חלק 1 הטרוגניות פיברובלסט ורקמות לימפואידיות שלישוניות בכליה

איש קשר: ali.ma@wecistanche.com

תַקצִיר

פיברובלסטים שוכנים באיברים שונים ותומכים במבנה הרקמה ובהומאוסטזיס בתנאים פיזיולוגיים. שינויים פנוטיפיים של פיברובלסטים עומדים בבסיס התפתחותם של מצבים פתולוגיים מגוונים, כולל פיברוזיס איברים. ההתקדמות האחרונה בביולוגיה של תא בודד גילתה כי פיברובלסטים מהווים תת-אוכלוסיות הטרוגניות עם פנוטיפים מובהקים, אשר מפעילים השפעות מועילות ומזיקות על האיברים המארחים באופן תלוי הקשר. בתוך הכִּליָה, שינויים פנוטיפיים של פיברובלסטים גרים מעוררים מצבים פתולוגיים נפוצים שלמחלת כליות כרונית(CKD), כגון אנמיה כלייתית ואובדן נימים פריטובולרי. בנוסף, בפצועים בגילכליות, פיברובלסטים מספקים תמיכה פונקציונלית ומבנית לרקמות לימפואידיות שלישוניות (TLTs), המשמשות כאתר חוץ רחמי של תגובות חיסוניות נרכשות בהקשרים קליניים שונים. TLTs קשורים קשר הדוק להזדקנות ולהתקדמות CKD, ושלבי ההתפתחות של TLTs משקפים את חומרת הפגיעה הכלייתית. בסקירה זו, אנו מתארים את ההבנה הנוכחית של הטרוגניות פיברובלסט הן בתנאים פיזיולוגיים והן בתנאים פתולוגיים, עם דגש מיוחד על תרומת הפיברובלסט להיווצרות TLT בכִּליָה. ניתוח המאפיינים ההטרוגניים של פיברובלסטים יספק אפשרות טיפולית מבטיחה למצבים פתולוגיים הקשורים לפיברובלסט, כולל היווצרות TLT.

מילות מפתחכְּרוֹנִיכִּליָהמחלה, פיברובלסט, פיברוזיס, מיופיברובלסט, רקמה לימפואידית שלישונית

לחץ כדימינון cistanche tubulosa למחלת כליות

1|מבוא

בעבר, זיהוי תאי ברקמה הסתמך על מראה מורפולוגי בהתבוננות מיקרוסקופית קפדנית. התקדמות בביולוגיה מולקולרית הובילה לגילוי סמנים מולקולריים ספציפיים לכל סוג תא שניתן לנצלם לסיווג תאי, וזה תרם משמעותית לחקר מנגנונים ביולוגיים מגוונים. ההתקדמות האחרונה בניתוח מולטי-אומיקה חד-תאית חשפה את התכונות ההטרוגניות של אוכלוסיות תאים ברזולוציה חסרת תקדים ושחזרה באופן דרמטי את ההבנה שלנו לגבי תופעות ביולוגיות. כל קטגוריית תאים כוללת תת-אוכלוסיות שונות עם פונקציות שונות, המאפיינות את המיקרו-סביבה הספציפית לרקמות בהקשרים פיזיולוגיים ופתולוגיים כאחד. תחום מחקר הפיברובלסט אינו יוצא דופן, והצטברו ראיות אדירות המצביעות על המאפיינים ההטרוגניים שלהם.

פיברובלסטים הם תאים בצורת ציר הממוקמים בחללים הביניים של איברים שונים, שם הם מסנתזים מספר חלבונים מבניים, כגון קולגנים ופיברונקטינים, כדי לארגן את המטריצה ​​החוץ-תאית (ECM) ולשמור על הומאוסטזיס איברים.1 בנוסף לתפקודיהם המשותפים בין איברים , פיברובלסטים ממלאים תפקידים ספציפיים לאיבר בשיתוף עם תאים גרים אחרים. לדוגמה, תת-אוכלוסיה של פיברובלסטים תושבי האזורכִּליָהמייצר אריטרופואטין (EPO), מווסת עיקרי של אריתרופואיזיס. מחקרים אחרונים גילו כי פיברובלסטים באיברים שונים מציגים הטרוגניות תפקודית גבוהה. בתנאים פתולוגיים, שינויים פנוטיפיים דרמטיים של פיברובלסטים מתרחשים ותורמים באופן משמעותי להתפתחות של אי תפקוד איברים. פיברובלסטים מתבדלים למיופיברובלסטים ומקדמים התקדמות של פיברוזיס איברים, שהוא הביטוי של תיקון לא מסתגל לאחר פציעה.2 בכליה, פיברובלסטים ממלאים תפקידים מכריעים בהתפתחות והתקדמות שלמחלת כליות כרונית(CKD), שיש לה תחלואה ותמותה גבוהים ברחבי העולם אפילו בעידן המודרני.3 פיברובלסטים מניעים מספר מצבים פתולוגיים הקשורים ל-CKD, כגון פיברוזיס בכליות ואנמיה כלייתית, ללא קשר לאטיולוגיה של CKD. בנוסף, פיברובלסטים ממלאים גם תפקידים מרובי פנים באופן תלוי הקשר. בכליות פצועות מיושנות, למשל, פיברובלסטים ממלאים תפקיד מכריע ביצירת רקמה לימפואידית שלישונית (TLT), רקמה לימפואידית אקטופית הניתנת להשראת דלקת כרונית.4 הבהרת המאפיינים האישיים של פיברובלסטים תבהיר את המנגנונים הבסיסיים של פיברובלסט. מצבים פתולוגיים ומקלים על פיתוח תרופות אפקטיביות.

בסקירה זו, אנו מתארים תחילה הטרוגניות פיברובלסט במונחים של מקורו ותפקודו בתנאים פיזיולוגיים. לאחר מכן, נדון בהטרוגניות התפקודית של פיברובלסטים במצבים פתולוגיים שונים, כולל פיברוזיס איברים, ובאינטראקציות שלהם עם סוגי תאים אחרים והסביבה המיקרו-סביבתית. דגש מיוחד מושם על פיברובלסטים תושביכִּליָהוהמשמעות שלהם בהתקדמות CKD. לבסוף, יידונו תרומת הפיברובלסט להיווצרות TLT והמשמעות הקלינית שלו.

