אפקט טיפולי ומנגנון של מיצוי Ligusticum Wallichii והמרשם על טסטוסטרון מושרה 57 שיערL/6 B Cin C

תַקצִיר:

מטרה לבחון את ההשפעות של היישום המקומי של תמצית Ligusticum wallichii והתמצית המורכבת שלה (כולל Ligusticum wallichii,Cistanche, ג'ינג'ר, Platycladus orientalis, ג'ינסנג, Salvia miltiorrhiza, Polygonum multiflor/6 על C57Llorum) עכברי סבוריאה אלופציה ולאחר מכן לחקור את המנגנונים המעורבים בה.

שיטות מודל ההתקרחות הסבוריאה של עכברי C57BL/6 הוכנס על ידי יישוםטסטוסטרוןתמיסה על הגב למשך 21 יום. לאחר טיפול בתמצית Ligusticum wallichii ותמצית החוזה שלה, האורך והכיסוי של שיער חדש בעכברים הוערכו th. hair gtr עור לחות, שמן ושינויי טמפרטורה נמדדו בבדיקת עור. השינויים ההיסטולוגיים כגון עובי העור, צורת זקיק השיער וגודל העכברים בכל קבוצה נמדדו במיקרוסקופ. הרמות של -MSN, TGF- 1 ו-VEGF בעור של עכברים לאחר מכן

התרופה זוהתה על ידי ELISA.

תוצאות תמצית האלכוהול של Ligusticum wallichii קידמה את השיער שצומח של עכברי התקרחות, וההשפעה של קבוצת המינון הנמוך הייתה טובה יותר מזו של הקבוצה במינון גבוה וקבוצת הנוסחה המורכבת. תוצאות ערכי הלחות, השמן והטמפרטורה הראו כי לחות העור של עכברי המודל ירדה, תכולת השמן גדלה, הרקה גדלה מעט. לאחר הטיפול, תכולת המים, תכולת השמן והטמפרטורה של העכברים חזרו לערכים תקינים. תוצאות היסטולוגיות הראו כי Ligusticum wallichii וצורתו המורכבת עלולים להגביר את עובי העור וחוסר תחושה

זקיקי שיער בשלב הצמיחה של עכברים. יתרה מכך, מינונים גבוהים ונמוכים של Ligusticum wallichii ונוסחת התרכובת יכולים לקדם את התוכן של -MSN, TGF- 1 ו-VEGF בעור עכברים במידה שונה.

מסקנה היישום האקטואלי שלתרופה סינית מסורתיתLigusticum wallichii יכול לקדם את צמיחת השיער בעכברים עם התקרחות אנדרוגנטית l על ידי שחזור החום והחום בעכברי מודל התקרחות, והגברת VEGF, -MSN ו-TGF של העור- 1.

מילות מפתח: Ligusticum wallichii; C57BL/6עכברים; התקרחות סבוריאה;טסטוסטרון

תרופה סינית מסורתיתמאמין שהיווצרות נשירת שיער קשורה למחסור בכבד ובכליותוהחולשה של צ'י דם. לתרופות סיניות מסורתיות רבות יש את הפונקציות שלהזנת כבד וכליות, תמצית ודם מזין, קירור דם וקידום זרימת הדם, והם משמשים לעתים קרובות עבור התקרחות ו leukoplakia. לצ'ואנג'יונג יש מאפיינים של טבע חם, טעם חריף וטעם מעט מר. זה תועד לראשונה ב-"Shen Nong's Materia Medica", וניתן להשתמש בו בשילוב עם תרופות אחרות כדי לקדם את זרימת הדם, לקדם צ'י, להוציא רוח ולהקל על כאבים [7]. לתרופות סיניות מסורתיות אחרות כמו ג'ינג'ר יש תפקידים של הקלה על החיצוניות ופיזור קור, חימום האמצע והקלה על הקאות, חימום הריאות והקלה על שיעול [8]; Polygonum multiflorum מזין דם וממלא את המהות [9]

Arborvitae משאיר דם קריר ושיער שחור [9-10]; Salvia miltiorrhiza מעודדת את זרימת הדם, מפזרת קיפאון דם ומקלה על כאב[11];

. מחקר מודרני מצא כי רביםתרופה סינית מסורתיתתרכובות או מרשמים בודדים יכולים לקדם את הצמיחה של זקיקי שיער ושיער, ולהשפיע משמעותית על נשירת שיער. כמהתרופות סיניות מסורתיותיכולים לעכב את הפעילות של 5 -רדוקטאז, בעלי פעילויות אנטי דלקתיות, אנטיבקטריאליות, נוגדות חמצון ופעילויות פיזיולוגיות אחרות, כל אלו מסייעות במניעת נשירת שיער. מאחר שלמרכיבים הפעילים של הרפואה הסינית המסורתית יש השפעות מתונות ויש להם השפעות תזונתיות ומרפאות, הם שימשו יותר ויותר בקוסמטיקה לצמיחת שיער בשנים האחרונות [13].

