השפעות הגנה של אכינאקוסיד על נפרופתיה סוכרתית

למידע נוסף:ali.ma@wecistanche.com

השפעות הגנה של אכינאקוסיד מ-cistanche על תפקוד הכליות, רקמת הכליה, ונזק לתאי mesangial בחולדות עם נפרופתיה סוכרתית

He Qin, Liu Fan, Wang Hongli, Li Jianping, Duan Jun (המחלקה לצוות רפואי, מחלקת Caotang, האקדמיה למדעי הרפואה של סצ'ואן, בית החולים העממי של מחוז סצ'ואן, צ'נגדו, סצ'ואן)

מילות מפתח: Cistanche; echinacoside;תמצית Cistanche,נפרופתיה סוכרתית; פיברוזיס אינטרסטיציאלי בכליות; אפופטוזיס; עכברוש

חולה סוכרתנפרופתיה(DN) הוא נפוץסוכרתיסיבוך מיקרו-וסקולרי, שיכול לא רק לגרום לנזק לכליות אלא גם להשפיע על איברים אחרים. פיברוזיס טובולו-אינטרסטיציאלי בכליות הוא התכונה הפתולוגית העיקרית בקלינית [1]. הפתוגנזה שלנפרופתיה סוכרתיתזה מסובך. מחקרים קודמים [2-3] האמינו שהמחלה נגרמת בעיקר מהיפרגליקמיה בסוכרתיחולים, שגרמו לשינויים המודינמיים בכליות ולמטבוליזם לא תקין. הביטויים הקליניים היו פרוטאינוריה וירידה בקצב הסינון הגלומרולרי. לַחֲכוֹת. כיום, חולים עםנפרופתיה סוכרתיתעדיין חסרות שיטות טיפול קליניות יעילות ומציאת תרופות יעילות חדשות היא המפתח לטיפול בנפרופתיה סוכרתית.

אכינאקוסייד(ECH) הוא אחד התמציות שלCistanchetubulosa, בעלת השפעה של הזנת הכליה וחיזוק היאנג [4]. מחקר פרמקולוגי מודרני [5] מראה זאתechinacosideמcistancheבעל השפעות נוגדות חמצון, אנטי אפופטוזיס, אנטי דלקתיות ותרופתיות כגון שיפור זרימת הדם והמיקרו-סירקולציה.Echinacosideמcistancheיכול גם לווסת את חילוף החומרים של הגלוקוז בגוף ולשפר את סבילות הגלוקוז. בשנים האחרונות, מחקרים [6] הראו זאתechinacosideמcistancheעלול לעכב את הפיברוזיס הכלייתי שלנפרופתיה סוכרתיתחולדות על ידי עיכוב מסלול האותות של גורם הגדילה המתמר (TGF-) והגנה על רקמת כליה של חולדה. עם זאת, יש מעט דיווחים בספרות על הטיפול בנפרופתיה סוכרתיתעםCistancheechinacosideוהמנגנון הספציפי שלו להגנהנפרופתיה סוכרתיתבחולדות עדיין לא ברור. לכן, מחקר זה חקר עוד יותר את ההשפעות והמנגנונים האפשריים שלechinacosideמCistancheעל פיברוזיס כלייתי ואפופטוזיס של תאי רקמת כליה בנפרופתיה סוכרתיתחולדות ומטרתו לספק בסיס תיאורטי ליישום הקליני שלechinacosideמCistanche.

אכינאקוסייד מ Cistancheמגןנפרופתיה סוכרתית

לחץ ליתרונות ותופעות לוואי של Cistanche tubulosa

1 חומר ושיטות

1.1 בעלי חיים

60 חולדות SD, זכר, דרגת SPF, בנות 8 שבועות, משקל גוף 240-280 גרם, מסופק על ידי Beijing Weitong Lihua Laboratory Animal Technology Co., Ltd., מספר רישיון בעל חיים: SCXK (בייג'ינג) 2015-0001, בעלי חיים מספר תעודת איכות: 11400700106210, גדל במעבדת מרכז החיות של בית החולים, שמירה על טמפרטורת החדר קבועה על 25 מעלות, מדמה את היום והלילה, שינוי תנאי האור אחת ל-12 שעות והחיות חופשיות לאכול ולשתות.

