כיצד פעילות Xanthine Oxidoreductase משפיעה על נפרופתיה של חומצה אריסטולוכית
Mar 25, 2022
איש קשר:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Takeo Ishii, Tomohiro Kumagae, Hiromichi Wakui, Shingo Urate, Shohei Tanaka ועוד.
מבוא
מחלת כליות כרונית (CKD) נפוצה ברחבי העולם, ומחלות קשורות שונות כולל הפרעות פיברוטיות מהוות אתגר ברקמות הכליות [1]. העלייה ב-CKD הובילה למספר מוגבר של חולים בדיאליזה, ולעומס כספי מוגבר, עקב עלויות הדיאליזה [2]. לכן, קיים צורך דחוף להפחית ולמנוע הפרעה בתפקוד הכלייתי, המוביל לאי ספיקת כליות סופנית. כדי ללמוד CKD, התמקדנו במודל של בעלי חיים שלחומצה אריסטולוכית(AA) נפרופתיה הנגרמת, המאופיינת בפיברוזיס מתקדם. AA (חומצה אריסטולוכית) נפרופתיה היא בעיה בחצי האי הבלקני[3,4] ובסין שבה ההפרעה הכלייתית של Mu Tong [5] אנדמית, מה שמוביל לפיברוזיס ואי ספיקת כליות סופנית בלתי הפיכה [6]. בנוסף, אורח חיים מודרני מוביל ליתר לחץ דם, סוכרת, היפר-אוריצמיה וגאוט, המהווים בעיות ברחבי העולם. בנוסף לגרימת גאוט, היפר-אוריצמיה דווחה לאחרונה כגורם סיכון להתפתחות נפרוסתקלרוזיס ויתר לחץ דם [7-9].
חומצת שתן גורמת להיווצרות רשתות מחלות הקשורות לקריסטל באמצעות שקיעת גבישי מונוסודיום אורט [10], הנובעים מחילוף החומרים של פורין. זה גורם לנזק לרקמות הקשורות ללחץ חמצוני ולדלקת רקמות עקב יצירת סופראוקסידים על ידיxanthine oxidoreductase(XOR)[11,12]. XOR(xanthine oxidoreductase) התגלתה לפני כ-100 שנה, והמרת קסנטין דהידרוגנאז (XDH) והמרת קסנטין אוקסידאז (XO) התגלו לפני כ-30 שנה [13]. בתנאים פיזיולוגיים, XO קיים בחלב וממלא תפקיד בסטריליזציה פיזיולוגית [14,15]. In vivo, XDH מגיב באופן מועדף עם NAD, בעוד ש-XO אינו יכול, אלא מייצר את האניון הסופראוקסיד (O2) ואת מי חמצן (H2O2)[16-19]. ידוע היטב ש-O2 ו-H2O2 גורמים נזק לרקמות [1]. XOR(xanthine oxidoreductase)הביטוי מווסת על ידי פירוק ATP הנגרמת על ידי מצבים פתולוגיים מסוימים כגון איסכמיה, היפוקסיה ולחץ חמצוני, המופעל על ידי לחץ תאי. בתנאים פתולוגיים אלה, ATP עובר חילוף חומרים להיפוקסנטין, קסנטין וחומצת שתן באמצעות תגובות המזרזות על ידי XOR(xanthine oxidoreductase)[12]. XOR(xanthine oxidoreductase)מייצר מיני חמצן תגובתיים (ROS) כגון סופראוקסידים, רדיקלי הידרוקסיל, מי חמצן ופרוקסיניטריט [20]. XOR(xanthine oxidoreductase)גם גורם למערכת הרנין-אנגיוטנסין ברקמות, מה שמקדם נזק לאיברים וטרשת כליות באמצעות הפעלה של לולאת משוב חיובי [12].
