הקשר בין פגיעת איסכמיה-רפרפוזיה (IRI) לתפקוד הכליות

איש קשר:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

חלק Ⅰ: מטפורמין תנאי קדם ומיזוג לאחר להפחתת פציעת רפרפוזיה של איסכמיה בדגם זלוף מכונה של מכונה מבודד Ex Vivo וכליות חזיריות

Tobias M.Huink, Leonie H.Venemal, Rene A.Posma,Nynke J.de Vries, Andrie C.Westerkampl, & et al.

מהו הידע הנוכחי בנושא?

פגיעה ב- lchemia-reperfusion injury (IRI) משפיעה לרעה על תוצאות השתלת כליה, בעוד שמטפורמין הוצע להחליש את IRI מעבר לפעולותיו להורדת רמת הסוכר. זלוף מכונה מספק פלטפורמה להוספת חומרי הגנה, כמו מטפורמין, לפני או במהלך זרבול חוזר כדי להפחית את IRI. נתונים קודמים הראו שהתניה מוקדמת של מטפורמין הצליחה לשפר את תפקוד הכבד והרב במהלך זלוף מכונה נורמותרמית והשתלה לאחר מכן של כבדי חולדה.

צמח עשבי תיבול cistancheלתפקודי כליות

לאיזו שאלה פנה המחקר הזה?

במחקר זה, השפעות מועילות פוטנציאליות של התניה מוקדמת ואחרי התניה עם מטפורמין על IRI הוערכו במודלים שונים של זלוף מכונה נורמותרמית מבודדים Ex vivo באמצעות כליות חולדה וחזירים.

מה מחקר זה מוסיף לידע שלנו?

אנו מראים שגם התניה מוקדמת של מטפורמין וגם התניה לאחר התניה הפחיתו את הפגיעה בכליות החולדות והחזירים, אך השיפורים היו מינוריים. עדיין לא ידוע אם הוספת מטפורמין במהלך זלוף מכונה מביאה לשיפור באיכות האיברים לאחר ההשתלה. יתרה מכך, אנו מראים כי השימוש בריכוזים רעילים in vivo של מטפורמין במהלך זלוף מכונה לא היה קשור לנזק תאי, מה שמצביע על כך שנראה בטוח להשתמש בריכוזים אלו במהלך זלוף ex vivo של כליות.

כיצד זה עשוי לשנות את הפרמקולוגיה הקלינית או את מדע התרגום?

מיושם נרחב, זלוף מכונה הוא פלטפורמה אידיאלית להתערבויות תרופתיות להפחתת או מניעת IRI, ולבדיקת תרופות באיברים מבודדים ex vivo. מכיוון שההשפעות של מטפורמין היו מינוריות, עדיין לא ברור אם יש להשתמש בו כחומר מגן מחדש לפני ההשתלה. התוצאות שלנו אינן בהכרח תומכות בשימוש במטפורמין כהתערבות לפני השתלת כליה, אך נדרש מחקר עתידי כדי לחקור אם מטפורמין בשילוב עם טיפולים פוטנציאליים אחרים עשוי להועיל.

איפה אני יכול לקנותאבקת cistanche

תוצאות

פרמטרי זלוף

ה-IVR נשאר קבוע במהלך NMP במודל החולדות, ללא הבדלים משמעותיים בין קבוצות הטיפול (איור S1a). לא נמצאו הבדלים משמעותיים בקבוצות הכליות החזיריות לגבי IVR (איור S1b). פרמטרים של תפקוד כליות

לא נצפו הבדלים משמעותיים בפינוי הכולל של קריאטינין בין כל קבוצות הטיפול במחקר החולדות (איור 2א). במחקר החזירים, פינוי קריאטינין הכולל לא היה שונה בין הכליות שטופלו במטפורמין ובין הביקורות (איור 2b), אם כי הייתה נטייה לפינוי קריאטינין נמוך יותר בקבוצה שטופלה במטפורמין (P=0.07).

