ליקופן ו-N-אצטילציסטאין מספקים הגנה מפני נזקים הנגרמים על ידי ציספלטין

איש קשר: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 דוא"ל:audrey.hu@wecistanche.com

השפעות הגנה סינרגיסטיות של ליקופן ו-N-אצטילציסטאין נגד רעילות כבד הנגרמת על ידי ציספלטין בחולדות

Asmaa Elsayed, Ashraf Elkomy & et al.

מבוא

ציספלטין(CP) היא אחת התרופות הכימותרפיות הנפוצות ביותר. למרות שציספלטיןבעל פעילות אנטי-נאופלסטית ידועה כנגד גידולים ממאירים מרובים, השפעות שליליות, בעיקר עקב השפעות חמצון ואפופטוטיות מוגברת של תאים ברקמות שונות, מגבילות את מתן התרופה-2. CP (ציספלטין) הוא חומר ציטוטוקסי פעיל ביותר בטיפול בסרטן; עם זאת, רעילות כליות מגבילה את השימוש בו4. CP (ציספלטין) מתן מוביל לנזק בכבד עקב חמצון שומנים וחמצון המוביל לשינויים בסמנים ביולוגיים של הכבד ובאנזימים נוגדי חמצון³. מחקרים רבים דיווחו על CP (ציספלטין) רעילות כבד- ונגרות נפרוטוקסיות10-14.

ליקופן (LP)הוא קרוטנואיד אציקלי (נגזרת של ויטמין A) עם פעילות עוצמתית ויעילה לניקוי רדיקלים חופשיים והשפעות אנטי דלקתיות, ממריץ חיסון, אנטיביוטי ואנטי מוטגני15,16, LP (ליקופן) הוא פיגמנט אדום שמופיע בשפע גבוה בעגבניות ובפירות אדומים אחרים. המבנה הכימי של הליקופן מכיל קשרים כפולים רבים שיש להם תפקיד מרכזי בסוג החמצן התגובתי (ROS)17 צריכת עגבניות או מוצרי עגבניות קשורה לעתים קרובות עם עלייה ברמות הליקופן במחזור הדם וירידה בנזקים חמצוניים לשומנים, חלבונים ו-DNA18. LP (ליקופן), נוגד חמצון טבעי, בעל פעילות נוגדת חמצון כנגד מספר פציעות רקמות המתווכות באמצעות מתח חמצוני9. ליקופן במבחנה, יעילות נוגדת החמצון חזקה עד פי 100 מאשר ויטמין E. בנוסף, LP (ליקופן) יש פעילות מונעת כימותרפיה נגד צורות מסוימות של סרטן20 הפעילות המגנה של LP (ליקופן) נגד נזקים כבדיים המושרים על ידי כימותרפיה משך פעילות מחקרית ניכרת בשנים האחרונות.

N-אצטילציסטאין (NAC)הוא תוסף תרופתי ותזונתי בשימוש נפוץ כחומר מוקוליטי לטיפול במינון יתר של אקמול1. NAC (N-אצטילציסטאין) הוא פרו-תרופה של L-cysteine, מבשר לגלוטתיון (GSH). מאזן החמצון-נוגד החמצון יכול להיות מווסת על ידי NAC (N-אצטילציסטאין) ויסות רמות GSH בתאים, עיכוב חמצון שומנים וניקוי ROs2,23. NAC מסוגלת לשחזר את האיזון הפרו-אוקסידנטים/נוגדי החמצון ונמצאת בשימוש נפוץ כנוגד חמצון יעיל נגד עקה חמצונית הן in vivo והן in vitro2425. CP (ציספלטין) שימש קלינית למחלות רבות כקולטור מתכות כבדות כדי להגן מפני עקה חמצונית ולמנוע פגיעה בתאים26. NAC (N-אצטילציסטאין) יש תכונות רפואיות מועילות, כולל עיכוב של סרטן, גידול גידולים, מוטגנזה, גדילת גידול וגרורות27.

המטרה של עיצוב זה הייתה לקבוע את השפעות ההגנה של LP (ליקופן) ו/או NAC (N-אצטילציסטאין) נגד רעילות בכבד וכליות הנגרמת על ידי CP (ציספלטין) בחולדות על ידי חקירת סמני הלחץ הביוכימיים, החמצוניים והביטוי של קספאז-3.

Cistanche יכול לטפל בתפקוד כליות לקוי

חומרים ושיטות

כימיקלים. CP (ציספלטין) (מספר CAS:15663-27-1), (מתן פרנטרלי 50 מ"ג/מ"ל) נקנה מ-EIMC Pharmaceuticals Company(Cairo,Egypt).LP (ליקופן) (מספר CAS:502-65-8) נקנה מחברת Sigma Aldrich (Saint Louis, MO, ארה"ב).NAC (N-אצטילציסטאין) (מספר CAS:616-91-1) נקנה מחברת South Egypt Drug Industries Company(SED-ICO)(עיר 6 באוקטובר, מצרים). הערכות האנליטיות נקנו מחברת ביו-דיאגנוסטיקה (גיזה, מצרים).