דיווחנו בעבר על הטיפול ב-XOR(xanthine oxidoreductase)מעכבים יכולים לשפר את ההישרדות של חולים בדיאליזה [21]. XOR(xanthine oxidoreductase)עיכוב עשוי להפחית את הלחץ החמצוני הקשור לנזק לאיברים עקב אי ספיקת כליות. במחקר זה, ניתחנו את XOR(xanthine oxidoreductase)פעילות בכליות, פלזמה, לב, כבד ושרירים ב-AA זה(חומצה אריסטולוכית)-נפרופתיה נגרמת.AA(חומצה אריסטולוכית)חודר לתאי אפיתל צינורי כליה דרך תעלת OAT1 על קרום הבסיס. זה עוצר את מחזור התא ומאלץ את התא לעבור אפופטוזיס, מה שגורם לפיברוזיס בלתי הפיך. א.א(חומצה אריסטולוכית)יכול לעשות זאת בכליות ללא נזק לאיברים אחרים. בחרנו ב-AA(חומצה אריסטולוכית)מכיוון שהוא מראה את המנגנון הפיברוטי לאי ספיקת כליות סופנית, מתפקד כמודל של פגיעה כלייתית חריפה שיכולה להתקדם לעבר מחלת כליות כרונית. מטרת מחקר זה הייתה לחקור את הרלוונטיות של XOR(xanthine oxidoreductase)פעילות במונחים של נזק לרקמות. ה-AA(חומצה אריסטולוכית)המודל הוא מודל של פגיעה כלייתית חריפה עם פוטנציאל להתקדם לעבר מחלת כליות כרונית. חקרנו נזק לרקמות במודל זה בהתבסס על XOR תלוי זמן(xanthine oxidoreductase)פעילות.
חומרים ושיטות
חיות
עכברי C57BL/6 זכרים בני 12 שבועות (נרכשו ממעבדות צ'ארלס ריבר) הוקצו ל-AA(חומצה אריסטולוכית)קבוצת הטיפול או קבוצת הביקורת של הרכב. כל קבוצה חולקה לשלוש תת-קבוצות בהתאם לשאלה אם הן הוקרבו ב-0, שבועיים או 4 שבועות לאחר ההזרקה הרביעית. א.א(חומצה אריסטולוכית)(2.5 מ"ג·ק"ג) ניתנה באמצעות זריקה תוך צפקית פעם בשבוע במשך ארבעה שבועות רצופים כפי שתואר קודם [22]. משטר מינון זה שימש על מנת לגרום לפיברוזיס כרוני עם שיעור מוות נמוך. XOR(xanthine oxidoreductase)פעילות הוערכה בעקבות AA(חומצה אריסטולוכית)מתן, ורקמות נבדקו עבור XOR(xanthine oxidoreductase)נזק הקשור. לפני ההקרבה (24 שעות), השתן נאסף בכלובים מטבוליים כמתואר קודם לכן [23](0 שבוע קבוצה n=4, 2 שבועות n=3, 4 שבועות n{{ 7}},פקד n=4)(איור 1). עכברים עברו מחזור אור/12 שעות כהה של 12 שעות בשעה 25 וסופקו להם דיאטה סטנדרטית (0.3 אחוז NaCl, 3.6 קק"ל gl, 13.3 אחוז אנרגיה כשומן (Oriental MF; Oriental Yeast Co.,Ltd, ומעלה, MA, ארה"ב)) עם גישה חופשית למים. מחקר זה אושר על ידי ועדת חיות המעבדה של אוניברסיטת יוקוהמה, ונערך בהתאם להנחיות משרד הבריאות, העבודה והרווחה לבעלי חיים. אלבומין בסרום נמדד באמצעות bromocresol green(BCG); אלבומין בשתן נמדד באמצעות בדיקת אימונו-טורבידימטרית; וקריאטינין (Cr) בסרום ובשתן נמדדו בשיטות אנזימטיות.
ניתוח כלוב מטבולי
ניתוח כלוב מטבולי בוצע כמתואר קודם (Techniplast,Paola,Malta)[23,24]. נמדדה צריכת מזון ומים יומית.