1.2 תרופות וריאגנטים

אכינאקוסייד, מכון לחקר מזון ותרופות בסין, מספר חבילה: 111670-201706; Losartan Potassium, Hangzhou Merck Pharmaceutical Co., Ltd., National Medicine Standard: H20030654; סטרפטוזוטוצין, American Sigma Company, מספר מגרש: 040103; ערכת בדיקת תכולת חלבון שתן, Ningbo Meikang Biotechnology Co., Ltd. Science And Technology Co., Ltd., מספר אצווה: 20170612; ערכת זיהוי TUNEL, Amictech Technology Co., Ltd., מספר אצווה: 20180406; ערכת מיצוי RNA, ערכת שעתוק לאחור, Shanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd., מספר אצווה: 20180705, 20180904; חומצה היאלורונית בסרום (HA), מעכב רקמות מטלופרוטאינאז-1 (TIMP-1) ​​ולמינין (Laminin, LN) ערכת זיהוי, Shanghai Yuanmu Biotechnology Co., Ltd., מספרי אצווה הם: 20180612, 20180624, 20180706; מולקולת הדבקה של תאי כלי דם 1 (מולקולת הדבקה של תאי כלי דם- 1, VCAM- 1), גורם גדילה מתמר (Transforming growth factor, TGF-) ונוגדנים -Smooth muscle actin (-SMA), חברת סנטה קרוז, ארה"ב, מספרי אצווה: sc13160, sc130348, sc-324317; פרוקסיד חזרת אנזים (חזרת פרוקסידאז, HRP) שכותרתו עז נגד ארנבת IgG, חברת DAKO דנמרק, מספר אצווה: P0447.

1.3 דגם מכשיר

מנתח ביוכימי אוטומטי 7600, חברת HITACHI יפן; מד סוכר נייד בדם, Beijing Yicheng Bioelectronics Technology Co., Ltd.; מיקרוסקופ אופטי BX60, חברת OLYMPUS יפן; SN-695B מנתח רדיואימוניות, Shanghai Rihuan Instruments Shenbei Co., Ltd.; מכשיר PCR כמותי פלואורסצנטי IQTM5, חברת Bio-Rad האמריקאית; מכשיר DYY-6C אלקטרופורזה, בייג'ינג ליויי מכשירי מפעל; AlphaImager HP לניתוח הדמיית ג'ל, חברת Alpha Innotech האמריקאית.

1.4 שיטות קיבוץ, שכפול מודל וניהול

60 חולדות הוזנו מראש במשך שבוע אחד וחולקו באופן אקראי לקבוצת ביקורת, קבוצת מודל,echinacosideקבוצות במינון גבוה, בינוני ונמוך, וקבוצת אשלגן Losartan, 10 חולדות בכל קבוצה. קבוצת הדוגמניות,echinacosideהקבוצה, וקבוצת אשלגן לוסארטן טופלו בתזונה עתירת שומן וסוכר בשילוב עם סטרפטוזוטוצין במינון נמוך כדי לגרום למודל של חולדהנפרופתיה סוכרתית[6]. לפני שהדגם שוכפל, החולדות צמו עם מים במשך 12 שעות. החולדות בקבוצת הביקורת קיבלו מזון רגיל, ולשאר הקבוצות האכילו מזון עתיר שומן וסוכר. לאחר 4 שבועות של האכלה רציפה, החולדות בקבוצת הביקורת קיבלו זריקה תוך-צפקית אחת של נפח שווה של חיץ ציטראט, והקבוצות הנותרות קיבלו זריקה תוך-צפקית אחת של סטרפטוזוטוצין Bacteriocin (40 מ"ג·ק"ג-1) ל לשכפל את מודל החולדות שלנפרופתיה סוכרתית. 72 שעות לאחר הזרקת סטרפטוזוטוצין לחולדות, רמת הגלוקוז בדם הייתה גדולה או שווה ל-16.7 mmol·L-1, וקצב הפרשת החלבון בשתן 24-לשעה לאחר 3 שבועות היה גבוה מזה של קבוצת הביקורת, וכימת החלבון בשתן 24-בשעה היה גדול מ-50 אחוז לפני שכפול המודל, מה שמצביע על כך שהמודל העותק הצליח. ארבעה שבועות לאחר הזרקת סטרפטוזוטוצין, המינון הנמוך, הבינוני והגבוהechinacosideלקבוצות ניתנו 20 מ"ג·ק"ג-1, 50 מ"ג·ק"ג-1 ו-100 מ"ג·ק"ג-1echinacoside(להמיס במלח רגיל ב-37 מעלות לפי התקן של 5 מ"ל·ק"ג-1 למשקל הגוף של חולדות. חולדות מקבוצת Losartan Potassium מקבלים מתן פומי של Losartan Potassium 16 מ"ג·ק"ג-1 קבוצת המודל וקבוצת הביקורת מקבלים אותו נפח.תמיסת מלח רגילה ניתנה פעם ביום למשך שבועיים.

