קולומוציטים של תולעת האדמה Oligochaeta Lumbricus Terrestris (לינאוס, 1758) כמפתח הגנה אבולוציוני: מחקר מורפולוגי
May 30, 2023
תַקצִיר
למטאזואים יש מספר מנגנוני הגנה פנימית להישרדותם. מערכת ההגנה הפנימית התפתחה לצד האורגניזמים. ל-Annlidae יש coelomocytes במחזור המבצעים פונקציות דומות לתאי החיסון הפגוציטים של בעלי חוליות. מספר מחקרים הראו שתאים אלו מעורבים בתהליכי פגוציטוזיס, אופסוניזציה וזיהוי פתוגנים. כמו מקרופאגים של בעלי חוליות, תאים אלה במחזור החודרים לאיברים מהחלל הקואלומי לוכדים או עוטפים פתוגנים, מיני חמצן תגובתיים (ROS) ותחמוצת חנקן (NO). יתר על כן, הם מייצרים מגוון של חלבונים ביו-אקטיביים המעורבים בתגובה חיסונית ומבצעים פונקציות ניקוי רעלים באמצעות המערכת הליזוזומלית שלהם.
Coelomocytes יכולים גם להשתתף בתגובות ליטיות נגד תאי מטרה ושחרור של פפטידים אנטי-מיקרוביאליים. המחקר שלנו מזהה באופן אימונוהיסטוכימי coelomocytes של Lumbricus terrestris מפוזרים באפידרמיס ובשכבת החיבור שמתחת, הן בשכבת השריר האורך והן בשכבת השריר החלק, אימונו-נרטיבי עבור TLR2, CD14 ו-Tubulin בפעם הראשונה. TLR2 ו-CD14 אינם מותאמים לחלוטין אחד עם השני, מה שמרמז על כך ש-coelomocytes אלה עשויים להיות שייכים לשתי משפחות שונות. הביטוי של מולקולות חיסון אלו על גבי קולומוציטים של Annelidae מאשר את תפקידן המכריע במערכת ההגנה הפנימית של פרוטוסטומים אלו של Oligochaeta, דבר המצביע על שימור פילוגנטי של קולטנים אלה. נתונים אלו יכולים לספק תובנות נוספות לגבי ההבנה של מערכת ההגנה הפנימית של האנלידה והמנגנונים המורכבים של מערכת החיסון בבעלי חוליות.
Coelomocytes קשורים קשר הדוק לחסינות. קולומוציטים הם תאים הקשורים למערכת החיסון. הם יכולים להפריש מגוון של גורמים חיסוניים, כגון ציטוקינים, אינטרלוקינים, אנטיגנים ונוגדנים, כדי לווסת ולשפר את היכולת החיסונית של הגוף.
Coelomocytes ממלאים מגוון פונקציות חיסוניות, כולל ויסות תגובות חיסוניות תאיות כתאים המציגים אנטיגן, הרג ישירות פתוגנים ותאים לא תקינים והשתתפות בוויסות הדלקת והתגובות החיסוניות. בנוסף, כמה מחקרים הראו ש-coelomocytes יכולים גם לשפר חסינות בפני פתוגנים פוטנציאליים על ידי צבירת תאי זיכרון חיסוניים, ובכך לשפר את חסינות הגוף.
לכן, שמירה על תפקוד וכמות תקינים של coelomocytes היא חיונית לחסינות הגוף. יחד עם זאת, על ידי ויסות ושיפור התפקוד החיסוני של קואלומוציטים, ניתן גם לשפר את חסינות הגוף, כדי למנוע ולטפל טוב יותר במחלות שונות. מכאן נוכל לראות את החשיבות של חסינות. Cistanche יכול לשפר חסינות. Cistanche עשיר במגוון חומרים נוגדי חמצון, כגון ויטמין C, ויטמין C, קרוטנואידים ועוד. מרכיבים אלו יכולים לנקות רדיקלים חופשיים, להפחית מתח חמצוני ולשפר חסינות. התנגדות מערכת.
יתרונות לחץ cistanche tubulosa
מילות מפתח
אנליד, קולומוציטים, תולעת אדמה, אבולוציה, חסינות.
