5.2. ניתוח שמן אתרי

בידוד שמנים אתריים על ידי הידרו-דיסטלציה בוצע במכשיר מסוג Clevenger למשך 3 שעות [64].

גליקוזיד של cistanche יכול גם להגביר את הפעילות של SOD ברקמות הלב והכבד, ולהפחית באופן משמעותי את תכולת הליפופוסצין וה-MDA בכל רקמה, תוך ניקוי יעיל של רדיקלי חמצן תגובתיים שונים (OH-, H₂O₂ וכו') ומגן מפני נזקי DNA הנגרמים על ידי OH-רדיקלים. לגליקוזידים פנילתנואידים של Cistanche יש יכולת ניקוי חזקה של רדיקלים חופשיים, יכולת צמצום גבוהה יותר מאשר ויטמין C, משפרים את פעילות ה-SOD בתרחיף זרע, מפחיתים את תכולת ה-MDA ובעלי השפעה הגנה מסוימת על תפקוד קרום הזרע. פוליסכרידים של Cistanche יכולים להגביר את הפעילות של SOD ו-GSH-Px באריתרוציטים וברקמות ריאה של עכברים מתבגרים שנגרמו על ידי D-galactose, כמו גם להפחית את תכולת ה-MDA והקולגן בריאה ובפלזמה, ולהגדיל את תכולת האלסטין. אפקט ניקוי טוב על DPPH, הארכת זמן ההיפוקסיה בעכברים מזדקנים, שיפור הפעילות של SOD בנסיוב, ועיכוב ניוון פיזיולוגי של ריאות בעכברים מזדקנים בניסוי. עם ניוון מורפולוגי תאי, ניסויים הראו כי ל-Cistanche יש יכולת נוגדת חמצון טובה ובעלת פוטנציאל להיות תרופה למניעה וטיפול במחלות הזדקנות העור. יחד עם זאת, לאכינאקוסיד ב-Cistanche יש יכולת משמעותית לסלק רדיקלים חופשיים של DPPH והוא יכול לנקות מיני חמצן תגובתיים, למנוע פירוק קולגן הנגרמת על ידי רדיקלים חופשיים, וגם יש לו אפקט תיקון טוב על נזקי אניון רדיקלים חופשיים של תימין.

לחץ על מוסף Cistanche Tubulosa

【למידע נוסף: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

ניתוחי השמנים בוצעו הן על ידי כרומטוגרפיה גז (GC) והן גז כרומטוגרפיה/ספקטרומטריית מסה (GC/MS). ניתוחי GC בוצעו באמצעות כרומטוגרף גז (Agilent 7890A, Palo Alto, CA, ארה"ב), מצויד במזהה של 30 m × 0.25 מ"מ עם 0.25 מיקרומטר נייח עובי הסרט HP-5 טור נימי (Agilent J&W, סנטה קלרה, קליפורניה, ארה"ב). נעשה שימוש בתוכנית הטמפרטורה הבאה: מ-60 ◦C עד 246 ◦C בקצב של 3 ◦C min-1 ולאחר מכן נשמרה ב-246 ◦C למשך 20 דקות (זמן ניתוח כולל 82 דקות). תנאי ההפעלה האחרים היו הבאים: הליום גז נושאת (טוהר גדול מ-99.9999 אחוזים או שווה ל-99.9999 אחוזים - אייר ליקוויד, מילאנו, איטליה); קצב זרימה, 1.0 mL.min−1; טמפרטורת מזרק, 250 ◦C; טמפרטורת גלאי, 300 ◦C. הזרקת 1 μL של דגימה מדוללת (1:100 ב-n-hexane, w/w) בוצעה ביחס פיצול של 1:20, באמצעות דגימה אוטומטית (Agilent, Model 7683B, Santa Clara, CA, USA).

ניתוחי GC-MS בוצעו באמצעות כרומטוגרף גז (Agilent 6890N, סנטה קלרה, קליפורניה, ארה"ב) מצויד ב-30 מ' × 0.25 מ"מ id עם עובי סרט נייח של 0.25 מיקרומטר HP{ {7}}ms עמודה נימית (Agilent J&W, סנטה קלרה, קליפורניה, ארה"ב) יחד עם גלאי סלקטיבי בעל התקן יינון אלקטרונים, EI, ומנתח מרובע פול (Agilent 5973, סנטה קלרה, קליפורניה, ארה"ב). תוכנית הטמפרטורה ותנאי ההפעלה הכרומטוגרפיים (למעט הגלאי) היו זהים לשימוש עבור GC-FID. תנאי MS היו כדלקמן: טמפרטורת קו העברה של MS 240 ◦C; טמפרטורת מקור יונים EI, 200 ◦C עם אנרגיית יינון של 70 eV; טמפרטורת קוואדרופול 150 ◦C; קצב סריקה, 3.2 scans.s−1 בטווח סריקה m/z, (30 עד 480). כדי לטפל ולעבד כרומטוגרמות וספקטרום מסה נעשה שימוש בתוכנה MSD ChemStation (Agilent, rev. E.01.00.237, סנטה קלרה, קליפורניה, ארה"ב). תרכובות זוהו על ידי השוואה של ספקטרום המסה שלהן עם אלו של נתוני ספריית NIST02 של מערכת GC/MS וספריות אדמס [32,33]. התוצאות אושרו עוד יותר על ידי השוואה לסדר החלוקה של התרכובת עם מדדי השמירה שלהם על שלבים חצי קוטביים שדווחו בספרות [32]. מדדי שמירה של הרכיבים נקבעו ביחס לזמני השמירה של סדרה של n-אלקנים (שתי תערובות סטנדרטיות C8-C20 ו-C21-C40) עם אינטרפולציה ליניארית [65]. אחוז הרכיבים הבודדים חושב על סמך אזורי שיא GC ללא תיקון פקטור תגובה FID. התוצאות מוצגות כאחוז של פסגות בודדות ± סטיית תקן של שתי ריצות כרומטוגרפיות עצמאיות.

