מחקר של השפעות אנטי-אייג'ינג של קלציטריול על תאי רוצח טבעיים אנושיים במבחנה Ⅱ

3. תוצאות

מחקר זה התמקד בהשפעות האנטי-אייג'ינג של קלציטריול על תאי NK. התוצאות הראו כי קלציטריולהפחית את הביטוי של סמנים ביולוגיים הקשורים להזדקנות כולל CD16, TIM3, PD-1, KIR והגביר את הביטוי של NKG2A של תאי NK. זה גםעיכוב שגשוג תאי NKולעצור אותם בשלב G1. קלציטריולהפחית את שחרור גורמים דלקתייםכגון IL-5, IL-13, IFN- ו-TNF- והיו בעליהשפעות נוגדות חמצון, מה שיכול לתרום לההשפעות אנטי אייג'ינג.

לחץ כאן כדי לדעת את השפעות נוגד חמצון של Cistanche ולקבל דוגמה

3.1 קלציטריול הפך את הביטוי של סמני הזדקנות פני השטח, האט את הגברה של תאי NK ושמר על תאי NK בשלב G1.

תאי NK מזדקנים הראו ביטוי גבוה של סמנים ביולוגיים הקשורים להזדקנות, כגון CD16, PD-1, TIM3 ו-KIR, וביטוי נמוך של NKG2A. מצאנו שרמות הביטוי של הסמנים הביולוגיים הקשורים להזדקנות NKG2A (איור 1a) (*P < 0.05) עלו, בעוד שהביטוי של CD16 (איור 1b), TIM3 (איור 1c) ), PD-1 (איור 1ד) ו-KIR (איור 1e) (*P <0.05) ירדו לאחר טיפול בקלציטריול במשך 72 שעות. השפעות ההיפוך היו בקורלציה חיובית עם ריכוז הקלציטריול (איור משלים 1).

הרחבנו תאים מדגימות הדם ההיקפי האנושיות במבחנה. לאחר מכן בודדנו את תאי NK (CD{{0}}CD56 פלוס ) על ידי מיון חרוזים מגנטי (איור 1f). לאחר מכן תורבו תאי ה-NK הממוינים עם ריכוזים שונים של קלציטריול או רפמיצין במשך 72 שעות. תוצאות צביעת CCK8 הראו שקצב הגדילה של תאי NK שטופלו בקלציטריול בריכוז גבוה (10- [7] M) היה איטי יותר מזה של קבוצת הביקורת השלילית (NC) (*P < {{17 }}.05) (איור 1g). בנוסף, קלציטריול מווסת את מחזור תאי ה-NK. לאחר טיפול בקלציטריול במשך 48 שעות, תאי NK הראו שינוי גבוה תלוי בריכוז קלציטריול לכיוון שלב G1 (*P < 0.05), בעוד ששיעור התאים בשלב G2 (#P < 0.05) ירד. חלקם של תאי NK שטופלו בקלציטריול בשלב S לא הראה שינוי, ללא קשר לריכוז הקלציטריול (איור 1h, איור משלים 2). לאחר מכן בדקנו אם מעצר שלב G1 שמקורו בקלציטריול גרם לאפופטוזיס של תאי NK ומצאנו שהסמן הביולוגי האפופטוטי של תאי NK, האימונוגלובולין של תאי T ומוטיב מעכבי טירוזין מבוסס אימונורצפטור (ITIM), לא הראה שינוי משמעותי (P > 0.05 , NS) (איור 1i). תוצאות אלו מרמזות שתוספת של קלציטריול הפחיתה את קצב הגדילה של תאי NK, הפחיתה את התפשטותם וגרמה להפסקת שלב G1 של תאי NK במקום לגרום לאפופטוזיס.