2|המאפיינים של פיברובלסטים

2.1|מאפיינים ותפקודים של פיברובלסט בתנאים פיזיולוגיים

פיברובלסטים מזוהים בדרך כלל על ידי המורפולוגיה, הלוקליזציה וביטויי הסמנים המייצגים שלהם, כגון PDGFR ו-CD73.1, לעומת זאת, סמנים אלה אינם ספציפיים לחלוטין עבור פיברובלסטים, ולכן היעדר סמנים עבור שושלות תאים אחרות (למשל, CD45 עבור תאים המטופואטיים ) משמש לעתים קרובות לזיהוי פיברובלסטים. בתנאים פיזיולוגיים, פיברובלסטים תורמים לשמירה על מבנה רקמות תקין על ידי תמיכה בתחלופה של ECM. בנוסף לתפקודים אלה, פיברובלסטים גרים ממלאים גם תפקידים ספציפיים לרקמות. לדוגמה, בלב, שבו פיברובלסטים מהווים את אוכלוסיית התאים הגדולה ביותר, פיברובלסטים חשים מתיחה מכנית ומקיימים אינטראקציה עם מיוציטים דרך צומת הפער, המאפשרת הולכה חשמלית מתאימה ושומרת על תפקוד לב תקין.⁵בנוסף, דלדול פיברובלסטים במח העצם ובשריר השלד מוביל לאנמיה וקצ'קסיה,6 מה שמצביע על חשיבותם בהומאוסטזיס רגיל של רקמות בכל איברים שונים.

הכִּליָההוא איבר ייחודי בכך שסוגים מרובים של תאים שוכנים קרוב זה לזה ומתפקדים בצורה הרמונית להפעלת תפקידים ספציפיים לכליה, כגון פינוי חומרי פסולת ושמירה על מאזן נוזלי הגוף. פיברובלסטים מספקים תומכים מבניים לנפרונים, היחידה התפקודית הבסיסית של הכליה, ויש להם אינטראקציה ישירה עם תאים תושבי כליה אחרים, כגון תאים צינוריים פרוקסימליים.7 כתפקוד ספציפי של פיברובלסטים תושבי כליה, תת-אוכלוסיות מסוימות של פיברובלסטים בקליפת המוח העמוק המדולה החיצונית מייצרת EPO בתגובה להיפוקסיה, המגרה אריתרופואיזיס במח העצם.8 לתאים המייצרים EPO יש מורפולוגיה דנדרטית דמוית נוירון ומבטאים סמנים עצביים, כגון חלבון 2 הקשור למיקרו-צינוריות (MAP2) ופוליפפטיד קל של נוירופילמנטים (NFL) .8 מעניין לציין שבתנאים אנמיים חמורים, כמעט כל הפיברובלסטים השוכנים, כולל אלה בקליפת המוח החיצונית, מייצרים EPO, מה שמרמז על הפלסטיות הגבוהה של תפקוד הפיברובלסט.9 הלוקליזציה של תאים מייצרי EPO עומדת בניגוד חד לגורמי גדילה המטופואטיים אחרים. , כגון גורמים מעוררי מושבות גרנולוציטים, אשר מסונתזים בקרבת תאי המטרה שלהם ומהנים לפעול באופן פרקריני. אחד ההסברים לפער זה הוא שריכוז החמצן הפיזיולוגי בכליה נמוך יותר מאשר באיברים אחרים, וזרימת הדם הכלייתית מהווה כ-20 אחוז מתפוקת הלב, מה שהופך את הכליה לחיישן הביולוגי האידיאלי להיפוקסיה.10 הכליות יכולות גם מיד לזהות מצב נוזלים באזור ה-juxtamedullary ולווסת נפח חוץ תאי על ידי התאמת כמות הספיגה מחדש של נתרן. יחד עם ייצור EPO, הכליות יכולות להגדיר את נפח הפלזמה ואת מסת תאי הדם האדומים ברמות טובות, לשמש כ"קריטמטר".^11,12בנוסף, פיברובלסטים במדולה הכלייתית מבטאים COX1 ו-COX2, שהם אנזימים מרכזיים של סינתזת פרוסטגלנדין (PG).¹³ בתנאים פיזיולוגיים, ל-PGs יש מספר פונקציות ב-כִּליָה, כגון ויסות זרימת הדם הכלייתית ושחרור רנין. בסך הכל, פיברובלסטים תושבי הכליה תורמים לשמירה על הומאוסטזיס כליות על ידי מספר מנגנונים.

2.2|מקורם של פיברובלסטים

המקורות ההתפתחותיים של פיברובלסטים הם הטרוגניים. בתוך הכִּליָה, חשפנו בעבר כי פיברובלסטים תושבי קליפת הכליה ובמדולה החיצונית נגזרים מתאי חוץ-כליות המסומנים על ידי חלבון מיאלין (P0)-Cre.¹⁴ בשלב העובר, P0 מתבטא על תאי ציצה עצביים.¹⁵ P0-תאים המסומנים בשושלת Cre נודדים מהציצה העצבית לתוך העוברכִּליָהביום העובר 13.5 והם ממוקמים יחד עם הקפסולה החיצונית והשופכן של הכליה. אצל המבוגרכִּליָה, P0-תאים המסומנים בשושלת Cre נצפים באינטרסטיטיום הכלייתי ומבטאים סמני פיברובלסט כגון PDGFR ו-CD73. מעניין לציין שרוב הפיברובלסטים המייצרים EPO מסומנים גם על ידי P0-Cre, בהתאם לתכונות שלהם של פנוטיפים דמויי נוירונים שתוארו לעיל.⁸ תוצאות אלו נתמכות גם על ידי התצפית שהמקור העיקרי של EPO באריתרופואיזיס פרימיטיבי הוא תאי ציצה עצביים ועצביים.¹⁶

לעומת זאת, פיברובלסטים תושבי המדולה הפנימית של הכליה מסומנים בשושלת על ידי Wnt4-Cre,¹⁷ המדגים את ההטרוגניות האזורית של מקור פיברובלסט ב-כִּליָה. בהתפתחות הכליות, ביטוי Wnt4 נצפה בנפרונים המרכיבים ובסטרומה המדולרית.18,19 Wnt4 מווסת את ההתמיינות של תאי סטרומה מדולריים לתאי שריר חלק,²⁰ כמו גם מעבר מזנכימלי לאפיתל וטובולוגנזה.19 אכן, דלדול Wnt4 מחליש את הביטוי של אקטין שריר חלק (SMA) בתאי הסטרומה המדולריים.²⁰

בשילוב עם המקורות השונים של פיברובלסטים בקליפת הכליה ובמדולה, דווחו גם כמה הבדלים פנוטיפיים בין פיברובלסטים בקליפת המוח למדולרי. לדוגמה, בעוד שפיברובלסטים בקליפת המוח מבטאים אקטו-5'-נוקלאוטידאז (5'NT), רוב הפיברובלסטים המדולריים אינם עושים זאת.²¹ בניתוח אולטרה-סטרוקטורלי, פיברובלסטים בקליפת המוח נוטים להפגין מבנה דנדריטי לאינטראקציה עם תאים סמוכים ואילו פיברובלסטים מדולריים מכילים טיפות שומנים.7,22 מעניין, טיפות שומנים אלו מופיעות גם בפיברובלסטים בקליפת המוח של חולדה אנמית.כליות.²¹ יש צורך במחקר עתידי כדי לקבוע אם הבדלים פנוטיפיים אלה קשורים להבדלים תפקודיים בין פיברובלסטים בקליפת המוח לבין מדולרי.

