מחקר על המרכיבים הכימיים של Cistanche Deserticola, רפואת צמחים סינית להזנת כליות ולחיזוק היאנג
Mar 09, 2022
איש קשר: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964audrey.hu@wecistanche.com
הקדמה
Cistanche deserticolaהשייך למשפחת ה- Orobanchaceae הוא הגזע הבשרני היבש של Cistanche deserticola, שהוא מתוק, מלוח וחם. יש לו את ההשפעות של חיזוק הכליה, חיזוק ה-Yang, לחות המעיים והרגעת המעיים. הוא משמש בעיקר לטיפול באימפוטנציה, קור וכאבים במותניים ובברכיים, אי פוריות, יובש במעיים ועצירות. דווחו גם ההשפעות התרופתיות של Cistanche deserticola.
המכון לרפואה סינית מסורתית של האקדמיה הסינית לרפואה סינית מסורתית ביצע מחקרים כימיים ופרמקולוגיים בנושאCistanche deserticola. הוכח שתמצית האתנול שלו משפיעה על מערכת החיסון. תשע תרכובות הופרדו וזוהו כ-D-Mannitol - Sitosterol, Daucosterol, Succinic acid, Triacontanol, 8-epibrucine glucoside, betaine, caffeic acid glycolipid, and polysaccharide. בנוסף למניטול ו-8-epibrucine glucoside, רכיבים נוספים התקבלו מ- Cistanche deserticola לראשונה. חומצה קפאית גליקוליפיד, בטאין, מניטול, חומצה סוקסינית ותרכובות אחרות יש מגוון של פעילויות פיזיולוגיות. יש להם השפעות על מערכת החיסון, התפקוד המיני, מערכת הלב וכלי הדם, הכבד, אנטי אייג'ינג וכו'.
חלק ניסיוני
נקודת ההיתוך נמדדה על ידי מיקרוסקופ Boetius PHMK, והמדחום לא הותאם; ספקטרומטריית המסה (EI) נקבעה על ידי מכשיר MMH 70-70 (בריטניה), וה-FD נקבע על ידי M-80 ספקטרומטר גז כרומטוגרפיה מסה (יפן); תהודה מגנטית גרעינית (ספקטרום מימן) נקבעה על ידי מכשיר מסוג JEOL FX 90Q (יפן); ספקטרום אולטרה סגול נקבע לפי סוג מכשיר UV-3000; ספקטרום אינפרא אדום נמדד על ידי מכשיר Hitachi מסוג 260-50, טבליות KBr וג'ל סיליקה נוצרו ממפעל כימי ימי של צ'ינגדאו, ג'ל LH-20 יוצר בשוודיה. גבעולי בשר מיובשים של Cistanche deserticola נרכשו מחברת חומרי המרפא של בייג'ינג וזוהו על ידי Zhang Yanzhen.
1. מיצוי והפרדה
Cistanche deserticola נמעך, מחלחל עם 95 אחוז אתנול, הממס מוחזר, מומס בכמות קטנה של מים, חולץ עם אתר, כרומטוגרפיה של עמודת סיליקה ג'ל, חולף עם אתר נפט-אתר (6:4) לקבלת הגביש הלבן ( אני). שכבת המים המופקת עם אתר מתאדה, מחוממת, ומומסת עם אתנול, מקוררת לקבלת משקעים פלפליים (II). Cistanche deserticola מחלחל עם 50 אחוז אתנול. חולץ עם אתיל אצטט, כרומטוגרפיה של עמודת סיליקה ג'ל, חולטה עם אתיל אצטט, 20 מ"ל כל אחד (זהה להלן) סך של 37 דגימות נאספו ונבדקו בכרומטוגרפיה של שכבה דקה. החלק המכיל קריסטל (III) שזרם בתחילה החוצה אוגד. 24 ~ 37 דגימות סוננו מתוך גוש לבן (II) ואידו עד ליובש. השאריות הועברו לכרומטוגרפיה של עמודת סיליקה ג'ל ונפלטה עם בוטנון-אתיל אצטט-בנזן-מים (4:3:2:0.2). נאספו 12 דגימות, מתוכן 8 ~ 11 דגימות הופרדו מגבישים כתומים; שכבת המים שהופקה על ידי אתיל אצטט חולצה על ידי n-butanol, כרומטוגרפיה של עמודת סיליקה ג'ל, ונפלטה עם כלורופורם-מתנול-מים (6:4:1). הדגימה החמישית המיסה התגבשות של פרוסה דקה (IV), החלק השני של כרומטוגרפיית השכבה הדקה, בשילוב עם החלק הקרינה הכחולה, ולאחר מכן השתמשו בכרומטוגרפיה של עמודת סיליקה ג'ל, שנפלטה עם כלורופורם-מתנול-מים (7:3:2.5 ), השתמש באותה שיטה בשילוב עם חלק הקרינה הכחולה, עבר את עמודת הג'ל LH-20, נחלץ עם מתנול-מים (1:1), הדגימה השמינית המיסה מעט אבקה צהובה (V), המשיכו לחלוט ל-37 חלקים, בשילוב עם החלק הדרוש לעיל, כרומטוגרפיה של עמודת סיליקה ג'ל, מרוחה על ידי בוטנון-אתיל אצטט-בנזן-מים (4:3:2:0.2), חותכים את מקטע הפלורסנט הכחול, ומוציאים עם מתנול לקבלת אור אבקה חומה (VI).