5.3. פעילות אנטי פטרייתית

הפעילות האנטי-פטרייתית של השמן האתרי של S. cacaliifolia הוערכה כנגד פטריות חוטיות ושמרים. שלושה זנים קליניים דרמטופיטים מבודדים מציפורניים ומעור (Epidermophyton floccosum FF9, Trichophyton mentagrophytes FF7, ו-Microsporum canis FF1), וארבעה זנים מסוג דרמטופיטים מה-Colección Espanõla de Cultivos Tipo (T. mentagrophytes C interdigit8, T. mentagrophytes var.2955 var. 2794, T. verrucosum CECT 2992, ו-M. gypseum CECT 2908), זן אחד מסוג Cryptococcus neoformans (C. neoformans YPO186), שני זן קנדידה קליני שבודדו ממקרים חוזרים של וולבו-ווגינאלי (C. krusei LF33 ו-C. guillermondi)i. שלושה זנים מסוג קנדידה (C. albicans ATCC 10231, C. tropicalis YPO128 ו-C. paraphimosis ATCC 90018). כל הזנים אוחסנו במרק Sabouraud דקסטרוז עם 20 אחוז גליצרול ב-80 ◦C ותת-תרבות ב-Sabouraud דקסטרוז אגר (SDA) או תפוחי אדמה דקסטרוז אגר (PDA) לפני כל בדיקה, כדי להבטיח תנאי צמיחה וטוהר מיטביים.

נעשה שימוש בשיטת מרק דילול מיקרו לקביעת הריכוזים המעכבים המינימליים (MIC) והריכוז הקטלני המינימלי (MLC) של השמן לפי פרוטוקול ההתייחסות של המכון לתקנים קליניים ומעבדתיים (CLSI) M38-A2 [66] או M27-A3 [67] עבור פטריות חוטיות ושמרים, בהתאמה. ה-MIC היה הריכוז הנמוך ביותר בו לא נצפתה גידול במבחנות המחוסנות, בעוד שה-MLC היה הריכוז הנמוך ביותר בו לא נצפתה צמיחה לאחר חיסון ב-SDA של כל המבחנות השליליות. כמו כן נכללו בקרה שלילי (לא מחוסן) ואמצעי חיובי (מדיום מחוסן עם 1 אחוז DMSO).

5.4. פעילות אנטי דלקתית

RAW 264.7, שורת תאים מקרופאגים לוקמיים של עכברים שהתקבלה מאוסף התרבות האמריקאי (ATCC TIB-71), תורבה כפי שדווח בעבר על ידי הקבוצה שלנו [22].

ייצור NO נמדד על ידי כימות הצטברות ניטריטים בסופרנטנטים בתרבית, באמצעות ריאגנט Griess [68]. תאים (0.6 × 106 תאים/באר) תורבו ב48-צלחות תרבית באר. לאחר ייצוב לילה, מקרופאגים טופלו מראש במשך שעה אחת עם השמן האתרי (0.08-1.25 µL/mL) מדולל ב-DMSO ולאחר מכן הופעל עם 50 ng/mL של LPS עבור 24 שעות בוצעו בקרות חיוביות (מקרופאגים מעוררי LPS) ושליליות (מקרופאגים לא מטופלים). לאחר תקופת דגירה זו, נפחים שווים של סופרנטנטים תרבית וריאגנט Griess [1:1 של 0.1 אחוז (w/v) N-(1-naphthyl) ethylenediamine dihydrochloride ו-1 אחוז (w/v) sulphanilamide המכיל 5 אחוז ( w/v) H3PO4] עורבבו והודגרו במשך 30 דקות, בחושך. הספיגה ב-550 ננומטר נרשמה בקורא לוחות אוטומטי (Agilent, Santa Clara, CA, ארה"ב) וריכוז הניטריט נקבע על פי עקומה סטנדרטית של נתרן ניטריט. DMSO בריכוז המרבי בשימוש (0.4 אחוזים) כבר הוכח על ידי הקבוצה שלנו כחסר השפעות אנטי דלקתיות וציטוטוקסיות (לא מוצגים נתונים).

RAW 264.7 (1.2 × 106 תאים/באר) תורבת בצלחות של 6-בארות והורשה להתייצב במשך 12 שעות. לאחר מכן, תאים הודגרו עם השמן האתרי (0.64 μL/mL) למשך שעה אחת ולאחר מכן הפעלת LPS (50 ng/mL) למשך 24 שעות. בקרה שלילית (תאים לא מטופלים) ובקרה חיובית (תאים שטופלו ב-LPS בלבד) נשקלו. ליזטים של תאים הוכנו כפי שתואר קודם על ידי Zuzarte et al. [22].