ניתוח היסטולוגי
ניתוח היסטולוגי בוצע כמתואר קודם [25,26]. הכליה הייתה מקובעת עם 4 אחוז PFA והוטמעה בפרפין. חתכים (4Im עובי) הוכתמו בטריכרום של מאסון. לצורך ניתוח של מבני כליה, אזורים פיברוטיים בכליות נמדדו דיגיטלית באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי (BZ-9000; Keyence, אוסקה, יפן). התמונה שהתקבלה הייתה מוכתמת באדום/כחול, והכחול חולץ. לאחר בינאריזציה בהתחשב באיזון הכללי, נמצא כי האפיתל הצינורי והחלק הכחול של הלומן אינם פיברוטיים והם נחתכו והודחו על מנת לכמת את הפיברוטי. אזור. פיברוזיס פריוסקולרי נכלל בכימות. נזק אינטרסטיציאלי של Tubulo הוגדר כיחס בין האזור המוכתם לשטח הדגימה כולה. יתר על כן, הערכנו רגרסיה פשוטה בין XOR של רקמות(xanthine oxidoreductase)פעילות ונזק בין-סטיציאלי של tubulo ( אחוזים ).
איור.1הליך ניסיוני וציר זמן עבור מודל העכבר. עכברי זכר C57BL/6 הוקצו לקבוצת טיפול בחומצה אריסטולוכית I(AA) או לקבוצת הביקורת של כלי הרכב. כל קבוצה חולקה לשלוש תת-קבוצות בהתאם לשאלה אם הם הוקרבו ב-0, 2 או 4 שבועות לאחר מכן הזריקה הרביעית שלהם.AA (2.5 מ"ג.ק"ג-1) ניתנה תוך צפקית (ip) פעם בשבוע במשך ארבעה שבועות רצופים. במשך 24 שעות לפני ההקרבה (Sx), השתן נאסף בכלובים מטבוליים כפי שתואר קודם לכן. עבור קבוצת 0-שבוע AA n=4, 2-קבוצת שבוע n= 3,4-קבוצת שבוע n=4, ובקרה n{{ 15}}. רמות קריאטינין בסרום (Ccr) נמדדו מיד לאחר הזרקת AA האחרונה.
תגובת שרשרת של תעתוק הפוך-פולימראז כמותית בזמן אמת (RT-qPCR)
RNA כולל הופק מרקמות כליות באמצעות ISOGEN (Nippon Gene, טוקיו, יפן), ו-cDNA סונתז באמצעות מערכת סינתזה של גדיל ראשון SuperScript III (Invitrogen). RT-qPCR בוצע באמצעות תערובת TaqMan PCR מאסטר ובדיקה מעוצבת של TaqMan (Applied Biosystems, Foster City, CA, ארה"ב) על מערכת זיהוי רצף ABIPRISM 7000. רמות הביטוי של mRNAs מטרה נורמלו ל-18S rRNA. בדיקות ה-TaqMan ששימשו ל-PCR היו כדלקמן: Transing factor growth beta 1(TGF beta 1), MM01178820_ml;collagenla, Mm00801666_gl;hypoxia inducible factor 1 alpha subunit inhibitor (HIF{{ 8}}א), מ"מ01198376_מ"ל; ואנגיוטנינוגן (AGT), Mm00599662_m1;RAS קשור C3 בוטולינום טוקסין מצע 1(RAC 1)Mm01201656_ml;NADPH Oxidase 1 (NOX 1)Mm00549170_m1; חלבון קושר CCAAT/enhancer, alpha C/EBPa Mm00514283_sl; peroxisome proliferator activated receptor gamma (PPARy) Mm00440940_ml;ו-Sterol regulatory element binding transcription factor 1 (SREBF1), Mm00550338_m1.
