תַקצִיר:הסוג Salvia L. (Lmiaceae) משמש בעיקר בתעשיית התרופות והמזון. מספר מינים בעלי רלוונטיות ביולוגית נמצאים בשימוש נרחב ברפואה המסורתית, כולל Salvia aurea L. (syn. S. africana-lutea L.), המשמש כחומר חיטוי מסורתי לעור ובפצעים כתרופה לריפוי; עם זאת, מאפיינים אלה עדיין לא אושרו. המחקר הנוכחי נועד לאפיין שמן אתרי S. aureus (EO), לחשוף את ההרכב הכימי שלו ולאמת את התכונות הביולוגיות שלו. ה-EO הושג על ידי הידרוסטילציה ולאחר מכן נותח על ידי GC-FID ו-GC-MS. פעילויות ביולוגיות שונות הוערכו: ההשפעה האנטי-פטרייתית על דרמטופיטים ושמרים והפוטנציאל האנטי דלקתי על ידי הערכת ייצור תחמוצת החנקן (NO) ורמות החלבון COX-2 ו-iNOS. תכונות ריפוי פצעים הוערכו באמצעות מבחן ריפוי שריטות, ויכולת האנטי-אייג'ינג הוערכה באמצעות פעילות בטא-גלקטוזידאז הקשורה להזדקנות. S. aurea EO מאופיין בעיקר על ידי 1,8-cineole (16.7 אחוז), -פינן (11.9 אחוז), cis-thujone (10.5 אחוז), קמפור (9.5 אחוז) ו-(E)-caryophyllene (9.3). אחוזים). התוצאות הראו עיכוב יעיל של צמיחת דרמטופיטים. יתר על כן, זה הפחית משמעותית את רמות החלבון של iNOS/COX-2 ובו זמנית ללא שחרור. בנוסף, ה-EO הפגין פוטנציאל אנטי-הזדקנות וריפוי פצעים משופר. בסך הכל, מחקר זה מדגיש את התכונות הפרמקולוגיות המדהימות של Salvia aurea EO, אשר יש לחקור עוד יותר כדי לפתח מוצרי עור חדשניים, בני קיימא וידידותיים לסביבה.

גליקוזיד של cistanche יכול גם להגביר את הפעילות של SOD ברקמות הלב והכבד, ולהפחית באופן משמעותי את תכולת הליפופוסצין וה-MDA בכל רקמה, תוך ניקוי יעיל של רדיקלי חמצן תגובתיים שונים (OH-, H₂O₂ וכו') ומגן מפני נזקי DNA הנגרמים על ידי OH-רדיקלים. לגליקוזידים פנילתנואידים של Cistanche יש יכולת ניקוי חזקה של רדיקלים חופשיים, יכולת צמצום גבוהה יותר מאשר ויטמין C, משפרים את פעילות ה-SOD בתרחיף זרע, מפחיתים את תכולת ה-MDA ובעלי השפעה הגנה מסוימת על תפקוד קרום הזרע. פוליסכרידים של Cistanche יכולים להגביר את הפעילות של SOD ו-GSH-Px באריתרוציטים וברקמות ריאה של עכברים מתבגרים שנגרמו על ידי D-galactose, כמו גם להפחית את תכולת ה-MDA והקולגן בריאה ובפלזמה, ולהגדיל את תכולת האלסטין. אפקט ניקוי טוב על DPPH, הארכת זמן ההיפוקסיה בעכברים מזדקנים, שיפור הפעילות של SOD בנסיוב, ועיכוב ניוון פיזיולוגי של ריאות בעכברים מזדקנים בניסוי. עם ניוון מורפולוגי תאי, ניסויים הראו כי ל-Cistanche יש יכולת נוגדת חמצון טובה ובעלת פוטנציאל להיות תרופה למניעה וטיפול במחלות הזדקנות העור. יחד עם זאת, לאכינאקוסיד ב-Cistanche יש יכולת משמעותית לסלק רדיקלים חופשיים של DPPH ובעל יכולת לנטרל מיני חמצן תגובתיים ולמנוע פירוק קולגן הנגרמת על ידי רדיקלים חופשיים, וכן יש לו אפקט תיקון טוב על נזקי אניון רדיקלים חופשיים של תימין.

