המחקר של תמצית אתר נפט של Cistanche Deserticola

מרכיבים כימיים ופעילות מעכבת מחזור התא של תמצית אתר נפט של Cistanche deserticola

איש קשר:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

לו קאנג, ליו הונגבינג, גו צ'יאנקון*

(מעבדת מפתח לרפואה ימית, משרד החינוך, המכון לרפואה ימית ומזון, אוניברסיטת אושן בסין, צ'ינגדאו, שאנדונג 266003)

Cistanchedeserticola YC Ma, הידוע גם בשםCistanche, הוא צמח השייך לסוג Cistanche במשפחת ה-Lydanaceae. הגבעול הבשרני היבש שלו עם קשקשים משמש כתרופה סינית מסורתית Cistanche deserticola. זהו מוצר מקורי הכלול בפרמקופאה של הרפובליקה העממית של סין. Cistanche מתוק בטעם וחם בטבע. יש לו השפעה של "חיטוב יין כליות, מזין תמצית ודם, לחות למעיים ומשלשל". זה יכול לשמש לטיפול באימפוטנציה גברית, אי פוריות נשית, כאבי מותניים וברכיים קרות, עצירות יבשה בדם וכו' [1].

בשנים האחרונות, הרפואה הסינית המסורתיתCistancheמשך את תשומת הלב של אנשים בגלל שיפור הזיכרון המדהים שלו, אנטי אייג'ינג, אנטי עייפות ושיפור חסינות הגוף. ההרכב הכימי וההשפעות הפרמקולוגיות שלו דווחו יותר [2, 3]. עם זאת, חיפוש ספרות מראה שיש מעט מחקרים קשורים על מדבר טריCistanche, רק Tu Pengfei ואחרים חקרו את ההרכב הכימי של תמצית n-butanol של פרחיו [4]. במחקר השיטתי של הרכיבים הכימיים של Cistanche טרי, המחבר מצא ששניהםתמצית אתר נפטולתמצית אתיל אצטט יש פעילויות מסוימות נגד גידולים. בניסוי זה, נעשה שימוש ב-GC-MS לניתוח וזיהוי ההרכב הכימי שלתמצית אתר נפט, וציטומטריית זרימה שימשה לזיהוי פעילות מעכבת המחזור שלה על תאי FT210 של סרטן השד של עכברים.

1 חלק ניסיוני

1. 1 מכשירים, ריאגנטים ודגימות

מכשיר משולב GC-M S חברת VG בריטית, מסוג Fiso ns M D800GC /MS. שימוש בתאי ts-FT210 סרטן שד עכברים. ציטומטריית זרימה משתמשת בציטומטר זרימה מסוג Va n-tage של חברת BD בארצות הברית, והתפלגות התאים בכל שלב של מחזור התא מנותחת ומחושבת על ידי תוכנת Mod Fit LT. סרום בקר עוברי (FBS) ומדיום תרבית תאים RPM I-1640 הופקו על ידי Hyclone (מספר קטגוריה STF721) ו- Gibcobrl, בהתאמה. Propidium iodide (PI) ו-Triton X-100 יוצרו שניהם על ידי Sigma. הטרי החדשcistancheחומר רפואי נאסף בליגת אלקסה, מונגוליה הפנימית, והוא זוהה כגבעול בשרני עם עלי קשקשת שלcistancheC. deserticola YC Ma מאת מר ליו הונגבינג מהמכון לרפואה ימית וחקר מזון של אוניברסיטת אוקיינוס ​​בסין.

cistanche deserticola

1. 2 מיצוי דגימות

אחרי 450 גר' מדבר טריCistanche, חומר תרופתי קצוץ, הוא עבר סינון עם {{0}} מ"ל אתר נפט עם טווח רתיחה של 30-60 מעלות, הממס הוחזר בטמפרטורה נמוכה ובלחץ מופחת, ולאחר מכן יובש על מים נטול מים נתרן סולפט לקבלת נוזל שקוף צהוב, אשר נאטם ואוחסן ב--10 נשמר במקרר בדרגה . התשואה הייתה 0.93 אחוז.

1.3 ניתוח GC-MS של תמצית אתר נפט

תנאים כרומטוגרפיים של גז: עמודה כרומטוגרפית היא עמודת נימי קוורץ 30QC2/AC5 (30 מ'×0.32 מ"מ); טמפרטורת העמודה היא 80-280 מעלות, עליית הטמפרטורה המתוכנתת היא 3 מעלות/דקה; יחס הפיצול הוא 30:1; טמפרטורת תא האידוי היא 240 מעלות; הלחץ הקדמי של העמוד הוא 82.8 kPa; הגז המוביל הוא N2 בטוהר גבוה.