1.5 אוסף דגימות

לאחר המתן האחרון, החולדות צמו ללא מזון ומים, ונרשמה כמות המים שצרכו החולדות במשך 24 שעות, ונאסף השתן למשך 24 שעות. בשעות הבוקר המוקדמות של היום השני נשקלו החולדות. לאחר איסוף שתן, הזרקה תוך-צפקית של תמיסת נתרן פנטוברביטל של 2 אחוזים 2 מ"ל·ק"ג-1 להרדמה, הפרדה של דם אבי העורקים הבטן של חולדה, צנטריפוגה (3 500 r·min-1, 15 דקות) , והסרום נאסף. אחסן באופן זמני במקרר ב--20 מעלות; מפרידים רקמת כליה של חולדה ומחלקים לשני חלקים, חלק אחד מקובע ב-4 אחוז פרפורמלדהיד, החלק השני מוכן כהומוגנית של 10 אחוז, ומוכנס למקרר בדרגת -80 לשימוש מאוחר יותר.

1.6 קביעת חילוף החומרים של גלוקוז וליפידים בחולדות

קח סרום מכל קבוצת חולדות, השתמש במד סוכר בדם כדי למדוד את רמת הסוכר בדם בצום, ומנתח ביוכימי אוטומטי לזיהוי טריגליצרידים אסטר, כולסטרול, רמות ליפופרוטאין בצפיפות נמוכה.

1.7 24 נלקחו אינדיקטורים הקשורים לפיברוזיס בשתן, תפקודי כליות ואינדיקטורים

שתן של 24 שעות של כל קבוצת חולדות, תכולת המיקרו-חלבון בשתן 24-ה נקבעה על ידי בדיקת רדיואימונית, והפעולה בוצעה בקפדנות לפי ההוראות. הסרום של כל קבוצת חולדות נאסף, ותכולת הקריאטינין והחנקן אוריאה בדם זוהתה על ידי מנתח ביוכימי אוטומטי, רמת TIMP-1 בסרום זוהתה על ידי ELISA, ורמות HA ו-LN זוהו על ידי בדיקת רדיואימונית. הפעולה בוצעה בקפדנות לפי ההנחיות.

1.8 צביעת HE כדי לראות את השינויים הפתולוגיים של רקמת הכליה וצביעת TUNEL

התבונן באפופטוזיס של תאי רקמת כליה. קח את רקמות הכליות הקבועות של כל קבוצה, הטמע אותן בפרפין וחתך אותן. חלק אחד משמש לצביעה HE כדי לצפות בשינויים המורפולוגיים של צינוריות הכליה, הגלומרולי והאינטרסטיטיום הכלייתי תחת מיקרוסקופ אור; החלק השני משמש לצביעה של TUNEL, פועל לפי הוראות הערכה, ותצפית על המספר והחיוביות של תאי רקמת הכליה תחת המיקרוסקופ. מספר התאים, היחס בין מספר התאים החיוביים למספר תאי רקמת הכליה הוא מחושב, שהוא שיעור האפופטוזיס.

