ZBP1-נקרופטוזיס מתווכת: מנגנונים והשלכות טיפוליות

תַקצִיר:מוות תאי הוא תהליך פתופיזיולוגי בסיסי במחלות אנושיות. גילוי הנקרופטוזיס, צורה של נמק מווסת המושרה על ידי הפעלת קולטני מוות ויצירת נמק, מהווה פריצת דרך גדולה בתחום מוות תאי בעשור האחרון. חלבון קושר Z-DNA (ZBP1) הוא חלבון מעורר אינטרפרון (IFN), שדווח בתחילה כחיישן DNA דו-גדילי (dsDNA), הגורם לתגובה דלקתית מולדת. לאחרונה, ZBP1 זוהה כחיישן חשוב של נקרופטוזיס במהלך זיהום בנגיף. הוא מחבר בין חומצת גרעין ויראלית וחלבון קינאז 3 (RIPK3) בעל אינטראקציה עם קולטן באמצעות שני תחומים ומעורר יצירת נמק. מחקרים אחרונים דיווחו גם כי ZBP1 גורם לנקרופטוזיס בזיהומים שאינם ויראליים ומתווך העברת אותות נמק על ידי מנגנון ייחודי. סקירה זו מדגישה את הגילוי של ZBP1 ואת הממצאים החדשים שלו בנקרופטוזיס ומספקת תובנה לגבי תפקידו הקריטי בהצלבה בין סוגים שונים של מוות תאי, אשר עשוי לייצג אפשרות טיפולית חדשה.

מערכת חיסון מגבירה צמח cistanche

מילות מפתח: ZBP1; PANoptosis; פירפטוזיס; אפופטוזיס; נקרופטוזיס

1. הקדמה

מוות תאי הוא תהליך פתופיזיולוגי בסיסי במחלות שונות. על פי סוג תהליך המוות, ניתן לחלק את מוות התא לשתי קבוצות עיקריות: מוות תאי מתוכנת (PCD), תהליך מוות תאי מדויק ומבוקר גנטית, ו-non-PCD, הנקרא גם נמק. בעשורים האחרונים, הוכח כי PCD ממלא תפקידים חשובים בהתפתחות מחלות אנושיות ותגובה חיסונית [1]. אפופטוזיס הוא מסלול המוות המתוכנת הראשון של תאים שזוהה [2,3]. מוות תאים זה מתרחש בעיקר בתהליך ההתפתחות וההזדקנות, בעוד שהוא יכול להתרחש תחת מגוון גירויים פתולוגיים בהגנה החיסונית [4]. כאשר אפופטוזיס מתרחשת, הוא מראה כיווץ תאים, עיבוי של הכרומטין, היווצרות אפופטוזום ופגוציטוזיס [5]. הביצוע של מסלול זה נחשב כקשור למשפחת חלבוני Bcl-2 ולמשפחת Cysteinyl aspartic acid protease (Caspase) [6,7].

נמק, בניגוד לאפופטוזיס, מתייחס למוות פסיבי כאשר תאים נפצעים, המתאפיין בנפיחות ציטופלזמית, קרע בקרום ושחרור תוכן תוך תאי [8]. נקרופטוזיס היא צורה של נמק מווסת הנשלטת על ידי קינאזות של חלבון אינטראקטיבי עם קולטן (RIP) [9]. עם זאת, נמצא שמסלול הגידול הנמק (TNF) הגורם לאפופטוזיס יכול גם לתווך את התרחשות הנמק בתנאים מסוימים [10]. בנוסף, מסלולי PCD אחרים יכולים להתרחש גם יחד עם נקרופטוזיס [11].

cistanche tubulosa- לשפר את המערכת החיסונית

לחץ כאן לצפייה במוצרי Cistanche Enhance Immunity

【בקש עוד】 דוא"ל:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Pyroptosis הוא סוג חדש של PCD שנמצא בשנים האחרונות, שהוא סוג של מוות תאים דלקתי טיפוסי. היא מופיעה בעיקר במחלות זיהומיות [12]. מבחינה מורפולוגית, היווצרות נקבוביות הממברנה, שבירה של קרום הפלזמה ושחרור תכולת התא גורמים לתגובה דלקתית חזקה בפירופטוזה [13]. לדלקות יש תפקיד מרכזי בתהליך הפירופטוזיס, אשר מפעיל את בני משפחת הקספס כדי לקדם את ההפעלה של ציטוקינים פרו-דלקתיים IL וחלבון גז פרמין. בשנים האחרונות נמצא כי קיים דיבור צולב בין מסלולי PCD שונים, וגילוי גורמי מפתח שיכולים לווסת באופן נרחב תהליכים אלו מהווה מוקד מחקר. ZBP1, כלומר חלבון קושר Z-DNA 1, נקרא במקור DLM-1, שהוא שם הגן שהוא זיהה במקור. זהו סוג של חלבון הקשור לגידול המושרה בחוזקה על ידי LFN- או ליפופוליסכרידים (LPS), והמחקר הציע ש-ZBP1 ממלא תפקיד בתגובת המארח בניאופלזיה [14]. מחקרים שלאחר מכן דיווחו שה-N-טרמינל של DLM-1 מכיל את אותו תחום Z-DNA-binding (ZBD) כמו האנזים עורך ה-RNA adenosine deaminase הפועל על RNA1 (ADAR1), מה שמצביע על כך ש-DLM-1 עשוי לפעול כחיישן DNA תוך תאי [15]. הביטוי של ZBP1 מושרה מאוד על ידי IFNs אחרים ומשפר באופן סלקטיבי את הביטוי של IFN מסוג I בתיווך DNA וגנים מולדים אחרים הקשורים למערכת החיסון [16]. בהתאם לכך, הוא סומן כמפעיל תלוי-DNA של גורמים רגולטוריים של IFN (DAI), מה שמצביע על כך ש-ZBP1 ממלא תפקיד משמעותי בהפעלה מתווכת DNA של התגובה החיסונית המולדת. הוא מחבר בין דפוסים מולקולריים הקשורים לפתוגן (PAMPs) ודפוסים מולקולריים הקשורים לנזק (DAMPs) עם העברת אותות פרו-דלקתית תוך תאית [17]. במונחים של נקרופטוזיס, מחקרים מוקדמים התמקדו בזיהום ויראלי, אשר הוכיחו כי ZBP1, כקולטן של RNA ויראלי (vRNA), עורר מסלולי מוות של תאים בעיקר באמצעות נקרופטוזיס ותגובה דלקתית [18]. בנוסף, הפונקציות החשובות של ZBP1 אושרו גם במחלות אנושיות, כולל זיהום SARS-CoV-2 [19], סרטן [20], ודלקת עור [21].

2. ZBP1, החיישן המולד

2.1. מבנה ZBP1

ZBP1 מכיל שני N-טרמינלי ZBDs (Z 1 ו-Z 2), לפחות שני תחומי מוטיב אינטראקציה הומוטיפי RIP (RHIM1 ו-RHIM2), ותחום אות C-terminal אחד (SD) (איור 1) [22]. תחום Z 2 ממלא תפקיד מפתח בחישת Z-DNA ו-Z-RNA. מחקרים רלוונטיים הראו שמוטציות ספציפיות באזור זה חוסמות ביעילות את ההכרה של ZBP1 עם vRNA או Z-NA אנדוגני, ובכך מעכבות מוות ודלקת של תאים לאחר מכן [23]. תחום זה הוא גם היעד של מעכבי ZBP1 רבים, כולל חלבון E3 של וירוס vaccinia (VACV) ו-ADAR1 [24,25]. תחום RHIM מתווך מוות של תאים. ZBP1 משלב עם מקלט אינטראקציה חלבון קינאז 3 (RIPK3) דרך תחום RHIM [26]. ZBP1 מקדם זרחון אוטומטי של RIPK3 ומעורר זרחון של דומיין ליניארי קינאז מעורב (MLKL), מבצע הנקרופטוזיס במורד הזרם, כדי לגרום לנקרופטוזיס. בנוכחות RIPK1, חלבון בעל אותו תחום RHIM, הקישור של ZBP1 ל-RIPK3 מעוכב על ידי תחרות RIPK1 [27]. חלבון M45 של Cytomegalovirus Murine (MCMV), שהוא חלבון מטוהר משותף במערכת ההגנה החיסונית של הנגיף והמארח, נושא גם תחום N-טרמינלי של RHIM. זה מעכב נקרופטוזיס על ידי הדמיית האינטראקציה בין RIPK1 ו-RIPK3 ליצירת מבנה עמילואיד הטרוגני [28]. תחום ה-SD של ZBP1 מגייס את TANK-binder kinase-1 (TBK1) ו-IFN regulatory factor 3 (IRF3) כדי להפעיל סינתזה של IFN מסוג I ותגובות דלקתיות אחרות [29]. עם זאת, ציר ZBP1- IRF3 מתווך גם את התפשטות תאי המיאלומה [30].

כחיישן של Z-NA, ZBP1 מסתמך בעיקר על תחום ה-Z שלו כדי לזהות ליגנדים. בחלק האמצעי של ZBP1, ישנם לפחות שני תחומי RHIM, שיכולים להיקשר עם חלבונים אחרים המכילים RHIM (כגון RIPK1, RIPK3 ו-TRIF) ולתווך העברת אותות במורד הזרם. שני התחומים המיוחדים הללו עשויים להפוך גם למטרות לעיכוב ZBP1. לדוגמה, חלבון M45 של MCMV יכול לעכב מוות תאי מתווך ZBP1- עם תחום ה-RHIM שלו. בעוד ADAR1-P150 הוא מעכב עם ZBP1 על ידי תחום Z המעכב את ההפעלה של ZBP1, יש לו דומיין Z נוסף ייחודי, בהשוואה לתת-הסוג הלא חוקי ADAR1-P110. Z 1, Z 2, Z- ו-Z- הם תחומים מחייבים Z-DNA. SD: תחום איתות; KD: תחום קינאז; מזהה: תחום ביניים; DD: תחום המוות; TIR: Toll/interleukin-1 receptor domain; RNR-LIKE: תחום דמוי ריבונוקלאוטיד רדוקטאז.

איור 1. תרשים מבני של ZBP1 והחלבונים המקיימים אינטראקציה שלו.