השפעות של תמצית CISTANCHE: הגנה על הכבד

תוצאות

ציספלטיןעשה אינדוקציה לרעילות כבד ולרעילות נפרו-טוקסית, המעידה על ידי רמות גבוהות בסרום של סמנים ביולוגיים של הכבד והכליות (טבלה 1). פעילויות AST, ALT ו-ALP וריכוז של קריאטינין, אוריאה, כולסטרול, טריגליצרידים וכולסטרול LDL עלו באופן משמעותי תוצאה של CP (ציספלטין) טיפול בהשוואה לאלו של חולדות הביקורת. כמו כן, CP (ציספלטין) הפחיתו את ריכוזי החלבון הכוללים, אלבומין וכולסטרול HDL בסרום. מצד שני, המקרה שונה כאשר הפרמטרים הללו הופחתו משמעותית בחולדות שטופלו ב-CP עם LP (ליקופן), NAC (N-אצטילציסטאין), או טיפול משולב (LP (ליקופן) ו-NAC (N-אצטילציסטאין)) בהשוואה לקבוצת ה-CP. יש לציין, פרמטרים אלו ירדו באופן משמעותי כאשר חולדות שיכרון CP טופלו בשני LP(ציספלטין) ו-NAC (N-אצטילציסטאין) ביחס לטיפול עם LP (ליקופן) או NAC (N-אצטילציסטאין) לבד. הערכים היו נמוכים משמעותית בהשוואה לביקורות. לפיכך, שילוב של LP ו-NAC הצביע על הגנה טובה יותר מנזק כבדי הנגרם על ידי CP מאשר לבד.

טבלה 1. השפעות של LP, NAC ו/או CP על פרמטרים ביוכימיים בסרום (n=7). הנתונים מבוטאים כממוצע±SE (n=7).אותיות עיליות שונות באותה שורה מציינות מובהקות סטטיסטית ב-P פחות או שווה ל-0.05.ציספלטין(CP) במינון בודד של 7.5 מ"ג/ק"ג (IP); ליקופן (LP) במינון של 10 מ"ג/ק"ג; N-אצטילציסטאין (NAC) במינון של 150 מ"ג/ק"ג; אספרטאט אמינוטרנספראז (AST); אלנין aminotransferase (ALT); פוספטאז אלקליין (ALP); ליפופרוטאין בצפיפות גבוהה (HDL); ליפופרוטאין בצפיפות נמוכה (LDL).

ההשפעות של CP (ציספלטין) שיכרון וטיפול עם LP (ליקופן), NAC (N-אצטילציסטאין), והשילוב שלהם ב-MDA, מופחת גלוטתיון ואנזימים נוגדי חמצון ברקמות הכבד והכליות מוצגים בטבלאות 2 ו-3, בהתאמה. רמות ה-MDA עלו באופן משמעותי ורמות CAT, SOD ו-GSH בכבד ירדו באופן משמעותי בחולדות שיכורות CP בהשוואה לחולדות הביקורת. LP (ליקופן) ו-NAC (N-אצטילציסטאין) טיפולים החלישו את ההשפעות של CP (ציספלטין) ב-MDA ברקמת הכבד, CAT, SOD ו-GSH, אך ערכי y אלה עדיין היו שונים באופן משמעותי מערכי הביקורת. LP משולב (ליקופן) ו-NAC (N-אצטילציסטאיןטיפול שיפר משמעותית את הנזק החמצוני שנגרם על ידי CP ברקמות הכבד והכליות בהשוואה ל-LP (ליקופן) או NAC (N-אצטילציסטאין) טיפולים לבד. תוצאות אלו אושרו על ידי התוצאה של היסטופתולוגיה.

טבלה 2. השפעות של LP, NAC ו/או CP על פרמטרים נוגדי חמצון ברקמות הכבד (n=7).הנתונים מבוטאים כממוצע±SE (n{{0}}). אותיות עיליות שונות באותה שורה מצביעות על מובהקות סטטיסטית ב-P פחות או שווה ל-0.05.ציספלטין(CP) במינון בודד של 7.5 מ"ג/ק"ג (IP); ליקופן (LP) במינון של 10 מ"ג/ק"ג; N-אצטילציסטאין (NAC) במינון של 150 מ"ג/ק"ג. מלונדיאלדהיד (MDA); קטלאז (CAT); superoxide dismutase (SOD); גלוטתיון מופחת (GSH).

