Interleukin שמקורו בתאי T-22 מניע את הביטוי של CD155 על ידי תאי סרטן כדי לדכא את תפקוד תאי NK ולקדם גרורות
Oct 10, 2023
סיכום
למרות שתאי T יכולים להפעיל חסינות אנטי-גידולית חזקה, תת-קבוצה של תאי T עוזר (Th) המייצרים אינטרלוקין-22 (IL-22) בגידולי שד וריאה קשורה לתוצאות עגומות של המטופל. כאן, בדקנו את המנגנונים לפיהם תאי T אלה תורמים למחלה. במודלים של עכברים של סרטן ריאות וסרטן השד, מחיקה חוקתית וספציפית לתאי T של Il22 הפחיתה גרורות מבלי להשפיע על צמיחת הגידול הראשוני. מחיקה של הקולטן IL-22 על תאים סרטניים מפחיתה גרורות במידה דומה לזו שנראית בעכברים חסרי IL-22-. IL-22 גרמה לביטוי גבוה של CD155, אשר נקשר לקולטן המפעיל CD226 על תאי NK. הפעלה מוגזמת הובילה לירידה בכמויות של CD226 ותאי NK פגומים בתפקוד, שהעלו את הנטל הגרורתי. איתות IL-22 היה קשור גם לביטוי CD155 במערכי נתונים אנושיים ועם תוצאות גרועות של חולים. ביחד, הממצאים שלנו חושפים מעגל מדכא חיסון המופעל על ידי IL שמקורו בתאי T-22 שמקדם גרורות בריאות.
היתרונות של cistanche tubulosa-Antitumor
מבוא
סימן ההיכר העיקרי של התקדמות ניאופלסטית והגורם העיקרי לתמותה הקשורה מסרטן הוא היכולת של תאים סרטניים להתפשט לאתרים משניים וליצור גרורות. , ותאי T helper (Th) 1.3,4 לעומת זאת, תאי T מווסתים (Treg), מונוציטים במחזור ו- IL -17A שמקורו בתאי Th יוצרים מיקרו-סביבה מדכאת חיסונית, המאפשרת בריחה חיסונית ומקדמת גרורות. 4–6 לפיכך, חיוני לזהות מפלי איתות המגדירים את הפונקציה של תאי חיסון פרו- לעומת אנטי-גידוליים.7,8 Interleukin-22 (IL-22) הוא ציטוקין המיוצר על ידי Th17 ובבני אדם, גם על ידי תת-קבוצת Th1, הידועה כמעודדת צמיחת תאים סרטניים, משפרת את הגירה, מגינה מפני אפופטוזיס, מעוררת מעבר אפיתל-למזנכימלי ומקיימת גזע של תאים ממאירים. 9-13 זה גם מקדם קרצינוגנזה מוקדמת, פועל על נגעים מקדימים או תאי גזע סרטניים לא בשלים. 14–18 IL-22-מייצרים תאים, בעיקר תאי Th, אך גם תאי גמא דלתא (gd) T, תאי T (iNKT) רוצח טבעי בלתי משתנה ותאי לימפה מולדים (ILCs) ), זוהו בנגעי סרטן ראשוניים.19–24 IL-22 מתבטא ברמות רלוונטיות ביולוגית בקרצינומה של השד, המעי הגס, הריאות, הקיבה והכבד.9,11,12,25,26 ברוב המחקרים , הביטוי שלו קשור לפרוגנוזה גרועה, שלב מחלה גבוה יותר והתקדמות מהירה יותר של הגידול.13,22-24,27-29 IL-22 פועל באופן בלעדי דרך הקולטן IL-22 (IL{{40 }}R) מורכבת משתי יחידות משנה, IL-22RA1 ו-IL-10RB.30,31 הפעולה של IL המופרש-22 מווסתת על ידי מעכב, ה-IL{{47} } חלבון קושר (IL-22BP, IL-22RA2), הומלוג של IL-22RA1, המיוצר בעיקר על ידי תאים מיאלואידים.32,33 בתנאי מצב יציב, IL -22 הוא ציטוקין הומיאוסטטי חיוני במחסומי אפיתל כגון המעי, הריאות והעור.34,35 באתרים אלה, IL-22 מקדם הגנה, התחדשות ותיקון כדי לשמור על שלמות המחסום,36, 37 והעדרו מחמיר את הקרצינוגנזה הנגרמת על ידי דלקת.13,38 יחד, נתונים אלה מדגישים את התפקודים הרחבים התלויים בהקשר של IL-22 במצבים פיזיולוגיים ופתולוגיים כאחד. עם קישור לקולטן, IL-22 מפעיל את Janus kinases Jak1 ו-Tyk2 לזרחן STAT3, STAT1 או STAT5, אך IL-22 יכול ליזום מסלולים אחרים במורד הזרם, כולל מפל חלבון קינאז (MAPK) המופעל על ידי מיטוגן או איתות PI3K-AktmTOR, בהתאם להקשר הסלולרי.13,36,39–44 מגוון זה של מסלולי איתות בא לידי ביטוי בשלל ההשפעות הפיזיולוגיות שהיו קשורות לאיתות IL-22, כולל אלו שתוארו לעיל, כמו גם הגנה מפני נזק גנוטוקסי והשראת פפטידים אנטי-בקטריאליים, ריר, ציטוקינים פרו ואנטי דלקתיים וכימוקינים.36,38,39,45,46 תאי סרטן מעוררים ייצור של IL-22 מתאי Th בחולי סרטן שד וריאות.12,47,48 שחרור מונע דלקתי של NLRP3 של IL-1b גורם לייצור IL-22 מתאי T בגידול, וגם IL-22+ ניתן למצוא תאי Th וחתימת NLRP3-IL-1b בדגימות גידול של סרטן השד וסרטן הריאות. התקדמות סרטן השד והריאות. מצאנו ש-IL-22 מעודד התפשטות גרורות לריאה, וחושף מעגל שבו IL{104}} מתווך דיכוי חיסוני בנישה הגרורתית על ידי קידום הביטוי של CD155 על תאים סרטניים, שהיה קשור לירידה בביטוי של CD226 על תאי NK וייצור מופחת של אינטרפרון-ג (IFNg). נתונים קליניים מצביעים על כך שהפעלה של מסלולים כאלה קשורה לתוצאות המטופל.
תוצאות
תוסף תוסף cistanche-הגברת חסינות
IL-22 משפיע על תאי סרטן מופצים במודלים סינגניים של עכברים של קרצינומה של ריאות ושד
To understand the impact of the IL-22-IL-22R1 signaling axis on cancer progression, we analyzed syngeneic murine models of breast and lung carcinoma. As cancer patients mostly succumb to metastatic disease, we recapitulated this with phenotypically relevant models. We implanted either 4T1 breast cancer or Line-1 lung cancer cells subcutaneously (s.c.) in the right flank of wild-type mice (WT) and mice lacking IL-22 expression (Il22 / ) (Figure 1A). IL-22 did not impact the outgrowth of the primary tumors in either model (Figures 1B and 1C). Upon reaching pre-defined termination criteria (tumor >225 מ"מ או כיב), הריאות היו האתר הגרורתי העיקרי במודל שלנו עם גרורות מזדמנות שנמצאו במקום אחר (לא מוצג). Il22 / עכברים הדגימו ירידה בהפצה גרורתית של תאי Line-1 ו-4T1 לריאה בהשוואה לבעלי חיים מסוג פרא ללא תלות בגודל הגידול הראשוני באמצעות שיטות שונות של זיהוי גרורות (איורים 1B, 1C ו-S1A). צפינו גם בפנוטיפ גרורתי דומה במודל אורתוטופי של סרטן השד, שבו תאי 4T1 הושתלו בכרית השומן בשד (איור S2B). כל השיטות המשומשות של ספירה מקרוסקופית עיוורת, מבחני clonogenic או היסטולוגיה הראו עקביות גבוהה בזיהוי עומס גרורתי נמוך יותר ב-Il22 / בעלי חיים (איורים 1B, 1C ו-S1C). זה מעיד על התפקיד המרכזי של IL-22 בתהליך הגרורתי. לאחר מכן, הכרחנו גרורות באמצעות הזרקת תאי סרטן תוך ורידי, אשר עוקפת את הצורך בניתוק ופלישה של רקמות (איור 1D). הזרקות תוך ורידי (iv) של שתי שורות התאים שיקפו את הפנוטיפ במודל התת עורי. אכן יכולנו לאשר עומס גרורתי נמוך יותר ב-Il22/עכברים (איורים 1E ו-1F). תוצאות אלו מצביעות על תפקיד ספציפי עבור IL-22 בתאים מופצים במחזור. כדי להבחין בהשפעות ספציפיות לזן, השתמשנו במודל של סרטן שד E0771 (איור 1G).50,51 הזרקה תוך ורידית של תאי E0771- GFP חשפה עומס גרורתי מופחת ב-Il22/בעלי חיים מאומתים באמצעות ציטומטריית זרימה (איורים 1H ו- S1D). באופן דומה, ראינו עומס גרורתי נמוך יותר בכבד של עכברים כאשר תאי E0771-GFP הוזרק לתוך הטחול (איור S1E). כל הריאה השמאלית של עכברים שהוזרקו ב-E0771-GFP נוקה אופטית בעקבות פרוטוקול iDISCO כדי לכמת גרורות עם מיקרוסקופיה של יריעות אור באתרו (איור 1I).52 כאן, Il22 / עכברים הפגינו נטייה מופחתת לפתח גרורות , בעוד שגודל הגרורות המוצגות לא היה שונה ולא היה לו דפוס ספציפי של לוקליזציה שלהם (איור 1J). לסיכום, IL-22 פעלה על תאים סרטניים מופצים, ואיפשרה גרורות לריאות של סרטן השד והריאות.
