ההשפעה של תמציות Cistanche Tubulosa על תפקוד הרבייה של זכר בחולדות סוכרתיות הנגרמות על ידי סטרפטוזוטוצין-ניקוטינאמיד-Ⅱ

3.2. In Vivo ניתוח

3.2.1. השפעות של CTE על משקל הגוף וצריכת הקלוריות

לאחר 6 שבועות של ניסויים, קבוצת הסוכרתיים (HFD-DM) הראתה משקל גוף גבוה יותר מאשר קבוצת הביקורת. קבוצת HFD-DME4 הראתה משקל גוף נמוך יותר מאשר קבוצות HFD-DM ו-HFD-DMER (איור 7א). צריכת הקלוריות של קבוצת הביקורת הייתה נמוכה משמעותית מאשר בשאר הקבוצות. לא היה הבדל משמעותי בין צריכת הקלוריות של חמש הקבוצות האחרות (איור 7b).

3.2.2. בדיקת סבילות גלוקוז דרך הפה (OGTT) כדי לקבוע את ההשראה המוצלחת של סוכרת

בדיקת סבילות גלוקוז דרך הפה (OGTT) משמשת ככלי מבטיח לאיתור מחלת סוכרת. רמות מוגברות של גלוקוז בדם מעידות על מצב הסוכרת. כפי שמוצג באיור 8a, רמת הגלוקוז בפלזמה הייתה נמוכה יותר בקבוצות ה-CTE מאשר בקבוצת ה-DM ב-0, 30, 90 ו-120 דקות. יתר על כן, השטח מתחת לעקומה (AUC) של ריכוז הגלוקוז בפלזמה הראה שבקבוצות CTE ו-RSG, קצב ספיגת הגלוקוז בדם גדל (איור 8b).

3.2.3. תכולת גלוקוז פלזמה, כולסטרול וטריגליצרידים

רמת הגלוקוז בדם בצום בפלזמה הייתה גבוהה יותר בקבוצת ה-DM ונמוכה בקבוצת ה-DME2 (למעט ביקורת) מאשר באחרות. לא היה הבדל משמעותי בכולסטרול הכולל בין הקבוצות למעט קבוצת DME4. בקבוצת DME4, רמת הכולסטרול הייתה נמוכה מהאחרות. רמת הטריגליצרידים הייתה גבוהה יותר בקבוצת ה-DM ונמוכה יותר בקבוצת ה-DME4 ותכולת הטריגליצרידים ירדה עם עלייה בריכוז ה-CTE (טבלה 2). התוצאות מראות שרמת הגלוקוז, הכולסטרול והטריגליצרידים בפלזמה הייתה גבוהה יותר בקבוצת ה-DM והרמה ירדה משמעותית בטיפול ב-CTE.

3.2.4. רמות אינסולין בפלזמה, רמת לפטין בפלזמה והערכת מודל הומאוסטזיס - ערכי התנגדות לאינסולין (HOMA-IR)

הרמות של ערכי האינסולין, הלפטין וה-HOMA-IR בפלזמה מוצגות בטבלה 3. לקבוצת ה-DM היו רמות אינסולין ולפטין בפלזמה גבוהות יותר מאשר בקבוצת הביקורת. גם מדד HOMA-IR היה גבוה משמעותית בקבוצת ה-DM. ערכי האינסולין, הלפטין וה-HOMA-IR בפלזמה ירדו עם עלייה בריכוז ה-CTE. לפטין בפלזמה הופחת משמעותית בקבוצות CTE אך קבוצת התרופות RSG (DMR) לא הראתה הבדל משמעותי מקבוצת ה-DM.

3.2.5. השפעת CTE על פלזמה LH ורמות טסטוסטרון בחולדות סוכרתיות

כפי שמוצג בטבלה 4, ריכוזי הטסטוסטרון בחולדות סוכרתיות (DM) ירדו באופן משמעותי, בעודריכוזי הטסטוסטרון עלו באופן משמעותיבמינונים שונים של CTE. יתרה מכך, התוצאות הראו ירידה קלה ברמת ה-LH בקבוצת ה-DM בהשוואה ל-DMR, DME1, DME2 ו-DME4. ייצור LH היה גבוה יותר בקבוצת DME4.