מבוא
מנגנוני ההגנה הפנימיים מאפשרים את הישרדות המארח במטאזואן. מנגנונים אלה הופכים מורכבים יותר ככל שאורגניזמים מתפתחים. בניגוד לדוטרוסטומים של בעלי חוליות, לפרוטוסטומים אין חסינות אדפטיבית, המבססת את ההגנה שלהם על חסינות מולדת [56]. קו ההגנה הראשוני מפני חיידקים ומיקרואורגניזמים בבעלי חוליות הוא הפעלה מהירה של תאים ומולקולות חיסון מולדות. לאחרונה, חסרי חוליות הפכו למועמדים לניתוח חסינות מולדת כדי לחשוף אסטרטגיות ומורכבויות של תגובה חיסונית אדפטיבית של בעלי חוליות. חסרי חוליות פיתחו מגוון מנגנוני חיסון פעילים, כולל ייצור פפטידים אנטי-מיקרוביאליים, קרישה, פגוציטוזיס ותגובות אנקפסולציה [20, 24]. מנגנונים אלו תלויים ב"קולטני זיהוי דפוס" (PRRs), מולקולות חיסוניות מולדות שיכולות להבחין בין "עצמי" לרכיבי קרום "לא עצמיים".
ההכרה של "דפוסים מולקולריים הקשורים לפתוגן" (PAMPs) מסדירה את תחילתם של מסלולי איתות חיוניים, עד להפעלת גנים המקודדים מתווכים דלקתיים, פפטידים אנטי-מיקרוביאליים ומווסתים של פגוציטוזיס [32]. Oligochaetes annelids (תולעי אדמה) הפכו למודל לאימונולוגיה השוואתית, וכמו עלוקות, הם משמשים לניטור ביולוגי סביבתי יבשתי ומימי (B.-T. [48, 52, 53, 72]. תולעי אדמה מסופקות עם מולדת ומפותחת מאוד , ומנגנוני הגנה יעילים מפני מיקרואורגניזמים סביבתיים מסוכנים. קו ההגנה המכאני-ביולוגי הראשון, המפריד בין גוף האנלידים מהסביבה החיצונית הוא הטגומנט, המורכב משכבות אפידרמיס ושכבות שרירים. יש לו לציפורן עם שכבה דקה של מוקופוליסכרידים וחלבונים, הפועלים כמחסום אנטי-מיקרוביאלי [20].
בתולעי אדמה, המערכת החיסונית התאית וההומורלית פועלות יחד לראשונה באבולוציה של המטאזואן. הנוזל בחלל הקואלומי נחשב כאחראי לפעילות אימונולוגית הומורלית. החלל הקואלומי של תולעי אדמה מלא בנוזלים המכילים קולומוציטים חופשיים ונודדים ואגרגטים פיגמנטיים שלהם, הנקראים גופים חומים, תוצר של כיבוש של חיידקים פולשים ושאריות חלקיקים. מספר תהליכים ביולוגיים, כולל המוליטים, פרוטאוליטיים, ציטוטוקסיים ואנטי-בקטריאליים מבוצעים על ידי הנוזל הקואלומי של תולעי אדמה [19, 24, 29]. ה-coelom מתקשר ישירות עם הסביבה החיצונית דרך הנקבוביות הגביות והאבובות הכליות המצמדות, המפרישות את המטבוליטים. נקבוביות אלו מעורבות גם בסילוק חיידקים וקואלומוציטים מותשים. בתנאי לחץ, הנוזל הקואלומי והתאים התלויים יכולים להיפלט במהירות על ידי העלייה בלחץ התוך-קולוני [24].