תאי T הם המקור הרלוונטי ל-IL-22 בנישה הגרורתית בריאה
זיהינו בעבר תאי CD4+ T כמקור העיקרי של IL-22 בגידולי ריאה ראשוניים בבני אדם ודגימות שטיפה ברונכואלוואולרית.12,47,48 כדי לשרטט את המקור של IL-22 ב- לריאות של המודלים שלנו, הזרקנו תוך ורידי תאי E0771 לתוך חיות מדווחות Foxp3mRFP Il17aGFPIl22sgBFP ותאי IL-22+ כימתנו באמצעות ציטומטריית זרימה (איורים 2A ו-S2A).53 אוכלוסיות הוגדרו כ-CD{{14{1}5, }} ושלילי כפול (DN) (CD4, CD8) תאי ab T (CD3+ gdTCR NK1.1), תאי gd T (CD3+ gdTCR+ NK1.1), ו-CD{{ 26}} תאים NK1.1+ ו-CD3 NK1.1+ (איורים 2B ו-S2B). ראינו עלייה בחלק של תאי CD4+, CD8+ T ו-NK1.1+ תאים שיצרו IL-22 בריאות של בעלי חיים שהוזרקו לגידול ( איורים 2C, S2C ו-S2D). כאן, תאי CD4+ ו-CD8+ T היוו את רוב התאים המייצרים IL-22- בעכברים נושאי גידול (איור 2C). יתרה מכך, זיהינו שתאי T מסוג CD4+ ייצרו IL-22 אך לא IL-17A (איור 2D). לתאים אלו היה ביטוי CD44 נמוך, מה שמאשר את פנוטיפ הזיכרון שלהם בהתאם לתצפיות הקודמות שלנו (איור S2E).48 כדי לחקור עוד יותר את הממצאים הללו על פני מודלים, השתמשנו בצביעה תוך תאית כדי להעריך את הייצור של IL-22 בקו-22 מודל {56}} sc, שהניב תוצאות דומות למעט חלק מופחת של מפיקי CD8+ T cell IL-22 (איורים S2F–S2I). יכולנו גם לזהות שתאי IL-22+ לא הביעו יחד IFNg, מה שמייחד את יצרני ה-IL-22 של עכבר מתת-הקבוצה Th1 (איור 2G).49 יתר על כן, השתמשנו במיקרוסקופיה קונפוקלית בחיתוך מדויק. פרוסות ריאה מחיות כתבות כדי לחקור את התפוצה המרחבית שלהן בריאות של עכברים שהוזרקו לגידול. כאן, נוכל לזהות שיצרני IL-22 ו-IL-17A כאלה מתמקמים כמעט אך ורק למוקדים הגרורתיים (איור 2E). כפי שהוכח על ידי ציטומטריית זרימה, לא מצאנו מתאם בין IL-22 ו-IL-17ייצור מתאי הדיווח במוקדים הגרורתיים, המצביע על כך ש-IL-22 ו-IL-17 אכן מיוצרים על ידי שתי תת-קבוצות סלולריות שונות. אישרנו גם שחלק גדול מהתאים המייצרים IL-22- הם תאי CD4+ T (איור 2E). מכיוון שהנתונים הללו הצביעו על תפקיד דומיננטי לתאי T בייצור IL-22, יצרנו עכבר Il22floxCd4cre עם מחיקה מותנית של Il22 בכל תאי T בוגרים (איור 2F). כאשר מאותגר עם תאי E0771-GFP, לעכברי Il22floxCd4cre הייתה נטייה מופחתת לפתח גרורות בריאות, המזכירה את הפנוטיפ שנצפה ב-Il22 / בעלי חיים העולמיים (איור 2F). עם זאת, נוכל גם לאשר ש-cre-recombinase בשליטה של מקדם CD4 ביטל לחלוטין את ייצור IL-22 לא רק בתאי CD4+, אלא גם בתאי CD8+ T מבודדים מהטחול של עכברי Il22floxCd4cre, ולכן לא ניתן היה להשתמש במודל זה כדי לאתר מקור ספציפי של IL-22 (איור S2J). כדי לאשר את תפקידם של תאי Th כמקור המכריע של IL-22 במודל שלנו, העברנו תאי מסוג פראי ו-Il22/CD{101}} לבעלי חיים Rag1/II22/ שקיבלו לאחר מכן E{{ 104}} תאי GFP IV (איור 2G). כאן, נוכל לאשר שייצור IL-22 על ידי תאי T4+ מועברים באופן אימוץ מספיק כדי לקדם גרורות ריאות במודל שלנו, אך בוטל בעת שימוש בתאי CD4+ מבודדים מ-II22 / חיות (איור 2G). חשוב לציין, ההבדלים בגרורות הושפעו מהשתלת תאי T בעת ההעברה (איור S2K). לסיכום, זיהינו תאי Th כמקור מספיק ל-IL-22 שמניע גרורות בריאות של עכברים נושאי גידול, ובהמשך ביקשנו לזהות את תא המטרה הרלוונטי.
איור 1. נוק-אאוט IL-22-מפחית את מספר גרורות הריאות אך אינו משפיע על צמיחת הגידול במודלים סינגניים של עכברים של קרצינומת ריאות ושד
איור 2. תאי T הם המקור העיקרי של IL-22 בריאות של עכברים נושאי גידול
הביטוי של IL-22RA1 על תאי גידול הוא הכרחי להיווצרות גרורות
ביטוי IL-22RA1 מוגבל לתאים שאינם המטופואטיים ומשמש כגורם מגביל לאיתות IL-22. כדי לחקור את השפעתו על הפנוטיפ הגרורתי, יצרנו מחיקת Il22ra1 יציבה בתאי 4T1 ו-Line-1 (איור 3A). בהתאם לממצאים הקודמים שלנו, צמיחת הגידול של תאי 4T1 Il22ra1 לא הושפעה במידה רבה בהשוואה לתאי ביקורת 4T1 (איור 3B). עם זאת, לעכברים שהוזרקו עם תאי 4T1 Il22ra1 sc או iv היו פחות גרורות מקרוסקופיות וקלונוגניות בריאה בהשוואה לתאי 4T1 בקרה (איורים 3B ו- 3C). כדי לאשר שהאפקט הזה אינו תלוי שיבוט, יצרנו וניתחנו שלושה שיבוטים של Line-1 Il22ra1 ובדקנו אותם מול שלושה שיבוטים בקרה, שהניבו תוצאות דומות (איורים 3D ו-3E). זה מאשר שתאי סרטן המבטאים IL-22RA1-הם היעד הרלוונטי של IL-22 בגרורות ריאות. כדי לשלול את ההשפעות מחוץ למטרה של המתודולוגיה, השתמשנו ב-IL-22BP כדי לעכב איתות IL-22. הקמנו שורות 4T1 ו-Line-1 שהפרישו באופן מכונן IL-22BP (Il22ra2+) (איור S3A). כאשר הוזרקו sc, תאי Line-1 Il22ra2+ גדלו באופן דומה לשליטה באתר ההשתלה, כפי שנראה בעבר בדגמי Il22ra1 ובעכברים Il22/, אם כי תאי 4T1 Il22ra2+ גדלו איטי יותר (איור S3B). כאן, לתאי 4T1 Il22ra2+ היה מספר מופחת במידה רבה של גרורות כאשר הוזרקו sc (איור S3B ו-S3C). למרות השונות הגדולה יותר, תאי ה-Line-1 Il22ra2+ גם יצרו פחות גרורות כאשר הוזרקו sc או iv (איור S3D ו-S3E). לפיכך, נטרול IL-22 באמצעות IL-22BP חיקה במידה רבה את הפנוטיפ שנצפה עם תאי Il22ra1 ו-Il22/עכברים, מה שמאשר את הרלוונטיות של הציטוקין לתהליך הגרורתי.