טבלה 3. השפעות של LP NAC, ו/או CP על פרמטרים נוגדי חמצון ברקמות הכליות. הנתונים מבוטאים כממוצע ±SE (n=7).אותיות עיליות שונות באותה שורה מציינות מובהקות סטטיסטית ב-P פחות או שווה ל-0.05.ציספלטין(CP) במינון בודד של 7.5 מ"ג/ק"ג (IP);;Lvcopene (LP) במינון של 10 מ"ג/ק"ג:N-אצטילציסטאין (NAC) במינון של 150 מ"ג/ק"ג. מלונדיאלדהיד (MDA); catalase(CAT); superoxide dismutase (SOD); מופחת גלוטתיון (GSH).

ממצאים היסטופתולוגיים הראו הפטוציטים מאורגנים בדרך כלל היוצרים מיתרי כבד מקרינים סביב הווריד המרכזי, עם רקמות כבד תקינות כולל סינוסואידים בדם ומבני פתח שנצפו בחתכי רקמה ממלח בקרה, LP (ליקופן), ו-NAC (N-אצטילציסטאין) חולדות שטופלו. לעומת זאת, ראינו שינויים אלטרנטיביים חמורים בפרנכימה הכבדית, כולל אובדן סידור תקין של מיתרי הכבד, וריד מרכזי צפוף וסינוסים, ציטופלזמה מוקצפת ואקוולציה, ושינויים ניווניים ניכרים הקשורים לפיקנוזה גרעינית חמורה שהורגשה בקטעים של CP. (ציספלטין) חולדות שטופלו. מעניין, LP (ליקופן), NAC (N-אצטילציסטאין), ושילובם שיחזר במיוחד את הארכיטקטורה הכבדית הרגילה (איור 1).

בצד השני, איור 2 הראה את הארכיטקטורה התקינה של קליפת הכליה, גוף הכליה, הגלומרולוס, הצינוריות המפותלת הפרוקסימלית והצינוריות המפותלת הדיסטלית של חולדות מהביקורת, LP (ליקופן), ו-NAC (N-אצטילציסטאין) קבוצות. לעומת זאת, CP (ציספלטיןחולדות שיכורות הראו נגעים נפרוטיים חמורים הקשורים לשינויים ניווניים ניכרים בתוך רירית האפיתל הצינורית הכלייתית, כלי דם בין-כלייתיים צפופים, ניוון הידרופי, גרעינים פיקוטיים בתאי אפיתל וחומרי גבס היאליניים בלומן של רוב הצינוריות. טיפול עם LP (ליקופן), NAC (N-אצטילציסטאין), או השילוב שלהם מנע את השינויים ההיסטופתולוגיים בכליות שנגרמו על ידי CP (ציספלטין).

בנוגע לתוצאות של האימונוהיסטוכימיקל, היה ויסות-על דרמטי של קספאז-3 ביטוי ציטופלזמי או גרעיני ברקמות הכבד והכליות שנגרם על ידי CP (ציספלטין)(איור 3 ו-4, בהתאמה). בצד השני, ביטויי caspase-3 בעלי ויסות מעט, בניגוד לקבוצת הביקורת נמצאו ב-LP (ליקופן) בתוספת CP ו-NAC (N-אצטילציסטאין) פלוס קבוצות CP. יתר על כן, ה-CP (ציספלטין) וויסות העל של קספאז-3 בתיווך הופחת בחדות על ידי הטיפול המשולב של LP (ליקופן) ו-NAC (N-אצטילציסטאין).

השפעות של תמצית CISTANCHE: אנטי דלקת

דִיוּן

CP (ציספלטין) מעורר השפעות אנטי סרטניות על ידי אינטראקציה עם DNA והשראת מוות תאי מתוכנת. מחקרים מרובים במבחנה הדגימו את ההשפעות הציטוטוקסיות של CP בשורות תאים שונות, אך בוצעו רק כמה מחקרים in vivo45,32-36. הממצאים שלנו עולים בקנה אחד עם תוצאות in vivo של מחקרים אחרים, כולל מעורבות של עקה חמצונית ומנגנונים אפופטוטיים בנזק לכבד המושרה על ידי CP והשימוש הפוטנציאלי ב-LP (ליקופן) ו-NAC (N-אצטילציסטאין) כחומרי הגנה מפני פגיעה הנגרמת על ידי CP.