אנליזה של Western blot בוצעה כדי למדוד את רמות החלבון של סינתאז תחמוצת החנקן הניתנת להשראה (iNOS) ו-cyclooxygenase {{0}} (COX-2). החלבונים הופרדו על ידי אלקטרופורזה על SDS-polyacrylamide 10 אחוז (v/v), ב-130 V למשך 1.5 שעות, והועברו לממברנות פוליווינילידן פלואוריד (שהופעלו בעבר עם מתנול) ב-400 mA למשך 3 שעות. לאחר חסימת IgGs לא ספציפיים עם 5 אחוז (w/v) חלב ב-TBS-T למשך שעה אחת בטמפרטורת החדר, ממברנות הודגרו עם נוגדנים ספציפיים נגד iNOS (1:500; R & D Systems) או COX{{15} } (1:5000; אבקם, קיימברידג', בריטניה) בן לילה, ב-4 ◦C. לאחר מכן, הממברנות נשטפו במשך 30 דקות עם TBS-T (10 דקות, 3 פעמים) והודגרו בטמפרטורת החדר, למשך שעה אחת, עם נוגדנים משניים (1:40, 000; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX , ארה"ב) מצומד עם פרוקסידאז חזרת. אימונוקומפלקסים זוהו באמצעות סורק כימילומינסצנציה (Image Quant LAS 500, GE, Boston, MA, ארה"ב). ממברנות נבדקו עם נוגדן אנטי טובולין (1:20,000; סיגמא) כדי להבטיח שכמות שווה של חלבון הועמסה. כימות החלבון בוצע באמצעות ImageLab גרסה 6.1.0 (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, CA, ארה"ב).

5.5. נדידת תאים

NIH 3T3, קו תאים פיברובלסטים עובריים של עכבר (ATCC CRL-1658), הורכב כפי שתואר קודם לכן בקבוצה שלנו [69].

5.5.2. בדיקת נדידת תאים

נדידת התאים בוצעה באמצעות בדיקת השריטה כפי שדווח על ידי Martinotti ועמיתיו [70] עם שינויים קלים. בקצרה, פיברובלסטים מסוג NIH 3T3 נזרעו ב-2.5 × 105 תאים/מ"ל בצלחות באר 12-. לאחר 24 שעות של צמיחה, בוצעה שריטה בשכבת התאים באמצעות קצה פיפטה של ​​20-200 μL. תאים מנותקים הוסרו על ידי שטיפת תאים עם PBS סטרילי 1x. DMEM עם 2 אחוז סרום הוספה לכל הצלחות, בנוכחות או היעדר השמן האתרי. באמצעות מיקרוסקופ חוזה פאזה, תמונות נרכשו 0, 12 ו-18 שעות לאחר השריטה, ואזור הפצע נמדד באמצעות תוכנת ImageJ/Fiji. התוצאות שהוצגו התקבלו באמצעות המשוואה הבאה

5.6. כדאיות תאים

ההשפעה של ריכוזים שונים של השמן האתרי על הכדאיות הן של מקרופאגים והן של פיברובלסטים בוצעה באמצעות מבחן הפחתת resazurin. בקצרה, מקרופאגים ({{0}}.6 × 106 תאים/מ"ל), או פיברובלסטים (1.25 × 105 תאים/מ"ל) נזרעו בצלחות של 48-בארים. לאחר ייצוב בן לילה, נוספו ריכוזים שונים של השמן האתרי (0.08-1.25 µL/mL) מדולל ב-DMSO למשך 24 שעות. בסוף הניסוי, המדיום הוסר ותוסף מדיום טרי המכיל resazurin (1:10) למשך שעה או 4 שעות, עבור מקרופאגים ופיברובלסטים, בהתאמה. הספיגה ב-570 ננומטר עם מסנן התייחסות של 620 ננומטר נרשמה בקורא לוחות אוטומטי (Agilent, Santa Clara, CA, ארה"ב). כדאיות התא נקבעה באמצעות המשוואה הבאה:

כאשר AbsExp היא הספיגה (הבדל בין 570 ל-620 ננומטר) בתנאי הניסוי השונים ו- AbsCT היא הספיגה בתאי בקרה (ללא שמן אתרי).

5.7. הזדקנות הנגרמת על ידי אטופוסיד 

הזדקנות הוערכה באמצעות ערכת צביעה זמינה מסחרית בטא-גלקטוזידאז לפי פרוטוקול היצרן (Cell Signaling Technology). בקצרה, 2.5 × 104 פיברובלסטים נזרעו בצלחות של 12-בארים ואפשרו היצמדות למשך הלילה. לאחר מכן, הזדקנות מושרה על ידי דגירת תאים עם 12.5 מיקרומטר של אטופוזיד למשך 24 שעות. Etoposide הוסר, והתאים נשטפו עם PBS 1x. לאחר מכן, התאים הורשו להתאושש במשך 72 שעות ב-DMEM בהיעדר או בנוכחות שמן אתרי S. cacaliifolia, ושינויים במורפולוגיה הוערכו מדי יום. לאחר 72 שעות, תאים נקבעו למשך 15 דקות באמצעות תמיסת קיבוע 1x (מסופק בערכה המסחרית), ואחריה שטיפות PBS, והודגרו למשך הלילה עם תמיסת צביעה בטא-גלקטוזידאז באינקובטור יבש ב-37 מעלות צלזיוס ללא אספקת CO2. שדות שונים נצפו במיקרוסקופ לפיתוח צבע כחול וצולמו לניתוח תמונה (8 תמונות לכל מצב). צביעת צבע כחול מובהקת העידה על פעילות בטא-גלקטוזידאז. ניתוח כמותי בוצע באמצעות ImageJ, ואחוז התאים המזדקנים מכלל התאים חושב.

