מתח חמצוני, חילוף חומרים לא מתפקד של אנרגיה ונוירוטרנסמיטורים מערערים שינו את הפרופיל המטבולי של המוח במודל חולדה של צלילה מדומה של רווית הליוקס ל-4.0 MPa Ⅱ

הליך מיצוי רקמות

הליך החילוץ של מטבוליטים קוטביים מדגימות רקמה היה שינוי קטן כפי שדווח [18]. דגימות רקמה קפואות ששוקלו מראש הופשרו על קרח ולאחר מכן הועברו להומוגניות מכנית במערכת ממס מתנול-כלורופורם-מים בדרגת HPLC קרה כקרח (400 μL, 400 μL ו-285 μL, בהתאמה, לכל 100 מ"ג רקמת מוח) באמצעות הומוגנית רקמה (Precellys 24, Bertin Technologies, Villeurbanne, צרפת). ההומוגניות שהתקבלו נשמרו על קרח למשך תקופה של 30 דקות ולאחר מכן עברו צנטריפוגה ב-12, 000 xg למשך תקופה של 10 דקות ב-4°C. לאחר מכן הסופרנטנט של כל דגימה הוסר והוליופילד כדי להשיג אבקה המכילה מטבוליטים קוטביים במייבש הקפאה (FD-1A-80, BIOCOOL, סין). כל דגימת אבקה שוחזרה לאחר מכן עם חיץ PBS של 550 μL עם 0.1 אחוז TSP, ולאחר מכן כל הדגימות עברו ערבוב יסודי ברוטציה וצנטריפוגה ב-12,000 xg למשך תקופה של 20 דקות ב-4°C. לאחר מכן הועבר מנה של 500 μL של סופרנטנט לתוך צינור NMR בקוטר 5.0 מ"מ (Norrel, בריטניה). עקרון המיצוי של חלבון בדגימת הקורטקס היה כפי שתואר קודם ללא שינויים. הכמות המדויקת של דגימות הקורטקס נשפכה למאגר הומוגניות (HEPES 25 mmol/L, pH 7.4, MgC12 5 mmo1/L, DTT 2 mmol/L, EDTA 1.3 mmol/L, EGTA 1 mmol/L, 0.1 אחוז Triton X-100, אפרוטינין, פפסטטין A ולאופפטין 10 ug/ml כל אחד) והומוגג באופן ידני באמבט קרח. התערובת עברה צנטריפוגה ב-1,000 xg למשך תקופה של 10 דקות ב-4˚C, והסופרנטנט שימש לריכוזי החלבון המכומתים באמצעות מבחן ברדפורד.

לחץ כאן כדי לדעת את הפונקציה נגד חמצון של Cistanche

בדיקה ביוכימית

בדיקת אימונוסורבנט (ELISA) רגישה ותחרותית הושמה עם ערכות בדיקה לכימות האנזימים המטבוליים Na-KATPase ו-AChE והנוירוטרנסמיטורים DA, E, NE, 5HT ו-GABA. ELISA קבעה גם את רמות SOD, MDA ו-GPx ברקמת קליפת המוח עם ערכות בדיקה בהתאם להוראות היצרן.