3.2.6. השפעת CTE על פרמטרי הזרע של חולדות סוכרתיות

תוצאות הניסוי הראו שלקבוצת ה-DM הייתה ירידה משמעותית במספר הזרע ובתנועתיותם בהשוואה לקבוצת הביקורת, בעוד ששיעור הפרעות בזרע גדל באופן משמעותי בקבוצת ה-DM. מעניין לציין שמספר הזרע, תנועתיות הזרע ושיעור הפרעות בזרע של קבוצת DMR השתפרו אך תנועתיות הזרע אינה מגיעה לרמה משמעותית בהשוואה ל-DME4. DME2 הראה ספירת זרע טובה יותר מכולם ושיעור התנועתיות עלה משמעותית בקבוצת DME4. לא היה הבדל משמעותי בין מספרי הזרע הבלתי תקינים בין הקבוצות שטופלו ב-RSG ו-CTE (טבלה 5).

3.2.7. השפעת CTE על המורפולוגיה של צינוריות זרע בחולדות סוכרתיות

איור 9 מציג את צביעה H&E של קטע האשך. החץ השחור מציין את תא Leydig והחץ הלבן מציין את תא Sertoli. גם תא Leydig וגם תא Sertoli בקבוצת DM הראו ניוון משמעותי ונראה חלל בלומן. המבנה של תאי Leydig ו- Sertoli שוחזר בקבוצות שטופלו ב-CTE ו-RSG. עובי הצינורית הזרעית היה גבוה יותר בקבוצות CTE ו-RSG מאשר בקבוצת DM.

3.2.8. השפעת CTE על MRNAs KiSS1, GPR54, SOCS-3 ו-SIRT1 בהיפותלמוס של חולדות סוכרתיות

הביטוי של KiSS1 (איור 10a), GPR54 (איור 10b), SOCS-3 (איור 10d) ו-SIRT1 (איור 10c) הוצג באיור 10. ביטוי ה-mRNA של KiSS1 והקולטן GPR54 בחולדות סוכרתיות היה נמוך משמעותית מאשר בקבוצת הביקורת. רמות ביטוי ה-mRNA KiSS1 ו-GPR 54 ב-DMR, DME1, DME2 ו-DME4 עלו באופן משמעותי. בפרט, ביטוי ה-mRNA של GPR54 גדל באופן משמעותי ב-DME4 והיה כמעט דומה לקבוצת הביקורת.

CISTANCHE TUBULOSA טבעי להגנה על ייצור טסטוסטרון PHGS75% ECH 30% ACT 12%

ניסוי זה חקר עוד את כמות ה-mRNA של SOCS-3 ו-SIRT1 בהיפותלמוס של חולדות. הביטוי של SOCS-3 mRNA בחולדות סוכרתיות גדל באופן משמעותי, דבר המעיד על כך שעכבת הלפטין הייתה חמורה יותר. קבוצות DMR, DME1, DME2 ו-DME4 הראו שיפורים משמעותיים בהשוואה לקבוצת הסוכרתיים. ביטוי ה- SIRT1 mRNA בקבוצת DM ירד באופן משמעותי והוגבר באופן משמעותי בקבוצות DME1 ו-DME4.

3.2.9. השפעת CTE על אנזימים נוגדי חמצון בפלזמה ובאשך של חולדות סוכרתיות

טבלה 6 מראה שפעילות SOD בפלזמה, פעילות GPx ופעילות קטלאז של חולדות סוכרתיות ירדו באופן משמעותי והפעילות גדלה בקבוצות שטופלו ב-CTE ו-RSG. בנוסף לכך, DME4 הראה שיפורים משמעותיים בפעילות GPx מאחרים. התוצאות הראו שפעילות ה-SOD והקטלאז בחולדות הסוכרתיות ירדו באופן משמעותי לאחר שישה שבועות. פעילות ה-SOD והקטלז של קבוצת DMR אינה מגיעה לרמה משמעותית. הקבוצות שטופלו ב-CTE הראו שיפורים משמעותיים בפעילות ה-SOD והקטלאז. הפעילות המוגברת של Catalase ו-SOD בקבוצות CTE נראתה גם באשך (טבלה 7). הפעילות הגבוהה ביותר של SOD ו-catalase נצפתה בקבוצת DME1 ו-DME2 בהתאמה.

