מחקר על האנזימים המיקרוביאליים המיוצרים במהלך תסיסה חיידקית משולבת ופעילותם הביולוגית ⅱ

תַקצִיר

במאמר זה שימשו Aspergillus oryzae, שמרים, סטרפטוקוקוס תרמופילוס, ו- Lactobacillusbulgaricus כזני התחלה ראשוניים כדי לחקור את ההשפעה של תסיסה מעורבת של אנזים תפוח על הערכה חושית. תפוחים, אגסים, והדרים שימשו כחומרי גלם בתנאים מיטביים כדי להשיג את האנזים האנזימיינטזפרנטנט המתאים למחקר הפעילות הנוגדת חמצון של אנזימים של תפוחים, פעילות אנזים כדי להוסיף מינים (קבוצת ניסוי), לא תוספים חיידקים (קבוצת ביקורת). מחקר על הפעילות הנוגדת חמצון במהלך תסיסה ושינויי פעילות אנזים של האנזים, קבוצת הניסוי והבדלי הביקורת בין הקבוצות. הממצאים העיקריים הם כדלקמן: 1． השילוב האופטימלי של זנים של יחס חיידקים והערכה חושית באמצעות רמת ציון הערכה חושית כאינדיקטור, נבחרים ליצירת היחס הגבוה ביותר של ציוני הערכה חושית. ראשית, בניסויי המינים היחידים, האנזימוואסריליליה לאחר חיסון של זנים טהורים מצא את אספרגילוס אוריזה, שמרים, סטרפטוקוקוסתרמופילוס, לקטובצילוס בולגריקוס נמצאים בהערכה החושית של האנזים ממלא תפקיד טוב. ואחריו מבחן גורם יחיד כדי לשנות את כמות המין בו החיסון, הקשר בין ארבעת סוגי הזנים השונים בין זני חיסון שונים. לבסוף, היחס האופטימלי של תוצאות המתח מבדיקת הניסוי האורתוגונאלי הוא כמו זה, חיסון השמרים הוא 1. {7}}%, חיסון הסטרפטוקוס תרמופילוס הוא 1. {{{}}%של חוטם של הניתוח של הניתוק, {}}}%, inculum, 1. 0%. הציון הגבוה ביותר של הערכה חושית של האנזים הוא עד 92.3.

 

עשבי תיבול חדשים סיסטנאש עם כוח אנטי חמצון גבוה יותר

 

2． אנזימים של פעילות נוגדי חמצון של אפל

תכולת הפנול הכוללת של אנזימים בקבוצת ניסוי הפחתת כוח, יכולת ניקוי רדיקלית של DPPH,הידרוקסיל רדיקלי, ABTS יכולת ניקוי רדיקליתוכןSuperoxide Scavenging Radicalעלה בריכוז, קבוצת הניסוי של אנזים סופר אנזים חמצן תפוח אניון רדיקלי, DPPH · רדיקלי, ABTS, ABTS, רדיקלית, מאשר קבוצת הביקורת; קבוצה של אנזימים יכולת ניקוי רדיקלית הידרוקסיל טובה במיוחד; בסך הכל, היכולת של קבוצת הניסוי גבוהה יותר מהיכולת לרדיקלים של קבוצת היכולת הרדיקלית ללא בקרה. 3． אנזימי תפוחים, וריאציה של אנזים של פעילות תסיסת אנזים של אגס ואגס הדרים, עם הרחבת זמן התסיסה, המגמות המשתנות של קבוצות הניסוי והביקורת שניהם קומפוזיציה כל פעילות נוגדת חמצון שונה, ושינויים במורכבים, תלוי אם המתח הנוסף ומזון התסיסה עצמו. אפל, למשל, מוסיפה את החיידקים ולא מוסיפה זן בהשוואה ל 60 הימים הראשונים, התוכן הפנולי הכולל עלה ב -15. 00%, והפחתת עוצמת ההספק השתפרה ב- 1.8%, סופר -אוקסיד אניון רדיקלי גדל על ידי כושר הרדיקציה של Scavenging ברדיקציה ביחס לרדיקלידציה ביכולת רדיקליה ברדיקליה. 59%, ABTS יכולת ניקוי רדיקלית עלתה ב -3.10%. 4． חוק הטרנספורמציה של וריאציה של אנזים של אפל בפעילות האנזים במהלך התסיסה באמצעות פעילות האנזים הרלוונטית בקבוצת הניסוי וקבוצת הביקורת שהתגלו, עם הרחבת זמן התסיסה, פעילות האנזים אינה מציגה חוקי שינוי מצטבר אלא מגדילה ויורדת. הוסף חיידקים ולא נוסף זן בהשוואה ל 90 ימי התסיסה הראשונים, פעילות ה- SOD ירדה ב 22.39%, פעילות העמילאז עלתה ב- 50%, פעילות הליפז ירדה ב- 69.49%, 85.71%פרוטאקטיביות השתפרה, פעילות התאית השתפרה ב- 54.19%. 5． תהליך התסיסה של אנזים תפוחים כולל חומצה מוחלטת, סוכר סוכר ואלכוהול, משנה אנזימים תוך 15 יום מתחילת התסיסה, הגיע הזמן לצמיחה והתרבות מיקרוביאלית של המהירה ביותר, אך גם החומצה הכוללת, סכום הכולל ותכולת האלכוהול, כאשר השינוי הגדול ביותר. עם הרחבת זמן התסיסה, תכולת החומצה הכוללת של אנזימים בתוך המצגת לאחר שהראשונה גדלה ואז ירדה. תסיסה 15, תכולת חומצה כוללת הצטברות מהירה בהתחלה, תכולת הסוכר הכוללת הופחתה משמעותית, וייצרה הרבה אלכוהול וערך ה- pH ירד בחדות. 15 יום לשלב התסיסה האיטי. בהשוואה למתח הנוסף של חיידקים וללא הוסיפו ב -90 ימי התסיסה הראשונים, תכולת החומצה הכוללת הייתה גבוהה מ- 24.14%, סך כל תכולת הסוכר ירדה ב 12.5%, תכולת האלכוהול עלתה ב -16.67%, וה- pH ירדה ב -5%.