מדידת NMR

הכימות היעיל של מטבוליטים של רקמות הושג באמצעות פלטפורמה אנליטית המבוססת על ספקטרומטר Bruker Avance-III NMR נוזלי ברזולוציה גבוהה המצויד בבדיקה קריוגנית בעלת רגישות גבוהה הפועלת בתדירות של 600. 17 מגה-הרץ לתצפית של 1 H ב-298 K. רצף פעימות (RD-90˚-ACQ) חד-ממדי 1 H ZGPR (TOPSPIN גרסה 3.0, Bruker Biospin) הוחל על לרכוש נתוני NMR עבור כל דגימה. ארבע סריקות דמה ו-128 ארעיות נרשמו לתחום זמן של 32 K נקודות נתונים תוך שימוש ברוחב ספקטרלי של 20 ppm עם השהיית הרפיה של 10.0 שניות וזמן קליטה של ​​2.73 שניות. פונקציית הרחבת קו אקספוננציאלית של 0.3 הרץ ומילוי אפס ל-64 K נקודות נתונים יושמה על כל דעיכות האינדוקציה החופשית (FIDs) לפני טרנספורמציה של פורייה. טכניקות NMR דו-ממדיות נוספות עם ספקטרוסקופיה של מתאם שיפוע שדה פועם (gCOSY) וספקטרוסקופיה דו-מימדית הומו-גרעינית כוללת (TOCSY) הופעלו תוך שימוש בתוכניות דופק סטנדרטיות בדגימות נבחרות כדי לאשר את הקצאות ההיסט הכימי. מחליף דגימות אוטומטי לאספקת דגימות רציפה שימש בכל רכישת הספקטרום.

זיהוי ואישור מטבוליטים

אותות NMR המבוססים על המיקום של תהודות בודדות על הספקטרום זוהו בחבילת התוכנה Chenomx NMR Suite v. 8.4 (גרסת הערכה). האישורים של חלק מהקצאות המטבוליטים בוצעו תוך התחשבות בשינויים כימיים, קבועי צימוד ודפוסי ריבוי של מטבוליטים כמידע על צימודים סקלרים המופקים מ-1 H-1 H COSY, 1 H-1 H TOCSY, מסדי נתונים ציבוריים של NMR כגון COLMAR ו-Human Metabolome מסד נתונים (HMDB), והספרות [18, 19].

ניתוח סטטיסטי רב משתני

פרוטוקול העיבוד המקדים ששימש לעיבוד מקדים של כל ספקטרום 1D 1H NMR היה זהה לזה שתואר בעבודה הקודמת שלנו [20]. ספקטרום ה-NMR של 1H תוקן בשלבים ותוקנו באמצעות MestReNova (Mestrelab Research, SL, ספרד), והאזור הספקטרלי של כל מטבוליט שולב בדלי אחד. התהודה של אות הממס האורגני ושל אזור האות H2O/HOD שיורי הוסרו בכל ספקטרום 1D 1H NMR. A 0.{{30}}הליך דלי 03 הרץ ונורמליזציה לסכום העוצמה הספקטרלית כפול 10000 יושמו בכל הספקטרום. רק ערכי הדלי הגדולים ביותר בשיא אחד נבחרו לניתוח השלב הבא כדי למנוע פרשנות שגויה של המטבוליטים המבדילים עקב אותות חופפים. לאחר מכן, חולצו דליים אינטגרליים של 47 מטבוליטים והועברו לניתוח נתונים חד משתנים ורב משתנים. ניתוח חסר אבחנה על ידי ניתוח רכיבים עיקריים (PCA) וניתוח אבחנה על ידי ניתוח מבחין בריבועים קטנים חלקיים (PLS-DA) והקרנות אורתוגונליות למבנים סמויים ניתוח אבחנה (OPLS-DA) בוצעו באמצעות חבילת התוכנה SIMCA-P plus 14.0 (Umetrics , Umeå, שוודיה) בקנה מידה לנתוני שונות יחידה. עלילות הניקוד של PCA ו-PLS-DA הומחשו עם הרכיבים העיקריים הראשון והשני (t[1], t[2]), בעוד שעלילת הציון OPLS-DA השתמשה ב-t[1] וברכיב האורתוגונלי (to[1] ]). הפרמטרים Q2 (cum), R2Y(cum) ו-R2X (cum) חושבו כדי לבדוק את חוסנם של מודלים לאפליה מפני התאמה יתר [21]. כפי שתואר קודם לכן, ערך הערכת איכות של Q2 � 0.4 נחשב למודל אמין. אסטרטגיית האימות הצולבת שבעתיים ומבחן התמורות 200 פעמים עם הרכיב הראשון יושמו כדי להגן מפני התאמת יתר של המודל ולאמת עוד יותר את המהימנות והאמינות של המודלים. אם לקו הרגרסיה של Q2 היה יירוט שלילי וערכי Q2 שהותאמו בנקודה השמאלית ביותר היו גדולים יותר מכל ערכי Q2 של הנקודות הימניות במבחן המתומרת, מודל OPLS-DA שהוקם היה חזק [22]. אסטרטגיית ברירת המחדל של 10- אימות צולב כפול יושמה כדי להגן מפני התאמת יתר של המודל. באופן כללי, נתון הערכת איכות (Q2) � 0.4 נחשב למודל אמין, כפי שתואר קודם לכן. מקדמי המתאם (r) וערכי VIP שהופקו ממודלים של OPLS-DA שימשו לזיהוי מטבוליטים שתרמו באופן משמעותי להפרדה בין שתי הקבוצות. בנוסף, השינויים בקפלים של מטבוליטים בין קבוצות חושבו באמצעות פונקציה. IA/IB, כאשר IA ו-IB מייצגים את הערכים הממוצעים של אינטגרל המטבוליטים בקבוצות A ו-B, בהתאמה. מפת החום ותרשימים התוכננו כדי להקל על ההבנה של וריאציות המטבוליטים בין הקבוצות.