3.2.10. השפעות של CTE על מתח חמצוני ודלקת בפלזמה ובאשך של חולדות סוכרתיות

ייצור תחמוצת החנקן (NO) בפלזמה (איור 11a) ובאשך (איור 11b) הוצג באיור 11. ייצור NO בקבוצת ה-DM גדל באופן משמעותי הן באשך והן בפלזמה בהשוואה לקבוצת הביקורת. הפחתה הדרגתית של ייצור NO נצפתה בקבוצות DME1, DME2 ו-DME4 (בפלזמה). קבוצת DMR הראתה גם הפחתה משמעותית בייצור NO. במקרה של האשך, נצפתה הפחתה קלה של ייצור NO בקבוצות CTE, בעוד שקבוצת DMR לא הפחיתה באופן משמעותי את ייצור NO.

כפי שמוצג באיורים 12 ו-13, רמות ה-TNF-ו-IL-6 עלו באופן משמעותי בחולדות סוכרתיות (הן בפלזמה והן באשך), מה שמצביע על כך שהדלקת חמורה יותר. בפלזמה, רמת TNF- דומה בקבוצות שטופלו ב-CTE וב-RSG (איור 12a). קבוצות ה-CTE הפחיתו באופן משמעותי (במיוחד DME2) את רמת ה-TNF- באשך (איור 12ב). רמת ה-IL-6 הופחתה באופן משמעותי בפלזמה של קבוצות CTE ו-RSG (איור 13a). באשך הייתה מגמה לירידה ברמת ה-IL-6, אך זו לא הגיעה לרמה משמעותית (איור 13ב).

3.2.1.1. השפעות של CTE על מתח חמצוני ודלקת בזרעונים של חולדות סוכרתיות כתוצאה מתזונה עתירת שומן

איור 14 מציג את תכולת אניוני הסופראוקסיד בזרע של חולדה. התוצאות הראו שייצור אניון סופראוקסיד בזרע של חולדות סוכרתיות עלה באופן משמעותי ולא נצפה שיפור משמעותי בקבוצת ה-DMR. קבוצות DME1 ו-DME4 הראו ייצור מופחת משמעותית של אניון סופראוקסיד.

3.2.12. השפעות של CTE על חמצון ליפידים בזרעונים של חולדות סוכרתיות כתוצאה מתזונה עתירת שומן

מחקרים הראו כי החמצן השומנים גדל הן בחולי סוכרת מסוג 1 והן בחולי סוכרת מסוג 2 [19]. רמת המלונדיאלדהיד (MDA) בפלזמה, זרע ואשך מוצגת בטבלה 8. רמת MDA בפלזמה, אשכים וזרע מקבוצת ה-DM הייתה גבוהה משמעותית והטיפול ב-CTE ו-RSG הפחית את ייצור ה-MDA. נצפתה הפחתה משמעותית בקבוצות DME4 ו-DMEI בפלזמה. מחקר זה מצא שחולדות סוכרתיות לא רק הגבירו את מידת החמצן של השומנים בפלסמה אלא גם עלתה באשך ובזרע. שיפור משמעותי נצפה במינונים שונים של CTE.

4. דיון

סוכרת היא מחלה כרונית הקשורה לרמה גבוהה של סוכר בדם. חוסר האיזון בין רמות נוגדי החמצון וה-ROS יוביל למצב הנקרא עקה חמצונית. סופראוקסיד, רדיקל הידרוקסיל, מי חמצן, תחמוצת חנקן וחמצן בודד הם חלק מהדוגמאות של ROS אשר יתרמו למצבי סוכרת באמצעות עקה חמצונית [20].Cistanche tubulosaהוא צמח מדברי המכיל רכיבים פעילים כגוןפוליסכרידים, אוליגוסכרידים, גליקוזידים פנילתנואידים (echinacoside, verbascoside), חומצה פלמיטית, חומצה לינולאית, אירידואידים, אלדיטולים וליגננים. צמח זה מסוגל לייצר השפעות אנטי-דלקתיות, נוירו-פרוקטטיביות, אנטיבקטריאליות, אנטי-ויראליות, נוגדות חמצון, אנטי-גידוליות ואימונומודולטוריות [21]. מחקרי ספרות מראים שהגליקוזידים פנילתנואידים מ- Cistanche tubulosa הם הסיבה העיקרית לפעילות נוגדת החמצון [22]. רזברטרול (RES) ורוזיגליטזון (RSG) נלקחו כביקורת חיובית עבור מחקרים חוץ-גופיים ו-in vivo בהתאמה. RSG הוא גורם רגיש לאינסולין בעל זיקה לאיזופורם של קולטן מופעל פרוקסיזום פרוליפרטור (PPARc). זה שולט בהיפרגליקמיה בחולי סוכרת [23]. ל-RES יש פעילות נוגדת חמצון טבעית והוא פועל כמרחיב כלי דם, מווסת את חילוף החומרים של ליפופרוטאין, מעכב הצטברות טסיות דם ומונע סרטן [24,25]. החקירה שלנו הראתה שה-ECH מראה פעילות ניקוי רדיקלית טובה יותר מאשר CTE ו-RES (איור 1). כמו כן, מובן שה-ECH אינו גורם לרעילות משמעותית כלשהי לתאי LC-540 ו-TM3 Leydig (איור 2).