2 תוצאות

1. שיטת Western Blot לקביעת הביטוי של חלבון VCAM-1, TGF- ו-SMA ברקמת הכליה

קח כ-50 מ"ג של הומוגנט של רקמת כליות חולדה, ממיס אותו עם lysate תאים המכיל מעכבי פרוטאז, ולחלץ חלבון כולל עם lysate תאים, באמצעות שיטת BCA לכימות חלבון. דגימת החלבון הכוללת שחולצה ב-50 μmol·L-1 הועברה לממברנת ניטרוצלולוזה על ידי אלקטרופורזה של ג'ל פוליקרילאמיד ונסגרה ב-5% חלב רזה, ולאחר מכן נוספו הנוגדן הראשוני (1∶1000) וחלבון -אקטין בהתאמה נוגדן חד-שבטי (1:300), דגירה לילה ב-4 מעלות. לבסוף, הוסף את הנוגדן המשני ודגירה במשך 2 שעות ב-37 מעלות, ועקוב אחר באמצעות electrochemiluminescence. השתמש בתוכנת ניתוח תמונה של Photoshop כדי לנתח את הערך האפור של להקות חלבון.

2 התוצאות מראות את ההשפעה של אכינאקוסיד על חילוף החומרים של גלוקוז ושומנים בחולדות נפרופתיה סוכרתית.

בהשוואה לקבוצת הביקורת, רמת הגלוקוז בדם בצום של החולדות בקבוצת המודל גדלה באופן משמעותי, וההבדל היה מובהק סטטיסטית (P<0.05); triglycerides,="" cholesterol,="" and="" low-density="" lipoprotein="" increased,="" but="" the="" difference="" was="" not="" statistically="" significant="" (p="">0.05) ). בהשוואה לקבוצת המודל, רמת הגלוקוז בדם בצום של חולדות בקבוצות המינון האמצעי והגבוה שלechinacosideוקבוצת לוסארטן אשלגן הופחתה באופן משמעותי, וההבדל היה מובהק סטטיסטית (P<0.05); triglycerides,="" cholesterol,="" and="" low-density="" lipoprotein="" were="" reduced,="" but="" the="" difference="" was="" not="" statistically="" significant="" (p="">0.05).

3 ההשפעות של אכינאקוסיד על חלבון שתן 24-שעה ותפקוד כליות של חולדות נפרופתיה סוכרתית.

בהשוואה לקבוצת הביקורת, רמות המיקרואלבומין בשתן, חנקן אוריאה וקריאטינין בקבוצת המודל עלו באופן משמעותי, וההבדלים היו מובהקים סטטיסטית (P<0.05); compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" middle="" and="" high="" dose="">echinacosideקבוצות רמות המיקרואלבומין בשתן, חנקן אוריאה וקריאטינין של חולדות בקבוצת אשלגן לוסארטן הופחתו באופן משמעותי, וההבדלים היו מובהקים סטטיסטית (P<>

4 ההשפעות של echinacoside על פיברוזיס כליות בחולדות נפרופתיה סוכרתית.

בהשוואה לקבוצת הביקורת, רמות הסרום של HA, TIMP-1 ו-LN בקבוצת המודל עלו באופן מובהק, וההבדלים היו מובהקים סטטיסטית (P<0.05); the="" levels="" of="" ha,="" timp-1,="" and="" ln="" of="" rats="" in="" the="" sartan="" potassium="" group="" were="" significantly="" reduced,="" and="" the="" differences="" were="" statistically="" significant=""><>

5 צביעת HE כדי לצפות בשינויים הפתולוגיים של רקמת הכליה בחולדות עם נפרופתיה סוכרתית.