תמצית אתנול של 95 אחוז, הסרת אתר נפט ודיכלורומתאן, המסה במתנול, כרומטוגרפיה של עמודת סיליקה ג'ל בלחץ נמוך, תוך יציאה עם מתנול-כלורופורם (9:1), 20 מ"ל כל אחד, החלקים ה-18-28 המיסו כמה גבישים חסרי צבע (VII) ; חילץ במים את שאריות ה- Cistanche deserticola לאחר מיצוי אתנול, לאחר מכן ריכז את השאריות, קירור, המיס מספר רב של גבישים לבנים (VIII), הסרת תמיסת המים המגובשים, ולאחר מכן טופל בכמות של פי 4 אתנול לייצור יותר משקעים (IX).
2. זיהוי
תרכובת I: גביש מחט לבן התקבל על ידי התגבשות מחדש עם אצטון, mp136 ~ 137 מעלות. מגיב חומצה גופרתית מרוכזת באצטית הראה תגובה חיובית (ירוק). EIMS m/z:414(M plus ). כרומטוגרפיה דקה של כרומטוגרפיה ערך Rf וספקטרום אינפרא אדום היו עקביים עם תקן Sitosterol, כך שהוא מאושר כ- Sitosterol.
תרכובת II התגבשה מחדש על ידי חימום וריפלוקס עם אתנול פעמיים כדי להשיג משקעים פלקטיים לבנים, mp290 ~ 291 מעלות. מגיב חומצה גופרתית מרוכזת באצטית הראה תגובה חיובית (ירוק), - מגיב נפתול הראה תגובה חיובית. EIMS m/z:396 (שיא בסיס), 382, 255, 213, 81, 57, 43. כרומטוגרפיה של שכבה דקה הייתה עקבית עם התוצר הידוע של דאוסטרול, ונקודת ההיתוך של התערובת לא ירדה. זה אושר כדאקוסטרול.
תרכובת III המתנול התגבש מחדש לכמה גבישים מוארכים, mpl87 ~ 189 מעלות, pH 2. EIMS m/z:119(M plus 1), 118(M plus ), 101, 100, 74, 73, 55 (שיא בסיס), 45, 28, 27. IR (KBr) ס"מ-1: 3100 ~ 2500 (רוחב, OH), 1690 (C=O), 1420, 1310, 1200, 920, 800. ערך ה-RF של כרומטוגרפיה של שכבה דקה זהה לזה של תקן חומצה סוקסינית. בנוסף, היא תואמת את ספקטרום המסה הסטנדרטי וספקטרום האינפרא אדום הסטנדרטי של חומצה סוצינית, ונקודת ההיתוך של התערובת אינה יורדת. היא מאושרת כחומצה סוצינית
תרכובת IV מתגבשת מחדש על ידי אתנול כמוצק לבן מבריק, mp83 ~ 84 מעלות. EIMS m/z:420(M פלוס -H2O), 57 (שיא בסיס). ערך Rf של כרומטוגרפיה שכבה דקה זהה לזה של Triacontanol הידוע, ונקודת ההיתוך של התערובת לא יורדת. הנתונים לעיל עולים בקנה אחד עם Triacontanol שדווח בספרות.
