איש קשר: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 דוא"ל:audrey.hu@wecistanche.com

Yu Lixin Chen Xueqiang Wu Qunfeng Dong Weiqin Guo Songhua Yu Jian Feng Wei Yang Lei Fu Yifeng Li Junjie Luo Cheng

1 בית החולים ה-98 של צבא השחרור העממי הסיני, Huzhou, Zhejiang 313000

אוניברסיטת ג'ה-ג'יאנג לרפואה סינית מסורתית, Hangzhou, Zhejiang 310053

3 Fuyang Traditional Chinese Medicine Orthopedics Hospital, Hangzhou City, Provincial Zhejiang, Hangzhou 311400, Zhejiang, סין

תַקצִיר

המטרה: להתבונן בהשפעה שלCistancheתמצית מיםעל הריפוי שלאוסטאופורוטישברים בחולדות ולחקור את המנגנון שלו. שיטות: חולדות נקבות SD בדרגת SPF חולקו באופן אקראי לקבוצת ביקורת, קבוצת מודל וקבוצת טיפול, ועוצבו לפי שיטות קשורות. 24 שעות לאחר דוגמנות השבר, קבוצת הביקורת וקבוצת המודל קיבלו מתן תמיסת מלח רגילה, וקבוצת הטיפול קיבלה מתן נתון עםCistancheתמצית מים פעם ביום. לאחר שבועיים ו-6 שבועות של התערבות, נאסף דם מאבי העורקים הבטן כדי לזהות אינטרלוקינים. TP (IL-1 B) ורמות גורם גדילה-B l (TGF-8 1) מתמירות, איסוף דגימות שבר בו-זמנית, בצע סריקת Micro-CT לאחר הקיבוע, מדוד R0 שבר נפח עצם הקאלוס (BV/TV) ופרמטרים קשורים אחרים לאחר ניקוי הסתיידות, התייבשות והטבעה, הפכו אותו לגושי שעווה לשימוש. תוצאות: 6 שבועות לאחר הקמת מודל האוסטאופורוזיס, צפיפות מינרל העצם של חולדות בקבוצת המודל ובקבוצת הטיפול הייתה נמוכה מזו של קבוצת הביקורת (P<0.05), but="" there="" is="" no="" significant="" difference="" between="" the="" treatment="" group="" and="" the="" model="" group.="" although="" the="" bone="" density="" of="" the="" treatment="" group="" is="" still="" lower="" than="" that="" of="" the="" control="" group="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" it="" is="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05). micro-ct="" scan="" shows="" the="" treatment="" group="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" tb.="" n,="" tb.="" th,="" smi="" was="" better="" than="" the="" model="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks="" after="" the="" intervention,="" and="" the="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" smi="" parameters="" of="" the="" control="" group="" and="" the="" treatment="" group="" were="" not="" different="" from="" those="" of="" the="" treatment="" group.="" obviously,="" the="" micro-ct="" parameters="" of="" the="" model="" group="" at="" 2-time="" points="" were="" inferior="" to="" the="" control="" group.="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" comparing="" the="" serum="" ilt="" b="" and="" tgf-p="" 1="" levels="" of="" the="" 3="" groups,="" it="" was="" found="" that="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups="" at="" 2="" weeks.="" at="" 6="" weeks,="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups.="" the="" control="" group,="" but="" still="" significantly="" lower="" than="" the="" model="" group=""><0.05); in="" terms="" of="" tgf-b="" 1="" level,="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistical="" difference="" between="" the="" control="" group="" and="" the="" control="" group.="" significance.="" conclusion:="" according="" to="" the="" analysis="" of="" bone="" mineral="" density,="" micro-ct="" scan="" parameters,="" and="" serum="" il-1="" b="" and="" tgf-b="" 1="" levels,="" it="" is="" found="" that="" the="" aqueous="" extract="" of="">Cistancheיכול לקדם את הריפוי שלאוסטאופורוטישברים, והמנגנון שלו עשוי להיות קשור לעיכוב שלאוסטאופורוטישברים. לאחר סרום החולדות IL-1 B ולקדם את הפרשת TGF-8 1, שיכול לשפר אוסטאופורוזיס ולקדם ריפוי שברים.

