חלק 1: פעילות אנטי-סרטנית של צ'לקונים טבעיים וסינטטיים

למידע נוסף. איש קשרtina.xiang@wecistanche.com

תַקצִיר: סרטןהוא מצב הנגרם על ידי מנגנונים רבים (גנטיים, חיסוניים, חמצון ודלקתיים).טיפול אנטי סרטןמטרתו להרוס או לעצור את הצמיחה של תאים סרטניים. התנגדות לטיפול היא הגורם המוביל לחוסר היעילות של הטיפולים הסטנדרטיים הנוכחיים. טיפולים ממוקדים הם היעילים ביותר בשל המספר הנמוך של תופעות הלוואי וההתנגדות הנמוכה. בין התרכובות הטבעיות של מולקולה קטנה, פלבנואידים מעניינים במיוחד עבור זיהוי חומרים אנטי סרטניים חדשים. הכלקונים הם מבשרים לכל הפלבנואידים ויש להם פעילויות ביולוגיות רבות. הפעילות האנטי-סרטנית של הכלקונים נובעת מהיכולת של תרכובות אלו לפעול על מטרות רבות. צ'לקונים טבעיים, כגון ליקוצ'לקונים, קסנטהומול (XN), פנדוראט (PA) ולונקוקארפין, נחקרו ואופסו רבות. שינוי המבנה הבסיסי של הכלקונים על מנת לקבל תרכובות בעלות תכונות ציטוטוקסיות מעולות בוצע על ידי אפנון של השאריות הארומטיות, החלפת שאריות ארומטיות בהטרוציקלים והשגת מולקולות היברידיות. התקבל מספר עצום של נגזרות של כלקון עם שאריות כגון דיאריל אתר, סולפונאמיד ואמין, ונוכחותן חיובית לפעילות אנטי סרטנית. שינוי של קבוצת האמינו במבנה של צ'לקונים אמינו הוא תמיד חיובי עבוראנטי גידולפעילות. זו הסיבה שהתקבלו מולקולות היברידיות של צ'לקונים עם הטרוציקלים חנקן שונים במולקולה. מתוך אלו, לאזולים (אימידאזול, אוקסאזול, טטראזול, תיאזול, 1,2,3-טריאזול ו-1,2,4-טריאזול) יש חשיבות מיוחדת לזיהוי חומרים אנטי-סרטניים חדשים.

מילות מפתח: chalkone; אזול;סרטן;קו תאים; פעילות ביולוגית; אינטראקציה של ליגנד-קולטן