Cistanche אנטי אייג'ינג

בניסוי זה, מודל AGA הוקם על עכברי C57BL/6 על ידי יישוםטסטוסטרוןעל הגב, וההשפעות של תמצית Chuanxiong ונוסחה תרכובת (כולל Chuanxiong, ג'ינג'ר, עלה orientalis orientalis, ג'ינסנג, Salvia miltiorrhiza, Polygonum multiflorum) עליו והשפעותיו נחקרו. מנגנון על מנת לספק רעיונות חדשים לפיתוח תכשירים חדשים וניסוחים חדשים למניעת נשירת שיער.

1 חומרים

1.1 ריאגנטים ותרופות

Chuanxiong, Ginger, Cistanche, Arborvitae, Panax ginseng, Salvia miltiorrhiza ו-Polygonum multiflorum נרכשו מ-CHENGDU WECISTANCHE BIOTECH; טסטוסטרון (חלקה: 58-22-0) נרכש מחברת Ron Reagent; מינוקסידיל טינקטורה (חלקה: 20210615) נרכשה מ-Zhejiang Wansheng Pharmaceutical Co., Ltd.; אתנול נטול מים (מספר אצווה: 2021-12-1) נרכש מ-Jindong Tianzheng Fine Chemical Reagent Factory; כלורי הידרט (מספר אצווה: 302-17-0) נרכש מחברת McLean Reagent; - ערכת הורמון מגרה מלנוציטים (-MSH) נרכשה מחברת CUSABIO Reagent (מספר אצווה: N20016218); ערכת Transforming growth factor- 1 (TGF- 1) נרכשה מחברת Signalway Antibody Reagent (מספר אצווה: 211230); ערכת גידול אנדותל כלי דם (VEGF) נרכשה מחברת Signalway Anti-body Reagent Company (מספר חבילה: 211230).

חטיף Cistanche

1.2 מכשירים

קורא Microplate (Thermo Fisher Scientific), מכונת הטבעה EG1160 (לייקה, גרמניה); מכונת איטום אוטומטית מסוג Tissue-Tek® GlasTM 6410 (סאקורה, יפן); מפזר YD-AB (Jinhua Yidi Medical Equipment Co., Ltd.); 1/100,000מאזן אנליטי (sartorius, MSX), מכונת ניקוי קולי (סוג KQ-100), בודק עור (Fuxi), מעטפת חימום (PTHW HEAT-ER), מיקרוסקופ אופטי (BX53 , אולימפוס), מאייד סיבובי, הומוגנית רקמות (KFBIO), צנטריפוגה (Cence, H1650R).

1.3 בעלי חיים

עכברים C57BL/6 (מחלקה SPF), זכר, בני 5-6 שבועות, פיזיים

הכמות של 18-22 גרם סופקה על ידי המרכז לבעלי חיים ניסויים של האוניברסיטה הדרומית לרפואה, מספר רישיון: SCXK (גואנגדונג) 2016-0041.

2 שיטה נסיונית

2.1 הכנת תמיסה רפואית

לתמצית של Chuanxiong (תרופה בודדת), שקלו את החומרים הרפואיים של Chuanxiong, הוסיפו פי 4 מהכמות של 75 אחוז אתנול (v/v), וחממו תחת ריפלוקס למיצוי למשך 4 שעות. לתמצית התרכובת, שקלו Chuanxiong, ג'ינג'ר, עלי arborvitae, ג'ינסנג, Salvia ו-Polygonum multiflorum (היחס הוא 1:1:1:1:1:1) והוסיפו פי 4 מהכמות של 75 אחוז אתנול (v/v) לרפלוקס לחילוץ 4 שעות. תמציות התרופה והתרכובת הבודדת סוננו עם גזה כדי להסיר את שאריות התרופה ורוכזו במאייד סיבובי. תמצית Chuanxiong רוכזה ל-1 g·mL-1 (כולל תרופה גולמית), כקבוצת המינונים הגבוהים של Chuanxiong; לפני השימוש, קבוצת המינון הגבוה דוללה ל-0.5 mg·mL-1 כקבוצת המינון הנמוך של Chuanxiong. עבור Chuanxiong, Ginger, Arborvitae, Panax ג'ינסנג, Danshen ו-Polygonum multiflorum, מרוכזת ל-1 גרם · מ"ל

-1 (כולל הכמות הכוללת של תרופות גולמיות). שומרים את התמצית המוכנה במקרר ב-4 מעלות.

Cistanche לשפר את הטסטוסטרון

2.2 דוגמנות

פרט לקבוצה הריקה, עכברי C57BL/6 בקבוצות אחרות הורדמו על ידי הזרקה תוך צפקית של כלורלי הידרט (4 אחוזים, w/v), והשיער האחורי הוסר עם קרם אפילציה במינון של 10 מ"ג·ק"ג.

מינון -1 של טסטוסטרון נמרח על הגב של עכברים במשך 21 ימים. לאחר 21 יום, כאשר החלק האחורי של העכבר היה חלק וורוד והשיער כבר לא צמח, הדוגמנות נחשבה מוצלחת.