XOR(xanthine oxidoreductase)מדידת פעילות
פעילות Xanthine oxidoreductase נמדדה שלוש פעמים (0 שבוע, 2 שבועות, 4 שבועות לאחר AA(חומצה אריסטולוכית)מתן)(n=4 בכל קבוצה) ברקמות הלב, הכבד, הכליות והשריר לפי שיטה שתוארה קודם לכן [27]. בקצרה, ההומוגניות של הכליות, הכבד, הלב או השרירים או הפלזמה נוספו לתערובת של [1C2.15N2] קסנטין, NAD פלוס ואוקסונאט במאגר Tris (pH 8.5) והודגרה ב-37 למשך 30 דקות. לאחר מכן, התווסף מתנול המכיל [1C2,15N2jUA, והתערובת עברה צנטריפוגה ב-3000×g ב-4 למשך 15 דקות. כמות [13C2,15N]UA שהופקה בסופרנטנט נמדדה באמצעות LC/TQMS (Nexera/QTRAP4500, SHIMADZU/SCIEX).XOR(xanthine oxidoreductase)הפעילות התבטאה כ[1C2,1NJUA nmol/min/mg חלבון [27].
ניתוח סטטיסטי
תוצאות ה-AA(חומצה אריסטולוכית)וקבוצות ביקורת הושוו באמצעות מבחן t לא מזווג. ערכי P<0.05 were="" considered="" statistically="" significant.="" all="" analyses="" were="" performed="" using="" prism="" 8="" ver.8.3.1(yokohama,="">
CISTANCHE עשב מרפא לחולים עם מחלות כליות
תוצאות
עבור העכברים שהוקרבו 4 שבועות לאחר ההזרקה הרביעית, משקל הגוף ברכב ו-AA(חומצה אריסטולוכית)הקבוצות היו 31.1 גרם ±0.4 גרם ו-31.1 גרם ±0.4 גרם, בהתאמה, בזריקה הראשונה. שבועיים לאחר מכן (לאחר ההזרקה הרביעית ובמהלך תקופת התצפית), משקל הגוף היה 31.9 גרם ±{{10}}.4 גרם בקבוצת הרכב, בעוד שהוא הגיע למינימום של 27.8 גרם ± 0.7 גרם (עמ'<0.05)in the="">(חומצה אריסטולוכית)קבוצה (איור 2). רמות Cr בסרום נמדדו מיד לאחר ה-AA האחרון(חומצה אריסטולוכית)זריקה. רמת Cr הייתה {{0}}.11lg±0.02 mg·dL-1 בקבוצת הרכב והייתה גבוהה משמעותית ב-AA(חומצה אריסטולוכית)קבוצות (עמ'<0.05). the="" levels="" continued="" to="" increase="" in="" the="" experimental="" group="" at="" 2="" and="" 4="" weeks="" after="" the="" end="" of="">(חומצה אריסטולוכית)מינהל.אחרי ה-AA הסופי(חומצה אריסטולוכית)מתן, חנקן אוריאה בדם בדם (BUN) היה 25.7 mg.dL-1±0.2 mg·dL-1 ו-53.8mg·dL-1±5.1 mg·dL -l ברכב ו-AA(חומצה אריסטולוכית)קבוצות, בהתאמה (P<0.05). bun="" continued="" to="" increase="" in="" the="">(חומצה אריסטולוכית)קבוצה במהלך תקופת תצפית המעקב. First Cr clearance(Ccr), שנמדד בסוף ה-AA(חומצה אריסטולוכית)מתן, היה 690.1 μLmin-1± 71.4 μLmin-1 בקבוצת הרכב ו-183.8 μLmin-'± 12.9 μLmin l ב-AA(חומצה אריסטולוכית)קבוצות. רמות Ccr ב-AA(חומצה אריסטולוכית)הקבוצות נותרו נמוכות לאחר שבועיים ו-4 שבועות לאחר AA(חומצה אריסטולוכית)מינהל (פ<0.05;table 1="" and="">
איור 2שינויים במשקל הגוף במהלך תקופת התצפית. העכברים היו במעקב 4 שבועות לאחר הזרקת AA הסופית. משקל הגוף בקבוצות הרכב והחומצה האריסטולוכית I(AA) היו 31.1±0.4 גרם ו-31.1 גרם±0.4, בהתאמה, בזריקה הראשונה. עד שבוע 4, משקל הגוף של קבוצת הביקורת היה 31.2 ± 0.6g, אך משקל הגוף של קבוצת AA היה 29.3± 1.4 גרם. שבועיים לאחר מכן (בתקופת התצפית), משקלי הגוף היו 31.9± {{20}}.4 גרם בקבוצת הרכב, בעוד שאלו בקבוצת AA הגיעו למינימום של 27.8± 0.7 גרם (P<0.05).0-week group="" n="4,2-week" group="" n="3,4-week" group="" n="4,control" n="4." error="" bars="" represent="">