לחץ על איפה אני יכול לקנות Cistanche

【למידע נוסף: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

1. הקדמה

לצמחי מרפא מספר מאפיינים אורגנולפטיים התורמים לערכם הגבוה בתעשיית התרופות, התזונתי, הקוסמטיקה והמזון. המטבוליטים המשניים שלהם מופיעים כמועמדים פוטנציאליים לתרופות אנטי דלקתיות ואנטי פטרייתיות חדשות [1-3]. בין היתר, מינים ארומטיים ממשפחת Lamiaceae ידועים בעושר שלהם בשמנים אתריים, המדגימים מגוון רחב של השפעות ביולוגיות, כולל, במיוחד, אנטי דלקתיות ואנטי פטרייתיות [4-8]. אחד מהסוגים הגדולים והחשובים במשפחה זו הוא הסוג Salvia L., הכולל כמעט 1000 מינים [9]. חלקם מעובדים ברחבי העולם לשימושם הקולינרי וכן למטרות רפואיות; למעשה, הם מועסקים זה מכבר ברפואה העממית [10,11]. מינים רבים מראים תכונות ביולוגיות חשובות, כולל השפעות אנטיבקטריאליות, אנטי פטרייתיות, נוגדות חמצון, אנטי דלקתיות, אנטי סרטניות, היפוגליקמיות ואנטי דמנציה [12,13].

למרות שסוג זה נחקר בהרחבה, עדיין יש עניין רב באותם מינים שניתן לטפח (לבייתם) ולהשתמש בהם לתכונות מעודדות בריאות. ידוע היטב כי מטבוליטים משניים הם תוצאה של אינטראקציות צמחיות/סביבה. לכן, מחקרים על האוכלוסייה המבויתת יכולים לספק מידע רלוונטי לגבי האם מטבוליטים משניים והתכונות הביולוגיות הקשורות אליהם משתנים מהאוכלוסייה המקומית. בין אלה, Salvia aurea L. (syn. S. africana-lutea L.) הוא זן ארומטי חשוב המשמש למטרות רפואיות בכף המערבי (דרום אפריקה) ומטופח בחלקים רבים של העולם כ ארומטי/ צמח מרפא וכן נוי (ריהוט עירוני). מין זה הוא שיח ארומטי מסועף בצבע אפור-ירוק המתנשא לגובה של כ-2 מ', בעל עלים בעלי פטוטרת הצוברים את שמן האתרי שלו בטריכומות בלוטות ומציג פרחים אופייניים גדולים וחומים-זהובים [14]. מקורו בדרום אפריקה, שם תפוצתו הגיאוגרפית משתרעת מערבה מחצי האי הכף לכיוון Namaqualand וכן מזרחה מהכף לכיוון פורט אלפרד במחוז הכף המזרחי. לעתים קרובות היא נקראת "מרווה חוף, סנדלית", שאופיינית לסביבת הדיונה, או "מרווה דיונה חומה" בשל הצבע האופייני של פרחיה [15,16].

S. aurea ידוע במספר השימושים שלו ברפואה המסורתית, בעיקר ככביסה אנטי דלקתית ותרופתית לטיפול בפצעים ומחלות עור. יתר על כן, מין זה משמש גם לריפוי ברונכיטיס ומחלות נשימה אחרות המחזקות את התכונות האנטי-מיקרוביאליות שלו [17,18].

דרמטופיטים, במיוחד אלה של Trichophyton, Epidermophyton ו-Microsporum, קשורים לעתים קרובות ל-mycoses שטחיים [19]; עם זאת, אנשים מדוכאי חיסון יכולים להיות מושפעים מזיהומים פולשניים [20].