לחולדות שטופלו מראש במטפורמין, שכליות שלהן זרפו עם 30 מ"ג/ליטר מטפורמין, היו עם ייצור שתן נמוך משמעותית בהשוואה לחולדות שטופלו מראש עם מטפורמין ללא זלוף לאחר מכן עם מטפורמין (P= 0.02), וחולדות שטופלו מראש במי מלח דרך הפה. הכליות טופלו לאחר התניה עם 30 מ"ג/ליטר מטפורמין (P=0.04). טיפול לאחר התניה עם 300 מ"ג/ליטר מטפורמין לא העלה הבדל משמעותי בייצור השתן, ללא קשר לתנאי התניה. בהשוואה לביקורות, ייצור השתן הכולל בכליות חזיר היה נמוך משמעותית בכליות שטופלו ב-met-formintion (P=0.004; איור 2c,d).

במחקר החולדות, הפרשת החלבון הכוללת הייתה נמוכה יותר בכליות עם מטפורמין מנוהלות מראש ללא זלוף לאחר מכן עם מטפורמין מאשר בקבוצת הביקורת (P=0.001). לא נצפו הבדלים בהפרשת החלבון הכוללת בין כל קבוצות הניסוי האחרות (איור 2ה).

במהלך NMP של כליות חזיריות, לא נמצאו הבדלים משמעותיים בהפרשת חלבון בשתן בין קבוצת המטפורמין לקבוצת הביקורת (איור 2ו).

cistanche tubulosa

סמני פציעה

חולדות שעברו תנאי מוקדם של מטפורמין שכליותיהן לא היו מפוזרות עם מטפורמין היו עם שחרור LDH נמוך יותר מאשר בביקורת (P= 0.005). לחולדות שעברו תנאי מוקדם של מטפורמין שכליותיהן עברו זילוף עם 30 מ"ג/ליטר מטפורמין היו בעלי שחרור LDH נמוך יותר מאשר לביקורות (P=0.01) והיה להם שחרור LDH נמוך יותר מחולדות מטופלות מראש במי מלח שכליותיהן הוזלו ב-30 מ"ג/ליטר מטפורמין (P=0.04). זלוף עם 300 מ"ג/ליטר מטפורמין לא הביא לירידה בשחרור LDH (איור 3א). שחרור LDH הכולל במהלך NMP לא היה הבדל בין כליות חזיריות שטופלו במטפורמין ובין ביקורת (איור 3b).

גם התניה מוקדמת וגם התניה לאחרית עם מטפורמין לא היו קשורים להבדל משמעותי בכמות הכוללת של ASAT המשוחרר במחקר החולדות (איור 3c). כמו כן, לא נמצאו הבדלים בין כליות שטופלו במטפורמין לבין בדיקות ברמות ASAT בכליות חזיריות (איור 3ד).

סימנים מורפולוגיים של פציעת רפרפוזיה של איסכמיה בהשוואה לביקורות, נמק צינורי הצטמצם באופן משמעותי בכליות שזלו ב-300 מ"ג/ליטר מטפורמין, ללא תלות במי מלח (P=0.02) או במטפורמין (P=0). 02) התניה מוקדמת. חולדות שעברו תנאי מוקדם של מטפורמין שכליותיהן הוזלו במינון 300 מ"ג/ליטר של מטפורמין סבלו פחות נמק צינורי בהשוואה לחולדות מנוהלות מראש עם מטפורמין ללא זלוף מטפורמין לאחר מכן (P=0.01) וחולדות מטפורמין מותנות מראש שכליותיהן עברו זלוף עם 30 מ"ג/ליטר. (P=0.02; איור 3ה).