שינויים בהפרשת אלבומין בשתן
הפרשת אלבומין בשתן נמדדה מיד לאחר ארבעה AA(חומצה אריסטולוכית)זריקות. הערכים היו Cr ב-26.0±0.9 ug·mg1 ו-240.8±100.0 ug·mg1 הרכב ו-AA(חומצה אריסטולוכית)קבוצות, בהתאמה. לאחר 4 שבועות, הפרשת אלבומין בשתן הייתה 18.3±0.6 ug mg1 ו-194.3± 59.8 ug·mg1Cr ברכב ו-AA(חומצה אריסטולוכית)קבוצות, בהתאמה (P<0.05;>
שולחן 1.פעילויות של xanthine oxidoreductase (XOR) במודל הנפרופתיה של חומצה אריסטולוכית (AA)
XOR(xanthine oxidoreductase)פעילות בפלזמה וברקמות
הפלזמה XOR(xanthine oxidoreductase)הפעילות הייתה 73.3± 8.0 pmol·min'mg1 ו-77.8±4.2 pmol·min mg ברכב וב-AA(חומצה אריסטולוכית)קבוצות, בהתאמה, בסוף AA(חומצה אריסטולוכית)מִנהָל. לא נצפה הבדל משמעותי בפלזמה XOR(xanthine oxidoreductase)פעילויות בין שתי הקבוצות בכל נקודת זמן (איור 4א).
איור 3.שינויים בקריאטינין בסרום (Cr), פינוי Cr (Ccr), והפרשת אלבומין בשתן. (א) רמות Cr בסרום נמדדו מיד לאחר ההזרקה האחרונה של חומצה אריסטולוכית I(AA). רמת Cr הייתה {{0}}.11 ± 0.02 מ"ג-ד"ל-'בקבוצת הרכב והייתה גבוהה משמעותית בקבוצת AA (0.30±0.02 מ"ג .dL-1;P<0.05). the="" levels="" continued="" to="" increase="" in="" the="" experimental="" group,="" at="" 2="" weeks="" and="" 4="" weeks="" after="" the="" end="" of="" aa="" administration.(b)="" first="" ccr,="" which="" was="" measured="" at="" the="" end="" of="" the="" aa="" administration,="" was="" 690.1="" ±="" 71.4="" ul-min-'in="" the="" vehicle="" group="" and="" 183.8±="" 12.9="" μl·min-1="" in="" the="" aa="" groups.="" the="" levels="" in="" the="" aa="" groups="" remained="" low="" at="" 2="" weeks="" and="" 4="" weeks="" after="" aa="" administration=""><0.05; table="" 1="" and="" fig.3a,="" 3b).(c)="" urinary="" albumin="" excretion="" was="" measured="" immediately="" after="" four="" aa="" injections.="" the="" values="" were="" 26.0="" ±="" 0.9="" and="" 240.8±="" 100="" ug-mg-1="" cr="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively.="" two="" weeks="" later,="" the="" urinary="" albumin="" excretion="" was="" 18.8±="" 1.7="" ug-mg-1="" and="" 78.3±="" 10.6="" ug.mg-1="" cr="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,=""><0.05).at 4="" weeks,="" the="" urinary="" albumin="" excretion="" was="" 18.3±="" 0.6="" ug·mg-'and="" 194.3±="" 59.8="" ug·mg-'="" cr="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively=""><0.05;fig.3c).0-week group="" n="4," 2-week="" group="" n="3," 4-week="" group="" n="4," control="" n="4.Error" bars="" represent="" sem.="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" multiple="" t-test="" in="" each="" week.="" *represents="">< 0.05,="" and="" **="" represents=""><>