 

מילות מפתח: Aspergillus oryzae; שמרים; Streptococcus thermophilus; lactobacillusbulgaricus; אנזימים; פעילות ביולוגית

עשבי תיבול חדשים סיסטנאש עם כוח אנטי חמצון גבוה יותר

 

פרק 1 מבוא

אנזימים הפכו למזון בריאות פופולרי בשנים האחרונות. בין אם מדובר בפרסומות טלוויזיה או שיווק מקוון, ניתן לראות אותן בכל מקום. הם "האנזימים" שאנשים מכירים היטב. בדרך זו, "אנזימים" לא נראים כל כך מסתוריים. כמעט כל האיברים, הרקמות והתאים בגוף האדם מסתמכים על התגובה הקטליטית ואספקת האנרגיה של אנזימים כדי לשמור על כוחם ובריאותם. אנזימים יכולים לקדם את חילוף החומרים של הגוף, ולהפוך אותנו למאושרים ואנרגטיים פיזית ונפשית; הם יכולים לקדם זרימת דם, לחסל רעלים בגוף ולטהר את מערכת הדם שלנו; הם יכולים לחזק את העיכול והספיגה במערכת העיכול שלנו, ולחזק את הכושר הגופני שלנו; הם יכולים לווסת את איזון בסיס החומצה בגופנו ולעזור לניקוי רעלים מהכבד; הם יכולים גם לקדם תיקון של תאים פגומים ולהפעיל תאים [1].
בתחילת המאה העשרים, אנזימים החלו להיות פופולריים ביפן והוצגו לאחר מכן לטייוואן, סינגפור, מלזיה, דרום קוריאה, וארצות הברית. לאן שהם הלכו, הם הציבו גלים של קדחת אנזים וקיבלו תגובות נלהבות במיוחד. ככל שהזמנים מתקדמים, אנשים שמים לב יותר לבריאות, תעשיות הקשורות לאנזים התפתחו במהירות, ואנזים מזון משכו גם יותר ויותר תשומת לב. במהלך תהליך התסיסה, מזון צורך ברציפות פחמימות, מה שמקטין את תכולת השומן. לפיכך, בני אדם משקיעים זמן רב ועלות כלכלית גבוהה לתסס מזון לפני האכילה, לא רק כדי לשנות את הטעם אלא גם לשיקולים תזונתיים.

 

1.1 סקירה של אנזימים מיקרוביאליים

אנזימים מיקרוביאליים מתייחסים למזונות מותססים פונקציונליים העשירים בוויטמינים ובמינרלים המיוצרים על ידי תסיסה של פירות, ירקות, ירקות וכו '. עם מגוון מיקרואורגניזמים. במהלך כל תהליך התסיסה של האנזים, מיקרואורגניזמים גורמים לחומרי הגלם לעבור שינויים שונים באמצעות חילוף החומרים שלהם, ומייצרים חומרים ואנזימים ביו -אקטיביים חדשים מבלי להשפיע על החומרים המזינים המקוריים. חומרים פעילים חדשים אלה כוללים חומרים פנוליים, חומצות אורגניות, סוכרים, וחומרים מזינים פונקציונליים אחרים, אשר תרמו תרומות מסוימות לבריאות האדם. חומרים פנוליים כוללים בעיקר אנתוציאנינים, פלבנואידים, טאנינים, ליגנין, קטכינים, סטירן, קומרינים, פלבונולים, טאנינים, חומצות פנוליות וכו '; חומצות אורגניות כוללות בעיקר חומצה מאלית, חומצה סוקסינית, חומצה פירובית, חומצה גלית וכו '[2]. במובן מסוים, הוספת זנים מיקרוביאליים לאנזימים זה כמו להציב מכונה לעיבוד מיקרו אחד אחרי השנייה בגוף האדם. זה יכול לעבד כראוי כל תא במזון, להסיר כמה חומרים לא מזינים, לבטל את נזקם לגוף האדם ואז להוסיף כמה חומרים מזינים כדי להשיג את השפעת הטיפול הבריאותי. אנזימים מיקרוביאליים לא רק שומרים על תפקידיהם המקוריים מבחינת מאפיינים פונקציונליים, אלא שטעמם המותסס הייחודי יכול לענות גם על צרכי האנשים מבחינת הטעם והמרקם.

