IC50 כנגד NL63 עלה לאחר המנה השנייה באמצעות mRNA-1273 (עמ'=0.03), בעוד ש-229E הראה עלייה מובהקת סטטיסטית בטיטר IC50 רק אצל אנשים שחוסנו AZD1222- (p { {37}}< 0.001). Conversely, after the second boost of the BNT162b2 vaccine, neutralization titers against HCoV HKU-1 decreased, probably due to the selection of antigen-specific plasma cells with lower affinity for the HKU1 spike. To better understand the impact of COVID-19 vaccination on the protection from seasonal HCoVs in subjects with or without a history of SARS-CoV-2 infection, we analysed the spike protein similarity of HCoVs HKU1, NL63, 229E, and SARS-CoV-2 to investigate whether a particular region could explain the neutralization differences (Figure 4C). The similarity plot generated by comparing pairwise similarity showed HKU1 had higher similarity in all spike regions to the SARS-CoV-2 spike compared with 229E and NL63, consistent with the viruses' taxonomy. However, HKU1 seems to have extra insertions at the C-terminal end of the RBD compared with the other two seasonals and SARS-CoV-2. Furthermore, the S2 region shows much higher similarity to SARS-CoV-2 in all three HCoVs compared with the S1 region (Figure 4C).
איור 4. השוואת תגובות מנטרלות ב-HCoVs NL63, 229E ו-HKU1 בין חיסון במנה ראשונה לשניה נגד SARS-CoV-2. פרופיל ניטרול נגד HCoVs NL63, 229E ו-HKU1 במינון כפול של BNT162b2, mRNA-1273 או AZD1222 – נבדקים מחוסנים עם או בלי היסטוריה של זיהום ב-SARS-CoV-2. (א). נטרול טיטר נוגדנים כנגד HCoVs הנזכרים לעיל לאחר מתן המנה הראשונה והשנייה של חיסוני BNT162b2, mRNA{{20}} או AZD1222. (ב). ב-A ו-B נעשה שימוש בניתוח סטטיסטי של בדיקות דירוג חתומות עם צמדים של Wilcoxon. חלקות דמיון (C) מציגות את ספייק ה-HKU-1 כבעל רצף חומצות אמינו דומה יותר ל-SARS-CoV-2 בהשוואה לשניהם NL63 ו-229E בכל האזורים של חלבון הספייק. קווים מקווקוים מלמעלה מראים דמיון זוגי של חומצות אמינו בין SARS-CoV-2 לבין 3 חלבוני HCoV Spike, משורטטים באמצעות גודל חלון של 400 חומצות אמינו ושלב של 1. מיקומים עם פערים היו לא נכלל מהחלונות. קווים אופקיים בתחתית מציינים נוכחות של שאריות עבור כל אחד מארבעת נגיף הקורונה המיושרים על פני אורך היישור (נוכחות צבע=נוכחות חומצת אמינו; פער צבע =). ns=לא מובהק, * p < 0.05, *** p < 0.001.
4. דיון
במחקר זה, הצלחנו להשוות ישירות את טיטר נטרול הנוגדנים המושרה על ידי שני חיסונים מבוססי m-RNA, BNT162b2 ו-mRNA-1273, לבין חיסון מבוסס אדנוויראלי, AZD1222, נגד SARS-CoV{{8} }, הגרסאות שהופיעו, ושלושה HCoVs עונתיים. הנתונים שלנו על נטרול נוגדנים נגד SARS-CoV-2 והגרסאות שלו בנבדקים מחוסנים, עם או בלי היסטוריה של זיהום קודם, תואמים למה שדווח בספרות [2,4,5,7,34-38 ]. אישרנו שחיסון עם שתי מנות חיסונים גרם לנוגדנים המסוגלים לנטרל SARS-CoV-2 ו-VOCs, כאשר BNT162b2 מעורר את טיטר הנטרול הגבוה ביותר, ואחריו mRNA-1273 ו-AZD1222. למרות ההבדלים ביניהם בטיטרי הנטרול, כל שלושת החיסונים דווחו כבעלי יעילות גבוהה במניעת COVID-19 [39-41] חמורה. גרסת Omicron BA.1 הייתה המתחמקת ביותר מכל VOCs שנותחו במחקר זה (איור 3). ואכן, חלבון הספייק שעבר מוטציה כבדה של וריאנט BA.1 הציב אתגרים ליעילותם של החיסונים הנוכחיים להגנה מפני נגיף הקורונה-19 והצביע על הצורך לנטר את ההגנה הניתנת מפני זה ומנגד ה-SARS-CoV החדש שהופיע-19 {31}} גרסאות, כלומר Omicron BA.4 ו-BA.5. פורמולציות דו ערכיות של חיסונים מבוססי mRNA, המכילים גם את ה-mRNA של הספייק של SARS-CoV הקדמוני-2 וגם את זה המשותף בין השושלות BA.4 ו-BA.5 תוכננו ואושרו על מנת לנטרל ההתחמקות מהתגובה החיסונית שעוררה תכנון החיסון המקורי.