5.8. ניתוח סטטיסטי

התוצאות מוצגות כערכים ממוצעים ± SEM (שגיאת תקן של הממוצע) משלושה ניסויים בלתי תלויים לפחות שבוצעו בשני עותקים. מובהקות סטטיסטית עבור מבחני אנטי דלקתיים, חיוניות תאים והזדקנות נקבעה באמצעות אנליזה חד כיוונית של שונות (ANOVA) ואחריה הבדיקה הפוסט-הוקית של דאנט באמצעות GraphPad Prism גרסה 9.3.0 (GraphPad Software, San Diego, CA, ארה"ב). עבור מבחני נדידת תאים נקבעה מובהקות סטטיסטית על ידי ANOVA דו-כיוונית ואחריה מבחן ההשוואה המרובה של Sydák. ערך p < 0.05 נחשב כמייצג הבדלים משמעותיים.

תרומות מחבר:המשגה, LS ו-AM; אימות, AS, MJG, MTC ו-SP; ניתוח פורמלי, JMA-S., MJG, AP ו-DF; חקירה, JMA-S., AM ו-AP; משאבים, AM, EC, MTC ו-LS; אוצרות נתונים, AP; כתיבה - הכנת טיוטה מקורית, JMA-S., AP ו-AM; כתיבה - סקירה ועריכה, MTC, LS ו-AM; הדמיה, JMA-S.; פיקוח, LS ו-AM; ניהול פרויקטים, LS; רכישת מימון, LS ו-MTC כל המחברים קראו והסכימו לגרסה שפורסמה של כתב היד.

מימון:עבודה זו מומנה על ידי COMPETE 2020—תוכנית מבצעית לתחרותיות ובינלאומיות וקרנות לאומיות של פורטוגל באמצעות FCT—Fundação para a Ciência ea Tecnologia, במסגרת פרויקטים UIDB/04539/2020, UIDP/04539/2020 ו-LA58/P/2020.

הצהרת זמינות נתונים:הנתונים יהיו זמינים לפי בקשה.

ניגוד עניינים:המחברים אינם מצהירים על ניגוד עניינים.

הפניות

1. בונגומין, פ.; גאגו, ש.; אולאדל, ר.; Denning, D. שכיחות עולמית ורב-לאומית של מחלות פטרייתיות - דיוק אומדן. J. Fungi 2017, 3, 57. [CrossRef] [PubMed]

2. Campoy, S.; Adrio, JL Antifungals. Biochem. פארם. 2017, 133, 86–96. [CrossRef] [PubMed]

3. גופטה, AK; קופר, EA עדכון בטיפול נגד פטריות של דרמטופיטוזיס. Mycopathologia 2008, 166, 353-367. [CrossRef]

4. מטיס, ג; Friedlander, SF זיהומים ומורסות של רקמות תת עוריות. בעקרונות ובפרקטיקה של מחלות זיהומיות בילדים; Elsevier: אמסטרדם, הולנד, 2012; עמ' 454–462.ה3.

5. דה אוליביירה, CB; Vasconcellos, C.; Sakai-Valente, ניו יורק; סוטו, MN; לואיז, FG; בלדה ג'וניור, וו.; דה סוזה, MdGT; בנארד, ג'; Criado, PR Toll Like Receptors (TLR) 2 ו-4 ביטוי של קרטינוציטים ממטופלים עם דרמטופיטוזיס מקומית ומפושטת. כומר אינסט. Med. טרופ. סאו פאולו 2015, 57, 57–61. [CrossRef] [PubMed]

6. Celestrino, GA; רייס, נגמ"ש; קריאדו, יחסי ציבור; בנארד, ג'; Sousa, MGT Trichophyton Rubrum מעורר תגובות פגוציטיות ופרו-דלקתיות במונוציטים אנושיים דרך קולטן דמוי אגרה 2. קדמי. מיקרוביול. 2019, 10, 2589. [CrossRef]

7. סאן, ש.-צ. מסלול ה-NF-B הלא קנוני בחסינות ודלקת. נאט. כומר אימונול. 2017, 17, 545–558. [CrossRef] [PubMed]

8. שארמה, א.; Gupta, S. Protective Manifestation of Herbonanoceuticals as Antifungals: A Possible Drug Candidate for Infection Dermatophytic. מדע בריאות. נציג 2022, 5. [CrossRef]

9. גואו, ש.; DiPietro, LA גורמים המשפיעים על ריפוי פצעים. ג'יי דנט. מילון 2010, 89, 219–229. [CrossRef]

10. זוזרטה, מ.; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Canhoto, J.; Vale-Silva, L.; סילבה, MJ; פינטו, E.; Salgueiro, L. הרכב כימי ופעילות אנטי-פטרייתית של השמנים האתריים של Lavandula Viridis LHér. J. Med. מיקרוביול. 2011, 60, 612–618. [CrossRef]

11. מרטינז-רוסי, NM; ביטנקורט, ת"א; פרס, נ.ת.ע; לאנג, EAS; גומס, EV; Quaresemin, NR; מרטינס, חבר פרלמנט; לופס, ל.; Rossi, A. עמידות דרמטופיטים לתרופות נגד פטריות: מנגנונים ותשקיף. חֲזִית. מיקרוביול. 2018, 9, 1108. [CrossRef]

12. מוראד, א.; Perfect, JR The War on Cryptococcosis: סקירה של הארסנל נגד פטריות. מ. אינסט. אוסוולדו. קרוז. 2018, 113, e170391. [CrossRef] [PubMed]

13. מקארתי, MW; Kontoyiannis, DP; קורנלי, או"א; מושלם, JR; וולש, סוכנים רומנים TJ ומטרות סמים כדי לעמוד באתגרים של פטריות עמידות. J. Infect. Dis. 2017, 216, S474–S483. [CrossRef] [PubMed]