מבנה התא של רקמת הכליה היה שלם, ולא נראו שינויים פתולוגיים ברורים. צביעת HE של חולדות בקבוצת המודלים והמינון הנמוךechinacosideהקבוצה הראתה: גלומרולוס התנפח והגדיל את נפחו, תאי אפיתל צינוריים של הכליה התנפחו או נשפכו, אינטרסטיטיום כלייתי מלווה בחדירת תאים דלקתיים, וחלק מהיפרפלזיה מסנגיאלית ושגשוג בין-תאי נראו גם הם. לַיֶפֶת. HE צביעה של חולדות באמצע מינונים גבוהים שלechinacosideוקבוצת אשלגן losartan הראו כי הנגעים ברקמת הכליות הופחתו באופן משמעותי, עם כמות קטנה של חדירת תאים דלקתיים, היפרפלזיה מסנגיאלית ופיברוזיס אינטרסטיציאלי היו גם קלים יותר מקבוצת המודל.

6 השפעת אכינאקוסיד על אפופטוזיס של רקמת כליה בחולדות עם נפרופתיה סוכרתית.

צביעת TUNEL הראתה שבהשוואה לקבוצת הביקורת, שיעור האפופטוזיס של חולדות בקבוצת המודל גדל באופן מובהק, וההבדל היה מובהק סטטיסטית (P＜0.05); שיעור האפופטוטי של חולדות בקבוצת אשלגן שזוף הופחת משמעותית, וההבדלים היו מובהקים סטטיסטית (P<>

7 ההשפעות של אכינאקוסיד על הביטוי של גנים הקשורים לאפופטוזיס ברקמות הכליות של חולדות נפרופתיה סוכרתית.

תוצאות RT-PCR הראו שבהשוואה לקבוצת הביקורת, הביטוי של Bax ו-Caspase-3 mRNA בקבוצת המודל היה מווסת באופן משמעותי, והביטוי של Bcl-2 mRNA היה מווסת משמעותית למטה , וההבדל היה מובהק סטטיסטית (P<0.05); compared="" with="" the="" model="" group="" in="" comparison,="" the="" expression="" of="" bax="" and="" caspase-3="" mrna="" was="" significantly="" down-regulated="" in="" the="" middle="" and="" high-dose="">echinacosideקבוצות וקבוצת אשלגן לוסארטן, והביטוי של Bcl-2 mRNA היה מווסת באופן משמעותי, וההבדלים היו מובהקים סטטיסטית (P<>

8 ההשפעות של echinacoside על הביטוי של חלבוני VCAM-1, TGF- ו-SMA בחולדות נפרופתיה סוכרתית.

בהשוואה לקבוצת הביקורת, הביטוי של חלבון VCAM-1, TGF- ו-SMA בקבוצת המודל היה מווסת משמעותית, וההבדל היה מובהק סטטיסטית (P<0.05); the="" expressions="" of="" vcam-1,="" tgf-β,="" and="" α-sma="" proteins="" in="" rats="" in="" the="" dose="" group="" and="" the="" losartan="" potassium="" group="" were="" significantly="" down-regulated,="" and="" the="" differences="" were="" statistically="" significant=""><>