2.2. ZBP1 קושר Z-NA ויראלי לתווך תגובה דלקתית ותגובת הגנה מארח

המולקולה הרלוונטית ביותר ל-ZBP1 היא ללא ספק IFN. ביטוי ZBP1 מושרה על ידי IFN וגם גורם לתגובות IFN [31]. קשר זה עם IFN מצביע על כך ש-ZBP1 ממלא תפקיד הכרחי בתגובה הדלקתית והגנת המארח [32]. מכיוון ש-ZBP1 מכיל ZBD, מחקרים חקרו את סוג ה-Z-DNA אליו הוא נקשר ואת התגובה החיסונית המושרה [33]. מחקרים ראשוניים דיווחו כי גם B-DNA וגם Z-DNA שמקורם במספר מקורות (DNA סינתטי או DNA ממקור חיידקי, ויראלי או יונק) גורמים לביטוי חזק של ZBP1 ו-IRF כדי לתווך ביטוי IFN ותגובה אנטי-ויראלית [34]. ההכרה של Z-RNA על ידי ZBP1 של וירוס השפעת (IAV) הובילה לנקרופטוזיס [35]. כאן, ZBP1 פעל כחיישן מולד של IAV המזהה Z-RNA בקומפלקס הריבונוקלאופרוטאין הנגיפי (vRNP) כדי לגרום לנקרופטוזיס להתנגד לזיהום בנגיף. ZBP1 גרם גם לאינטרלוקין-1 (IL-1) ב-IAV באמצעות קולטן דמוי NOD (NLR) משפחת פירין המכיל 3(NLRP3) וגייס נויטרופילים ריאתיים, וכתוצאה מכך דלקת [36]. מחקרים נוספים הוכיחו כי גנים ויראליים פגומים (DVGs) של IAV ו-Orthmyxoviruses אחרים יצרו Z-DNA, אשר נחשו על ידי ZBP1, וגרמו למוות של תאים ותגובות דלקתיות [37]. בנוסף, ZBP1 חש ב-Z-NA אנדוגני בעכברים כדי לגרום למוות של תאים ודלקת עור, במיוחד במקרה של מוטציות RIPK1 ו-Caspase-8 [38]. ZBP1 פועל כקולטן DNA ציטופלזמי בסוגים רבים של זיהומים פתוגניים, כולל זיהום Toxoplasma gond ii [39,40], פטריות [41], ו-Yersinia pseudotuberculosis [42]. עם זאת, נותר לאשר האם ניתן לייצר Z-NA בפתוגנים אלו ובנגיפים אחרים עבור חישת ZBP1.

2.3. ZBP1 חש ב-Z-NA אנדוגני וגורם למוות של תאים

במשך זמן רב, מחקרים התמקדו בתפקיד של ZBP1 בחישת חומצת גרעין ויראלית במוות תאים המושרה על ידי וירוסים, אך עדיין יש לבדוק האם מוות תאי מתווך ZBP1- בזיהומים לא ויראליים יכול לזהות ליגנדים אנדוגניים [ 43]. יונתן ואחרים. דיווח על זיהוי של חומצות גרעין אנדוגניות בתאים לא זיהומיים עם ביטוי גבוה של ZBP1 [44]. יתר על כן, אנליזה של ריבונוקלאוזיד מוגבר וריבונוקלאוזיד (PAR-CLIP) הוכיח כי ZBP1 נקשר ל-RNA ולא ל-DNA, וחומצות גרעין אלו עשויות להיות בקונפורמציה Z. במחקר זה, ZBP1 הושפע מ-Caspase-8 כדי לגרום למוות של תאים, שעשוי להיות מתווך באמצעות RIPK3, שהיה כמובן שונה מזיהום ויראלי.

התקדמות חדשה נעשתה בשנת 2020 [38]. הצוות מצא שזיהוי ZBP1 של Z-NA אנדוגני עורר דלקת ומוות תאי בעכברים חסרי RIPK1-, מה שהוביל לדלקת עור. בנוסף, ZBP1 יכול גם לחוש ליגנדים אנדוגניים כדי לגרום למוות של תאים וכתוצאה מכך לקוליטיס בעכברים על ידי עיכוב העברת אותות FADD-Caspae-8 [45]. ZBP1 נקשר ל-dsRNA אנדוגני דרך תחום ה-Z, שמתווך ככל הנראה על ידי רטרו-אלמנטים אנדוגניים (ERE). ב-EREs, ל-B2 ו-Alu SINEs יש את הפוטנציאל הגדול ביותר ליצור dsRNA [46]. הם באו לידי ביטוי ספציפי באפידרמיס ויצרו dsRNA כדי לגרום למוות של תאים ודלקת עור בעכברים חסרי RIPK1- [21]. ADAR1 נושא תחום Z, שיכול לערוך dsRNA המיוצר על ידי ERE, מה שמרמז כי ADAR1 עשוי למלא תפקיד חשוב בתיווך ההכרה של חומצת גרעין אנדוגנית על ידי ZBP1. בשנים האחרונות, כמה מחקרים דיווחו על ההשפעה הרגולטורית של ADAR1 על מוות תאי ודלקת מתווך של ZBP1- וזיהו את ADAR1 כמווסת שלילי של ZBP1 [47]. ניתן לסווג את ADAR1 לשני תת-סוגים, P110 ו-P150. P150 יכול להיות מושרה על ידי IFN והוא ממלא תפקיד מרכזי בוויסות ZBP1 (איור 2) [48]. בהשוואה ל-P110, P150 מכיל תחומי Z נוספים ואותות פלט גרעיניים (NESs), שקובעים את יכולתו לעבור לציטופלזמה ולקיים אינטראקציה עם ZBP1. הרגולציה השלילית של ADAR1 על ZBP1 מתרחשת באמצעות עיכוב של מוות תאי תלוי Z-RNA ו-ZBP 1- על ידי מניעת הצטברות של תעתיקי mRNA, היוצרים Z-RNA [49]. עם זאת, הוא קשור ישירות לאינטראקציות של תחום ZBP1 Z, אשר מעכבות את ההכרה של Z-NA אנדוגני. בעכברים חסרי ADAR1-, ZBP1 מתווך מוות תאי3-תלוי ב-RIPK ותגובת IFN פתוגנית מסוג I תלוי MAVS [50]. יתרה מכך, אפופטוזיס תלוית Caspase-8- תורמת גם למחלה תחת מחסור ב-ADAR1, המושרה על ידי השילוב המכונן של ZBP1 ו-RIPK1 [51]. Caspase-8 גם מעכב את המסלול הדלקתי של ZBP1-מתווכת גורם גרעיני-kappaB (NF-κB). מחקרים נוספים העלו ש-Alu dsRNA אנדוגני עשוי להיות הליגנד המוכר על ידי ZBP1 במקרה של מחסור ב-ADAR1 [52]. אף על פי כן, מחקר קשור זיהה ואישר גם מולקולה קטנה, CBL0137, אשר קידמה את השימוש בקונפורמציה של Z-DNA על ידי רצף הגנום [51]. לכן, CBL0137 מייצר כמות גדולה של Z-DNA אנדוגני וגורם למוות תאי תלוי ZBP בפיברובלסטים סטרומליים של הגידול במהלך עיכוב ADAR1.

יתרונות cistanche לגברים מחזקים את המערכת החיסונית

גם ADAR1 וגם ZBP1 מושרים על ידי IFN, אבל ADAR1-P150, אחד מתתי הסוגים שלו, יכול לעכב את תפקוד ZBP1. ADAR1-P150 מחליש את הסינתזה של Z-RNA אנדוגני בגרעין ומעכב את הזיהוי של Z-NA של ZBP1 על ידי שילוב איתו בציטופלזמה. תרופת מולקולה קטנה CBL0137 מקדמת סינתזה של Z-DNA אנדוגני בגרעין וממלאת תפקיד חשוב בהשראת מסלול האות 1-מתווך ZBP. כאשר ADAR1 פגום, ZBP1 גורם בעיקר לשתי צורות של מוות תאי: נקרופטוזיס ואפופטוזיס, אשר תלויות בהכרה של תחום ה-Z 2. נקרופטוזיס נגרמת בעיקר על ידי הפעלה מתווכת ZBP1- של ציר האות RIPK3-MLKL, בעוד שאפופטוזיס נגרמת על ידי השילוב המכונן של ZBP1 ו-RIPK1 כדי לגרום להפעלה של Caspase-8. Caspase-8 יכול גם לעכב את ההשפעות של ZBP1 ו-RIPK3 לעיכוב נקרופטוזיס. בנוסף, ZBP1 גם מקדם תגובות IFN מסוג I על ידי השראת מסלול המיטוכונדריה האנטי-ויראלי (MAVS).

איור 2. ADAR1-P150 מעכב ZBP1-מוות ודלקת מתוכנתים של תאים

3. ZBP1 מתווך נקרופטוזיס

במחקרים קודמים, נמק נחשב לצורה פסיבית ובלתי מווסתת של מוות תאי [3,53,54]. עם זאת, בשנים האחרונות דווח על צורה מיוחדת של מוות תאי מתוכנת, כלומר necroptosis [55-58]. הוא מאופיין במוות נמק ומווסת גם על ידי מולקולות קשורות, כולל RIPK1/3 [59-62]. סוג זה של מוות תאי מתוכנת יכול להיגרם על ידי מספר גורמים, כולל TNF, IFN, LPS, dsRNA, נזק ל-DNA ולחץ רשתית אנדופלזמית [63,64]. נקרופטוזיס נגרמת על ידי שילוב של ליגנדים שונים עם קולטני תחום המוות של משפחת TNF, קולטני זיהוי דפוסים וחיישני וירוסים דרך מסלול עצמאי ומאוחד במורד הזרם [65-67]. נקרופטוזיס המושרה על ידי TNF הוא המסלול הנחקר והקלאסי ביותר, המתווך על ידי RIPK1, RIPK3 ו-MLKL [68-70]. TNF נקשר לקולטן המקביל (TNFR1), ותחום המוות שלו TRADD נקשר ומפעיל את RIPK1. בהיעדר Caspase-8, FADD מגויס נוסף ליצירת קומפלקס, שפועל על RIPK3 כדי להפעיל זרחון ואוליגומריזציה [71-74]. לבסוף, הנמק המורכב מ-RIPK3 מפעיל את החלבון MLKL. MLKL מופעל על ידי זרחון באתרים שונים במינים שונים [75-77]. MLKL אנושי מזורחן ב-Thr357, Ser358, Ser345 ו-Ser347, בעוד ש-MLKL של עכברים מזורחן ב-Thr349 ו-Ser352 [78]. כמבצע, MLKL משנה את הקונפורמציה שלו לאחר הפעלה באמצעות זרחון RIPK3. הוא משחרר ארבעה תחומי צרור סליל, ולאחר מכן טרנסלוקציה מהמטריצה ​​הציטופלזמית לממברנת התא, מה שמוביל לפירוק מבני של קרום הפלזמה [64,79,80]. הרכיבים התאיים שדלפו עשויים להיקשר לתאים המקוריים ולתאים שמסביבם כליגנדים כדי לעורר עוד יותר נמק. ZBP1 הוא הרגולטור הראשי של אחד ממסלולי האינדוקציה של נקרופטוזיס, אשר נגרמת בעיקר על ידי זיהום בנגיף [81]. זה קשור לזירוז וביצוע של נקרופטוזיס. ההבדל הגדול ביותר בין המסלול הזה למסלול הקלאסי טמון בתפקיד שמילא RIPK1, שלעתים קרובות קיים כמווסת שלילי של נקרופטוזיס במסלול המתווך ZBP1- [21,27,82]. RIPK3 ו-MLKL מתווכים את העברת האותות בשלבים האחרונים של נמק על ידי שילוב אותות שונים כדי לקבוע את מידת הנמק.