תוסף תוסף cistanche-הגברת חסינות
IL-22 שולט על הצמיחה של תאי גידול בשלב מוקדם של השתלה גרורתית
To determine the role of IL-22 signaling during the dissemination process, we analyzed the kinetics of metastatic seeding in our models. For this, we injected 4T1-GFP cells i.v. and analyzed lungs at 12 and 48 h after injection (Figure S4A). We used confocal microscopy to quantify the numbers of GFP+ colonies (defined as cell clusters of >100 מ"מ) ותאים בודדים לכל מ"מ של רקמת ריאה (איור S4B). לא הצלחנו לזהות הבדלים ב-12 שעות לאחר ההזרקה, מה שמצביע על כך שהזריעה עשויה שלא להיות מושפעת בעיקר מ-IL-22 (איורים S4C ו-S4D). עם זאת, בנקודת הזמן 48-h, מספר התאים והמושבות של GFP+ ירדו בריאות של Il22/עכברים (איורים S4C ו-S4D). זה הציע תפקיד עבור IL-22 בהנעת גרורות מוקדמות בריאות. כדי להעריך את קצב ההתפשטות, הזרקנו לעכברים יחד עם 5-ethynyl-20 -deoxyuridine (EdU) 4 שעות לפני החקירה ב-12, 24, 48 שעות ו-7 ימים לאחר הזרקת הגידול (איור S4E) . בדומה לספירה מיקרוסקופית, לא זיהינו הבדלים במספר תאי GFP+ לפני 48 שעות לאחר ההזרקה (איורים S4F-S4G). לעומת זאת, יכולנו לזהות הבדלים בשילוב EdU, מה שמצביע על חלק גבוה יותר של תאים מתחלקים רק ביום 7 לאחר ההזרקה (איור S4G). לפיכך, אנו חושבים שהבדלים בעומס של גידולי ריאות המושפעים מ-IL-22 שנצפו כבר ב-48 שעות מתווכים על ידי מנגנון בלתי תלוי בשגשוג.
איור 3. ביטוי IL-22RA1 על תאי גידול הוא הכרחי להיווצרות גרורות
IL-22 מווסת את הביטוי של CD155 על תאי גידול ובכך מקדם גרורות
בהתבסס על הממצאים שלנו ש-IL-22 פועל על תאי סרטן IL-22ra1+ כדי לקדם גרורות, ביצענו ריצוף RNA בתפזורת של תאי 4T1 שטופלו ב-IL-22 כדי להגדיר עוד יותר המנגנון הבסיסי (GEO: GSE202314) (איור 4א). גילינו 147 גנים שהיו מווסתים באופן דיפרנציאלי. מתוכם, הביטוי של 133 גנים גדל ו-14 ירד בטיפול ב-IL-22 (איורים 4B ו-S5A). אימתנו את Pvr (קולטן לפוליו-וירוס, Pvr) כאחד היעדים המוגדלים ביותר באמצעות qPCR (איור S5B). זה בולט מכיוון ש-CD155, המוצר של Pvr, בא לידי ביטוי יתר בסוגי סרטן שונים ובעל תכונות מעודדות גידול, כולל גרורות.54–56 כדי לאשר את הממצאים שלנו, הערכנו את הביטוי של CD155 ב-IL-22-מעורר 4T1, תאי קו-1 ו-E0771 על ידי ציטומטריית זרימה (איור 4C). זיהינו עלייה בביטוי של CD155 בכל שורות התאים במשך 72 שעות (איורים 4D ו-4E), אך השפעה זו נעדרה בתאים חסרי IL-22RA1 (איור S5C). לאחר מכן, הערכנו את ההשפעה של IL-22 על ביטוי CD155 בתאי E0771-GFP מהריאות של עכברים נושאי גידול (איור 4F). כאן, יכולנו לאשר שלתאים שהושתלו ב-Il22/עכברים יש ביטוי נמוך יותר של CD155, אשר נמצא בקורלציה עם חלק קטן יותר של תאי E0771-GFP שזוהו באמצעות ציטומטריית זרימה (איורים 4G ו-4H). כדי לאמת את תפקידו של CD155 בגרורות, הקמנו שורות תאים Pvr Line-1 ו-4T1 (איורים 4I, S5D ו-S5G). אמנם זה השפיע מעט על יכולתם לגדול תת עורית (איורים S5E ו-S5F), אבל זה ביטל את היכולת ליצור גרורות בריאות (איורים 4J ו-S5H). נוכל להפוך את התהליך הזה על ידי ביטוי CD155 מכונן בתאי Pvr ללא תלות בוויסות המושרה על ידי IL-22- (Pvr+).
איור 4. איתות IL-22 מגביר את הביטוי של CD155 על פני השטח של תאי הגידול ומעניק עמידות לבקרת גרורות
במסגרת זו, נוכל לגרום לגרורות בריאות של Il22 / עכברים, תוך הדגשת הקשר בין שתי מולקולות אלה ותפקידן כמתווכים של התהליך הגרורתי (איורים 4K ו- S5I).
CD155 על תאי גידול קשור לירידה בביטוי של CD226 על תאי NK והפחתת ייצור IFNg
CD155 ממלא תפקיד מהותי בשגשוג והידבקות בתאי סרטן, 54-57 בין היתר. לא זיהינו ליקויים בשגשוג של תאי Line-1 Pvr במבחנה (לא מוצגים נתונים). חשוב לציין, ל-CD155 יש תפקיד פרו-גרורתי חיצוני לתא על ידי קשירה לקולטנים האימונומודולטורים CD96, CD226 או TIGIT על פני השטח של תאי NK ו-T.54–56,58,59 כדי לאתר את שותפי הקישור של CD155, ניתחנו תגובות אנטי-גידוליות בריאות של עכברים המכילים תאי 4T1-luciferase+ (4T1-Luc) (איור 5A). אישרנו באמצעות מערכת הדמיה in vivo (IVIS) כי עכברים מסוג פרא ו-Il22 / זרעו זריעה דומה של תאי גידול ביום 5 לאחר ההזרקה, וההבדלים בעומס הגידול גדלו במהלך שבועיים (איורים 5B ו- 5C) . ואכן, הפגם של ייצור IFNg על ידי תאי NK, אך לא סוגי תאים אחרים, הראה את אובדן מנגנוני האפקטור ההומורלי (איורים 5D, 5E ו-S6A) ותאם עם עומס גידול גבוה יותר (איור S6B). השפעה זו נמצאה באופן עקבי במודל Line-1 sc (איורים S6C–S6E). שנבדקו על ידי ציטומטריית שבב, 60 דגימות מעכברים 4T1- הנושאים גרורות בריאות הדגימו ביטוי מוגבר של CD155 במוקדים הגרורתיים ב-WT אך לא ב-Il22/בעלי חיים (איורים 5F ו-S6F). מצאנו חדירות גבוהה יותר של תאי NK למוקדים הגרורתיים של חיות Il22 / אך לא WT, מה שמרמז על הפעלה גבוהה יותר ומאשר את התלות בתאי NK כתאים אנטי-גידוליים (איור 5F). CD226, אך לא TIGIT או CD96, הובעו באופן דיפרנציאלי על ידי תאי NK, ובמידה פחותה, על ידי תאי CD8+ T בריאות של חיות מסוג פראי ו-Il22 / (איורים 5G ו-S6G-S6H). CD226 הוא קולטן שותף חיוני להפעלת פונקציות האפקטור של תאי NK ו-CD8 T. לכן, יצאנו לחקור את הרלוונטיות הפתופיזיולוגית שלו במודל שלנו.61–64
cistanche tubulosa- לשפר את המערכת החיסונית
החסימה של CD226 מבטלת את הפנוטיפ האנטי-גרורתי של בעלי חיים חסרי IL-22-
העברת איתות מוגזמת155-מתווכת CD הקיימת במיקרו-סביבת הגידול יכולה לגרום להפנמה ופירוק של CD226 בתאי אפקטור.61,63 כדי לשרטט את התפקיד של ביטוי מוגזם של CD155 על CD226 ותגובה אנטי-גידולית שלאחר מכן, הזרמנו שליטה 4T1 ו תאי Pvr+ iv בעכברי Il22/, ושתי קבוצות קיבלו גם נוגדן חוסם אנטי-CD226 (480.1) (איור 6A). גם תאי Pvr+ וגם חסימת CD226 יכלו לקדם גרורות ריאות בעכברים Il22/Il22, והשפעות אלו לא עברו סינרגיה (איור 6B). בדומה לתצפיות הקודמות שלנו בבעלי חיים מסוג פרא, זה היה מספיק כדי לעכב ייצור IFNg על ידי תאי NK (איור 6C). לבסוף, זיהינו ירידה בביטוי CD226 בתאי NK בעכברים שהוזרקו Pvr+- בהשוואה לתאי ביקורת. זה קשור לירידה ביכולת של תאי NK אלה לייצר IFNg (איור 6D). יתר על כן, חקרנו את הפוטנציאל של נוגדן TIGIT אגוניסטי (IG9) לעכב את הפעלת תאי NK ב-Il22/בעלי חיים ושל חסימת CD96 (3.3) כדי למנוע עיכוב של תפקוד תאי NK (איור 6E). לא האגוניסט של TIGIT ולא האנטגוניסט של CD96 שינו את מספר הגרורות בהשוואה ל-Il22/בעלי חיים שקיבלו תאי ביקורת או Pvr+ 4T1, בהתאמה (איור 6F). כאשר הוא מופעל, TIGIT יכול לעכב ייצור IFNg מתאי CD8+ T אך לא NK (איור 6G). לפיכך, ציר IL-22- CD155 מעורר ירידה בביטוי של CD226 בתאי NK והופך אותם לאנרטיים במיקרו-סביבת הגידול.