flavonoids anti cancer

לחץ כדי ללמוד עוד אפקטים של מוצרים

1. הקדמה

סרטןהיא בעיה משמעותית בבריאות הציבור שיש לה מספר קטן של טיפולים יעילים, פרוגנוזה גרועה ושיעור תמותה גבוה [1]. תאים סרטניים רבים מסתגלים מטבולית לאפקט ורבורג, הכולל ספיגת גלוקוז וחומרי תזונה מוגברת וייצור חומצת חלב, גם בתנאים אירוביים. [2] ידע מדויק על האפידמיולוגיה של הסרטן מספק מידע חיוני על גורמים ומגמות אפשריות של האוכלוסייה למחלה זו, ומאפשר התערבות חיובית לזיהוי שיטות יעילות למניעה, ניטור ואבחון. [3] האטיולוגיה של סרטן מושפעת מגורמים תורשתיים וסביבתיים. לדוגמה, מידע גנטי שונה נצפה בתאי סרטן |4]. מסיבה זו, מספר רב של מחקרים אפיינו שינויים גנומיים בסרטן ממסלולי איתות יוצרי תאים אונקוגניים אל ספקטרום המוטציות בתתי סוגים שונים של סרטן [5]. בנוסף, בתהליכים אונקוגניים, מסלולים דלקתיים וחיסונים נמצאים בקורלציה עם רכיבים תאיים והומורליים רבים ויש להם מסלולי איתות משותפים. במקרה של דלקת הקשורה למחלות גידול, תהליכים ארוכים וחמורים. [6] ידוע כי דלקת וסרטן נמצאים בקורלציה בשני אופנים: המסלול הפנימי והמסלול החיצוני. המסלול החיצוני מופעל על ידי התחלת תהליכים אונקולוגיים על ידידַלֶקֶת. במקרה של המסלול הפנימי, חסרים סומטיים ומוטציות גנטיות מפעילים מסלולי איתות וגורמים לעלייה בתגובה הדלקתית [7]. גורם מכריע נוסף לסרטן הוא הפעלת מערכת החיסון, אשר נמצא בקורלציה עם מסלולים מטבוליים רבים בתאי סרטן [8]. בחולי סרטן, מספר רב של תאים משתחררים למחזור הדם מדי יום. לצורך היווצרות גרורות, תאים סרטניים עוזבים את האתר הראשוני, נכנסים לזרם הדם, נתונים ללחץ כלי דם, מסתגלים לסביבה התאית המשנית ומפריעים לתאי החיסון 9]. התפשטות תאים סרטניים נגרמת גם מהצטברות מיני חמצן, בעלי יכולת לעוות מקרומולקולות ולגרום למוות של תאים [10]. מיני חמצן וחנקן תגובתיים (ROS/RNS) מיוצרים על ידי תאים דלקתיים ותאי אפיתל. ROS/RNS גורמים לדנטורציה של DNA באיברים בלחץ התהליך הדלקתי וגורמים להתחלת קרצינוגנזה. נזק ל-DNA, במיוחד ל-8-oxo-7,8-dihydro-2'-deoxyguanosin ו-8-nitroguanidine, הוכח כמנגנון מולקולרי לסרטן[ 11]. אפופטוזיס של תאים או מוות תאי מתוכנת היא אחת השיטות החיוניות לוויסות הקרצינוגנזה והיא התכווצות של התא, הגורמת לפרגמנטציה של DNA ועיבוי כרומטין [12,13]. ישנם שני מסלולים אפופטוטיים חיוניים (מוות של קולטן ומסלולים מיטוכונדריים). מחקרים רבים זיהו מטרות פוטנציאליות רבות לטיפול אנטי סרטני [14]. פעולה על מטרות אלו מטרתה להרוס או לעצור את הצמיחה של תאים סרטניים [15]. Caspases, קבוצה של ציסטאין פרוטאזות המפרקות חלבונים תאיים, הם מטרות חשובות לטיפול אנטי סרטני מכיוון שהם ממלאים תפקיד חיוני באיתות אפופטוטי [16]. מסלול PI3K/AKT נחשב גם לאחד ממנגנוני המפתח המעורבים בנדידת תאים, פלישה ומעבר דרך האפיתל המזנכימלי הריאתי. בנוסף, מסלול איתות זה קשור לשגשוג וגרורות בקרצינומות של תאי כליה, אפופטוזיס של תאים בקרצינומות של הלוע ומשפיע על התקדמות התאים הסרטניים בחלל [17].

המטרה הרציונלית של טיפולים אנטי סרטניים היא לפעול על תאים סרטניים מבלי להשפיע על רכיבים תאיים שאינם גידוליים או על המיקרו-סביבה של הגידול [18]. תאים סרטניים הנוצרים מתאי נורמליים קשים לטיפול באמצעות חומרים כימותרפיים קונבנציונליים באופן סלקטיבי. חומרים אלו פועלים באמצעות מנגנונים שונים, כגון חסימת מחזור התא בשלבים שונים, גרימת אפופטוזיס ומניעת שגשוג של תאים סרטניים, והפרעה לתכנות מחדש מטבולי [19]. גם כימותרפיה וגם הקרנות מעוררים עיוות DNA וגורמים לחסימת מחזור התא או מוות של תאים. עם זאת, דור חדש של טיפולים בסרטן מבוסס על הגברת ההשפעות התאיות של הגידול על ידי שילוב חומרים בעלי מנגנון פעולה ייחודי או שיש להם דרך מהותית ידועה להתקנת עמידות לטיפול [20].