3.1. ZBP1 מקיים אינטראקציה עם מולקולות מפתח בהעברת אותות נקרופטוזיס באמצעות תחום RHIM

העברת האותות של נקרופטוזיס כוללת ארבעה חלבונים הנושאים תחומי RHIM, כלומר ZBP1, RIPK1, RIPK3 ו-TRIF [83]. תפקידו של מתאם הגורם לאינטרפרון (TRIF) המכיל תחום TIR דומה לזה של ZBP1 בנקרופטוזיס. כמתאם של מקלט דמוי Toll 3/4 (TLR3/4), הוא יוצר אינטראקציה עם RIPK3 כדי לתווך נקרופטוזיס [84]. ZBP1 קשור למסלול ייזום אחר, אשר גורם לנקרופטוזיס על ידי שילוב של תחום RHIM עם RIPK3. RIPK1 מווסת גם תהליך זה באמצעות תחום RHIM.

3.1.1. ZBP1 משתלב עם RIPK3 במהלך היווצרות הנקרוזום

הנמק הוצע לראשונה במסלול הנקרופטוזיס הטיפוסי המושרה על ידי TNF [85]. זהו קומפלקס עמילואיד ציטופלזמי, המורכב בעיקר מ-RIPK1, RIPK3 ו-MLKL משופעל, המעוררים נקרופטוזיס [86]. תפקיד הליבה של הנמק הוא לקדם את הגיוס והזרחון של RIPK3 ו-MLKL. במסלול TNF, RIPK1 מקדם את האוטופוספורילציה והפעלה של RIPK3. בעוד ב-ZBP1-נקרופטוזיס מתווך, ZBP1 גורם לאוטו-פוספורילציה של RIPK3 (איור 3). האינטראקציה בין ZBP1 ל-RIPK3 מספיקה גם כדי ליצור סוג אחר של נמק ולהפעיל MLKL. RIPK1 ממלא את התפקיד ההפוך במסלול זה ומעכב necroptosis. במהלך התפתחות העכבר, המחיקה של RIPK1 גורמת לנקרופטוזיס 1-מתווכת ב-ZBP ואפופטוזיס, וכתוצאה מכך למוות סביב הלידה [27,82,87]. אובדן הקרטינוציט RIPK1 גורם לדלקת עור ולנקרופטוזיס [21]. ל-RIPK1 אין פעילות קינאז ללא אינדוקציה של TNF וגורמים אחרים. עם זאת, הוא יכול להיקשר ל- RIPK3 דרך תחום RHIM, והוא לא יכול לקדם זרחון RIPK3. במקרה זה, חלבונים אחרים המפעילים נקרופטוזיס, כגון TRIF ו-ZBP1, אינם יכולים להיקשר ל-RIPK3, מה שמרמז על כך ש-RIPK1 מעכב נקרופטוזיס מתווך ZBP1-.

cistanche tubulosa- לשפר את המערכת החיסונית

כאשר מצטברים וירוסים או Z-NA אנדוגני, ZBP1 ממלא תפקיד קריטי בהשראת נקרופטוזיס. לאחר שתחום ה-Z 2 שלו חש ב-Z-NA, ZBP1 יכול לזרחן ולהפעיל את RIPK3 על ידי קישור ישיר אליו, שתלוי בתחומי ה-RHIM שלהם. ה-RIPK3 המופעל אוליגומריזציה ספונטנית ליצירת מיקרוזומים וגורם להפעלה ואוליגומריזציה של MLKL לביצוע נקרופטוזיס. לכן, התפקוד התלוי בתחום זה מעוכב על ידי חלבונים אחרים עם תחום RHIM, כולל חלבון RIPK1 ו-M45 ב-MCMV. בנוסף, LPS המיוצר בזיהומים פתוגניים אחרים יכול לזהות גם קולטני TLR4 על ממברנת התא כדי לגרום להפעלה של RIPK3 ליצירת מיקרוזומים, והקשר בין קולטן זה ל-RIPK3 מתממש גם על ידי החלבון עם תחום RHIM, TRIF. מסלול קלאסי נוסף של נקרופטוזיס מתווך על ידי TNF, שיכול לזהות אותות פתוגניים בשפע יותר. עודף TNF נקשר ל-TNFR, שיכול להשתלב עם FADD ו-RIPK1 ליצירת קומפלקס שמפעיל את RIPK3 כדי לקדם את היווצרות נקרוזומים.

איור 3. ZBP1 גורם להיווצרות מיקרוזומים בנקרופטוזיס

3.1.2. שילוב של ZBP1 ו-RIPK1

גם RIPK1 וגם ZBP1 מכילים תחומי RHIM, מה שמצביע על אינטראקציה ישירה [88]. ZBP1, כחלבון RHIM, לא רק משתתף בנקרופטוזיס אלא גם מווסת את האפופטוזיס באמצעות Caspase-8 כמוציא לפועל הראשי על ידי שליטה ביצירת קומפלקס בשם TRIFosome [42]. TRIFosome מורכב מ-ZBP1, RIPK1, FADD ו-Caspase-8. במקרה של אינדוקציה של LPS, TLR4 מגייס RIPK1 דרך TRIF הקשור ל-ZBP1, וכתוצאה מכך הרכבה של TRIFosome, ולאחר מכן הפעלה של Caspase-8, וכתוצאה מכך לאפופטוזיס [34]. בנוסף, היווצרות קומפלקס זה חיונית גם להפעלת הדלקת. במחקר אחר, האינטראקציה בין ZBP1 ל-RIPK1 הפעילה גם את מסלול NF-κB [26], מה שהוביל להפעלה של IFN מסוג I וציטוקינים אחרים.

איור 4. ZBP1 מעורר PANoptosis בעקבות זיהום IAV

PANoptosis מייצגת שילוב של פירופטוזיס, אפופטוזיס ונקרופטוזיס, שמתווך על ידי ZBP1 בעקבות זיהום IAV וזיהומים ודלקות ויראליות אחרות. לאחר חישה של כמות גדולה של IAV Z-RNA, ZBP1 יכול לשלב עם RIPK1, RIPK3, Caspase-8, FADD, NLRP3, ASC ו-Caspase-1 ליצירת קומפלקס ענק הנקרא PANoptosome. בין המולקולות הללו, RIPK1, RIPK3, FADD ו-caspase-8 קשורות לאפופטוזיס. ההפעלה של המולקולות גורמת בסופו של דבר להפעלה של קספס-8, שפועלת על המבצע Caspase-3/6/7 ומובילה לאפופטוזיס. בעוד ש-RIPK3 קשור בעיקר לנקרופטוזיס, RIPK1 ו-FADD נחשבים גם למלא תפקיד חיובי בהתרחשות של נמק. ההפעלה של RIPK3 מפעילה ואוליגומריזה ישירות את MLKL, המוציא לפועל של necroptosis, ליצירת תעלת יונים שהורסת את קרום הפלזמה. NLRP3, ASC ו-Caspase-1 הן מולקולות מפתח בהתרחשות של pyroptosis. הם יכולים ליצור דלקות NLRP3 כדי לקדם את יצירת המבצעים הסופיים של פירופטוזה. NLRP3 אחראי על חישת הגירוי המתאים. ל-ASC יש תחום PYD ודומיין CEAD שניתן לגייס על ידי NLRP3 ולאחר מכן לגייס את Caspase-1. Caspase-1 מבקע ומפעיל את המבצע הסופי, GSDMD. Pyroptosis נגרמת בעיקר על ידי התחום ה-N-terminal של GSDMD, שיכול לעבור לממברנת התא ולקדם יצירת נקבוביות, מה שמוביל לשחרור של ציטוקינים פרו-דלקתיים IL-1 ו-IL-18.

4. תפקידו של ZBP1 במחלות אנושיות

במחלות אנושיות הנגרמות על ידי וירוסים, כגון שפעת ואבעבועות שחורות, מסלולי האות 1-מתווכים של ZBP שולטים במוות מתוכנת של תאים נגועים ותגובות דלקתיות קשורות [37,102]. בנוסף, ל-ZBP1 תפקיד חשוב גם בוויסות נקרופטוזיס במחלות אנושיות אחרות, כגון סרטן ומחלות דלקתיות מערכתיות (טבלה 1).

טבלה 1. ZBP1 מתווך מוות תאים ודלקת במחלות שונות.