קולומוציטים של תולעי אדמה הם מרכיב חיוני של חסינות מולדת תאית. תאים אלה דומים ללוקוציטים של בעלי חוליות הן במורפולוגיה והן בתפקוד [33]. קולומוציטים מבצעים מגוון רחב של משימות, כולל ציטוטוקסיות של תאים, אנקפסולציה ופגוציטוזיס. ניתן לחלק אותם לשתי תת-אוכלוסיות ראשוניות: מלנוציטים ואמבוציטים (היאלין וגרנולרי) [33]. אמובוציטים היאליניים ואמובוציטים גרגירים מעורבים בפאגוציטוזה ואנקפסולציה, המבטאים PRRs שונים [23, 60]. תאים במחזור אלה הנודדים לרקמות מהחלל הקואלומי דומים מאוד למקרופאגים בעלי חוליות, בולעים או עוטפים פתוגנים, מיני חמצן תגובתיים (ROS) ותחמוצת חנקן (NO) [39]. Eleocytes מייצרים מגוון רחב של חלבונים ביו-אקטיביים המעורבים בתגובה החיסונית ההומורלית וגם בניקוי רעלים מהגוף באמצעות המערכת הליזוזומלית שלהם [24]. Coelomocytes יכולים לקחת חלק בתגובות ליטיות נגד תאי מטרה ושחרור פפטידים אנטי-מיקרוביאליים. בין מנגנוני החיסון, ניסויי השתלה הוכיחו את קיומה של זיהוי עצמי בתולעי אדמה [28].
Coelomocytes של Annelid יוצרים במהירות מנגנונים חיסוניים נגד חיידקים, טפילים ושמרים באמצעות תגובות תאיות [59]. תגובה מהירה זו מתווכת על ידי מולקולות אנטיבקטריאליות מסיסות, כגון ליזוזים, ליזנין ולובריצין [22, 42, 68]. מולקולות אימונולוגיות שמורות מאוד, כגון אינדיקטורים של פני תאים, התגלו על קולומוציטים באמצעות ציטומטריים לניתוח. במיוחד, coelomocytes הגיבו עם נוגדנים ספציפיים ליונקים, והראו חיוביות שטחית לנוגדנים anti-CD11a, CD45RA, CD45RO, CDw49b, CD54, b2-M ו-Ty-1 [30, 34].
מטרת המחקר שלנו היא להעריך באופן אימונוהיסטוכימי את נוכחותם של TLR2, CD14 ו-Tubulin לראשונה ב-coelomocytes של Lumbricus terrestris (לינאוס, 1758), תולעת אדמה רחבה, רב-מקטעית, גלילית השייכת למשפחת Lumbricidae (Annelida, Oligochaeta) , הרמפרודיטה, באורך 8 עד 10 ס"מ [55]. שיפור הידע של מערכת ההגנה הפנימית של חסרי חוליות יכול לסייע בהבנת החסינות המתוחכמת יותר של בעלי החוליות, וכתוצאה מכך, את התפתחות התגובה החיסונית [63].
חומרים ושיטות
דגימות והכנת רקמות
דגימות Lomricus terrestris מגיעות מהיסטוקה במעבדה שלנו. בעבר, הם נלקחו בשדה הפתוח הלא מזוהם והתאקלמו במשך שבועיים באדמה טרייה, כפי שדווח על ידי Licata וחב'. [51], ולאחר מכן הוכנו באמצעות השיטות הסטנדרטיות למיקרוסקופ אור. דגימות הוטבעו ב- immune (paraformaldehyde 4 אחוז) (05-W01030705, BioOptica Milano SpA, מילאנו, איטליה) למשך שעתיים. לאחר מכן, טופלו בסולם אתנול מייבש (מ-30 עד 100 אחוז אתנול), ולאחר מכן הוכנו להכללה בפרפין באמצעות קסילן.
לאחר הכלולה, שני חלקים דקים של 3-5 מיקרומטר חתוכים עם מיקרוטום סיבובי הונחו על כל שקף.
היסטולוגיה
כתמים מורפולוגיים והיסטוכימיים שימשו לעיבוד השקופיות [4, 6]. לאחר מכן, הפרוסות הוזרמו מחדש באמצעות תמיסות אלכוהול פרוגרסיביות (מ-100 עד 30 אחוז אתנול), למים מזוקקים לאחר דה-פראפין בקסילן [17], G. [75], לאחר מכן, הם נצבעו באמצעות Mallory trichrome ו-AB/PAS [3] . לאחר צביעה הותקנו שקופיות באמצעות Eukitt (BioOptica Milano SpA, מילאנו, איטליה, אירופה). נתונים על הזנים המשמשים במחקר זה כלולים בטבלה 1.