ביטוי CD155 משלים את חתימת הגן IL-22 בחולי סרטן השד והריאות
לבסוף, הערכנו את הרלוונטיות הקלינית של CD155 בהקשר של ציר IL-22-IL-22RA1. ביטוי CD155 לבדו קשור לפרוגנוזה לא חיובית במגוון של ישויות סרטניות.54 ניתחנו נתוני רצף RNA מאטלס גנום הסרטן (TCGA) אדנוקרצינומה בריאותית (TCGA: LUAD, n=504) ו-HER2- דגימות חיוביות של מטופלים ממערך הנתונים של קרצינומה פולשנית של השד (TCGA: BRCA, n=110). התמקדנו בגנים מרכזיים הקשורים ל-IL-22-: IL22RA1, IL22RA2, IL10RB ו-PVR. כדי לריבד קבוצות חולים, השתמשנו באשכולות אגרסיבית, שיטת אשכולות ללא פיקוח, שהובילה לשלושה אשכולות עיקריים (איורים 7A ו-7B). זה חשף דפוסי ביטוי גנים ייחודיים: אשכול 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, IL10RBmed, PVRhi), אשכול 1 (IL22RA1lo, IL22RA2hi, IL10RBhi, PVRlo) ואשכול 2 (IL22RA1lo, IL22RA2lo, IL10RBlo, PVRmed) (איור 7C). אשכולות אלה הופצו באופן שווה בשתי העוקות הללו (איור 7D). לחולים באשכול 0 ובאשכול מערך הנתונים של LUAD 2 הייתה הישרדות גרועה יותר מאשר לחולים באשכול 1 (איור 7E). ההישרדות של אשכולות 1 ו-2 לא הייתה שונה בשתי העוקות (איור 7E). בנוסף, חישבנו זמני הישרדות ממוצעים מוגבלים (RMST) עבור אשכולות 0 ו-1 כדי לכמת את ההבדל בזמן ההישרדות הצפוי עד חמש שנות מעקב, וכתוצאה מכך 361.18 ימים עבור LUAD ו-93.23 ימים עבור BRCA (איור 7F). לאשכולות 0 ו-1 היו הבדלים בתדירות של שלבי מחלה פתולוגיים בתוכם ב-LUAD אך לא בקבוצת BRCA (איור 7G). חשוב לציין, הבדלי הישרדות כאלה בין אשכולות (IL22RA1hiPVRhi) ו-1 (IL22RA1loPVRlo) נובעים בעיקר מחולים שאובחנו בשלבים המוקדמים (I ו-II), אך לא בשלבים מתקדמים של המחלה (III ו-IV) (איור S7A). כדי להעריך את ההשפעה של כל גן על ההישרדות, השתמשנו במודל הסיכונים היחסיים של קוקס. גם IL22RA1 (יחס סיכון [HR]=1.23) וגם PVR (HR=1.28) משפיעים על הישרדות, בעוד ש-IL22RA2 ו-IL10RB לא שינו את המפגע בקבוצת LUAD (איור S7B). יתרה מכך, רק CD226 (עמ'=0.06), אך לא TIGIT או CD96, נטו להשפיע על ההישרדות, בהתאם לממצאים שלנו במודלים פרה-קליניים (איור S7B). השתמשנו באלגוריתם CIBERSORTx deconvolution בקבוצת LUAD כדי להעריך האם לדפוסי ביטוי הגנים של האשכולות שלנו יש השפעה על חדירת תאי מערכת החיסון בחולים.65 מעניין לציין שיש עלייה ביחידות CIBERSORTx עבור תאי NK מופעלים באשכול 1 בהשוואה לאשכולות 0 ו-2 בחולי LUAD, בעוד שלא היו הבדלים בתאי NK במנוחה או בתאי זיכרון T פעילים של CD4+ (איור S7C) עם מגמה דומה בקבוצת BRCA (איור S7D). יחד, תוצאות אלו מקבוצות קליניות מדגימות את הרלוונטיות של קשר רגולטורי בין IL-22 שמקורו בתאי T ו-CD155.
איור 5. ביטוי CD226 גבוה יותר בתאי NK בעכברי Il22-/-
דִיוּן
במחקר זה, גילינו מנגנון שבאמצעותו תאי T מייצרים IL-22 כדי לקדם גרורות בריאות במודלים של עכברים של סרטן ריאות וסרטן השד. מבחינה מכאנית, תאי T במוקדים הגרורתיים של הריאה, בעיקר CD4+, מייצרים IL-22 שמאותת ישירות דרך הקולטן שלו המתבטא בתאי סרטן, ומעודדים ביטוי של המולקולה הפרו-גרורתית CD155.{{ 5}},58,59 למרות הביטוי הפאן-סרטני שנחקר היטב של CD155 ותפקידיו הפנימיים והחיצוניים בהתקדמות הסרטן,54 המסלול האחראי על ויסות CD155 בתאים ממאירים נותר חמקמק.66–68 הדגמנו כי IL{{ 15}} הגביר את ביטוי CD155 בשורות תאים מסרטן ריאות וסרטן השד במבחנה ובאינבו, בעוד שהביטוי המכונן שלו איפשר גרורות בעכברים Il22, בהשוואה לתאים בקרה וחסר. ביטוי מוגבר של CD155 במיקרו-סביבת הריאות של הגידול הוביל להפחתה של המולקולה הקו-סטימולטורית CD226 על תאי NK, והפחיתה את הלוקליזציה שלהם לגרורות וייצור IFNg, אשר נמצאה בקורלציה עם עומס גידול גבוה יותר. במחקרים הקודמים שלנו, זיהינו הצטברות של תאי T המייצרים IL-22- בדגימות גידולים של חולי קרצינומה של תאים לא קטנים (NSCLC).12,48 הוכחנו שתאי סרטן מעוררים NLRP3- הפרשה תלויה של IL-1b שגורמת לייצור כזה של IL-22 בעיקר מתאי Th.18 ראוי לציין שבבני אדם, עקב ההבדלים בפרופילי הציטוקינים של תאי Th, IL{{ 31}} מושרה גם בתאי Th1. ניתן להעלות על הדעת שזה עלול לפגוע בתגובה החיסונית האנטי-גידולית. חשוב לציין, גרסאות Th1 כאלה עשויות להסביר חלקית התקדמות יתר של סרטן לאחר הפעלת תאי T בעקבות חסימת נקודות ביקורת.69 בהתאם לתצפיות הקודמות שלנו, אישרנו את הצטברות IL-22-מייצר CD4+ ו-CD{{38} } תאי T, אבל גם תאי NK1.1+, בנישה הגרורתית בריאה של בעלי חיים שהוזרקו בגידול. חשוב לציין שראינו הבדלים ספציפיים לזן בהצטברות של תאי T מסוג IL-22-מייצר CD8+ במודלים שלנו. עם זאת, ביטול ייצור IL-22 בסך תאי T בוגרים הספיק כדי לשחזר את ההשפעה שצפינו בבעלי חיים חסרי IL-22-.70 כמו כן, ההעברה המאמצת של תאי T CD4+ לתוך Rag / II22 / עכברים הספיקו כדי לגרום לגרורות בריאות, והצביעו על התפקיד החשוב ביותר של תאי Th כמקור ל-IL-22. לעומת זאת, הממצאים הקודמים שלנו מצביעים על כך שלמרות הצטברות של תאי CD8+ T בדגימות גידול, תרומתם למאגר IL-22 היא מינורית.48 בכל מקרה, האפיון של CD כזה{{53 }} IL-22-ייצור תאי T חיוני כדי להעריך בקפידה את תכונותיהם הפרו או האנטי-גידוליות, כאשר נתונים חדשים על תת-אוכלוסייה זו מופיעים. תרומה פוטנציאלית להיווצרות גרורות באמצעות IL-22, המובחנת בניסוי העברה אימוץ של Rag / II22 / באמצעות בעלי חיים נטולי תאי T בוגרים אך בעלי תאי NK מתפקדים.37 השערה זו נתמכת עוד יותר על ידי הממצאים שלנו במחקר הגרורתי. מוקדים שבהם תאי NK נמצאו בכמות גדולה יותר מתאי T ציטוטוקסיים, מה שמדגיש את תאי NK כשחקנים חיוניים בבקרת גידולים בהיעדר IL-22. חשוב לציין שהתמקדנו ביצרני IL-22 במוקדים גרורתיים בריאה, אך לא התחשבנו במקורם, בשיבוטם או בתפוצתם בדם או באיברים לימפואידים. יתרה מכך, מקורות שונים של IL-22 מקדמים התקדמות הגידול באופן תלוי הקשר המתווך על ידי הפעולה הפליוטרופית של ציטוקין זה. לפי קווים אלה, תאים דומים המייצרים IL-22- בתאים שונים (ריאות לעומת טחול מול בלוטת לימפה) יכולים להשפיע באופן דיפרנציאלי על פנוטיפים פרו-גידוליים או ללא תפקוד בהתאם להקשר, מה שיהיה צורך לחקור עוד יותר. מחקרי סרטן מדווחים שוב ושוב ש-IL-22 משפיעה על התפתחות וגדילה של גידולים ראשוניים ובסופו של דבר, התקדמות ניאופלסטית.26,73-76 רעיון זה מוצדק בעיקר על ידי היכולת לקדם הגירה, פלישה וגזע של תאים סרטניים במבחנה ובכך לקדם היווצרות גרורות.76,77 חשוב לציין, אבלציה של IL-22 יכולה להקל על המיקרו-סביבה המדכאת את מערכת החיסון במודל קראס-מוטנטי של קרצינומה ריאות.14 במחקר הנוכחי, הוכחנו שהעומס הגרורתי המוגבר היה השפעה ישירה של IL-22 על תאי גידול IL-22RA1+ מפוזרים, שהביאה לגדילה מוגברת של המושבה. חשוב לציין, הנתונים שלנו אינם שוללים רשמית השפעה על תאים שאינם גידולים. ככזה, ההשפעה של IL-22 על התפשטות תאי הגידול באמצעות הפעולה הפנימית של IL-22R המובע באופן אנדוגני מודגשת בהרחבה על ידי Giannou et al.78