 

1.2 מנגנון תסיסה של אנזימים מיקרוביאליים

מזונות רבים יכולים לשמש לתסיסה. לדוגמה, תסיסת בשר ומזונות חלב יכולים לעזור לפרק את החלבון המקורי ולהקל על גוף האדם לעכל ולספוג; תסיסה של העור, הפירות, וזרעי הצמחים יכולים להשיג את האנזים עם הפעילות הביולוגית העשירה ביותר, ושורשיו וגבעוליו עשירים במינרלים לאחר התסיסה. לאחר תקופה ארוכה של תסיסה, הפרוביוטיקה מגבירה את הפירוק ואת קצב העיכול של חומרים מזינים של חומר גלם, מה שהופך את היכולת לפרק חלבונים מולקולריים גדולים למגוון חומצות אמינו חיוניות לחזקות יותר, כך שניתן להשיג חומרים מזינים שאינם קלים לביטול. המיקרואורגניזמים הכלולים באנזימים מיקרוביאליים כוללים בעיקר חיידקי חומצה לקטית, שמרים, אספרגילוס וכו '[3-4]. במהלך תהליך התסיסה, מיקרואורגניזמים אלה מפרישים אנזימים שיכולים לפרק את קירות התא, ובכך לשפר את קצב השימוש של חומרים מזינים. בנוסף, הם יכולים גם לסנתז כמה ויטמינים שניתן "לייצר" רק על ידי מיקרואורגניזמים ולא ניתן לסנתז אותם על ידי בעלי חיים וצמחים עצמם, כמו ויטמין B12. במהלך תהליך התסיסה, מיקרואורגניזמים מייצרים מטבוליטים רבים באמצעות חילוף החומרים שלהם, המועילים לוויסות התפקודים הביולוגיים של הגוף ולעכב את הצטברות החומרים המזיקים.
Sievers M, Reiss, et al. חקר את המנגנון העיקרי של תהליך התסיסה של אנזים קומבוצ'ה. התוצאות הראו כי בתהליך התסיסה עם סוכרוז כמקור הפחמן, הנתונים המקוריים של ערך ה- pH של נוזל התסיסה היו 3.75, שירדו ל -2.42; המטבוליטים המיוצרים כללו פרוקטוז, חומצה אצטית, אתנול, חומצה גלוקונית וכו '; יחד עם זאת, התוצאות הראו קשר סימביוטי מועיל הדדי טוב בין חיידקי שמרים לחומצה אצטית, אשר משתקפים בעיקר בשמרים ממיר סוכרוז לגלוקוז ופרוקטוז באמצעות תסיסה, ואז משתמש בפרוקטוז לתסיסה לאתנול, ואילו חיידקים אצטיים ממירים גלוקוז לגלוקוני ואתנול לאתנול (uptation ontation [uptation, שנג-צ'צ'ו ואח '. חקר את הפעילות הנוגדת חמצון של אנזים קומבוצ'ה במהלך התסיסה. התוצאות הראו כי לאחר 15 ימי תסיסה, שיעור העיכוב של חמצן חומצה לינולנית עלה ל 49%, שיעור ההפקה הרדיקלי של הידרוקסיל עלה ל -40%, ושיעור ההפקה הרדיקלי של DPPH עלה ל 70%. הסיבה לשיפורים אלה הייתה פירוק המיקרואורגניזמים במהלך תהליך התסיסה [7]. מִי. Ae. Choi et al. חקר את ההבדלים בתהליך התסיסה של אנזים קומבוצ'ה בתנאי טמפרטורה ומקור פחמן שונים. התוצאות הראו כי סוגי החומצות האורגניות המיוצרות על ידי שימוש בארבעה מקורות פחמן שונים, כלומר גלוקוז, פרוקטוז, סוכרוז וסירופ תירס, היו דומים, אך תוכנם היו שונים. הטמפרטורה האופטימלית לייצור חומצות תסיסה הייתה 30 מעלות, ושיעורי המטבוליים היו גבוהים לנמוכים: פרוקטוז, גלוקוז וסוכרוז, ביניהם קצב המטבולי של פרוקטוז היה מהיר בהרבה מזה של הגלוקוזה [8].

