השפעות של שיטות עיבוד שונות על האיכות הפנימית והדמויות של Cistanche

מטרה: לייעל את שיטות העיבוד של Cistanche Cistanche, ולחקור את ההשפעות של שיטות עיבוד שונות על האיכות והתכונות הפנימיות של Cistanche Cistanche.

שיטות: טיפולי ייבוש מוקדמים שונים (לא פרוס ולא מאודה, לא פרוס ומאודה למשך 20 דקות, פרוס טרי, מאודה 5 דקות לאחר פרוסות טריות) ושיטות ייבוש (80, 70, 60, 50 מעלות ייבוש, טבעי התוכן שלechinacoside, verbascoside, cistanoside A, isoverbasin, 2′-אצטילוורבסיד, טוברוזיד Aופוליסכרידב- Cistanche נקבעו דגימות שמיובשות בשמש, מיובשות בצל ומיובשות בהקפאה, ונעשה שימוש בציון המקיף. שיטת העיבוד שלCistancheעבר אופטימיזציה לפי שיטה, טעמם של הדגימות נקבע על ידי טכנולוגיית לשון אלקטרונית, מרקם הדגימות הוערך בעקיפין על ידי קצב ההידרציה ואינדקס הקשיות, ונבדק המתאם בינן לבין תכולת הרכיבים הכימיים העיקריים.

תוצאות: שיטת הניקוד המקיפה שימשה לבחירת שיטת העיבוד הטובה ביותר של Cistanche טרי, אידוי במשך 20 דקות ולאחר מכן ייבוש ב-60 מעלות. מחקר המתאם מצא כי הטעם, המרקם ותכונות אחרות נמצאו בקורלציה עם התוכן של רכיבים מסוימים בדרגות שונות. .

מסקנה: על מנת להבטיח ביעילות את האיכות שלCistanche, יש צורך לבחור שיטות עיבוד מתאימות לעיבוד במקור, ומידע האופי כגון טעם ומרקם יכול לשקף את תכולת החומר הפעיל של החומר הרפואי במידה מסוימת, דבר הנוחה לזיהוי מהיר של איכות החומר הרפואי.

מילות מפתחCistanche; עיבוד מקור; פנילטנול גליקוזידים (Phg); פוליסכרידים; לשון אלקטרונית; תווים

לחץ כאן כדי לקבל את א

חינםדוגמה של אבקת תמצית Cistanche 

Cistancheהוא גזע הקשקשים היבש שלCistanche DeserticolaYC מא אוCistanche Tubulosa(שנק) וייט, בעל הפונקציות של ממריץ יאנג הכליות,תמצית ודם מזין, לחות המעי, ומשלשל [1].

העיבוד שלCistancheנהוג מאז ימי קדם. ב"Zhenglei Materia Medica", יש תיעוד של "קטיף ב-5 במאי וייבוש בצל". שיטות העיבוד הנוכחיות כוללות ייבוש, המלחה ומרתף. בשל הנפח הגדול שלCistanche, תכולת סוכר גבוהה וקושי בייבוש, השיטה הנ"ל לא רק גוזלת זמן, מייגעת ומושפעת בקלות מתנאים טבעיים, אלא גם עם חלוף הזמן ולחות משנית, החומרים הפעילים הולכים לאיבוד בקלות, ומשפיעים על איכות חומרים רפואיים [2].

על מנת להבטיח את האיכות והאחידות הגבוהה של החומרים הרפואיים שלCistanche, יש צורך לייעל את שיטות העיבוד של מקורו, כדי לתקנן ולתקנן אותו. בהתבסס על ניסיונם של חקלאי מרפא באזור הייצור ודוחות המחקר של חוקרים קשורים בנושא שיטות העיבוד שלCistancheבאזור הייצור בשנים האחרונות [3-6], ניסוי זה לקח את הגזע הבשרני של ה-Cistanche הטרי כאובייקט המחקר לחקור את שיטות הטיפול והייבוש לפני הייבוש של Cistanche, תוך שימוש במספר אינדיקטורים. כדי להעריך את האיכות שלCistancheולייעל את שיטת העיבוד הטובה ביותר באזור הייצור, היא שואפת לספק בסיס לסטנדרטיזציה של העיבוד באזור הייצור שלCistanche, ולספק שיטת התייחסות חדשה להערכה מקיפה ובקרה כוללת של איכות החומר הרפואי שלCistanche.

1 מכשירים וחומרים

1.1 מכשירים

כרומטוגרף נוזלי Agilent 1260 בעל ביצועים גבוהים (Agilent Company, ארה"ב); ספקטרופוטומטר UV6100S UV (Shanghai Meipuda Instrument Co., Ltd.); ASTREE II לשון אלקטרונית (חברת אלפא MOS צרפת); מאזן אנליטי FA2004 (Shanghai Sunny Hengping) Scientific Instrument Co., Ltd.); איזון אנליטי DV215CD (Ohaus Instrument Co., Ltd.); GY-4 בודק קשיות דיגיטלית (Yeqing Aidelberg Instrument Co., Ltd.); SB-3200DTN Ultrasonic Cleaner (Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., Ltd.).