איור 6. איתות CD226 הוא הכרחי לייצור IFNg מתאי NK
הוכחנו ש-Pvr הוא אחד הגנים עם ביטוי מוגבר על תאים סרטניים לאחר טיפול ב-IL-22. בהקשר זה, תאים חסרי CD155-יצרו מעט גרורות, הן בסוג הבר והן בעכברים Il22, וחשוב מכך, ההחדרה מחדש של CD155 אפשרה לנו לבנות מחדש את הפנוטיפ הגרורתי. התפקיד המהותי של CD155 בתאי סרטן נחקר היטב וידוע כמשפיע על זריעה, שגשוג תאי גידול והגירה.56,57 עם זאת, תאי Pvr לא הראו שגשוג או נדידה מעוכבים בידינו, וזריעת תאי גידול. לא הושפע ב-Il22/עכברים. זוהה תחילה על תאים המציגים אנטיגן, CD155 משמש כמקדם חיצוני של התקדמות הגידול המדכא את תפקוד תאי NK ו-T על ידי קישור ל-CD96 ו-TIGIT על פני השטח שלהם וגורם להפנמה והורדה של CD226.56,61-64,79-85Due לתפקוד הדיכוי החיסוני שלו, CD155 בסרטן ובתאים מארח מפעיל תכונות פרו-גרורות ומוצע כמטרה לחסימת עיכוב בנקודות ביקורת.61,86 תאי NK מקבלים אות מעורר משותף מתאי הצגת אנטיגן דרך CD226. 87 עם זאת, גירוי מוגזם של CD226 במיקרו-סביבת הגידול מוביל להפנמה ופירוק.63 זה מנוגד בדרך כלל על ידי CD96 ו-TIGIT, אשר קושרים CD155 עם זיקה גבוהה יותר.58 מעניין כי ידוע כי תאי 4T1 גורמים להורדת ויסות CD226 בהסתננות הגידול. לימפוציטים ומדכאים ייצור IFNg.88 כאן, הדגמנו שמחסור ב-IL-22 שמר על ביטוי CD226 על תאי NK ו-CD8+ T. עם זאת, רק לתאי NK היו יכולות ייצור IFNg גבוהות יותר באופן דרמטי ומתאם הפוך עם עומס גרורתי. באופן מעניין, הפעלה של איתות TIGIT במחקר שלנו עיכבה ייצור IFNg מתאי CD8+ T, אך לא NK, ולא הספיקה להגביר את הנטל הגרורתי. באופן דומה, קולטן אחר ל-CD155, CD96, לא היה מווסת דיפרנציאלית בעכברים Il22 וגם לא עיכוב שלו מנע גרורות, מה שמעיד על כך ש-CD155 אינו מדכא תאי NK באמצעות CD96 במודל שלנו. זה מדגיש ויסות ספציפי לסוג תא של תגובות אנטי-גידוליות על ידי CD155 ושותפי הקישור השונים שלו.
יתרונות תוסף cistanche-איך לחזק את המערכת החיסונית
לחץ כאן לצפייה במוצרי Cistanche Enhance Immunity
【בקש עוד】 דוא"ל:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
ההשפעה של CD155 על הפרוגנוזה ותפקידו בפתוגנזה של סרטן ריאות, שד, מעי גס וסוגים אחרים של סרטן מבוססת.79–85 קיימות עדויות רבות לגבי הרלוונטיות הפרוגנוסטית של IL-22 והגנים הקשורים אליו בישויות סרטניות שונות.10,21,27,75,89-91 עם זאת, מחקרים מסוימים מדווחים על אין השפעה של ביטוי IL-22 על ההישרדות.12 אמנם פערים אלו עשויים לנבוע מההטרוגניות ב אוכלוסיות חולים, בעיות דגימה ודיווח, רבים מהמחקרים הללו מתמקדים בגן בודד הקשור לאיתות IL-22. כאן, השתמשנו באשכולות אגרסיבית כדי להבחין בדפוסי ביטוי של IL22RA1, IL22RA2, IL10RB ו-PVR בקוהורטות LUAD ו-BRCA ב-TCGA ולשייך אותם לנתונים הקליניים. כאן, זיהינו שלושה דפוסי ביטוי של גנים אלה: דפוס 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, PVRhi), דפוס 1 (IL22RA1lo, IL22RA2hi, PVRlo) ודפוס 2 (IL22RA1lo, IL22RA2lo, PVRmed). זיהינו שביטוי גבוה של IL22RA1 עלה בקנה אחד עם ביטוי גבוה של PVR, שתורגם גם לתוצאות הישרדות כלליות גרועות, במיוחד בחולים שאובחנו עם שלבים פתולוגיים מוקדמים (I ו-II), אך לא מתקדמים (III ו-IV), והדגשה התפקיד הספציפי לשלב של מנגנון זה. לעומת זאת, ביטוי גבוה של IL22RA2, הידוע גם כ-IL-22BP, היה בקורלציה עם ביטוי PVR נמוך יותר והישרדות טובה יותר.18,34 הדפוס השלישי תואם לביטוי נמוך לחלוטין וייצג גידולים קרים מבחינה אימונולוגית.92 לאורך קווים אלה , CIBERSORTx deconvolution הצביע על כך שאשכול 1 המאופיין בביטוי גבוה של IL22RA2 כולל חתימת גן לתאי NK מופעלים, אך לא נחים, בהשוואה לאשכולות אחרים. הוכח כי ביטוי CD226 מרבד מטופלים לתוצאות במספר ניסויים קליניים של NSCLC.93 עם זאת, בשל הדרך הכפולה של ויסות טרום-ופוסט-תרגום של CD226, הביטוי לא תמיד בא לידי ביטוי בנתוני רצף ה-mRNA.94 לפיכך, מחקרים המתמקדים על הרגולציה הפוסט-תרגוםית של CD226 להעריך את הביטוי שלו בדגימות קליניות באמצעות צביעת נוגדנים.63 עם זאת, בעת חקירת מערך הנתונים של TCGA בנוגע לקשר של שותפים מחייבים CD155 להישרדות, רק CD226 נטה לשיפור הפרוגנוזה (לוג (HR) {{57 }}.24, p=0.06), בעוד TIGIT ו-CD96 לא הראו מתאם להישרדות. חשוב לציין, תאי גידול שהונדסו להפריש IL-22BP יצרו פחות גרורות, מה שמדגיש את הפוטנציאל של מסלול IL-22 להתערבות טיפולית ממוקדת. זה יכול לנטרל ביטוי יתר של CD155 של הגידול, שכן מיקוד ישיר שלו נותר מאתגר בגלל רשת מורכבת של קולטנים שותפים. יש לציין כי ההשפעות ארוכות הטווח של נטרול IL-22 על גרורות אינן ידועות, אך עשויות להשפיע ישירות על השיקול הטיפולי של תאי T או לספק את הרציונל לנטרול IL-22 באמצעות נוגדנים עם פרופיל בטיחות מועיל, כגון Fezakinumab (ניסוי NCT01941537) או IL מהונדס-22 עם תכנון מבוסס מבנה.39,95 לסיכום, זיהינו ביטוי יתר של IL-22-על תאי הגידול כמנגנון שגורם לביטוי יתר של CD155 על תאי הגידול מועיל לצמיחה גרורתית. תפקיד חיוני זה בפרוגנוזה הדגיש את הפוטנציאל של IL-22 כמטרה טיפולית בסרטן. עד כה, הנטרול של IL-22 מוצע בעיקר כאסטרטגיה לטיפול במחלות אוטואימוניות.31,49 הנתונים שלנו על IL-22BP כמנטרל של IL-22, אשר העתיקו את חוסר IL-22 גלובלי, עמד בבסיס הפוטנציאל הטיפולי למיקוד בציר IL-22-IL-22R1 ויש לחקור אותו עוד יותר במחקרים פרה-קליניים וקליניים.