תנאי ספקטרומטריית מסה: EI-MS, אנרגיית אלקטרונים 70 eV; טמפרטורת מקור יונים 200 מעלות; זרם נימה 4.1 A; טווח מסה 35-450 מ/צ; תקופת סריקה 1 שניות; מערכת LAB-BASE לעיבוד נתונים, באמצעות ארצות הברית ספריית ה-NBS של הלשכה הלאומית לתקנים נערכה חיפוש ואושרה באמצעות הפניה.

1. 4 בדיקת פעילות נגד גידולים

עיין בשיטת הספרות [5], באמצעות ציטומטריית זרימה כדי לזהות את הפעילות מעכבת המחזור שלCistancheמדבריתתמצית אתר נפטעל תאי tsFT210.

2. תוצאות

2. 1 זיהוי ההרכב הכימי של תמצית אתר נפט

לאחר ניתוח וזיהוי על ידי מכשיר משולב GC-MS, זוהו בסך הכל 46 שיאים בתמצית אתר נפטשֶׁלCistanchedeserticola, שנערך חיפוש עם ספריית ה-NBS של לשכת התקנים הלאומית ואושר על ידי הפניה, ובסך הכל זוהו 25 תרכובות, המהוות את אזור השיא. מתוך 75. 03 אחוזים, התוצאות מוצגות בטבלה 1. התוצאות הראו כי אסטרים ואלקנים הם המרכיבים העיקריים של תמצית אתר נפט Cistanche. חלק המסה הגבוה ביותר הוא 14-מתיל-pentadecanoic acid methyl ester (13.61 אחוזים), ואחריו חומצה hexadecanoic ethyl ester (12.39 אחוז) 2,5,6-trimethyl-octane. אלקן (7.60 אחוז).

2.2 פעילות אנטי גידולית

תוצאות ציטומטריית הזרימה הראו שתמצית אתר הנפט שלCistancheל-deserticola הייתה פעילות מעכבת שלב G{{0}/G1 ברורה על תאי tsFT210 ב-10 ug/mL (איור 1).

טבלה 1 מרכיביתמצית אתר נפטמ-C. deserticola טרי

3. דיון

כיום, המחקר על הפעילות הביולוגית שלCistancheמתמקד בעיקר בשיפור הזיכרון, אנטי אייג'ינג ושיפור התפקוד החיסוני של הגוף. אין דיווח על ההיבט האנטי גידולי. בניסוי זה, נעשה שימוש ב-flow cytometry כדי להעריך מקדים את הפעילות המעכבת את מחזור התא של Cistanche deserticola טרי.תמצית אתר נפטעל מחזור התא של סרטן השד של עכברים tsFT210, והשתמש ב-GC-MS כדי לנתח את ההרכב הכימי שלו. בין תמציות אתר הנפט שלCistanche deserticola, ישנם בעיקר אלקנים ואסטרים אלקנואטים ומספר קטן של פנולים ותרכובות ציקלוהקסנון. הפעילות האנטי-גידולית של תרכובות אלו טרם דווחה. לכן, החומרים הפעילים נגד גידולים ב-תמצית אתר נפטשֶׁלCistancheDeserticola זקוק למחקר נוסף כדי לקבוע.

תודות: GC-MS נקבע על ידי פרופסור דינג ג'ינגקאי, המכון לבוטניקה בקונמינג.

הפניות

[1] ג'יאנגסו New Medi cal Coll ege. Dictionary y of Chinese Ma teria Med ica (מילון רפואה סינית) [M ]. Sh shanghai: Shanghai People e's Publishing House, 1997.

[2] Song ZH, Lei L, Tu P F. התקדמות במחקר של פעילות פרמקולוגית בצמחים שלCistancheנופף. et Link [J]. Chin Tra dit Herb Drugs (רפואת צמחים סינית), 2003, 34(9): 16-17.

[3] Zhang LH, Du N S. התקדמות במחקר של מרכיבים כימיים בצמחי הרבהCistanche[י]. Chin Trad it Pat Med (רפואת פטנט סינית), 2003, 25(4): 323-327.

[4] טו PF, He YP, Lou Z C. מחקרים על המרכיבים הכימיים של התפרחות הטריות של ארגז חי המדבר Anche (Cistanchedeserticola) [י]. Chin Trad it Herb Drugs (רפואת צמחי מרפא סינית), 1994, 25(9): 451-452.

[5] Liu HB, Cui CB, Cai B, et al. בידוד, זיהוי ופעילות אנטי-גידולית של טריטרפנים מ-Pterocar ya tonkinesis (צרפתית) Dode [J]. Chin J Med Chem (Chinese Journal of Medicinal Chemistry), 2004, 14(3): 168-170.

מתוך: תרופות סיניות מסורתיות וצמחיות; כרך 36 מספר 4 באפריל 2005.