ניהול In Vivo של קונסורציית חיידקי המעיים משכפל את המטאבוטיפים של Urolithin A ו-B בדגם חולדה שאינו מייצר אורוליטיןⅠ

במשך עשרות שנים, צריכת ellagitannins (ETs) andlagic acid (EA) קשורה להשפעות ביולוגיות רבות, כולל פעילויות נוגדות חמצון, אנטי סרטניות, אנטי דלקתיות, אנטיבקטריאליות ואנטי-HIV.1 עם זאת, הספיגה והזמינות הביולוגית של ETs ו-EA הם גרועים מאוד. מחקרים קודמים בבני אדם מצאו שהפרשת EA ו-EA-O-glucuronide בשתן היא פחות מ-1% מהצריכה.2,3 עם זאת, בעוד שהספיגה של ET ו-EA נמוכה, הם עוברים חילוף חומרים נוסף על ידי המיקרוביוטה של ​​המעי הגס לאורוליתינים (Uros), אשר אחראים, לפחות חלקית, להשפעות המיטיבות של מזונות עשירים ב-ET ו(או) EA.1,4

לחץ לחומר משלשל

ראשית, EA משתחרר באמצעות הידרוליזה של קשרי אסטר של ET על ידי האנזים המכונה ellagitannase.5 EA עובר פירוק נוסף, מייצר 6H-dibenzo[b,d]pyran-6-one הנגזרת Uros. מפל תגובות זה מתחיל עם חיתוך טבעת לקטונים על ידי אנזים לקטונאז, וכתוצאה מכך חומצה לוטאית, אשר לאחר מכן עוברת דה-קרבוקסילציה לפנטהידרוקסי-אורו (Uro-M5). דה-הידרוקסילציה רצופה הופכת אותה ל-tetrahydroxy-Uros (Uro-D, Uro-E, ו Uro-M6) וטריהידרוקסי-Uros (Uro-C, UroM7 ו- Uro-G), כדי להניב סוף סוף דיהידרוקסי-Uros (Uro-A andisoUro-A) ומונו-הידרוקסי-Uro (Uro-B), שהאחרון זוהה בדרך כלל כאשר מייצרים גם isoUro-A.1

השונות הרחבה של פרופילים מטבוליים של Uro שזוהה בבני אדם לאחר צריכת מזונות עשירים ב-ET מצביעה על הבדלים בין-אישיים במיקרוביוטה של ​​המעי הגס האחראית לפירוק ET. )פנולים.6,9 אינטראקציה דו-כיוונית זו בין מיקרוביוטה במעיים ל(פולי)פנולים גרמה לקהילה המדעית לקבץ את האוכלוסייה על סמךפנוטיפ מטבולי (סוג מתכת) כדי להסביר את ההבדלים בהשפעות הפוליפנולים.10,11 ליתר דיוק, על פי מטבוליזם של ET ו-EA, ניתן לחלק אנשים ל-Urometabotypes (UMs) הקשורים להרכב המיקרוביום של המעי ולפונקציונליותם.7,8,12

שלושה UMs אנושיים (UM-A,UM-B, ו-UM-0) הקשורים לשלושה פרופילי ייצור Uro שונים תוארו באוכלוסיות מערביות ומזרחיות.13–15 בהקשר זה, פרטים מטאבוטיפ A (UM-A). מייצרים מספר Uros ביניים אבל רק Urolithin A(Uro-A), האורו הנספג העיקרי ב-UM זה, בסוף המסלול הקטבולי המיקרוביאלי. אנשים מטאבו-טייפ B (UM-B) מייצרים כמה Uros ביניים ושלושה Uros סופיים, כלומר, Uros סופי (Uro-B), Urolithin A (IsoUro-A) ו-Uro-A, שהם ה-Uros הנספגים העיקריים ב-UM-B. לכן, Uros הביניים יכול לפעול בעיקר במעי, בעוד שלסופיות יכולות להיות השפעות מקומיות וסיסטמיות.6 לעומת זאת, אנשים עם סוג מתכת 0 (UM-0) אינם יכולים לייצר Uros סופיים אלה (רק מבשר Urolithin-M5 זוהה עד כה, שאינו נספג במעיים).

