ההשפעה הטיפולית של Cistanche Deserticola על עשיית הצרכים בדגם עכברוש סנילי

איש קשר:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

שיה ג'אנג, פא-ג'ואן ג'נג, ג'ן ג'אנג

תַקצִיר

רקע כללי

עצירות היא אחת המחלות התפקודיות הכרוניות של מערכת העיכול. זה משפיע בצורה רצינית על איכות החיים. Cistanche deserticola (C. deserticola) יכול לטפל בעצירות כמובן, אבל המנגנון שלה לא הובהר. הנחנו שהמנגנון שלו שיפר את תנועתיות המעיים על ידי גירוי Cajalcells interstitial (ICC). הפעלת הקולטן C-kit על פני השטח של ICC קשורה קשר הדוק לתפקוד ICC, ומסלולי האיתות של תאי הגזע (SCF)/C-kit ממלאים תפקיד חשוב בו. כדי לחקור את המנגנון של האופן שבו C. deserticola מטפל בעצירות, מחקר זה נועד לבסס מודל עצירות בחולדות ולחקור את התפקיד של מסלול איתות SCF/C-kit בטיפול.

מַטָרָה

לחקור את מסלולי האיתות של SCF/C-kit בתפקיד של C. deserticola לטיפול בעצירות על ידי מודל חולדות עצירות.

שיטות

ארבעים ושמונה חולדות ספראג-דולי מגיל 8- חולקו ל-4 קבוצות לפי שיטת משקל אקראית: קבוצה רגילה (n=12), קבוצת מודל (n=12), קבוצת C. deserticola (n=12) וקבוצת חוסמים (n=12). הקבוצה הנורמלית קיבלה מתן מתן מלח תקין; קבוצת הדוגמניות קיבלה לופרמיד במתן מתן; קבוצת החוסמים קיבלה לופרמיד ו-C. deserticola באמצעות מתן, ו-STI571 הוזרק תוך צפק. במהלך הטיפול, המשקל, גרגירי הצואה ואיכות הצואה תועדו כל 10 ד'. ביום 20 לאחר זירוז המודל, הוסרו רקמות המעי הגס של כל קבוצה. צביעת המטוקסילין ואאוזין שימשה לצפייה בשינויים פתולוגיים. רמות ביטוי של גנים SCF, C-kit ו-Aquaporin זוהו על ידי אימונוהיסטוכימיה, ווסטרן בטינג ותגובת שרשרת כמותית של פולימראז בזמן אמת. מיטוכונדריה של אפיתל המעי הגס ותאי הגביע נצפו על ידי מיקרוסקופ אלקטרונים שידור.

תוצאות

בהשוואה לקבוצה הרגילה, ככל שהטיפול התקדם, משקל החולדות בקבוצת המודל והחוסמים ירד באופן משמעותי, משקל הצואה ירד ואיכות הצואה הייתה יבשה (P < {0}}}.{{6}="" }5).="" c.="" deserticola="" הפך="" את="" הירידה="" במשקל="" הגוף="" ובמשקל="" הצואה="" ושיפר="" את="" איכות="" הצואה.="" ניתוח="" היסטופתולוגי="" הצביע="" על="" כך="" שהאפיתל="" של="" רירית="" המעי="" הגס="" בקבוצת="" המודלים="" לא="" היה="" שלם,="" וסידור="" הבלוטות="" היה="" לא="" סדיר="" או="" פגום.="" טיפול="" ב-c.="" deserticola="" שיפר="" את="" השלמות="" וההמשכיות="" של="" תאי="" האפיתל="" ואת="" סידור="" הבלוטות="" הסדיר.="" החומרים="" החוסמים="" עיכבו="" את="" ההשפעות="" של="" אימונוהיסטוכימיה="" של="" c.="" deserticola="" ותגובת="" שרשרת="" כמותית="" של="" פולימראז="" בזמן="" אמת="" הראו="" שביטוי="" של="" scf="" ו-c-kitprotein="" או="" גנים="" ברקמת="" המעי="" הגס="" של="" קבוצת="" המודל="" ירד="" (p="">< 0.05),="" תוך="" כדי="" טיפול="" ב-c.="" deserticola="" הגדילה="" את="" ביטוי="" החלבון="" או="" הגנים="" (p="">< 0.05).="" סופג="" מערבי="" הראה="" שביטוי="" של="" aquaporin="" apq3="" גדל,="" בעוד="" שהביטוי="" של="" cx43="" ירד="" בקבוצת="" המודלים.="" טיפול="" עם="" c.="" deserticola="" inhibited="" ביטוי="" של="" apq3="" וקידם="" ביטוי="" של="" cx43.="" מיקרוסקופיה="" אלקטרונית="" הראתה="" שהמיטוכונדריה="" של="" אפיתל="" המעי="" הגס="" בקבוצת="" המודלים="" היו="" נפוחות="" ומסודרות="" בצורה="" לא="" מסודרת,="" והמיקרו-ווילים="" היו="" דלילים.="" המצב="" היה="" טוב="" יותר="" בקבוצת="" c.="" deserticola.="" עכברים="" שטופלו="" בחוסם="" sti571="" אישרו="" שחסימת="" מסלול="" scf/c-kit="" עיכבה="" את="" השיפור="" של="" עצירות="" על="" ידי="" c.="">