הפניות
1. Hanahan, D., and Weinberg, RA (2011). סימני ההיכר של הסרטן: הדור הבא. תא 144, 646–674. https://doi.org/10.1016/j.cell.2011. 02.013.
2. Massague', J., and Obenauf, AC (2016). קולוניזציה גרורתית על ידי מחזור תאי גידול. טבע 529, 298–306. https://doi.org/10.1038/ nature17038.
3. Renner, P., Rovira, J., Klein, C., Schlitt, HJ, Geissler, EK, and Kroemer, A. (2014). תאי הורגים טבעיים KLRG1(+) מגנים מפני מחלה גרורתית ריאתית על ידי מעקב חיסוני. OncoImmunology 3, e28328. https://doi.org/10.4161/onci.28328.
4. Mohme, M., Riethdorf, S., and Pantel, K. (2017). תאי גידול במחזור ומפוזרים - מנגנונים של מעקב חיסוני ובריחה. נאט. כומר קלינ. אונקול. 14, 155–167. https://doi.org/10.1038/nrclinonc. 2016.144.
5. Briukhovetska, D., Do¨ rr, J., Endres, S., Libby, P., Dinarello, CA, and Kobold, S. (2021). אינטרלוקינים בסרטן: מביולוגיה לטיפול. נאט. כומר סרטן 21, 481–499. https://doi.org/10.1038/s41568-021-00363-z.
6. Kitamura, T., Qian, BZ ו-Pollard, JW (2015). קידום תאי חיסון של גרורות. נאט. כומר אימונול. 15, 73–86. https://doi.org/10.1038/ nri3789.
7. Galon, J., and Bruni, D. (2020). אימונולוגיה של גידולים והתפתחות גידולים: היסטוריות שזורות זו בזו. חסינות 52, 55–81. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.12.018.
8. Page`s, F., Mlecnik, B., Marliot, F., Bindea, G., Ou, FS, Bifulco, C., Lugli, A., Zlobec, I., Rau, TT, Berger, MD , ועוד. (2018). אימות בינלאומי של הקונצנזוס Immunoscore לסיווג סרטן המעי הגס: מחקר פרוגנוסטי ודיוק. Lancet 391, 2128–2139. https://doi. org/10.1016/S0140-6736(18)30789-X.
9. Rui, J., Chunming, Z., Binbin, G., Na, S., Shengxi, W., and Wei, S. (2017). IL-22 מקדם את התקדמות סרטן השד על ידי ויסות HOXB-AS5. Oncotarget 8, 103601–103612. https://doi.org/10.18632/ oncotarget.22063.
10. Kryczek, I., Lin, Y., Nagarsheth, N., Peng, D., Zhao, L., Zhao, E., Vatan, L., Szeliga, W., Dou, Y., Owens, S. ., ועוד. (2014). IL-22(+)CD4(+) תאי T מקדמים גזע סרטן המעי הגס באמצעות הפעלה של גורם שעתוק STAT3 ואינדוקציה של המתילטרנספראז DOT1L. חסינות 40, 772–784. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2014.03.010.
11. Jiang, R., Tan, Z., Deng, L., Chen, Y., Xia, Y., Gao, Y., Wang, X., and Sun, B. (2011). Interleukin-22 מקדם קרצינומה כבדית אנושית על ידי הפעלה של STAT3. הפטולוגיה 54, 900–909. https://doi.org/10.1002/ hep.24486.
12. Kobold, S., Vo¨ lk, S., Claudiz, T., K€ upper, NJ, Minner, S., Tufman, A., D€ uwell, P., Lindner, M., Koch, I ., Heidegger, S., et al. (2013). אינטרלויקין-22 מתבטא לעתים קרובות בסרטן ריאות בתאים קטנים וגדולים ומעודד צמיחה בתאים סרטניים עמידים לכימותרפיה. J. Thorac. אונקול. 8, 1032–1042. https://doi.org/10.1097/JTO.0b013e31829923c8.
13. Hernandez, P., Gronke, K., and Diefenbach, A. (2018). מלכוד-22: אינטרלוקין-22 וסרטן. יורו J. Immunol. 48, 15–31. https://doi.org/10. 1002/eji.201747183.
14. Khosravi, N., Caetano, MS, Cumpian, AM, Unver, N., De la Garza Ramos, C., Noble, O., Daliri, S., Hernandez, BJ, Gutierrez, BA, Evans, SE, et al. (2018). IL22 מקדם סרטן ריאות מוטנטי מסוג Kras על ידי אינדוקציה של תגובה חיסונית פרוטומור והגנה על תכונות הגזע. סרטן אימונול. מילון 6, 788–797. https://doi.org/10.1158/ 2326-6066.CIR-17-0655. 15. Li, H., Mou, Q., Li, P., Yang, Z., Wang, Z., Niu, J., Liu, Y., Sun, Z., Lv, S., Zhang, B. ., ו-Yin, C. (2019). MiR-486-5p מעכב IL-22-מעבר אפיתל-מזנכימלי של תאי סרטן השד על ידי דיכוי Dock1. J. Cancer 10, 4695–4706. https://doi.org/10.7150/jca.30596.
16. Kim, K., Kim, G., Kim, JY, Yun, HJ, Lim, SC, and Choi, HS (2014). Interleukin-22 מקדם טרנספורמציה של תאי אפיתל וגידול שד באמצעות הפעלת MAP3K8. קרצינוגנזה 35, 1352–1361. https://doi.org/10.1093/carcin/bgu044.
17. Katara, GK, Kulshrestha, A., Schneiderman, S., Riehl, V., Ibrahim, S., and Beaman, KD (2020). Interleukin-22 מקדם התפתחות של נגעים ממאירים במודל עכבר של סרטן שד ספונטני. מול. אונקול. 14, 211–224. https://doi.org/10.1002/1878-0261.12598.
18. Huber, S., Gagliani, N., Zenewicz, LA, Huber, FJ, Bosurgi, L., Hu, B., Hedl, M., Zhang, W., O'Connor, W., Jr., Murphy, AJ, et al. (2012). IL-22BP מווסת על ידי ה-inflammasome ומווסת את התפתחות הגידול במעי. טבע 491, 259–263. https://doi.org/10.1038/ nature11535.
19. פרז, LG, Kempski, J., McGee, HM, Pelzcar, P., Agalioti, T., Giannou, A., Konczalla, L., Brockmann, L., Wahib, R., Xu, H., et al. (2020). איתות TGFbeta בתאי Th17 מעודד ייצור IL-22 וסרטן המעי הגס הקשור לקוליטיס. נאט. Commun. 11, 2608. https://doi.org/10.1038/ s41467-020-16363-w.
20. Meyer, A., Stark, M., Karstens, JH, Christiansen, H., and Bruns, F. (2012). היסטיוציטוזיס של תאי לנגרהנס של בסיס הגולגולת: האם טיפול קרינתי במינון נמוך יעיל? נציג תיק אונקול. Med. 2012, 789640. https://doi.org/10.1155/2012/789640.
21. Zhuang, Y., Peng, LS, Zhao, YL, Shi, Y., Mao, XH, Guo, G., Chen, W., Liu, XF, Zhang, JY, Liu, T., et al. (2012). עלייה ב-IL-22-תוך-גידולית המייצר תאי CD4(+) T ותאי Th22 מתאם עם התקדמות סרטן הקיבה ומנבאת הישרדות לקויה של חולים. סרטן אימונול. אימונית. 61, 1965–1975. https://doi.org/10.1007/s00262-012- 1241-5.