סטטיסטיקה חד משתנית של אינטגרלים של מטבוליטים

ממוצע הדלי של מטבוליטים בכל קבוצה מבוטא כממוצע ± סטיית תקן (SD). ניתוח חד משתני בוצע גם באמצעות ANOVA (אנליזה של שונות). הבדלים מובהקים סטטיסטית בין קבוצות הוערכו על ידי בדיקת t לא מזווגת של שני זנבות לאחר המרה ביומן בתוכנת GraphPad Prism V 8.4.3 (Graph Pad Software Inc., San Diego, CA, ארה"ב). הבדלים מובהקים סטטיסטית הוגדרו על ידי ערכים של p (< 0.05). According to the three criteria, including an absolute value of r greater than 0.50, a value of VIP greater than 1.0, and a p-value less than 0.05, the bucket variables with one of three features will be selected as discriminatory variables. Because more than one bucket value was listed from the same metabolite, two or more discriminative variables arising from the same metabolite will be present in the discriminatory panel. Selection will be carried out based on VIP rankings, and only the variables from the same metabolites with the highest VIP values were therefore selected as discriminatory metabolite level features, which will be included in the next-step analysis.

ניתוח מתאם מטבולי סטטיסטי של המערכת וניתוח אשכולות היררכי

חישוב מקדם המתאם של פירסון וניתוח אשכולות היררכי בוצעו על סמך האינטגרלים היחסיים של מטבוליטים ב-R Studio (גרסה 1.4.1717) עם סקריפטים קטנים. עבור כל זוג קבוצות, מטריצת המתאם הוצגה במפת פיקסלים כמתואר בספרות [21]. בקצרה, עבור כל משתנה בקבוצה אחת, מתאמים עם ערכי p הנמוכים מ-0.05 נחשבו מתאמים סטטיסטיים מובהקים ונשמרו כדי לבנות את רשת המתאם הסופית כדי להמחיש את הקשרים הסמויים של מטבוליטים בתוך קבוצה והיחסים המטבוליים המופרעים בין קבוצות. הריבועים האדומים יותר מצביעים על מתאם חיובי משמעותי יותר. הריבועים הכחולים יותר מצביעים על מתאם חיובי משמעותי יותר. הריבועים הלבנים מציינים את המתאם ללא כל משמעות. ניתוח של המסלולים והרשתות המטבוליות הרלוונטיות ביותר של המוח שהופעלו כמגיבים ל-HSD בוצע באמצעות הכלי MetaboAnalyst 3.0. עבור ניתוח הטופולוגיה של המסלול שבוצע, נבחרה ספריית מסלולי היונקים Rattus norvegicus (עכברוש). גישה זו נוצלה גם כדי לספק הערכות של השפעת המסלול, שיעור גילוי כוזב (FDR) וערכי p.