אימונופלואורסצנטי
חלקים נטולי פרפנין טופלו בתמיסה של 5 אחוזים של נתרן בורוהידריד כדי לחסל את האוטופלואורסצנטי, לאחר מכן נעשה שימוש בתמיסה של 2.5 אחוזים של אלבומין בסרום בקר (BSA), ולאחר מכן הודגרו פרוסות לילה עם נוגדנים ראשוניים נגד TLR2, CD14 ו-Tubulin [40 ]. לאחר מכן, בוצעה הדגירה של נוגדנים משניים. כדי להימנע מהלבנה, הפרוסות הותקנו באמצעות Fluoromount™ Aquaous Mounting Medium (Sigma-Aldrich, Taufkirchen גרמניה, אירופה). ניסויים נערכו ללא הנוגדנים העיקריים כביקורת שלילית (לא מוצגים נתונים). כדי לאשר שהנוגדנים העיקריים היו אימונו-חיוביים, רקמות עור של חולדה הופעלו כביקורת חיובית (נתונים לא מוצגים) [5, 47, 74].
החתכים נותחו תחת מיקרוסקופ לייזר קונפוקאלי של Zeiss LSM DUO עם מודול META (Carl Zeiss MicroImaging GmbH, Jena, גרמניה, אירופה) עם לייזרים הליום-ניאון (543 ננומטר) וארגון (458 ננומטר) באורכי גל שונים [7] . לשיפור התמונות נעשה שימוש ב-Zen 2011 (תוכנת LSM 700 Zeiss, Oberkochen, גרמניה, אירופה). באמצעות Adobe Photoshop CC גרסה 2019 (Adobe Systems, San Jose, CA, ארה"ב) התמונות הדיגיטליות מוזגו לדמות מורכבת. עקומות עוצמת הקרינה הוערכו לאחר מכן באמצעות תכונת Zen 2011 "פרופיל תצוגה" [58]. פרטים על נוגדנים מסוכמים בטבלה 2.
ניתוח כמותי
נתונים נאספו לניתוח כמותי באמצעות בחינת עשרה מקטעים ועשרים שדות לכל מדגם. חיוביות התא והמספר הוערכו באמצעות תוכנת ImageJ 1.53e. מספר ה-coelomocytes שהם חיוביים עבור TLR2, CD14 ו-Tubulin נספר באמצעות SigmaPlot גרסה 14.0 (Systat Software, San Jose, CA, USA). הנתונים המחולקים בצורה נורמלית נותחו באמצעות ANOVA חד כיווני ומבחן t של סטודנט. ערכי ממוצעים וסטיות תקן (SD) של מספר הקואלומוציטים האימונראקטיביים מדווחים: ** p פחות או שווה ל-0.01, * p פחות או שווה ל-0.05.
תוצאות
לתולעת האדמה Lumbricus terrestris אפיתל חד-שכבתי וציפורן סיבי כיסוי המהווה את האפידרמיס. רקמות חיבור ושרירים המרכיבות את רוב דופן הגוף נמצאות מתחת לאפידרמיס. האפיתל האפידרמיס שומר על ציפורן הקולגן נבדלת משאר האורגניזם ואחראי על ייצור הקולגן הקולגני הזה. הקוטיקולה, האפידרמיס, השריר האורך והשריר המעגלי נראים כולם על ידי בדיקה היסטולוגית של החתך של דופן הגוף של תולעי אדמה. האפידרמיס מוגדר היטב מבחינה מורפולוגית; זה או שכבת אפיתל בודדת או פסאודוסטרוסטרט; הוא מורכב מתאי תמיכה, בסיס, בלוטות וחושים (איור 1). ניתוח אימונופלואורסצנטי, בתצפית במיקרוסקופ קונפוקאלי, מראה coelomocytes חיובי עבור TLR2 (איורים 2, 3), CD14 (איור 2), ו-Tubulin (איור 3), מפוזרים באפידרמיס ובשכבת החיבור למטה, שניהם ב- האורך ובשכבת השריר החלק. TLR2 ו-CD14 אינם משולבים לחלוטין אחד עם השני, מה שמרמז על כך ש-coelomocytes אלה עשויים להיות שייכים לשתי משפחות שונות (איור 2). יתר על כן, תאי בלוטות ריריים היו חיוביים לטובולין באפידרמיס (איור 3). על ידי ניתוח של פונקציית "הצג פרופיל" של המיקרוסקופ הקונפוקאלי, אישרנו את שיאי הקרינה של קולוקליזציה בין נוגדנים שנבדקו.