HCoVs מופצים ברחבי העולם ומאמינים שהם מעוררים נוגדני הגנה קצרי טווח [42]. לכן, קיימת סבירות גבוהה של הידבקות חוזרת להישאר מוגברת, במיוחד בתקופות החורף [13,43-45] למרות שכיחות סרופ גבוהה [43,45,46]. כיום יש ויכוח אם הידבקות קודמת עם HCoVs עונתיים מעוררת נוגדנים צולבים נגד SARS-CoV-2, וחשוב מכך, אם זה מתורגם להגנה מפני SARS-CoV-2. נוגדנים צולבים [47-54] ותגובות תאי T [55-61] זוהו בסמים טרום-מגפה ובתורמים בריאים; עם זאת, גישות ניסוי דומות הראו שההפך הוא הנכון על ידי חוקרים אחרים [62]. בנוסף, ברבים מהמאמרים הנ"ל שחשפו נוגדנים צולבים בדגימות טרום-מגפה, מספר הדגימות המוצלבות היה חלק קטן מסך הסרה שנותח, מה שמצביע על כך שתגובתיות ההצלבה, למרות שהיא קיימת, נמוכה . אותה שאלה הועלתה לגבי נוגדנים שנוצרו על ידי חיסוני COVID-19, כאשר מחקרים מראים נוגדנים צולבים לחלק מה-HCoVs העונתיים [63-65] אך לא לכל. הוכח כי חיסון לחלבון ספייק של SARS-CoV-2 גורם לנוגדנים תגובתיים צולבים לנגיפים אלפא וגם בטאקורונה במקוקים [66]. חשוב להסיק האם נוגדנים צולבים מתורגמים לנוגדנים מגנים ומנטרלים נגד SARS-CoV-2. כמה דיווחים העלו שלמרות שיש חיזוק קטן בנוגדנים ל-HCoVs במהלך זיהום SARS-CoV-2, הם אינם קשורים להגנה [67]. באופן דומה, מחקרים הראו שזיהום קודם ב-HCoVs לא הגן מפני זיהום ומחלות SARS-CoV-2 [68,69].
cistanche tubulosa- לשפר את המערכת החיסונית
לא מצאנו כל דחיפה של נטרול טיטר נוגדנים נגד HKU1 בקבוצת הנחקרים החוסנים ב-SARS-CoV-2- שלנו, ללא קשר למצבם הטרום זיהומי של SARS-CoV-2, למעט נבדקים שקיבלו BNT162b2. זאת בניגוד לשני דיווחים שראו עלייה בטיטרי HKU-1 לאחר החיסון נגד SARS-CoV-2 על ידי BNT162b2 [63,64]. היקס וחב'. הראו שלנוגדנים המגיבים ל-HCoV-OC43 ול-HCoVHKU1 הייתה תגובתיות צולבת מינימלית עם SARS-CoV-2, בהתאם להומולוגיה של הרצף של חלבונים אלה [54]. יתרה מכך, זיהום קודם ב-SARS-CoV-2 לא הגביר את הנטרול ההצולב לא נגד HKU1 או נגד HCoV-229E הקשור יותר מבחינה פילוגנטית (איור 4A). דו"ח אחד העלה כי ל-HKU1 עשוי להיות קולטן מועמד אחר שטרם זוהה, עקב נוכחות RBD משוער, מרוחק מאזורי הקישור לחומצה סיאלית [70,71]. יש לציין גם שיכולת הנטרול עשויה להיות תלויה לא רק בדמיון הזוגי בין חומצות אמינו בחלבון, אלא גם בהחדרות קצרות ומחיקות שיכולות לשנות את הקונפורמציה המבנית של החלבון. לדוגמה, ההכנסה הספציפית ל-HKU-1- בקצה C-טרמינל של ה-RBD (איור 4C) עשויה להסביר חלקית את תוצאות הנטרול שלנו. לעומת זאת, מצאנו כי מתן המנה השנייה בנבדקים תמימים הגביר את תגובת הנוגדנים המגן כנגד NL63 בהשוואה לזו שהתקבלה בנבדקים שנדבקו בעבר שקיבלו את אותו מינון. זה כנראה נבע מהעובדה שלחשיפות נוספות לאנטיגן הספייק לא הייתה השפעה על נטרול נוגדנים נגד NL63.
ההבדלים בניטרול הנוגדנים בין ה-HCoVs עשויים לנבוע מההבדלים בקוצים המשמשים את פלטפורמות החיסון. BNT162b27 מקודד ספייק באורך מלא עם אתרי המוטציה K986P ו-V987P כדי לייצב את מבנה החלבון לפני היתוך [72]. חיסון ה-mRNA-1273 מכיל את רצף הקידוד של גליקופרוטאין ספייק המיוצב על ידי אותם תחליפי פרולין המשמשים בחיסון BNT162b2, עם עוגן טרנסממברני ואתר מחשוף S1-S2 שלם. קונפורמציה טרום-היתוך מיוצבת על ידי החלפות פרולין עוקבות, הממוקמות ביחידת המשנה S2 בחלק העליון של הסליל המרכזי [73]. לעומת זאת, ספייק דמוי מקומי מתבטא על ידי חיסון AZD1222. מכיוון שהנבדקים הנאיביים שלנו קיבלו את החיסון AZD1222, אנו יכולים לשער שהצורה המקומית של חלבון הספייק גררה התפתחות של כיטרי נוגדנים מנטרלים גבוהים יותר בהשוואה לזו המושרה על ידי החלבון המיוצב לפני היתוך. לעומת זאת, החשיפה האימונוגנית השנייה לספייק ה-SARS-CoV-2 הגבירה את התגובה המנטרלת נגד NL63 או 229E (איור 4B), כפי שדווח בעבר [67], בהתאם לפלטפורמת החיסון, ללא קשר לקדם- מצב זיהום. מעניין שדו"ח אחר ראה את אותה פעילות ניטרלית צולבת, אם כי זה היה ללא קשר לפלטפורמת החיסון [74]. אנו משערים שתגובתיות צולבת יכולה להיווצר עקב הדמיון באפיטופים במוטיב הקולטנים (RBM) של NL63 ל-SARS-CoV-2 מכיוון ששני הנגיפים חולקים את ACE-2 כקולטן הכניסה שלהם [75 ]. באופן דומה, אפיטופ חופף לפפטיד היתוך S2 ב-229E דווח כמעורר תגובתיות צולבת נגד SARS-CoV-2 [48]. שיר ועוד. תיאר נוגדנים מנטרלים מגנים המכוונים לתת-דומיין S2 [53]. יתר על כן, דיווח במהלך התפרצות ה-SARS-CoV-1 המקורית מצא גם נוגדנים תגובתיים נגד NL63 ו-229E [76], מה שמחזק את ההשערה של אפיטופים משותפים בין נגיפי אלפא-קורונה ל-Betacoronaviruses. חלבון S של NL63 אינו מכיל את אתר זיהוי פורין ואינו מבוקע במהלך הביוגנזה [77]. באופן דומה, חלבון הספייק המובע על ידי חיסון mRNA1273 חסר את אתר המחשוף; לכן, הקונפורמציה של החלבון עשויה להיות דומה ועשויה לעורר נוגדנים מנטרלים כנגד אפיטופים משותפים ואשר מוחזקים לאחר חשיפה שנייה לאותו אנטיגן.