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA לזכר תפקוד מיני PHGS75% ECH 30% ACT 12%

AGEs שימשו כדי לגרום לתנאי לחץ בתאי Leydig. ייצור AGEs, דלקת, עקה חמצונית וסוכרת קשורים זה בזה. המצב ההיפרגליקמי של סוכרת מקדם פגיעה בתאים באמצעות ייצור של AGEs ולחץ חמצוני. AGEs מעוררים רעילות של תאים, מה שמקדם עוד יותר גיוס תאים חיסוניים ומוות תאים. רמה מוגברת של AGEs מקדמת את הביטוי של שני סוגים של קולטנים הנקראים RAGE ו-AGER1 [26]. הטפטוף והעברה שלאחר מכן של אלקטרון משרשרת הנשימה המיטוכונדריאלית לחמצן מולקולרי במהלך עקה חמצונית מביאה ליצירת אניון סופראוקסיד. התוצאות שלנו מראות שייצור של אניון סופראוקסיד המושרה על ידי AGEs גדל בקבוצת הביקורת ושיפורים נוספים נצפו גם בטיפולי ECH וגם ב-RES. על פי המחקר שלנו, הובן שייצור הסופראוקסיד (איור 3) ו-H2O2 (איור 4) המושרה על ידי AGEs ירד בנוכחות ECH ו-RES.

NF-κB ידוע כמתווך החשוב של דלקת הקשורה לסוכרת [27]. הביטוי של NF-κB מוביל לתפקוד לקוי של תאים ולמוות של תאים. ההפעלה של NF-KB על ידי עקה חמצונית מעוררת את התגובה הפרו-דלקתית, וויסות העל של האנדותלין ואפופטוזיס [28]. הביטוי של RAGE ו-NF-KB גדל בקבוצות מגורות AGE וההפחתה שלאחר מכן נצפתה בתאים שטופלו ב-ECH ו-RES (איור 5).

טסטוסטרוןהוא סטרואיד אנבולי וראשוניהורמון המין הגברימסונתז מכולסטרול. התהליך מתחיל בביקוע החמצוני של שרשרת הצדדית של הכולסטרול על ידי גן המחשוף של שרשרת הכולסטרול (CYP11A). גן זה ממוקם בקרום המיטוכונדריה והופך את הכולסטרול לפרגננולון. לאחר מכן, הגן CYP17A1 מהרשת האנדופלזמית מסיר שני אטומי פחמן נוספים ומייצר מספר סטרואידים C19. בנוסף לכך, הפרגננולון מתחמצן ליצירת אנדרוסטנדיון/פרוגסטרון על ידי הידרוקסיסטרואיד דהידרוגנאז (3- -HSD). לבסוף, טסטוסטרון מיוצר על ידי הפחתת קבוצת הקטו במיקום הפחמן ה-17 של אנדרוסטנדיון על ידי 17-בטא-הידרוקסיסטרואיד דהידרוגנאז (17- -HSD). תאי ליידיג מעורבים בייצור העיקרי של טסטוסטרון. העברת הכולסטרול לממברנת המיטוכונדריה הפנימית דורשת פעולה של חלבון רגולטורי חריף סטרואידוגני (StAR). מחקרים נוכחיים מראים שהביטוי של StAR, CYP11A1, CYP17A1 ו-HSD17 3 ירד בתאים שטופלו ב-AGE (ביקורת) והוכחה עלייה אדירה בתאים שטופלו ב-ECH וב-RES (איור 6) . לפיכך, התוצאות מראות כי הייצור שלהטסטוסטרון גדל בקבוצות שטופלו ב-ECH וב-RES. 