עשבי תיבול חדשים סיסטנאש עם כוח אנטי חמצון גבוה יותר

 

1.3 מבוא לזנים ניסיוניים

ישנם סוגים רבים של מיקרואורגניזמים באנזימים מיקרוביאליים מותססים באופן טבעי, והתוכן משתנה. העיקריות העיקריות שהם חיידקי חומצה לקטית, שמרים, אספרגילוס וכו '. המפתח למחקר זה הוא לבחור 4 זני תסיסה מועילים, ולחוסל באופן מלאכותי חלק מסוים של זנים על בסיס ייצור האנזים המקורי כדי ללמוד את השינויים בתהליך התסיסה. ארבעת הזנים הללו כוללים אספרגילוס אוריזה, שמרים, סטרפטוקוקוס תרמופילוס ולקטובצילוס בולגריקוס. נתוני ספרות מקיפים מראים כי במהלך תהליך התסיסה של אנזימים, הזנים מורכבים ומגוונים, וניתן לייצר זנים חדשים רבים באמצע. עם זאת, למרות המורכבות והמגוון של הזנים, בדרך כלל יש להם קומפוזיציה קבועה. זה כולל את 4 הזנים שנבחרו בניסוי זה. בכל תהליך התסיסה, 4 הזנים הללו ממלאים תפקידים שונים, אך הם אינם אנשים עצמאיים, אלא משלימים זה את זה. לפיכך, השליטה ביחס המתח היא קריטית וקובעת את איכות האנזים.

 

1.3.1 Aspergillus oryzae

Aspergillus oryzae הוא פטריה השייכת לתת -פילום Ascomycota ולסוג אספרגילוס עם תכונות גז טובות. ההיפות שלה הן בדרך כלל צהובות-ירוקות או צהובות-חומות. מתחת למיקרוסקופ, ראשי הקונדיאליות שלו הם רדיאליים, בצורת בקבוק או כדורי אפיקה. הקונדיופורים צומחים על תאי רגליים עם קירות עבים, והגבעולים הם בדרך כלל שכבתיים. הקונידיה חלקים וכמה מעטים יש קוצים.
Aspergillus oryzae הוא מין מיקרוביאלי המייצר כמות גדולה של אנזימים. זה יכול לייצר אנזימים אחרים מלבד פרוטאזות, כמו עמילאז, תאית ואנזימים סקרנים [9]. תחת פעולת פרוטאזות, אספרגילוס אוריזה מפרקת חלבונים מולקולריים גדולים בלתי ניתנים לעיכול לחומצות אמינו ופוליפפטידים; תחת פעולת אמילאזים, הוא משפיל שרשרת ישר ועמילן מסועף לסוכרים מולקולריים נמוכים כמו מלטוז וגלוקוז. ל- Aspergillus oryzae יש ערך תזונתי גבוה, יכול לקדם עיכול וספיגה, ויש לו השפעה מסוימת בתחום הבריאות על גוף האדם. לכן הוא נמצא בשימוש נרחב במזון, מבשלות ותעשיות אחרות [10].

 

1.3.2 שמרים

במוצרי חלב מסורתיים מותססים באסיה, מזרח אירופה, אפריקה וכו ', כמו קפיר, קוסיס, איירג, עמאסי וגבינות, שמרים ממלאים תפקיד חשוב מאוד. זה יכול להביא את הארומה והטעם הרצוי למוצר [11]. בשנים האחרונות אנשים גילו ברציפות שכאשר שמרים משמשים כחומר תסיסה עזר, זה יכול להשפיע לטובה על טעמם של מוצרי החלב ויכולים לעכב ביעילות את צמיחתם של חיידקים מזיקים, ויש להם פונקציות מועילות לפוטנציאל לגוף האדם [{1}]. הפחמן הדו -חמצני המיוצר על ידי שמרים במהלך תהליך התסיסה יכול לקדם את הפעילות של חיידקי חומצה לקטית ולהאריך גם את מחזור הגידול של מיקרואורגניזמים מזיקים [15]. שמרים מעולים מתרבים בכמויות גדולות בתחילת התסיסה ומונע פלישה למיקרואורגניזמים המייצרים חומצה, ומקצרים מאוד את התקופה האיטית של תהליך התסיסה; היכולת שלו לייצר אלכוהול על ידי תסיסה היא חזקה ויכולה לגרום לריכוז האלכוהול להגיע לרמה גבוהה תוך זמן קצר, מה שלא רק מעכב את ההתרבות של חיידקים שונים, אלא גם מייצר חומרים ארומה וטובים יותר [16]. באופן דומה, הוספת כמות מתאימה של שמרים לאנזים יכולה לא רק לשפר את טעם האנזים, אלא גם להפוך את האנזים לעמידה יותר בפני טמפרטורה גבוהה, תכולת אלכוהול גבוהה ולחץ אוסמוטי גבוה בתהליך התסיסה, ויכולה להתנגד טוב יותר להשפעה של סביבות לוואי.