תרופות ציטוטוקסיות מסווגות, על פי מנגנון הפעולה שלהן, לחומרי אלקילציה, מתכות כבדות (פלטינה), אנטי-מטבוליטים, אנטיביוטיקה ציטוטוקסית וחוסמי מחזור תאים. רוב התרכובות הציטוטוקסיות פועלות על שלמות ה-DNA וחלוקת התאים בתאים סרטניים [21]. שימוש קליני במתחמי פלטינה כתוספת בטיפול אנטי סרטנימבוסס על יכולתם לגרום למוות של תאי גידול, שכן לתרכובות אלו מגוון רחב של פעילויות |22]. הסיבות לחוסר היעילות של טיפולים אנטי סרטניים הם גרורות, הישנות, הטרוגניות, עמידות לכימותרפיה והקרנות וירידה ביכולת המערכת החיסונית. ניתן להסביר את כל הכשלים הטיפוליים הללו על ידי המאפיינים של תאי גזע סרטניים [23-25]. תאי גזע Mesenchymal הם סוג של תאים בשימוש נפוץ ברפואה רגנרטיבית. ידוע כי תאים אלו מפעילים השפעות דיכוי על תאים סרטניים [26]. התנגדות לטיפול ממשיכה להיות הגורם המגביל העיקרי בטיפול בחולי סרטן. הטיפולים הסטנדרטיים הנוכחיים (ניתוחים, כימותרפיה והקרנות) סובלים ממחסור עקב השפעות שליליות ורעילות, חוסר סובלנות של המטופל ושיעור הישרדות נמוך לטווח ארוך [27-30]. טיפול כירורגי והקרנות מטרתם למגר סוגי סרטן מקומיים, וניתן לשלוט בשלבים מתקדמים של המחלה רק על ידי כימותרפיה [31]. בתהליך ההובלה של תרכובת פעילה ביולוגית, הדיפוזיה שלה עשויה לייצר אינטראקציות לא ספציפיות, שיובילו לירידה ביעילות ולתגובות שליליות [32]. בין הטיפולים האנטי סרטניים, טיפולים ממוקדים הם היעילים ביותר מכיוון שיש להם מספר נמוך של תופעות לוואי, כדאיות טובה, ניתנים מינונים נמוכים וקשה יותר להתקין עמידות טיפולית [33]. לדוגמה, ננו-רפואה משמשת בהצלחה ככלי להובלה ממוקדת של חומרים אימונוסטימולטורים כדי להקל על תגובה חיסונית אנטי-גידולית. אסטרטגיות רבות נחקרו להפחתת הרעילות של אימונותרפיה נגד סרטן. ננו-פורמולציות של אנטיגנים, ציטוקינים, כימוקינים, נוקלאוטידים ואגוניסטים לקולטן דמויי Toll הראו תוצאות חיוביות [34]. נכון לעכשיו, הזיהוי של חומרים טיפוליים אלטרנטיביים חדשים, שהם יעילים יותר ובעלי פחות השפעות רעילות, מושך עניין גובר. מטרה זו היא מאתגרת להשגה עקב המורכבות של היווצרות גידול [35]. נוגדנים חד-שבטיים ומניעת כימותרפיה על ידי תרכובות טבעיות הם שני כיוונים חשובים לטיפול ומניעה של סרטן [36]. אחת האסטרטגיות החיוניות בהקשר זה היא שימוש בפיטוכימיקלים פעילים ביולוגית, שכן יש להם רעילות נמוכה והשפעות פליאוטרופיות בתהליכים תאיים שונים המפריעים להופעת הסרטן ולהתקדמותו. הפרעה לסרטן באמצעות תזונה או תוספת עם תרכובות טבעיות נקראת כימו-מניעתה [37-41]. יותר מ-3000 תרכובות צמחיות בעלות תכונות אנטי סרטניות זוהו [42]. בין התרכובות הללו,פלבנואידיםיש נציגים רבים בעלי תכונות ציטוטוקסיות על סוגים רבים של תאים סרטניים אנושיים והם נעדרים או בעלי השפעות שליליות מופחתות על תאים נורמליים [43]. פלבנואידים הם תרכובות פוליפנוליות ומייצגים סוג של מטבוליטים משניים פעילים ביולוגית בצמחים בעלי מבנה בסיסי של דיפניל פרופאן (C6-C3-C6) ובעלי משקל מולקולרי נמוך. הם עוברים סינתזה ביולוגית מפניל פרופנואיד וכלקונים הם הפלבנואידים הראשונים שנוצרו [44-51]. המבשר השכיח של הפלבנואידים הוא פנילאלנין, וסידן סינתזה, סידן איזומראז ו-flavan 3 הידרולאזים נחשבים לאנזימי מפתח לביו-סינתזה שלהם [52-56]. עבור פלבנואידים רבים, גשר יוצר טבעת פיראנית או בירונית [57]. בהתאם למבנה הבסיסי, תרכובות אלו מסווגות ל-chalcones, aurones, flavanones, flavones, isoflavones, dihydroflavonols, flavonols, leucoanthocvanidins, anthocyanidins ו-flavan-3-ols (איור 1)[58-61].