14. וונקמן, HE; van de Laar, MAFJ תרופות נוגדות דלקת לא סטרואידיות: השפעות שליליות ומניעתן. סמינר. דַלֶקֶת פּרָקִים. ריאום. 2010, 39, 294–312. [CrossRef] [PubMed]

15. בקאלי, פ.; אברבק, ש.; אברבק, ד.; Idaomar, M. השפעות ביולוגיות של שמנים אתריים סקירה. Food Chem. טוקסיקול. 2008, 46, 446–475. [CrossRef] [PubMed]

16. כריסטאקי, ע.; בונוס, ע.; Giannenas, I.; Florou-Paneri, P. צמחים ארומטיים כמקור לתרכובות ביו-אקטיביות. חקלאות 2012, 2, 228–243. [CrossRef]

17. Edris, AE פוטנציאל פרמצבטי ותרפי של שמנים אתריים ומרכיביהם הנדיפים: סקירה. פיטוטר. מילון 2007, 21, 308–323. [CrossRef] [PubMed]

18. פינטו, E.; Vale-Silva, L.; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L. פעילות אנטי-פטרייתית של שמן אתרי ציפורן מ-Syzygium Aromaticum על מינים של קנדידה, אספרגילוס ודרמטופיטים. J. Med. מיקרוביול. 2009, 58, 1454–1462. [CrossRef]

19. פינטו, E.; הרימפנג, ק.; לופס, ג.; ואז, ש; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L. פעילות אנטי-פטרייתית של שמן אתרי Ferulago Capillaris נגד קנדידה, קריפטוקוקוס, אספרגילוס ומיני דרמטופיטים. יורו ג'יי קלין. מיקרוביול. לְהַדבִּיק. Dis. 2013, 32, 1311–1320. [CrossRef]

20. פינטו, E.; פינה-וז, ג; סלגיירו, ל. Gonçalves, MJ; Costa-de-Oliveira, S.; Cavaleiro, C.; פלמיירה, א.; רו-דריגס, א.; Martinezde-Oliveira, J. פעילות אנטי-פטרייתית של השמן האתרי של תימוס פולגיוידס על מינים מסוג Can-dida, Aspergillus ו-Dermatophyte. J. Med. מיקרוביול. 2006, 55, 1367–1373. [CrossRef]

21. ולנטה, י. זוזרטה, מ.; Gonçalves, MJ; לופס, MC; Cavaleiro, C.; סלגיירו, ל. Cruz, MT פעילויות אנטי-פטרייתיות, נוגדות חמצון ואנטי-דלקתיות של Oenanthe Crocata L. Essential Oil. Food Chem. טוקסיקול. 2013, 62, 349–354. [CrossRef] [PubMed]

22. זוזרטה, מ.; Alves-Silva, JM; אלבס, מ.; Cavaleiro, C.; סלגיירו, ל. Cruz, MT תובנות חדשות על הפוטנציאל האנטי-דלקתי ופרופיל הבטיחות של שמנים אתריים תימוס קרנוסוס ותימוס קמפורטוס והתרכובות העיקריות שלהם. J. Etnopharmacol. 2018, 225, 10–17. [CrossRef]

23. ווקר, JB; Sytsma, KJ; טרוטליין, י. Wink, M. Salvia (Lmiaceae) אינו מונופילטי: השלכות על השיטתיות, הקרינה וההתמחויות האקולוגיות של סלביה ושל שבט מנתיאה. אמ. ג'יי בוט. 2004, 91, 1115–1125. [CrossRef] [PubMed]

24. סו, סי-י; מינג, Q.-L.; רחמן, ק.; האן, ט.; צ'ין, ל.-פ. סלוויה מילטיוריזה: שימושים רפואיים מסורתיים, כימיה ופרמקולוגיה. סַנְטֵר. J. Nat. Med. 2015, 13, 163–182. [CrossRef] [PubMed]

25. גורבני, א.; Esmaeilizadeh, M. מאפיינים פרמקולוגיים של Salvia Officinalis ומרכיביו. ג'יי טראדיט. מַשׁלִים. Med. 2017, 7, 433–440. [CrossRef]

26. Afonso, AF; Alves-Silva, JM; Pereira, OR; Cardoso, SM השפעות מועילות של צמחי סלביה: מתאם עם רכיבים ביו-אקטיביים. בהתקדמות אחרונה בצמחי מרפא כרך 44: פיטותרפיה III; Govil, JN, Pathak, M., Eds.; הוצאת Studium: ניו דלהי, הודו, 2016; עמ' 161–198.

27. סלימיקיה, I.; אריאנפור, מ.; עבדולהי, מ.; עבדולגאפרי, א.; סמדי, נ.; Monsef-Esfahani, H. Phytochem-ical והשפעות ריפוי פצעים של תמצית מתנולית של Salvia Multicaulis Vahl. בעכברוש. פלנטה מד. 2016, 81, S1–S381. [CrossRef]

28. גלי-מוחסיב, ח.; חילן, ג; Khater, C. שימושים מסורתיים של Salvia Libanotica (מרווה מזרח ים תיכונית) והשפעות השמנים האתריים שלה. J. Etnopharmacol. 2000, 71, 513–520. [CrossRef] [PubMed]

29. חמידפור, מ.; חמידפור, ר.; חמידפור, ש; Shahlari, M. כימיה, פרמקולוגיה ותכונה רפואית של מרווה (סלוויה) למניעה וריפוי של מחלות כמו השמנת יתר, סוכרת, דיכאון, דמנציה, לופוס, אוטיזם, מחלות לב וסרטן. ג'יי טראדיט. מַשׁלִים. Med. 2014, 4, 82–88. [CrossRef]