1.2 חומרים

אכינצאה (חלקה: Y29M10H84490), Verbasin (חלקה: Y21A9H59554), Cistanoside A (חלקה: P14N9F74960), Isorrascoside (חלקה: Y12D8H50507), 2′-Acetyl Verbasin (Lot6F6F627) מספר P6F6F (Lot6F6F627) (מספר P6F6F623) חומרים נרכשו משנגחאי Yuanye Biotechnology Co., Ltd., חלק מסה גדול או שווה ל-98 אחוזים; חומר התייחסות לגלוקוז D-נטול מים (מספר אצווה: 110833-201707, המכון הלאומי של סין לבקרת מזון ותרופות); אצטוניטריל זה בדרגה כרומטוגרפית; שאר הריאגנטים הם בדרגה אנליטית. הטריCistancheעבור הניסוי נאסף מה-טיפוח Cistancheהבסיס של Hongkuisha Industrial Development Co., Ltd. מונגוליה הפנימית AlxaCistancheקבוצה באוקטובר 2019. גבעולים עסיסיים בעלי עלים קשקשים. הנקצר טריCistancheהיה מעורב באופן שווה וחולק באופן אקראי לקבוצות. לכל קבוצת דגימות נקבעו 3 שכפולים. שיטות הטיפול לדוגמה מוצגות בטבלה 1.

2 שיטות ותוצאות

2.1 קביעת גליקוזידים של פנילתנול

2.1.1 תנאים כרומטוגרפיים: נעשה שימוש בעמודה Agilent Eclipse XDB-C18 (250 מ"מ×4.6 מ"מ, 5 מיקרומטר), השלב הנייד היה 0.1 אחוז תמיסת חומצה פורמית (A)-אצטוניטריל (B), פליטת שיפוע (0 ~ 10 דקות, 9 אחוז ~ 15 אחוז B; 10 ~ 40 דקות, 15 אחוז ~ 26 אחוז B; 40 ~ 45 דקות, 26 אחוז ~ 9 אחוז B;

קצב הזרימה היה 1.0 מ"ל/דקה; אורך גל הזיהוי היה 330 ננומטר; טמפרטורת העמודה הייתה 30 מעלות; נפח ההזרקה היה 10 μL, והכרומטוגרמה מוצגת באיור 1.

2.1.2 הכנת תמיסת חומר ייחוס: שקלו במדויק כמות מתאימה של echinacoside, verbascoside,cistanoside A, isoverbasin, 2'-acetylverbasin ו- tuberoside A, ומניחים אותו ב-5 מ"ל בבקבוק נפח חום, ממיסים עם 50 אחוז מתנול ומדללים לנפח כדי להכין תמיסת ייחוס עם ריכוזים של {{6} }.809, {{10}}.932, 0.185, 0.272, 0.582 ו-0.068 מ"ג/מ"ל, בהתאמה.

2.1.3 הכנת תמיסת הבדיקה: קח 0.5 גרם שלCistanche Tubulosaאבקת דגימה (העברה דרך מסננת מס' 4), שקלה אותה במדויק, הנח אותה בבקבוקון נפח חום, הוסף במדויק 25 מ"ל של 50 אחוז מתנול, אטום אותה היטב ושקל אותה. לאחר טבילה למשך 30 דקות, בדיקת אולטרסאונד (150 ואט, 40 קילו-הרץ) למשך 40 דקות, תן לזה להתקרר ואז השלם את המשקל, לנער היטב, לתת לעמוד, לקחת את הסופרנטנט ולסנן אותו עם קרום מיקרו-נקבי בגודל 0.45 מיקרון.

2.2 קביעת פוליסכרידים

2.2.1 הכנת תמיסת חומר ייחוס: קח 10.03 מ"ג של חומר ייחוס D-anhydroglucose, שקלו במדויק, ממיסים במים ודלל ל-100 מ"ל לקבלת תמיסת חומר ייחוס בריכוז של 100.3 ug/mL.

2.2.2 הכנת תמיסת הבדיקה: קח 0.5 גרם אבקת דגימה של Cistanche Tubulosa (הועברה דרך מסננת מס' 4), שקלו אותה במדויק, הכניסו אותה לבקבוק חרוט עצום, הוסיפו 25 מ"ל של 80 אחוז אתנול, וקול ב-80 מעלות. (150 W, 40 קילו-הרץ) למשך 30 דקות, מסונן בעודו חם, וחילוץ חוזר פעם אחת. לאחר שאריות המסנן התאדו ליובש, נוספו 25 מ"ל מים, ובוצעו בצלילים למשך 30 דקות. , שואבים במדויק 1 מ"ל של תמיסה ומדלל אותה ל-10 מ"ל.