4.1. ZBP1 כחיישן של נקרופטוזיס המושרה על ידי IAV

IAV הוא נגיף RNA אנטי-סנס השייך למשפחת ה-Orthomyxoviridae, הגורם לנזק לריאות ולמחלות קשורות ביונקים נגועים [108]. בשנים האחרונות, מחקרים שכללו מחלות אנושיות על ידי ZBP1 התמקדו באובדן ריאות שנגרם על ידי זיהום IAV. בינתיים, מחקרים שכללו תאי עכבר שנדבקו ב-IAV חשפו גם מנגנונים שונים במעלה הזרם והמורד הזרם של נקרופטוזיס מתווך ZBP1- [33]. האפשרות של ZBP1 כחיישן DNA ציטופלזמי הוצעה כבר זמן רב. עד 2016, מחקרים רלוונטיים קבעו ש-ZBP1 היה חיישן מולד של IAV, ו-ZBP1 חש ב-RNA גנומי של IAV כדי להפעיל את RIPK3 [26]. במהלך זיהום IAV, התפקיד של חישת ZBP1 היה מתווך על ידי השילוב של תת-יחידת הפולימראז PB1 ונוקלאופרוטאין NP. במחקר קשור בשנת 2017 [35], הוצע כי ZBP1 זיהה קומפלקס vRNP, המורכב מגנום IAV RNA, מספר NPs ו-PBs. הפעלת ה-ZBP1 עשויה לדרוש גם המרת אותות RIG-I ו-ubiquitination. אף על פי כן, תחום Z 2 של ZBP1 ממלא תפקיד מפתח בהעברת אותות על ידי קישור ישיר עם Z-NA. במחקר של IAV, מספר מולקולות מווסתות מוות תאים המושרה על ידי ZBP1- בדרכים שונות, כולל IRF1 [109], Caspase-6 [110] ו-TRIM34 [111]. IFN regulatory factor (IRF) 1 היא מולקולה המגבירה את שעתוק ZBP1. עם זאת, בתאי עכברים הנגועים ב-IAV, IRF1 לבדו אינו יכול לשנות את מוות התא ואת התגובה הדלקתית הנגרמים על ידי ZBP1, אולי בגלל שהוא רק אחד מהגורמים המשפיעים על ביטוי ZBP1, וניתן להחליף את תפקידו במולקולות דומות אחרות. Caspase-6 נחשבה ל-Executor Caspase, הממלאת תפקיד בביצוע אפופטוזיס [112]. עם זאת, המחקר מצא כי Caspase-6 יכול לקדם שלושה סוגים עיקריים של מוות תאי מתוכנת בזיהום IAV על ידי קישור ל-RIPK3 וחיזוק היווצרות קומפלקס PANoptosis. TRIM34 הוא חבר במשפחת המוטיב המשולש (TRIM) [113]. רבים מבני משפחת TRIM מציגים פעילות E3 ubiquitin ligase [114]. זה קשור לפוליאוביקוויטינציה של K63 בשארית K17 של ZBP1, מה שמקדם את השילוב של ZBP1 ו- RIPK3. מנקודת מבט אחרת, המחקר של ZBP1 בזיהום IAV חשף את סוג ה-RNA המוכר על ידי ZBP1. המחקרים לעיל גם הצביעו על כך שקטעי גנים קצרים של IAV עשויים לשמש כליגנדים לזיהוי ZBP1. בהתאם לכך, מחקר בשנת 2020 דיווח כי IAV יצר Z-RNA באמצעות ה-DVG שלו עבור ZBP1 [37]. לאחר זיהום IAV, ה-RNA הגנומי נכנס לגרעין המארח כדי לקדם שכפול עצמי, בנוסף להפעלה של נקרופטוזיס בגרעין, השונה מהמסלול הקלאסי המופעל על ידי TNF המתרחש בציטופלזמה. חלקיקי "ההפרעה הפגומה" (DI) הנוצרים מאריזת DVG הנושאת ריכוזים גבוהים יותר של DVG RNA יכולים לעורר זרחון מהיר של MLKL. השימוש בסרום אנטי-Z-NA יכול כמובן להכתים את הגרעין במהלך הזיהום הקודם. בתהליך זה, ZBP1 מגויס מהציטופלזמה לגרעין. MLKL, המוציא לפועל של הנקרופטוזיס, ממוקם גם הוא בגרעין ומתווך את הקרע של הממברנה הגרעינית ללא תלות באפופטוזיס. השחרור הבא של DAMPs גרעיני מקדם גיוס והפעלה של נויטרופילים, מה שמחמיר את תסמיני הזיהום ב-IAV. המנגנון הספציפי של נקרופטוזיס הגורם ל-IAV אומת גם במשפחות אחרות של Orthomyxoviridae, והדגים את תפקוד הליבה של ZBP1 בחישת נקרופטוזיס בתיווך Z-NA [38].

4.2. ZBP1-מוות תאי דלקתי תלוי בזיהום בנגיף הקורונה

נגיף הקורונה זכה לתשומת לב רחבה בעקבות ההתפרצות בשנת 2019 [115,116]. וירוס הקורונה הוא וירוס RNA חיובי חד-גדילי, שניתן לסווג אותו לשבעה סוגים: 2019 nCoV, HCoV-229E, HCoV-OC43, HCoV-NL63, HCoV HKU1, SARS CoV ו-MERS CoV [117]. ביניהם, זיהום SARS CoV-2 גורם לדלקת בדרכי הנשימה במארח, אך גם לנזק עצבי, וכתוצאה מכך למגוון סיבוכים של מערכת העצבים [118,119]. עם זאת, כבר בשנת 2017, נמצא שנגיף הקורונה האנושי גורם לנמק של תאי עצב אנושיים [120]. זן HCoV-OC43 מדביק עכברים וגורם למוות של תאי עצב במספרים גדולים בהתאם ל- RIPK1/3 ו- MLKL באמצעות necroptosis. השראת מוות תאי, שנמצאת גם בנגיף הפטיטיס של עכברים (MHV), שהוא הומולוגי לקורונה בעכברים, אפילו מניע את התגובה הדלקתית ומוות התא עם PANoptosis כהליבה [98]. זה גם מדגים שהמושג PANoptosis ישים באופן נרחב לחקר זיהום בנגיף. עכברים טרנסגניים (K18-hACE2) המבטאים אנזים אנושי ממיר אנגיוטנסין 2 תחת מקדם הציטוקרטין 18 נמצאים בשימוש נרחב כדי לחקור את הפתוגנזה של זיהום SARS CoV-2 [121]. קו תרבית תאים עצביים של K18-hACE2 והמוח לאחר זיהום SARS CoV-2 הראו הגברת ויסות של גנים הקשורים לדלקת. בנוסף, רמות החלבון וה-mRNA של ZBP1 ו-pMLKL עלו גם הן 1 עד 3 ימים לאחר ההדבקה, מה שהוכיח ישירות ש-ZBP1 המושרה על ידי SARS CoV-2 מתווך את התרחשות הנקרופטוזיס [122]. לטיפול ב-IFN עבור SARS CoV-2 יש ערך מוגבל ואף השפעות שליליות [19]. הסיבה העיקרית היא שהטיפול ב-IFN אקסוגני הגביר את ה-PANoptosis1-מתווך ב-ZBP וסערת הציטוקינים במהלך זיהום בנגיף הקורונה, מה שהוביל לפציעה בריאותית ואף למוות אינדיבידואלי. מחקר זה מצא גם שהביטוי הגבוה של ZBP1 ו-IFN התרחש לעתים קרובות בחולים קשים עם COVID-19, מה שמצביע על כך שלמולקולות אלו יש תפקיד שלילי בטיפול במחלה. זה גם מספק אסטרטגיה לטיפול משולב על ידי חסימת ZBP1 במהלך טיפול IFN. מולקולות ספציפיות מווסתות את חישת ה-ZBP1 של נקרופטוזיס בתיווך Z-NA בנגיף הקורונה, אשר עשוי להיות מיוחס לאבולוציה משותפת של הנגיף ומערכת ההגנה החיסונית המארח. חלבון לא מבני 13 (Nsp13) הקיים ב-SARS CoV מציג פונקציה זו. Nsp13 הוא helicase ונושא תחום RHIM פוטנציאלי [123]. זה עשוי לעכב מוות תאי1-מתווך על ידי ZBP על ידי מניעת היווצרות Z-RNA ועיכוב האינטראקציה בין ZBP1 ל-RIPK3. בסך הכל, מוות תאי תלוי ב-ZBP ותגובה דלקתית הם בעלי משמעות חיובית או שלילית במחלות הנגרמות על ידי זיהום בקורונה. המחקר של PANoptosis{59}}מתווכת ב-ZBP עשוי לספק תמיכה תיאורטית חשובה להפוגה ולטיפול ב-SARS.

cistanche tubulosa- לשפר את המערכת החיסונית

4.3. Vaccinia Virus Inhibits ZBP1-Mediated Necroptosis

VACV הוא וירוס אבעבועות, שהוא וירוס DNA דו-גדילי [124]. זה קשור קשר הדוק לאבעבועות שחורות ואבעבועות רוח בחסינות ויכול לשמש כחיסון נגד אבעבועות שחורות. VACV מפגין בריחה חיסונית, המתווכת באמצעות כמעט שליש מהגנים שלו. אחד מגני הבריחה העיקריים, E3L, מקודד לחלבון E3. ל-E3 יש תחום קושר של RNA דו-גדילי (dsRNA)--בטרמינל C ותחום קושר חומצת גרעין Z במסוף N [125]. הוכח שהתחום C-terminal מעכב הפעלה המושרה על ידי IFN של אנזימים אנטי-ויראליים תלויי dsRNA. תחום ה-N-טרמינלי Z קשור ל-ZBP1-נקרופטוזיס מתווך [24]. במחקר זה, נעשה שימוש ב-VACV מסוג WT ו-VACV-E3L ∆ 83N עם תחום Z שנמחק של E3 כדי להדביק תאי L929 של עכבר שטופלו ב-IFN כדי לחקור את התפקיד והמנגנון של ה-E3 N-טרמינל, מה שהוכיח את תפקידו בעיכוב של פעילות IFN. תאים שנדבקו בנגיף החסר ב-E3- הראו נקרופטוזיס תלוי RIPK3-, בעוד שתחום ה-E3 N-terminal Z התחרה עם ZBP1 כדי למנוע הפעלה תלוית ZBP1- של RIPK3 בתאים נגועים ב-VACV . יתרה מכך, VACV עיכב רק נקרופטוזיס מתווך ZBP1- אך לא נקרופטוזיס מתווך RIPK1- במסלול המושרה על ידי TNF. בנוגע לעיכוב של necroptosis, אסטרטגיות אחרות התגלו גם בנגיף אבעבועות [126]. חלבון הנגיף MLKL שמקורו ב-BeAn 58,058 ו-Cotia poxvirus חסם את ההפעלה של MLKL ונקרופטוזיס בתאים על ידי בידוד RIPK3. למחקר של VACV, או נגיף האבעבועות כולו, יש משמעות רבה בבדיקת מעכבי נקרופטוזיס.