תוצאות אינדקסים ביוכימיים קורטיקליים מקבוצות HSD ו-CON

כדי לאמת את השפעות השינוי המטבולי של HSD על רקמות המוח, פרמטרים ביוכימיים, כולל הפעילויות האנזימטיות המטבוליות הקשורות לחילוף החומרים באנרגיה של Na-KATP, AChE ו-LDH, הנוירוטרנסמיטורים של DA, E, NE, 5HT ו-GABA, ו החלבונים הקשורים ללחץ חמצונישֶׁלטִפֵּשׁ, מד"א, ו-Gpx ברקמות הקורטקס האיפסילטרליות של חולדות HSD ו-CON נקבעו גם כן (טבלה 1). בהשוואה לקבוצת הביקורת, רמות ה-DA, E, NE ו-MDA עלו באופן משמעותי, בעוד שתכולת Na-KATP, AChE, LDH, 5HT, GABA, SOD ו-Gpx ירדה במודל HSD. גבול הגילוי של ערכות בדיקה המשמשות בעבודה הנוכחית היה רשום בטבלת S3 בקובץ החומרים המשלימים.

טבלה 1. הכימות של פרמטרים ביוכימיים נמדד בחיות CON ו-HSD של רקמת קליפת המוח על ידי ELISA עם ערכות הבדיקה. (ממוצע ± SD). מצביע על מובהקות סטטיסטית.

מטבוליטים שזוהו בספקטרום 1H NMR של דגימות רקמת מוח

איור 3 מציג שלוש ספקטרום NMR מייצג של 1 H מהקליפת המוח (איור 3A), ההיפוקמפוס (איור 3B), והסטריאטום (איור 3C) של עכברוש HSD. מגוון רחב של מטבוליטים בולטים זוהו על פי נתוני 1H NMR של דגימות רקמת מוח, והם אניונים חומצה אורגנית (לקטט (Lac), מלונט (Maln), succinate (Suc), malate (Mal), fumarate (FMA). ), 2-הידרוקסי-בוטיראט (2-HB), אצטט (אס), פורמט (פור), טאורין (טאו), אסקורבט (Asc), 2-הידרוקסי-בוטיראט (2HIB)), חומצות אמינו (לאוצין (Leu), איזולאוצין (Ile), ולין (Val), אלנין (Ala), גליצין (Gly), טירוזין (Tyr), פנילאלנין (Phe), אספרטאט (Asp), גלוטמין (Gln), גלוטמט (Glu) , תריאונין (Thr), סרין (Ser), ליזין (Lys), אספרגין (Asn)), נוירוטרנסמיטורים (-aminobutyrate (GABA)), מטבוליטים הקשורים לאנרגיה (קריאטין (Cre), אדנוזין טריפוספט (ATP), אדנוזין מונופוספט ( AMP)), מטבוליטים הקשורים לפוספוליפידים (Ophosphoethanolamine (PEA), O-phosphocholine (Pcho), sn-glycero-3-phosphocholine (GPC)), ואחרים (Myo-inositol (MI), nicotinamide adenine dinucleotide (NAD plus) ), חומצה ניקוטינו רירית (Nic), N-אצטילאספרטאט (NAA), ניקוטינמיד-אדנין-דינוקלאוטיד פוספט (NADP פלוס ), UDP-N- גלקטוז (UDPGa), אורידין (Uri), אורציל (Ura), ציסטידין (Cyt) , uridine 5'- monophosphate (UMP), inosine 5'-monophosphate (IMP), אינוזין (Ino), כולין (Cho), car nitin (Car), גלוטתיון (GSH). טבלה S1 מציגה מידע מפורט על הקצאות המטבוליטים.