30. אסקרי, SF; אוון, ר.; תאיראני-נג'ראן, ז'; סחבקר, א.; Eghbali, S. איראני סלביה מינים: עדכון פיטוכימי ופרמקולוגי. Phytochemistry 2021, 183, 112619. [CrossRef]

31. דוידסה, ג.; סוזה סאנצ'ז, מ.; Knapp, SD; Chian Cabrera, F. Rubiaceae a Verbenaceae. 4(2): I–Xvi, 1–533. ב-Flora Mesoamericana; Davidse, G., Sousa Sánchez, M., Knapp, SD, Chian Cabrera, F., Eds.; הגן הבוטני של מיזורי: St. Louis, MO, ארה"ב, 2012; עמ' 402–403.

32. אדמס, RP זיהוי של רכיבי שמן אתרים על ידי כרומטוגרפיה גז/ספקטרוסקופיה מסה קוואדרופול, מהדורה רביעית; Allured Publishing Corporation: Carol Stream, IL, ארה"ב, 2007.

33. NIST/EPA/NIH Mass Spectral Library 2005.

34. Guijarro-Muñoz, I.; קומפטה, מ.; Álvarez-Cienfuegos, A.; Álvarez-Vallina, L.; Sanz, L. Lipopolysaccharide מפעיל קולטן דמוי אגרה 4 (TLR4)-Mediated NF-KB Signaling Pathway ותגובה פרו-דלקתית בפריציטים אנושיים. ג'יי ביול. Chem. 2014, 289, 2457–2468. [CrossRef]

35. סקרימה, מ.; מליטו, סי; מרולה, פ.; איוריו, א.; ויטו, נ.; גיורי, אמ; Ferravante, A. הערכה של פעילות ריפוי פצעים של Salvia Haenkei תמצית חלק אווירי הידרו-אלכוהולי על מודלים ניסיוניים במבחנה וב-Vivo. קלינ. קוסמטיקה. תחקור. דרם. 2020, 13, 627–637. [CrossRef] [PubMed]

36. פארהפור, מר; פירכעזר, ע.; אשרפיאן, א.; Sonboli, A. Accelerated Healing by Administration Local of Salvia Officinalis Essential Oil on Pseudomonas Aeruginosa and Staphylococcus Aureus Infected Wound Model. ביומד. פרמקוטר. 2020, 128, 110120. [CrossRef]

37. מטיק, א.; רבונקר, א.; חן, ג'; ביזיו, א.; דאל'אקווה, ש.; Cocetta, V.; ברון, פ.; מנצ'ינו, ג'; מילנזי, מ.; מתיי, מ.; et al. זיהוי של Salvia Haenkei כסוכן מדכא ג'ירו על ידי שימוש ב-Senes-science-Screening Assay משולב. הזדקנות 2016, 8, 3223–3240. [CrossRef]

38. פארק, CH; שין, ש; לי, EK; קים, ד.ה.; קים, M.-J.; Roh, S.-S.; יוקוזאווה, ט.; Chung, HY Magnesium Lithospermate B מ- Salvia Miltiorrhiza BUNGE משפר דלקת כליות הנגרמת על ידי הזדקנות והזדקנות באמצעות NADPH Oxidase-Mediated Oxygen Reactive Oxygen. פיטוטר. מילון 2017, 31, 721–728. [CrossRef]

39. נג'אר, ב'; Mecacci, G.; נרדי, ו'; Cervelli, C.; נרדוני, ש.; מנסיאנטי, פ.; אבאני, VV; Giannecchini, S.; Pistelli, L. נדיפים ופעילות אנטי-פטרייתית-אנטיבקטריאלית-אנטי-ויראלית של Salvia Spp. שמנים אתריים מטופחים בתנאים אחידים. מולקולות 2021, 26, 2826. [CrossRef] [PubMed]

40. אבו-דרוויש, מ.ס; קברל, סי; עלי, ז; וואנג, מ.; חאן, SI; יעקב, מ"ר; Jain, SK; Tekwani, BL; זולפיקאר, פ.; חאן, IA; et al. Salvia Ceratophylla L. מדרום לירדן: תובנות חדשות על הרכב כימי ופעילויות ביולוגיות. נאט. לְדַרבֵּן. ביופרוספקט. 2020, 10, 307–316. [CrossRef] [PubMed]

41. תערית, מ"ב; מסעדה, ק.; חוסני, ק.; צ'אהד, ט.; מרזוק, ב. הרכב שמן אתרי של סלביה ורבנאקה הגדל בר בתוניסיה. J. Food Biochem. 2010, 34, 142–151. [CrossRef]

42. Viljoen, AM; גונו-בוואליה, א.; קמאטו, GPP; Ba¸ser, KHC; Demirci, B. הרכב השמן האתרי והכימוטקסונומיה של Salvia Stenophylla ובעלות בריתה S. Repens ו-S. Runcinata. ג'יי אסנט. Oil Res. 2006, 18, 37–45. [CrossRef]

43. פינטו, ע.; Salgueiro, LR; Cavaleiro, C.; פלמיירה, א.; Gonçalves, MJ רגישות במבחנה של כמה מינים של שמרים ופטריות חוטיות לשמנים אתריים של Salvia Officinalis. Ind. Crop. לְדַרבֵּן. 2007, 26, 135–141. [CrossRef]