פעילות מוגברת של אנזימי כבד מצביעה על דליפה תאית ואובדן שלמות הפטוציטים תפקודית; אנזימי הכבד משתחררים לזרם הדם כאשר ממברנות הפלזמה של הפטוציטים נפגעות1, במחקר זה, CP (ציספלטיןרעילות הכבד הנגרמת על ידי תחליפים משמעותיים באנזימי כבד בסרום (AST, ALT ו-ALP). CP (ציספלטין) נקלט בכבד ומצטבר בהפטוציטים, מה שגורם לנזק תאי שבסופו של דבר מוביל להגברת אנזימי הכבד במחזור הדם*. בנוסף, CP העלה את רמות הקריאטינין והאוריאה, בהסכמה למחקרים קודמים,17,37. רמות מוגברות של קריאטינין ואוריאה נגרמות כתוצאה משיעור מופחת של סינון גלומרולרי. יתרה מכך, Cayer et al.38 ייחסו את הרעילות של הכבד והכליה הנגרמת על ידי CP לרדיקלים חופשיים הנוצרים בתאי הכבד והכליה, וכתוצאה מכך לחמצן של השומנים ובעקבות כך מוביל לעקה חמצונית הפוגעת בתאים.

מתן CPV גרר ירידה משמעותית בסך החלבון והאלבומין במחזור הדם. תוצאה זו הייתה בהסכמה עם אבוזינאדה ואחמד3. בעקבות נזק לכבד, CP (ציספלטין) שיכרון מפחית את סינתזת החלבון ומשנה את השלמות התפקודית של הכליה, מה שמוביל לפרוטאינוריה ובסופו של דבר לירידה ברמות החלבון במחזור40.

ניהול CP (ציספלטין) הביאו לעלייה משמעותית בכולסטרול במחזור הדם, בטריגליצרידים ובכולסטרול LDL, ולירידה בכולסטרול HDL. הכבד ממלא תפקיד חיוני בוויסות רמות הכולסטרול בפלזמה. לפיכך, כאשר תפקוד לקוי של הכבד נגרמת על ידי טיפול תרופתי, רמות הכולסטרול הכולל בסרום (TC) ורמות הכולסטרול LDL עולות41. העלייה המשמעותית ברמות הסרום של TC, טריגליצרידים (TG) ו-LDL-כולסטרול בעקבות חשיפה של חולדות לציספלטיןככל הנראה נובע מההשפעות השליליות של CP, המובילות לתפקוד לקוי של הכבד ופגיעה בחילוף החומרים של שומנים, בהתאם לממצאים של Akindele et al.42. הכבד מסנתז TG והופך TG לכולסטרול ליפופרוטאינים בצפיפות נמוכה מאוד (VLDL) להובלה לרקמות היקפיות ופגיעה בסינתזת VLDL-C גורמת לרמות גבוהות של TG3. התאוששות ניכרת מנזק CP נצפתה ב-LP (ליקופן) ו-NAC (N-אצטילציסטאיןקבוצות שטופלו ב-). בנוסף, NAC (N-אצטילציסטאין) ו-LP (ליקופן) יש השפעות היפוליפידמיות28,44.

לגבי הפרמטרים של עקה חמצונית/נוגדי חמצון, רמות MDA (עלייה בחמצן שומנים) עלו באופן משמעותי ונוגדי החמצון (CAT, SOD ו-GSH) ירדו באופן משמעותי ברקמות הכבד והכליות לאחר CP (ציספלטין) טיפול. תוצאות אלו תואמות את עבד אל-קאדר ותהל, עבד אל-ראזק וחב' 12, ואלקומי וחב'!. יצירת ROS כגון אניוני סופראוקסיד ורדיקלי הידרוקסיל גורם לתיווך של עקה חמצונית ודלדול של נוגדי חמצון בפלזמה39.

LP (ליקופן) מעכב חמצון שומנים על ידי תגובה ישירה עם ROS שונים ועל ידי מניעת נזק מיטוכונדריאלי הנגרם על ידי CP (ציספלטין). התוצאות שלנו מצביעות על כך ש-LP (ליקופן) מפריע לחמצון של שומני הממברנה המיטוכונדריאלית. LP (ליקופן) מעכב חמצון שומנים כמפרק שרשרת, שולל רדיקלים חופשיים ומאפנן נוגד חמצון 45.

ההשפעות המועילות של NAC (N-אצטילציסטאין) מיוחסים לתפקידו כגורר רדיקלים חופשיים חזק. קבוצת הסולפהדריל החופשית של NAC יכולה להגיב ישירות עם תרכובות אלקטרופיליות, כגון רדיקלים חופשיים45. NAC גם ממריץ את סינתזת GSH ובכך ממריץ פעילות נוגדת חמצון אנדוגנית². פעילות נוגדת החמצון הישירה וגירוי של פעילות נוגדת חמצון אנדוגנית מסבירים את היכולת של NAC (N-אצטילציסטאין) כדי לשחזר הומאוסטזיס חמצוני בכבד ובכליות במחקר שלנו. ניקוי הרדיקלים החופשיים של NAC (N-אצטילציסטאין) יכול למנוע הפרעה בזרימת הדם הכלייתית לאחר חסימת הווריד הנבוב התחתון ולמנוע את ההתנגדות של כלי הדם הכלייתיים המופחתים הנגרמת על ידי CP (ציספלטין) 48. ההשפעה של NAC (N-אצטילציסטאין) על זרימת הדם הכלייתית ותנגודת כלי הדם בחולדות שיכורות CP יכולים להסביר את השיפור בתפקוד הכלייתי שנצפה במחקר זה.