3.2 קלציטריול הפחית את שחרור ציטוקינים דלקתיים בתאי NK ועיכב את הציטוטוקסיות של תאי NK

דלקת היא דלקת כרונית בדרגה נמוכה. זה מאיץ את ההזדקנות של תאי NK, שכן תאי NK משתתפים בדלקת כרונית זו. איור 2a מדגים שהרמות של IL-5, IL-13, IFN- ו-TNF- ירדו באופן מובהק בכל הקבוצות מאשר בביקורת השלילית (*P < 0.05). IFN- ו-TNF- הם ציטוקינים פרו-דלקתיים ידועים, אבל כמה מחקרים הראו גם את התכונות הפרו-דלקתיות של IL-5. דווח כי IL-13 תורם לסוגים שונים של דלקת ברירית, כגון אסטמה אלרגית, קוליטיס כיבית, דלקת בוושט אאוזינופילית ומספר מחלות הקשורות לפיברוזיס.

עם זאת, הציטוטוקסיות של תאי NK כרוכה בעיקר בשחרור ציטוקינים דלקתיים ובדגרנולציה של תאים. סימנו תאי K562 עם DIO ותירחנו יחד את תאי DIO-K562 עם תאי NK שטופלו בקלציטריול במשך 4 שעות. האחוז של תאים DIO פלוס PI פלוס היה נמוך יותר בכל קבוצות יחס המשפיענים (E)/יעד (T) מאשר בבקרה השלילית (*P < 0.05) (איור 2ב, ג). הביטוי המוסק של אשכול התמיינות 107 (CD107) הצביע על דה-גרנולציה נמוכה יותר (*P < 0.05) (איור 2ד). תוצאות אלו מראות את עיכוב תפקוד הרג ה-NK על ידי קלציטריול.

3.3 קלציטריול הפעיל את הביטוי של SIRT1- ∆Exon8 ומסלול SIRT1/pERK הקשור לאנטי-אייג'ינג

כדי לחקור את ההשפעות האנטי-אייג'ינג של קלציטריול על תאי NK, זיהינו את מסלולי האיתות הקשורים להזדקנות על ידי אימונובלוטינג. אנליזה של Western blotting בוצעה כדי להעריך את רמות הביטוי של VDR, SIRT1-∆Exon8, SIRT1 ו-PERK בתאי NK שטופלו בקלציטריול. ניתוח סטטיסטי הראה ש-calci triol הפעיל את ציר VDR/SIRT1/pERK בריכוזים גבוהים. בינתיים, קלציטריול הפעיל את הביטוי של SIRT1-∆Exon8 (*P < 0.05). (איור 3א).

איור 1. פנוטיפ הקשור להזדקנות, הרחבת תאים וניתוח מחזור התא של תאי NK. (ae) תאי ה-NK האנושיים שטופלו בקלציטריול או ברפמיצין במשך 72 שעות הראו את הסמנים הביולוגיים הבאים של התא: קבוצת רוצח טבעי 2 חבר A (NKG2A), אשכול התמיינות 16 (CD16), אימונוגלובולין של תאי T וחלבון המכיל תחום מוצין 3 ( TIM3) תכנת מוות תאי-1 (PD-1), וקולטן דמוי אימונוגלובולין קטלני (KIR), שהיו קשורים להזדקנות. 50 nM rapamycin (RAPA) שימש כביקורת חיובית. n=3 עבור כל קבוצה. *P < 0.05 ו-**P < 0.01 הושוו עם קבוצת הביקורת השלילית (NC). (ו) תאי NK (מימין) מבודדים מתאי דם היקפיים חד-גרעיניים (PBMCs, משמאל) על ידי מיון חרוז מגנטי. (ז) ניתוח התפשטות תאים נמדד על ידי ערכת ספירת תאים 8 (CCK8). (ח) השפעת קלציטריול או rapamycin על מחזור התאים ב-nk cels ממוינים לאחר טיפול במשך 72 שעות, wp 0.0, 0.05, ו-fp < 0.05 הצביעו על המובהק הבדלים בשלבי G1, S ו-G2, בהתאמה. כל הקבוצות הושוו ל-NC, בהתאמה. n=3. ) אחוז ה-T cellimmunoa globulin ו-immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif(M) domain (TGI)-positive NK cels לאחר טיפול עם calcitriol או rapamycin במשך 72 שעות.*p <0.05 ו-**p <0.01 הושוו ל-NC. n=3.