סיכום

C. deserticola שיפר את עשיית הצרכים בחולדות עם עצירות, ומסלול האותות SCF/C-kit, שהוא חוליה מרכזית בתפקוד ICC, מילא תפקיד חשוב בטיפול.

מילות מפתח:Cistanche deserticola; עצירות סנילי; גורמי תאי גזע; סי-קיט

חומר גלם טרי של cistanche

מבוא

עצירות סנילי (SC) היא אחת המחלות הכרוניות התפקודיות של מערכת העיכול בחולים גריאטריים, אשר גורמת או מחמירה אירועים מוחיים וכלי דם ומחלות אחרות ופוגעת קשות באיכות החיים של האוכלוסייה המבוגרת[1,2]. על פי הרפואה הסינית המסורתית, העיקריות אטיולוגיה ופתוגנזה של SCare חום מערכת העיכול, מחסור ב-Yin וג'ין, והרטבת מעיים[3,4], בעוד ש-Cistanche deserticola (C. deserticola) יכול לחמם את הכליות ולהרפות את המעיים. חוקרים דיווחו כי ההשפעה של מעיים שיפור התנועתיות והטיפול ב-SC ברורים, אך המנגנון שלו לא הובהר[5,6]. Interstitial Cajalcells (ICCs) הם סוג מיוחד של תאים mesenchymal במערכת העיכול. הפעלת הקולטן C-kit על פני השטח של ICCs קשורה קשר הדוק לשגשוג תאים, התמיינות ותפקוד. ICCs משתתפים בפתוגנזה של הפרעות מוטוריות רבות של מערכת העיכול [7,8]. הפעלת C-kit תלויה בקישור של גורם תאי גזע הליגנד שלו (SCF) [9]. כדי לחקור את ההשפעה ומנגנון הפעולה של C. deserticola על SC, מחקר זה נועד לבסס מודל SC בחולדות המושרה על ידי לופרידול כדי לחקור את תפקידו של מסלול האיתות SCF/C-kit בטיפול בעצירות על ידי C. deserticola.

חומרים ושיטות

חומרים ניסיוניים

חיות ניסוי:חיות הניסוי היו 48 זכרים 8-חולדות ספראג דאולי ששוקלות 500-550 גרם; הכל נרכש מ-Changsha Tianqin BiotechnologyCo. בע"מ חולדות גודלו במעבדת בעלי החיים של Chongqing Weisiteng BiomedicalTechnology Co. Ltd., שקיבלו אור יום ולילה רגיל, מזון ושתייה. כל הנהלים עמדו בהנחיות הניהול שהוצאו על ידי ועדת האתיקה של בית החולים לרפואה סינית מסורתית בצ'ונגצ'ינג.

ריאגנטים ראשיים:הריאגנטים העיקריים כללו לופרמיד (Sigma, St. Louis, MO, ארצות הברית), C. deserticola מ- Hubei Jurui Traditional Chinese Medicine DecoctionCo. Ltd., STI571 מבית Chinese Selleck Co. Ltd., ו-SCF, C-kit, connexin 43 (Cx43), aquaporin 3 (AQP3) ו-actin נוגדנים (Abcam, Cambridge, MA, ארצות הברית), PrimeScript II 1st Strand cDNA ערכת סינתזה ו-Premix Taq™ (Ex Taq™ גרסה 2.0)(Takara Co. Ltd., יפן).