ניתוח כמותי גילה מספר דומה של coelomocytes חיובי עבור הנוגדנים הבודדים שנבדקו, כפי שמוצג בטבלה 3.
דִיוּן
תגובות המארח נגד פתוגנים פולשים הם מנגנונים פיזיולוגיים השייכים לכל האורגניזמים החיים. מאז הופעת התאים האיקריוטים הראשונים, התפתחו מספר תהליכי הגנה כדי להבטיח את שלמות התא, הומאוסטזיס והישרדות המארח [25]. חסרי חוליות פיתחו מגוון תגובות הגנה שמזהות ומסירות ביעילות חומרים זרים, חיידקים או טפילים. בעוד שלקורדאטים יש חסינות אדפטיבית, לופטרוכוזואנים כתולעי אדמה מסתמכים בעיקר על תאי חיסון מולדים, כגון פגוציטים (אמובוציטים, קואלומוציטים), הכוללים PRR שמורים פילוגנית כדי לתווך את התגובה החיסונית [41]. קולטני נבלות, TLRs ו-Nod-like receptors (NLRs) הם נציגים בולטים בחסרי חוליות. בעקבות קישור קולטן-ליגנד, העברת אותות מתחילה מפל מורכב של תגובות תאיות, המובילות לייצור של מולקולת אפקטור אחת או יותר המעורבות בתגובה החיסונית [61]. החלבון הציטוליטי הקואלומי (CCF), החלבון קושר ליפופוליסכרידים (EaLBI/BPI) והקולטן ל-Toll-like EaTLR הם שלושת סוגי ה-PRR שזוהו בתולעי אדמה עד כה [65, 66]. CCF זוהה ואופיינה כמולקולה חיסונית של הנוזל הקואלומי וה-coelomocytes של Eisenia foetida (Savigny, 1826). CCF, הנקשר לאנטיגנים המיקרוביאליים, יכול לעורר את מפל הפרופנולוקסידאז, מנגנון חיסוני חשוב של חסרי חוליות, שגם מפעיל תכונות אופסוניזציה, ובכך מקדם פגוציטוזיס [18, 35].
TLRs הם קולטני זיהוי ממברנות שנשמרו מבחינה אבולוציונית [9, 15] המזהים אנטיגנים זרים באמצעות PAMPs [2] ותורמים לאיפונון התגובה החיסונית [8, 9, 11, 36]. Bodó et al. [24] הדגימה נוכחות של TLR על coelomocytes של annelid oligochaete Eisenia andrei (Bouche, 1972) [24]. סקנטה וחב'. (2013) בודדה תולעת אדמה TLR (EaTLR) מ-E. andrei. המגוון הגבוה בין המינים של קולטן זה מצביע על נוכחותם של מספר גנים של TLR בתוך הגנום E. andrei. TLR מ-Annlid polychaete Capitella teleta (Blake, Grassle, and Eckelbarger, 2009), EaTLR ו-TLRs של רכיכות ואכינודרמים חולקים הרבה קווי דמיון, על פי מחקר פילוגנטי [66]. Prochazkova et al. הדגיש את EaTLR ומקבצי ציסטאין מרובים (MCC) EaTLR שבא לידי ביטוי בכל רקמות הגוף של תולעי אדמה. הראשון נמצא בשפע במיוחד במערכת העיכול, בעוד השני עשוי לפעול בהתפתחות עוברית ובתגובה נגד טפילים [61]. יתר על כן, נוכחותו ב-coelomocytes יכולה להתבטא יתר על המידה עקב הצטברות חיידקים [66]. Coelomocytes של Lumbricus terrestris הצליחו לזהות מונוציטים במבחנה כלא-עצמיים, מה שמאשר את יכולתם לזיהוי חיסוני [62]. מחקרים ב-Transcriptomics מאשרים את נוכחותם של 18 TLRs במרינה Polychaete annelid Arnicola (Linaeus, 1758) [67].