שינויים בפרופיל מטבולי נחשפו על ידי ניתוח מטבולומי

PCA, גישת ניתוח חקרנית וחסרת פניות של ספקטרום 1H NMR מכל תמציות המוח על פני אזורי מוח שונים, נוצרה לראשונה כדי לחשוף את המגמות המטבוליות העיקריות המונעות מחשיפה היפרברית ל-400 msw סביבת רווית הליוקס. עלילת פיזור PC1 לעומת PC2 שהתקבלה מ-PCA (איור S1A–S1C) של נתוני דלי אינטגרליים חשפה הבחנה מסוימת עם חפיפה מסוימת בין שני הסיווגים. חקירות מפוקחות של מודלים של PLS-DA (S1A'–S1C' Fig) ו-OPLS-DA (איור 4A-4C) הראו הבחנה ברורה בין הקבוצות של הפרופילים המטבוליים. איור 4 מציג את עלילות הניקוד של מודל OPLS-DA עבור אזור קליפת המוח (A), אזור ההיפוקמפוס (B) ואזור הסטריאטום (C), מראה הבחנה ברורה בין קבוצות HSD והבקרות. השונות המוסברת הגבוהה וטובת החיזוי המשתקפת על ידי הערכים של R2X ו-Q2 (S1A'–S1C' איור, איור 4A–4C) וחלקות בדיקת תמורה (איור 4'-4C'A) הצביעו על החוסן של המודלים המפוקחים שנוצרו. מקדם המתאם (r) שהופק מהחלקות של קו S, חשיבות משתנה בהקרנה (VIP), וערך ה-p מהמבחנים החד-משתניים הלא-פרמטריים נאספו כדי להעריך את המטבוליטים המשמעותיים האחראים לדפוסים המבדילים בין המעמדות. לכן, בעמידה בכל אחד משלושת הקריטריונים (הערך המוחלט של r גדול מ-0.50, הערך של VIP גדול מ-1.0, יחד עם ערך p קטן מ-0.05), בחרנו פאנל של מטבוליטים מובהקים סטטיסטית (טבלה 1) אחראית על ההפרדה בין קבוצות CON ו-HSD. בטבלה 1, ערכי שינוי קיפול גדולים מ-1 מצביעים על רמה מוגברת בקבוצת HSD, בעוד ערכי שינוי קיפול הנמוכים מ-1 מצביעים על רמה ירידה בקבוצת HSD. ערכי ה-SD הממוצעים של מטבוליטים מבחנים מפורטים בטבלה S2. באמצעות ניתוח אשכולות היררכי של מטבוליטים ושיטת ההצמדה הממוצעת, מפת החום שנוצרה (איור 5A-5C) עם דנדרוגרמות מאפשרת הדמיה טובה יותר של שלושה שינויים מטבוליים באזור המוח שנגרמו מחשיפה היפרברית בסביבה רווית חמצן הליום.