2.3|פריציטים ופיברובלסטים

פריציטים הם תאי קיר המקיפים תאי אנדותל כלי דם ושולטים במיקרו-סירקולציה. באופן מסורתי, פריציטים מוגדרים בעיקר על ידי מיקומם האנטומי, המורפולוגיה שלהם וביטוי הסמן האופייני.²³ פריציטים חולקים מאפיינים משותפים עם פיברובלסטים מקומיים, כגון מקורם המזנכימלי והמורפולוגיה שלהם. פריציטים מבטאים את אותם סמנים תאיים כמו פיברובלסטים גרים, כגון PDGFR. למרות שמספר סמנים נוצלו לזיהוי פריציטים, כגון NG-2, הם אינם ספציפיים לחלוטין עבור פריציטים, ואין סמן מובהק שמבדיל לחלוטין בין פריציטים לפיברובלסטים. ואכן, יעילות המעקב של פריציטים כליות על ידי NG-2 נמוכה יחסית.24 למרות שההבדלים במיקום האנטומי בתנאים פיזיולוגיים מסייעים בחלקם בהבחנה של פריציטים מפיברובלסטים תושבי, חלק מהפיברובלסטים התושבים נמצאים גם באזור הפריווסקולרי. ("פיברובלסטים פרי-וסקולריים"), כך שההבחנה בין פריציטים לפיברובלסטים לפי לוקליזציה אנטומית אינה מספקת.

כמו פיברובלסטים, המקור של פריציטים הוא הטרוגני. בעוד שהפריציטים במערכת העצבים המרכזית ובתימוס מקורם בציצה העצבית שמקורה באקטודרם, הפריציטים בלב ובריאה נגזרים מהמזותליום.²³ בכליה, פריציטים מקורם באבות מזנכימליים חיוביים של FoxD1-.²⁵ תאי FoxD1 plus נגזרים במקור מ-Osr1-positive nephrogenic intermediate mesoderm progenitors בשלב העוברי.^26,27תאי FoxD1 פלוס משמשים כאבי אבות מזנכימליים ומתמיינים למספר סוגי תאים, כגון פריציטים, פיברובלסטים, תאי שריר חלק וסקולריים ותאי mesangial.²⁷ מעניין לציין שאוכלוסיות תאי סטרומה שסומנו בשושלת FoxD1-Cre חופפות במידה רבה לתאים המסומנים בשושלת P0-Cre, למעט במדולה הפנימית.^14,25,27זה אושר על ידי התצפית שתאי ציצה עצביים נודדים בשלב העוברי מבטאים את FoxD1,²⁸ו-P0-Cre תאים עם תווית שושלת הנכנסים לעוברכִּליָהלהביע בזמני את FoxD1.¹⁴ באופן עקבי, תאים המייצרים EPO מסומנים גם על ידי FoxD1-Cre.²⁹ לפיכך, יש חפיפה גדולה בין אוכלוסיות תאים המוגדרות כ"פיברובלסטים" ו"פריציטים", וככאלה, פריציטים ופיברובלסטים נדונו לעתים קרובות כמכלול. בסקירה זו אנו משתמשים במונח "פיברובלסטים/פריציטים" כדי להגדיר את אוכלוסיית התאים, כולל פיברובלסטים וגם פריציטים. התרומה של FoxD1 פלוס אבות מזנכימליים למאגר המיופיברובלסטים ולפיתוח פיברוזיס תידון בסעיף הבא.

למרות שהיה קשה להבחין בין פריציטים לפיברובלסטים, מחקר שנערך לאחרונה שערך scRNAseq של פיברובלסטים ותאי קיר (תאי שריר חלק ופריציטים) באיברים שרירים מאפשר לנו להבין את ההבדלים ביניהם ברמות התעתיק.³⁰ Muhl וחב' ביצעו scRNAseq של תאים שמקורם בלב עכבר, שרירי השלד, המעי הגס ושלפוחית ​​השתן. למרות שכל סוג תא מפגין הטרוגניות שעתוק תלוית איברים, זוהו 90 תת-קבוצות גנים החופפות בכל ארבעת האיברים שניתן להשתמש בהם כדי להבחין בין פריציטים לפיברובלסטים. למרות שסמני פיברובלסט נפוצים כוללים גנים רבים של ECM (למשל, Col1a1), CD34 ו-PDGFR, סמני תאי קיר כוללים את Mcam, Tagln ו-Notch3. למרות שאין סמן בודד לבדו יכול להגדיר לחלוטין כל סוג תא, השילוב של סמנים אלה מבדיל ביעילות בין פריציטים לפיברובלסטים. באופן מעניין, פריציטים מציגים לוקליזציה ספציפית לאיבר וביטוי סמן בהשוואה לפיברובלסטים. לדוגמה, למרות שפריציטים של המעי הגס ממוקמים בקודקוד של לולאות נימי תת-אפיתליאליות עם ביטוי חזק של PDGFR ו-NG-2, פריציטים שלפוחית ​​השתן נוטים לבטא SMA במקום זאת. פרופילי התעתיק המובהקים של פריציטים עשויים להסביר את ההבדלים התפקודיים של פריציטים בין איברים שונים.

3|MYOFIBROBL A ST: מוצא, פונקציה, הטרוגניות ותנאים פתולוגיים קשורים

פיברוזיס הוא הביטוי השכיח הסופי של דיסהומאוסטזיס של איברים ומוגדר כשקיעה מוגזמת של ECM עם ארכיטקטורות רקמה מעוותות. התפתחות פיברוזיס מווסתת על ידי האיזון המורכב בין סינתזת ECM לבין הפירוק שלה.31 לאחר שהתפתחה, פיברוזיס קשורה לפרוגנוזה גרועה באיברים שונים, כוללכִּליָה, ונחשב כמנבא אמין לירידה בתפקוד האיברים. בכליה, פיברוזיס מתפתח במקביל לאנמיה כלייתית ואובדן נימים פריטובולרי, שניהם סימני היכר של CKD. בפיתוח פיברוזיס, מיופיברובלסטים מופיעים דה נובו לאחר פציעה, ומתרבים ומסנתזים באופן פעיל רכיבי ECM (איור 1).