במהלך זיהומים אלה, אפיטופים פטרייתיים [21,22] נקשרים לקולטנים דמויי Toll (TLR), מה שמעורר הפעלה של מצב פרו-דלקתי. אחד המסלולים המשמעותיים ביותר הקשורים למצב זה הוא מסלול הגורם הגרעיני kappa B (NF-κB), הכולל הפרשת ציטוקינים דלקתיים וסינתזה של אנזימים פרו-דלקתיים, למשל, Synthase Nitric Oxide Inducable (iNOS) וה-Cycloxygenase- 2 (COX-2) [23]. אנזימים אלו אחראים לייצור תחמוצת החנקן (NO) ופרוסטנואידים, בהתאמה [24,25].

יתר על כן, דרמטופיטים מובילים לעתים קרובות לנגעים בעור [26]. לכן, יש צורך בריפוי פצעים כדי לחדש את הרקמה הפגועה; אחרת, הפצע הופך לכרוני [27].

זיהומים פטרייתיים הם עדיין צורך קליני שאינו מסופק מאחר שהגורמים האטיולוגיים קשורים לעתים קרובות לעמידות לטיפול ומובילים להישנות, בעוד שתרופות קונבנציונליות קשורות באופן נרחב לתופעות לוואי [28]. יתרה מכך, ידוע שכמה זני פטרייה עמידים בפני חומרים אנטי-פטרייתיים קיימים [29,30]. תרופות אנטי דלקתיות נקשרו גם למספר תופעות לוואי [31]. לכן, חיוני לפתח אסטרטגיות חדשות, שבנוסף לטיפול בזיהומים פטרייתיים, יכולות גם לעכב את המצב הפרו-דלקתי המתעורר במהלך ההדבקה.

בהתחשב בשימושים המסורתיים שלה, סביר להניח של-S. aurea עשוי להיות פעילות אנטי-פטרייתית ואנטי-דלקתית במקביל. עם זאת, תכונות אלה נבדקו על ידי מספר מצומצם של מחקרים על מגוון צר של מיקרואורגניזמים [32-34]. יתר על כן, למיטב ידיעתנו, אף מחקר לא דיווח על תכונות ריפוי הפצעים של S. aureus עד כה. לכן, עבודה זו שואפת לאפיין את השמן האתרי של S. aureus (sandsalie) כאשר הוא מבוית באזור החוף של האי סרדיניה. בהתחשב במגוון הנפט בעונה ובמקום, טריטוריה זו נבחרה בשל קווי הדמיון שלה עם אזור ה-Fynbos הדרום אפריקאי, טריטוריית הילידים של S. aurea [35,36]. בנוסף, אימתנו כמה מהשימושים המסורתיים המיוחסים למין זה, במיוחד אלה הקשורים לשימושים אנטי-מיקרוביאליים, אנטי דלקתיים וריפוי פצעים. השפעות אנטי-הזדקנות נחשפו גם כדי לקדם עניין נוסף בצמח זה.

2. תוצאות

2.1. הרכב כימי של שמן אתרי S. aurea

עלי S. aurea עברו זיקוק הידרו, והשיגו את השמן האתרי (EO) עם תפוקה של 0.54 אחוז (w/w). בטבלה 1, תרכובות המזוהות עם EO והאחוזים היחסיים שלהן רשומים לפי סדר הפליטה שלהם. זוהו שלושים ושש תרכובות, בסך הכל 98.8 אחוזים.

יתר על כן, 47.4 אחוזים מהתרכובות הן מונוטרפנים מחומצנים, 28.8 אחוז מונוטרפנים פחמימנים, 19.8 אחוז סקוטרפנים פחמימנים ו-2.8 אחוז סקוטרפנים מחומצנים.

ניתוח כימי גילה שהרכיבים המייצגים ביותר של שמן S. aurea היו 1.8 סינאול (16.7 אחוז), -פינן (11.9 אחוז), ציס-תוג'ון (10.5 אחוז), קמפור (9.5 אחוז), ( E)-caryophyllene (9.3 אחוזים), טרנס-תוג'ון (6.9 אחוזים), -פינן (4.7 אחוזים), קמפן (3.9 אחוזים) ו-הומולן (3.0 אחוזים).