 

1.3.3 סטרפטוקוקוס תרמופילוס

Streptococcus thermophilus שייך לסוג Streptococcus. טמפרטורת הצמיחה האופטימלית שלה היא 38 מעלות -43 תואר וערך ה- pH האופטימלי שלה הוא 6. 0-7. 0. זהו מיקרואורגניזם אנאירובי פקולטטיבי. זהו חיידק חיובי גרם. ניתן לראות אותו תחת מיקרוסקופ שאין לו סמל ואין נבגים. במשך זמן רב, מחקר מקומי וזר על סטרפטוקוקוס תרמופילוס התמקד בעיקר בתפקידו בקידום בריאות האדם ובמאפייניה הביולוגיים. תוצאות המחקר מראות כי סטרפטוקוקוס תרמופילוס הוא אחד המיקרואורגניזמים החשובים ביותר במעיים של בני אדם ובעלי חיים. נוכחותו יכולה להתאים ולשפר את איזון המיקרואורגניזמים במעיים ולקדם את בריאותם של תאים מארחים. זהו אחד החיידקים הנפוצים ביותר בייצור תסיסה חלבית.
Akalin et al. האמין כי סטרפטוקוקוס תרמופילוס יכול להפחית באופן משמעותי את התוכן של ליפופרוטאין בצפיפות נמוכה וסך הכולסטרול בסרום [17]. בנוסף, ל- Streptococcus Thermophilus יש השפעה טובה נגד גידול, יכולה להקל על חוסר סובלנות ללקטוז ויש לה פונקציות פיזיולוגיות חשובות לתאים מארחים.

 

1.3.4 Lactobacillus bulgaricus

Lactobacillus bulgaricus הוא חיידק שזוהה על ידי המיקרוביולוג הבולגרי גבירה גריגורוב בשנת 19 0 5 ונקרא על שמו של המדינה. תחת מיקרוסקופ ניתן לראות כי המורפולוגיה האישית שלה היא בצורת מוט דק, 0. 1-0. 8 מיקרומטר רוחב ואורך {}} מיקרומטר, המציג מוט או שרשרת יחידה. זהו סוג של מיקרואורגניזם אנאירובי פקולטטיבי. טמפרטורת הצמיחה המתאימה ביותר היא 43-44, טמפרטורת הגידול המינימלית היא 22 מעלות וטמפרטורת הצמיחה המרבית היא 52.5 מעלות [18]. המושבות שעובדות על חלב הן לבנות בהירות או חסרות צבע, ונראות בדרך כלל דמוי כותנה מחוספסת [19]. כחבר בפרוביוטיקה, Lactobacillus bulgaricus משפיע מאוד על שירותי הבריאות על גוף האדם. זה בא לידי ביטוי בעיקר ב: קידום צמיחה וקולוניזציה של חיידקים מועילים, ניקוי המעיים, התנגדות לשלשול ושמירה על בריאות העיכול [20-22]; קידום עיכול וספיגה [23], שיפור החסינות [24], אנטי-סרטן, אנטי-גידול [25-26] ופונקציות פיזיולוגיות חשובות אחרות. צריכת הפרוביוטיקה יכולה ליצור מחסום ביולוגי גדול ברירית המעי, אשר ניתן להשתמש בה כדי להתנגד לפלישה של חיידקים פתוגניים כמו Escherichia coli ולייצר חומרים אנטיבקטריאליים. חומרים אנטיבקטריאליים יכולים לעמוד בפני צמיחת חיידקים לשחיתות עצמית וחיידקים פתוגניים אקסוגניים במעי. תוך שיפור התגובה החיסונית הספציפית והלא ספציפית של הגוף, הוא גם מונע את ההתרבות של חיידקים מזיקים במעי, מצמצם מאוד את הצטברות החומרים המזיקים, ומפחית את הנזק של חומרים מזיקים לאיברים חשובים כמו הכבד, ובכך מאט את האגדה האנושית ומלא תפקיד נוגדני מסוים. בנוסף, יש להם תועלת ידועה ומודעת נרחבת נוספת, שהיא לקדם פריסטליזה במעי, להגביר את הלחות הצואה ולשמור על לחץ אוסמוטי מסוים ולמנוע עצירות [27]. לפיכך, פרוביוטיקה נמצאת בשימוש נרחב בתעשיית המזון ובטיפול רפואי.