חוץ מהכליה, XOR(xanthine oxidoreductaseפעילויות ברקמות שנבדקו לא היו שונות בין הקבוצות. ה-AA(חומצה אריסטולוכית) קבוצות לא הראו הבדלים ב-XOR(xanthine oxidoreductase) פעילות בלב, בכבד ובשריר בהשוואה לקבוצת הביקורת בכל נקודת זמן (איור 4BD). עם זאת, ברקמת הכליה, XOR(xanthine oxidoreductase) פעילויות ב-AA(חומצה אריסטולוכיתקבוצות היו גבוהות במהלך תקופת התצפית. בשבוע 0, XOR(xanthine oxidoreductase) הפעילויות היו 254.3±19.9 pmolmin 1.mg1 ו-556.8±52.9 pmol·min1mg1 TP ברכב ו-AA(חומצה אריסטולוכית) קבוצות, בהתאמה (P<0.0001).two weeks="" later,="" the="">xanthine oxidoreductaseהפעילות הייתה 231.5±20.4 pmolmin一mg1 ו-430±55.6 pmolmin'mg1TP ברכב ו-AA(חומצה אריסטולוכית) קבוצות, בהתאמה (P<0.05).at week="" 4,="" the="" activities="" were="" 237.5±9.9="" pmolmin1mg1a="" and="" 410.5="" ±="" 30.5="" pmol:min1mg="" g1="" tp="" in="" the="" vehicle="" and="">חומצה אריסטולוכית) קבוצות, בהתאמה (P<0.05;fig. 4e).="">
ביטוי של סמני פיברוזיס ברקמת הכליה
נבדקו רמות ביטוי ה-mRNA של גנים הקשורים לפיברוזיס בכליות. הביטוי הכלייתי של קולגן1 (Col1) היה מוגבר ב-AA(חומצה אריסטולוכית)קבוצות בהשוואה לזו שבקבוצת הרכב בכל נקודות הזמן (P<0.05; fig.="" 5a).="" additionally,="" the="" renal="" expression="" of="" transforming="" growth="" factor="" β(tgf-β)="" was="" increased="" in="" the="">(חומצה אריסטולוכית)קבוצות לעומת זו שבקבוצת הרכב בסוף א.א(חומצה אריסטולוכית)מתן ולאחר שבועיים (P<0.05), and="" showed="" a="" tendency="" to="" increase="" after="" 4="" weeks="" (fig.="">
איור.4.פעילות Xanthine oxidoreductase בפלזמה וברקמות.(A) פעילות ה-xanthine oxidoreductase(XOR) בפלזמה הייתה 73.3±8.0 pmol·min-1.mg-1ו-77.8±4.2 pmol- min-1.mg-1 בקבוצת הרכב וחומצה אריסטולוכית I(AA), בהתאמה, בסוף מתן AA. לא נצפה הבדל משמעותי בפעילויות XOR בפלזמה בין שתי הקבוצות בכל נקודת זמן. (BD) מלבד הכליות, פעילויות XOR ברקמות שנבדקו לא היו שונות בין הקבוצות. קבוצות ה-AA לא הראו הבדלים כלשהם בפעילות XOR בלב, בכבד ובשריר בהשוואה לקבוצת הביקורת בכל נקודת זמן. (E) עם זאת, ברקמת הכליה, פעילות ה-XOR בקבוצות ה-AA עלתה במהלך התצפית. פרק זמן. בשבוע 0, פעילויות ה-XOR היו 254.3± 19.9 pmol.min-1.mg-1 ו-556.8± 52.9 pmol·min-1.mg-1 TP בקבוצות הרכב ו-AA, בהתאמה (P<0.0001). two="" weeks="" later,="" xor="" activity="" was="" 231.5±="" 20.4="" pmol-min-1.mg-1="" and="" 430±="" 55.6="" pmol-min-1.mg-1="" tp="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively=""><0.05). at="" week="" 4,="" the="" activity="" was="" 237.5±="" 9.9="" pmol.min-1.mg-1="" and="" 410.5="" ±="" 30.5="" pmol-min-1.mg-1="" tp="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="">< 0.05).="" o-week="" group="" n="4," 2-week="" group="" n="3," 4-week="" group="" n="4," control="" n="4.Error" bars="" represent="" sem.="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" multiple="" t-test="" in="" each="" week.="" *represents="">< 0.05,="" and="" **represents=""><>