האופי האנטיגני של חלבון הספייק המתבטא על ידי החיסונים השונים, יחד עם הקונפורמציות המרובות שהם יכולים לרכוש, עשויים להשפיע על התפתחות של נוגדנים מנטרלים בעלי זיקה שונה למספר אפיטופים בחלבון הספייק. מכיוון שהספייק AZD-1222 אינו מכיל את שתי מוטציות הפרולין כדי לייצב את השפיץ שלו למבנה טרום היתוך טרימרי [78,79], נוכחות של ספייק לאחר היתוך עשויה לעורר תגובה חיסונית גדולה יותר כלפי אפיטופים בתחום S2. זה עשוי להסביר מדוע לא ראינו דחיפה כלשהי בנטרול טיטרים כנגד 229E בדגימות חיסון מבוססות mRNA, מיוצבות טרום היתוך או דגימות מחוסנות. בסופו של דבר, למרות שראינו עלייה בטיטרים, אי אפשר לקבוע אם זה מתורגם לטיטרים מגנים, שכן מתאמים של הגנה מפני SARS-CoV-2 עדיין לא הוגדרו. ישנן מספר מגבלות במחקר שלנו שיש לקחת בחשבון. הנתונים שלנו היו נהנים ממספר גדול יותר של דגימות בכל סוגי פלטפורמת החיסונים, ומדגימות בקרה של אנשים לא מחוסנים שנדבקו ב-SARS-CoV-2 או לא. יתר על כן, לא ניתחנו את רמות הבסיס של נוגדנים מנטרלים צולבים נגד נגיפים עונתיים בקבוצת הנבדקים המחוסנים שלנו. חיסון נגד נגיף פאן יגרום לנוגדנים המזהים ומנטרלים מגוון רחב של נגיפים. זה מאתגר בגלל האופי הגנטי של נגיפי ה-RNA הללו שעוברים מוטציות תכופות ומעוררים חסינות שמתפוגגת עם הזמן, מה שמגדיל את הסבירות להדבקה חוזרת. לכן, זיהוי האפיטופים המרכזיים הממוקמים באזורים השמורים ביותר של חלבון הספייק, במיוחד ביחידת המשנה S2, רלוונטי ליצירת נוגדנים מנטרלים עם זיקה רחבה יותר לקולטנים התאיים המתווכים כניסה ויראלית. גובשו מספר מועמדים לחיסון, וחלקם מבוססים על אנטיגנים כפולים, כולל רכיבי ספייק ורכיבי נוקלאוקפסיד (N) [80]. ניסוחים אלו נמצאים בשלב הפרה-קליני מכיוון שהם עשויים לספק תגובות חיסוניות הומורליות ותאיות רחבות ועמידות יותר כנגד נגיפים [80].
הפניות
1. ז'ו, נ.; ג'אנג, ד'; וואנג, ו.; לי, X.; יאנג, ב.; שיר, ג'; ז'או, X.; הואנג, ב.; שי, ו.; לו, ר.; et al. נגיף קורונה חדש מחולי דלקת ריאות בסין, 2019. N. Engl. J. Med. 2020, 382, 727–733. [CrossRef] [PubMed]
2. אלטמן, ד"ר; Boyton, RJ; Beale, R. Immunity to SARS-CoV-2 Variants of Concern. מדע 2021, 371, 1103–1104. [CrossRef] [PubMed]
3. Burki, T. הבנת גרסאות של SARS-CoV-2. Lancet 2021, 397, 462. [CrossRef] [PubMed]
4. גרסיה-בלטראן, WF; לאם, EC; סנט דניס, ק.; Nitido, AD; גרסיה, ZH; האוזר, ב"מ; פלדמן, י. פבלוביץ', MN; גרגורי, DJ; פוזננסקי, MC; et al. וריאציות מרובות של SARS-CoV-2 בורחות מנטרול על ידי חסינות הומורלית הנגרמת על ידי חיסון. תא 2021, 184, 2372–2383. [CrossRef] [PubMed]
5. הופמן, מ.; ארורה, פ.; גרוס, ר.; זיידל, א.; הורניך, BF; האן, א.ס.; קרוגר, נ.; גראיכן, ל.; הופמן-ווינקלר, ה. קמפף, א.; et al. וריאציות SARS-CoV-2 B.1.351 ו-P.1 Escape from Neutralizing Antibodies. תא 2021, 184, 2384–2393. [CrossRef]
6. Cantoni, D.; מאיורה-נטו, מ.; Nadesalingam, A.; וולס, דא; Carnell, GW; אוהלנדורף, ל. פרארי, מ.; פאלמר, פ.; צ'אן, ACY; סמית, פ.; et al. היררכיית נטרול של SARS-CoV-2 וריאציות של דאגה באמצעות מבחני נטרול סטנדרטיים וכמותיים חושפת מתאם עם חומרת המחלה; לקראת פענוח ספי נוגדנים מגנים. חֲזִית. אימונול. 2022, 13, 773982. [CrossRef]
7. פלאנס, ד.; בריאל, ט.; גרזלק, ל.; גויבל-בנחסין, פ.; סטארופולי, א.; פורוט, פ.; Planchais, C.; בוקריזר, י. ראג'ה, מ"מ; בישוף, ע.; et al. רגישות של גרסאות SARS-CoV-2 זיהומיות B.1.1.7 ו-B.1.351 לנוגדנים מנטרלים. נאט. Med. 2021, 27, 917–924. [CrossRef]
8. לוסטיג, י.; צוקרמן, נ.; נמט, א.; עטרי, נ.; קליקר, ל.; רגב-יוחאי, ג'; ספיר, ע.; מור, או.; אלרוי-פרייס, ש.; מנדלסון, ע.; et al. נטרול קיבולת נגד דלתא (B.1.617.2) וגרסאות אחרות של דאגה בעקבות חיסון קומירנאטי (BNT162b2, BioNTech/Pfizer) בעובדי שירותי בריאות, ישראל. Eurosurveillance 2021, 26, 2100557. [CrossRef]
9. קסיאזק, ט"ג; ארדמן, ד.; Goldsmith, CS; זכי, ס"ר; פרט, ת.; אמרי, ש; טונג, ש; עירוני, ג; קוֹמר, ג"א; לים, ו.; et al. נגיף קורונה חדש הקשור לתסמונת נשימתית חריפה חמורה. N. Engl. J. Med. 2003, 348, 1953–1966. [CrossRef]
10. זכי, א.מ.; ואן בוהמן, ש.; Bestebroer, TM; Osterhaus, ADME; Fouchier, בידוד RAM של וירוס קורונה חדש מאדם עם דלקת ריאות בערב הסעודית. N. Engl. J. Med. 2012, 367, 1814–1820. [CrossRef]
11. ליו, DX; ליאנג, JQ; Fung, TS Human Coronavirus-229E, -OC43, -NL63 ו-HKU1 (Coronaviridae). באנציקלופדיה לווירולוגיה, מהדורה רביעית; Bamford, DH, Zuckerman, M., Eds.; עיתונות אקדמית: אוקספורד, בריטניה, 2021; עמ' 428–440. ISBN 978-0-12-814516-6.