נצפו הבדלים בפרופילי Uro בין UMs ולאורך המעי הגס, מה שמראים ייצור Uro דומיננטי באזור הדיסטקולון.16–19 למרבה הפלא, אחוז ה-UM-0 במתנדבים בריאים בספרדים ובסינים הוא כ-10% ויכול להיות גבוה אף יותר ב אוכלוסיית ארה"ב.13–15 הזנים החיידקיים Gordonibacter ו-Ellagibacter זוהו כמסוגלים לבצע חילוף חומרים של EA לכמה Uros.20–23 עם זאת, נמצא שחלק ביניים (לדוגמה, Uro-D, Uro-E, Uro- M7, ו-Uro-G) וה-Uros הסופי (Uro-A ו-Uro-B) אינם מיוצרים בתרביות טהורות של חיידקים אלה, מה שמרמז על הצורך של חיידקים אחרים להשלים את מערך ה-Uros שמגדיר גם UM-A וגם UM-B . לאחרונה זוהו קונסורציית החיידקים המעיים המעורבים במטבוליזם של EA כדי להניב את המטאבוטיפים המייצרים Uro (UM-A ו-UM-B) במבחנה.24

קונסורציית חיידקים המכילים את Gordonibacter plusEnterocloster genera ו-Ellagibacter plus Enterocloster ייצרו במבחנה את האורליתינים הקשורים ל-UM-A ו-UM-B, בהתאמה.25 עם זאת, היכולת של קונסורציאט חיידקים אלו לשכפל פרופילי Uro אנושיים הקשורים ל-UM-A ו-UM-B in vivo עדיין לא ידוע. יתר על כן, הבטיחות של צריכת חיידקים אלו המייצרים אורו כפרוביוטיקה חדשה עדיין אינה בטוחה, מכיוון שהיא לא נוסתה בעבר בבעלי חיים או בבני אדם. במחקר הנוכחי, קונסורציוני החיידקים לעיל הוערכו על יכולתם ליישב את המעי של חולדות שאינן מייצרות Uro (כמו -0-UM) ולהמיר אותן ליצרני Uro המחקים UM-A ו-UM-B, בהתאמה. בטיחותם של קונסורציית חיידקים אלה הוערכה גם היא. חוץ מזה, פותחו שני נהלים מבוססי PCR כמותי בזמן אמת (qPCR) כדי לזהות ולכמת Ellagibacter ו-Enterocloster בדגימות צואה.

חומרים ושיטות

כימיקלים וריאגנטים

Uros עבר סינתזה כימית וטוהר על ידי VillapharmaResearch SL (Parque Tecnológico de Fuente Álamo, Murcia, ספרד). EA נרכשה מ-Sigma-Aldrich (סנט לואיס, MO, ארה"ב). מי מלח חוצץ פוספט (PBS) התקבל מ-FisherScientific (ארה"ב), בעוד שמתנול, אתנול וחומצה פורמית היו מ- Panreac Química (ברצלונה, ספרד). ממיסים בדרגת כרומטוגרפיה נוזלית-ספקטרומטריית מסה (LC-MS) נרכשו מ-JT Baker (Deventer, הולנד). נעשה שימוש במים UltrapureMillipore (Bedford, MA, ארה"ב) לאורך כל המחקר. כל הכימיקלים והריאגנטים היו בדרגה אנליטית.

הכנת קונסורציית חיידקים

Gordonibacter urolithinfaciens DSM 27213T, Ellagibacter isourolithinifaciens DSM 104140T, ו-Enterocloster bolted CEBASS4A9, כולם מבודדים ומזוהים במעבדה שלנו (CEBAS-CSIC, ספרד, 5 mWilerkin) -צ'לגרן אנאירובי בינוני (WAM, Oxoid) צינורות ב-37 מעלות למשך 48 שעות בתא אנאירובי Concept 400 (BakerRuskin Technologies Ltd, Bridgend, South Wales, בריטניה) ומורחפים ב-PBS בתוספת 10% גליצרול ו-0.05% L-cysteine ​​hydrochloride (PanRecsteine ​​Hydrochloride) קווימיקה, ברצלונה, ספרד). לאחר דגירה אנאירובית, הוכנו קונסורציונים.24,25 בקצרה, "קונסורציום חיידקי A" הכיל G. זני urolithinfaciens ו- E. bolteae; "קונסורציום חיידקים B" הכיל תרביות E. isourolithinifaciens ו-E. bolteae; ו"קוקטייל בקרה" הכילו PBS סטרילי עם 10% גליצרול ו0.05% L-ציסטאין הידרוכלוריד. לפני המתן, כל הקוקטיילים חולקו במנות של 3.5 מ"ל ונשמרו ב-80 מעלות.