תוספי מיצוי עשבי תיבול cistanche

שיטות

הכנה וקיבוץ של מודל SC:כדי למנוע את ההשפעה של גורמים מבלבלים כמו משקל גוף על תוצאות הניסוי, החולדות קובצו באופן אקראי לפי שיטת הקיבוץ האקראי הבלוק. ארבעים ושמונה חולדות הוזנו בצורה אדפטיבית במשך שבוע, והחולדות ממוספרו לפי סדר משקל מקל לכבד. לפי סדר משקל הגוף, חולקו החולדות ל-12 אזורים (משקל החולדות בכל אזור היה דומה), כאשר בכל אזור 4 חולדות. 12 האזורים חולקו ל-4 קבוצות של 12 (רגיל, דגם, C. deserticola וחוסם). חולדות בקבוצת הדגמים קיבלו loperamide (0.0625/100 גרם, 10 מ"ל/ק"ג) על ידי מתן. מנת הזנה הראשונה הוכפלה, והתרופה ניתנה בשעה 10:00 כל יום, פעם ביום במשך 20 ימים רצופים. לקבוצה הרגילה ניתנה אותה כמות של תמיסת מלח רגילה על ידי מתן מתן. בנוסף, קבוצת המודל טופלה ב-C. deserticola (0.156 גרם/100 גרם, 10 מ"ל/ק"ג) באמצעות מתן מתן. לקבוצת החוסמים ניתנו C. deserticola (0.156 גרם/100 גרם, 10 מ"ל/ק"ג) במתן מתן ו-STI571 (25 מ"ג/מ"ל, 1 מ"ל/ק"ג) בהזרקה תוך-צפקית. במהלך הניסוי, משקל הגוף, משקל הצואה ומצב הצואה תועדו כל 10 ד'. לא אירע מוות בשוגג באף אחת מהחולדות. 20 ימים לאחר מכן, החולדות נהרגו, ורקמת המעי הגס הוסרה לבדיקה ולשימור חנקן נוזלי. החלקים הנותרים תוקנו והוטמעו.

ניתוח היסטופתולוגי:החולדות שצמו לילה הורדמו על ידי הזרקה תוך צפקית עם 7 אחוז כלור הידרט (5 מ"ל/ק"ג) למחרת. הבטן נפתחה כדי להפריד את רקמת המעי הגס, ו-8-10 מ"מ מהמעי הגס הוסר. תוכן המעי הוסר על ידי ניעור עדין בפוליבוטילנסוצ'ינט מקורר מראש וקיבוע למשך 24 שעות בתמיסת קיבוע פרפורמלדהיד של 4 אחוזים. בוצעה הטבעת פרפין קונבנציונלית. קטעי רקמה (5 מיקרומטר) הוסרו עבור צביעת המטוקסילין ואאוזין, והמורפולוגיה ההיסטופתולוגית נצפתה תחת מיקרוסקופ.

זיהוי ביטוי של SCF ו-C-kit על ידי צביעה אימונוהיסטוכימית:רקמות הפרפין שנבדקו על ידי ההיסטופתולוגיה לעיל נחתכו, הועברו לחתוך עם אתנול שיפוע קסילן מפורק שעווה, אנטיגן תוקן על ידי חום, ונאטמו למשך שעה עם סרום עיזים בטמפרטורת החדר. נוגדנים ראשוניים של SCF ו-C-kit נוספו טיפה, ורקמות נשמרו למשך הלילה ב-4 מעלות. לאחר שטיפה עם פוליבוטילנסוצ'ינט, חזרת פרוקסידאז ירדה כדי לסמן נוגדן משני, נשטפה בפוליבוטילן סוצ'ינט למשך 5 דקות, טיפה 2,4-תמיסת כרומוגן דיאמינובוטורית, צביעה מחדש עם המטוקסילין, התייבשות בדרגה הפוכה של אלכוהול, שקוף על ידי קסילן. חותם שרף. מבחינה מיקרוסקופית, הגרעינים היו כחולים-סגולים, ותוצרי התוצאה החיובית היו חלקיקים בצבע צהוב חום או צהוב.