12. דה ויט, ע.; ואן דורמאלן, נ.; פלזרנו, ד.; מנסטר, VJ SARS ו-MERS: תובנות אחרונות לגבי נגיפים מתפתחים. נאט. Rev. Microbiol. 2016, 14, 523–534. [CrossRef]
13. Gaunt, ER; הארדי, א.; קלאס, ECJ; סימונדס, פ.; Templeton, KE אפידמיולוגיה ומצגות קליניות של ארבעת הקורונה האנושית 229E, HKU1, NL63 ו- OC43 זוהו במשך 3 שנים באמצעות שיטת PCR חדשנית מרובה בזמן אמת. ג'יי קלין. מיקרוביול. 2010, 48, 2940–2947. [CrossRef]
14. Da Veiga, ABG; מרטינס, LG; רידיגר, א.; מאזטו, א.; Debur, MdC; Gregianini, TS יותר מסתם הצטננות: נגיף קורונה אנדמי OC43, HKU1, NL63 ו-229E הקשורים לזיהום חריף בדרכי הנשימה ולמקרי מוות בקרב מבוגרים בריאים. J. Med. וירול. 2021, 93, 1002–1007. [CrossRef]
15. ארדן, KE; ניסן, ד"ר; Sloots, TP; Mackay, IM ניו וירוס קורונה אנושי, HCoV-NL63, קשור למחלת דרכי נשימה תחתונה חמורה באוסטרליה. J. Med. וירול. 2005, 75, 455–462. [CrossRef]
16. יד, י. רוז, EB; סלינס, א.; לו, X.; Sakthivel, SK; שניידר, ע.; Watson, JT התפרצות מחלת נשימה חמורה הקשורה לקורונה אנושית NL63 במתקן סיעודי. Emerg. לְהַדבִּיק. Dis. 2018, 24, 1964–1966. [CrossRef]
17. הופמן, מ.; קליין-ובר, ה.; שרדר, ש.; קרוגר, נ.; הרלר, ט.; אריכסן, ש.; Schiergens, TS; הרלר, ג.; וו, נ.-ה.; ניטשה, א.; et al. כניסת SARS-CoV-2 לתא תלויה ב-ACE2 וב-TMPRSS2 ונחסמת על ידי מעכב פרוטאז מוכח קלינית. תא 2020, 181, 271–280.e8. [CrossRef]
18. הופמן, ה.; Pyrc, K.; ואן דר הוק, ל.; גייר, מ.; ברקאות, ב.; Pöhlmann, S. Human Coronavirus NL63 מעסיק את קולטן הקורונה לתסמונת הנשימה החריפה לכניסה סלולרית. פרוק. נאטל. אקד. Sci. ארה"ב 2005, 102, 7988–7993. [CrossRef]
19. Hulswit, RJG; לאנג, י.; Bakkers, MJG; לי, ו.; לי, ז; שוטן, א.; אופורסט, ב.; van Kuppeveld, FJM; בונס, ג'-ג'; בוש, ב'-ג'; et al. נגיפים אנושיים OC43 ו-HKU1 נקשרים אל 9-חומצות סיאליות O-Acetylated דרך אתר קושר רצפטורים משומר בדומיין Spike Protein A. Proc. נאטל. אקד. Sci. ארה"ב 2019, 116, 2681–2690. [CrossRef]
20. ייגר, CL; אשמון, ר"ע; וויליאמס, RK; קרדליצ'יו, CB; שפירו, ל"ה; להסתכל על; Holmes, KV Human Aminopeptidase N הוא קולטן לקורונה אנושית 229E. טבע 1992, 357, 420–422. [CrossRef]
21. וו, ק.; לי, ו.; פנג, ג.; Li, F. מבנה קריסטל של תחום קושרת קולטן לקורונה נשימתי NL63 מורכב עם הקולטן האנושי שלו. פרוק. נאטל. אקד. Sci. ארה"ב 2009, 106, 19970–19974. [CrossRef]
22. Meyerholz, DK; פרלמן, ס. האם זיהום נגיף קורונה נפוץ מגן מפני מחלת SARS-CoV-2 חמורה? ג'יי קלין. תחקור. 2021, 131. [CrossRef] [PubMed]
23. רינגלנדר, י. מרטנר, א.; נילסון, ש.; Westin, J.; לינד, מ.; Hellstrand, K. שכיחות וחומרת נגיף הקורונה-19 בחולים עם וללא זיהומים מאומתים בעבר עם נגיף קורונה. J. Infect. Dis. 2021, 223, 1831–1832. [CrossRef]
24. Schnierle, BS תגובה ל-Ringlander et al. J. Infect. Dis. 2021, 223, 1833. [CrossRef] [PubMed]
25. ברטה, א.; Cranage, M.; Zipeto, D. האם חסינות צולבת תגובתית מעוררת אימונופתוגנזה של COVID-19? חֲזִית. אימונול. 2020, 11, 2695. [CrossRef] [PubMed]
26. קריץ', CB; ווקר, SC; Samuels, RJ SARS-CoV-2 חיסונים. JAMA 2021, 325, 1318–1320. [CrossRef]
27. טאו, ק.; צו, PL; נוהין, ג'; גופטה, RK; דה אוליביירה, ט.; בריכת קוסאקובסקי, SL; Fera, D.; Shafer, RW המשמעות הביולוגית והקלינית של גרסאות SARS-CoV-2 המתעוררות. נאט. הכומר ג'נט. 2021, 22, 757–773. [CrossRef]
28. Nguyen, L.-T.; שמידט, HA; פון האסלר, א. Minh, BQ IQ-TREE: אלגוריתם סטוכסטי מהיר ויעיל להערכת פילוגניות סבירות מרבית. מול. ביול. Evol. 2015, 32, 268–274. [CrossRef]