44. טוסון, א.; חאן, ש.; קים, י.; קאלין-סנצ'ז, א.; Hysenaj, X.; Carbonell-Barrachina, A. הרכב שמן אתרי ופעילות אנטי דלקתית של Salvia Officinalis L (Lmiaceae) ב-Murin Macrophages. טרופ. ג'יי פארם. מילון 2014, 13, 937. [CrossRef]

45. אבו-דרוויש, מ.ס; קברל, סי; פריירה, IV; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; קרוז, MT; אל-בדור, ת'; Sal-gueiro, L. שמן אתרי של מרווה מצויה (Salvia Officinalis L.) מירדן: הערכת בטיחות בתאי מאמה והפוטנציאל האנטי-פטרייתי והאנטי-דלקתי שלה. ביומד. מילון Int. 2013, 2013, 1–9. [CrossRef]

46. ​​לפוריני, מ.; בונזי, מ.; Loizzo, MR; Passalacqua, NG; Tundis, R. The Essential Oil of Salvia Rosmarinus Spenn. מאיטליה כמקור לתרכובות מעודדות בריאות: פרופיל כימי ופעילות מעכבת נוגדי חמצון וכולינסטראז. Plants 2020, 9, 798. [CrossRef]

47. צ'וי, JK; אה, ח.-מ.; לי, ש; קוון, ת.ק; שין, ט.-י.; רו, מ.-צ.; קים, ש.-ה. סלביה פלבייה מדכאת נגעי עור דמויי אטופיק דרמטיטיס. אמ. ג'יי צ'ין. Med. 2014, 42, 967–985. [CrossRef]

48. פאהד, ל.; שטיין, ד.; Ouaini, N.; Eparvier, V.; el Beyrouthy, M. מגוון כימי ופעילות אנטי-מיקרוביאלית של שמנים אתריים של Salvia multicaulis Vahl. Chem. צוללנים ביולוגיים. 2016, 13, 591–595. [CrossRef]

49. ג'וליאנו, ג'; Marchetti, M.; Campagna, P.; Usai, M. פעילות אנטי-מיקרוביאלית והרכב כימי של שמן אתרי מבית Helichrysum Microphyllum Cambess. Subsp. Tyrrhenicum Bacch., Brullo & Giusso שנאספו בדרום מערב סרדיניה. סעודיה. ג'יי ביול. Sci. 2019, 26, 897–905. [CrossRef] [PubMed]

50. הוא, X.; ג'אנג, ל.; חן, ג'; סוי, ג'; יי, ג.; וו, ג'; Ma, Y. מתאם בין הרכב כימי ופעילות אנטי-פטרייתית של שמן אתרי קלאוזנה לנסיום נגד קנדידה spp. מולקולות 2019, 24, 1394. [CrossRef]

51. Ruiz-Vásquez, L.; רואיז מסיה, ל.; Caballero Ceferino, HD; רואיז מסיה, ו.; אנדרס, MF; דיאז, CE; Gonza-lez-Coloma, A. פוטנציאל אנטי-פטרייתי וקוטל עשבים של שמנים אתריים של פייפר מהאמזונס הפרואני. Plants 2022, 11, 1793. [CrossRef] [PubMed]

52. פונטנל, ROS; מוראיס, SM; בריטו, EHS; Brilhante, RSN; Cordeiro, RA; Nascimento, NRF; Kerntopf, MR; סידרים, ג"י; Rocha, MFG פעילות אנטי-פטרייתית של שמנים אתריים של מיני קרוטון מהביום הקאטינגה הברזילאית. J. Appl. מיקרוביול. 2008, 104, 1383–1390. [CrossRef] [PubMed]

53. מתלה, ג.; Joshi, S. פעילויות נוגדות חמצון ואנטיבקטריאליות של שמן אתרי העלים ומרכיביו Furanodienone ו-Curzerenone מ- Lindera Pulcherrima (Nees.) Benth. אקס הוק. ו. פרמקוגנוסיה. מילון 2012, 4, 80. [CrossRef]

54. סרה, ע.; Hidalgo-Bastida, L.; Verran, J.; וויליאמס, ד'; Malic, S. פעילות אנטי-פטרייתית של שמנים אתריים וביוצידים מסחריים נגד קנדידה אלביקנס. פתוגנים 2018, 7, 15. [CrossRef]

55. בורשטיין, וי"ל; Beccace, I.; גואסקוני, ל.; Mena, CJ; Cervi, L.; Chiapello, LS חסינות העור לדרמטופיטים: ממודלים ניסויים של זיהום למחלות אנושיות. חֲזִית. אימונול. 2020, 11, 605644. [CrossRef]

56. Genˇci´c, MS; Aksi´c, JM; Živkovi´c Stoši´c, MZ; Randjelovi´c, PJ; Stojanovi´c, NM; Stojanovi´c-Radi´c, ZZ; Radulovi´c, NS קישור ההשפעות האנטי-מיקרוביאליות והאנטי-דלקתיות של שמן אתרי Immortelle עם ההרכב הכימי שלו - המשחק בין המרכיבים העיקריים והמינוריים. Food Chem. טוקסיקול. 2021, 158, 112666. [CrossRef] [PubMed]

57. A´cimovi´c, M.; Ljuji´c, J.; וולי'ק, ג'; ז'לזקוב, VD; פזו, ל.; וארגה, א.; Tumbas Šaponjac, V. Helichrysum Ital-icum (Roth) G. Don שמן אתרי מסרביה: הרכב כימי, סיווג ופעילות ביולוגית - האם זה יכול להיות יבול חדש המתאים לסרביה? אגרונומיה 2021, 11, 1282. [CrossRef]