Veringa Ha et al. ציין כי יש קשר סימביוטי בין סטרפטוקוקוס תרמופילית לבין לקטובצילוס בולגריקוס. בשלב המוקדם של התסיסה, Lactobacillus bulgaricus מפרק את הקזאין ליצירת חומצות אמינו ופפטידים חדשים, שיכולים לקדם טוב יותר את צמיחתם של סטרפטוקוק תרמופילי; וסטרפטוקוקוס תרמופילית מייצרת כמות גדולה של CO2 וחומצה פורמית במהלך כל תהליך התסיסה. שני חומרים אלה יכולים לקדם את הצמיחה ואת חילוף החומרים של Lactobacillus bulgaricus במידה מסוימת [28].

 

כאשר כמות הדבש היא 8% וזמן התסיסה הוא שעתיים, תכולת הגלוטתיון באנזים אורז חום יכולה להגיע ל -2.62 מ"ג/גרם [31]. שו מוקסיה ואחרים פיתחו תהליך להכנת אנזימים מורכבים. ירקות ופירות טריים נפרסים, 1% עד 1 0% חומץ תפוחים מתווסף, מעורבב באופן שווה ואטום בטמפרטורת החדר למשך חודש עד 6 חודשים כדי לאפשר להם להתסס באופן טבעי למיץ אנזים פירות וירקות. צמחי מרפא נבחרים, קצוצים ומעורבים, 1% עד 1 0% מתווסף מלח, ואטום בטמפרטורת החדר למשך חודש עד 6 חודשים כדי לאפשר להם להתסס באופן טבעי למיץ אנזים צמחי. דגני בוקר נבחרים, 1 עד 1 0% דבש מתווסף כמצע, ו- 0. 01% עד 0.1% שמרים יבשים משמשים לתסיסה ליצירת אנזימי דגנים. פולי סויה ושעועית שחורה משמשים כחומרי גלם. לאחר מאודה שעועית סויה ושעועית שחורה, הם מחוסנים ישירות עם 0.01% עד 0.1% עובש ומוססים ליצירת אנזימי שעועית. נלקחים אנזימי פירות וירקות, אנזימי צמחים, אנזימי דגנים ואנזימי שעועית, ופוליולים מתווספים לתערובת לתסיסה טבעית שנייה בטמפרטורת החדר בפחית אטומה. לאחר חודש עד 3 חודשים לאחר הקרעה, מתקבלים מוצרי אנזים מורכבים [32].

תהליך התסיסה של האנזים שנחקר על ידי Li Zhongshu et al. הוא כדלקמן: לסחוט ולערבב את הפירות כדי להשיג נוזל אנזים סחיטה פיזי; take another part of the extract and add {{0}}.02% to 0.05% by weight of composite pectinase, pH 2.2 to 5.5, enzymolysis at 30 to 50 degree for 1.5 to 4 hours, add 0. 05% עד 0.2% על ידי משקל שמרי הבירה, תוסס של 18 עד 25 מעלות למשך 7 עד 15 יום, ואז מוסיפים 0.05% עד 0.1% מחיידקי חומצה אצטית, ותסוס למשך 10 עד 30 יום ב -30 עד 40 מעלות. לאחר שני תהליכים של תנאים אנאירוביים ואירוביים, מתקבל שני משקעים וממצאים, מתקבל נוזל אנזים תסיומי ביולוגי. שני נוזלי האנזים מעורבבים ומסוננים עם קרום בגודל נקבוביות של 0.1 עד 0.2 מיקרומטר כדי להכין נוזל אנזים מורכב [33].

 

1.5 פונקציות ומאפיינים של אנזימים מיקרוביאליים

 

1.5.1 אנזימים עיקריים

אנזימים עשירים באנזימים, כמו סופרוקסיד דיסוטאז, פרוטאז וליפאז [34]. Dismutase Superoxide יכול להאיץ את התגובה של רדיקלים חופשיים של אניון Superoxide (O 2-) ולהסיר את O 2- מהגוף. זה לא יכול רק להתנגד להזדקנות, אלא גם למנוע ולטפל במחלות לב וכלי דם ולהגן על גופנו מפני הנזק של O 2-.
פרוטאז הוא סוג של אנזים המזרז את ההידרוליזה של חלבונים. זה יכול לפרק חלבונים במזון ותאים גוססים. הפרוטאז במוצרי אמבט יכול למלא תפקיד פילינג עדין. תוך כדי פילינג, זה יכול לנקות טוב יותר את העור, במיוחד הנקבוביות והלכלוך על הפנים שקשה לנקות אותו.
תוצרי ההידרוליזה של ליפאז הם בדרך כלל שמנים טבעיים. זה הידרוליזה את קשר האסטר בין חומצות שומן לגליצרול והוא נמצא בשימוש נרחב במוצרי בריאות, קוסמטיקה ומוצרי ירידה במשקל.
Yu Xiaoyan et al. חקר את ההבדל בפעילותם של אנזימים קשורים באנזים הדבק ואנזים אבקה. התוצאות הראו כי לאנזים הדבק היה תוכן גבוה יותר של דיסוטאז סופרוקסיד ופרוטאז, ואילו לאנזים אבקה היה תוכן אנזים נמוך יותר [34]. תוצאות המחקר של Dong Yinmao et al. הראו כי הפעילות של סופרוקסיד דיסמוטאז באנזים פיטאיה הייתה 300U/ml, והפעילות של אמילאז וליפאז הייתה נמוכה. יש לו DPPH חזק רדיקלי רדיקלי, סופרוקסיד, רדיקלים חופשיים ויכולת ניקוי רדיקלית חופשית הידרוקסילית [35].