4.4. מתח חום מפעיל את ZBP1 באמצעות מנגנון עצמאי של Z-NA במכת חום

מכת חום היא מחלה הקשורה לטמפרטורת גוף גבוהה ולהפרעות מטבוליות הנגרמות בעיקר מלחץ חום [127]. במקרים חמורים עלולות להתרחש תגובות דלקתיות מערכתיות ואי ספיקת איברים מרובה, וכתוצאה מכך למוות. כאן, אנו דנים במיוחד בתפקיד של ZBP1 במחלה זו מכיוון שהמחקר הקשור האחרון בשנת 2022 [104] דיווח על מנגנון ייחודי של נקרופטוזיס. המחקר הראה לראשונה שלחץ חום גורם למוות של תאים כמו גם לתגובות דלקתיות אחרות באמצעות הפעלה תלוית RIPK3- של MLKL ו-Caspase-8 בעכברים ובתאים L929, וכתוצאה מכך ביטויים פתולוגיים של מכת חום. בתאים פגומים ב-ZBP1- אך לא חסרים בחלבונים אחרים המקיימים אינטראקציה עם RIPK3, סימנים הקשורים לכל מיני סוגים של מוות תאי הנגרם כתוצאה מלחץ חום נעלמו, כגון הזרחון של RIPK3 ו-MLKL, שהיה שונה מלחץ חום בתאים רגילים . לפיכך, ZBP1 היא מולקולת מפתח הקשורה למוות תאי3-מתווך ב-RIPK בלחץ חום. בשורות תא HT-29 אנושיות המבטאות RIPK3 ו-RIPK1 אך לא ZBP1, לחץ חום לא גרם למוות של תאים. עם זאת, היישום של ZBP1 אנושי אקסוגני הגביר את רגישותו למוות תאי הנגרם כתוצאה מלחץ חום, מה שמוכיח עוד יותר כי ZBP1 ממלא תפקיד מפתח במוות תאי הנגרם מלחץ חום. גורם שעתוק הלם חום 1 (HSF1), כמולקולה מווסתת בלחץ חום, נמצא כגורם מפתח בקידום הביטוי של ZBP1 בלחץ חום [128]. יש לציין שהעלייה בביטוי ZBP1 לבדה אינה מספיקה למוות של תאים. בלחץ חום, הפעלת ZBP1 התרחשה באמצעות מנגנון בלתי תלוי ב-Z-NA, שעשוי להיות קשור לתלות שלו בתחום ה-RHIM לצבירה. מחקר זה ללא ספק מספק תובנה לגבי תפקידו של ZBP1. ההפעלה של ZBP1 והשראת מוות של תאים אינם דורשים בהכרח זיהוי של פתוגנים או Z-NA אנדוגני. אין ספק, מנגנון ייחודי זה דורש מחקר נוסף. בין זיהומים פתוגניים שונים, חום גבוה הוא גם סימפטום שכיח, שבו לחץ חום עלול לחסל פתוגנים על ידי הפעלת ZBP1 כדי לקדם מוות של תאים. עם זאת, לחץ חום מוגזם משפיע לרעה גם על האורגניזם.

4.5. מחלות אחרות 

ZBP1, כמולקולה רגולטורית מרכזית של מוות ודלקת של תאים, ממלאת תפקיד במחלות אנושיות רבות בנוסף לאלו שהוזכרו לעיל. זיהום ציטומגלווירוס אנושי (HCMV) גורם למחלות קרביים. ZBP1-גרם לתעתוק IRF3 וביטוי IFN. ביטוי היתר של ZBP1 מעכב את שכפול HCMV [105]. בדלקת כרונית בדרכי הנשימה הנגרמת מעישון, ZBP1 גורם לדלקת על ידי קשירה ל-DNA מיטוכונדריאלי פגום (mtDNA) המשתחרר לציטופלזמה תחת עקה חמצונית [29]. מחלה אנושית חשובה נוספת הקשורה ל-ZBP1 היא סרטן. ZBP1 ממלא תפקיד מפתח בשלבים שונים של גידולים ועשוי להוות מטרה טיפולית [129]. במהלך התפתחות של גידולים מוצקים, עלול להתרחש נקרופטוזיס באזור הליבה, הנקרא נקרופטוזיס גידול, שעלול לגרום לגרורות של הגידול [130]. מחקרים המבוססים על מודלים של MVT-1 של סרטן השד הוכיחו ש-ZBP1, ולא RIPK1, מתווך נקרופטוזיס של גידול [20]. הביטוי החזק של ZBP1 ו- RIPK3 בנקרופטוזיס אומת גם בסוגים אחרים של גידולים מוצקים. בנוסף, נקרופטוזיס של הגידול נגרמת ככל הנראה על ידי מחסור בגלוקוז (GD) ועשוי להיות מתווך באמצעות mtDNA, המשתחרר על ידי מתח תחת ויסות GD ומוכר על ידי תחום Z של ZBP. היעילות האנטי-גידולית של הקרנות עשויה להיות קשורה לקשר בין נקרופטוזיס (1-מתווכת ZBP) לבין הממריץ של מסלול הגנים האינטרפרון (STING) בגידולים [106]. ההשפעות המעכבות של הקרנות על צמיחת הגידול בקו תאי אדנוקרצינומה של המעי הגס של עכבר MC38 וקו תאי המלנומה של עכבר B16-SEY קשורות ישירות לביטוי של MLKL בתאי גידול, באמצעות אות נקרופטוזיס מתווך ZBP1- התמרה. יתרה מכך, במהלך טיפולי הקרנות, נקרופטוזיס ZBP1-MLKL מקדם הפעלת STING ותגובת IFN מסוג I בתאי גידול הצוברים mtDNA ציטופלזמי. ZBP1-נקרופטוזיס מתווך יכול להיות משופר באמצעות אבלציה של גן Caspase-8 בתאי גידול כדי לשפר את ההשפעות של הקרנות. Fisetin הוא פלבנואיד טבעי המשמש באופן שגרתי לעיכוב התפתחות סרטן. זה קידם את המוות של שורות תאי סרטן שחלות אנושיות באמצעות נקרופטוזיס 1-מתווכת ZBP ומנגנונים אחרים [107]. עם זאת, המנגנון של מוות תאים המושרה על ידי פיסטין ויישומו דורשים חקירה נוספת. מוות תאי 1-מתווך ב-ZBP ומסלולי אותות תוך-תאיים אחרים מתרחשים גם במחלות ניווניות, מגוון דלקות, זיהומים פטרייתיים, חיידקים ו-T. gond ii ופתולוגיות אחרות. כל מיני מחלות קשורות לנקרופטוזיס, מה שמצביע על הצורך בזיהוי המנגנון שלו בפתולוגיות שונות.

5. רגולציה וסיכויים של ZBP1

במהלך ויסות ZBP1, מחקרים אחרונים זיהו מספר מולקולות חשובות שיכולות להשפיע על תפקוד ZBP1 בהיבטים שונים. ברמת השעתוק, IRF1 ו-HSF1 מווסתים את ZBP1 ובכך מקדמים את הביטוי של ZBP1. TRF3-Thr-AGT מקטין את ZBP1. IRF1 הוא חבר במשפחת IRF של גורמי שעתוק וזוהה לראשונה כמפעיל השעתוק של הגן המגורה IFN ו-IFN (ISG) [131]. בתאים חסרי IRF1 שנדבקו ב-IAV, רמת הביטוי של ZBP1 הייתה מווסתת, מה שאושר גם במגוון תאים ובתנאי גירוי שונים [109]. ההשפעה הרגולטורית של HSF1 על ZBP1 זהה לזו שתוארה קודם לכן [104]. היה אתר קישור ל-HSF1 באזור המקדם של ZBP1, והמחיקה של אתר זה או של HSF1 עיכבה את העלייה בביטוי ZBP1 שנגרמה על ידי לחץ חום. RNA העברה אנדוגני (tRNA) הוא סוג של RNA לא מקודד, וה-RNA הקטן (tsRNA) הנגזר שלו קשור למחלות רבות [132,133]. הוכח כי ה-TRF3-Thr-AGT שנבדק מהם קשור קשר הדוק להתפתחות דלקת לבלב חריפה (AP). ביואינפורמטיקה צופה ש-TRF3-Thr-AGT יכול להיקשר ל-30 האזורים הלא מתורגמים (30 UTR) של ZBP1. הניסוי גם הוכיח שניתן לבטל את העיכוב של ביטוי יתר של TRF3-Thr-AGT על מוות תאי במודל AP על ידי העלאת ויסות ZBP1 [134]. זה מצביע על כך ש-tRF3-Thr-AGT מעכב מוות ודלקת של תאים על ידי השבתת מסלול ZBP1/NLRP3. Caspase-6, TRIM34, Pyrin, AIM2 ו-ABT-737 מקדמים מוות של תאים באמצעות אינטראקציה מוגברת בין ZBP1 ו-RIPK3. לעומת זאת, MCMV M45 [135], IE3 [136], VZV ORF20 [137], VACV E3 [24,103,138], וירוס הרפס סימפלקס מסוג 1(HSV1) ICP6 [139,140], ו-RIPK1 [21,141,142] נושאים בעיקר RHIM לשלב עם ZBP1 ו- RIPK3. תחת זיהום IAV, Caspase-6 יכול לשלב עם RIPK3 כדי לחזק את היווצרות PANoptosome, וגם האגרגטים הגדולים והקטנים של Caspase-6 הם קריטיים לקשירה של RIPK3 ל-ZBP1 [110]. הקשר בין TRIM34 ו-ZBP1 מקדם גיוס ZBP1 של RIPK3, ו-TRIM34 מתווך polyubiquitination מקושר K63- של ZBP1 בשארית K17 [111]. נעדר במלנומה 2 (AIM2) הוא חבר במשפחת החלבונים של Pyrin ו-HIN, שיכול לזהות DNA דו-גדילי ליצירת דלקת. בזיהום HSV1 ו-F. novi cida, AIM2, Pyrin ו-ZBP1 יחד עם ASC, Caspase-1, Caspase-8, RIPK3, RIPK1 ו-FADD יוצרים קומפלקס רב חלבוני גדול בשם AIM2 PANoptosome, המניע את PANoptosis [96]. ABT-737 היא תרופה 3-הומולוגית Bcl-2 מחקה. בתאי סרטן שלפוחית ​​השתן, ABT-737 גורם לנמק של תאים כאשר ZBP1 או RIPK3 מופלים, מה שמושג על ידי הסדרת האינטראקציה בין ZBP1 ל-RIPK3 [143]. המולקולות שיכולות לעכב את האינטראקציה של ZBP1 ו-RIPK3 קיימות בעיקר בנגיפים ובעלות תחומי RHIM, אשר עשויה להיות תוצאה של אבולוציה משותפת של הנגיף וההגנה החיסונית של המארח [144]. בנוסף, RIPK1, כמולקולה הגורמת לנקרופטוזיס ברוב המקרים, יכולה לשלב באופן תחרותי עם RIPK3 בפיתוח ולנקרופטוזיס אנדוגני בתיווך Z-NA כדי למלא תפקיד מעכב. מספר מולקולות גם מווסתות בעקיפין את ZBP1. ניתן לגרום ל-PUMA על ידי נקרופטוזיס ומפעיל את תחושת ZBP1 על ידי קידום שחרור mtDNA [145]. Nonylphenol (NP) מפחית את מידת המתילציה של מקדם ZBP1 ומקדם ביטוי ZBP1 על ידי עיכוב הקישור של אזור פרומטור lncRNA PVT1, EZH2, DNMT1 ו-ZBP1 [146]. CBL0137 מפעיל נקרופטוזיס 1-מתווך על ידי ZBP על ידי קידום סינתזת Z-DNA. הגילוי של מולקולות רגולטוריות נוספות במחלות שונות הקשורות ל-ZBP1 ופתוגנים מזוהים היא גם אסטרטגיית מחקר מרכזית [47]. עם זאת, מעכבים כימיים המשפיעים ישירות על ZBP1 אינם זמינים כעת.