2.3 קיבוץ וניהול בעלי חיים

עכברים זכרים C57BL/6 (דרגת SPF) חולקו באופן אקראי ל-6 קבוצות, עם 6 עכברים בכל קבוצה, אשר אוחסנו בכלובים נפרדים וממוספרו [קבוצה ריקה, קבוצת מודל, קבוצה חיובית של מינוקסידיל, קבוצת צ'ואנג'יונג במינון נמוך וקבוצת גבוהה -מינון קבוצת chuanxiong. , קבוצת תרכובות (Chuanxiong: Ginger: Arborvitae: Ginseng: Salvia: Polygonum multiflorum=: 1: 1: 1: 1: 1)].

לאחר דוגמנות מוצלחת, העכברים בקבוצת המודלים לא קיבלו ניהול; שאר קבוצות העכברים נמרחו ב-0.3 מ"ל תמיסת מינוקסידיל (2 אחוזים), מינונים גבוהים ונמוכים של תמצית Chuanxiong וניסוחים תרכובות על גבם, בהתאמה. במשך 12 ימים, פעם ביום. לאחר המתן, גבם של העכברים כוסה בניילון נצמד בגודל מתאים כדי למנוע אובדן של תמיסת התרופה מהגב. במהלך תקופת המתן, צמיחת השיער על גב העכברים בכל קבוצה נצפתה ונרשמה מדי יום.

2.4 קביעת אורך שיער חדש וכיסוי

ביום ה-8, ה-10 וה-12 למתן, חולצו 10 שערות באופן אקראי מכל עכבר, ואורך השיער (מ"מ) נמדד בסרגל. אפקט הקידום EE1 (אפקט משפר) מחושב לפי הנוסחה הבאה:

אפקט חיזוק (אורך שיער) =

אורך שיער (קבוצה מנוהלת)

אורך שיער (סט דגם)

פורמולה 1)

בנוסחה (1), אורך השיער (קבוצת ניהול) הוא הערך הממוצע של אורך השיער שזה עתה נולדו של עכברים בכל קבוצת תרופות (n=6); אורך השיער (קבוצת המודל) הוא הערך הממוצע של אורך השיער שזה עתה נולדו של עכברים בקבוצת הביקורת (הדגם) (n=6).

בימים ה-4, ה-8 וה-12 למתן, השטח שכוסה על ידי השיער שזה עתה נולד בגב העכברים חושב על ידי תוכנת imageJ, וכיסוי השיער (אחוז) ואפקט הקידום EE2 חושבו לפי הנוסחה הבאה :

כיסוי שיער ( אחוזים )=אזור שיער גב אזור אפילציה

נוסחה (2)

אפקט קידום (שיעור כיסוי שיער)=שיעור כיסוי שיער (קבוצת ניהול) שיעור כיסוי שיער (קבוצת דוגמניות)

בפורמולה (3), אזור השיער בפורמולה (2) הוא האזור המכוסה על ידי השיער שזה עתה נולד בגב העכבר, והאזור המוחלף בגב הוא האזור של כל האזור המגולח בגב העכבר. עכבר; בנוסחה (3), כיסוי השיער (קבוצת הניהול) הוא השטח של כל האחוז הממוצע של כיסוי שיער חדש בקבוצת הניהול (n=6), וכיסוי השיער (קבוצת הביקורת) היה הערך הממוצע של אחוז השיער החדש בקבוצת הבקרה (הדגם) (n=6).

2.5 קביעת לחות העור, השמן והטמפרטורה

לאחר 12-טיפול יום בעכברים, נעשה שימוש בבודק עור (Fuxi) למדידה ורישום של ערכי הלחות, השמן והטמפרטורה של העור האחורי של העכברים, כדי לחקור את ההשפעות השונות של טסטוסטרון ותרופות על אלה מדדי עור, ולהעריך את ההשפעה של תרופות על עכברי מודל AGA. האפקט הטיפולי.

2.6 תצפית היסטולוגית של עור עכבר

לאחר 12 ימי טיפול, העכברים הוקרבו, העור האחורי הוסר מיידית, תוקן בתמיסת פרפורמלדהיד של 4 אחוז, התייבש, הוטמע בפרפין, נחתך, נצבע בהמטוקסילין-אאוזין (HE), והפרוסות המוכתמות הונחו בתוך אוטומטי לחלוטין מבנה העור, שינויים בעובי וצמיחת זקיקי שיער של עכברים בקבוצות שונות נצפו על ידי סריקה בסורק שקופיות (KFBIO).

2.7 קביעת גורמי -MSH, TGF- 1 ו-VEGF בעור של עכבר

גורמי -MSH, TGF- 1 ו-VEGF הופעלו לפי ההוראות הרלוונטיות של ערכת Mouse -MSH, ערכת Mouse TGF- 1 ו-Mouse VEGF, בהתאמה.

2.8 שיטת עיבוד סטטיסטית

תוכנה סטטיסטית SPSS 21.0 שימשה לניתוח סטטיסטי, ונתוני הניסוי הובאו כממוצע ± סטיית תקן (x ± s).

תמיכה:

wallence.suen@wecistanche.com