Basic structure of flavonoids

המגוון המבני של תרכובות אלו נובע מההשפעות המשולבות של אנזימים ביוסינתזה של פלבנואידים עם פונקציות קטליטיות וספציפיות שונות [62]. צריכה תזונתית של פלבנואידים קשורה לירידה בסיכון למחלות כרוניות, כגון מחלות לב וכלי דם, מחלות ניווניות, אסטמה, מחלות אוטואימוניות וסרטן (במיוחד סרטן ריאות, ערמונית, קיבה ושד)[63-71]. ידוע גם כי לפלבונואידים יש פעילויות ביולוגיות רבות, כגון אנטי-אלרגיות, אנטי דלקתיות, אנטיבקטריאליות, אנטי-סרטניות, נוגדות חמצון, אנטי-סוכרתיות, נוגדות יתר לחץ דם, אימונומודולטוריות, מגינות על הכבד, נוגדות השמנת יתר, הורמונליות (למשל, פעילות דמוית אסטרוגן), ו תכונות אנטי-אייג'ינג[72-85]. ישנם מחקרים רבים המראים כי פלבנואידים מדכאים את הצמיחה של תאי גידול במבחנה ובאינבו [86]. תרכובות טבעיות של מולקולות קטנות בסוג של פלבנואידים נחשבות לבעלי השפעות פיזיולוגיות יוצאות דופן, בעלות תכונות לא-מוטגניות בגוף האדם, ומשכו עניין הולך וגובר בזיהוי חומרים אנטי-סרטניים חדשים. מנגנונים אנטי סרטניים של פלבנואידים כוללים עיכוב צמיחת תאים ושגשוג על ידי חסימת מחזור התא, גרימת אפופטוזיס והתמיינות, או שילוב מנגנונים אלו [87,88]. בנוסף, מחקרים אפידמיולוגיים מראים שלפלבנואידים טבעיים יש פוטנציאל נוגד חמצון חזק הקשור לשכיחות נמוכה של סרטן [89,90]. פעילות נוגדת חמצון של פלבנואידים היא תוצאה של יכולתם לתרום אטומי מימן מקבוצות הידרוקסיות לרדיקלים חופשיים, מנגנון המוקל על ידי צימוד ממושך הניתן על ידי אלקטרונים II מפלבונואידים [91]. פלבנואידים ידועים כבעלי יכולת נוגדת חמצון משמעותית על אניוני סופראוקסיד, רדיקלי הידרוקסיל ורדיקלי פרוקסי. בנוסף, פלבנואידים יעילים יותר מחומצה אסקורבית בנטרול רדיקלים חופשיים הנוצרים כתוצאה מלחץ חמצוני [92]. בשנים האחרונות הוכרה ונחקרה הפעילות האנטי-סרטנית של הפלבנואידים, בפרט תכונותיהם האנטי-גרורות. הוכח הפוטנציאל הקליני שלהם בטיפול אנטי סרטני. לדוגמה, LFG-500(C30H32N2O5) הוא פלבנואיד סינתטי בעל תכונות אנטי דלקתיות ואנטי סרטניות. לתרכובת זו יש גם פוטנציאל אנטי גרורתי 93]. הפעילות הביולוגית של הפלבנואידים תלויה בדרגת הידרוקסילציה שלהם, במעמד המבני, באופי ובמיקום של תחליפים קיימים, צימודים ודרגת פילמור [94]. פלבנואידים תזונתיים רבים קיימים בצורה גליקוזית, שבה סכריד קשור לקבוצה פנולית או הידרוקסית של התרכובת [95,96]. מבנה הסכרידים הוא גורם מכריע לזמינות הביולוגית של פלבנואידים [97]. פלבנואידים הם כיום מרכיבים חיוניים של ניסוחים פרמצבטיים, קוסמטיים ותרופתיים שונים [98,99]. הרעילות הנמוכה של תרכובות אלו נחשבת ליתרון מרכזי של מחלקה זו[100]. במקרים מסוימים, גליקוזילציה של פלבנואידים אחראית להפחתת ההשפעות הרעילות והבלתי רצויות של תרכובות אלו [101].