זיהוי ביטוי של C-kit mRNA ברקמת המעי הגס על ידי תגובת שרשרת כמותית-פולימראז בזמן אמת (RT-qPCR):רקמת המעי הגס קפואה של חולדה נטחנה על ידי הומוגנייזר, ונוספה 1 מ"ל RNAiso Plus. ה-RNA הכולל של רקמת המעי הגס הופץ בשיטת כלורופורם/איזופרופנול, ואיכות ה-RNA זוהתה על ידי אלקטרופורזה של ג'ל. לאחר שזוהה על ידי מדמיית ג'ל Bio-Rad, RNA 1 ug הועתק לאחור ל-cDNA על ידי Takara PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit. על פי זיהוי הגן של מסד הנתונים של NCBI: 64030, אזור ה-CDS של הגן C-kit נמצא ושולב עם NCBI Primer-Blast עיצוב רצף פריימר, אשר היה מסונתז על ידי Sangon Biotech Co. Ltd, C-kit רצף פריימר חישת גדיל 5'-AGGT GTACCGTTCCTGTCCC-3', גדיל אנטי-חושי 5'-GGCTGGATTTGCTCTTTGCTGT-3', - actin sense strand 5'-CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC-3', antisense strand 5'-CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. הגברה של PCR בוצעה במכשיר Bio-RadCFX90 Real-Time PCR. התנאים לבדיקת PCR היו דנטורציה ראשונית ב-95 מעלות למשך 5 דקות, 30 מחזורים של 95 מעלות למשך 30 שניות, 60 מעלות למשך 30 שניות ו-72 מעלות למשך דקה ולאחריה הארכה סופית ב-72 מעלות למשך 10 דקות. 2-ΔΔCt (ΔCt=ערך Ct - -actin Ctvalue) נלקח לניתוח ביטוי גנים יחסי.

זיהוי רמת ביטוי החלבון של Cx43 ו-AQP3 ברקמת המעי הגס על ידי סופג ווסטרן:כ-1 ס"מ של רקמת המעי הגס קפואה נאספו והוסרו עם נוזל פירוליזה חזק של RIPA (100 μL). הרקמה הומוגנית עם זכוכית הומגנייזר 20 פעמים והועברה לצינור צנטריפוגה של 1.5 מ"ל. הסופרנטנט הוצא לאחר צנטריפוגה ב-12000 סל"ד ב-4 מעלות למשך 5 דקות, וריכוז החלבון הכולל בסופרנטנט נקבע בשיטת BCA. הסרנו חלבון דנטור של 25 אג' כדי לבצע אלקטרופורזה של ג'ל נתרן דודציל סולפט-פוליאקרילאמיד ולאחר מכן העברנו את החלבונים בג'ל לממברנה פוליווינילידן פלואוריד בזרם קבוע של 200 mA ולאחר מכן אטום על ידי 5 אחוז חלב דל שומן נוזל ל-2 שעות בטמפרטורת החדר. נוגדנים ראשוניים תואמים דוללו בנוזל איטום, הודגרו ב-4 מעלות למשך הלילה, ואז שטפו את העמידות של הממברנה והוסיפו נוגדנים שניים. לאחר הוספת נוזל ECL, הם הוכנסו מתחת למד החשיפה לבדיקה על ידי ניתוח צפיפות אופטית.

מיקרוסקופ אלקטרונים העברה:לקחנו כ-1 ס"מ של רקמת מעי הגס פרוקסימלית, קיבענו אותה ב-2.5 אחוז גלוטראלדהיד למשך 24 שעות, ייבשנו אותה עם אצטון מדורג, הטבענו ב-Epon812 וחתכנו קטעים דקים במיוחד של 50 ננומטר על אולטרה-מיקרוטום. החלקים נצבעו באורניום דו חמצני אצטט ובנוזל צביעת עופרת ציטראט בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. צפינו במעי המעי הגס, המיטוכונדריה של תאי אפיתל ותאי גביע תחת מיקרוסקופ אלקטרונים של Philips Tecnai-10.