הפרעות מטבוליות שנצפו באזורי מוח שונים של חולדות HSD

הניתוח הרב-משתני והאנליזה החד-משתנית שהוזכרו לעיל תוך שימוש בגובה הדלי של מטבוליטים בקבוצות השונות סיפקו צינור עבודה נהדר לזיהוי מטבוליטים מבחנים החושפים את השינויים המטבוליים הנוירולוגיים הפוטנציאליים הקשורים לאירועי HSD. AMP, FMA, Nic ו-Phe מוגברים וירידה ב-Ala, Asn, Car, Cho, Cyt, GABA, GSH, Ino, Lac, Pcho, Phe, Tyr, Ura ואורי נמצאו ברקמת הקורטקס של ה-HSD קבוצה בהשוואה לקבוצת CON (איור 5A, טבלה 1). בינתיים, בהיפוקמפוס, גם Ala, GSH, Lac, Uri, Cyt, GABA, Tyr ואורה ירדו ו-AMP עלה בקבוצת HSD, כפי שעשו בקורטקס. יתרה מזאת, ה-Thr המווסת מעלה וה-Gly, ATP, Tau, Imp, Suc, Asc ו-DMA המווסתים מטה באו לידי ביטוי בתמציות ההיפוקמפוס של קבוצת HSD ביחס לבקרות (איור 5B, 5D, טבלה 1). בהשוואה לקבוצת CONS, התוכן של Cyt, GABA, Ura, Cho ו-Thr ירד גם הוא כפי שירד בקורטקס ובהיפוקמפוס. בנוסף, רמות מוגברות של חומצות אמינו מסועפות (BCAAs, כולל Leu, Ile, Val), ו-Lys וירידה ברמות של Gln, NAA, NAD plus , NADP plus , Asp, סדרה של מטבוליטים של ATP, Tau, IMP, ו-Suc, שגם היא ירדה בהיפוקמפוס, ועוד שני מטבוליטים, Ino ו-Pcho, שגם הם ירדו בקורטקס, נצפו ברקמות הסטריאטום של חולדות מקבוצת HSD (איור 5C, 5D, טבלה 1). מטבוליטים רבים כאלה תמיד מצביעים על מסלולים מולקולריים מעורבים עם מורכבות וגיוון. ערכי הדלי האינטגרליים של מטבוליטים מבחנים כומתו, ושינויים מובהקים סטטיסטית של הריכוזים שלהם בין קבוצות הליוקס-רוויה-היפרבריות-נחשפות וקבוצות הביקורת מסוכמים בטבלה S2 ובטבלה 2 עבור שלושת אזורי המוח.

איור 4. חלקות ניקוד של ניתוח מבחנים בריבועים קטנים (OPLS-DA) וחלקות בדיקת תמורה המבדילות את ההשפעה של 400 msw חשיפה לרווית הליוקס על ספקטרום 1H NMR מקבוצות ביקורת בקורטקס (CONC, n=8, HSDC, n=8, A ו-A') (R2X=0.38; Q2=0.46), היפוקמפוס (CONH, n {{12} }, HSDH, n=8, B ו-B') (R2X=0.37; Q2=0.43), וסטריאטום (CONS, n=8, HSDS, n=8, C ו-C') (R2X=0.39; Q2=0.40). הערכים של פרמטר Q2 בחלקות הניקוד של OPLS-DA, שהיו שווים או גדולים מ-0.40, יחד עם ערכי Q2 של הנקודה השמאלית ביותר במודלים המתומרים היו גדולים מכל ערכי ה-Q2 המותאם של הנקודות הימניות (תמורה). בדיקה 80 פעמים), מה שמצביע על כך שהמודלים של OPLS-DA שנקבעו היו תקפים.

Pcho, שגם ירד בקליפת המוח, נצפתה ברקמות הסטריאטום של חולדות מקבוצת HSD (איור 5C, 5D, טבלה 1). מטבוליטים רבים כאלה תמיד מצביעים על מסלולים מולקולריים מעורבים עם מורכבות וגיוון. ערכי הדלי האינטגרליים של מטבוליטים מבחנים כומתו, ושינויים מובהקים סטטיסטית של הריכוזים שלהם בין קבוצות הליוקס-רוויה-היפרבריות-נחשפות וקבוצות הביקורת מסוכמים בטבלה S2 ובטבלה 2 עבור שלושת אזורי המוח.

איור 5. מפת חום וחלקות מתאם סטטיסטי הנגזרות מערכי הדלי של המטבוליטים המפלים מהקורטקס (דגימות A, A', HSDC נמצאות בפאנל העליון ו-CONC נמצא בפאנל התחתון), היפוקמפוס (B, B', HSDH הקבוצה שוכנת בפאנל העליון ו-CONH שוכנת בפאנל התחתון), ורקמות הסטריאטום (דגימות C, C', HSDS שוכנות בפאנל העליון ו-CONS נמצא בפאנל התחתון) של חולדות HSD ו-CON. מטבוליטים במפת החום מאורגנים על ידי מקבץ היררכי המבוסס על הדמיון הכללי בדפוסי הרמה. דיאגרמת Venn (D) הממחישה חפיפה של מטבוליטים בין השוואות HSDC-CONC, HSDH-CONH ו-HSDS-CONS.