2.2.3 תנאי זיהוי: קח 2 מ"ל מתמיסת הבדיקה שלCistanche, הוסף 1 מ"ל מגיב פנול 6 אחוז, נער היטב, הוסף במהירות 5 מ"ל חומצה גופרתית מרוכזת, נער במשך 5 דקות, מחמם באמבט מים רותחים למשך 15 דקות, מצנן ומניח ב-482 מעלות. הספיגה נמדדה ב-nm. השתמש במים במקום בתמיסת הבדיקה כבקרה ריקה.

2.3 בחינת קשר ליניארי יש לדלל את תמיסת הייחוס לפי יחס מסוים להכנת תמיסה מעורבת של סדרת ריכוזים ולמדוד לפי השיטה הנ"ל. קח את הריכוז של תמיסת ההתייחסות כאבססיס, ואת שטח השיא או הספיגה כאורדינאטה. רגרסיה לינארית, התוצאות מוצגות בטבלה 2.

2.4 חקירה מתודולוגית

2.4.1 בדיקת דיוק:

צייר במדויק כל תמיסת ייחוס, ומדדו אותה ברציפות במשך 6 פעמים לפי השיטות תחת "2.1.1" ו-"2.2.3", וחשבו כדי לקבל echinacoside, verbascoside,cistanoside A, isaveraside, 2′ ה-RSDs של אזורי השיא של -Acetyl Verbasoside ו- Tuberoside A וספיגת הגלוקוז היו 0.76 אחוז , 0.53 אחוז , 0.81 אחוז , 0.25 אחוז , {{10}}.44 אחוז , 0.62 אחוז , 0. . 49 אחוז, מה שמצביע על דיוק המכשיר טוב.

2.4.2 מבחן החזרה:

קח 6 עותקים מאותה אצווה שלCistancheלבדיקת אבקה, שקלו במדויק, הכינו את תמיסת הבדיקה לפי השיטות תחת "2.1.3" "2.2.2", ולחץ על "2.1.1" "2.2". 2.3", ה-RSDs המחושבים של echinacoside, verbascoside, cistanoside A, isoverbasin, 2'-acetylverbasoside, tuberoside A ופוליסכריד היו 0.82 אחוזים, בהתאמה. , 1.47 אחוזים, 0.88 אחוזים , 1.53 אחוז , 0.55 אחוז , 0.44 אחוז , 1.13 אחוז , מה שמצביע על כך שלשיטה יש יכולת חזרה טובה.

2.4.3 מבחן יציבות:

צייר במדויק את פתרון הבדיקה שלCistancheתחת פריט "2.1.3", והזריקו דגימות ב-0, 2, 4, 8, 12 ו-24 שעות בהתאם לתנאים הכרומטוגרפיים לפי פריט "2.1.1", וחשבו את האצטרובלים. ה-RSD של אזורי השיא של גליקוזיד חרצית, verbascoside, cistanoside A, isoverascoside, 2'-acetylverbasoside ו- tuberoside A היו 0. 47 אחוז , 1. 12 אחוז , 0. 42 אחוז , {{20}}. 65, בהתאמה. אחוז , 0.57 אחוז , 0.47 אחוז , המצביע על כך שלפתרון הבדיקה יש יציבות טובה בתוך 24 שעות; לספוג במדויק את תמיסת הבדיקה שלCistancheתחת "2.2.2", לחץ על "2.2.3" תנאי הזיהוי תחת הפריט נמדדו ב-0, 15, 30, 60, 120 ו-240 דקות בהתאמה, וה-RSD של ספיגת הפוליסכריד חושב להיות 1.24 אחוזים, מה שמצביע על כך שתמיסת הבדיקה הייתה יציבה תוך 240 דקות.

2.4.4 מבחן התאוששות לדוגמה:

קח 6 חלקים שלCistancheלבדיקת אבקה עם תכולת רכיבים ידועה, כל חלק הוא 0.25 גרם, במשקל מדויק, הוסף

הוסף את תמיסת הייחוס עם התוכן של כל רכיב בדגימה, הכן את תמיסת הבדיקה לפי השיטות בסעיף "2.1.3" "2.2.2", ולפי "2.1.1" "2.2. נמדד בשיטה מתחת הפריט 3", ומחושב להשגת אכינצאה

24 אחוז , 1{{20}}2. 69 אחוז , 101. 13 אחוז , 101. 13 אחוז , 101. 13 אחוז , 101. 13 אחוז , 101. 102. 38 אחוז , 101. 27 אחוז , 99. 94 אחוז , 99. 23 אחוז , RSD היו 0. 98 אחוז . אחוז , 0. 86 אחוז , 1. 26 אחוז , 1. 13 אחוז , 0. 94 אחוז , 2. 34 אחוז , מה שמצביע על כך ששתי השיטות מדויקות ואמינות.