6. מסקנות

מחקרים שחקרו את ZBP1 מקורם בתחומי ה-Z וה-RHIM שלו, המקיימים אינטראקציה עם מולקולות אחרות במעלה הזרם או במורד הזרם במהלך העברת אותות. נכון לעכשיו, מחקרים מצביעים על כך ש-ZBP1 מזהה את Z-NA, בתיווך ישירות על ידי תחום ה-Z השני שלו במסוף N. יתר על כן, necroptosis הוא המסלול המתווך ביותר של ZBP1-. למרות ש-ZBP1-נקרופטוזיס מתווך הוא לא המסלול הקלאסי ביותר, ZBP1-נוצר נקרופטוזיס באמצעות ציר RIPK3-MLKL הוקם במגוון מחלות אנושיות, מה שמצביע על כך ש-ZBP1 עשוי להיות מטרה טיפולית פוטנציאלית. ניתוח התפקיד הקלאסי של ZBP1 בזיהום ויראלי קשור גם לתפקידו המקורי כחיישן ויראלי. במחקרי IAV, ה-vRNA בתיווך DVG יצר RNP וזוהה על ידי ZBP1. בנוסף, חומצות גרעין אנדוגניות זוהו על ידי ZBP1. MtDNA [29] ו-dsRNA [38] מ-ERE עלולים לגרום למגוון של דלקות כרוניות באמצעות מנגנוני הגנה חיסונית בתיווך ZBP1-. בעתיד, יש לחקור את תפקידו של ZBP1 בזיהומי וירוס שונים כדי לקבוע את רצף הגנום המייצר Z-NA. ZBP1 מתווך מסלולי מוות אחרים של תאים, כגון אפופטוזיס, פירופטוזיס ו-PANoptosis, המשלב את השניים הראשונים ונקרופטוזיס. זה גם מוקד של מחקר נוכחי ועתידי, כולל זיהום ב-SARS-CoV-2 ושליטה בגידולים. כדאי לחקור את המנגנון של ZBP1 במחלות שונות. מבחינת הרגולציה של ZBP1, מחקרים קיימים מצאו שמולקולות רבות יכולות להשפיע על תפקוד ה-ZBP1 ברמת התעתיק, האינטראקציה שלו עם החלבון שלו ובאופן עקיף. ישנה משמעות רבה להמשיך ולחפש מולקולות קשורות נוספות באזורים אלו ולחקור מולקולות שיכולות להשפיע על פעולת ZBP1 בדרכים אחרות. בנוסף, קיים חוסר בחומרים מולקולריים קטנים שניתן לסנתז במבחנה ולהשפיע ישירות על תפקוד מוות תאים מתווך של ZBP1- בתחומים רלוונטיים כיום, וזה מה שנחפש באופן פעיל בעתיד.

הפניות

1. נירמלה, JG; Lopus, M. מנגנוני מוות תאים באוקריוטים. Cell Biol. טוקסיקול. 2020, 36, 145–164. [CrossRef] [PubMed]

2. קר, JFR; Wyllie, AH; Currie, AR אפופטוזיס: תופעה ביולוגית בסיסית עם השלכות רחבות טווח בקינטיקה של רקמות. בר. J. Cancer 1972, 26, 239–257. [CrossRef] [PubMed]

3. מג'נו, ג'; Joris, I. אפופטוזיס, אונקוזיס ונמק. סקירה כללית של מוות תאים. אמ. ג'יי פאתול. 1995, 146, 3-15. [PubMed]

4. אלמור, ס. אפופטוזיס: סקירה של מוות תאי מתוכנת. טוקסיקול. פאתול. 2007, 35, 495–516. [CrossRef] 5. Sen, S. מוות תאי מתוכנת: מושג, מנגנון ובקרה. ביול. כומר קמב. פילוס. Soc. 1992, 67, 287–319. [CrossRef]

6. אשכנזי, א.; Fairbrother, WJ; לברסון, JD; Souers, AJ מגילויים בסיסיים של אפופטוזיס ועד למעכבי משפחת BCL-2 סלקטיביים מתקדמים. נאט. Rev. Drug Discov. 2017, 16, 273–284. [CrossRef]

7. מניפה, ט.-ג'; האן, ל.-ה.; קונג, ר.-ש.; Liang, J. Caspase Family Proteases and Apoptosis. Acta Biochim. Et Biophys. חטא. 2005, 37, 719–727. [CrossRef]

8. Farber, E. מוות תאי מתוכנת: נמק לעומת אפופטוזיס. מוד. פאתול. 1994, 7, 605–609.

9. Galluzzi, L.; Kroemer, G. Necroptosis: A Pathway of Specialized Pathway of Programmed Necrosis. תא 2008, 135, 1161–1163. [CrossRef]

10. פרנק, ד.; Vince, JE Pyroptosis לעומת necroptosis: קווי דמיון, הבדלים והצלבה. מוות תאים שונה. 2019, 26, 99–114. [CrossRef]

11. מאלירדי, RKS; גורונג, פ.; Kesavardhana, S.; סמיר, פ.; ברטון, א.; מומרדי, ה.; פוגל, פ.; Pelletier, S.; בורגולה, ש.; Kanneganti, T.-D. פרימה חיסונית מולדת בהיעדר TAK1 מניע פירופטוזה, אפופטוזיס, נמק ומחלות דלקתיות בלתי תלויות בפעילות RIPK1. J. Exp. Med. 2020, 217, jem.20191644. [CrossRef] [PubMed]

12. מקנזי, BA; Dixit, VM; Power, C. Fiery Cell Death: Pyroptosis במערכת העצבים המרכזית. מגמות Neurosci. 2020, 43, 55–73. [CrossRef] [PubMed]

13. שי, י.; גאו, ו.; Shao, F. Pyroptosis: Gasdermin-Mediated Cell Death Necrotic. טרנדים ביוכימיה. Sci. 2017, 42, 245–254. [CrossRef]

14. פו, י.; קומלה, נ.; טוגנאצי, ק.; בראון, LF; דבורק, HF; Kocher, O. Cloning of DLM-1, גן חדש שמווסת למעלה במקרופאגים מופעלים, באמצעות תצוגה דיפרנציאלית של RNA. ג'ין 1999, 240, 157–163. [CrossRef] [PubMed]

15. שוורץ, ט.; בהלקה, י. Lowenhaupt, K.; היינמן, יו.; Rich, A. מבנה של קומפלקס DLM-1–Z-DNA חושף משפחה משומרת של חלבונים קושרי Z-DNA. נאט. מבנה. ביול. 2001, 8, 761–765. [CrossRef]

16. טקאוקה, א.; וואנג, ז.; צ'וי, חבר הכנסת; ינאי, ח.; נגשי, ח.; באן, ט; לו, י.; מיאגישי, מ.; קודמה, ט.; הונדה, ק.; et al. DAI (DLM-1/ZBP1) הוא חיישן DNA ציטוזולי ומפעיל את התגובה החיסונית המולדת. טבע 2007, 448, 501–505. [CrossRef] [PubMed]

17. איש, SM; קרקי, ר.; Kanneganti, T.-D. מנגנונים ותפקודים מולקולריים של פירופטוזיס, קספאסות דלקתיות ודלקות במחלות זיהומיות. אימונול. Rev. 2017, 277, 61–75. [CrossRef]

18. Upton, JW; קייזר, WJ; Mocarski, ES DAI/ZBP1/DLM-1 קומפלקסים עם RIP3 לתווך נמק מתוכנת המושרה על ידי וירוסים הממוקדים על ידי Murine Cytomegalovirus vIRA. Cell Host Microbe 2012, 11, 290–297. [CrossRef]

19. קרקי, ר.; לי, ש; קניון, ר.; פנדיאן, נ.; וואנג, י.; שארמה, בר; Malireddi, RS; יאנג, ד.; טריפקוביץ, ש.; סטיל, JA; et al. מוות תאי דלקתי תלוי ב-ZBP, אפופטוזיס וסערת ציטוקינים משבשים את היעילות הטיפולית של IFN במהלך זיהום בנגיף הקורונה. Sci. אימונול. 2022, 7, eabo6294. [CrossRef]

20. Baik, JY; ליו, ז.; Jiao, D.; קוון, ה'-ג'; יאן, ג'; Kadigamuwa, C.; צ'ו, מ.; אגם, ר.; קרוהלאק, מ.; טנדון, מ.; et al. ZBP1 לא RIPK1 מתווך נקרופטוזיס גידול בסרטן השד. נאט. Commun. 2021, 12, 2666. [CrossRef]

21. דבוס, מ.; Tanghe, G.; גילברט, ב.; Dierick, E.; Verheirstraeten, M.; Nemegeer, J.; דה ראובר, ר.; לפבר, ש.; דה מונק, י. Rehwinkel, J.; et al. חישה של חומצות גרעין אנדוגניות על ידי ZBP1 גורמת לנקרופטוזיס קרטינוציטים ודלקת בעור. J. Exp. Med. 2020, 217, e20191913. [CrossRef] [PubMed]

22. ג'ין, ש; לי, ט.; הוא, X.; ג'יא, ח.; חן, ג.; זנג, ש.; פאנג, י.; ג'ינג, ז'; Yang, X. מאפיינים מבניים מולקולריים והפונקציות של מפעיל תלוי-DNA של עכבר של גורמים מווסתים של אינטרפרון. Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi 2015, 31, 1606–1610. [PubMed]

23. Kesavardhana, S.; מאלירדי, RKS; ברטון, ארה"ב; פורטר, SN; פוגל, פ.; פרוט-מילר, SM; Kanneganti, T.-D. תחום Z 2 של ZBP1 הוא מתג מולקולרי המווסת PANoptosis הנגרמת על ידי שפעת וקטלניות סביב הלידה במהלך ההתפתחות. ג'יי ביול. Chem. 2020, 295, 8325–8330. [CrossRef] [PubMed]

24. קוהלר, ה.; Cotsmire, S.; Langland, J.; קיבלר, ק"ו; קלמן, ד.; Upton, JW; Mocarski, ES; Jacobs, BL Inhibition of DAI dependent necroptosis על ידי תחום הקישור Z-DNA של חלבון ההתחמקות החיסונית המולדת של וירוס vaccinia, E3. פרוק. נאטל. Acad. Sci. ארה"ב 2017, 114, 11506–11511. [CrossRef] [PubMed]