flavonoids antibacterial

Chalcones (13-diphenyl-2-propen-1-one) הוא אחד מהסוגים החשובים ביותר של תרכובות פלבנואידים הקיימות בפירות, ירקות ותה [102] ומייצגים מבשרים ביוגנטיים של פלבנואידים ואיסופנואידים [103]. הם פיטוכימיקלים ליפופיליים המורכבים משני שיירים ארומטיים (אלדהיד ואצטופנון) המחוברים למערכת קרבוניל בלתי רוויה של שלושה אטומי פחמן (איור 2)[102,104].

General structure of chalcones

, קבוצת הקרבוניל הבלתי רוויה היא מקבלת מייקל טובה ומשתתפת בתוספות נוקלאופיליות [105]. כלקונים נמצאים בשתי צורות איזומריות (cis ו-trans), שהטרנספורמציה יציבה יותר מבחינה תרמודינמית, ובאופן מרומז, התצורה השלטת עבור תרכובות אלו (איור 3) [106-108].

Cis and trans isomers of chalcones

חשיבותן של תרכובות אלו נובעת מהכימיה הפשוטה שלהן, מהסינתזה הקלה שלהן ומיכולתן להחליף מספר רב של אטומי מימן, ובכך ליצור מספר עצום של נגזרות פעילות ביולוגית [109]. היבט חשוב הקשור לכלקונים הוא האפשרות של תרכובות אלו ליצור בקלות קשרי פחמן-פחמן, פחמן-גופרית ופחמן-חנקן, אלו הם מבשרים לסינתזה של תרכובות הטרוציקליות שונות, כגון פירמידינים, פירידינים, בנזודיאזפינים, פיראזולים, 2-פירזולינים, אימידאזולים וכל שאר הפלבנואידים|110-114. איזומריזציה של צ'לקונים לפלבנונים מתאימים בנוכחות חומצות או בסיסים מסבירה את החשיבות של תרכובות אלה כליגנדים (איור 4)[115]. לדוגמה, Pandey et al. השיג 5-ניטרו-פלבנונים על ידי ריפלוקס 2-כלקון הידרוקסי בנוכחות חומצה גופרתית מרוכזת [116].