הדגמנו בעבר את הנוכחות של TLR2 במספר חוליות [4, 11, 12, 16, 46, 54] ו-urochordates [14, 45].
בעקבות נתונים אלה, המחקר שלנו אפיין TLR2 באופן אימונוהיסטוכימי ב-coelomocytes של Lumbricus terrestris בפעם הראשונה. ביצענו colocalized TLR2/CD14 ו-TLR2/-Tubulin, המאשר שני סוגי תאים של coelomocytes, כפי שדווח על ידי Engelmann [33]. לא כל ה-coelomocytes עברו colocalized עבור הנוגדנים שנבדקו, מה שמרמז על גיוון תפקודי ומבני סביר של תאים אלה. למרות שאין ראיות ניסיוניות, הנוכחות של coelomocytes TLR2/CD14 עשויה להצביע על כך שתאים אלה יכולים להיות אמובוציטים המעורבים בפגוציטוזיס, בעוד ש-coelomocytes המבטאים רק TLR עשויים להיות תאי מלנוציטים המעורבים בתגובה החיסונית אך אינם מבצעים פונקציות פגוציטיות [1, 37 , 38], SJ [49, 50], עמ', [57, 71]. למרות Bodó et al. מה שמצביע על היעדר TLR במלנוציטים של E. andrei באמצעות qPCR [23], מלנוציטים חיוביים של TLR2- מתגלים ב-L. terrestris, מה שמצביע על הבדל בין מיני תולעי אדמה, כפי שכבר הונח על בסיס גנומי גרעיני [64].
מחקר של Eguilor et al. [31] בעלוקה Glossiphonia complanata (Linaeus, 1758) זיהה מבחינה מורפולוגית והיסטוכימית שלושה סוגי תאים עיקריים (תאים דמויי מקרופאגים, תאים דמויי NK, גרנולוציטים מסוג I ו-II) תוך שימוש בסמנים אנטי-אנושיים שונים בעכברים ספציפיים למקרופאגים CD14 ו CD61 [44], ותאי NK CD56 ו-CD57 [43]. תגובתיות צולבת זו לנוגדנים שנוצרו נגד אנטיגנים CD יונקים תואמת את נתוני הספרות על מתאמים פילוגנטיים בין annelids ובעלי חוליות [21, 30] ויכולה להיות דוגמה לשימור אבולוציוני של מולקולות חיסון אלו.
נוגדנים אנטי-אנושיים של עכברים נגד CD24, נוגדנים נגד גידולי נמק (TNF), אנטי-CD45RA ואנטי CD45RO אותרו במשטחי ה-coelomocyte של תולעת האדמה Eisenia foetida [30, 34], מה שמצביע על כך שמולקות אלו הן נשמר מאוד במהלך הפילוגנזה. מחקרים אלו עולים בקנה אחד עם מחקרים קודמים שהוכיחו כי אנטיגנים על פני השטח של coelomocyte הם בעלי תגובה צולבת עם נוגדנים כנגד CD14, CD11b ו-CD11c המיוצרים ביונקים Temiste petricola (אמור, 1964), המאפיינות פגוציטים חיוביים לנוגדנים אנטי-CD14, CD11b ו-CD11c [21 ]. לפי נתונים אלה, התוצאות שלנו הראו תאים פגוציטים אימונרטיביים ל-CD14 ב- Lumbricus terrestris.
יתר על כן, הדגמנו את האימונו-חיוביות של coelomocytes ל-Tubulin, בשילוב עם TLR2, המראה קשר בין ציטושלד, microtubules ותגובה חיסונית מולדת המתווכת על ידי TLR2. Colocalization של TLR2 ו-Tubulin מאשרת את המעורבות של טובולין בהובלת TLRs על פני הממברנה. מחקר של Heli Uronen-Hansson et al. [70] הפגין ביטוי tubulovesicular נרחב של TLR2 ו- TLR4 על מונוציטים פנימיים וחיצוניים וכן בתאים דנדריטים. מכיוון שהקולטנים הללו מועברים יחד עם -Tubulin ומקושרים ישירות לקומפלקס Golgi, המיקרוטובולים עשויים לשמש צינור להעברת שלפוחיות TLR [70]. טובולין קיים גם באפידרמיס, עוזר לשמור על שלמותו [27], ומתערב בריפוי פצעים [73], ובכך מסייע למערכת החיסון המולדת, כפי שדווח גם על ידי מחקרים על Nematoda Caenorhabditis elegans (Maupass, 1900) [27, 69].