איור 1, שינויים היסטופתולוגיים בקטעי כבד.

(א)-(ג) ארגון נורמלי של מיתרי הכבד (חץ עבה), הסינוסאיד בדם (חצים דקים) והווריד המרכזי (CV) של הכבד בבקרה (א), LP (ליקופן)(ב), ו-NAC (N-אצטילציסטאין)(ג) קבוצות.

CP (ציספלטיןשינויים הנגרמות על ידי ) בכבד כוללים שינויים ניווניים חמורים, כגון אובדן של סידור מיתרי כבד תקין, ואקוולציה (חצים דקים), מראה קצף (חץ עבה) וגרעינים פיקנוטים של כמה הפטוציטים (S).

(ה) CP (ציספלטין) אובדן המושרה של ארכיטקטורה תאית תקינה של מיתרי הכבד עם תנועות כבד חמורות (חץ עבה), סינוס דם מורחב (חץ דק) וגרעינים פיקנוטיים של הפטוציטים (חץ קצר).

(ו) שינויים היסטולוגיים בכבד ב-LP (ליקופן) בתוספת CP (ציספלטין) קבוצה. השפעות מתונות בכבד כוללות כלי דם צפופים (CV), סינוסאיד דם מורחב (חץ עבה) ועיבוי של כרומטין גרעיני של הפטוציטים (חץ דק).

(ז) שינויים היסטולוגיים בכבד ב-NAC (N-אצטילציסטאין) בתוספת CP (ציספלטין) קבוצה. השפעות מתונות בכבד כוללות CV עמוס, ניוון הידרופי (חצים דקים), וציטופלזמה מפורקת של הפטוציטים (חץ עבה).

(ח) שינויים היסטולוגיים בכבד ב-LP (ליקופן) בתוספת NAC (N-אצטילציסטאין) בתוספת CP (ציספלטין) קבוצה. תופעות קלות בכבד כוללות כלי דם מורחבים （CV） וסינוסי דם (חצים). סרגל קנה מידה=50 מיקרומטר.

בנוסף לפעילות הסרת ROS, LP (ליקופן) ו-NAC (N-אצטילציסטאין) שיחזר את הפעילויות של SOD ו-CAT ואת רמות ה-GSH ב-CP (ציספלטין) חולדות שיכורות. לכן, אנו ממליצים בחום ש-LP (ליקופן) ו/או NAC (N-אצטילציסטאיןשיפורים בתיווך של הפרמטרים הביוכימיים בסרום שנבדקו במחקר זה היו מתווכים על ידי דיכוי ROS ווויסות עלייה של מנגנוני נוגדי חמצון כנגד CP (ציספלטין) פגיעה חמצונית הנגרמת.

LP (ליקופן) מורכב מאטומי פחמן ומימן (CHs6) עם קשרים כפולים רבים המפחיתים את האנרגיה הדרושה לביטול מיקום אלקטרונים המספקים מקור טוב לתרומת אטומי מימן הנדרשת לייצוב רדיקלים חופשיים. מאז LP (ליקופן) הוא ליפופילי, הוא משולב עם שכבת השומנים הדו-שכבתית של קרום התא המאפשרת להחדיר אטום H מ-LP (ליקופן) במקום חומצות שומן בלתי רוויות עוצרות CP (ציספלטיןחמצון שומנים המושרה על ידי ) הנראה על ידי הפחתה דרסטית ב-MDA49.

איור 2. שינויים היסטופתולוגיים בחתכי כליות.

(א)-(ג) ארכיטקטורה תקינה של קליפת הכליה, גוף הכליה (חץ), גלומרולוס (G), צינוריות מפותלת פרוקסימלית (P), וצינוריות מפותלת דיסטלית (D) בשליטה (א), LP (ליקופן) (1ב), ו-NAC (N-אצטילציסטאין)(ד) קבוצות.

(ד) CP (ציספלטין) שינויים ניווניים חמורים שנגרמו בציפוי האפיתל של צינור הכליה (f), כלי דם בין-כלייתיים צפופים (I), ניוון הידרופי (חץ דק) וגרעינים פיקנוטים של תאי אפיתל (חץ עבה).