תרכובת VI: לאחר המסת אצטון, בוצעה כרומטוגרפיה של עמודת סיליקה ג'ל וחולטה עם 60 אחוז מתנול לקבלת גבישים אמורפיים דקים צהובים בהירים, המסיסים בקלות במים ומסיסים במתנול, אתנול ואצטון, מגיב - Naphthol הראה תגובה חיובית . IR (KBr) ס"מ-1: 3700 ~ 3000 (OH), 2900 (CH2, CH3), 1690 (C=O), 1600520 (C=C), 1440, 1350 , 1280, 1260 (COC), 1156, 1110, 1050 (CO), 807. UV λ nm(log ε): 218 (sh, 4.30), 249 (3.91), 291 (4.08), 330 (4.15). H-NMR (CD3COD3) δ ppm: 1.18 (3H, D, J=6, CH3 על rhamnose), 2.75 (2h, t, J=7.2, 2H במיקום C), 4.75 ( 1H, D, J=8, C1-H על גלוקוז), 5.17 (1H, D, J=1.8, C1-H על rhamnose), 4.20 ~ 3.30 (12H, m, 2H בעמדה C, 6H על גלוקוז, 4H על rhamnose), 6.27 (1H, D, J=16, 1H בעמדה C), 7.52 (1H, a, J {{76} } מיקום C (1H), 6.60 (1H, a, J=8, C5 "'- H), 6.90 (1H, DD, J=8 / 2, C6"' - H), 7.10 (1H, D, J=2, C2 "'- H), 6.70 (1H, D, J 2-, C2-H), 6.65 (1H, D, J {{ 105}}, C5-H), 6.52 (1H, DD, J=8 / 2, C6-H), H-NMR (DMOS) δ ppm: 7.43 (1H. s, OH), 8.07 (1H, s, OH), 850 (2H, s, 2 * OH), נעלמו לאחר חילופי מים מחמירים. [a] 22D: - 68.37 מעלות (C {{126} }.67MeOH). FDMS m/z:647(M פלוס פלוס Na), 625 (M פלוס פלוס 1), 624 (M פלוס ), 479 (M פלוס 1-rhamnosyl), 478 (M פלוס -rhamnosyl ), התואמת את הנוסחה המולקולרית C29H36O15. לאחר הידרוליזה חומצית של תרכובת VI, שני כתמים חומים מוצגים על כרומט נייר גרפיה. ערך Rf תואם לחלוטין לרמנוזה וגלוקוז, ונקודת ההיתוך אינה יורדת כאשר מערבבים אותו עם האקטאוזיד הידוע. הנתונים שלעיל תואמים לקבוצת 3,4-דיהידרוקסי המתוארת בספרות - Phenethoxy-o- - L-rhamnosyl (1 → 3) - 4-o-caffeic acid group- D- גלוקופירנוזיד הוא בעצם מסרטן.
תרכובת VII היא גביש לבן המתקבל על ידי התגבשות מחודשת של אצטון מתנול, מעל mp299 מעלות (פירוק), מסיס ביותר במים, מתרוקן בקלות ומסיס באתנול ובמתנול. מגיב אלקלואיד מראה תגובה חיובית. ערכי ניסוי (אחוז) של ניתוח יסודות: C47.29,H9.16,N10.54; ערכים תיאורטיים ( אחוז ): C47.54,H9.52,N11.11. הוא תואם את הנוסחה המולקולרית C5H11NO2.1/2H2O. IR (KBr) ס"מ-1: 3360 (משויך NH, OH), 2940, 1620 (C=O), 1470, 1390, 1330, 1240, 1125, 980, 930, 890. H- NMR (D2O) δ ppm: 3.28 (9 H,s, 3*CH3), 3.88 (2 H,s,CH2), 4.68 (D2O). EIMS m/z:117(M plus ), 100, 85, 73, 59, 58 (שיא בסיס), 44, 42. כרומטוגרפיה של שכבה דקה תואמת לחלוטין את ערך ה-Rf של תקן בטאין, ונקודת ההיתוך של התערובת לא נופלת. ספקטרום התהודה המגנטית הגרעינית, ספקטרום האינפרא אדום וספקטרום המסה תואמים לספקטרום הסטנדרטי של בטאין, כך שבטאין מוכר.
תרכובת IX: מומסת במים, מופקת על ידי n-בוטנול-כלורופורם (l:4), והזיהומים הוסרו. שכבת המים טופלה בכמות של פי 4 של אתנול, המשקעים הומסו במים, הורדו על ידי מי חמצן, והתרכובות המולקולריות הקטנות הוסרו בדיאליזה. הממברנה טופלה בכמות פי 5 של אתנול לקבלת משקע צהוב בהיר. תגובת ה-Fehling הייתה שלילית לפני ההידרוליזה של המשקע, ומשקע חום-אדום נוצר לאחר ההידרוליזה. לאחר הידרוליזה חומצית, ההידרוליזט עבר לכרומטוגרפיה של נייר. בהשוואה לסוכר הסטנדרטי, זוהה רק גלוקוז, ולכן אושר כי זוהו פוליסכרידים המורכבים בעיקר מגלוקוז.