2.2. אפקט אנטי פטרייתי של Salvia aurea

נעשה שימוש בשיטת ה-microdilution broth כדי להעריך את הפעילות האנטי-פטרייתית, כפי שדווח בטבלה 2. Trichophyton mentagrophytes, T. rubrum ו-Epidermophyton floccosum הם הזנים הרגישים ביותר לפעילות EO. באופן ספציפי, EO הראה השפעה פטרייתית עבור T. mentagrophytes ו- E. floccosum.

2.3. פוטנציאל אנטי דלקתי של S. aurea

כדי להעריך את הפוטנציאל האנטי דלקתי של S. aurea, נקטנו במודל המקרופאגים המגורים ליפופוליסכרידים (LPS). כצפוי, בנוכחות LPS, המקרופאגים שחררו NO למדיום, שם הוא זוהה כחנקה ([NO]=43.03 ± 7.74 µM). מעניין לציין ש- S. aurea EO הפחית את שחרור ה-NO שנוצר על ידי LPS בהתאם למינון (איור 1A, IC 50=1.07 µL/mL). המינון של 1.25 µL/mL נבחר לחשוף את המנגנונים הבסיסיים שכן הוא עיכב ייצור NO ביותר מ-50 אחוז, היה נטול רעילות (איור 1B), והיה מינון שעצר את הצמיחה של דרמטופיטים.

הקישור של LPS לקולטן דמוי Toll 4 (TLR4) גורם לטרנסלוקציה גרעינית של NF-κB, אשר כתוצאה מכך גורמת לביטוי של סינתאז תחמוצת החנקן (Nos2) וציקלוקסיגנאז (Ptgs2) הניתן לשרירה-2 (Ptgs2) [39]. לאחר מכן, הערכנו אם ה-EO יכול לווסת את רמות החלבונים הללו. כצפוי, במקרופאגים שטופלו ב-LPS, נצפתה עלייה ברמות החלבון של iNOS וגם של COX -2 (איור 2A-C). נוכחות של שמן אתרי S. aurea במינון של 1.25 µL/mL עשויה להוביל לירידה משמעותית ברמות החלבון של שני החלבונים, במיוחד iNOS. תוצאות אלו מצביעות על כך שהשמן האתרי עשוי לווסת את מסלול ה-NF-κB.

2.4. תכונות ריפוי פצעים של שמן אתרי S. aurea

בהתחשב בשימושים של S. aurea לטיפול בפצעים [18], שיערנו שהשמן האתרי עשוי לשפר את ריפוי הפצעים. ואכן, התוצאות שלנו מראות שה-EO קידם נדידת תאים (איור 3A, B) מבלי להשפיע על כדאיות התא (איור 3C).

2.5. פוטנציאל אנטי-הזדקנות של שמן אתרי S. aurea

בהתחשב בכך שהשימושים המסורתיים המיוחסים ל-S. aurea קשורים לטיפול במחלות הקשורות לגיל [40], הערכנו את ההשפעה על הזדקנות התאים. בהתבסס על הזדקנות התא המושרה על ידי אטופוזיד, צפינו בפעילות גלקטוזידאז הקשורה להזדקנות (איור 4A, B). מעניין שכאשר הוסיפו את השמן האתרי בשלב ההתאוששות, תכונה זו הופחתה, מה שמצביע על כך שהשמן האתרי נראה מונע הזדקנות תאים.

3. דיון

מחקר זה מספק את פרופיל השמן האתרי של S. aurea מבוית באי סרדיניה. דיווחנו שה-EO שלו התאפיין ב-47.4 אחוזים של מונוטרפנים מחומצנים, בעיקר 1,8-cineole, cis/trans-thujone וקמפור, 28.8 אחוזים של מונוטרפנים פחמימניים, בעיקר -פינן, ו-19.8 אחוזים של ססקיטרפנים פחמימנים, עם (E)-caryophyllene, ו-humulene, בעוד רק 2.8 אחוזים של sesquiterpenes מחומצן.