3.4 קלציטריול התנגד להזדקנות תאי NK הנגרמת על ידי עקה חמצונית במבחנה

מקובל על כך שהזדקנות נגרמת על ידי הצטברות נזקי חמצון עקב מכלול הראיות הרב שנמצא לאורך השנים [31]. התרבות את תאי ה-NK עם ריכוזים שונים של H2O2 במשך 24 שעות ומצאנו ש-1{{1{{20}}}}0 מיקרומטר הוא הריכוז הקרוב ביותר למינון הקטלני החציוני (LD50) (איור 3ב) . הביטוי של TIM3 באוכלוסיית תאי NK עלה על ידי תוספת של H2O2, בעוד שהביטוי ירד לאחר טיפול בקלציטריול (*P < 0.05) (איור 3c). בנוסף, תאי NK מזדקנים נצבעו בכחול בנוכחות -galactosidase. הצבע הכחול הזה של התאים הוא סימן היכר ספציפי של תאים מזדקנים. ניתוח סטטיסטי הראה כי לתאי NK שלא טופלו יש פחות פעילות תאית של גלקטוזידאז, בעוד שתאי NK שנחשפו ל-H2O2 הראו פעילות מוגברת של גלקטוזידאז. קלציטריול הפחית את האוכלוסייה החיובית ל- galactosidase, מה שמצביע על נוכחותם של פחות תאים מזדקנים (*P < 0.05) (איור 3ד). ירידה בפוטנציאל הממברנה המיטוכונדריאלית נצפתה גם במגוון תאים מזדקנים מכמה מיני יונקים. הערכנו את פוטנציאל הממברנה המיטוכונדריאלית של תאי NK במחקר זה. התוצאות הסטטיסטיות הראו כי H2 O2 הפחית משמעותית את הפעילות התאית של תאי NK בהשוואה לזו של התאים הלא מטופלים, בעוד שקלציטריול הגביר את הנזק שנגרם על ידי H2 O2 (*P < 0.05) (איור 3ה).

איור 2. השפעות של קלציטריול על הפונקציות של תאי NK. (א) ניתוח של הציטוקין ששוחרר על ידי תאי NK שטופלו בקלציטריול תוך 48 שעות. ב) תוצאות מיון תאים מופעלי פלואורסצנציה (FACS) הראו תאי K562 מתים שסומנו על ידי 3,3 -octadecyl-oxacarbocyanineDlO) ו-propidium iodide (P). תאי K562 תורבו יחד עם יחסים שונים של תאי Nk שטופלו בקלציטריול. למשך 4 שעות. (ג) FACSinalysis של K562 cels מתים במבחני הרג. (ד) השפעות הדגרנולציה של תאי Nk שטופלו במבחני הרג. n=3 עבור eaciyroup. *p < 0.05 ו-**p < 0.01 הושוו ל-NC

3.5 קלציטריול התנגד לאפופטוזיס של תאי NK המושרה על ידי עקה חמצונית במבחנה

לאחר מכן, מדדנו את מספר התאים האפופטוטיים. תוצאות ציטומטריית הזרימה הראו שטיפול ב-100 מיקרומטר H2O2 למשך 24 שעות הוביל לאפופטוזיס משמעותי של תאי NK. עם זאת, טיפול בקלציטריול הפחית את היחס האפופטוטי (*P <0.05) (איור 4א). כל התוצאות לעיל הדגימו את העמידות של קלציטריול נגד עקה חמצונית הנגרמת על ידי H2O2. עם זאת, זיהינו חלבונים אפופטוטיים בתאי NK תחת לחץ חמצוני. לפני הטיפול ב-H2O2, 10- [7] M calcitriol נוספה לתאי NK למשך 24 שעות. רמות החלבונים הקשורים לאפופטוזיס, caspase-3 p17 ו-caspase-3 p20, עלו באופן משמעותי לאחר טיפול ב-H2O2. קלציטריול הפחית את האפופטוזיס שמקורו ב-2-H2O והוריד את הביטוי של caspase-3, p17 ו-caspase-3 p20 (*P <0.05) (איור 4b). תוצאות אלו הצביעו על כך שקלציטריול התנגד לאפופטוזיס המושרה על ידי H2O2.