(ה) CP (ציספלטין) אובדן המושרה של ארכיטקטורה נורמלית באבוביות הכליה, עם חומרים יצוקים הילינים בלומן של רוב הצינוריות (חצים עבים), ציטופלזמה מפורקת בחלק מתאי אפיתל (ד), ותאים מפורקים (חץ דק).

(ו) שינויים היסטולוגיים בכליה ב-LP (ליקופן) בתוספת CP (ציספלטין) קבוצה. השפעות מתונות באבוביות הכליה ובתאי אפיתל מנוונים ונשמטים (חץ עבה).

(ז) שינויים היסטולוגיים בכליה ב-NAC (N-אצטילציסטאין) בתוספת CP (ציספלטין) קבוצה. השפעות מתונות כוללות כלי דם בין-כליות צפופים (C), חומרי גבס היאליניים בלומן של כמה צינוריות (h), ונמק בחלק מתאי אפיתל (e).

(ח) שינויים היסטולוגיים בכליה ב-LP (ליקופן) בתוספת NAC (N-אצטילציסטאין) בתוספת CP (ציספלטין) קבוצה. השפעות קלות כוללות חומרים חלבוניים בלומן של כמה צינוריות (חצים עבים). סרגל קנה מידה= 50 אממ.

NAC (N-אצטילציסטאין) הוא תורם תיול בעל תכונות נוגדות חמצון. זהו מקור מצוין לקבוצות sulfhydryl והוא הופך in vivo למטבוליטים הממריצים את ייצור הגלוטתיון (GSH), ובכך שומרים על רמות GSH תוך תאיים, מגבירים את ניקוי הרעלים ומתפקדים ישירות כגורר רדיקלים חופשיים50.

התצפיות ההיסטולוגיות והאימונוהיסטוכימיות של המחקר הנוכחי היו בהרמוניה ואישרו את השינויים של הפרמטרים הביוכימיים והחמצנים/נוגדי חמצון בקרב קבוצות הניסוי. CP (ציספלטין) הטיפול הראה השפעות נפרוטוקסיות ניכרות, כולל ואקווליזציה ציטופלזמית בתאי אפיתל צינוריים ואפופטוזיס כפי שדווח על ידי Alhoshani וחב'.4. שינויים ניווניים חמורים באבובות הכליה התרחשו לאחר CP (ציספלטיןטיפול, כולל ניוון הידרופי, גרעינים פיקנוטיים, שלפוחיות ציטופלזמיות מוגברות, ואקווליזציה ציטופלזמית, נמק ואפופטוזיס של תאים צינוריים, ופילוף של תאי אפיתל נמקיים, מילוי לומן הצינורי ויצירת גבס היליני. תוצאות אלו תואמות את התוצאות של Perse ו-Veceric-Haler51.

איור 3. שינויים בביטוי קספאז-3 בכבד.

(א)-(ג) הראו את התגובות החיסוניות השליליות ב-Control(a), LP (ליקופן)(ב),ו-NAC (N-אצטילציסטאין)(ג) קבוצות.(ד) ו-(ה)CP (ציספלטיןשינויים המושרים על ידי ) המראים תגובה חמורה של צביעה חיסונית.

(ו) צביעת Caspase ב-LP (ליקופן) בתוספת CP (ציספלטיןהקבוצה הראתה צביעה חיסונית בינונית. (ז) צביעת קספאז ב-NAC (N-אצטילציסטאיןקבוצת ) פלוס CP הראתה צביעה חיסונית מתונה.

(ח) צביעת Caspase ב-LP (ליקופן) בתוספת NAC (N-אצטילציסטאין) בתוספת CP (ציספלטיןהקבוצה הראתה צביעה חיסונית קלה.

סרגל קנה מידה= 50 מיקרומטר. CP (ציספלטין) טיפול שגרם לביטוי של קספסות-3, מה שמרמז על התרחשות של אפופטוזיס של תאי אפיתל צינורי.

תוצאות אלו מאששות את התוצאות של Liu et al.52 ושל Miller et al.53, שהדגימו כי CP (ציספלטין) הומר מטבולית לרעלן חזק יותר, שגרם לפציעת DNA ולנזק ל-DNA המיטוכונדריאלי ולנשימה.

שינויים אלה המושרים על ידי רעלנים מובילים להפעלה של מסלולים אפופטוטיים והתחלת תגובות דלקתיות.

ה-CP (ציספלטיןרעילות הכבד הנגרמת על ידי ) , המסומנת על ידי התרחבות סינוסואידלית, גודש של כלי דם וארכיטקטורה לא מאורגנת של אונות הכבד, תואמות להשפעות הנגרמות על ידי CP שדווחו על ידי Elkomy et al.1.