29. Hoang, DT; צ'רנומור, או.; פון האסלר, א. מין, BQ; Vinh, LS UFBoot2: שיפור קירוב האתחול האולטרה-מהיר. מול. ביול. Evol. 2018, 35, 518–522. [CrossRef]
30. קליאנמורתי, ש.; מין, BQ; וונג, TKF; פון האסלר, א. Jermiin, LS ModelFinder: בחירת מודל מהירה להערכות פילוגנטיות מדויקות. נאט. שיטות 2017, 14, 587–589. [CrossRef]
31. Katoh, K.; Standley, DM MAFFT Multiple Sequence Alignment Software גרסה 7: שיפורים בביצועים ובשימושיות. מול. ביול. Evol. 2013, 30, 772–780. [CrossRef]
32. ג'נובה, תקליטור; סמפסון, א.; סקוט, ס.; קנטוני, ד.; מאיורה-נטו, מ.; בנטלי, E.; Mattiuzzo, G.; רייט, E.; דרבני, מ.; Auld, B.; et al. ייצור, טיטרציה, נטרול, אחסון וליאופיליזציה של תסמונת נשימה חריפה חמורה Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) פסאודוטיפים לנטיו-ויראליים. ביו-פרוטוקול 2021, 11, e4236. [CrossRef]
33. פרארה, פ.; Temperton, N. מבחני נטרול פסאודוטייפ: מספסל מעבדה לניתוח נתונים. פרוטוקול שיטות. 2018, 1, 8. [CrossRef]
34. ליו, סי; ג'ין, ח"מ; דג'ניראטיסאי, וו.; סופאסה, פ.; וואנג, ב.; טועקפרחון, א.; נוטלאי, ר.; ג'ואו, ד'; מנצר, AJ; זאו, י.; et al. נטרול מופחת של SARS-CoV-2 B.1.617 על ידי חיסון וסרום הבראה. תא 2021, 184, 4220–4236.e13. [CrossRef]
35. שן, X.; טאנג, ה.; Pajon, R.; סמית', ג'; גלן, GM; שי, ו.; קורבר, ב.; Montefiori, DC נטרול של SARS-CoV-2 וריאציות B.1.429 ו-B.1.351. N. Engl. J. Med. 2021, 384, 2352–2354. [CrossRef]
36. שן, X.; טאנג, ה.; מקדנל, סי; וואג, ק.; פישר, ו.; תיילר, ג'; יון, ה.; לי, ד.; היינס, BF; סנדרס, KO; et al. וריאנט SARS-CoV-2 B.1.1.7 רגיש לנטרול נוגדנים הנגרמים על ידי חיסוני ספייק אבות. Cell Host Microbe 2021, 29, 529–539. [CrossRef]
37. Willett, BJ; גרוב, ג'; מקלין, OA; Wilkie, C.; דה לורנצו, ג'; Furnon, W.; קנטוני, ד.; סקוט, ס.; לוגן, נ.; אשרף, ש.; et al. SARS-CoV-2 Omicron הוא וריאנט מילוט חיסוני עם נתיב כניסת תאים שונה. נאט. מיקרוביול. 2022, 7, 1161–1179. [CrossRef]
38. סיראקוסאנו, ג'; רוג'ירו, א.; ביסופי, ז; Piubelli, C.; Carbonare, LD; ולנטי, MT; מאיורה-נטו, מ.; טמפרטון, נ.; לופאלקו, ל.; זיפטו, ד' דעיכה שונה של תגובת נוגדנים ורגישות ל-VOC אצל נבדקים נאיביים ונדבקים בעבר ב-15 שבועות לאחר החיסון עם BNT162b2. J. Transl. Med. 2022, 20, 22. [CrossRef]
39. פולאק, פ.פ; תומאס, SJ; קיצ'ין, נ.; אבסלון, י. גורטמן, א.; לוקהארט, ש.; פרז, JL; פרז מארק, ג'; Moreira, ED; זרביני, ג; et al. בטיחות ויעילות של חיסון BNT162b2 MRNA Covid-19. N. Engl. J. Med. 2020, 383, 2603–2615. [CrossRef]
40. באדן, LR; אל סאהלי, ח"מ; אססינק, ב.; קוטלוף, ק.; פריי, ש.; נובאק, ר.; דימרט, ד.; ספקטור, ס"א; רופאל, נ.; Creech, CB; et al. היעילות והבטיחות של חיסון MRNA-1273 SARS-CoV-2. N. Engl. J. Med. 2021, 384, 403–416. [CrossRef]
41. אמרי, KRW; גולובצ'יק, ט.; Aley, PK; אריאני, קורות חיים; אנגוס, ב.; ביבי, ש.; בליין, ב.; בונסל, ד.; Cicconi, P.; צ'רלטון, ש.; et al. יעילות חיסון ChAdOx1 NCoV-19 (AZD1222) נגד SARS-CoV-2 וריאנט של דאגה 202012/01 (B.1.1.7): ניתוח חקרני של ניסוי אקראי מבוקר. Lancet 2021, 397, 1351–1362. [CrossRef]
42. אדריג', AWD; קצ'רובסקה, י. Hoste, ACR; באקר, מ.; קליין, מ.; לואנס, ק.; Jebbink, MF; מצר, א.; Kinsella, CM; Rueda, P.; et al. חסינות הגנה עונתית לקורונה היא קצרת טווח. נאט. Med. 2020, 26, 1691–1693. [CrossRef] [PubMed]