מילות מפתח: שבר אוסטאופורוטי, Cistanche, ריפוי שברים, חולדה

אוסטאופורוזיס היא מחלה שבה צפיפות העצם יורדת, המבנה העדין של רקמת העצם נהרס ושבריריות העצם מוגברת. מטופלים יכולים לגרום לשברים בכוח חיצוני קל בחיי היומיום. זוהי מחלה קלינית שכיחה ומחלה הנפוצה לעתים קרובות. יתרה מכך, שבר מסוג זה הוא לרוב חולים קשישים, הקשורים לרוב למחלות אחרות, ורוב השברים מפורקים, עם יציבות ירודה, ולעיתים מתרחש איטי או אי-איחוד של ריפוי שבר, וקיים שיעור נכות ותמותה גבוהים. כיום הטיפול בו הוא בעיקר באמצעות ניתוח, שיקום ידני וטיפול נגד אוסטאופורוזיס. קיים חוסר בתרופות ממוקדות לטיפול בחולים עםאוסטאופורוטישברים. לרפואה הסינית המסורתית היסטוריה ארוכה של טיפול באוסטיאופורוזיס ויש לה השפעה חיובית. תרופות סיניות מסורתיות רבות הוכחו כמשפרות את העצמות. עניות יכולה גם לקדם ריפוי שברים. רונגרונג משמש בדרך כלל כתרופה מייצגת להזנת יאנג הכליות ובעלת השפעה של הזנת הכבד והכליות. הרפואה הסינית המסורתית מאמינה שהכליה שולטת בעצם, וגם הטיפול בשברים אינו נפרד מהכליה ומהמהות. פרמקולוגיה מודרנית מצאה כי לאפר בשר יש גם השפעה אסטרוגנית מסוימת. מחקר זה מתכוון להשתמש במדידת צפיפות עצם, Micro-CT ואינטרלוקין בסרום-13 (IL-10), תצפית רמת גורם גדילה-P KTGF-P 1) ותמצית מים של משחת בקע בשר על ריפוי שלאוסטאופורוטישברים בחולדות

Cistanche

1 חומרים ושיטות

1.1 חיות ניסוי וציוד ריאגנטים: 52 חולדות SD נקבות SPF במשקל 210~250ג' גדלות במרכז ניסויים בבעלי חיים של אוניברסיטת ג'ג'יאנג לרפואה סינית מסורתית. יוד מורכב, Hangzhou Lonzo Medical Disinfectant Co., Ltd., אצווה מספר 20160720; Penicillin, North China Pharmaceutical Co., Ltd., מספר אצווה F3117217; ערכת IL-18 (מספר אצווה: 20160715), ערכת TGF-8 1 (מספר אצווה: 20160722); סורק צפיפות עצם בעל אנרגיה כפולה, 0STE0C0RE2; Micro-CT, Skyscan1176O

1.2 מיצוי שלCistancheתמצית מים: להשרות את האדמהcistanche(מפעל התרופות של אוניברסיטת ג'ה-ג'יאנג לרפואה סינית מסורתית) 10 פעמים מים טהורים למשך 0.5 שעות, מרתח מחבת למשך 1.5 שעות, חזור על המיצוי 2 פעמים, ותרכיז הקיטור הסיבובי הנוזל הרפואי המעורב לריכוז של 1.5 גרם /ml ומאחסנים במקרר ב-4 מעלות לשימוש מאוחר יותר.

1.3 הכנת דוגמנות: הנקודות הן כדלקמן.

1.3. מודל אוסטאופורוזיס 1: החולדות גודלו בצורה אדפטיבית במשך שבוע לפני המודל וחולקו באופן אקראי לקבוצת ביקורת, קבוצת מודל וקבוצת טיפול, עם 16 חולדות, 18 חולדות ו-18 חולדות בהתאמה, וכל קבוצה התבססה על נקודת הזמן של שבועיים ו-6 שבועות. כל אחת חולקה לשתי קבוצות. גם קבוצת הטיפול וגם קבוצת הדוגמניות הורדמו ב-1 אחוז נתרן פנטוברביטל (0.4ml/100g), העור הורדם, חוטא, עטוף, והעור נחתך. השחלות הדו-צדדיות של החולדה הוסרו. לקבוצת הביקורת היה רק ​​חתך. אל

הסרת השחלות

1.3. מודל שבר 2: 6 שבועות לאחר הכנת מודל האוסטאופורוזיס, יוכן מודל השבר. לאחר הרדמה של החולדות בכל קבוצה, נמדדת צפיפות מינרל העצם של עצם הירך האמצעית. , חתך, צור דגם של שבר רוחבי של עצם הירך האמצעי, תקן אותו עם חוט קירשנר 1 מ"מ, עיקור ותפר את עור החתך

1.4 התערבות תרופתית: זיהוי בקרני רנטגן של עצם הירך בוצע לאחר מודלים, חולדות שנכשלו בהכנת המודל חוסלו, ו-80,000 יחידות פניצילין הוזרקו לשריר לאחר דוגמנות כדי למנוע זיהום. 24 שעות לאחר הניתוח, ניתנה לקבוצת הטיפול תמצית מים של משחת בקע בשר (ריכוז 1.5g/ml, lg/kg, פעם ביום). קבוצת הביקורת וקבוצת המודל קיבלו את אותו נפח של תמיסת מלח רגילה.