בעלי חיים, דיאטות ועיצוב ניסויים

פרוטוקול הניסוי (התייחסות 624/2020) אושר על ידי הממשל המקומי, ועדת הביו-אתיקה של מועצת המחקר הלאומית הספרדית (מדריד, ספרד), והוועדה לאתיקה של ניסויים בבעלי חיים מאוניברסיטת מורסיה (ספרד). הניסויים עקבו אחר המלצות האיחוד האירופי לגבי ניסויים בבעלי חיים (הנחיה 2010/63/EU של הפרלמנט האירופי והמועצה להגנה על בעלי חיים המשמשים למטרות מדעיות). חולדות ויסטאר (n=18; 9 נקבות ו-9 זכרים) במשקל 240 ± 31 גרם התקבלו מאנביגו (ברצלונה, ספרד). מודל חולדות זה נבחר על סמך יכולתו לייצר Uros שנצפה במחקרים ראשוניים שלנו בהם נבדקו דגימות צואה מדגמי חולדות שונים. שלוש קבוצות (A, B ו-C) נוצרו על ידי הקצאה אקראית של 6 חיות כל אחת (3 נקבות ו-3 חולדות זכרים ) לקבוצה (איור 1).

כל קבוצת חולדות אוכסנה בשני כלובים שונים, מחולקים לפי מין, בחדר עם סביבה מבוקרת טמפרטורה (22± 2 מעלות) עם 55 ± 10% לחות יחסית ומחזור אור-חושך מבוקר (12 שעות). החולדות קיבלו דיאטת צ'או סטנדרטית (תקלד, ברצלונה, ספרד) המכילה (%/100 גרם משקל טרי) 14.3% חלבונים (קמח גלוטן תירס), 48% פחמימות (חיטה, חיטה טחונה, תירס טחון) ו-4% שומן (שמן סויה). ), צפיפות אנרגיה של 2.9 קק"ל g−1, ו-4.1% סיבים גולמיים, בתוספת אבקת EA גדולה או שווה ל-95% טוהר (3.6 מ"ג ל-100 גרם של מאכל). EA היה מעורבב בצורה הומוגנית עם הזנה סטנדרטית טחונה, גולף מחדש והוליופיליז. הדיאטה המועשרת ב-EA נשמרה הרחק מלחות ואור. מינון ה-EA שניתן ל-החולדות בתזונה היו בקירוב 0.72 מ"ג לחולדה ליום (דיאטת EA1×), מינון שווה ערך לאדם של 41 מ"ג יום-1.26 כל הקבוצות קיבלו את דיאטת EA 1× ומי ברז באופן חופשי לאורך כל הניסוי ( 5 שבועות). מכיוון שה-EA שזוהה בדגימות צואה היה נמוך במהלך השבוע הראשון, נוספה מעט EA נוסף בימים הבאים. בשבוע 3, מנה נוספת של 1.5 מ"ג EA לכל חולדה ליום מומסת במים ניתנה דרך הפה על ידי מתן לבעלי החיים (סה"כ=EA 3× דיאטה), שניתנה רק למשך שבוע אחד. לבסוף, בשבוע 4, נוספו ≈5 גרם אגוזי מלך לכל חולדה ליום (מקור EA אחר) לדיאטת EA 1× ונשמרו עד סוף המחקר כדי להעריך את ההשפעה של EA המכילה מטריצת מזון על יכולת החיידקים. לייצר Uros. משקל, מזון וצריכת מים נמדדו מדי יום. קונסורציית חיידקי המעיים ניתנו דרך הפה באמצעות מתן. קבוצה A קיבלה 500 μL של קוקטייל חיידקי A, קבוצה B קיבלה 500 μL של קוקטייל חיידקי B, וקבוצה C (בקרה) קיבלה 500 μL של PBS. מתן מתן דרך הפה בוצע כל יומיים במהלך השבועיים הראשונים וכל יום במהלך השבועיים הבאים. בשבוע האחרון (ימים 28 עד 32), בעלי החיים המשיכו עם אותה תזונה בתוספת EA ואגוזי מלך, אך ללא מתן חיידקים דרך הפה. בסוף המחקר, בעלי חיים הוקרבו באמצעות תא CO2.