43. Aldridge, RW; לוור, ד.; ביל, ש.; ג'ונסון, AM; זמבון, מ.; הייוורד, AC; Fragaszy, EB עונתיות וחסינות לנגיף קורונה עונתי שאושר על ידי מעבדה (HCoV-NL63, HCoV-OC43 ו-HCoV-229E): תוצאות ממחקר העוקב של Watch Watch. Wellcome Open Res 2020, 5, 52. [CrossRef] [PubMed]
44. ג'אנג, ש.-פ.; Tuo, J.-L.; הואנג, X.-B.; ז'ו, X.; Zhang, D.-M.; ג'ואו, ק.; יואן, ל.; Luo, H.-J.; ג'נג, ב'-ג'; יואן, ק.-י.; et al. מאפיינים אפידמיולוגיים של נגיף קורונה אנושי בחולים עם תסמינים של זיהום בדרכי הנשימה וניתוח פילוגנטי של HCoV-OC43 במהלך 2010-2015 בגואנגג'ואו. PLoS ONE 2018, 13, e0191789. [CrossRef] [PubMed]
45. Byington, CL; אמפופו, ק.; סטוקמן, סי; אדלר, FR; הרבנר, א.; מילר, ט.; שנג, X.; Blaschke, AJ; פריך, ר; Pavia, AT מעקב קהילתי אחר וירוסים בדרכי הנשימה בקרב משפחות ביוטה מחקר זיהוי טוב יותר של חיידקים-אפידמיולוגיה ויראלית אורכית (BIG-LoVE). קלינ. לְהַדבִּיק. Dis. 2015, 61, 1217–1224. [CrossRef] [PubMed]
46. וולס, דא; קנטוני, ד.; מאיורה-נטו, מ.; ג'נובה, CD; סמפסון, א.; פרארי, מ.; קרנל, ג'; Nadesalingam, A.; סמית, פ.; צ'אן, א.; et al. נטרול נגיף קורונה עונתי אנושי וחומרת הקורונה-19. J. Med. וירול. 2022, 94, 4820–4829. [CrossRef]
47. שרואני, ק.; שארמה, ר.; קרישנה, מ.; ג'ונס, ט.; מאיורה-נטו, מ.; קנטוני, ד.; Temperton, NJ; דובסון, SL; סוברמאניאם, ק.; מקנמרה, נ"ב; et al. זיהוי של נוגדנים צולבים בנסיוב ותגובת זיכרון ל-SARS-CoV-2 בדגימות הבראה קדם-פנדמיות ופוסט-פוסט-COVID-19. J. Infect. Dis. 2021, 224, 1305–1315. [CrossRef]
48. Ng, KW; פוקנר, נ.; קורניש, GH; רוזה, א.; הארווי, ר.; חוסיין, ש.; Ulferts, R.; ארל, סי; Wrobel, AG; בנטון, DJ; et al. חסינות הומורלית קיימת ו-de Novo ל-SARS-CoV-2 בבני אדם. מדע 2020, 370, 1339–1343. [CrossRef]
49. וודנברג, ט.; Pelleau, S.; אנה, פ.; עטיה, מ.; Donnadieu, F.; גרבט, א.; לוהמן, סי; סרפין, ח; Guiheneuf, R.; Delamare, C.; et al. חסינות הומורלית ל-SARS-CoV-2 וקורונה עונתית בילדים ומבוגרים בצפון-מזרח צרפת. EBioMedicine 2021, 70, 103495. [CrossRef]
50. Tso, FY; Lidenge, SJ; פניה, PB; קלג, א.א.; Ngowi, JR; Mwaiselage, J.; Ngalamika, O.; יוליוס, פ.; ווסט, JT; Wood, C. שכיחות גבוהה של תגובתיות צולבת סרולוגית קיימת נגד תסמונת נשימה חריפה חמורה וירוס קורונה-2 (SARS-CoV-2) באפריקה שמדרום לסהרה. Int. J. Infect. Dis. 2021, 102, 577–583. [CrossRef]
51. Laing, ED; סטרלינג, SL; ריצ'רד, ס"א; פוגט, ש.; סמואלס, EC; Epsi, ניו ג'רזי; יאן, ל.; מורנו, נ.; קולס, סי; מחלקו, י. et al. בדיקת חיסונית מיקרוספירה מרובה של Betacoronavirus מזהה המרת סרוק מוקדמת של SARS-CoV-2 ובקרה על תגובתיות צולבת של נוגדנים לקורונה אנושיים עונתיים. medRxiv 2020. [CrossRef]
52. לאדנר, JT; הנסון, SN; Boyle, AS; Engelbrektson, AL; פינק, ZW; Rahee, F.; ד'אמברוציו, י. Schaecher, KE; אבן, מ.; דונג, ו.; et al. תגובת נוגדנים מסוג SARS-CoV-2 מזהה תגובתיות צולבת עם נגיף קורונה אנושי אנדמי. Cell Rep. Med. 2021, 2, 100189. [CrossRef]
53. שיר, ג.; הוא, ו.; קלגהאן, ס.; אנזנלו, פ.; הואנג, ד.; ריקטס, ג'יי; טורס, JL; ביוטלר, נ.; פנג, ל.; ורגאס, ש.; et al. תגובת סרום צולבת ותגובות תאי B בזיכרון לחלבון ספייק ב-SARS-CoV-2 וזיהום אנדמי בקורונה. נאט. Commun. 2021, 12, 2938. [CrossRef]
54. היקס, ג'; Klumpp-Thomas, C.; קאליש, ח; שונמוגבל, א. מחלקו, י. דנסון, J.-P.; Snead, KR; דרו, מ.; Corbett, KS; גרהם, BS; et al. תגובתיות צולבת סרולוגית של SARS-CoV-2 עם וירוסי בטאקורונה אנדמיים ועונתיים. ג'יי קלין. אימונול. 2021, 41, 906–913. [CrossRef]