ביטוי של גורם הגורם להיפוקסיה (HIF-1a) ברקמת הכליה
נבדקו גם רמות ביטוי ה-mRNA של HIF-1a. הביטוי הכלייתי של HIF-1o היה גבוה משמעותית ב-AA(חומצה אריסטולוכית)קבוצות בהשוואה לזו שבקבוצת הרכב (P<0.001) at="" the="" end="" of="">(חומצה אריסטולוכית)מתן, לאחר שבועיים ו-4 שבועות (P<>
ביטוי של מרכיבי NADPH ברקמת הכליה
ביטוי גנים של RACI ו-NOXI ב-AA(חומצה אריסטולוכית)הקבוצה עלתה ברציפות בהשוואה לקבוצת הרכב (P<>
ביטוי של סמני אדיפוגנזה ברקמת הכליה
סמני אדיפוגנזה ביטוי גנים C/EBP ו-PPAR, וביטוי גנים של סמן ליפוגנזה SREBF1 ב-AA(חומצה אריסטולוכית)הקבוצה עלתה ברציפות בהשוואה לקבוצת הרכב (P<0.05;fig. 5f,="">
איור 5.ביטוי גנים ברקמת הכליה. (א) נבדקו רמות ה-mRNA של גנים הקשורים לפיברוזיס בכליות. הביטוי הכלייתי של קולגן-1 (Col-1) היה מוגבר בקבוצות החומצה האריסטולוכית I(AA) בהשוואה לקבוצת הרכב בכל נקודות הזמן (P<0.05).(b)additionally, renal="" expression="" of="" transforming="" growth="" factor-β(tgf-b)was="" increased="" in="" the="" aa="" groups="" compared="" to="" the="" vehicle="" group="" at="" the="" end="" of="" aa="" administration="" and="" 2="" weeks="" later=""><0.05), and="" showed="" a="" tendency="" to="" increase="" after="" 4="" weeks.="" (c)="" the="" mrna="" levels="" of="" hypoxia-inducible="" factor-1="" alpha="" (hif-1α)="" were="" examined.="" renal="" expression="" of="" hif-1a="" was="" significantly="" higher="" in="" the="" aa="" groups="" compared="" with="" the="" vehicle="" group="">< 0.001)="" at="" the="" end="" of="" aa="" administration,at="" 2="" weeks,="" and="" 4="">< 0.05).(d,="" e)the="" mrna="" levels="" of="" nadph="" components="" were="" examined.="" renal="" expression="" of="" (rac1)="" and="" (nox1)was="" elevated="" in="" the="" aristolochic="" acid="" i(aa)="" groups="" compared="" to="" the="" vehicle="" group=""><0.05).(f-h) the="" mrna="" levels="" of="" adipogenesis="" and="" lipogenesis="" markers="" were="" examined.="" renal="" expression="" of="" (c/ebpa),="" (ppary),="" and="" (srebf1)was="" elevated="" in="" the="" aristolochic="" acid="" i(aa)="" aroups="" compared="" to="" the="" vehicle=""><0.05). 0-week="" groun="" n="4" 2-week="" group="" n="3," 4-week="" group="" n="4," control="" n="4.Error" bars="" represent="" sem.="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" multiple="" ttest="" in="" each="" week.*="" represents="" p="" <="" 0.05,="" and="" **represents=""><>
פיברוזיס של רקמת הכליה