3.1|מקורם של מיופיברובלסטים

במהלך העשור האחרון, הוצעו מספר מקורות סלולריים כמועמדים לאבות מיופיברובלסטים. מחקרים גילו שרוב המיופיברובלסטים מקורם בפיברובלסטים מקומיים, הן ב-כִּליָהואיברים אחרים (למשל, לב).^14,32,33בתוך הכִּליָה, P0-Cre פיברובלסטים תושבים עם תווית שושלת מתבדלים למיופיברובלסטים לאחר פציעה, עם אובדן נלווה של ייצור EPO.¹⁴ באופן עקבי, myofibroblasts בפצועיםכליותהם גם מתויגים בשושלת על ידי FoxD1-Cre.²⁵ תוצאות אלו אושרו על ידי מחקר שלאחר מכן באמצעות עכברי EPO-Cre תחת חסימה חד-צדדית של השופכה (UUO), מודל ניסיוני עיקרי in vivo של פיברוזיס כליות.⁹ ב-myofibroblasts, איתות NFκB ו-Smad מופעלים, ואלה עומדים בבסיס המעבר הפנוטיפי של myofibroblasts וירידה בייצור EPO. באופן מעניין, ייצור EPO ב-myofibroblasts משוחזר על ידי מתן חומרים נוירו-פרוטקטיביים, כגון דקסמתזון ונוירוטרופינים,¹⁴ או היפוך UUO,⁹ המדגים את הפלסטיות התפקודית הגבוהה של מיופיברובלסטים.

שלא כמו מיופיברובלסטים בקליפת המוח, מיופיברובלסטים מדולריים מקורם ב-Wnt4 פלוס פיברובלסטים תושבי המדולה הפנימית.¹⁷ ניתוח שעתוק של תא בודד לאחרונה תומך גם באפשרות שפיברובלסטים בקליפת המוח והמדולרי (מיו) עשויים להפגין פנוטיפים שונים. snRNAseq על murineכִּליָהמודלים של פציעה חשפו שתת-אוכלוסיות פיברובלסטים מחולקות לארבע קבוצות בהתאם לאתר המקור שלהן בקליפת המוח או המדולרי.³⁴ מעניין לציין שפיברובלסטים בקליפת המוח מבטאים באופן חולף את Acta2 ו-Col1a1 רק בשלב החריף של IRI ואילו פיברובלסטים מדולריים מציגים ביטוי מתמשך של סמני מיופיברובלסט אלו, אפילו ב-6 שבועות לאחר IRI. הבדלים פנוטיפיים אלה בין מיופיברובלסטים בקליפת המוח לבין מיופיברובלסטים מדולריים עשויים לנבוע מהמקורות השונים של פיברובלסטים, כפי שתואר לעיל.

מחקר מקיף שפורסם לאחרונה סיפק הוכחות משכנעות לכך שרוב המיופיברובלסטים מקורם בפיברובלסטים/פריציטים מקומיים לא רק בכליות עכברים אלא גם בכליות אנושיות. Kuppe וחב' ניתחו פיברוטיים של אדם ועכברכליותעל ידי scRNAseq עם רזולוציה גבוהה מאוד.35 רוב המיופיברובלסטים מובחנים מפיברובלסטים ופריציטים, עם תרומה מינורית מסוגי תאים אחרים כגון תאים פרוקסימליים פרוקסימליים מופרדים. במחקר זה, מיופיברובלסטים הוגדרו כתאים המבטאים הכי הרבה גנים של ECM, במקום ביטוי SMA, והתגלה שמיופיברובלסטים מסומנים בצורה יעילה יותר על ידי פריוסטין (Postn). מעניין לציין שמעבר מפיברובלסט/פריציט למיופיברובלסט מאופיין בביטוי מוקדם של גנים הקשורים להפסקת מחזור התא, כגון חלבון אקטיבטור -1 (AP1). הביטוי של AP1 מלווה בביטוי של אינטגרינים ו-TGF, שניהם גורמים עיקריים של פיברוזיס כליות. הם גם זיהו את Nkd2 כסמן הסלקטיבי למיופיברובלסטים בוגרים. ביטוי Nkd2 נמצא בקורלציה חיובית עם ביטוי Postn ו-ECM, אך שלילי עם גנים הקשורים לפיברובלסטים ופריציטים. נוק-דאון של Nkd2 פועלכִּליָהאורגנואידים דיכאו את ביטוי Col1a1, מה שמרמז כי Nkd2 עשוי למלא תפקיד בהתפתחות פיברוזיס. למרות שדרוש אימות נוסף in vivo, קיימת אפשרות ש-Nkd2 יכול לשמש כיעד טיפולי לפיברוזיס כלייתי.

למרות שתרומת הפיברובלסטים/פריציטים למאגר המיופיברובלסטים היא המשמעותית ביותר, דווחה גם תרומתם של פיברוציטים. פיברוציטים הם תאים שמקורם במח עצם עם סמנים המטופואטיים חיוביים, המייצרים קולגן ורכיבי ECM. פיברוציטים נודדים לתוךכִּליָהכתאים מייצרי קולגן מובחנים מראש ותורמים להתפתחות פיברוזיס בכליה.³⁶ מחקרים מוקדמים דיווחו על תוצאות סותרות בנוגע לתרומה הכוללת של פיברוציטים למיופיברובלסטים,^24,37בעיקר בשל ההבדלים באמינות של כתבים מהונדסים. מחקרים עדכניים המשתמשים במודלים של פרביוזיס ו-scRNAseq הוכיחו שרוב המיופיברובלסטים נגזרים מפיברובלסטים/פריציטים, אך לא מתאי שושלת המטופואטיים.³⁸ scRNAseq של האדםכִּליָהגם חשף תוצאות דומות,³⁵ מה שמצביע על כך שתרומת הפיברוציטים למאגר המיופיברובלסטים קטנה יחסית בהשוואה לפיברובלסטים/פריציטים.

מחקר קודם טען שתאי אפיתל מתמיינים למיופיברובלסטים על ידי מעבר אפיתל-למזנכימלי (EMT),³⁹ מבוסס בעיקר על נקודת מוצא של סמנים אפיתל ומזנכימליים. מחקרים מפורטים על מעקב אחר גורל התא הטילו ספק בתרומה העיקרית של EMT in vivo, עם זאת, והוכיחו כי EMT מהווה רק חלק קטן ממאגר המיופיברובלסטים אם בכלל.^24,25,35מעבר אנדותל-למזנכימלי (EndoMT) הוא תהליך ביולוגי נוסף שבו תאי אנדותל מתמיינים ל-myofibroblasts. למרות שכמה מחקרים גילו ש-EndoMT תורם לפיברוזיס בכליות,^40-42נראה כי התרומה של EndoMT לאוכלוסיות המיופיברובלסט הכוללות פחות משמעותית מאשר פיברובלסטים/פריציטים או פיברוציטים.^24,35