בהשוואה לספרות, נוצר הבדל איכותי וכמותי ברור בהרכב EOs של S. aurea ילידים. בפרט, המרכיבים העיקריים שדווחו היו -pinene, myrcene, o-cymene, spathulenol ו-eudesmol [32]. יתרה מכך, שינויים אלה באים לידי ביטוי באחוזים היחסיים של הקבוצות העיקריות של תרכובות. כאן, מצאנו ירידה משמעותית בססקוויטרפנים מחומצנים (2.8 אחוזים), בעוד שהם היוו 18.9 אחוז ו-41.7 אחוז בשני מחקרים שונים על אזור הכף המערבי[33,41].

עם זאת, הבדל כימי זה לא היה בלתי צפוי שכן, לפי כמה מחברים, עם זאת, הבדל כימי זה לא היה בלתי צפוי שכן, לפי כמה מחברים, הוא תלוי לא רק במאפיינים גנטיים אלא גם במחזור החיים של הצמח, עונת הגידול, עונת הקציר. , תכונות קרקע וגורמי מתח[32, 41]

בפרט, לגבי S. aurea, נמצא מגוון כימי עקבי בהתאם לעונתיות וטריטוריית הקציר [32,41]. Lim Ah Tock et al., 2020, התייחסו לאוכלוסיות של אזור הכף המערבי והראו רמה גבוהה של שונות תוך-ספציפית, המהווה 47.8 אחוזים [32,33,41]. יתר על כן, הם ניתחו את דנדרוגרמת ה-HCA של אוכלוסיות אלו, שבהן הופיעה הפרדת אשכולות ברורה ב-S. aurea, כאחראית לשונות הכימית המשמעותית [41].

בנוסף לגורמים המוזכרים המשפיעים על ההרכב הכימי של EO, ידוע שטיפול לאחר הקציר, תנאי האחסון ושיטות המיצוי תורמים גם הם לשונות הכימית [42,43]. עם זאת בחשבון, ההבדלים שנצפו כאן עשויים להיות מיוחסים לכל אחד מהגורמים הללו.

הפעילויות הביולוגיות המדווחות מאשרות את תכונות השימוש המסורתיות של S. aurea, במיוחד אלו הקשורות לזיהומים דלקתיים ומיקרוביאליים.

אנו מדווחים כי ה-EO עיכב את הצמיחה של דרמטופיטים, ובכך מאשר את השימוש המיוחס לטיפול במחלות עור [18]. שמן אתרי S. aurea ידוע כיעיל נגד Brevibacterium [44], Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Bacillus cereus ו-Escherichia coli [32,33]. מחקרים אחרים דיווחו על פעילות אנטי-מיקרוביאלית עבור תמציות לא נדיפות [14,45,46]. לגבי התרכובות העיקריות שנמצאו ב-S. aurea EO, דווח כי 1,8-cineole הציג פעילות חלשה כנגד הדרמטופיטים שנבדקו [47]. העיכוב של פתוגנים צמחיים דווח גם עבור 1,8-cineole [48-51]. הפוטנציאל האנטי-מיקרוביאלי של -pinene דווח בהרחבה גם נגד מספר שמרים ופטריות חוטיות, כולל Trichophyton spp. [52–56]. Cis-thujone, תרכובת רלוונטית בשמן אתרי זה, הפעילה גם פעילות אנטי-מיקרוביאלית [57,58]. מצד שני, פעילות אנטי-מיקרוביאלית חלשה דווחה עבור הקמפור [59-61]. ה-sesquiterpene-caryophyllene הפעיל פעילות אנטי-מיקרוביאלית נגד פטריות וחיידקים שונים [3,62-64]. תוצאות אלו מצביעות על כך ש-pinene, cis-thujone ו-caryophyllene עשויים להיות תורמים עיקריים לפעילות המדווחת עבור S. aurea.