1.5 איסוף דגימות: דגימות חולדות נאספו 2 ו-6 שבועות לאחר ההתערבות. לאחר הרדמה של 1 אחוז פנטוברביטל נתרן, נאסף 5-10 מ"ל דם מאבי העורקים הבטן להכנת סרום ואוחסן במקרר -20B. נוֹסָף. לאחר מכן הוקרבו החולדות ודגימות שבר הירך נאספו והונחו בפורמלדהיד נייטרלי של 10 אחוז למשך 72 שעות.

1.6 מדדי בדיקה: הנקודות הן כדלקמן.

1.6. 1 צפיפות מינרל העצם: כל החולדות לאחר מודל האוסטאופורוזיס הורדמו לפני מודל השבר, ולאחר מכן נמדדה צפיפות מינרל העצם של עצם הירך האמצעית. שלוש קבוצות החולדות קיבלו דגימות לאחר שבועיים ו-6 שבועות של התערבות, והדגימות תוקבעו למשך 72 שעות ולאחר מכן נמדדה שוב צפיפות העצם.

1.6. 2 מיקרו-CT: סריקת מיקרו-CT מבוצעת לאחר קיבוע הדגימה למשך 72 שעות, עם 200 תמונות מעל ומתחת לקצה השבר כאזור העניין (R01), זווית סריקה 360 מעלות, זרם 555uA, מתח 42kV, מסנן Al 0. 2mm, רזולוציה 8.73um, לאחר השלמת שחזור התמונה התלת מימדית וניתוח הקאלוס. פרמטרי הזיהוי הם כדלקמן: שבר נפח עצם BV/TV, גורם מודל טרבקולרי עצם (Tb. Pf); מדד מודלים מבניים (SMI) וכו'."

1.6.3 קביעת סרום IL-1P ו-TGF-P1: הפשר את סרום החולדות מהמקרר ב--20 מעלות ובצע את האיתור שלב אחר שלב בהתאם ל-IL-13 והוראות ערכת TGF" 1.

1.7 שיטות סטטיסטיות: השתמש בתוכנת ניתוח סטטיסטי SPSS.19 לעיבוד. נתוני הניסוי מתבטאים במונחים של סטיית תקן ממוצעת (G±s), וצפיפות מינרל העצם של שלוש קבוצות החולדות. פרמטרי מיקרו-CT JL-1 P JGF- P 1 ממוצעים על ידי ניתוח חד כיווני של שונות, ומשתמשים בהשוואות זוגיות בין קבוצות בדיקה, רמת הבדיקה היא P<0.>

2 תוצאות

2.1 צפיפות העצם של שלוש הקבוצות: ראה טבלה 1.

טבלה 1 תוצאות של צפיפות מינרלים בעצם עצם הירך האמצעית של כל קבוצת חולדות (x±s, g/cm²)

הערה: בהשוואה לקבוצת הדגמים, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group.△=""><>

2.2 חתך דו-ממדי Micro-CT: החתך הדו-ממדי הסגיטלי בוחר את התמונות של ציר האורך של עצם הירך בכל נקודת זמן בכל קבוצה (ראה איור 1), ואת הצלב הדו-ממדי האופקי- הסעיף בוחר את התמונה ה-100 מתחת לקו השבר להשוואה (איור 2) ), ניתן לראות מהאיור כי הקאלוס של כל קבוצה גדל בהדרגה עם הזמן, אך הוא היה פלסטי בדרגות שונות 6 שבועות לאחר השבר; יחד עם זאת, ניתן לראות כי הקאלוס בקבוצת הביקורת היה גדול, וקליפת היבלת הייתה עבה וזחלה על פני קו השבר לאחר 6 שבועות, בעוד שהקאלוס בקבוצת המודל היה פחות עצם בקילוס בשעה שבועיים, וקליפת היבלת הייתה רופפת לאחר 6 שבועות. למרות שנפח הקילוס בקבוצת הטיפול לא היה גדול לאחר שבועיים, מסת העצם בקילוס הייתה גדולה מזו בקבוצת המודל. היבלת התעצבה טוב יותר לאחר 6 שבועות. וקו השבר אינו ברור.