3.2|הגדרה מחדש של מיופיברובלסטים

באופן מסורתי, מיופיברובלסטים הוגדרו כתאים בעלי מאפיינים של פיברובלסטים ותאי שריר חלק ומבטאים חלבון מתכווץ SMA .1 עם זאת, מספר מחקרים העלו כי בנוסף לפיברובלסטים, מיופיברובלסטים גם מציגים הטרוגניות גבוהה, ו-SMA הוא סמן לא עקבי ל-myofibroblasts. . כפי שתואר קודם לכן, בניתוח scRNAseq שנערך לאחרונה של fibroticכליות, myofibroblasts הוגדרו כתאים עם הכי הרבה ביטוי ECM, ו-Postn נוצל לזיהוי myofibroblasts במקום SMA.³⁵ואכן, Sun וחב' השתמשו בעכברי Col-EGF/SMA-RFP dual reporter וחשפו שרק חלק קטן מהתאים המייצרים קולגן מבטאים SMA במודלים של פיברוזיס של הכליות והריאות.⁴³ מחקר אחר גם הצביע על כך שתאי שריר חלקים ופריציטים מבטאים רמות גבוהות יותר של SMA מאשר my-fibroblasts, מה שהופך את SMA לסמן לא עקבי עבור myofibroblasts, לפחות בפיברוזיס ריאות.⁴⁴ מעניין לציין כי מיופיברובלסטים מחולקים לחמישה אשכולות על ידי scRNAseq, וניתוח פסאודו-זמן מצביע על כך שכל אחד מהם מייצג שלבים שונים של המעבר שלי-פיברובלסט מפיברובלסטים.35 יש צורך במחקר אימות נוסף כדי לאשר את ההטרוגניות התפקודית של תת-סוגי פיברובלסטים שונים.

3.3|הטרוגניות תפקודית של (מיו) פיברובלסטים

בתנאים פתולוגיים, פיברובלסטים רוכשים פנוטיפים ברורים וממלאים תפקידים מגוונים בהתאם למיקרו-סביבה ולהקשר הקליני שלהם. בריאה, דווח על הטרוגניות תפקודית גבוהה של פיברובלסטים מקומיים, אשר תורמת לפיברוזיס ריאות באמצעות מנגנונים שונים.44-46 יש תת-אוכלוסיות ברורות של פיברובלסטים ריאות השוכנים במיקומים אנטומיים שונים (פיברובלסטים מכתשי, אדוונטציאלי ופריברונצ'יאלי), וכל אחד מהם מציג פרופילי שעתוק שונים ב- scRNAseq.44 ביניהם, תת-אוכלוסיית פיברובלסטים ייחודית עם ייצור גבוה של ECM זוהתה על ידי ביטוי של חזרה של קולגן משולש הליקס המכיל 1 (Cthrc1). הפיברובלסטים החיוביים של Cthrc1- מובחנים מפיברובלסטים מכתשיים והם נצפים בעיקר במוקדים הפיברובלסטיים, האתר המרכזי של הפיברוגנזה. הם מפגינים יכולת נדידה וקולוניזציה גבוהה לאחר ההעברה תוך קנה הנשימה, דבר המצביע על התפקודים הפתולוגיים שלהם. תוצאות אלו מצביעות על כך שתת-אוכלוסיות שונות של פיברובלסטים תופסות מיקומים אנטומיים שונים בריאה, ו-Cthrc1 מסמן פיברובלסטים מזיקים עם ביטוי ECM גבוה. מחקר אחר גילה ששינויים פנוטיפיים של מיופיברובלסטים מיושנים בריאה עומדים בבסיס היכולת הפגומה של רזולוציה של פיברוזיס ריאות אצל אנשים מבוגרים.47 מיופיברובלסטים מבוגרים מציגים ביטוי גבוה יותר של NADPH-oxidase 4 (Nox4) ואילו ל-NFE2-גורם 2 (Nrf2) ), שהוא הרגולטור העיקרי של תגובת הלחץ האנטי-אוקסידטיבי, מווסת למטה. חוסר איזון החיזור בין Nox4 ל- Nrf2 גורם לרכישת פנוטיפים אנטי-אפופטוטיים וזקנים בפיברובלסטים מיושנים, מה שמקדם פיברוזיס מתמשך. ואכן, חסימה in vivo של פעילות Nox4 על ידי siRNA או מעכב מולקולה קטנה משחזרת את היכולת של רזולוציית פיברוזיס בעכברים מבוגרים, עם ירידה בפנוטיפים מזדקנים ואנטי-אפופטוזיס ב-myofibroblasts.

פנוטיפ ייחודי של פיברובלסט מדווח גם במחלה הקשורה ל-IgG4-(IgG4-RD), המאופיינת בחדירת תאי פלזמה חיובית ל-IgG4- ופיברוזיס סטווריפורמי.48 למרות שרוב החולים עם IgG4-RD מגיבים היטב לטיפול בגלוקוקורטיקואידים, הרציונל הבסיסי לתגובה הטיפולית לא היה ברור. גילינו שהביטוי של הקולטן לגלוקוקורטיקואיד (GR) מווסת באופן משמעותי באיברים הפגועים של חולים, כגון בלוטות תת-הלסת, רטרופריטונאום וכליות.49 מעניין לציין ש-GR מתבטא בעיקר על פיברובלסטים וכן על לויקוציטים של האיבר הפגוע, מה שמסביר בחלקו מדוע מתן גלוקוקורטיקואידים מחליש את התפתחות הפיברוזיס ב-IgG4-RD. למרות שהתרומה של פיברובלסטים לפיתוח IgG4-RD צריכה לקבל תוקף נוסף, תוצאות אלו מדגימות את ההטרוגניות התפקודית של פיברובלסטים בהתפתחות מצבים פתולוגיים שונים.