NAC (N-אצטילציסטאין) לא היו תופעות לוואי בכבד או בכליות, כפי שבאה לידי ביטוי בהיסטולוגיה התקינה ברקמות אלו. הנתונים שלנו אישרו שטיפול עם NAC (N-אצטילציסטאין) הייתה השפעה מגנה מפני רעילות נפרוטוקסיות ורעילות בכבד, המצוינת על ידי הנחתה של ה-CP (ציספלטיןשינויים ניווניים המושרים בכבד ובכליות. טיפול בחולדות עם LP (ליקופן) הפחית את ההשפעות הנפרוטוקסיות וההפטטוטוקסיות של CP (ציספלטין), כפי שעולה מממצאים היסטופתולוגיים מתונים בכבד ובכליות. שילוב של LP (ליקופן) ו-NAC (N-אצטילציסטאין) הייתה השפעה מניעתית גדולה נגד CP (ציספלטין) רעילות בכבד ורעילות נפרוטוקסית. החולדות שטופלו ב-LP (ליקופן) ו-NAC (N-אצטילציסטאין) לפני הטיפול ב-CP היו רק נגעים היסטופתולוגיים קלים של הכבד והכליה וביטוי קל של קספאז 3, המעיד על רמה נמוכה יותר של אפופטוזיס. תוצאות אלו תואמות את הממצאים של Jiang et al.54, אשר שקלו את LP (ליקופן) תרופה נוגדת חמצון המגנה על הכבד והכליות מנזק חמצוני הנגרם על ידי CP. תוצאות אלה תואמות גם עם עבד אל-ווהב וחב' 4, שהוכיחו כי NAC (N-אצטילציסטאין) מוחלש את הרעילות הנפרוטית הנגרמת על ידי CP והחזיר תפקוד תקין של הכליות, ועם De Vries7, שהצביע על כך ש-NAC מקדם ניקוי רעלים בכבד. NAC עשויה גם להפחית את ריכוז ה-CP בכליה על ידי הגברת הפרשת הכליה ו/או מניעת הצטברותו ברקמת הכליה, כפי שדווח על ידי Appenroth. Zhao and Shichi" הוכיחו כי קבוצת הסולפהדריל החופשית יכולה להגיב ישירות עם תרכובות אלקטרופיליות, כגון רדיקלים חופשיים, ו-Yalcin22 הוכיחו כי NAC יכולה לפעול כתרופה נוגדת חמצון.

טיפול מקדים עם LP ו/או NAC מוגן מפני רעילות הפטורנלית הנגרמת על ידי CP, כפי שמוצג על ידי הפרמטרים הביוכימיים המשופרים, סמני הלחץ החמצוני, היסטופתולוגיה וביטוי קספאז-3. שילוב תזונתי של LP ו-NAC עשוי לשפר את יכולת ניקוי ROS17. הנתונים שלנו חשפו כי ניהול משותף של LP ו-NAC מעורר אפקט הגנה טוב יותר מפני עלבון CP מאשר תוספי תזונה בודדים שלהם.

Also, other natural products protected against hepatorenal toxicity induced by CP as Citrullus colocynthis, garlic oil>, thymoquinone3, ו-L-carnitine'.

איור 4, שינויים בביטוי קספאז הכליות-3. (א)-(ג) הראו את התגובות החיסוניות השליליות.

(א). קבוצת ביקורת המציגה צביעה חיסונית קלה מאוד של קספאז-3. מכתים Caspase-3 ב-LP (ליקופן)(ב) ו-NAC (N-אצטילציסטאין) (C) קבוצות הראו תגובה שלילית של צביעה חיסונית.

(ד) ו-(ה) קבוצה שטופלה עם CP (ציספלטין) הראה תגובה חיסונית חמורה. (ו) צביעת Caspase ב-LP (ליקופןקבוצת ) פלוס CP הראתה צביעה חיסונית מתונה.

(ז) צביעת קספאז ב-NAC (N-אצטילציסטאין) בתוספת CP (ציספלטיןהקבוצה הראתה צביעה חיסונית בינונית. (ח) צביעת Caspase ב-LP (ליקופן) בתוספת NAC (N-אצטילציסטאיןקבוצת ) פלוס CP הראתה צביעה חיסונית קלה.

סרגל קנה מידה =50 מיקרומטר. הכליה על ידי הגדלת הפרשתה הכלייתית ו/או מניעת הצטברותה ברקמת הכליה, כפי שדווח על ידי Appenroth 36. Zhao ו-Shichi7 הדגימו שקבוצת הסולףהידריל החופשית יכולה להגיב ישירות עם תרכובות אלקטרופיליות, כגון רדיקלים חופשיים, ו-Yalcin2 הוכיחו כי NAC (N-אצטילציסטאין) יכולה לפעול כתרופה נוגדת חמצון.