קבוצת ביקורת קבוצת מודל קבוצת טיפול

איור 1 החתך הסגיטלי של עצם הירך האמצעי של כל קבוצה

איור 2 חתך אופקי של עצם הירך האמצעי של כל קבוצה

2.3 שחזור תלת מימדי של Micro-CT: השחזור התלת מימדי של הקאלוס בקצה השבר של עצם הירך מוצג באיור 3. ניתן לראות מתמונה 3 כי הקאלוס נוצר לאורך הפריוסטאום בשני קצוות השבר קו שבועיים לאחר השבר בכל קבוצה, גדילי השבר בכל קבוצה היו עדיין ברורים, במיוחד בקבוצת המודל ובקבוצת הטיפול, בעוד שהקלוס בקבוצת הביקורת היה עבה ועבה, לרוב עם לוחות 6 שבועות לאחר השבר . העצמות הטרבקולריות היו דומיננטיות וקו השבר נעלם, בעוד שקבוצת המודל הייתה עצמות רפויות וקו השבר היה מטושטש, אך בקבוצת הטיפול היו יותר עצם יבלת, עצם טרבקולרית רגילה ועבה, וקו השבר לא היה ברור.

איור 3 שחזור תלת מימדי של R0I callus בקצה השבר

2.4 פרמטרים של Micro-CT: השתמש בתוכנה כדי לנתח את הקאלוס בקצה השבור. ראה טבלה 2 לפרמטרים קשורים.

טבלה 2 השוואה של פרמטרי Micro-CT של כל קבוצה (x±s)

קבוצת ביקורת קבוצת מודל קבוצת טיפול

הערה: בהשוואה לקבוצת הדגמים, *P<0. 05;="" compared="" with="" the="" control="" group.=""><0.>

2.5 רמת IL-1 בנסיוב P .TGF-P 1: ראה טבלה 3.

טבלה 3 השוואה של רמות IL-1 P JGF-0 1 בכל קבוצה G±s, n=8)

הערה: בהשוואה לקבוצת הדגמים, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group,=""><0.05 0="" 3="">

בשנים האחרונות הוכחו בפרקטיקה הקלינית התרופות הסיניות המסורתיות Yinyangdian, Drynaria fortune והתרכובות שלה (כדורי צ'ינג, Liuwei Dihuang וכו') כמשפרות באופן משמעותי אוסטאופורוזיס. סוג זה של רפואה סינית ותרכובות משמשות בעיקר להזנת הכבד והכליות. הדבר תואם את העיקרון של הזנת הכליה וחידוש השרירים בשלב האמצעי והמאוחר של השבר. "עשרה ימים. משחת הגפיים הבשרנית פורסמה לראשונה ב-"Shen Nong's Materia Medica". , חם בטבע, יש תפקידים של הזנת הכליה וחיזוק היאנג, חידוש תמצית ומוח, הזנת דם ויובש לחות, ומענג צבע ו מאריך חיים.

במחקר זה, צפיפות מינרל העצם של קבוצת הטיפול הייתה גבוהה מזו של קבוצת המודל לאחר 2 ו-6 שבועות של התערבות (P<0.05). micro-ct="" scan="" bv/tv="" parameters="" showed="" the="" results="" and="" bone="" mineral="" density="" of="" the="" treatment="" group="" at="" two="" time="" points="" after="" the="" intervention="" the="" measurement="" results="" are="" consistent,="" and="" bv/tv="" is="" an="" important="" indicator="" for="" the="" evaluation="" of="">אוסטאופורוטיריפוי שבר. זה משקף ישירות את תוכן העצם של הקאלוס. זה מראה שלרוגנרונג עשויה להיות השפעה של קידום אוסטאוגנזה. הניתוח עשוי להיות יעיל במשחת בקע בשר. למרכיבים יש השפעה של ויסות על BMP2, ו-BMP2 הוא אחד מחברי משפחת TGF-8. ותוצאה זו מאושרת גם על ידי פרמטרים אחרים של סריקת Micro-CT (Tb. Spjb. N, Tb. Th. SMI). שַׁחֶפֶת. Sp ו-SMI משקפים את התכונות הביומכניות של קאלוס, והערכים בקבוצת הטיפול טובים משמעותית מקבוצת המודל, זה גם מצביע על כך שלרודונגרונג יש השפעה של שיפור אובדן עצם, קידום אוסטאוגנזה והאצת ריפוי שברים.