בשל השימוש המסורתי ב-S. aurea בטיפול במחלות הקשורות לדלקת [18], שאפנו לאמת השפעות אלו. ואכן, התוצאות שלנו מראות שה-EO עיכב את הייצור של NO במקרופאגים מעוררי LPS ובמקביל הפחית את רמות החלבון של iNOS ו-COX-2: שני אנזימים פרו-דלקתיים הרלוונטיים לתגובה הדלקתית. למיטב ידיעתנו, רק מחקר אחד התייחס לפוטנציאל האנטי דלקתי של S. aurea על ידי הצגת היכולת המעכבת של פעילות lipoxygenase-5 [33]. לגבי תרכובות מבודדות, מספר מחקרים דיווחו על פעילות אנטי דלקתית של 1,8-cineole [65-70], כולל ניסויים קליניים [71]. יתר על כן, ידוע שתרכובת זו מעכבת את פעילות COX-2 [66] ומונעת את הטרנסלוקציה הגרעינית של NF-κB [65,72]. -pinene הפחית באופן משמעותי את ייצור NO בשני מקרופאגים מעוררי LPS [73] ו- IL-1 -כונדרוציטים מופעלים [74]. זה גם הראה עיכוב כימוטקסיס בנויטרופילים [75]. הפוטנציאל האנטי דלקתי של קמפור מדווח בהרחבה באמצעות מודלים in vivo ו-in vitro [76-78]. -Caryophyllene הפעיל גם השפעות אנטי דלקתיות בקוליטיס [79], כריתת פצעים בעור [80] ואלח דם [81] במודלים של בעלי חיים. גישות אחרות במבחנה וב-in vivo מדגישות את הפעולה האנטי דלקתית של ססקיטרפן זה [82,83]. התוצאות מצביעות על כך שהפעילות הנצפית ב-S. aurea עשויה לנבוע מנוכחותן של תרכובות אלו, אשר עשויות לפעול באופן סינרגטי.

דיווחנו שהשמן האתרי מ-S. aurea מקדם ריפוי פצעים, מה שאישר את השימושים שלו לטיפול בפצעים פתוחים. למיטב ידיעתנו, אף מחקר לא דיווח על תכונות ריפוי הפצעים של S. aurea. לגבי התרכובות המבודדות, 1,8-cineole מקדם נדידת תאים במודלים של פצעים הן in vivo והן במבחנה [70,84,85]. יתר על כן, דווח כי שמן אתרי מ-Teucrium polium subsp. קפיטליזם, עשיר ב-pinene, הגביר ריפוי פצעים [86]. ה-sesquiterpene-caryophyllene גם קידם ריפוי פצעים במודל של כריתת פצעים בעור [80]. עם זאת, תרכובות אחרות שנמצאו בכמויות נמוכות יותר יכולות לתרום לפעילות המדווחת. אכן, -pinene מקדם ריפוי פצעים במודל החיות של פצע פתוח [84]. בהתחשב בכך ששמנים אתריים הם תערובות מורכבות, ניתן להעלות על הדעת כי תכונות ריפוי הפצעים המדווחות עשויות להיות מיוחסות להשפעות הסינרגיות של מספר תרכובות.

אנו מדווחים, לראשונה, על אפקט אנטי-הזדקנות לשמן אתרי S. aurea. ואכן, תאים שטופלו בשמן האתרי הציגו מספר מופחת של תאים חיוביים לגלקטוזידאז הקשורים להזדקנות. לגבי תרכובות מבודדות, מספר המחקרים שדיווחו על השפעתם היה מועט. ואכן, קמפור מונע את הפעילות המוגברת של גלקטוזידאז הקשור לזקנה [87]. מצד שני, 1,8-cineole, התרכובת העיקרית של שמן אתרי זה, גרמה להזדקנות תאים [88]. בהתחשב במיעוט המחקרים, אנו יכולים רק לשער כי ייתכן שהפעילות המדווחת נובעת בעיקר ממתחם הקמפור; עם זאת, לא ניתן להשליך את ההשפעה של תרכובות מינוריות.

【למידע נוסף: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】