Cyclization of 2-hydroxy-chalcone to flavanones

בשל המבנה הגמיש שלהם, כלקונים יכולים להיקשר ביעילות לאנזימים ולקולטנים רבים, מה שמסביר את היישומים הביולוגיים הרבים של תרכובות אלו [117]. הסבר נוסף לפעילות הפרמקולוגית של תרכובות אלו הוא צימוד בין הקשר הכפול לקבוצת הקרבוניל הקיימת במבנה[118]. הפעילות הביולוגית של הכלקונים תלויה במיקום, במספר ובאופי של תחליפים על שני השאריות הארומטיות (אלדהיד ואצטופנון). נתונים מהספרות מראים שמספר עצום של צ'לקונים טבעיים וסינתטיים זוהו עם יישומים קליניים ופרמצבטיים, לתרכובות אלו יש אנטי סרטן, אנטיבקטריאלי, אנטי ויראלי, נוגד חום, נוגד יתר לחץ דם, אנטי דלקתי, נוגד HIV, נוגד חמצון, נוגד כיב, פעילויות אסטרוגניות ונוירו-הגנה. לכלקונים יש את היכולת לעכב -גלוקוזידאז, MAO-B (מונואמין אוקסידאז), טובולין וטירוזין קינאז [118-137]. מצד שני, לצ'לקונים, בתנאים מסוימים, יש תכונות מחמצנות. השפעה זו עשויה להיות קשורה לפעילות האנטי-גידולית של תרכובות אלו, והיא מבוססת על מנגנונים כגון היווצרות סופראוקסיד מוגברת, דלדול גלוטתיון תאי ויצירת רדיקלים של פנוקסיד. בנוסף, מחקרים זמינים הוכיחו את הפעילות הממוקדת של צ'לקונים על קינאזות רבות, מיקרוטובולים, חלבונים עמידים לפוליתרפיה ומסלולי איתות שונים הקשורים להישרדות תאים ומוות [138]. המבנה המעניין של תרכובות אלו ופעילויות ביולוגיות שונות הובילו לאישורן של תרופות חדשות מקבוצת הכלקון, כגון metochalcone (תרופה אנטי-קולרטית) ו-sofalcone (תרופה נגד כיב) (איור 5) [139,140].

Structure of metochalcone and sofalcone

נתונים מהספרות מצביעים על כך שהחלפת שאריות ארומטיות של צ'לקונים בהטרוציקלים קובעת את היווצרותן של מולקולות בעלות תכונות ביולוגיות מיוחדות [141].

למולקולות היברידיות יש את היכולת לפתור את בעיית העמידות לטיפול בשל העובדה שלפרמקפורים שונים יש מנגנוני פעולה מרובים. מכיוון שהכלאה של מולקולות היא שיטה חשובה לזיהוי סוכנים טיפוליים חדשים, ישנן מולקולות היברידיות רבות בניסויים קליניים [142]. לדוגמה, החדרת אטום חנקן משנה לטובה את הבסיסיות של מולקולות וקובעת את האפשרות ליצור קשרים חזקים עם מטרות. תכונה שונה וחשובה נוספת היא קוטביות, שניתן להשתמש בה כדי להפחית את האופי הליפופילי, הגורמת להמסה במים ולספיגה נוחה דרך הפה [143].