מבחינת רמות IL-1B ו-JGF-P 1 בסרום, לאחר שבועיים ו-6 שבועות של התערבות, נמצא שרמת ה-IL-1P של קבוצת הטיפול הייתה נמוכה מהשתיים האחרות קבוצות בשבוע שבועיים ובגיל 6 שבועות. למרות שרמת ה-IL-1 B של קבוצת הטיפול הייתה גבוהה יותר מקבוצת הביקורת, עדיין נמוכה משמעותית מקבוצת המודל (『<0.05); while="" the="" tgf-p="" 1="" level="" of="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" from="" the="" control="" group="" the="" level="" of="" il-1="" p="" directly="" affects="" the="" differentiation="" and="" activity="" of="" osteoclasts.="" an="" increase="" in="" its="" level="" will="" promote="" bone="" resorption="" and="" inhibit="" the="" proliferation="" and="" differentiation="" of="" osteoblasts.="" jhtgf-p="" 1="" is="" closely="" related="" to="" the="" proliferation,="" differentiation,="" and="" migration="" of="" osteoclasts.="" it="" has="" the="" effect="" of="" promoting="" cartilage="" and="" bone="" callus="" formation="" ⑵="" and="" accelerating="" the="" shaping="" of="" bone="" callus.="" this="" suggests="" that="">Cistancheפחיתלשפר את אובדן העצם, לקדם אוסטאוגנזה ולהאיץ ריפוי שברים. זה עשוי להפחית את רמת ה-IL-13 באוסטאופורוטישבר חולדות ולעכב שבר. מושגת פעילות תאי עצם; בנוסף, זה יכול להיות גם קשור לעובדה שCistancheיכול להגביר את רמת ה-TGF-B 1 בחולדות שבורות, לקדם התמיינות אוסטאוגנית והתבגרות ועיצוב של יבלת.

לסיכום, בהתבסס על ניתוח של צפיפות מינרלים בעצם, פרמטרים של סריקת Micro-CT ורמות IL-1 P, TGF"1 בסרום, נמצא כי התמצית המימית שלCistancheפחיתלשפר את אובדן העצםולקדם ריפוי של שברים אוסטאופורוטיים. המנגנון עשוי להיות קשור לכך. זה יכול לעכב את הפרשת ILT 8 בסרום ולקדם את הפרשת TGF-B 1 בחולדות לאחראוסטאופורוטישברים, ובכך לשפר אוסטאופורוזיס ולקדם ריפוי שברים.

4 הפניות

[1] Ma Yuanzheng, Wang Yipeng, Liu Qiang, et al. הנחיות לאבחון וטיפול באוסטאופורוזיס בקשישים בסין (2018) [J], Chinese Journal of Osteoporosis, 2018, 24(12): 1541-1567.

[2]Zhu Gang, Sun Haibin, Xu Gang, et al. ההשפעה הטיפולית והמנגנון של תמצית האלכוהול של בקע בשר על חולדות עם אוסטאופורוזיס שבוצעו בשחלות [J]. Journal of Jilin University (Medicine Edition), 2018, 44(1): 68-72.

[3] Karvande A, Khedgikar V, Kushwaha P, et al. תמצית עץ לב מ-Dalbergia sissoo מקדמת ריפוי שברים ויישומה בחולדות אוסטאופורוטיות הנגרמות על ידי כריתת שחלות [J]. Journal of Pharmacy and Pharmacology, 2017, 69(10): 1381-1397.

[4]קווין 0'Neill, Christopher MS, Nicholas AM, et al. הערכת טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת של התקדמות ריפוי שברים בעכברים[j]. Bone, 2012, (6): 1357-1367.

[5] Yao Xinmiao, Shi Xiaolin, Wang Jian, et al. הסכמה של מומחים על אבחון מדורג וטיפול באוסטיאופורוזיס ראשוני עם רפואה סינית מסורתית במחוז ג'ה-ג'יאנג (2017) [J], Zhejiang Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018, 53(4): 237- 241.

[6] Ma Meng, Zhang Zhiguo, Ma Xiaohui. התקדמות מחקרית במניעה וטיפול באוסטיאופורוזיס על ידי תרופות סיניות בודדות ומורכבות[J]. מדריך רפואי לסין, 2018, 20(8) =477-481.

[7] Zhang Yuequan, Zheng Danhong, Xu Jianfeng, et al. ההשפעה של מחית בשר ממשפחת המדבר על ביטוי חלבון BMP-2 בעכברים אוסטאופורוטיים מזדקנים במהירות[J]. Ningxia Medical Journal, 2014, 36(12): 1114-1116