TUBULOSA CISTANCHE NATURAL לשיפור הכוח המיני PHGS75% ECH 30% ACT 12%

במצב של סוכרת, הובלת הגלוקוז לאיברים מוגבלת וכתוצאה מכך, רמות הגלוקוז עולות [29]. מכאן שהמצב ההיפרגליקמי הוא אחד מהסממנים החשובים לזיהוי סוכרת. המחקרים שלנו מראים שרמת הגלוקוז בפלזמה עלתה בקבוצות סוכרתיות וה-AUC של קבוצת ה-DM היה גבוה משמעותית משאר הקבוצות (איור 8). יחד עם גלוקוז בפלזמה, תכולת הכולסטרול והטריגליצרידים הכוללת גדלה באופן משמעותי בקבוצת ה-DM (טבלה 2). טרשת עורקים מוקלת על ידי רמה מוגברת של כולסטרול וטריגליצרידים [30]. עם זאת, רמת הכולסטרול והטריגליצרידים ירדה בקבוצות שטופלו ב-CTE ו-RSG. תכולת הטריגליצרידים של קבוצת DME4 הגיעה לערכים כמעט דומים לקבוצת הביקורת.

אינסולין הוא הורמון המיוצר על ידי תאי הלבלב ומתפקד כדי לשלוט ברמות הסוכר בדם בגוף ואילו לפטין הוא הורמון המיוצר על ידי האדיפוציטים המסוגלים לווסת את צריכת המזון וניצול האנרגיה. מחקרים הצביעו על כך שלפטין מעורב בפתופיזיולוגיה של השמנת יתר וקיימת אינטראקציה חיובית בין לפטין לאינסולין [31]. המחקרים שלנו מראים שרמת האינולין והלפטין בפלסמה היו גבוהות יותר בקבוצת ה-DM ורמת האינסולין ירדה עם עלייה בריכוז ה-CTE. קבוצת RSG לא מראה שום הבדל משמעותי מקבוצת DM. תנגודת האינסולין ותפקוד התא הוערכו בשיטת HOMA-IR. ערך HOMA-IR עלה בקבוצת ה-DM והיה שונה באופן מובהק מקבוצות אחרות (טבלה 3).

DM משפיע על תפקוד הרבייה באמצעות התחלופה ההורמונלית בציר ה-HPG ומחקרים גילו שביטוי האינסולין באשך מושפע גם מסוכרת. זה מאופיין ב-vacuolization של תאי Sertoli, פיצול DNA מוגבר, הפרעה בזרע ודלדול מוגבר של תאי נבט. מתח חמצוני תורם גם להפרעות בתפקוד הרבייה [32]. תהליך היווצרות הזרע באיבר הרבייה הגברי (אשכים) נקרא spermatogenesis. האשך מורכב מצינוריות מפותלות בחוזקה הנקראות צינוריות זרע. תאי סרטולי נראים בדפנות הצינורית הזרעית ומספקים הזנה לזרע הבוסרי. חקירת פרמטרי הזרע הצביעה על כך שמספר הזרע והתנועתיות ירד והחריגות עלו בקבוצת ה-DM (טבלה 5). השפעה הפוכה נצפתה בקבוצות שטופלו ב-CTE וב-RSG. גם תא Leydig וגם תאי Sertoli בקבוצת DM הראו ניוון משמעותי והחלל נראה בלומן. עובי הצינורית הזרעית ירד גם בקבוצת ה-DM. תוצאה משופרת נצפתה בקבוצות שטופלו ב-CTE ו-RSG (איור 9). בנוסף לכך, רמת ה-LH והטסטוסטרון ירדה בקבוצת ה-DM והרמות עלו בקבוצות שטופלו ב-CTE (טבלה 4). בגברים, טסטוסטרון נמוך בסרום ותדירות דופק LH נמוכה יותר היו קשורים לעתים קרובות להשמנה וסוכרת מסוג 2 [33].