3 דיון

תחילתו שלנפרופתיה סוכרתיתהוא נסתר, והפתוגנזה מורכבת ומגוונת. לאחר היווצרותו, קשה לרפא. זוהי מחלה כרונית עם נזק רב וגורם חשוב למחלת כליות סופנית [8]. חולים עםנפרופתיה סוכרתיתמטופלים לעתים קרובות במעכבי אנזימים הממירים אנגיוטנסין ובאנטגוניסטים לקולטן אנגיוטנסין, אך השפעת הטיפול הקלינית אינה מספקת במיוחד [9]. אשלגן לוסארטן הוא אנטגוניסט לקולטן לאנגיוטנסין Ⅱ, אשר יכול לשמש לטיפול ביתר לחץ דם חיוני. כמה מחקרים [10-11] מראים שאשלגן לוסארטן יכול גם לעכב את האינטרסטיטיום הכלייתי של חולדות עםנפרופתיה סוכרתיתפיברוזיס, הגנה על תפקוד הכליות. לכן, מחקר זה בחר באשלגן Losartan כביקורת חיובית להשוואת ההשפעות המגנות שלechinacosideעל רקמת הכליה של חולדות עםנפרופתיה סוכרתית.מחקרים קליניים [12-13] הראו שהתוכן שלechinacosideבקפסולות Changui Yishen הוא בערך 3.104 מ"ג · ק"ג-1. לאחר המרה על בסיס מינון הניהול של האדם והעכבר, המינון הנמוך ביותר של קפסולות Changui Yishen עבורנפרופתיה סוכרתיתחולדות הוא 0.648 g·kg-1, והמינון הומר ל-echinacosideהוא בערך 2 מ"ג·ק"ג-1. מכיוון שיש מעט דיווחים קליניים על הטיפול בechinacosideעבור סוכרת או נפרופתיה, מחקר זה בוחר פי 10 מהמינון הקליני הנמוך ביותר, כלומר 20 מ"ג·ק"ג-1 אכינאקוסיד כמינון הנמוך, ועולה ברצף. 50 מ"ג·ק"ג-1echinacosideהוא מינון בינוני, ו-100 מ"ג·ק"ג-1echinacosideהוא מינון גבוה.

Echinacoside מ cistanche לטפל בנפרופתיה סוכרתית

במחקר זה, מינון נמוךechinacosideאין השפעה ברורה על רקמת הכליה שלנפרופתיה סוכרתיתחולדות, בעוד מינונים בינוניים וגבוהים שלechinacosideיכול לשפר משמעותית את השינויים הפתולוגיים של רקמת הכליה ולשפר את הנזק לרקמת הכליה בנפרופתיה סוכרתיתחולדות. , מציע כי מינונים בינוניים וגבוהים שלechinacosideיכול להגן על הנזק לרקמת הכליות שלנפרופתיה סוכרתיתחולדות באופן תלוי ריכוז, והוא צפוי לשמש בטיפול קלינינפרופתיה סוכרתית. במחקר זה, מינונים בינוניים וגבוהים שלechinacosideיכול להגדיל באופן משמעותי את מסת הגוף של חולדות עםנפרופתיה סוכרתיתולהפחית את צריכת המים, תפוקת השתן ורמת הגלוקוז בדם בצום. מחקרים קליניים [14] הראו כי אינסולין בחולים עםנפרופתיה סוכרתיתנמצא במחסור מוחלט או יחסי, ורמות הגלוקוז בדם גבוהות. ריכוז יתר של גלוקוז בדם יעלה על יכולת הספיגה החוזרת של הגלומרול, מופרש עם שתן, תדירות מתן השתן עולה ומי השתייה עולה. הירידה במסת הגוף תואמת את תוצאות המחקר הזה, מה שמרמז על כךechinacosideעשוי להגדיל את מסת הגוף שלנפרופתיה סוכרתיתחולדות על ידי הורדת רמת הסוכר בדם והפחתת השתייה ותפוקת השתן שלהן.

במחקר זה, מינונים בינוניים וגבוהים שלechinacosideיכול להפחית באופן משמעותי מיקרואלבומין בשתן, קריאטינין וחנקן אוריאה בחולדות עםנפרופתיה סוכרתית. קריאטינין וחנקן אוריאה מופרשים בעיקר מהגוף באמצעות סינון גלומרולרי, שיכול לשקף בצורה מדויקת יותר את תפקוד הכליות. כאשר תפקוד כליות לקוי, קצב הסינון הגלומרולרי יורד, ריכוז הקריאטינין בדם וחנקן אוריאה יעלה באופן משמעותי [15]. רמת החלבון בשתן היא אחד המדדים הנפוצים ביותר לשקף את מידת הנזק הגלומרולרי, שעלול לפגוע ישירות בתאי המזנגיה ויכול גם להחמיר את הנזק לכליות והפרעות בתפקוד הכליות [16]. מחקר של Zhang Yun וחב'. [17] הראה כי היפרגליקמיה בחולדות עםנפרופתיה סוכרתיתיכול לגרום לירידה בקצב הסינון הגלומרולרי, מה שמוביל לעלייה ברמות קריאטינין בדם, חנקן אוריאה ומיקרואלבומין בשתן. תוצאות המחקר הזה מצביעות על כךechinacosideעשוי להפחית את רמת הסוכר בדם, לשפר את תפקוד הכליות, להפחית קריאטינין בדם, חנקן אוריאה ורמות מיקרואלבומין בשתן, ולשפר את הנזק לתאי רקמת הכליה.