איור 3. ההשפעות אנטי אייג'ינגשל קלציטריול על תאי NK. (א) הביטוי של הקולטן לוויטמין D (VDR), sirtuin 1 (SIRT1), SIRT1- ∆Exon8, ו-Protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase (pERK) בתאי NK זוהה על ידי אנליזה של Western blotting לאחר טיפול בקלציטריול למשך 48 שעות. Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) שימש כבקרת הטעינה. דיאגרמת עמודות הממחישה את תוצאות הספיגה המערבית (n=3). *P < 0.{{10}}5 ו-**P < 0.01 הושוו ל-NC (n=3). (ב) עקומת תמותה של מינון של תאי NK לאחר טיפול במי חמצן (H2O2) למשך 24 שעות. (ג) אחוז תאי TIM3 המפגינים ביטוי גבוה לאחר טיפול ב-100 מיקרומטר H2O2 למשך 24 שעות. (ד) תוצאות צביעה וניתוח של גלקטוזידאז הקשורות להזדקנות. התאים המזדקנים נצבעו בכחול וסומנו בחצים אדומים. סרגל קנה מידה, 50 מיקרומטר. (ה) תאי NK נצבעו עם Hoechst ו- Chloromethyl-X-Rosamine (CMXRos) כדי לקבוע את מיקום התא ופוטנציאל הממברנה המיטוכונדריאלית. התאים המזדקנים והאפופטוטיים היו Hoechst בתוספת CMXRos- ומסומנים על ידי חיצים לבנים. סרגל קנה מידה, 50 מיקרומטר. ניתוח סטטיסטי הראה את עוצמת הקרינה היחסית. *P <0.05 ו-**P <0.01 הושוו לקבוצת H2O2 באיורים C, D ו-E (n=3).

איור 4. ההשפעות האנטי-אפופטוטיות של קלציטריול על תאי NK. (א) השפעות אנטי-אפופטוטיות של קלציטריול בפציעה הנגרמת2- של H2O. ניתוח FACS הראה את האחוז של תאי NK אפופטוטיים לאחר טיפול ב-100 מיקרומטר H2O2 למשך 24 שעות. (ב) רמות הביטוי של caspase-3 p20 ו-caspase-3 p17 בתאי NK זוהו על ידי ניתוח Western blotting לאחר טיפול ב-100 מיקרומטר H2O2 למשך 24 שעות. GAPDH שימש כבקרת הטעינה. דיאגרמת עמודות הממחישה את תוצאות הספיגה המערבית (n=3). *P <0.05 הושווה עם קבוצת H2O2.

4. דיון

האינטראקציה ארוכת הטווח בין דלקת ולחץ חמצוני היא גורם חשוב בהזדקנות. בנוסף, דלקת ולחץ חמצוני הם סינרגטיים [32]. עודף ROS שנוצר על ידי מתח חמצוני תוקף את תאי הגוף. במהלך תהליך זה, גורמים דלקתיים משתחררים על ידי מערכת החיסון המופעלת כדי להרוג את התאים הלא תקינים, מה שמוביל ליצירת ROS נוספת. חוסר בקלציטריול עלול לגרום למחלות אוטואימוניות, מחלות מטבוליות כרוניות וגידולים. עם זאת, מעט ידוע על ההשפעות האנטי-אייג'ינג של קלציטריול על מערכת החיסון, במיוחד על תאי NK.

במחקר זה, חקרנו את ההשפעות האנטי-אייג'ינג של קלציטריול על תאי NK. מצאנו כי קלציטריול הגביר את הביטוי של NKG2A, תוך הפחתת הביטוי של KIR במבחנה. תת-אוכלוסיית CD56−CD16 פלוס של תאי NK, הידועה כקשורה לדלקת כרונית, גדלה באופן משמעותי בקשישים [33]. לכן, ההפחתה בביטוי CD16 המושרה על ידי קלציטריול עשויה להיות מיוחסת להשפעה האנטי דלקתית שלו. דווח כי TIM-3 ו-PD-1 הם הקולטנים המעכבים והדלדול של תאי NK. המחקר שלנו הראה ש-cal citriol הוריד את רמות הביטוי של TIM-3 ו-PD-1 ומנע אפופטוזיס של תאי NK.