 

1.5.2 פעילות נוגדת חמצון

הגורמים למחלות אנושיות רבות קשורות לרדיקלים חופשיים ומיני חמצן תגוביים, כולל מחלות דלקתיות [{36-37], סרטן [38], הזדקנות [39-40], סוכרת [41], מחלות נוירו -ניווניות [42] וגרעין [43]. גוף האדם יפיק ברציפות כמה רדיקלים חופשיים בתהליך המטבולי הרגיל או תחת גירוי של גורמים חיצוניים. ניתן לבטל רדיקלים חופשיים אלה על ידי מערכת ההגנה הנוגדת חמצון של הגוף, ואנזימים הם רכיבים של חומרים נוגדי חמצון אלה. ייצור רדיקלי חופשי מוגזם יכול לשבש את מערכת האיזון של הגוף, מה שמוביל לנזק לתאים ולמוות [44]. Jayabalan et al. נמצא במחקר שלהם על תהליך התסיסה של אנזים קומבוצ'ה כי לאנזים קומבוצ'ה יש פעילות נוגדת חמצון גבוהה, ופעילות נוגדת חמצון זו עולה עם הרחבת זמן התסיסה. המחקר שלהם קבע כי העלייה בפעילות נוגדת חמצון קשורה לאנזימים המיוצרים על ידי חיידקים ושמרים במהלך תסיסה של מצע התסיסה [45].

 

1.5.3 השפעות אנטיבקטריאליות ואנטי דלקתיות

אנזימים הם אנטיביוטיקה טבעית. Dong Yinmao et al. חקר את ההשפעות האנטיבקטריאליות של אנזימים מיקרוביאליים. תוצאות הניסוי הראו כי הן אנזימים להדבקה והן אנזימי אבקה משפיעים על עיכוב אקנה [46]. בנוסף, נמצא כי הוספת אנזימים לקוסמטיקה או מוצרי טיפוח יכולה למלא תפקיד אנטיבקטריאלי ואנטי דלקתי מסוים.

 

1.5.4 קדם חילוף חומרים

חידוש תאים הוא התהליך המטבולי של גוף האדם. בתוך מחזור חיים מסוים, תאים ישנים מתבגרים ומתים, ותאים חדשים יופיעו. עם זאת, תהליך הפירוק לאחר הזדקנות תאים ונמק הוא די עצום, ויש צורך לקדם ברציפות חילוף החומרים של תאים ותיקון רקמות תאים פגומים. לפיכך, אנזימים הפכו לכלי חיוני, וזה לא אנזים אחד, אלא מגוון אנזימים שמשתפים פעולה זה עם זה כדי לשחק את היתרונות שלהם. כאשר בוחנים את ההשפעה של אנזימים ביולוגיים על תפקוד התחדשות הכבד של חולדות, Liu Xiuhong et al. מצא כי אנזימים ביולוגיים, כמו הורמוני גדילה המקדמים את התחדשותם של תאי כבד, פועלים בשלב המוקדם של התחדשות תאי הכבד ויכולים לקדם את התחדשות תאי הכבד אצל חולדות עם כריתת כבד חלקית [47-48]. אנזימים ממלאים תפקיד מגן בחיזוק התאים, שיפור העמידות האנושית, שמירה על איזון חיידקי המעיים, קידום עיכול וספיגה והוצאת פסולת מהגוף. הם יכולים להפוך את הדם בגוף האדם אלקליין חלש ולשמור על איזון כל תחומי הגוף.

 

1.5.5 שפר את החסינות

מבחינת שיפור החסינות, לי בוקינג ואחרים ערכו מחקר מעמיק יחסית. עכברים שימשו כנבדקי מחקר כדי להתבונן בהשפעת אנזים קומבוצ'ה על חסינותם של עכברים ניסיוניים. בניסוי נמדדו הפעילויות הביולוגיות של IL -1 ו- IL -2 בשיטת התפשטות התימוציטים ושיטת התפשטות Splenocyte בהתאמה; הפונקציה הפגוציטית של מקרופאגים נמדדה בשיטת הפגוציטוזיס של קנדידה אלביקנים על ידי מקרופאגים צפקים; שיטת M1VR שימשה למדידת פעילות הריגת תאי NK. תוצאות הניסוי הראו שהאנזים הגביר את הפעילות הביולוגית של IL -1 ו- IL -2; תפקוד הפגוציטוזיס של מקרופאגים שופר משמעותית; ופעילות ההרג של תאי NK עלתה באופן משמעותי (P<0.01) [49].