ניתוח מתאם מטבוליטים

הקשר בין או בין מטבוליטים היה כה מורכב באיור 5A'-5C'. עבור מטבוליטי האנרגיה, המתאמים החיוביים ל-Lac לעומת Ala ב-HSDC, AMP לעומת IMP ב-HSDH, ATP לעומת Pcho ב-HSDS, Suc לעומת GABA/Gln/Tyr/NAA ב-HSDS, והמתאמים השליליים עבור Lac לעומת Thr ו- GSH לעומת Suc ב-HSDH, Suc לעומת Val ב-HSDS היו נוכחים בחלקות המתאם של המטבוליטים. עבור הנוירוטרנסמיטורים, המתאמים החיוביים עבור GABA לעומת רכב ב-HSDC, GABA לעומת Cho ב-CONH ו-GABA לעומת Suc/Ino/Gln ב-HSDS היו נוכחים בחלקות המתאם של המטבוליטים. המתאמים השליליים של GABA לעומת FMA ב-CONC ו-GABA לעומת NAA/Ura/NADP פלוס ב-CONS היו נוכחים בחלקות המתאם של המטבוליטים. עבור המטבוליטים הקשורים למתח חמצוני, המתאמים חיובייםעבור GSH לעומת Asn ב-HSDC וב-CONC, Tau לעומת Lac ב-HSDH, Tau לעומת Suc/Ala ב-CONH, המתאמים השליליים עבור GSH לעומת Suc ב-HSDH, Tau לעומת Thr ב-HSDH היו קיימים במתאם המטבוליטים עלילות.

ניתוח מסלול מטבולומי

ניתוח מסלול כמותי המורכב מניתוח העשרת מסלולים והשפעת מסלול מטופולוגיית המסלול גילה מודולציות הנגרמות על ידי HSD לסדרה של מסלולים מטבוליים בעלי משמעות סטטיסטית ביותר. ציוני השפעת הנתיב, יחד עם שיעור גילוי כוזב (FDR) וערכי p, מתוארים באיור 6. נתיבים נחשבו מועשרים באופן משמעותי אם ערכי p היו נמוכים מ-0.05; המטבוליטים (המכות) בעלי פרופיל ביחס לסך המטבוליטים של המסלול (סטטוס התאמה) היו גבוהים מ-1; וציוני ההשפעה (המצביעים על ההשפעה של מטבוליטים מושפעים באופן משמעותי במסלול בהתבסס על מדד טופולוגיית רשת של מרכזיות ביניים יחסית) היו גבוהים מ-0. המסלולים בקליפת המוח (איור 6A) עם ערך ההשפעה המטבולית הגדול ביותר היופנילאלנין, טירוזין, וביוסינתזה של טריפטופן>חילוף חומרים של פנילאלנין> חילוף חומרים של פירמידין > חילוף חומרים של אלנין, אספרטאט וגלוטמט. המסלולים בהיפוקמפוס (איור 6B) עם ההשפעה המטבולית הגדולה ביותר היו ביו-סינתזה של פנילאלנין, טירוזין וטריפטופן > מטבוליזם של גלוטתיון > מטבוליזם של גליצין, סרין ותראונין > מטבוליזם של פורין > חילוף חומרים של פירמידין > מטבוליזם של אלנין, אספרטאט > וחילוף חומרים של גלונומט. . המסלולים בסטריאטום (איור 6C) עם ההשפעה המטבולית הגדולה ביותר היו מטבוליזם של אלנין, אספרטאט וגלוטמט > מטבוליזם של ניקוטינט וניקוטינמיד > מטבוליזם של פורין.

תבקש עוד:

דוא"ל:wallence.suen@wecistanche.com

ווטסאפ/טלפון: פלוס 86 15292862950