נהלי דגימה

דגימות צואה נאספו במהלך המחקר לניתוח Uro על ידי UPLC-ESI-QTOF-MS/MS ומיקרוביוטה של ​​המעי על ידי רצף 16S rRNAgene ו-qPCR. דם הוצא בנקודות זמן שונות (בסיס, יום 28 וסוף המחקר) לצורך ניתוחים המטולוגיים וביוכימיים בסרום. דגימות דם התקבלו מוריד הזנב (≈500 μL) ונאספו בצינורות המכילים הפרין בקו הבסיס ובימים 28 ו-32 (איור 1). הפרדת הפלזמה בוצעה מיד בצנטריפוגה ב-3000 גרם למשך 10 דקות ב-4 מעלות והוקפאה ב-- 80 מעלות עד לקביעה נוספת של משתנים סרוביוכימיים. הכבד, הכליות והטחול נאספו, נשקלו ונבדקו כדי לזהות הבדלים מורפולוגיים בזמן ההקרבה.

עיצוב ואופטימיזציה של הפריימרים והבדיקה לכימות של Ellagibacter ו-Enterocloster על ידי qPCR

רצפים של גנים 16S rRNA של Ellagibacter isourolithinifaciens DSM 104140T ו-E. bolted CEBAS S4A9 התקבלו ממסד הנתונים GenBank (בסיס הנתונים של EMBL). הרצפים היו מיושרים עם החיידק הקרוב מבחינה פילוגנטית שיצר את תוכנת ה-Molecular Evolutionary Genetics Analysis (MEGA 11) ונבדקו עבור אזורים של רצפים שמורים ומשתנים כדי לעצב את הפריימרים והבדיקה כדי לזהות ולכמת Ellagibacter ו-Enterocloster (טבלה 1). בדיקת ה-primersand תוכננה ואומתה עם הכלים Primer Questand Oligo Analyzer, בהתאמה (Integrated DNATechnologies, Inc., בלגיה). הבדיקה של TaqMan סומנה בקצוות 5' ו-3' בקבוצת 6-קרבוקסי-פלואורסצאין. (6FAM) ומרווה אוכמניות (BBQ), בהתאמה. qPCR בוצע באמצעות מערכת זיהוי ABI 7500sequence. הריכוזים הסופיים של כל פריימר ובדיקה היו 300 ו-375 ננומטר עבור Ellagibacter ו-200 ו-500 ננומטר עבור Enterocloster. בוצע פרוטוקול qPCR קונבנציונלי להגברת DNA של Ellagibacter ואנטרוקלוסטר, בהתאמה. פרופיל ה-ramping עבור Ellagibacteramplification היה מחזור אחד ב-95 מעלות למשך 5 דקות, ואחריו 45 מחזורים של 95 מעלות למשך 15 שניות, 50 מעלות למשך 40 שניות ו-72 מעלות עבור 31 שניות. לבסוף, נוסף מחזור אחד ב-72 מעלות למשך 5 דקות . פרופיל ה-ramping עבור הגברה של Enterocloster היה מחזור אחד ב-95 מעלות למשך 5 דקות, ואחריו 40 מחזורים של 95 מעלות למשך 15 שניות, 65 מעלות למשך 40 שניות ו-72 מעלות למשך 31 שניות. לבסוף, נוסף מחזור אחד ב-72 מעלות למשך 5 דקות.

מיצוי DNA צואה וניתוחים של חיידקים במעיים

שאיבת DNA מדגימות צואה בוצעה עם ערכת טיהור רקמות DNA של NucleoSpin® (Macherey-Nagel, גרמניה), בהתאם להוראות היצרן עם שינויים מסוימים. ה-DNA נמדד על ידי פלואורמטריה (Qubit3.0 – ThermoFisher Scientific™, בריטניה), והטוהר נמדד מיחס הספיגה באורך גל של 260/280 ננומטר (A260/A280) (NanoDrop-ThermoFisher Scientific™, UK ). הרכב המיקרוביוטה של ​​המעיים נקבע על ידי ריצוף של האזורים המשתנים V3 ו-V4 של הגן 16S rRNA בעקבות פרוטוקולים של Illumina (Illumina Inc., San Diego, CA, ארה"ב) עם אורך קריאה של 2 × 300 bp ריצה זוגית (MiSeqReagent Kit v3 , Illumina Inc.). ריצוף מטאנומי בוצע על גבי פלטפורמת MiSeq-Illumina (שירות רצפים של FISABIO, ספרד). עיבוד נתונים, הסרת רצף כימרי, יישור רצף וצבירת רצף 16S rRNA של גנים בוצעו כמתואר במקום אחר כדי לקבל את הסיווג הטקסונומי. פרימרים ובדיקות ספציפיות שתוכננו במחקר הנוכחי שימשו בעקבות פרוטוקול qPCR שתואר לעיל. עקומות DNA סטנדרטיות של Gordonibacter, Enterocloster ו-Ellagibacter שימשו לכימות. כל דגימות הצואה נותחו בשלושה עותקים.