22. Chen, X., Wang, Y., Wang, J., Wen, J., Jia, X., Wang, X., and Zhang, H. (2018). הצטברות של תאי T-helper 22, interleukin-22 ותאי מדכאים שמקורם במיאלואיד מעודדת התקדמות סרטן הקיבה בחולים קשישים. אונקול. Lett. 16, 253–261. https://doi.org/10.3892/ol.2018.8612.
23. Doulabi, H., Rastin, M., Shabahangh, H., Maddah, G., Abdollahi, A., Nosratabadi, R., Esmaeili, SA, and Mahmoudi, M. (2018). ניתוח של תאי Th22, Th17 ו-CD4(+) המייצרים יחד IL-17/IL-22 בשלבים שונים של סרטן המעי הגס האנושי. ביומד. פרמקוטר. 103, 1101–1106. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.04.147.
24. Zeng, H., Liu, Z., Wang, Z., Zhou, Q., Qi, Y., Chen, Y., Chen, L., Zhang, P., Wang, J., Chang, Y. ., ועוד. (2020). תאים המייצרים IL22- תוך-גידוליים מגדירים סרטן שלפוחית השתן החודרני של שריר תת-סוג חיסוני (2017). תפקוד מגן של IL-22BP באיסכמיה-פרפוזיה חוזרת ופציעת כבד הנגרמת על ידי פרצטמול. J. Immunol. 199, 4078–4090. https://doi. org/10.4049/jimmunol.1700587.
25. Jiang, R., Wang, H., Deng, L., Hou, J., Shi, R., Yao, M., Gao, Y., Yao, A., Wang, X., Yu, L. ., ו-Sun, B. (2013). IL-22 קשור להתפתחות סרטן המעי הגס באדם על ידי הפעלה של STAT3. BMC Cancer 13, 59. https://doi.org/10.1186/1471-2407-13-59.
26. Fukui, H., Zhang, X., Sun, C., Hara, K., Kikuchi, S., Yamasaki, T., Kondo, T., Tomita, T., Oshima, T., Watari, J. ., ועוד. (2014). IL-22 המיוצר על ידי פיברובלסטים הקשורים לסרטן מקדם פלישת תאי סרטן קיבה באמצעות איתות STAT3 ו-ERK. בר. J. Cancer 111, 763–771. https://doi.org/ 10.1038/bjc.2014.336.
27. Liu, T., Peng, L., Yu, P., Zhao, Y., Shi, Y., Mao, X., Chen, W., Cheng, P., Wang, T., Chen, N. ., ועוד. (2012). תאי Th22 ו-Th17 מוגברים במחזור הדם קשורים להתקדמות הגידול ולהישרדות המטופל בסרטן קיבה אנושי. ג'יי קלין. אימונול. 32, 1332–1339. https://doi.org/10.1007/ s10875-012-9718-8.
28. Niccolai, E., Taddei, A., Ricci, F., Rolla, S., D'Elios, MM, Benagiano, M., Bechi, P., Bencini, L., Ringressi, MN, Pini, A. ., ועוד. (2016). תאי Th22 המייצרים IFN-גמא תוך-גידולית מתואמים עם שלב TNM והתוצאות הגרועות ביותר בסרטן הלבלב. קלינ. Sci. 130, 247–258. https://doi.org/10.1042/CS20150437.
29. Xu, X., Tang, Y., Guo, S., Zhang, Y., Tian, Y., Ni, B., ו-Wang, H. (2014). רמות ותדירות מוגברות של אינטרלוקין תוך-גידולי 22 של תאי T 22-מייצר CD4+ מתואמים עם התקדמות סרטן הלבלב. לבלב 43, 470-477. https://doi.org/10.1097/MPA.000000000000 0055.
30. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP, and Pestka, S. (2001). זיהוי של קומפלקס קולטן האינטרלוקין הפונקציונלי-22 (IL-22): שרשרת IL-10R2 (IL-10Rbeta) היא שרשרת משותפת של שני ה-IL{{7 }} ו-IL-22 (IL- 10-קשורים ל-T cell-related factor inducible factor, IL-TIF) רצפטורים. ג'יי ביול. Chem. 276, 2725–2732. https://doi.org/10.1074/jbc.M0078 37200.
31. Ouyang, W., and O'Garra, A. (2019). IL-10 ציטוקינים משפחתיים IL-10 ו-IL- 22: ממדע בסיסי לתרגום קליני. חסינות 50, 871–891. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.03.020.
32. Kempski, J., Giannou, AD, Riecken, K., Zhao, L., Steglich, B., L€ ucke, J., Garcia-Perez, L., Karstens, KF, Wo¨ stemeier, A. , Nawrocki, M., et al. (2020). IL22BP מתווך את ההשפעות האנטי-גידוליות של לימפוטוקסין נגד גידולי מעי גס בעכברים ובני אדם. גסטרואנטרולוגיה 159, 1417– 1430.e3. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2020.06.033.
33. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP, and Pestka, S. (2001). זיהוי, שיבוט ואפיון של קולטן מסיס חדש הקושר את IL-22 ומנטרל את פעילותו. J. Immunol. 166, 7096–7103. https://doi. org/10.4049/jimmunol.166.12.7096.
34. Dudakov, JA, Hanash, AM, and Van den Brink, MRM (2015). אינטרלויקין-22: אימונוביולוגיה ופתולוגיה. אננו. כומר אימונול. 33, 747–785. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-032414-112123.
35. Wolk, K., Kunz, S., Witte, E., Friedrich, M., Asadullah, K., and Sabat, R. (2004). IL-22 מגביר את החסינות המולדת של רקמות. חסינות 21, 241–254. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2004.07.007.
36. Sabat, R., Ouyang, W., and Wolk, K. (2014). הזדמנויות טיפוליות של מערכת IL-22-IL-22R1. נאט. Rev. Drug Discov. 13, 21–38. https://doi. org/10.1038/nrd4176.
37. Zenewicz, LA, Yancopoulos, GD, Valenzuela, DM, Murphy, AJ, Stevens, S., and Flavell, RA (2008). אינטרלוקין מולד ומסתגל-22 מגן על עכברים מפני מחלות מעי דלקתיות. חסינות 29, 947–957. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2008.11.003.
38. Gronke, K., Herna´ndez, PP, Zimmermann, J., Klose, CSN, Kofoed Branzk, M., Guendel, F., Witkowski, M., Tizian, C., Amann, L., Schumacher, F., et al. (2019). Interleukin-22 מגן על תאי גזע מעיים מפני מתח גנוטוקסי. טבע 566, 249–253. https://doi.org/10.1038/ s41586-019-0899-7.
39. Saxton, RA, Henneberg, LT, Calafiore, M., Su, L., Jude, KM, Hanash, AM, and Garcia, KC (2021). ניתן לנתק את התפקודים המגינים על הרקמה של אינטרלוקין -22 מפעולות פרו-דלקתיות באמצעות עיצוב מבוסס מבנה. חסינות 54, 660–672.ה9. https://doi.org/10. 1016/j.immuni.2021.03.008.
40. Dumoutier, L., Louahed, J., and Renauld, JC (2000). שיבוט ואפיון של גורם אינדוקטיבי שמקורו בתאי T (IL-TIF) הקשור ל-IL-10-, ציטוקין חדש הקשור מבחינה מבנית ל-IL-10 וניתן להשראת IL-9. J. Immunol. 164, 1814–1819. https://doi.org/10.4049/jimmunol.164. 4.1814.
41. Lejeune, D., Dumoutier, L., Constantinescu, S., Kruijer, W., Schuringa, JJ, and Renauld, JC (2002). Interleukin-22 (IL-22) מפעיל את מסלולי הקינאז JAK/STAT, ERK, JNK ו-p38 MAP בקו תאי הפטומה של חולדה. מסלולים משותפים עם IL-10 ונבדלים מהם. ג'יי ביול. Chem. 277, 33676–33682. https://doi.org/10.1074/jbc.M204204200.
42. Nagalakshmi, ML, Rascle, A., Zurawski, S., Menon, S., and de Waal Malefyt, R. (2004). Interleukin-22 מפעיל STAT3 וגורם ל-IL-10 על ידי תאי אפיתל המעי הגס. Int. Immunopharmacol. 4, 679–691. https://doi. org/10.1016/j.intimp.2004.01.008.
43. Mitra, A., Raychaudhuri, SK, and Raychaudhuri, SP (2012). שגשוג תאים המושרה על ידי IL-22- מווסת על ידי מפל איתות PI3K/Akt/mTOR. ציטוקין 60, 38–42. https://doi.org/10.1016/j.cyto.2012.06.316.
44. Bachmann, M., Ulziibat, S., H€ ardle, L., Pfeilschifter, J., and M€ uhl, H. (2013). IFNalpha ממירה IL-22 לציטוקין המפעיל ביעילות את STAT1 ואת המטרות במורד הזרם שלו. Biochem. פרמקול. 85, 396–403. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2012.11.004.