ריקון תאי צינורי פרוקסימלי הצטמצם באופן משמעותי בחולדות עם מי מלח שהכליות שלהן הוזלו ב-300 מ"ג/ליטר של מטפורמין בהשוואה לחולדות שעברו עיבוד מלוחים שהכליות שלהן עברו זלוף ב-30 מ"ג/ליטר מטפורמין (P=0.05). ה-vacuolation היה גם נמוך יותר באופן משמעותי בכליות עם מטפורמין מנוהלות מראש עם 300 מ"ג/ליטר מטפורמין בהשוואה לכליות מטפורמין מותנות מראש ללא זלוף מטפורמין (P=0.02) (איור 3g). לא נראו הבדלים סטטיסטיים לגבי היווצרות בצקת במחקר החולדות (איור 3f). לא נצפו הבדלים בסימנים מורפולוגיים של IRI בסוף ה-NMP בכליות חזיריות (איור 3h).

איור 3סמני פגיעה בנוזל זלוף ופגיעה מורפולוגית ברקמה לאחר זלוף מכונה נורמותרמית. סך סמני הפציעה חושבו כשטח מתחת לעקומה. כמות כוללת של לקטאט דהידרוגנאז (LDH) (a, b) ו-aspartate aminotransferase (ASAT) (c, d) ב-perfusate. הרקמות נבדקו על נמק של תאי צינורי פרוקסימליים (נע בין קל לחמור: 1-5), בצקת (נע בין קלה לחמורה: 1-4), וריקון תאי צינורי פרוקסימלי (נע בין קל לחמור: 1-4) ב מחקר החולדות, בהתאמה (e–g). סימנים של פגיעה באיסכמיה בכליות חזיריות נבדקו (ח). הנתונים מוצגים כממוצע ± שגיאת תקן של הממוצע. קבוצות מכילות 5-7 כליות. *P < 0.05,="" **p="">< 0.01,="" בהשוואה="" לכל="" הקבוצות="">

ביטוי גנים

ביטוי mRNA יחסי של גנים המעורבים בוויסות טונוס כלי הדם הוערך בכליות חולדה וכליות חזיריות. בהשוואה לביקורות, הביטוי של EDN-1 ירד באופן משמעותי בכליות חולדות עם זלוף של 300 מ"ג/ליטר מטפורמין, ללא קשר להתניה מוקדמת עם מי מלח (P=0.002) או מטפורמין (P{{4} }.005;איור 4א). בהשוואה לחולדות שטופלו מראש בתמיסת מלח שכליותיהן עברו זילוף ב-30 מ"ג/ליטר מטפורמין, ביטוי ה-eNOS ירד באופן משמעותי בביקורות (P=0.04) וחולדות שעברו טיפול מראש במי מלח שכליותיהן הוזלו ב-300 מ"ג/ליטר מטפורמין (P=0.04) {11}}.01; איור 4ב). לא נמצאו הבדלים לגבי ביטוי EDN-1 או eNOS במחקר כליות חזיר (איור 4h). ביטוי KLF-2 לא היה שונה בין הקבוצות במחקר על כליות החולדות והחזירים (איור 4c,h).

cistanche סין עשבpdf

יתרה מכך, גנים המעורבים בהפעלת האנדותל הוערכו. ביטוי ה-vWF לא היה שונה בין קבוצות הטיפול בכליות חולדה וחזירים (איור 4ד). בהשוואה לביקורות, ביטוי הגנים של VCAM-1 ירד באופן משמעותי בכליות חולדות עם זרוף של 30 מ"ג/ליטר מטפורמין ללא קשר לתנאי מוקדם עם מי מלח (P=0.002) או מטפורמין (P=0 .03). לחולדות שטופלו מראש במי מלח, שכליותיהן עברו זילוף ב-30 מ"ג/ליטר מטפורמין, היו בעלי ביטוי נמוך יותר של VCAM-1 מאשר חולדות עם תנאי מוקדם של מטפורמין, שכליותיהן עברו גם זלוף ב-30 מ"ג/ליטר מטפורמין (P=0.04). חולדות עם תנאי מלח שהכליות שלהן הוזלו ב-300 מ"ג/ליטר מטפורמין היו בעלי ביטוי VCAM-1 גבוה יותר באופן מובהק מאשר חולדות מנוהלות מראש עם מי מלח שכליותיהן הוזלו ב-30 מ"ג/ליטר מטפורמין (P=0.002). מצד שני, לחולדות שעברו תנאי מוקדם של מטפורמין שכליותיהן היו מפוזרות ב-300 מ"ג/ליטר מטפורמין היו בעלי ביטוי VCAM-1 גבוה יותר באופן מובהק מאשר לבקרות (P=0.03; איור 4ה).