 

1.5.6 הלבנה ואנטי אייג'ינג

אנזימים מבוקשים מאוד על ידי כולם, וסיבה חשובה נוספת היא פונקציות ההלבנה והאנטי אייג'ינג שלהם. ניתן לראות את תוצאות המחקר הניסיוניות של רן צ'ינג ובתוצאות המחקר הניסיוניות in vivo כי לאנזימים יש השפעות הלבנות ואנטי-אייג'ינג ברורות. שיעורי העיכוב של טירוזינאז על ידי אנזימים הדבק עם ריכוזים של 1%, 2% ו- 5% הגיעו ל 88.41%, 96.35% ו- 99.87% בהתאמה; הנבדקים התבקשו ליישם אנזים הדבק ואנזים אבקה בהתאמה. ג'ל, שינויים במלנין באזור היישום של הנבדקים נבדקו באופן קבוע, ושני האנזימים נמצאו בעלי השפעה על הלבנה; הבדיקה הנוגדת חמצון של האנזים ובדיקת מרקם העור של הנבדקים הראתה גם כי לאנזים יש יכולת נוגדת חמצון טובה ואנטי אייג'ינג [50].

 

1.6 תוכן מחקר, מטרה ומשמעותו של נושא זה

 

1.6.1 תוכן מחקר

(1) יחס זן אופטימלי והערכה חושית של זנים משולבים שנבחרו (2) מחקר על הפעילות הנוגדת חמצון של אנזימי אפל
(3) התבנית המשתנה של פעילות נוגדת חמצון במהלך תהליך התסיסה של אנזים תפוחים, אנזים אגס ואנזים הדרים (4) הדפוס המשתנה של פעילות האנזים במהלך תהליך התסיסה של אנזים תפוח
(5) מחקר על ניטור חומצה מוחלטת, סכום כולל, תכולת אלכוהול ו- pH במהלך תסיסת אנזים תפוחים

 

1.6.2 שיפור ומשמעות

בשנים האחרונות, אנזימים מיקרוביאליים הפכו פופולריים בכל העולם, ומוצרים פונקציונליים של אנזים מיקרוביאלי הופיעו ללא סוף. תפקודיו כמו נוגדי חמצון, אנטיבקטריאליים ואנטי-דלקתיים, קידום חילוף חומרים, שיפור החסינות, הלבנה ואנטי-אייג'ינג מבוקשים מאוד על ידי אנשים. תהליך הייצור של אנזימים מיקרוביאליים מתעדכן כל העת, אולם מרבית המחקר נעשה על סמך תהליכי תסיסה מסורתיים. סוג זה של אנזים מיקרוביאלי, המותסס באופן טבעי בטכנולוגיית תסיסה מסורתית, מושפע בקלות ממיקרואורגניזמים בסביבה, תהליך התסיסה ותנאים עונתיים. קשה לשלוט באופן מלאכותי באיכות המוצר, המשפיעה על התפתחותה וניצולו. לפיכך, מחקר זה מספק כמה תמיכה בנתונים ובסיס תיאורטי לחקירה ופיתוח של מוצרי אנזים מיקרוביאליים פונקציונליים חדשים ומימוש הייצור התעשייתי. חיסון מלאכותי של זני חיידקים משמש לניהול מעקב ומעקב מעמיק של פעילותם ואנזימים הנוגדי חמצון שלהם, כדי לשפר את איכות המוצרים. התסיסה נשלטת והולכת לכיוון שאנו מצפים. נכון לעכשיו, מרבית המחקר בבית ומחוצה לו מבוסס על תסיסה טבעית, לימוד המטבוליטים המיוצרים במהלך תהליך התסיסה, מנגנון התסיסה וכו '. השפעה, והאם גישה זו אפשרית.
לאור הבעיות הקיימות לעיל, מאמר זה לוקח אנזימים של אפל, אנזימי אגס ואנזימי הדרים כאובייקטים של המחקר. בשלב המוקדם של התסיסה, מחוסנים כמות מסוימת של אספרגילוס אוריזה, שמרים, לקטובצילוס אסידופילוס ולקטובצילוס בולגריקוס כדי לאפשר תסיסה טבעית (ללא חיסון של זנים כלשהם) לצורך השוואה, פעילות נוגדת חמצון והשתנה, דפוסים משתנים, פעילות אנזים והחלפת דפוסים. זה צפוי לספק בסיס תיאורטי מסוים ובסיס טכני להמשך פתרון נוסף של בקרת המתח החיידקי, ניתוח רכיבים פונקציונלי ובקרת איכות מוצר של אנזימים מיקרוביאליים, כמו גם התפתחות וניצול מקיף של אנזימים, כך שאנשים יוכלו לשתות אנזימים עם תזונה ופונקציות עשירים. ו