קולוקליזציה, שאושרה על ידי פונקציית "הצג פרופיל" של המיקרוסקופ הקונפוקאלי, מאששת את התוצאות שהתקבלו, תוך הדגשת שיא הקרינה התואמת לקישור הנוגדנים לאנטיגנים המתאימים.
לסיכום, המחקר שלנו מזהה על ידי מיקרוסקופיה קונפוקלית coelomocytes immunoreactive ל-TLR2, CD14 ו-Tubulin בפעם הראשונה ב-Oligochaeta annelid Lumbricus terrestris. נתונים אלה לא רק מאששים את השימור האבולוציוני החשוב של מולקולות אלה, אלא גם מעמיקים את הידע שלנו על מערכת ההגנה הפנימית של חסרי חוליות, במיוחד האנלידים, ועשויים לספק אינדיקציות שימושיות למחקרים עתידיים, לשיפור המחקר של מנגנוני החיסון המולדים המורכבים של בעלי חוליות עליונים.
הצהרת ועדת הביקורת המוסדית
ויתרו על סקירה אתית ואישור למחקר זה מכיוון שלא הוחלו נהלים ניסיוניים על הדגימות.
תרומות מחברים
המשגה, אלסיו אלשי; ניתוח פורמלי, אלסיו אלשי ואנג'לו פומיה; חקירה, אלסיו אלשי, ג'ואלה קפילו, אנג'לו פומיה, מרקו אלבנו, עמנואלה מסינה, נונזיאקרלה ספאנו, סימונה פרגוליצי ואוגניה ריטה לוריאנו; אוצרות נתונים, אלסיו אלשי, ג'ואל קפילו, אנג'לו פומיה, מרקו אלבנו, עמנואל מסינה, נונציאקארלה ספאנו, סימונה פרגוליצי ואוג'ניה ריטה לוריאנו.; כתיבה-הכנה לטיוטה המקורית, אלסיו אלשי; כתיבה - סקירה ועריכה, אלסיו אלשי, ג'ואלה קפילו, נונציאקארלה ספאנו, סימונה פרגוליצי ואוג'ניה ריטה לוריאנו; הדמיה, אלסיו אלשי ואנג'לו פומיה; פיקוח, אוגניה ריטה לאוטיאנו. כל המחברים קראו והסכימו לגרסה שפורסמה של כתב היד.
מימון
מחקר זה לא קיבל מימון חיצוני.
זמינות נתונים וחומרים
הנתונים המוצגים במחקר זה זמינים במאמר.
הצהרות
אישור אתיקה והסכמה להשתתפות
לא ישים.
אינטרסים מתחרים
המחברים אינם מצהירים על ניגוד עניינים.
הפניות
1. אדרם A, Underhill DM. מנגנונים של פגוציטוזיס במקרופאגים. Annu Rev Immunol. 1999;17(1):593–623. https://doi.org/10.1146/annur ev.immunol.17.1.593.
2. Akira S, Uematsu S, Takeuchi O. זיהוי פתוגנים וחסינות מולדת. תָא. 2006;124(4):783–801. https://doi.org/10.1016/j.cell.2006.02.015.
3. Alesci A, Albano M, Savoca S, Mokhtar DM, Fumia A, Aragona M, Lo Cascio P, Hussein MM, Capillo G, Pergolizzi S, Spanò N, Lauriano ER. זיהוי קונפוקאלי של מולקולות חיסוניות בתאי מועדון העור של זבראפש (Danio rerio, Hamilton 1882) ותפקידם האפשרי בחסינות. ביולוגיה. 2022;11(11):1653. https://doi.org/10.3390/biology11111653.