45. Zheng, Y., Valdez, PA, Danilenko, DM, Hu, Y., Sa, SM, Gong, Q., Abbas, AR, Modrusan, Z., Ghilardi, N., de Sauvage, FJ, and Ouyang , W. (2008). Interleukin-22 מתווך הגנה מוקדמת של המארח מפני הצמדות והכחדה של פתוגנים חיידקיים. נאט. Med. 14, 282–289. https://doi. org/10.1038/nm1720.
46. Andoh, A., Zhang, Z., Inatomi, O., Fujino, S., Deguchi, Y., Araki, Y., Tsujikawa, T., Kitoh, K., Kim-Mitsuyama, S., Takayanagi , א' ועוד. (2005). Interleukin-22, חבר בתת-משפחת IL-10, גורם לתגובות דלקתיות במיופיברובלסטים תת-אפיתליאליים של המעי הגס. גסטרואנטרולוגיה 129, 969–984. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2005.06.071.
47. Tufman, A., Huber, RM, Vo¨ lk, S., Aigner, F., Edelmann, M., Gamarra, F., Kiefl, R., Kahnert, K., Tian, F., Boulesteix, AL, et al. (2016). Interleukin-22 מוגבר בשטיפה מחולים עם סרטן ריאות ומחלות ריאות אחרות. BMC Cancer 16, 409. https://doi.org/10.1186/s12885-016- 2471-2.
48. Voigt, C., May, P., Gottschlich, A., Markota, A., Wenk, D., Gerlach, I., Voigt, S., Stathopoulos, GT, Arendt, KAM, Heise, C., et al. (2017). תאים סרטניים גורמים לייצור אינטרלוקין-22 מתאי זיכרון CD4(+) T דרך אינטרלויקין-1 כדי לקדם את צמיחת הגידול. פרוק. נאטל. אקד. Sci. ארה"ב 114, 12994–12999. https://doi.org/10.1073/pnas.17051 65114.
49. Markota, A., Endres, S., and Kobold, S. (2018). מיקוד לאינטרלוקין-22 לטיפול בסרטן. זִמזוּם. תַרכִּיב. אימונית. 14, 2012–2015. https://doi.org/10.1080/21645515.2018.1461300.
50. Ewens, A., Mihich, E., and Ehrke, MJ (2005). גרורות מרוחקות מגידול תת עורי E0771 אדנוקרצינומה של השד המדולרי. Anticancer Res. 25, 3905–3915.
51. Sugiura, K., and Stock, CC (1952). מחקרים בספקטרום גידולים. I. השוואה בין הפעולה של מתיל ביס (2-כלורואתיל)אמין ו-3-ביס(2-כלורואתיל)אמינומתיל-4-מתוקסימתיל -5-הידרוקסי{{7} }מתילפירידין על גידול של מגוון גידולי עכברים וחולדות. סרטן 5, 382–402. https://doi.org/10.1002/1097-0142(195203)5:2<382::aidcncr2820050229>3.0.co;2-3.
52. Renier, N., Wu, Z., Simon, DJ, Yang, J., Ariel, P., and Tessier-Lavigne, M. (2014). iDISCO: שיטה פשוטה ומהירה לסימון דגימות רקמות גדולות להדמיית נפח. תא 159, 896–910. https://doi.org/10. 1016/j.cell.2014.10.010.
53. Kleinschmidt, D., Giannou, AD, McGee, HM, Kempski, J., Steglich, B., Huber, FJ, Ernst, TM, Shiri, AM, Wegscheid, C., Tasika, E., et al.
54. O'Donnell, JS, Madore, J., Li, XY, and Smyth, MJ (2020). תפקודים חיסוניים פנימיים וחיצוניים של הגידול של CD1
55. סמינר. סרטן ביול. 65, 189–196. https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2019.11.013. 55. Molfetta, R., Zitti, B., Lecce, M., Milito, ND, Stabile, H., Fionda, C., Cippitelli, M., Gismondi, A., Santoni, A., and Paolini, R. (2020). CD155: מולקולה רב תפקודית בהתקדמות הגידול. Int. י.מול. Sci. 21, 922. https://doi.org/10.3390/ijms21030922.
56. Gao, J., Zheng, Q., Xin, N., Wang, W., and Zhao, C. (2017). CD155, מולקולה אונקו-אימונולוגית בגידולים אנושיים. מדע הסרטן. 108, 1934– 1938. https://doi.org/10.1111/cas.13324.
57. Morimoto, K., Satoh-Yamaguchi, K., Hamaguchi, A., Inoue, Y., Takeuchi, M., Okada, M., Ikeda, W., Takai, Y., and Imai, T. ( 2008). אינטראקציה של תאים סרטניים עם טסיות דם המתווך על ידי קולטן Necl-5/poliovirus משפרת גרורות של תאי סרטן לריאות. אונקוגן 27, 264–273. https://doi.org/10.1038/sj.onc.1210645.
58. Chan, CJ, Martinet, L., Gilfillan, S., Souza-Fonseca-Guimaraes, F., Chow, MT, Town, L., Ritchie, DS, Colonna, M., Andrews, DM, and Smyth, MJ (2014). הקולטנים CD96 ו-CD226 מנוגדים זה לזה בוויסות תפקודי תאי הורגים טבעיים. נאט. אימונול. 15, 431–438. https://doi.org/10.1038/ni.2850.
59. Fuchs, A., Cella, M., Giurisato, E., Shaw, AS, and Colonna, M. (2004). חוד החנית: CD96 (מישוש) מקדם הידבקות תא NK-תאי מטרה על ידי אינטראקציה עם קולטן הפוליו-וירוס (CD155). J. Immunol. 172, 3994– 3998. https://doi.org/10.4049/jimmunol.172.7.3994.
60. Jarosch, S., Ko¨ hlen, J., Wagner, S., D'Ippolito, E., and Busch, DH (2022). ChipCytometry לזיהוי מרובה של סמני חלבון ו-mRNA בדגימות רקמת FFPE אנושיות. STAR פרוטוק. 3, 101374. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2022.101374.
61. Chauvin, JM, Ka, M., Pagliano, O., Menna, C., Ding, Q., DeBlasio, R., Sanders, C., Hou, J., Li, XY, Ferrone, S., et al. (2020). גירוי IL15 עם חסימת TIGIT הופכת תפקוד לקוי של תאי NK בתיווך CD155- במלנומה. קלינ. Cancer Res. 26, 5520–5533. https://doi.org/10.1158/ 1078-0432.CCR-20-0575.
62. Weulersse, M., Asrir, A., Pichler, AC, Lemaitre, L., Braun, M., Carrie´, N., Joubert, MV, Le Moine, M., Do Souto, L., Gaud, G., et al. (2020). אובדן תלוי ב-eomes של הקולטן המפעיל CD226 מרסן תפקודים אנטי-גידוליים של תאי T CD8(+) ומגביל את היעילות של אימונותרפיה בסרטן. חסינות 53, 824–839.e10. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.006.
63. Braun, M., Aguilera, AR, Sundarrajan, A., Corvino, D., Stannard, K., Krumeich, S., Das, I., Lima, LG, Meza Guzman, LG, Li, K., et al. (2020). CD155 על תאי גידול מניע עמידות לאימונותרפיה על ידי גרימת הפירוק של הקולטן המפעיל CD226 בתאי CD8(+) T. חסינות 53, 805–823.e15. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.010.
64. Lepletier, A., Madore, J., O'Donnell, JS, Johnston, RL, Li, XY, McDonald, E., Ahern, E., Kuchel, A., Eastgate, M., Pearson, SA, et al. (2020). ביטוי CD155 של גידול קשור לעמידות לאימונותרפיה נגד PD1 במלנומה גרורתית. קלינ. Cancer Res. 26, 3671–3681. https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-19-3925.
65. ניומן, AM, Steen, CB, Liu, CL, Gentles, AJ, Chaudhuri, AA, Scherer, F., Khodadoust, MS, Esfahani, MS, Luca, BA, Steiner, D., et al. (2019). קביעת שפע וביטוי של סוג תאים מרקמות בתפזורת עם ציטומטריה דיגיטלית. נאט. ביוטכנולוגיה. 37, 773–782. https://doi.org/10.1038/s41587-019-0114-2.
66. סוריאני, א', זינגוני, א', סרבוני, ג', יאניטו, מ"ל, ריקיארדי, מ.ר., די ג'יאלונרדו, וי., צ'יפיטלי, מ., פיונדה, סי. פטרוצ'י, מ"ט, גואריני, א., et al. (2009). ויסות-על תלוי-ATM-ATR של ליגני DNAM-1 ו-NKG2D על תאי מיאלומה נפוצה על ידי חומרים טיפוליים מביא לרגישות מוגברת של תאי NK וקשור לפנוטיפ מזדקן. דם 113, 3503–3511. https://doi.org/10.1182/blood- 2008-08-173914.