בנוסף, קלציטריול עיכב את התרחבות תאי NK ושמר על אוכלוסיית תאי NK בשלב G1 במבחנה. עם זאת, התאים ב-S-phase לא הושפעו. TIGIT, הידוע כגורם ביקורת של תאי NK, נותר ללא שינוי. תוצאות אלו הצביעו על כך שאיור 4. ההשפעות האנטי-אפופטוטיות של קלציטריול על תאי NK. (א) השפעות אנטי-אפופטוטיות של קלציטריול בפציעה הנגרמת על H2O2-. ניתוח FACS הראה את האחוז של תאי NK אפופטוטיים לאחר טיפול ב-100 מיקרומטר H2O2 למשך 24 שעות. (ב) רמות הביטוי של caspase-3 p20 ו-caspase-3 p17 בתאי NK זוהו על ידי ניתוח Western blotting לאחר טיפול ב-100 מיקרומטר H2O2 למשך 24 שעות. GAPDH שימש כבקרת הטעינה. דיאגרמת עמודות הממחישה את תוצאות הספיגה המערבית (n=3). *P <0.05 הושווה עם קבוצת H2O2. BIOENGINEERED 6851calcitriol לא הוביל למוות של תאי NK, אלא רק האט את קצב התרחבות תאי NK.

זה ידוע היטב שדלקת מובילה להופעת חיסון [34,35]. יתרה מכך, מצאנו שקלציטריול הפחית את רמות ה-IL-5, IL-13, IFN- ו-TNF- בתאי NK. הציטוטוקסיות של תאי NK מתווכת בחלקה על ידי שחרור של גורמים דלקתיים [36]. יתרה מכך, חלה ירידה בתמותה של תאי גידול K562 ודגרנולציה של תאי NK. תוצאות אלו היו בהתאם לציפיות שלנו. Rapamycin היא תרופה ידועה המפחיתה את קצב חילוף החומרים למניעת הזדקנות[37] המשמשת כביקורת חיובית במחקר זה. זה גורם לדיכוי חיסוני ומגביר את הסיכון הפוטנציאלי לגידול ונטל גידול. נטל זה אושר במודלים של עכברים של סרטן השד [38]. האם קלציטריול מפגין השפעות דומות ל-rapamycin עדיין לא ידוע. יש לבצע מחקרים נוספים בבעלי חיים וקליניים כדי לאמת את השפעתם על גוף האדם.

לבסוף, חקרנו את ההשפעות של קלציטריול על הזדקנות נוגדת חמצון. רזברטרול, תרופת אנטי-אייג'ינג ידועה, יכולה להנמיך את מסלול ה-NF-κB על ידי הפעלת ציר SIRT1/PERK. הורדת ויסות זו הוכחה כמועילה גם בהפרעות ניווניות ומחלות לב וכלי דם [39]. דה-אצטילציה של SIRT1 קשורה בקרה מטבולית וביוגנזה של המיטוכונדריה. בסוג זה של ויסות, רמות מוגברות של SIRT1 יכולות לקדם את הצטברות של רצפטור גמא מופעל על ידי פרוקסיזום פרוליפרטור-1 אלפא (PGC-1) בגרעין, מה שגורם לשעתוק של גנים הנחוצים עבור תפקוד מיטוכונדריאלי [40]. חוץ מזה, SIRT1 מדכא את יעד היונקים של מסלול האיתות rapamycin (mTOR), שיכול להגן על העצבים ולהתנגד להזדקנות המוח בעכברים [41]. במחקר זה, זיהינו מסלול רגולטורי דומה עבור קלציטריול. קלציטריול הפעיל את SIRT1 באמצעות VDR והעלה את ציר SIRT1/pERK.