Kisspeptins המקודדים על ידי הגן KiSS1 ידועים כממריץ החזק של ציר HPG וכל מוטציה בגן Kisspeptin תוביל לרמות נמוכות של סטרואידי מין וגונדוטרופין. מחקרים מראים כי בחולדות סוכרתיות הנגרמות על ידי STZ, רמות ה-mRNA של Kiss1 ירדו [33]. ההתחלה והתחזוקה של אי פוריות של יונקים קשורים לקולטן צמוד חלבון G 54 (GPR54). המוטציה ב-GPR 54 מאופיינת בהיעדר התבגרות מינית ורמות נמוכות של הורמונים גונדוטרופיים (LH ו-FSH). ציטוקינים פרו-דלקתיים כגון IL-6 ו-TNF- מווסתים את הביטוי של מדכא ציטוקינים איתות 3 (SOCS3) המעורבים בתנגודת אינסולין מתווכת דלקת בכבד ובאדיפוציטים [34]. SIRT 1 הוא גן הקשור לוויסות של מספר מחלות הזדקנות. גן זה מתבטא בצורה בולטת בתאי הלבלב ומווסת את הפרשת האינסולין ומונע אפופטוזיס. מחקרים עדכניים הצביעו על כך שהביטוי של KiSS1, GPR54 ו-SIRT1 ירד בקבוצת ה-DM, אך הביטוי גדל בקבוצות שטופלו ב-CTE (איור 10). עלייה בביטויי SOCS-3 בקבוצת DM מצביעה על המצב הדלקתי. הקשר המולקולרי הראשון שזוהה בין השמנת יתר ודלקת היה TNF-. לפיכך, רמה מוגברת של TNF- היא אינדיקטור לדלקת. הרמה המופחתת של ציטוקינים פרו-דלקתיים כגון TNF- ו-IL-6 נראתה בקבוצות שטופלו ב-CTE (איורים 12 ו-13).

חוסר האיזון בין ROS לנוגדי חמצון מוביל למצב הסוכרתי. Superoxide Dismutase (SOD), Catalase (CAT) וגלוטתיון פרוקסידאז (GPX) ידועים כנוגדי החמצון העיקריים האחראים לשמירה על רמת ה-ROS האופטימלית [35]. מהתוצאות נמצא כי פעילות נוגדי החמצון הייתה נמוכה משמעותית בקבוצת ה-DM. קבוצות שטופלו ב-CT הראו שיפורים בייצור של נוגדי חמצון. הקבוצה שטופלה ב-RSG לא הראתה שיפורים משמעותיים בפעילות נוגדת החמצון (טבלאות 6 ו-7).

תחמוצת החנקן (NO) ידועה כ-ROS חשוב התורם לדלקת. המחקרים שלנו מצביעים על כך שרמת ה-NO ירדה בקבוצות שטופלו ב-CTE (איור 11). התוצאות הראו שתכולת אניוני הסופראוקסיד בזרע של חולדות סוכרתיות גדלה באופן משמעותי ולא היה שיפור משמעותי לאחר מתן RSG. ייצור הסופראוקסיד הופחת בקבוצות CTE.

קביעת MDA שימושית מאוד להערכת חמצון שומנים. חמצון שומנים הוא תהליך של חמצון בליפידים ולבסוף גורם לנזק לתאים. MDA מיוצר כתוצאה מחמצן שומנים של חומצות שומן רב בלתי רוויות. מחקרים מראים כי רמת MDA נמצאת בקורלציה עם הגיל ורמת הגלוקוז בדם בצום [36]. המחקר הנוכחי הצביע על כך שה-CTE משפר את חמצון השומנים בפלזמה, באשך ובזרע (טבלה 8).

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA לשיפור התפקוד המיני PHGS75% ECH 30% ACT 12%

5. מסקנות

הלחץ החמצוני במצבי סוכרת מפריע למערכת הרבייה הגברית באמצעות פגיעה בזרע והפרעה בתפקוד הגונדאלי. Cistanche tubulosa הוא צמח מדברי המקובל ברפואה הסינית בשל השפעותיו הפרמקולוגיות.Echinacoside (ECH)הוא המרכיב העיקרי של CTE האחראי על פעילות נוגדת החמצון והאנטי דלקתית שלו. התוצאות שלנו במבחנה הצביעו על כך שה-ECH שיקם את מסלול סינתזת הטסטוסטרון והוריד את רמת הביטוי של חלבון NF-KB ו-RAGE. ECH עיכב ביעילות את הייצור של אניון סופראוקסיד ו-H2O2 בתאי Leydig. מחקרים in vivo גילו שה-ECH הפחית את רמות הכולסטרול, הטריגליצרידים, TNF- ו-IL-6. בנוסף לכך, ביטויי ה-mRNA בהיפותלמוס של החולדות הסוכרתיות שופרו משמעותית. ראוי גם לציין שה-ECH הפחית את חמצון השומנים ושיפר את העמידות לאינסולין בחולדות זכרים סוכרתיים. פעילות נוגדת החמצון עלתה הן בפלזמה והן באשך. לכן, המחקרים שלנו הציעו שה-ECH סיפק הגנה יעילה מפני הפרעות בתפקוד הרבייה בחולדות זכרים סוכרתיים הנגרמות על ידי STZ.