3.4|אנמיה כלייתית ואובדן נימים פריטובולרי: שני מצבים פתולוגיים שכיחים המונעים על ידי הפרעה בתפקוד הפיברובלסטים בכליה

פיברוזיס הוא המסלול השכיח האחרון של CKD, ללא קשר לאטיולוגיה הבסיסית שלו. ואכן, פיברוזיס בקליפת הכליה נחשבת למנבא ההיסטולוגי הטוב ביותר של תפקוד כליות ב-CKD.50. הסיבה לכך היא חלקית כי פיברוזיס קשורה קשר הדוק למצבים פתולוגיים אחרים הנפוצים ב-CKD, כגון אנמיה כלייתית ואובדן נימים פריטובולרי. מספר גורמים מעוררים מעבר פיברובלסט למיופיברובלסטים והתפתחות פיברוזיס בכליה, כגון פגיעה בצינורית פרוקסימלית.51,52 כפי שתואר בפרק הקודם, פיברובלסטים/פריציטים המייצרים EPO מתמיינים למיופיברובלסטים בתגובה לפציעה, עם אובדן ייצור EPO נלווה. .14,29 ייצור EPO מושרה במצב היפוקסי ומווסת על ידי גורמים המונעים היפוקסיה (HIFs). בתנאים נורמוקסיים, HIFs עוברים הידרוקסילציה מהירה על ידי חלבונים המכילים תחום HIF-prolyl hydroxylase (PHDs) המקדמים את הפירוק הפרוטאזומלי של HIFs. בתוך הכִּליָה, הפעלת HIF על ידי Ph.D. עיכוב משחזר את ייצור ה-EPO ב-myofibroblasts, וציר ה-PHD2-HIF2 הוא מפל הרגולציה העיקרי.53 באופן מעניין, ייצור EPO בפיברובלסטים המסומנים בשושלת FoxD1-Cre מווסת על ידי ביטול ההפעלה של PHD2, אך לא על ידי ביטול ההפעלה של PHD1 או PHD3, מה שמרמז שייצור EPO בתאים אלה מווסת על ידי מנגנונים ייחודיים.⁵³ למרות שהטיפול הסטנדרטי הנוכחי באנמיה כלייתית הוא מתן EPO אנושי רקומביננטי (rhEPO), מתן rhEPO אקסוגני קשור למספר תופעות לוואי, כגון יתר לחץ דם ואירועים פקקת.^54,55על מנת להתגבר על החסרונות הללו של rhEPO, Ph.D. מעכבים המגבירים גנים הנגרמות היפוקסיה, כולל EPO, פותחו ונוצלו לטיפול באנמיה כלייתית.⁵⁶ אמנם נדרשים מחקרים נוספים לגבי ההשפעות השליליות ארוכות הטווח של Ph.D. מעכבים, המיקוד למיופיברובלסטים כדי לגרום לייצור EPO אנדוגני יכולה להיות אסטרטגיה טיפולית מבטיחה וטובה לאנמיה כלייתית ב-CKD.

אובדן נימי פריטבולרי ונדיר נימים מתפתחים גם יחד עם פיברוזיס, והשינוי התפקודי של פריציטים עומד בבסיס ביטויים אלה.^57-59בתוך הכִּליָה, נימים פריטובולריים מוקפים בפריציטים, התומכים במבנה הנימים ותפקודם בתנאים פיזיולוגיים. לאחר הפציעה, פריציטים אלו מתנתקים מנימים פריטובולריים ונודדים לצינוריות פגועות.^53,60 בתהליך זה, נימים peritubular מאבדים את התמיכה המכנית של pericytes, מה שמוביל|201 ARAI et al. רגרסיה קפילרית ונדירות.^57,58במודל UUO, אפופטוזיס של תאי אנדותל ואובדן נימים פריטובולרי מתפתחים בהתאמה עם התקדמות הפיברוזיס.⁶¹ בנוסף, הנימים הפריטבולריים של פיברוטיקכליותמציגים חריגות מורפולוגיות, כגון היווצרות caveolae ו-vacuolization, והחדירות שלהן מוגברת, כפי שבא לידי ביטוי בהגדלת האקסטראוסציה בהדמיה מיקרוסקופית דו-פוטונים.⁶² ואכן, הירידה באספקת הדם הכלייתית הנגרמת על ידי אובדן נימים פריטובולרי ונדירות מזוהה במודלים של עכברי CKD על ידי טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת מוגברת.63 יחד עם התפתחות פיברוזיס ומחסור יחסי ב-EPO, אובדן נימי פריטובולרי תורם לירידה באספקת החמצן ל- אבובות כליות ואינטרסטיטיום, אשר מחמירות את הפגיעה הכלייתית ויוצרות מעגל קסמים של התקדמות CKD.⁶⁴

4|הטרוגניות תפקודית של פיברובלסטים מעבר לפיברוזיס

מחקרים אחרונים המשתמשים בניתוח scRNAseq חשפו את ההטרוגניות הפנוטיפית של פיברובלסטים בתנאים פתולוגיים באיברים שונים, וכתוצאה מכך הדגימו את הפונקציות הרב-תכליתיות של פיברובלסטים. פיברובלסטים לא רק מפעילים השפעות מזיקות אלא יש להם גם פונקציות מועילות באופן תלוי הקשר. בחלק זה, נסקור את ההבנה הנוכחית של הפונקציות המגוונות של פיברובלסטים, מלבד התפתחות פיברוזיס.

4.1|פונקציות דלקתיות

פיברובלסטים מקדמים דלקת רקמות במספר הקשרים.⁶⁵ לדוגמה, במודל העכבר של אוטם שריר הלב, פיברובלסטים גרים לא רק פיברוזיס לבבי אלא גם דלקת מקומית להידרדרות בתפקוד הלב. לאחר אוטם שריר הלב, פיברובלסטים לבביים באזור הפיברוטי מגבירים את הוויסות של Sox9,^66,67שהוא גורם שעתוק שאחראי על שקיעת ECM בכונדרוציטים.⁶⁸ המחיקה הספציפית לפיברובלסט של Sox9 in vivo מקלה על דלקת לב ופיברוזיס בשלב הכרוני לאחר אוטם שריר הלב, מה שמוביל לשיפור בתפקוד החדר השמאלי והצטלקות שריר הלב. RNAseq של רקמת צלקת לב גילתה שמחיקת Sox9 בפיברובלסטים מווסתת למטה גנים פרו-דלקתיים, כגון IL-6, כמו גם גנים של קולגן. ChIPseq על כונדרוציטים של יונקים גילה שחלק מהגנים הפרו-דלקתיים הללו קשורים ישירות על ידי Sox9 בנגע המשפר. 69 ביחד, למרות שיש לחקור עוד יותר את האותות במעלה הזרם לוויסות עלייה של SOX9, ממצאים אלה מראים ש- Sox9 בפיברובלסטים של הלב מווסת הן פיברוזיס והן דלקת לאחר אוטם שריר הלב, ויכול להיחשב כמטרה טיפולית חדשה.