בנוסף, מצאנו כי קלציטריול הגביר את הביטוי של SIRT1-∆Exon8. מתחים ידועים כגורם רגולטורי מעלה של SIRT1-∆Exon8. למרות ש-SIRT1-∆Exon8 עצמו מציג פעילות מופחתת של דה-אצטילציה של p53, הוא מפעיל אפקט דה-אצטילציה נוסף על p53 כאשר הוא מתבטא יחד עם SIRT1 באורך מלא [42]. השפעה זו הצביעה על התפקוד האנטי-אפופטוטי של קלציטריול על תאי NK. עם זאת, עדיין יש להבין טוב יותר את תפקידו של SIRT1-∆Exon8 במסלולים הקשורים לגיל. מכיוון שהירידה של SIRT1 עשויה לנבוע מנזק חמצוני [43], הקמנו מודל תאי NK מזדקן חריפה במבחנה באמצעות H2O2. ההזדקנות החמצונית המושרה על ידי H2O2 הגדילה את הביטוי של TIM3 וכן את הפעילות של -galactosidase בתאי NK. מצאנו שקלציטריול התנגד לנזק חמצוני ושמר על פעילות המיטוכונדריה וחיות התא של תאי NK תוך מניעת אפופטוזיס של התא. עם זאת, קלציטריול עדיין לא זוהה כתרופה אנטי-אייג'ינג ברפואה הקלינית שכן יש צורך בראיות נוספות לגבי השפעות האנטי-אייג'ינג של תרופה זו in vivo. לסיכום, סיפקנו ראיות ראשוניות להערכת ההשפעות האנטי-אייג'ינג של קלציטריול על תאי NK במבחנה. אנו מאמינים שיש לחקור עוד יותר את ההשפעות של תרופה זו במחקרים עתידיים על בעלי חיים וקליניים.

5. מסקנה

במחקר זה, הדגמנו אתהשפעות אנטי אייג'ינגשל קלציטריול על תאי NK. קלציטריול הפך את הביטוי שלסמנים ביולוגיים להזדקנותעל תאי NK. זה האט את ההגברה של NK ושמר אותם בשלב G1. בנוסף, קלציטריול עיכב את שחרורו של ציטוקינים דלקתיים והסרה מטה של ​​תאי NK. הפעלת ציר SIRT1-∆Exon8 ו-VDR/SIRT1/pERK על ידי קלציטריול עשויה להיות המנגנון העיקרי של אפקט אנטי-אייג'ינג של קלציטריול בהתבסס על כל האמור לעיל. לבסוף, קלציטריול התנגד להזדקנות החמצונית של תאי NK במבחנה. מחקרים נוספים צריכים להתמקד במחקר בבעלי חיים ובמחקר קליני.

עיקרי הדברים

(1) קלציטריול הפחית את הביטוי של סמנים ביולוגיים הקשורים לגיל כולל CD16, TIM3, PD-1, KIR, והגביר את הביטוי של NKG2A של תאי NK. (2) קלציטריול הצליח לעכב את התפשטות תאי NK ולעצור אותם בשלב G1. (3) קלציטריול הפחית את שחרור גורמי דלקת עיקריים כגון IL-5, IL-13, IFN- ו-TNF- של תאי NK.(4) ההשפעה האנטי-אייג'ינג של קלציטריול על תאי NK יכולה להשיג באמצעות מסלול האות Sirt1- pERK.

תודות ברצוננו להודות לכל חברי הצוות בקבוצה שלנו על תמיכתם ולוועדת החדשנות במדע וטכנולוגיה של שנזן על תמיכתם במימון במחקר זה.

מימון עבודה זו נתמכה כלכלית על ידי ועדת החדשנות במדע וטכנולוגיה של שנזן (JCYJ20170412155231633), קרן לבניית משמעת רפואית של שנזן מפתח (מס' SZXK062), Chengdu Wecistanche Biotech, ופרויקט Sanming לרפואה בשנג'ן (מס' SZSM202011010); ועדת חדשנות למדע וטכנולוגיה של שנזן [JCYJ20170412155231633]; Shenzhen Key Medical Discipline Construction Fund [מס'. SZXK062]; Sanming Project of Medicine בשנג'ן [מס'. SZSM202011010].