55. גריפוני, א.; Weiskopf, D.; רמירז, SI; Mateus, J.; דן, JM; Moderbacher, CR; רולינגס, ס"א; סאתרלנד, א.; פרקומאר, ל. ג'די, ארס; et al. יעדים של תגובות תאי T ל-SARS-CoV-2 וירוס קורונה בבני אדם עם מחלת COVID-19 ואנשים לא נחשפים. תא 2020, 181, 1489–1501.e15. [CrossRef]
56. Mateus, J.; גריפון, א.; טארקה, א.; סידני, ג'; רמירז, SI; דן, JM; בורגר, ZC; רולינגס, ס"א; סמית', DM; פיליפס, E.; et al. אפיטופים של תאי T SARS-CoV-2 סלקטיביים וצולבים בבני אדם לא חשופים. מדע 2020, 370, 89–94. [CrossRef]
57. סקין, ט.; פרז-פוטי, א.; ריברה-בלסטרוס, או. סטרולין, ק.; גורין, ג'-ב; אולסון, א.; Llewellyn-Lacey, S.; כמאל, ח; בוגדנוביץ', ג'; Muschiol, S.; et al. חסינות חזקה של תאי T אצל אנשים בהחלמה עם נגיף אסימפטומטי או מתון של נגיף הקורונה-19. תא 2020, 183, 158–168.e14. [CrossRef]
58. שוליין, I.; קמינג, ג'; Oberhardt, V.; פרא, ק.; זיידל, LM; קילמר, ש.; סגאר; דאול, פ.; סלבט לאגו, מ.; דקר, א.; et al. אפיון של תאי SARS-CoV-2-ספציפיים8+ T. קיימים ומושרים מראש. נת מד 2021, 27, 78–85. [CrossRef]
59. ריינולדס, CJ; החתלה, ל.; Gibbons, JM; פאד, ג; Jensen, MP; דיניז, מו; שמידט, NM; באטלר, DK; אמין, OE; ביילי, SNL; et al. תגובות נוגדנים מנטרלים ו-T תאי T בזיהום SARS-CoV-2 אסימפטומטי ומתון. Sci. אימונול. 2020, 5, eabf3698. [CrossRef]
60. נמוך, JS; Vaqueirinho, D.; מֶלֶה, פ.; פוגליריני, מ.; ג'רק, ג'; פרוטי, מ.; ג'רוסאי, ד'; יוביץ', ש.; פרז, ל.; Cacciatore, R.; et al. ניתוח קלונלי של אימונודומיננטיות ותגובתיות צולבת של תגובת תאי CD4 T ל-SARS-CoV-2. מדע 2021, 372, 1336–1341. [CrossRef]
61. Echeverría, G.; גווארה, א.; קולומה, ג'; Ruiz, AM; Vasquez, MM; טג'רה, ע.; de Waard, JH חסינות קיימת מראש של תאי T ל-SARS-CoV-2 בבקרות בריאות לא חשופות באקוודור, כפי שזוהתה עם בדיקת שחרור אינטרפרון-גמא של COVID-19. Int. J. Infect. Dis. 2021, 105, 21–25. [CrossRef]
62. Poston, D.; ויסבלום, י.; וייז, ח; טמפלטון, ק.; ג'נקס, ש.; Haziioannou, T.; Bieniasz, P. היעדר תסמונת נשימתית חריפה נגיף קורונה 2 פעילות מנטרלת בסרה קדם-פנדמית מאנשים עם זיהום עונתי לאחרונה בקורונה. קלינ. לְהַדבִּיק. Dis. 2020, 73, e1208–e1211. [CrossRef] [PubMed]
63. אמנת, פ.; Thapa, M.; ליי, ט; אחמד, SMS; אדלסברג, DC; Carreño, JM; סטרומאייר, ש.; שמיץ, AJ; צפר, ש.; ג'ואו, JQ; et al. חיסון MRNA מסוג SARS-CoV-2 גורם לנוגדנים מגוונים בתפקוד ל-NTD, RBD ו-S2. תא 2021, 184, 3936–3948.e10. [CrossRef]
64. אנג'יאל, א.; לונגט, ש.; מור, SC; פיין, RP; הארדינג, א.; טיפטון, ט.; רונגקארד, פ.; עלי, מ.; הרינג, LM; Meardon, N.; et al. תגובות T-Cell ונוגדנים למינון החיסון הראשון של BNT162b2 בנגועים בעבר ו-SARS-CoV-2-עובדי בריאות בבריטניה נאיבים: מחקר עוקבה פרוספקטיבי רב-מרכזי. Lancet Microbe 2022, 3, e21–e31. [CrossRef] [PubMed]
65. סקלי, DT; Harding, AC; גילברט-ג'רמילו, י. נייט, ML; לונגט, ש.; בראון, א.; אדל, ש.; אדלנד, ע.; בראון, ה.; טיפטון, ט.; et al. שתי מנות של חיסון SARS-CoV-2 מעוררות תגובות חיסוניות חזקות לגרסאות מתעוררות של SARS-CoV-2. נאט. Commun. 2021, 12, 5061. [CrossRef] [PubMed]
66. גרובן, מ.; ואן דר שטרטן, ק.; Brouwer, PJ; ברינקמפר, מ.; Maisonnasse, P.; Dereuddre-Bosquet, N.; אפלמן, ב.; לאוול, א.א.; ואן ווט, לוס אנג'לס; בורגר, JA; et al. נוגדנים צולבים תגובה לאחר זיהום וחיסון SARS-CoV-2. eLife 2021, 10, e70330. [CrossRef]