הפנוטיפים הפרו-דלקתיים של תת-אוכלוסיות פיברובלסטים נחקרו באופן אינטנסיבי גם בדלקת מפרקים שגרונית (RA). Croft וחב' חקרו מודלים של עכברים של דלקת מפרקים נפתרת ומתמשכת וחשפו כי פיברובלסטים חיוביים להפעלת פיברובלסט חלבון-a (FAPa) מצטברים במפרק הדלקתי.70 המחיקה של FAPa פלוס פיברובלסטים מחלישה דלקת מקומית ועיוות מפרק, מה שמרמז על תפקודיהם הפתולוגיים. מעניין לציין ש-FAPA פלוס פיברובלסטים מחולקים לשתי תת-אוכלוסיות נפרדות לפי scRNAseq: FAPa פלוס THY1 פלוס פיברובלסטים ו-FAPa פלוס פיברובלסטים THY1-. FAPa פלוס THY1 פלוס פיברובלסטים ממוקמים בשכבת המשנה הסינוביאלית ואילו פיברובלסטים FAPa פלוס THY1- נמצאים בשכבת הרירית הסינוביאלית. בנוסף להבדל המרחבי שלהם, פיברובלסטים אלה נבדלים מבחינה תפקודית; ההעברה המאמצת של FAPa פלוס THY1 פלוס פיברובלסטים לתוך המפרק גורמת לדלקת מקומית חמורה עם חדירת לויקוציטים מוגברת ואילו העברה של FAPa פלוס פיברובלסטים THY1- גורמת לפעילות מוגברת של אוסטאוקלסטים ולעיוות מפרק מבלי להחמיר דלקת. פיברובלסטים שונים תפקודית אלה נצפים גם במפרקים אנושיים עם RA. ואכן, FAPa פלוס THY1 פלוס פיברובלסטים נמצאים בשפע יותר במפרקים של חולי RA מאשר חולי אוסטאוארטריטיס (OA),70 מה שממחיש את החתימה הדלקתית שלהם. מחקר אחר חקר רקמות סינוביאליות אנושיות על ידי RNAseq ו-scRNA-seq בתפזורת וזיהה שלוש תת-קבוצות עיקריות של פיברובלסטים עם ביטוי חלבון משטח מובהק.⁷¹ ביניהם, פיברובלסטים Pdpn פלוס THY1 פלוס CD34− מתרחבים באזור הפריווסקולרי של הסינוביום המודלק ומתואמים באופן חיובי עם חומרת הדלקת הסינוביאלית ב-RA. פיברובלסטים Pdpn פלוס THY1 פלוס CD34− מציגים פרופילים גבוהים של נדידה ושגשוג במבחנה. מעניין שרוב הפיברובלסטים מסוג Pdpn פלוס THY1 פלוס CD34- מבטאים קדרין-11, העומד בבסיס המאפיינים הפתולוגיים של פיברובלסטים סינוביאליים של עכברים.72 נחקר גם המנגנון הבסיסי לוויסות פיברובלסטים פרו-דלקתיים ב-RA. Wei וחב' חשפו כי איתות Notch3 שולט בהתמיינות של THY1 פלוס פיברובלסטים מושכים העומדים בבסיס הדלקת הסינוביאלית של RA.73 דלדול גנטי או חסימה תרופתית של איתות Notch3 מחלישים דלקת מפרקים ושחיקת עצם במודל העכבר של RA. בסך הכל, ממצאים אלה מצביעים על כך שהכוונה ספציפית לפיברובלסטים דלקתיים יכולה להיות אסטרטגיה טיפולית מבטיחה ב-RA.

פיברובלסטים פועלים גם כתאי חיסון מולדים. פריציטים/פיברובלסטים מבטאים מספר קולטנים לזיהוי דפוסים, כגון קולטנים דמויי Toll-like (TLR), ומקדמים את המפל הדלקתי המקומי. Leaf וחב' חשפו שפריציטים כליות חשים דפוסים מולקולריים הקשורים לנזק (DAMPs) המשתחררים מתאי פציעה באופן תלוי TLR ו-MyD.74 באותו אופן כמו תאי חיסון קלאסיים, פריציטים מפעילים את הדלקת NLRP3, מה שמוביל להפרשת IL-1 ו-IL-18. ממצאים אלו מוכיחים שהלוקליזציה הבין-סטילית של פריציטים/פיברובלסטים מאפשרת להם לחוש מיד בפציעה ראשונית ולתפקד כמפיץ של דלקת מקומית. כמנגנון נוסף להפצת דלקת מקומית, תצפית מיקרוסקופית תוך-חיית גילתה שפריציטים משנים את המורפולוגיה שלהם במהלך הדלקת ויוצרים פערים בין פריציטים סמוכים, מה שמקל על מעבר נויטרופילים וזחילה.⁷⁵

פיברובלסטים תורמים גם ליצירת TLTs בכליות פצועות מיושנות.4,76 על ידי הפרשת כימוקינים הומיאוסטטיים כגון CXCL13 ו- CCL19, פיברובלסטים השוכנים בתוך TLTs מגייסים 202|ARAI et al. לימפוציטים ולספק פיגום תפקודי עבור TLT, כפי שנדון בסעיף הבא.

4.2|ויסות התקדמות הגידול

במיקרו-סביבה של הגידול (TME), פיברובלסטים הקשורים לסרטן (CAFs) מהווים את המרכיב הסלולרי הגדול ביותר בסטרומה של TME וממלאים תפקיד חשוב בפתוגנזה של סרטן.⁷⁷ CAFs מקדמים את התקדמות הסרטן באמצעות מנגנונים מרובים, כגון שיפוץ ECM והפרשת גורמי גדילה וציטוקינים פרו-דלקתיים. CAFs גם מסדירים את הגיוס של תאי מערכת החיסון ומדכאים את התגובה החיסונית האנטי-גידולית.^77,78CAFs מפגינים מגוון תפקודי ואזורי גבוה בהתאם לאיברים השוכנים שלהם. לדוגמה, באדנוקרצינומה דרכית לבלב (PDAC), מזוהים שני תת-סוגים ברורים של CAFs: תת-קבוצה אחת של CAFs שוכנת בסמוך לתאי גידול עם ביטוי מוגבר של SMA ואילו תת-הקבוצה השנייה ממוקמת רחוק מתאי הגידול ומפרישה ציטוקינים דלקתיים, כגון IL-6.⁷⁹בסרטן השד, CAFs מסווגים לשלוש תת-אוכלוסיות לפי מקורותיהן, שלכל אחת מהן יכולות פרוגנוסטיות עצמאיות.80 מעניין שמחקרים העלו כי תת-אוכלוסיות הטרוגניות אלו של CAFs יכולות להיות מחולקות לשני תת-סוגים נפרדים מבחינה תפקודית: CAFs מקדמי סרטן (pCAFs) ) ו-CAFs המונעים סרטן (rCAFs).77,81 קיומם של rCAFs הוצע על ידי התצפית שהדלדול הגנטי או התערבות תפקודית של CAFs מתרבים אינם מעכבים, אלא מעודדים, את התקדמות הסרטן.^82-84למרות שהסמן הספציפי ל-rCAFs עדיין לא נקבע, מחקר שנערך לאחרונה גילה ש-rCAFs ב-PDAC מאופיין בביטוי של Mifflin,⁸⁵אשר זוהה לראשונה כחלבון מעוגן ב-glycosylphosphatidylinositol המסמן ספציפית תאי סטרומה/גזע mesenchymal.86 בחולים עם PDAC, ההסתננות של Meflin פלוס CAFs נמצאת בקורלציה חיובית עם תוצאות חיוביות. בניתוח של מודל עכבר xenograft תת עורי, העברה של Meflin המושרה על ידי lentivirus לתאי סטרומה של הגידול מוחלשת את צמיחת הגידול ואת חדירת SMA פלוס CAF. הסטרומה של הגידולים של עכברי נוקאאוט מיפלין מציגה מבני קולגן ישרים ורחבים יותר, ורמת הביטוי של מיפלין ב-PDAC אנושי קשורה למבני קולגן שהשתנו. בהתחשב בכך שהתקדמות הסרטן קשורה קשר הדוק לעיצוב מחדש של מטריקס,87 ממצאים אלה מראים כי Meflin פלוס CAFs מדכאים את התקדמות הגידול על ידי עיכוב שיפוץ קולגן. למרות שדרוש מחקר נוסף על המנגנון הבסיסי של פיתוח Meflin פלוס CAF, הרגולציה של rCAFs עשויה להיות אסטרטגיה טיפולית חדשה בטיפול אנטי-סרטני.