מיצוי, גילוי וכימות של אורוליטין בדגימות צואה

דגימות צואה ({{0}}.2–0.5 גרם) חולצו, בשיעור של 1:10, עם תמיסה של MeOH/H2O (8{{ 20}}/20), מחומצן ב-0.1% HCl, והומוגג על ידי מערבולת במשך 2 דקות וניעור ב-1500 סל"ד בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות במחמם אבלוק. התרחיף עבר צנטריפוגה ב-14 000g ב-4 מעלות למשך 10 דקות, והסופרנטנט סונן דרך מסנן ממברנה PVDF 0.22 מיקרומטר (Millipore Corp., Bedford, MA) ומדולל 3x עם MeOH (0.1% חומצה פורמית ) לפני הזרקה במערכת UPLC-ESI-QTOF-MS. מערכת UPLC (Agilent 1290Infinity) מחוברת ל-QTOF LC/MSsystem מרובע-פול (6550 Accurate-Mass) (Agilent Technologies, Waldbronn, גרמניה) שימשה לניתוח מטבוליטים צואה באמצעות שיטת פליטת שיפוע כפי שתואר קודם לכן. .29,30 בקצרה, ההפרדה בוצעה בעמודה הפוכה של aPoroshell 120 EC-C18, תוך שימוש במים ואצטוניטריל, שניהם חומצים עם 0.1% חומצה פורמית, בתור פאזות ניידות. קצב הזרימה היה 0.4 מ"ל min-1, ונפח ההזרקה היה 5 μL. תוכנת MassHunter Qulitative Analysis (גרסה B.10, Agilent Technologies, Waldbronn, גרמניה) שימשה לעיבוד נתונים. כל המטבוליטים זוהו על ידי השוואה ישירה עם תקנים ואושרו על ידי המסה המולקולרית שלהם. עקומות כיול התקבלו עבור EA וה-Uros השונים עם ליניאריות טובה (R2 > 0.99).

המטולוגיה וכימיה קלינית

משתנים המטולוגיים נקבעו בדם בהפארין באמצעות מנתח המטולוגי אוטומטי עם תוכנה ספציפית לדגימות דם של חולדות (AVDIA 120, סימנס, מינכן, גרמניה). המשתנים שנותחו היו נפח גופני ממוצע (MCV), המוגלובין גופני ממוצע (MCH), ריכוז המוגלובין גופני ממוצע (MCHC), התפלגות אריתרוציטים (RDW), נפח טסיות ממוצע (MPV), טסיות דם (PCT), רוחב חלוקת טסיות דם (PDW) , רכיב טסיות ממוצע (MPC), מסת טסיות ממוצעת (MPM), ספירת טסיות דם (PLT), תכולת המוגלובין רטיקולוציטים (CHr), ונפח גופי רטיקולוציטים ממוצע (MCVr). משתנים ביוכימיים בפלזמה, סידן (Ca) וזרחן (P) נותחו באמצעות מנתח כימיה וטוקסיקולוגיה של Olympus AU400 (בקמן קולטר, קליפורניה, ארה"ב). המשתנים הביוכימיים היו סך חלבונים (PROT), אלבומין (ALBU), גלובולין (GLOB), קריאטינין (CREA), גלוקוז (GLUC), כולסטרול (CHOL), טריגליצרידים (TRIGL), פוספטאז אלקליין (ALP), גמא-גלוטמיל טרנספפטידאז ( GGT), אספרטאט אמינוטרנספראז (AST), ואמינין אמינוטרנספראז (ALT). לבסוף, רמות התירוקסין (T4) נותחו באמצעות מערכת IMMULITE® 1000immunoassay (Siemens).