נצפה שלמולקולות אורגניות פעילות ביולוגית עם חנקן במולקולות יש תכונות אנטי-סרטניות טובות. בין מולקולות עם חנקן, למורפולינים ופיפרידינים יש פעילויות חשובות על סוגים שונים של סרטן [144]. ידב ואח'. השיג triazole chalkone עם פוטנציאל אנטי סרטני משמעותי על קווי תאים אנושיים [145]. דוגמאות למקומות שבהם הכנסת פרמקפור חיובית לפעילות הביולוגית של תרכובות הן כמה כלקוני הידריד עם שאריות של quinazoline, biphenidate, ואינדול במולקולות. למולקולות החדשות שנוצרו יש את היכולת לקבוע את הפיכות העמידות לטיפול במקרה של סרטן שד [146]. לכלקוני בנזימידאזול עם חלופי חנקן עם שארית אלקיל או הטרוציקל בן חמישה או שישה איברים יש גם השפעות ציטוטוקסיות משמעותיות על אדנוקרצינומה של השד (MCF-7) ועל קרצינומה של השחלות (OVCAR-3). מולקולות הידריד אחרות בעלות פעילות ציטוטוקסית מעל הסטנדרטים על קווי תאים אנושיים (MCF-7, MA-PA-Ca2human pancreatic carcinoma, A549pulmonary adenocarcinoma, HepG2human carcinomas) הן 1,2,3-triazole chalcones. תרכובות תיאזול היברידיות מעוררות אפופטוזיס על ידי חסימת שלב ה-G2/S של מחזור התא והפחתת הפוטנציאל המיטוכונדריאלי על שורות תאים MIA-PA-Ca2 בסרטן הלבלב [147]. מחקרים על מנגנוני פעולה עבור כלקונים 1,2A-triazole מראים שיש להם את היכולת לגרום לאפופטוזיס על ידי הגדלת רמות חלבון Bax, שחרור ציטוכרום C מהמיטוכונדריה והפעלת קספאזות 3, 8 ו-9[148]. מטרת מאמר זה היא לסכם מידע שהתקבל בניסוי ובסיליקו על הפעילות האנטי-סרטנית של חלק מהכלקונים הטבעיים והסינטטיים.

flavonoids anti-inflammatory

2. תגובת קלייזן-שמידט

השיטה הנפוצה ביותר להשגת כלקונים סינתטיים היא תגובת עיבוי Claisen-Schmidt (איור 6). זוהי תגובת אלדוליזציה-קולוניזציה בין נגזרות אצטופנון עם אלדהידים ארומטיים. התגובה מתרחשת בקטליזה חומצית חזקה או בסיסית בתנאים הומוגניים [149-152].

Claisen–Schmidt reaction

השימוש במדיום אלקליין יעיל יותר להשגת צ'לקונים [153]. עיבוי Claisen-Schmidt במדיום בסיסי כרוך ביצירת אניון אצטופנון ואחריו התקפה של קבוצת הקרבוניל של אצטופנון [154]. התגובה ממשיכה עם תשואות בין 10 אחוז ל 60 אחוז. עיבוי מתבצע ב-50 מעלות, זמן התגובה הוא 12-15 שעות או שבוע בטמפרטורת החדר [155]. החסרונות של שיטה זו הם חוסר יכולת לשחזר זרז, יצירת תרכובות משניות, חוסר סלקטיביות, זמן תגובה ארוך, תנאי תגובה קיצוניים וקושי בבידוד מוצרים [156]. סוגים חדשים של זרזים הטרוגניים (חומצות לואיס, חומצות ברונסטד, חומצות מוצקות ובסיסים מוצקים) זוהו לסינתזה של צ'לקונים עם סלקטיביות גבוהה. השימוש בזרזים אלו מונע תגובות לוואי, כגון תגובת עיבוי Cannizaro או תוספת מייקל [157]. בנוסף, על מנת למנוע תגובה לא פרופורציונלית של אלדהיד, נעשה ניסיון להחליף אותו בנזילידן דיאצטט [155]. דוגמאות נוספות לתגובות להשגת צ'לקונים הן תגובת הצימוד של Heck קרבונילציה, איזומריזציה של סונוגאשירה ותגובת צימוד, תגובת פיזור זרימה מתמשכת, תגובת צימוד סוזוקי-מיאורה ותגובת סינתזה המתווכת על ידי זרז חומצה מוצק [158-160].

cistanche extract