ניתוח סטטיסטי

תוכנת SPSS 19.0 שימשה לניתוח נתונים, ותוכנת GraphPad Prism8.4 שימשה לשרטוט התוצאות. בדיקת Shapiro-Wilk שימשה לבדיקת תקינות. נתונים עם התפלגות נורמלית יוצגו בממוצע ± SD. פריטי שגיאה שימשו כדי לייצג את הממוצע ± SD של המוגלובין לאחר הטיפול. מבחן t של התלמיד שימש להשוואה בין שתי קבוצות. ניתוח השונות שימש להשוואה בין מספר קבוצות. שיטת Student-Newman-Keuls שימשה להשוואה בין קבוצות מרובות בזוגות, והמבחן של דאנט שימש למדידת ההבדלים בין כל קבוצת ניסוי וקבוצת ביקורת ברצף. הנתונים הקשורים נמדדו לפי מספר נקודות זמן, וניתוח נתוני מדידה חוזר של שונות היה נערכו. אם בדיקת הכדוריות הראתה P > 0.{{10}}5, נעשה שימוש בניתוח שונות של נתוני מדידה חוזרים. אם P < 0.05,="" נלקחה="" משוואת="" ההערכה="" הכללית.="" נתונים="" שלא="" תאמו="" להתפלגות="" נורמלית="" יוצגו="" על="" ידי="" m="" (p25,="" p75),="" ומבחן="" סכום="" הדירוג="" kruskal-wallis="" h="" שימש="" להשוואה="" בין="" קבוצות.="" מבחן="" χ2="" שימש="" להשוואה="" בין="" קבוצות="" כאשר="" הנתונים="" היו="" נתונים="" לא="" מסודרים,="" ומבחן="" χ2="" של="" פירסון="" שימש="" אם="" שיעור="" התאים="" עם="" תדירות="" תיאורטית="">< 5="" היה="">< 20="" אחוז.="" אם="" שיעור="" התאים="" עם="" תדירות="" תיאורטית="">< 5="" היה="" גדול="" או="" שווה="" ל-20="" אחוזים,="" נעשה="" שימוש="" במבחן="" המדויק="" של="" פישר.="" נעשה="" שימוש="" ב-p=""><0.05 כדי="" לקבוע="" שההבדל="" היה="" מובהק="">

איור 1 איור 1 שינויים היסטופתולוגיים של המעי הגס.

תוצאות

תנאים כלליים

יום אחד לאחר מתן הלופרמיד בהשוואה לקבוצה הרגילה, משקל הגוף ומשקל הצואה בקבוצת המודל ירדו באופן משמעותי (P < {{0}}.05),="" אך="" לא="" היה="" הבדל="" משמעותי="" באיכות="" הצואה.="" ציון="" (p=""> 0.05). C. טיפול במדבר בקבוצת המודל האט את הירידה במשקל הגוף ובמשקל הצואה (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="" <="" 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="" <="" 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="" >="" 0.05).="" on="" day="" 20="" before="" sampling,="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" normal="" group,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p="" <="">

היסטופתולוגיה של המעי הגס

צביעת המטוקסילין ואאוזין של רקמת המעי הגס של חולדות מוצגת באיור 1. בקבוצה הרגילה, שרירי המעיים היו שלמים, רירית המעי הייתה שלמה ורציפה, התאים והבלוטות היו מסודרים באופן קבוע. רירית ותת-רירית לא הוחדרו על ידי תאים דלקתיים, ומבנה הרקמה היה תקין. בקבוצת הדגמים נהרסו בעיקרם של מעיים ורירית, נמלים מקומיים נשפכו וסודרו בצורה רופפת, וחלק ממבנה הבלוטה נעלם. בקבוצת C. deserticola, הצביעה ההיסטופתולוגית הייתה פחותה מזו של קבוצת המודל, אך היה נמק בתאי גובלט מסוימים. לאחר הזרקה תוך-צפקית בקבוצת החוסמים, בהשוואה לקבוצת C.deserticola, עדיין היה אובדן מקומי של שרירי מעיים, והיה שבר ואובדן רירית המעי.

איור 2 איור 2 ביטוי של גורם תאי גזע ויחס צפיפות אופטית יחסית ברקמת המעי הגס על ידי זיהוי אימונוהיסטוכימי.

זיהוי ביטוי של גורם תאי גזע וחלבון C-kit על ידי צביעה אימונוהיסטוכימית

צביעה אימונוהיסטוכימית הראתה ש-SCF ו-C-kit באו לידי ביטוי במעי הגס של קבוצת הביקורת. בהשוואה לקבוצת הביקורת, הביטוי של SCF ו-C-kit בקבוצת המודל ירד באופן משמעותי (P < 0.05).="" בהשוואה="" לקבוצת="" המודלים,="" הביטוי="" של="" scf="" ו-c-kit="" בקבוצת="" c.="" deserticola="" גדל="" באופן="" משמעותי="" (p="">< 0.05).="" לא="" היה="" הבדל="" בביטוי="" של="" scf="" ו-c-kit="" בין="" קבוצת="" החוסמים="" והמודלים="" (p=""><0.05, איורים="" 2="">