ניתוח סטטיסטי

הנתונים מבוטאים כממוצע ± סטיית תקן (SD). ניתוח סטטיסטי בוצע עם תוכנת SPSS גרסה 27.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA), והבדלים עםp < 0.05 נחשבו מובהקים סטטיסטית. תקינות הנתונים הוערכה באמצעות מבחן Shapiro–Wilk. השוואות בין קבוצות טיפול שונות בוצעו באמצעות ניתוח שונות מדודה חוזרת (RM ANOVA) עם מבחן T3 post-hoc של Tukey או Dunnett, תלוי אם הנתונים עקבו אחר התפלגות נורמלית או לא נורמלית, בהתאמה. הבדלים בין זכרים ונקבות נחקרו באמצעות מבחן ה-t-מצמד של Student, או מבחן ה-signedrank של Wilcoxon כאשר הנתונים היו מבוזרים נורמלית או לא נורמלית, בהתאמה. ניתוח אפקטים ליניארי אבחנה של Chi-square (LEfSe) שימש כדי לזהות תכונות חיידקיות דיפרנציאליות בין קבוצות. מתאם Pearson שימש לניתוח קשרים אפשריים בין משתנים בנתונים בחלוקה נורמלית, בעוד שמתאם Spearman יושם בנתונים שאינם מבוזרים נורמליים. חלקות נתונים בוצעו באמצעות Sigma Plot 14.5 (Systat Software, San Jose, CA, ארה"ב).

צמחי מרפא טבעיים להקלה על עצירות-Cistanche

Cistanche הוא סוג של צמחים טפילים השייך למשפחת ה- Orobanchaceae. צמחים אלו ידועים בסגולותיהם הרפואיות ושימשו ברפואה סינית מסורתית (TCM) במשך מאות שנים. מיני Cistanche נמצאים בעיקר באזורים צחיחים ומדבריים של סין, מונגוליה וחלקים אחרים של מרכז אסיה. צמחי ה- Cistanche מאופיינים בגבעולים הבשרניים והצהבהבים שלהם ומוערכים מאוד בשל היתרונות הבריאותיים הפוטנציאליים שלהם. ב-TCM, מאמינים כי ל-Cistanche יש תכונות טוניקות והוא משמש בדרך כלל להזנת הכליה, לשיפור החיוניות ולתמיכה בתפקוד המיני. הוא משמש גם לטיפול בהזדקנות, עייפות ובעיות רווחה כלליות. בעוד ל-Cistanche יש היסטוריה ארוכה של שימוש ברפואה מסורתית, המחקר המדעי על יעילותו ובטיחותו מתמשך ומוגבל. עם זאת, הוא מכיל תרכובות ביו-אקטיביות שונות כגון פנילתנואידים גליקוזידים, אירידואידים, ליגננים ופוליסכרידים, אשר עשויים לתרום להשפעותיו הרפואיות.

של Wecistancheאבקת cistanche, טבליות cistanche, כמוסות cistanche,ומוצרים אחרים מפותחים באמצעותמִדבָּרcistancheכחומרי גלם, שלכולם השפעה טובה על הקלה על עצירות. המנגנון הספציפי הוא כדלקמן: ל- Cistanche מאמינים שיש יתרונות פוטנציאליים להקלה על עצירות בהתבסס על השימוש המסורתי שלו ותרכובות מסוימות שהוא מכיל. בעוד שמחקרים מדעיים ספציפיים על ההשפעה של Cistanche על עצירות מוגבלים, מניחים שיש לו מספר מנגנונים שעשויים לתרום לפוטנציאל שלו להקל על עצירות. אפקט משלשל:Cistancheזה זמן רב בשימוש ברפואה הסינית המסורתית כתרופה לעצירות. מאמינים שיש לו השפעה משלשלת קלה, שיכולה לעזור לקדם תנועות מעיים ולגרום לעצירות. ניתן לייחס השפעה זו לתרכובות שונות המצויות ב-Cistanche, כגון פנילתנואידים גליקוזידים ופוליסכרידים. לחות המעיים: בהתבסס על שימוש מסורתי, Cistanche נחשבת לבעלת תכונות לחות, המכוונות במיוחד למעיים. קידום הידרציה ושימון המעיים עשוי לעזור לרכך כלים ולהקל על מעבר קל יותר, ובכך להקל על עצירות. השפעה אנטי דלקתית: עצירות יכולה לפעמים להיות קשורה לדלקת במערכת העיכול. Cistanche מכיל תרכובות מסוימות, כולל פנילתנואידים גליקוזידים וליגננים, אשר מאמינים שיש להם תכונות אנטי דלקתיות. על ידי הפחתת דלקת במעיים, זה עשוי לעזור לשפר את סדירות תנועת המעיים ולהקל על עצירות.