4.3|פונקציות התחדשות

למרות שההשפעות המזיקות של פיברובלסטים משכו עניין מחקרי כפי שתואר בסעיף הקודם, פיברובלסטים גם מקדמים התחדשות רקמות מפציעה. אכן, עיכוב תפקוד הפיברובלסט אינו מוביל בהכרח לתוצאה טובה יותר. לדוגמה, מחיקת Postn פלוס myofibroblasts בלב מעכבת היווצרות צלקת מתאימה, מה שמוביל לקרע בחדר ותמותה גבוהה יותר.³²

מחקרים אחרונים גילו כי בפציעה ובתיקון רקמות, תת-אוכלוסיה ספציפית של פיברובלסטים מפעילה השפעות רגנרטיביות במספר מנגנונים. בעור, פיברובלסטים מחולקים לשתי קטגוריות לפי לוקליזציה: פיברובלסטים פפילריים בדרמיס העליון ופיברובלסטים רשתיים בדרמיס התחתון.88 לאחר הפציעה, פיברובלסטים רשתיים מגוייסים לנגע ​​לפני נדידת פיברובלסט פפילרית ומפרישים קולגנים האחראים על צלקת. . לעומת זאת, פיברובלסטים פפילריים, אשר מגויסים בנקודת זמן מאוחרת יותר לאחר הפציעה, תורמים להתחדשות זקיקי השיער. ממצאים אלו מצביעים על כך שתתי-סוגי פיברובלסטים שונים מבחינה מרחבית ותפקודית תורמים להתחדשות פצעי העור באופן מתואם. ניתוח של scRNAseq לאחרונה גילה גם כי פיברובלסטים בפצעי עור מפגינים הטרוגניות גבוהה, וניתן לסווג אותם לשנים עשר תת-צבירים.89 ניתוח מהירות Pseudotime ו-RNA הוכיח שחלק מהצבירים הללו מייצגים מצבי התמיינות כלפי פנוטיפים מתכווצים בעוד שאחרים מקבלים פנוטיפים רגנרטיביים. מעניין לציין כי זוהתה תת-אוכלוסייה ייחודית של פיברובלסטים בעור המתמחה בתיקון רקמות מפציעה. לאחר פגיעה בעור, פיברובלסטים השוכנים בפשיה, שהוא מבנה קרומי ג'לטיני המפריד בין העור למבנה הקשיח שמתחתיו, עולים אל פני העור.90 בתגובה לפציעות עמוקות, פיברובלסטים של פאשיה מכוונים את המטריצה ​​המרוכבת הסובבת שלהם לתוך הפצע ויוצרים מטריצה ​​זמנית. רוב ה"פאשיות פיברובלסטים" הללו מסומנים על ידי 1 (En1), שזוהה לראשונה כסמן של תאי שושלת פיברוגניים בעור הגב של עכברים.⁹¹ שפע הפיברובלסטים של fascia בפצע נמצא בקורלציה חיובית עם עומק הצלקת. ואכן, הדלדול הגנטי של פיברובלסטים של fascia מונע היגוי מטריקס לתוך הפצע ומוביל להצטלקות לקויה. השתלת סרט אטום מתחת לעור מונעת נדידת פיברובלסט של fascia ומביאה לצלקת פתוחה. כמו כן דווח על תרומתה של תת-קבוצה ייחודית נוספת של פיברובלסטים, תאי אדיפוציטים מבשר (APS); APs מקיימים אינטראקציה עם CD301b פלוס מקרופאגים ותורמים להתחדשות העור לאחר פציעה.⁹² בסך הכל, ממצאים אלה מצביעים על כך שתת-אוכלוסיות הטרוגניות של פיברובלסטים עם פונקציות מיוחדות תורמות להתחדשות העור לאחר פציעה.

"פיברובלסטים רגנרטיביים" אלה נצפים גם בכִּליָה. תצפית אולטרה-מיקרוסקופית גילתה כי מיופיברובלסטים נודדים סביב צינוריות פגועות ותומכים בהן באופן מבני במודל הפגיעה הכלייתית, מה שמרמז כי מיופיברובלסטים עשויים להקל על התחדשות תאי צינורית.93 על ידי שימוש בעכברי P0-Cre: DTR, בהם מתן רעלן דיפתריה (DT) מדלדל את P0-ביצירת פיברובלסטים תושבי הכליה המסומנים בשושלת, גילינו שדלדול הפיברובלסט בשלב המוקדם של הפציעה מחליש את התחדשות הצינורית ומחמיר את הפגיעה הכלייתית.⁹⁴ מעניין, בתגובה לפציעה, פיברובלסטים מגבירים את הביטוי של retinaldehyde dehydrogenase 2 (RALDH2), האנזים המגביל את הקצב של סינתזת חומצה רטינואית. קולטן חומצה רטינואית (RAR) מתבטא בתאים צינוריים פרוקסימליים, ו-B-crystallin, התוצר של גנים מטרה של RAR, מווסת באופן בלעדי בתאים צינוריים פרוקסימליים פצועים. אגוניסט הפוך של RARs מחליש את התפשטות תאי הצינור במבחנה. בהתחשב בכך החומצה הרטינואית המופרשת על ידי המזנכימה הסטרומלית בעובריתכליותחיוני להתפתחות ניצן השופכן,^95,96ממצאים אלו מצביעים על כך ש-RALDH2 פלוס מיופיברובלסטים עשויים למלא תפקיד חשוב בהתחדשות של צינוריות פרוקסימליות פגועות באמצעות איתות חומצה רטינואית בשלב המוקדם של הפציעה.