25. קרקי, ר.; סונדארם, ב.; שארמה, בר; לי, ש; מאלירדי, RKS; Nguyen, LN; כריסטגן, ש.; ז'נג, מ.; וואנג, י.; סמיר, פ.; et al. ADAR1 מגביל את התגובה החיסונית המתווכת ב-ZBP1- ו-PANoptosis כדי לקדם גידולים. Cell Rep. 2021, 37, 109858. [CrossRef] [PubMed]

26. קוריאקוסה, ט.; איש, SM; Subbarao Malireddi, RK; קרקי, ר.; Kesavardhana, S.; מקום, DE; Neale, G.; פוגל, פ.; Kanneganti, T.-D. ZBP1/DAI הוא חיישן מולד של נגיף השפעת המפעיל את ה-NLRP3 inflammasome ומסלולי מוות של תאים מתוכנתים. Sci. אימונול. 2016, 1, aag2045. [CrossRef] [PubMed]

27. אינגרם, JP; Thapa, RJ; פישר, א.; טאמרס, ב.; ג'אנג, ט.; יין, ג; רודריגז, DA; גואו, ה.; ליין, ר.; וויליאמס, ר.; et al. ZBP1/DAI מניע RIPK3-מוות תאי מתווך המושרה על ידי IFNs בהיעדר RIPK1. J. Immunol. 2019, 203, 1348–1355. [CrossRef]

28. פאם, CL; שנמוגם, נ.; מוזר, מ.; או'קרול, א'; בראון, JW; Sierecki, E.; גמבין, י.; סטיין, מ.; Sunde, M. Viral M45 וחלבונים הקשורים לנקרופטוזיס יוצרים מכלולי עמילואיד הטרומריים. נציג EMBO 2019, 20, e46518. [CrossRef]

29. שצ'סני, ב.; Marchetti, M.; אחמד, א.; מונטלבנו, מ.; ברוניאנסצקי, א.; ביבלי, ש'-י; פאפאטרופולוס, א.; Szabo, C. נזק ל-DNA מיטוכונדריאלי והפעלה שלאחר מכן של חלבון קושר Z-DNA 1 מקשרים מתח חמצוני לדלקת בתאי אפיתל. Sci. נציג 2018, 8, 914. [CrossRef]

30. Ponnusamy, K.; ציוני, מ"מ; בגום, מ.; רובינסון, ME; Caputo, VS; קצארו, א.; טרסאנידיס, נ.; שיאו, X.; קוסטופולוס, IV; איסקנדר, ד.; et al. החיישן המולד ZBP1-IRF3 ציר מווסת את התפשטות התאים במיאלומה נפוצה. Haematologica 2021, 107, 721–732. [CrossRef]

31. טקאוקה, א.; Shinohara, S. חיישני DNA במערכת החיסון המולדת. Uirusu 2008, 58, 37–46. [CrossRef] [PubMed]

32. האו, י.; יאנג, ב.; יאנג, ג'; שי, X.; יאנג, X.; ג'אנג, ד'; ז'או, ד'; יאן, ו.; חן, ל. ז'נג, ה.; et al. ZBP1: חיישן חיסוני מולד רב עוצמה וחרב פיפיות בחסינות מארח. Int. י.מול. Sci. 2022, 23, 10224. [CrossRef] [PubMed]

33. Thapa, RJ; אינגרם, JP; ראגן, KB; נוגוסה, ש.; בויד, DF; בניטז, א.א.; סרידהארן, ה.; קוסוף, ר.; שובינה, מ.; לנדשטיינר, VJ; et al. DAI חש ב-Influenza A Virus RNA גנומי ומפעיל RIPK3-מוות תאים תלוי. Cell Host Microbe 2016, 20, 674–681. [CrossRef] [PubMed]

34. קייזר, WJ; Upton, JW; Mocarski, ES אינטראקציה הומוטיפית בין חלבון לרצפטור בקרה תלוית מוטיב של הפעלת NF-κB באמצעות המפעיל תלוי-DNA של גורמים רגולטוריים של IFN1. J. Immunol. 2008, 181, 6427–6434. [CrossRef] [PubMed]

35. Kesavardhana, S.; קוריאקוסה, ט.; גיא, CS; סמיר, פ.; מאלירדי, RKS; מישרא, א.; Kanneganti, T.-D. Ubiquitination של ZBP1/DAI וחישה של vRNPs של שפעת מפעילים מוות תאי מתוכנת. J. Exp. Med. 2017, 214, 2217–2229. [CrossRef] [PubMed]

36. מומוטה, מ.; Lliott, P.; קובו, א.; Kusakabe, T.; קובייאמה, ק.; קורודה, ע.; אימאי, י.; אקירה, ש; קובאן, סי; Ishii, KJ ZBP1 שולט ב-IL-1 ודלקת נויטרופילים שאינה תלויה בדלקת הממלאת תפקיד כפול בחסינות נגד נגיף השפעת. Int. אימונול. 2019, 32, 203–212. [CrossRef] [PubMed]

37. ג'אנג, ט.; יין, ג; בויד, DF; Quarato, G.; אינגרם, JP; שובינה, מ.; ראגן, KB; ישיזוקה, ט.; קרופורד, JC; טאמרס, ב.; et al. נגיף Z-RNA של שפעת מעורר ZBP1-נקרופטוזיס מתווכת. תא 2020, 180, 1115–1129.e13. [CrossRef]

38. Jiao, H.; וואכסמוט, ל.; קומארי, ש.; שוורצר, ר.; לין, ג'; ערן, RO; פישר, א.; ליין, ר.; יאנג, GR; קסיוטיס, ג.; et al. חישת חומצת גרעין Z מפעילה נקרופטוזיס ודלקת תלויה ב-ZBP1-. טבע 2020, 580, 391–395. [CrossRef]

39. פיטמן, KJ; Cervantes, PW; Knoll, LJ Z-DNA מחייב חלבון מתווך שליטה מארח של זיהום Toxoplasma gond ii. לְהַדבִּיק. חיסון. 2016, 84, 3063–3070. [CrossRef]

40. Cervantes, PW; ג'נובה, BMD; פלורס, BJE; Knoll, LJ RIPK3 מקל על התנגדות המארח לזיהום ב-Oral Toxoplasma gondii. לְהַדבִּיק. חיסון. 2021, 89, ה00021-21. [CrossRef]

41. בנות, ב.; Tuladhar, S.; קרקי, ר.; שארמה, בר; בריארד, ב.; Kesavardhana, S.; ברטון, א.; Kanneganti, T.-D. ZBP1 מעודד הפעלת דלקת הנגרמת על ידי פטריות ופירופטוזיס, אפופטוזיס ונקרופטוזיס (PANoptosis). ג'יי ביול. Chem. 2020, 295, 18276–18283. [CrossRef]

42. Muendlein, HI; קונולי, WM; מגרי, ז; סמירנובה, א.; איליוחה, ו'; גוטם, א.; דגטרב, א.; Poltorak, A. ZBP1 מקדם מוות תאי המושרה על ידי LPS ושחרור IL-1 באמצעות אינטראקציות בתיווך RHIM עם RIPK1. נאט. Commun. 2021, 12, 86. [CrossRef] [PubMed]

43. שובינה, מ.; טאמרס, ב.; בויד, DF; ג'אנג, ט.; יין, ג; גוטם, א.; גואו, X.-ZJ; רודריגז, DA; קייזר, WJ; פוגל, פ.; et al. נקרופטוזיס מגביל את נגיף השפעת A כמנגנון מוות תאי עצמאי. J. Exp. Med. 2020, 217, e20191259. [CrossRef] [PubMed]

44. מאלפייט, י. ליברפול, ל.; ברידג'מן, א'; ראגן, KB; Upton, JW; Rehwinkel, J. חישה של RNA ויראלי ואנדוגני על ידי ZBP1/DAI גורם לנמק. EMBO J. 2017, 36, 2529–2543. [CrossRef] [PubMed]

45. שוורצר, ר.; Jiao, H.; וואכסמוט, ל.; טרש, א.; Pasparakis, M. FADD and Caspase-8 מווסתים הומאוסטזיס ודלקת במעיים על ידי שליטה על מוות בתיווך MLKL ו-GSDMD של תאי אפיתל מעיים. חסינות 2020, 52, 978–993.e6. [CrossRef]

46. ​​הרברט, A. Z-DNA ו-Z-RNA במחלות אנושיות. Commun. ביול. 2019, 2, 7. [CrossRef] [PubMed]

47. ג'אנג, ט.; יין, ג; פדורוב, א.; Qiao, L.; באו, ה.; בקנאזארוב, נ.; וואנג, ס.; גוטם, א.; וויליאמס, RM; קרופורד, JC; et al. ADAR1 מסווה את ההבטחה האימונותרפית לסרטן של נקרופטוזיס מונעת על ידי ZBP1-. טבע 2022, 606, 594–602. [CrossRef] [PubMed]

48. נג, סק; ויסבך, ר.; רונסון, GE; חלבוני Scadden, ADJ המכילים תחום מחייב Z-DNA פונקציונלי מתמקמים לגרגרי מתח ציטופלזמי. Nucleic Acids Res. 2013, 41, 9786–9799. [CrossRef]

49. Jiao, H.; וואכסמוט, ל.; וולף, ש.; לוהמן, י. נגאטה, מ.; קאיה, ג.ג; Oikonomou, N.; Kondylis, V.; רוג, מ.; דיבולד, מ.; et al. ADAR1 מונע אינדוקציה קטלנית של אינטרפרון מסוג I על ידי ZBP1. טבע 2022, 607, 776–783. [CrossRef]

50. האברד, צפון מערב; איימס, JM; מאוראנו, מ.; צ'ו, LH; Somfleth, KY; Gokhale, NS; ורנר, מ.; סניידר, JM; Lichauco, K.; סבן, ר.; et al. מוטציית ADAR1 גורמת ל-ZBP1-אימונופתולוגיה תלויה. טבע 2022, 607, 769–775. [CrossRef]

51. דה ראובר, ר.; ורדונק, ש.; Dierick, E.; Nemegeer, J.; הסמן, ע.; אחמד, ש.; יאנס, מ.; בלנקה, ג'; Van Nieuwerburgh, F.; בוצקי, א.; et al. ADAR1 מונע דלקת אוטומטית על ידי דיכוי הפעלה ספונטנית של ZBP1. טבע 2022, 607, 784–789. [CrossRef] [PubMed]

52. יאנג, ד.; ליאנג, י.; ז'או, ש.; דינג, י.; Zhuang, Q.; שי, ש; איי, ט; Wu, S.-Q.; Han, J. ZBP1 מתווך נקרופטוזיס המושרה על ידי אינטרפרון. תָא. מול. אימונול. 2020, 17, 356–368. [CrossRef] [PubMed]