במחקר זה, מינונים בינוניים וגבוהים שלechinacosideיכול לווסת משמעותית את הביטוי של Bax ו-Caspase-3 mRNA בנפרופתיה סוכרתיתחולדות, מווסתות את הביטוי של Bcl-2 mRNA, ומעכבות את האפופטוזיס של תאי רקמת הכליה. גן Bax הוא חבר פרו-אפופטוטי ממשפחת Bcl-2. בתנאים פיזיולוגיים, Bax ו-Bcl-2 יוצרים הטרודימר, אשר מפחית את חדירות קרום התא ואת שחרור ציטוכרום C. ברגע שהביטוי של Bcl-2 מווסת למטה, זה יגרום לעלייה בחדירות התא, לשחרור ציטוכרום C, יפעיל את מפל Caspase במורד הזרם ויגרום לאפופטוזיס של התא [18]. Caspase-3 היא מולקולה מנהלת אפופטוזיס, שיכולה לפרק מגוון של חלבונים חשובים בתאים ולהשתתף באפופטוזיס של התא [19]. המחקר של דונג וחב'. [20] הראה זאתechinacosideיכול לעכב את האפופטוזיס של מגוון תאים, מה שעולה בקנה אחד עם תוצאות המחקר הזה, מה שמצביע על כךechinacosideיכול לעכב אפופטוזיס של תאי רקמת כליה, ובכך להגן על נזק לרקמת הכליה. במחקר זה, מינונים בינוניים וגבוהים שלechinacosideיכול לווסת משמעותית את הביטוי של חלבון VCAM-1 בנפרופתיה סוכרתיתחולדות. VCAM-1 היא מולקולת הידבקות חשובה של תאי כלי דם, הקשורה קשר הדוק להתרחשות ולהתפתחות שלנפרופת סוכרתיy ויכול לשמש להערכה קלינית של חולים עםנפרופתיה סוכרתית[21]. המחקר של Zhang et al. [22] הראה ש-VCAM-1 יכול לגרום לאפופטוזיס עצבי לאחר דימום תוך מוחי בחולדות. תוצאות מחקר זה מצביעות על כך שמינונים בינוניים וגבוהים שלechinacosideעשוי לעכב את הביטוי של VCAM-1 ולעכב אפופטוזיס של תאי כליה בחולדות עם נפרופתיה סוכרתית.