בהשוואה לחולדות מנוהלות מראש עם מטפורמין שכליותיהן עברו זלוף עם 300 מ"ג/ליטר מטפורמין, ביטוי הגנים L-6 ירד בחולדות מטופלות מטפורמין שהכליות שלהן לא עברו זלוף עם מטפורמין (P=0.03), ומטפורמין. חולדות עם תנאים מוקדמים שכליותיהן חולפו ב-30 מ"ג/ליטר מטפורמין (P=0.004; איור 4ו).

ביטוי HSP-70 בכליות חולדה לא היה שונה בין קבוצות הטיפול (איור 4g). הביטוי של vWF, VCAM-1 ו-IL-6 לא היה שונה באופן מובהק בין קבוצות ניסוי בתוך כליית החזיר מחקר (איור 4i). עם זאת, HSP-70 היה מווסת עלייה בכליות חזיר שטופלו במטפורמין (P=0.03; איור 4l).

איור 4ביטוי יחסי mRNA של גנים המעורבים בוויסות טונוס כלי הדם, כולל כיווץ כלי דם (אנדותלין 1 (EDN-1)), הרחבת כלי דם (סינתאז תחמוצת חנקן אנדותל (eNOS)), ולחץ גזירה של זרימה למינרית (גורם 2 דמוי קרופל (KLF-2)) הן בחולדה (בהתאמה, a–c) והן במחקר חזירים (h). גנים המעורבים בהפעלת האנדותל, ממלאים תפקיד בטסיות (פקטור פון ווילברנד (vWF)) והיצמדות לויקוציטים (מולקולת הידבקות של תאי כלי דם 1 (VCAM-1)), ותהליכים דלקתיים (IL{{7} }) הוערכו בחולדות (בהתאמה, d-f) וכליות חזיריות (i). ביטוי הלם חום של חלבון 70 (HSP{{10}}) הוערך גם בכליות של חולדה וגם בכליות חזיר (בהתאמה, g, i). הנתונים מוצגים כממוצע ± שגיאת תקן של הממוצע. קבוצות מכילות 5-7 כליות. *P < 0.05,="" **p=""><>

לחץ כאן לחלק Ⅱ & Ⅲ

הערה: התרופה הסינית המסורתיתעשבי תיבול cistanche(המכונה גם "עשב הדרקון" ו"ג'ינסנג מדברי"), גדל רק במדבריות הצחיחים והחמים. בתור אחד מתשעת הצמחים האלמותיים,Cistanche(cistanche tubulosa/cistanche deserticola/desertliving cistanche/cistanche salsa) תוכן עם מרכיבים יעילים עשירים כגון echinacoside, acteoside, סך phenylethanoid glycosides, flavonoids, polysaccharides, וכו'.cistancheעשב מזין יקר וחומר מזון לחסינות של אנשים, איברים פנימיים ותאי מוח ונוירונים וכו'. המחקרים הפרמקולוגיים המודרניים אישרו את ההשפעות הבאות של cistanche(היתרונות של cistanche): לשפר חסינות;לשפר את התפקוד המיני ותפקוד הכליותn; נוגד עייפות; נוגד הזדקנות; לשפר את הזיכרון; מחלת אנטי-פרקינסון; מחלת אנטי-אלצהיימר; נוגד חמצון; קלות-עצירות; אנטי דלקתי; לקדם את צמיחת העצם, הלבנת עור; להגן על הכבד; וכו '