53. גולדשטיין, פ.; Kroemer, G. מוות תאי על ידי נמק: לקראת הגדרה מולקולרית. טרנדים ביוכימיה. Sci. 2007, 32, 37–43. [CrossRef]

54. McCall, K. בקרה גנטית של נמק-סוג נוסף של מוות תאי מתוכנת. Curr. דעה. Cell Biol. 2010, 22, 882–888. [CrossRef]

55. Vandenabeele, P.; גאלוצי, ל.; Vanden Berghe, T.; Kroemer, G. מנגנונים מולקולריים של נקרופטוזיס: פיצוץ תאי מסודר. נאט. כומר מול. Cell Biol. 2010, 11, 700–714. [CrossRef] [PubMed]

56. לי, ל.; טונג, א.; ג'אנג, ש; ווי, י.; Wei, X. המנגנונים המולקולריים של נמק תלוי MLKL ובלתי תלוי MLKL. י.מול. Cell Biol. 2020, 13, 3–14. [CrossRef]

57. קונג, ג'; קונסטנטידיס, ק.; קיציס, RN נמק מתוכנת, לא אפופטוזיס, בלב. Circ. מילון 2011, 108, 1017–1036. [CrossRef]

58. שמש, ל. Wang, X. סוג חדש של התאבדות תאים: מנגנונים ותפקודים של נמק מתוכנת. טרנדים ביוכימיה. Sci. 2014, 39, 587–593. [CrossRef]

59. ג'אנג, ש.; וואן, X.-X.; הו, X.-M.; Zhao, W.-J.; באן, X.-X.; Huang, Y.-X.; יאן, ו.-ת.; Xiong, K. מיקוד למוות תאי מתוכנת כדי לשפר את הטיפול בתאי גזע: השלכות לטיפול בסוכרת ומחלות הקשורות לסוכרת. חֲזִית. Cell Dev. ביול. 2021, 9, 809656. [CrossRef]

60. הו, X.-M.; לי, ז'-י'; לין, ר.-ה.; Shan, J.-Q.; יו, Q.-W.; וואנג, R.-X.; ליאו, ל.-ש.; יאן, ו.-ת.; וואנג, ז.; שאנג, ל.; et al. הנחיות למבחני מוות תאים מוסדר: סיכום שיטתי, השוואה קטגורית, פרוספקט. חֲזִית. Cell Dev. ביול. 2021, 9, 634690. [CrossRef]

61. יאנג, י.-ד.; לי, ז'-י'; הו, X.-M.; וואן, ח.; ג'אנג, ש; שיאו, ר.; Xiong, K. תובנה לגבי הצלבה בין מיטופגיה לאפופטוזיס/נקרופטוזיס: מנגנונים ויישומים קליניים בשבץ איסכמי. Curr. Med. Sci. 2022, 42, 237–248. [CrossRef] [PubMed]

62. ליו, ש.-מ.; ליאו, ל.-ש.; Huang, J.-F.; וואנג, ס.-סי. תפקידו של נתיב CAST-Drp1 בנמק מוסדר נוירונים ברשתית בגלאוקומה ניסויית. Curr. Med. Sci. 2022. [CrossRef] [PubMed]

63. דו, X.-K.; Ge, W.-Y.; ג'ינג, ר.; פאן, ל.-ה. נקרופטוזיס במקרופאגים ריאתיים מתווך פגיעה ריאות דלקתית הנגרמת על ידי ליפופוליסכריד על ידי הפעלת ZBP-1. Int. Immunopharmacol. 2019, 77, 105944. [CrossRef] [PubMed]

64. מרפי, JM; צ'בוטאר, PE; הילדברנד, JM; Lucet, IS; Zhang, J.-G.; אלוורז-דיאז, ש.; לואיס, ר.; לאלוי, נ.; מטקאלף, ד.; Webb, AI; et al. ה- Pseudokinase MLKL מתווך נקרופטוזיס באמצעות מנגנון מתג מולקולרי. חסינות 2013, 39, 443–453. [CrossRef]

65. ליאו, ל.-ש.; לו, ש; יאן, ו.-ת.; וואנג, S.-C.; גואו, ל.-מ.; יאנג, י.-ד.; הואנג, ק.; הו, X.-M.; ג'אנג, ש; יאן, ג'; et al. תפקידו של HSP90 ב-Methamphetamine/Hyperthermia-Induced Necroptosis בנוירונים סטריאטליים של חולדה. חֲזִית. פרמקול. 2021, 12, 716394. [CrossRef]

66. הו, XM; ג'אנג, ש; ג'ואו, RX; וו, י.ל; לי, ZX; Zhang, DY; יאנג, YC; יאנג, RH; הו, YJ; Xiong, K. מוות תאי מתוכנת בטיפול מבוסס תאי גזע: מנגנונים ויישומים קליניים. World J. Stem Cells 2021, 13, 386–415. [CrossRef]

67. יאן, ו.-ת.; לו, ש; יאנג, י.-ד.; נינג, ו.-י.; קאי, י.; הו, X.-M.; ג'אנג, ש; Xiong, K. מגמות מחקר, נקודות חמות וסיכויים לנקרופטוזיס בתחום מדעי המוח. ריגן עצבי. מילון 2021, 16, 1628–1637.

68. ימשיטה, מ.; Passegué, E. TNF- קואורדינטות הישרדות תאי גזע המטופואטיים והתחדשות מיאלואידית. תא גזע 2019, 25, 357–372.e7. [CrossRef]

69. קרקי, ר.; שארמה, בר; Tuladhar, S.; וויליאמס, EP; זלדוונדו, ל. סמיר, פ.; ז'נג, מ.; סונדארם, ב.; בנות, ב.; מאלירדי, RKS; et al. סינרגיזם של TNF ו-IFN- מעורר מוות דלקתי של תאים, נזק לרקמות ותמותה בזיהום SARS-CoV-2 ותסמונות הלם ציטוקינים. תא 2021, 184, 149–168.e17. [CrossRef]

70. חן, א-ש; פאנג, ז; חן, X.-L.; יאנג, ס.; ג'ואו, י.-פ.; מאו, ל.; שיה, י.-פ.; ג'ין, ה'-ג'; לי, י.-נ.; אתה, מ.-פ.; et al. TNF שמקורו במיקרוגליה- מתווך נקרופטוזיס אנדותל המחמיר הפרעה במחסום דם-מוח לאחר שבץ איסכמי. Cell Death Dis. 2019, 10, 487. [CrossRef]

71. בונט, MC; Preukschat, D.; ולץ, פ.-ש.; ואן לו, ג'; Ermolaeva, MA; בלוך, ו.; האס, א.; Pasparakis, M. החלבון המתאם FADD מגן על קרטינוציטים אפידרמיסים מפני Necroptosis In Vivo ומונע דלקת עור. חסינות 2011, 35, 572–582. [CrossRef] [PubMed]

72. Günther, C.; מרטיני, ע.; ויטקופף, נ.; אמאן, ק.; ויגמן, ב.; נוימן, ח.; וולדנר, MJ; Hedrick, SM; טנצר, ש.; Neurath, MF; et al. Caspase-8 מווסת TNF- -נקרופטוזיס אפיתל ודלקת סופנית. טבע 2011, 477, 335–339. [CrossRef] [PubMed]

73. ניוטון, ק.; Wickliffe, KE; דוגר, DL; מלצמן, א.; רוז-גירמה, מ.; דוהסה, מ.; K˝om ˝uves, L.; Webster, JD; Dixit, VM חיתוך של RIPK1 על ידי caspase-8 הוא חיוני להגבלת אפופטוזיס ונקרופטוזיס. טבע 2019, 574, 428–431. [CrossRef] [PubMed]

74. מרקובבה, ז.; Portešová, M.; Slaninová, I. אובדן של FADD ו-Caspases משפיע על התגובה של תאי T-Cell Leukemia Jurkat לתרופות אנטי-סרטניות. Int. י.מול. Sci. 2021, 22, 2702. [CrossRef] [PubMed]

75. אלמקי, ר"ש; לו, ו.; מנלו, פ.; וואנג, ג'; וורן, AY; טולקובסקי, AM; פובר, JS; Bradley, JR תאי אפיתל צינוריים בקרצינומה של תאי כליות צלולים מבטאים RIPK1/3 גבוה ומראים רגישות מוגברת לנקרופטוזיס המושרה על ידי קולטן TNF 1-. Cell Death Dis. 2016, 7, e2287. [CrossRef] [PubMed]

76. רודריגז, DA; וינליך, ר.; חומים.; גיא, ג; פיצג'רלד, פ. דילון, CP; אוברסט, א.; Quarato, G.; נמוך, ג'; קריפס, JG; et al. אפיון של זרחון מתווך RIPK3- של לולאת ההפעלה של MLKL במהלך נקרופטוזיס. מוות תאים שונה. 2016, 23, 76–88. [CrossRef]

77. גרסיה, LR; טנב, ט.; ניומן, ר.; Haich, RO; ליקארדי, ג.; ג'ון, SW; אניבלדי, א.; יו, ל.; פרדו, מ.; יאנג, SN; et al. Ubiquitylation של MLKL בליזין 219 מווסת באופן חיובי פגיעה ברקמות הנגרמת על ידי נקרופטוזיס ופינוי פתוגנים. נאט. Commun. 2021, 12, 3364. [CrossRef]

78. קייזר, WJ; Offermann, MK אפופטוזיס המושרה על ידי מתאם קולטן דמוי אגרה, TRIF תלוי במוטיב אינטראקציה הומוטיפי של חלבון בין הקולטן שלו. J. Immunol. 2005, 174, 4942–4952. [CrossRef]

79. Garnish, SE; מנג, י.; Koide, A.; Sandow, JJ; דנבאום, ע.; יעקבסן, AV; יונג, ו.; שמשון, א"ל; הורן, CR; פיצגיבון, סי; et al. המרה הדדית קונפורמטיבית של MLKL והתנתקות מ-RIPK3 קודמים למוות של תאים על ידי נקרופטוזיס. נאט. Commun. 2021, 12, 2211. [CrossRef]

80. שמשון, א"ל; ג'אנג, י.; Geoghegan, ND; גאווין, XJ; דייויס, KA; מלודיאנוסקי, MJ; Whitehead, LW; פרנק, ד.; Garnish, SE; פיצגיבון, סי; et al. סחר והצטברות MLKL בממברנת הפלזמה שולטים בקינטיקה ובסף לנמק. נאט. Commun. 2020, 11, 3151. [CrossRef]