סיכום

בסך הכל, הנתונים שלנו מצביעים על כך ש-CP גורם לנזק משמעותי לרקמות בכבד ובכליות עקב עקה חמצונית ומנגנונים אפופטוטיים כפי שמעידים פרמטרים ביוכימיים משתנים ונגעים היסטופתולוגיים. השילוב של LP ו-NAC מציג השפעות הגנה מפני נזק מתיווך CP בכבד ובכליות.

השפעות של תמצית CISTANCHE: אנטי חמצון

הפניות

1, Elkomy, A, et al. L-Carnitine מפחית מתח חמצוני וחוסר ארגון של חוטי ביניים של שלד ציטוניים בציספלטיןרעילות כבדית-כלייתית הנגרמת בחולדות. חֲזִית. Pharmacol.11,574441(2020).

2. Sallam, AOet al. ההשפעות המשפרות של L-קרניטין נגדציספלטיןרעילות גונדאלית הנגרמת בחולדות. Pak Vet. 41(1),147-151 (2021).

3. Antunes, LMG, Darin, JDAC& Bianchi, MDLP השפעות הגנה של ויטמין C נגדציספלטיןרעילות נפרוטוקסיות ופרוקסידציה של שומנים בחולדות בוגרות: מחקר תלוי מינון. Pharmacol.Res.41(4), 405-411(2000).

4. אלחושני, א.ר.ו. אפקט מגן של תוסף רוטין נגדציספלטין-הנגרמת נפרוטוקסיות בחולדות. BMC Nephrol.18(1),194(2017).

5. Karale, S.& Kamath, JVEהשפעה של daidzein עלציספלטיןרעילות כבד וגרמה לכבד בחולדות ניסוי. Indian J. Pharacol.49(1), 49-54(2017).

6. Boroja, T.et al. תמצית מלוח קיץ (Satureja hortensis L.) פרופיל פיטוכימי ומודולציה שלציספלטין- כבד המושרה,

רעילות כליות ואשכים. Food Chem Toxicol. 118, 252-263 (2018).

7. Neamatallah, T., El-Shitany, NA, Abbas, AT, Ali, SS&Eid, BGHoney מגן מפניציספלטין-הנגרמת רעילות בכבד וכליות באמצעות עיכוב של ביטוי COX-2 בתיווך NF-KB והמסלול האפופטוטי BAX/Bcl-2/caspase-3 תלוי מתח חמצוני. Food Funct.9(7), 3743-3754(2018).

8. Mohamed, HE& Badawy, MMM אפקט מדוד של zingerone נגדציספלטיןאו רעילות הכבד הנגרמת על ידי קרינת y על ידי ויסות מיקוד מולקולרי. Appl Radiat Isot.154,108891(2019).

9. עבד אל-דיים, MMet al. השפעת שמן השום (Allium sativum) עלציספלטין-שינויים ביוכימיים והיסטופתולוגיים של הכבד בחולדות. מדע מוחלט. Environ.710,136338 (2020).

10. El-Kordy, EA השפעת סוראמין על נזק לתאי צינורית פרוקסימליים של הכליה הנגרמים על ידיציספלטיןבחולדות (מחקר היסטולוגי ואימונו-היסטוכימי). J. Microsc.Ultrastruct.7(4),153-164 (2019).

11. Abd El-Kader, M.& Taha,RI השפעות השוואתיות להגנה על הכליות של כורכומין ו-etoricoxib נגדציספלטין-גרמה לפגיעה חריפה בכליות בחולדות.Acta Histochem.122(4), 151534 (2020).

12. Abdel-Razek, EA, Abo-Youssef, AM&Azouz, AABenzbromarone מקלציספלטיןרעילות נפרו הכוללת ביטוי משופר של קולטן אלפא (PPAR-) המופעל על ידי פרוקסיזום. Life Sci.243,117272(2020).

13. Barakat,LAA,Barakat,N,Zakaria,MM&Khirallah,SMתפקיד מגן של ננו-חלקיקים של תחמוצת אבץ בפגיעה בכליות הנגרמת על ידיציספלטיןבחולדות.Life Sci.262,118503 (2020).

14. Sadeghi, H.et al. השפעה נוגדת חמצון והגנה של Stachys pilifera Benth מפני רעילות נפרו-טוקסית הנגרמת על ידיציספלטיןבחולדות. Food Biochem.44(5), e13190 (2020).

15. Müller, L., Fröhlich, K.& Böhm, V. פעילות נוגדת חמצון השוואתית של קרוטנואידים הנמדדת על ידי כוח נוגד חמצון מפחית ברזל (FRAP), מבחן הלבנה ABTS (TEAC), מבחן DPPH ומבחן סילוק רדיקלי פרוקסיל. Food Chem.129,139-148 (2011).