במחקר זה, מינונים בינוניים וגבוהים שלechinacosideיכול להפחית באופן משמעותי את רמות HA, TIMP-1 ו-LN בחולדות עםנפרופתיה סוכרתית.HA הוא המרכיב העיקרי של המטריצה ​​החוץ-תאית, ו-LN הוא גליקופרוטאין מבני חשוב, שהוא אינדיקטור קליני נפוץ לפיברוזיס רקמות [23]. TIMP-1 הוא מעכב של מטריצת מטלופרוטאינזים (MMP), אשר יכול לעכב את הביטוי של MMP, לעכב את הפירוק של המטריצה ​​החוץ תאית ולקדם פיברוזיס של רקמת הכליה [24]. המחקר של Bieniaa et al. [25] הראה ש-TIMP-1 יכול לעכב את הביטוי של MMP, לקדם את הביטוי של HA ו-LN ולקדם את התרחשות והתפתחות של פיברוזיס של רקמת הכליה. זה עולה בקנה אחד עם תוצאות המחקר הזה, מה שמצביע על כךechinacosideעשוי לעכב את רמות HA, TIMP-1 ו-LN, לעכב את התרחשות והתפתחות של פיברוזיס בכליות. במחקר זה, מינונים בינוניים וגבוהים שלechinacosideיכול לווסת משמעותית את הביטוי של חלבוני TGF ו-SMA בנפרופתיה סוכרתיתחולדות. מספר רב של מחקרים [26-27] הראו שמסלול האיתות TGF-/Smad ממלא תפקיד חשוב בהתרחשות ובהתפתחות של פיברוזיס בין-סטיציאלי בכליות. כאשר TGF- נקשר לרצפטור שלו בממברנת התא, הוא יכול לזרחן את Smad2 ו-Smad3, וה-Smad המופעל יוצר טרימר, שעובר לגרעין כדי לווסת את הביטוי של מולקולות אפקטור במורד הזרם כגון -SMA ו-matrix metalloproteinases. לגרום לייצור של פיברוזיס אינטרסטיציאלי בכליות [28]. -SMA הוא סימן להפיכת פיברובלסטים למיופיברובלסטים, שיכולים לקדם הפרשה ושקיעת מטריקס חוץ-תאי, ולקדם את התרחשות של פיברוזיס אינטרסטיציאלי בכליות. החיסרון הוא שגודל המדגם קטן, מה שעלול לגרום לשגיאות סטטיסטיות מסוימות בתוצאות, אך הוא יכול לספק בסיס תיאורטי מסוים לבחירת המינון והיישום הקליני שלechinacoside.

הפניות:

[1] ZANCHI C, MASSONI D, TRIONFINI P, et al. MicroRNA-184 הוא גורם מטה של ​​אלבומינוריה המניע פיברוזיס כלייתי בחולדות עםנפרופתיה סוכרתית[י]. Diabetologia, 2017, 60(6): 1114-1125.

[2] TENCEL GC, YILDIRIM S. ביטויים מוגברים של eNOS ו-iNOS מתואמים עם אפופטוזיס שלנפרופתיה סוכרתיתבסוג 1 המושרה על ידי סטרפטוזוטוציןסוכרתיחולדות[J]. J Comp Pathol, 2016, 154(1): 63.

[3] SCHALKWIJK CG, CHATURVEDI N, TWAAFHOVEN H, et al.סוכרתיחולים.[י]. Eur J Clin Invest, 2015, 32(7): 500-506.

[4] Wei Dawei, Ge Xinyu, Liu Yihan, et al.אכינאקוסיידגורם לתאי גזע מזנכימליים של מח עצם לצמוח מחקר על ההתמיינות של אוסטאובלסטים[J]. Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica, 2017, 33(2): 48-52.

[5]MORIKAWA T, NINOMIYA K, IMAMURA M, et al. גליקוזידים פנילתנואידים אצילים,echinacosideואקטאוזיד מCistanchetubulosa, לשפר את סבילות הגלוקוז בעכברים[J]. J Nat Med, 2014, 68(3): 561-566.

[6]Guo Congcong, Jiao Mingwen, Zhang Yaqin, et al. שיפור והערכה של שיטת המידול של חד צדדיכריתת כליהבשילוב עם סטרפטוזוטוציןנפרופתיה סוכרתיתבחולדות[J]. התקדמות ברפואה וטרינרית, 2019, 40 (2): 135-139.

[7] He Zhu, Kuang Shixiang, Zhang Shusen, et al. מרתח נאוטונג על נוירוני ההיפוקמפוס של חולדות היפוקסיה/חמצן חוזר השפעת ביטוי Bcl-2, Bax ו-Caspase-3[J]. Chinese Journal of Gerontology, 2015, 23 (24): 6973-6976.

[8]ROSSING P. קידום, חיזוי ומניעת התקדמות שלנפרופתיהבסוכרת מסוג 1[J].חולה סוכרתMed, 2015, 15 (11): 900-919.

[9] באו ג'יאנג'ו, ג'ואו באוהואה. מחקר קליני על 68 מקרים שלנפרופתיה סוכרתיתמטופל על ידי Yiqi Yangyin Huoxue Decoction [J]. Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica, 2015, 31(2): 177-178.