אישור אתיקה כל הנהלים אושרו על ידי ועדת האתיקה של בית החולים העממי של שנזן לואוהו (ZLNK 12/2019, שנזן, סין). הושגה הסכמה מדעת לניסוי בדגימות אנושיות.

הצהרת גילוי נאות כל המחברים אישרו את הגשת כתב היד הזה. המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים או קשרים אישיים ידועים שהיו יכולים להשפיע על העבודה המדווחת במאמר זה.

הפניות

[1] עובדיה Y, Landsberger T, Leins H, et al. פיקוח חיסוני לקוי מאיץ הצטברות של תאים מזדקנים והזדקנות. נאט קומון. 2018;9 (1):5435.

[2] López-Otín C, Blasco MA, Partridge L, et al. סימני ההיכר של ההזדקנות. תָא. 2013;153:1194–1217.

[3] Hodgins JJ, Khan ST, Park MM, et al. Killers 2.0: טיפולי תאי NK נמצאים בחזית השליטה בסרטן. J Clin Invest. 2019;129(9):3499–3510.

[4] Zhu H, Blum RH, Bjordahl R, et al. תאי NK שמקורם בתאי גזע פלוריפוטנטיים עם CD16a בעל זיקה גבוהה שאינם ניתנים לפירוק מתווכים פעילות אנטי-גידולית משופרת. דָם. 2020;135(6):399–410.

[5] Mandal A, Viswanathan C. Natural killer cells: in health and disease. Hematol Oncol Stem Cell Ther. 2015;8(2):47–55.

[6] Le Garff-Tavernier M, et al. תאי NK אנושיים מציגים שינויים פנוטיפיים ותפקודיים משמעותיים לאורך תוחלת החיים. תא מזדקן. 2010;9(4):527–535.

[7] Le Garff-Tavernier M, Béziat V, Decocq J, et al. דפוסי ביטוי של NKG2A, KIR ו-CD57 מגדירים תהליך של התמיינות CD56dim תאי NK מנותק מהחינוך של תאי NK. דָם. 2010;116 (19):3853–3864.

[8] Manser AR, Uhrberg M. שינויים הקשורים לגיל ברפרטואר תאי הורגים טבעיים: השפעה על תפקוד תאי NK ומעקב חיסוני. סרטן Immunol Immunother. 2016;65(4):417–426. [9] Bi J, Tian Z. NK Cell Exhaustion. אימונול קדמי. 2017;8:760.

[10] Furman D, Campisi J, Verdin E, et al. דלקת כרונית באטיולוגיה של המחלה לאורך תוחלת החיים. נאט מד. 2019;25(12):1822–1832.

[11] Liu Y, et al. נוגדן ספציפי לפפטידי ציטומגלווירוס משנה הומאוסטזיס של תאי הורגים טבעיים ומשותף למספר מחלות אוטואימוניות. Cell Host Microbe. 2016;19(3):400–408.

[12] קמפוס X, Pera A, Solana R, et al. תאי NK בהזדקנות בריאה ומחלות הקשורות לגיל. J Biomed Biotechnol. 2012;2012:195956.

[13] Liu Y, Mu R, Gao YP, et al. השפעת ההזדקנות על אוכלוסיית תאי nk ושגשוגם במצב תרבית ex vivo. Anal Cell Pathol (Amst). 2018;2018:7871814.

[14] Sintov AC, Yarmolinsky L, Dahan A, et al. השפעות פרמקולוגיות של ויטמין D והאנלוגים שלו: התפתחויות אחרונות. Drug Discov היום. 2014;19 (11):1769–1774. [15] Halicka HD, Zhao H, Li J, et al. הנחתה של איתות נזק מכונן ל-DNA על ידי

תבקש עוד:

דוא"ל:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: פלוס 86 15292862950