67. אנדרסון, EM; גודווין, EC; ורמה, א.; Arevalo, CP; בולטון, MJ; Weirick, ME; גומא, ש.; מקאליסטר, CM; כריסטנסן, SR; וויבר, ג'; et al. נוגדני נגיף קורונה אנושיים עונתיים מוגברים עם זיהום ב-SARS-CoV-2 אך אינם קשורים להגנה. תא 2021, 184, 1858–1864.e10. [CrossRef]
68. Sermet-Gaudelus, I.; תמם, ש; הון, סי; בהיליל, ש; Gajdos, V.; Bigot, T.; לורייר, ט.; Chrétien, D.; בקוביץ', מ.; Delaunay Moisan, A.; et al. הידבקות קודמת על ידי קורונה עונתית, כפי שהוערכה על ידי סרולוגיה, אינה מונעת זיהום ומחלות SARS-CoV-2 בילדים, צרפת, אפריל עד יוני 2020. Eurosurveillance 2021, 26, 2001782. [CrossRef]
69. גומבר, ש.; ברגקוויסט, ט.; Pejaver, V.; Hammarlund, NE; Murugesan, K.; מוני, ש.; שאה, נ.; פינסקי, BA; Banaei, N. SARS CoV-2 זיהום ו-COVID-19 חומרת אנשים עם זיהום עונתי קודם בקורונה. דיאגן. מיקרוביול. לְהַדבִּיק. Dis. 2021, 100, 115338. [CrossRef]
70. קיאן, ז.; או, X.; Góes, LGB; אוסבורן, סי; קסטנו, א.; הולמס, KV; Dominguez, SR זיהוי של התחום קושר הרצפטורים של ה-Spike Glycoprotein של Human Betacoronavirus HKU1. J. Virol. 2015, 89, 8816–8827. [CrossRef]
71. Ou, X.; גואן, ה.; צ'ין, ב.; מו, ז; Wojdyla, JA; וואנג, מ.; דומינגז, SR; קיאן, ז.; Cui, S. מבנה קריסטל של תחום מחייב הקולטנים של ה-Spike Glycoprotein של Human Betacoronavirus HKU1. Nat Commun 2017, 8, 15216. [CrossRef]
72. פוגל, א.ב; קניבסקי, א.; צ'ה, י.; סוונסון, KA; מויק, א.; וורמהר, מ.; קרנץ, LM; Walzer, KC; היין, ש.; Güler, A.; et al. חיסוני BNT162b מגנים על מקוק רזוס מפני SARS-CoV-2. טבע 2021, 592, 283–289. [CrossRef]
73. ג'קסון, לוס אנג'לס; אנדרסון, EJ; Rouphael, NG; רוברטס, PC; מכין, מ.; קולר, RN; McCullough, MP; Chappell, JD; דניסון, MR; Stevens, LJ; et al. חיסון MRNA נגד SARS-CoV-2—דוח ראשוני. N. Engl. J. Med. 2020, 383, 1920–1931. [CrossRef]
74. לורנץ, י. Xie, Q.; זך, פ.; וייל, ת.; זיידל, א.; קרנאבק, ד.; ואן דר הוק, ל.; Munch, J.; מולר, JA; Kirchhoff, F. תסמונת נשימה חריפה חמורה חיסון נגד וירוס קורונה 2 מגביר את הפעילות המנטרלת נגד נגיפים אנושיים עונתיים. קלינ. לְהַדבִּיק. Dis. 2022, 75, e653–e661. [CrossRef]
75. סימולה, ארה"ב; Manca, MA; ג'סמי, ש.; עוזאו, ש.; רובינו, ש.; מנצ'יה, פ.; ביטי, א.; פאלרמו, מ.; Sechi, LA HCoV-NL63, ו-SARS-CoV-2 משתפים אפיטופים מזוהים על ידי התגובה ההומורלית בסרה של אנשים שנאספו לפני ובמהלך מגיפת CoV-2. מיקרואורגניזמים 2020, 8, 1993. [CrossRef]
76. צ'אן, ק"ח; צ'נג, VCC; וואו, PCY; לאו, SKP; Poon, LLM; גואן, י.; Seto, WH; יואן, KY; Peiris, JSM תגובות סרולוגיות בחולים עם תסמונת נשימתית חריפה חמורה זיהום בקורונה ותגובתיות צולבת עם נגיף קורונה אנושי 229E, OC43 ו-NL63. קלינ. חיסון אימונול. 2005, 12, 1317–1321. [CrossRef]
77. לין, ה.-X.; פנג, י.; טו, X.; ז'או, X.; הסיה, סי'-ח; גריפין, ל.; יונופ, מ.; Zhang, C. אפיון חלבון הספייק של נגיף הקורונה האנושי NL63 בקישור קולטן וכניסת וירוס פסאודוטייפ. Res. 2011, 160, 283–293. [CrossRef]
78. היינץ, FX; Stiasny, K. Distinguishing Features of Current COVID-19 חיסונים: ידועים ולא ידועים של הצגת אנטיגן ודרכי פעולה. npj Vaccines 2021, 6, 1–13. [CrossRef]
79. מרטינז-פלורס, ד.; זפדה-סרוונטס, י. Cruz-Reséndiz, A.; Aguirre-Sampieri, S.; סמפיירי, א. Vaca, L. SARS-CoV-2 חיסונים המבוססים על Spike Glycoprotein וההשלכות של גרסאות ויראליות חדשות. חֲזִית. אימונול. 2021, 12. [CrossRef]
80. Dolgin, E. Pan-Coronavirus Vaccine Pipeline מקבל צורה. נאט. Rev. Drug Discov. 2022, 21, 324–326. [CrossRef]