58. אמורים, י"ל; סימאס, DLR; Pinheiro, MMG; מורנו, DSA; אלוויאנו, CS; דה סילבה, AJR; Dias Fernandes, P. מאפיינים אנטי דלקתיים ואפיון כימי של שמנים אתריים של ארבעה מיני הדרים. PLoS ONE 2016, 11, e0153643. [CrossRef]

59. Ascari, J.; דה אוליביירה, MS; נונס, DS; Granato, D.; שרף, ד"ר; סימיאנטו, ע.; אוטוקי, מ.; סולי, ב.; Heiden, G. הרכב כימי, פעילויות נוגדות חמצון ואנטי דלקתיות של שמנים אתריים מדגימות זכר ונקבה של Baccharis punctulata (Asteraceae). J. Etnopharmacol. 2019, 234, 1–7. [CrossRef]

60. סינג, פ.; סינג, ס.; קאפור, IPS; סינג, ג.; איזידורוב, ו.; Szczepaniak, L. Chemical Composition and Anti-oxidant Activities of Essential Oeoresins and Oleoresins from Curcuma Zedoaria Rhizomes, Part-74. Food Biosci. 2013, 3, 42–48. [CrossRef]

61. Jena, S.; ריי, א.; בנרג'י, א.; Sahoo, A.; נסים, נ.; Sahoo, S.; קאר, ב.; פטנאיק, י. פנדה, PC; Nayak, S. הרכב כימי ופעילות נוגדת חמצון של שמן אתרי מעלים וקני שורש של Curcuma Angustifolia Roxb. נאט. לְדַרבֵּן. מילון 2017, 31, 2188–2191. [CrossRef]

62. Andji´c, M.; בוז'ין, ב.; דראגיניץ', נ.; Koˇcovic, A.; Jeremic, JN; Tomovi´c, M.; Milojevi´c Šanovi´c, A.; קלדר, נ.; ˇCapo, I.; Jakovljevi´c, V.; et al. ניסוח והערכה של ניסוחים מקומיים מבוססי שמן אתרי Helichrysum Italicum לריפוי פצעים בחולדות סוכרתיות. Pharmaceuticals 2021, 14, 813. [CrossRef]

63. אהלינה, FN; נוגרהני, נ.; סלסבילה, IA; הריאנטי, ש.; דעי, מ.; Meiyanto, E. Revealing the Reversy Effect of Galangal (Alpinia Galanga L.) תמצית נגד מתח חמצוני בתאי סרטן שד גרורתי ותאי פיברובלסט נורמליים המיועדים כחומר כימותרפי ואנטי-אייג'ינג משותף. פאק אסיאתי. J. Cancer Prev. 2020, 21, 107–117. [CrossRef]

64. מועצת אירופה. פרמקופיה אירופית, מהדורה 7; המנהלת לאיכות התרופות והטיפול הבריאותי של מועצת אירופה: שטרסבורג, צרפת, 2010; ISBN 978-92-871-6700-2.

65. ואן דן דול, ה.; Kratz, PD A הכללה של מערכת אינדקס ההחזקה, כולל גז מתוכנת בטמפרטורה ליניארית - כרומטוגרפיה של מחיצת נוזלים. J. Chromatogr. 1963, 11, 463–471. [CrossRef]

66. מכון התקנים הקליניים והמעבדתיים. שיטת התייחסות לדילול מרק בדיקת רגישות נגד פטריות של פטריות חוטיות; מאושר תקן M38-A2, מהדורה שנייה; המכון לתקנים קליניים ומעבדתיים: וויין, הרשות הפלסטינית, ארה"ב, 2008; ISBN 1-56238-668-9.

67. מכון התקנים הקליניים והמעבדתיים. שיטת התייחסות לדילול מרק בדיקת רגישות נגד פטריות של שמרים; מאושר תקן M27-A3, מהדורה שלישית; המכון לתקנים קליניים ומעבדתיים: וויין, הרשות הפלסטינית, ארה"ב, 2008; ISBN 1-56238-666-2.

68. גרין, LC; Wagner, DA; גלוקובסקי, י. סקיפר, PL; Wishnok, JS; Tannenbaum, SR ניתוח של ניטראט, ניטריט ו-[15N]ניטראט בנוזלים ביולוגיים. אנאלי. Biochem. 1982, 126, 131–138. [CrossRef]

69. פיראס, א.; מקציוני, א.; פלקונירי, ד.; פורצדה, ש.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; סילבה, א.; קרוז, MT; סלגיירו, ל. Maxia, A. הרכב כימי ופעילות ביולוגית של שמן אתרי של Teucrium Scordium L. Subsp. Scordioides (Schreb.) Arcang. (Lmiaceae) מהאי סרדיניה (איטליה). נאט. לְדַרבֵּן. מילון 2021, 36, 5828–5835. [CrossRef] [PubMed]

70. מרטינוטי, ש.; Ranzato, E. Scratch Wound Healing Assay. בתאי אפידרמיס: שיטות בביולוגיה מולקולרית; טורקסן, ק., עורך; Humana: ניו יורק, ניו יורק, ארה"ב, 2019; כרך 2109, עמ' 225–229.

כתב ויתור/הערת מפרסם:ההצהרות, הדעות והנתונים הכלולים בכל הפרסומים הם אך ורק של המחבר/ים והתורמים הבודדים ולא של MDPI ו/או העורך/ים. MDPI ו/או העורכים מתנערים מאחריות לכל פגיעה באנשים או ברכוש הנובעת מכל רעיון, שיטות, הוראות או מוצרים הנזכרים בתוכן.