RT-qPCR

RT-qPCR showed that expression of C-kit mRNA in the model group was significantly lower than in the normal group (Figure 4, P < 0.05). Compared with the model group, C-kit in the C. deserticola group was significantly increased (P < 0.05). There was no significant difference in C-kit mRNA level between the model and blocker groups (P >0.05). תוצאות אלו הצביעו על כך שביטוי C-kit מותאם על ידי C. deserticola השתתף בשיפור העצירות, וחוסמים מעכבים את היעילות של C. מדברית.

יתרונות cistanche סלסה

סופג מערבי

סופג מערבי הראה שחלבון AQP3 בא לידי ביטוי ברמה נמוכה בקבוצת הביקורת הרגילה, בעוד שהוא גדל באופן משמעותי בקבוצת המודל בהשוואה לקבוצת הביקורת (איור 5) (P < 0.05)="" .="" ביטוי="" של="" חלבון="" aqp3="" ירד="" לאחר="" טיפול="" ב-c.="" deserticola,="" וההשפעה="" המעכבת="" של="" c.deserticola="" על="" הביטוי="" של="" aqp3="" נבלמת="" על="" ידי="" טיפול="" בחוסם="" (p="">< 0.05).="" ביטוי="" של="" cx43="" היה="" הפוך="" מזה="" של="" aqp3.="" תוצאות="" אלו="" הצביעו="" על="" כך="" שההשפעה="" הפרמקולוגית="" של="" c.="" deserticola="" על="" חולדות="" עם="" sc="" הושגה="" על="" ידי="" קידום="" הביטוי="" של="" cx43="" ועיכוב="" הביטוי="" של="" aqp3="" (איורים="">

מיקרוסקופ אלקטרונים העברה

לאחר אינדוקציה של לופרמיד, נפיחות מיטוכונדריה ואוטופגיה התרחשו בחלק מתאי האפיתל ברירית המעי הגס בקבוצת המודל. מספרם ואורכם של מיקרוווילי מעיים ירדו, והתרחשה פיקנוזה של תאי גביע (איור 8). לאחר טיפול ב-C. deserticola, מספר המיקרוווילי במעיים גדל. Themicrovilli היו מסודרים בצורה מסודרת, והמבנה היה שלם. תאי הגביע באורך קצר יותר, מורפולוגיה לא סדירה של המיטוכונדריה ופיקנוזה חמורה של תאי גביע.

איור 3 איור 3 ביטוי של C-kit ויחס צפיפות אופטית יחסית ברקמת המעי הגס על ידי זיהוי אימונוהיסטוכימי.

דִיוּן

עצירות שכיחה באוכלוסיית קשישים והיא אחת התסמינים השכיחים המשפיעים על מצב הבריאות ואיכות החיים של קשישים[10,11]. ביניים של הרפואה הסינית המסורתית, Bai et al[12] האמינו שהפתוגנזה הבסיסית של SC היא חוסר תפקוד של תפקוד הולכה של המעי הגס, אי ספיקת גוף סנילי, אובדן הדרגתי של תפקודי כבד וכליות, חוסר צ'י ודם, ואובדן נוזלי גוף. ,מה שהוביל לצואה יבשה, וכתוצאה מכך לעצירות[13]. SC מפעיל לחץ על חולים ובני משפחותיהם בהיבטים רבים, וחשוב לחקור את הפתוגנזה שלו.

ל-C. deserticola תפקידים של חיטוב יאנג הכליות, להועיל לדם ולוויסות חסינות הגוף[14]. C. deserticola ומרתח צמחים סיניים המכילים ג. deserticola נעשה שימוש נרחב בטיפול בעצירות, והאפקט הקליני יוצא דופן. Du et al[15] מצאו במודל של מחסור ביאנג ועצירות של חולדה ש-C. deserticola שיפר את משרעת ההתכווצות של המעי הגס מבודד, חיזק את ההתכווצות של מערכת המעיים והחזיר את רמת ההורמונים במערכת העיכול לנורמה. בנוסף, סיבים תזונתיים של C. deserticola, תוצר לוואי עיבוד של C. deserticola, משפרים את יכולת אחיזת המים של הצואה ויש להם יתרון של מינון נמוך והשפעה טובה בהזנת מעיים ושיפור עשיית הצרכים[16]. המחקר שלנו מצא שטיפול ב-C. deserticola שיפר את הלחות בצואה והיסטופתולוגיה של המעי הגס של חולדות עם עצירות.