אזורי הפיברוזיס הכלייתי הבין-סטיציאלי היו 1.8±0.7 אחוזים ו-9.1±1.9 אחוזים (P<0.05)in the="" vehicle="" and="">(חומצה אריסטולוכית)קבוצות, בהתאמה, בסוף AA(חומצה אריסטולוכית)מִנהָל. מגוון רחב של תאי אפיתל צינורי אבדו באמצעות אפופטוזיס. שבועיים לאחר מכן, האזורים הפיברוטיים היו 2.1 ±0.4 אחוזים ו-8.1±4.7 אחוזים ברכב וב-AA(חומצה אריסטולוכית)קבוצות, בהתאמה. לאחר 4 שבועות, אזורי הפיברוזיס הכלייתי הבין-מערכתי היו 3.6±1.1 אחוזים ו-15.3±2.6 אחוזים (P<0.05)in the="" vehicle="" and="">(חומצה אריסטולוכית)קבוצות, בהתאמה. האזור האפופטוטי הצינורי בשבועות O הוחלף באזור הפיברוטי באמצעות שיפוץ רקמות (איור 6A, B). הערכה מיקרוסקופית של כתם טריכרום מאסון הראתה שרקמת הכליה XOR(xanthine oxidoreductase)פעילות הייתה בקורלציה מובהקת לאזור הפיברוטי הבין-תתי (אחוז o) (P<0.0012,r²=>
איור 6.פיברוזיס רקמת הכליה.(A,B) אזורי הפיברוזיס הכלייתי הבין-סטיציאלי היו 1.8± 0.7 אחוזים ו-9.1 ± 1.9 אחוזים (P<0.05) in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively,at="" the="" end="" of="" aa="" administration.="" two="" weeks="" later,="" the="" areas="" were="" 2.1+0.4%="" and="" 8.1="" +="" 4.7%="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively.="" at="" 4="" weeks,="" the="" interstitial="" renal="" fibrosis="" areas="" were="" 3.6±="" 1.1="" and="" 15.3=""><0.05) in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively,="" scale="" bar="" indicated="" 200="" um,(c)="" kidney="" tissue="" xor="" activity="" was="" significantly="" correlated="" with="" interstitial="" fibrotic="" area(%)using="" microscopic="" evaluation="" of="" masson="" trichrome="" stain="" （p="0.0012" 产="0.40）." this="" suggests="" that="" xor="" activity="" contributed="" to="" tissue="" damage="" leading="" to="" end-stage="" renal="" disease.="" 0-week="" group="" n="4," 2-week="" group="" n="3,4-week" group="" n="4,control" n="4.Error" bars="" represent="" sem.="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" multiple="" t-test="" in="" each="" week.*represents="">< 0.05,="" and="" **="" represents=""><>
CISTANCHE
הערה: עשב המרפא הסיני המסורתי cistanche (המכונה גם "עשב הדרקון" ו"ג'ינסנג המדבר"), גדל רק במדבריות הצחיחים והחמים. כאחד מתשעת עשבי התיבול האלמותיים, Cistanche (cistanche tubulosa/cistanche deserticola/cistanche deserticola/cistanche deserticola/cistanche desertliving cistanche/cistanche salsa) מכיל מרכיבים יעילים עשירים כגון אכינאקוסיד, אקטאוזיד, גלוקוזידים פניליתנואידים מלאים, פלבנואידים, מרכיבים אפקטיביים של ריבוי סוכרים וכו'. עשב מזין וחומר מזון לחסינות של אנשים, איברים פנימיים ותאי מוח ונוירונים וכו'. מחקרים פרמקולוגיים מודרניים אישרו את ההשפעות הבאות של cistanche (היתרונות של cistanche): שיפור חסינות; לשפר את התפקוד המיני ותפקוד הכליות; נוגד עייפות; נוגד הזדקנות; לשפר את הזיכרון; מחלת אנטי-פרקינסון; מחלת אנטי-אלצהיימר; נוגד חמצון; קלות-עצירות; אנטי דלקתי; לקדם את צמיחת העצם, הלבנת עור; להגן על הכבד; וכו '
לחץ כאן לחלק Ⅱ
echinacoside