2.5 השפעות של שיטות עיבוד שונות על התוכן של רכיבים פעילים ב- Cistanche סכום התוכן של echinacoside ו- verbascoside ב-Cistancheהדגימות היו גבוהות מ-0.30 אחוז , מה שהיה בקנה אחד עם מהדורת 2020 של הפרמקופאה הסינית [1].

המחקר מצא כי הכמות הכוללת של רכיבי האינדקס בכל החומרים הרפואיים היבשים הייתה גבוהה מזו של הפרוסות הטריות, והכמות הכוללת של רכיבי האינדקס בדגימה המאודה RZ3 לפני הייבוש הייתה הגבוהה ביותר. אחוזים , שהם יותר מפי 14 מהרמה המצוינת בפרמקופיה. ניתן לראות שתכולת החומרים הפעילים לאחר אידוי ועיבוד החומרים הרפואיים במקור גבוהה יותר. בהשוואת ההשפעות של ייבוש בשמש, ייבוש בצל, ייבוש בפיצוץ וייבוש בהקפאה על תכולת החומרים הפעילים ב- Cistanche Cistanche לא פרוס ומאוה, נמצא כי תכולת האכינאקוסיד בדגימה RZ2 הייתה הגבוהה ביותר; התוכן של '-אצטילברזין וטוברוסיד A היה הגבוה ביותר, התוכן שלCistancheA בדגימת RZ6 הייתה הגבוהה ביותר, ותכולת הפוליסכריד בדגימה RZ5 הייתה הגבוהה ביותר, מה שמצביע על כך שלשיטות ייבוש שונות היו השפעות שונות על תכולת הרכיבים הפעילים ב- CistancheCistanche. יש צורך להשתמש במספר אינדיקטורים כדי להעריך באופן מקיף את איכותו.

שיטת AHP שימשה לקביעת מקדם המשקל של מדד הערכת האיכות שלCistanche, ומקדמי המשקל של שבעת האינדיקטורים של echinacoside, verbascoside, cistanoside A, isoverbasin glycoside, 2′-acetylverbasic glycoside, piploside A ופוליסכריד חושבו בהתאמה. 0.2668, 0.2668, 0.1626, 0.{{10}}958, 0.0958, 0.0561, 0.0561.

לפי חשיבות הרכיבים הנמדדים בCistanche, the 7 indicators were divided into 4 levels, and the priority order of each indicator was determined: echinacoside=verbasicose glycosides>cistanoside A>isoverbasin glycosides=2′-acetyl group Verbasin>tuberosin A{{0}}פוליסכריד, ובכך בונה את רגע העדיפות לשיפוט להשוואה זוגית. יחס העקביות האקראי CR הוא מדד למדידת האם מקדם המשקל המתקבל הוא סביר. בניסוי זה, CR= 0. 0066 < 0.="" 10,="" המציין="" שמטריצת="" עדיפות="" השיפוט="" להשוואה="" זוגית="" של="" אינדיקטורים="" תואמת="" את="" מבחן="">

המקדם סביר ויעיל, וניתן להשתמש בו לניקוד מקיף של שיטות עיבוד באזור הייצור האופטימלי שלCistanche [7].

על מנת להפוך את הנתונים לאחידים, יש לנרמל את מדדי ההערכה, הנוסחה היא yi=xi-xmin*xmax-xmin, כאשר yi הוא הערך המנורמל של המדד, xi הוא הערך בפועל של המדד אינדיקטור, ו-xmax ו-xmin הם האינדיקטורים בהתאמה. ערכי המקסימום והמינימום של הקבוצה והניקוד המקיף המשוקלל מחושבים לפי הנוסחה K=y1×l1 בתוספת y2×l2 פלוס …y6×l6 ועוד y7×l7, כאשר K הוא ערך הניקוד המקיף , y1, y2 ... y6, y7 בהתאמה הוא תוצאה של נורמליזציה של התוכן של echinacoside, verbascoside, cistanoside A, isoverascoside, 2′-acetylverbasic glycoside, tuberoside A ופוליסכריד. משקולות. תוצאות הניקוד המקיפות הראו שהאיכות הכוללת של הדגימה RZ3 הייתה הטובה ביותר, כלומר הטרייה כולה.Cistancheאודה במשך 20 דקות ולאחר מכן יובש ב-60 מעלות כשיטת העיבוד הטובה ביותר במקור. התוצאות מוצגות בטבלה 3.