ICCs נמצאים בכל מערכת המעיים וממלאים תפקיד חיוני בשליטה העצבית של תנועת המעי כקוצבי לב והעברת עצבי מעיים[17]. פרוטו-אונקוגן מקודד קולטן טירוזין קינאז, C-kit, מתבטא על ידי ICCs, ו-SCF הוא ליגנד של C-kit[18]. מערכת SCF/C-kit חיונית בפיתוח של ICCs. מסלול איתות SCF/C-kit נותח במהלך טיפול בעצירות העברה איטית בחולדות על ידי דיקור[19]. אלקטרואקופונקטורה בנקודת Tianshu הגדילה את מספר ICC של המעי הגס בעכברים שטופלו ב-ACK2-, הגבירה את הביטוי של SCF ו-C-kit חלבונים, והפכה את הפנוטיפ של ICC. מרשם להמרצת צ'י וטחול יכול להגביר את הביטוי של ICC ברקמת המעי הגס ולהגביר את הביטוי של C-kit ו-SCF mRNA, ובכך לשפר את תסמיני העצירות [20]. במחקר שלנו, אימונוהיסטוכימיה הראתה ש-C. deserticola העלה ויסות משמעותי של SCF וחלבון C-kit במודל חולדה של SC, ו-RT-qPCR הראו ש-C. deserticola העלה ויסות משמעותי של ביטוי של C-kitmRNA. חוסם C-kit עיכב את ויסות העל של SCF וביטוי C-kit המושרה על ידי C. deserticola.

תכולת מים צואה והובלת מים במעי הגס קשורים קשר הדוק ל-AQPs, אשר ממלאים תפקיד חשוב במטבוליזם של מים במעיים[21]. במחקר שנערך על חולדות עם עצירות הובלה איטית, מרתח הצרכים שיפר משמעותית את תסמיני העצירות על ידי ויסות ספיגת המים במעי באמצעות הורדת ויסות AQP3 ו-AQP4[22]. במודל עכברוש של עצירות תפקודית, מנגנון הטיפול של Oral Xiaofu Tongjie Fluid לעצירות תפקודית עשוי להתממש על ידי ויסות הביטוי של פוליפפטיד מעי כלי דם ו-AQP3 במעי הגס[23]. Gapjunctions ממלאים תפקיד חיוני בתיווך התכווצות סינכרונית של תאי שריר חלק. Cx43 הוא החלבון החשוב ביותר במהלך תהליך זה[24]. אובדן של Cx43expression עשוי להיות אחראי חלקית לתפקוד מוטורי של שריר חלק[25]. תיקון של מבנה רשת מערכת העצבים של המעי בחולדות עם עצירות מעבר איטית יכול לשפר את הביטוי של Cx43 וכו' ותסמיני עצירות[26]. תוצאות אלו מצביעות על כך שהעלייה ביטוי של AQP3 מפחית את כמות המים בצואה, מה שמוביל לעצירות, שעשויה להיות מנגנון חשוב של עצירות. ביטוי של Cx43 עשוי להיות קשור לכיווץ של שריר חלק של המעי ולהפחית את התרחשות עצירות. במחקר שלנו, ה-Western blotting הראה שביטוי Cx43 גדל וביטוי AQP3 עוכב על ידי טיפול C.deserticola, מה שהביא להתכווצות מוגברת של שריר חלק ולירידה בספיגת מים, וטיפול בחוסם הפך את ההשפעות הללו.

טבליות תמצית Cistanche tubulosaמשתפרעצירותהמושרה על ידילופראמיןומפחיתנזק לרקמת המעי הגס.

למידע נוסף, אנא לחץ כאן.

סיכום

לסיכום, C. deserticola יכול לעכב את הביטוי של AQP3 ולקדם ביטוי של Cx43 דרך מסלול SCF/C-kit, ובכך לשפר עצירות הנגרמת על ידי לופרמין ולהפחית את הנזק לרקמת המעי הגס בחולדות מבוגרות. מחקר זה סיפק בסיס תיאורטי מעודן לשימוש הקליני של C. deserticola.