4. Alesci A, Capillo G, Fumia A, Messina E, Albano M, Aragona M, Lo Cascio P, Spanò N, Pergolizzi S, Lauriano ER. אפיון קונפוקאלי של תאים דנדריטים במעיים ממיקסינים ועד טלאוסטים. ביולוגיה. 2022;11(7):1045.https://doi.org/10.3390/biology11071045.
5. Alesci A, Capillo G, Mokhtar DM, Fumia A, D'Angelo R, Lo Cascio P, Albano M, Guerrera MC, Sayed RKA, Spanò N, Pergolizzi S, Lauriano ER. ביטוי של פפטיד Piscidin1 אנטי-מיקרובי בתאי תורן של זימים של ענק בוץ Periophthalmodon schlosseri (Pallas, 1770). Int J Mol Sci. 2022;23(22):13707. https://doi.org/10.3390/ijms232213707.
6. Alesci A, Cicero N, Fumia A, Petrarca C, Mangifesta R, Nava V, Lo Cascio P, Gangemi S, Di Gioacchino M, Lauriano ER. ניתוח היסטולוגי וכימי של מתכות כבדות בכליות ובזימים של בופס: מרכזי מלנומקרופאג'ים ותאי רודלט כסמנים ביולוגיים סביבתיים. רעלים. 2022;10(5):218. https://doi.org/10.3390/toxics10050218.
7. Alesci, A., Fumia, A., Miller, A., Calabrò, C., Santini, A., Cicero, N., & Lo Cascio, P. (2022). ספירולינה מקדמת צבירת מקרופאגים בכבד דג הזברה (Danio rerio). Nat Prod Res, 1–7. https://doi.org/10.1080/14786419. 2022.2089883.
8. Alesci, A., Gitto, M., Kotańska, M., Lo Cascio, P., Miller, A., Nicosia, N., Fumia, A., & Pergolizzi, S. (2022). אימונוגניות, יעילות, בטיחות והשפעה פסיכולוגית של חיסוני mRNA COVID-19. Human Immunol, S0198885922001586. https://doi.org/10.1016/j.humimm.2022.08.004.
9. Alesci, A., Lauriano, ER, Aragona, M., Capillo, G., & Pergolizzi, S. (2020). סימון תאי לנגרהנס של בעלי חוליות, מדגים ועד יונקים. Acta Histochemica, 122(7): 151622. https://doi.org/10.1016/j.acthis.2020.151622.
10. Alesci A, Lauriano ER, Fumia A, Irrera N, Mastrantonio E, Vaccaro M, Gangemi S, Santini A, Cicero N, Pergolizzi S. הקשר בין תאי חיסון, דיכאון, מתח ופסוריאזיס: האם השימוש במוצרים טבעיים להיות מועיל? מולקולות. 2022;27(6):1953.
11. Alesci, A., Pergolizzi, S., Capillo, G., Lo Cascio, P., & Lauriano, ER (2022). תאי רודלט בכליה של דגי זהב (Carassius auratus, Linnaeus 1758): מחקר מיקרוסקופי קל וקונפוקאלי. Acta Histochemica, 124(3):151876.
12. Alesci, A., Pergolizzi, S., Fumia, A., Calabrò, C., Lo Cascio, P., & Lauriano, ER (2022). תאי תורן במעיים של דג זהב (Carassius auratus): אפיון אימונוהיסטוכימי. Acta Zoologica.
13. Alesci A, Pergolizzi S, Fumia A, Miller A, Cernigliaro C, Zaccone M, Salamone V, Mastrantonio E, Gangemi S, Pioggia G, Cicero N. מערכת החיסון והמצב הפסיכולוגי של נשים בהריון במהלך נגיף הקורונה-19 מגיפה: האם מיקרו-נוטריאנטים מסוגלים לתמוך בהריון? חומרים מזינים. 2022;14(12):2534. https://doi.org/10.3390/nu14122534. 14. Alesci, A., Pergolizzi, S., Lo Cascio, P., Capillo, G., & Lauriano, ER (2022). לוקליזציה של פפטיד מעי vasoactive ותאים אימונרטיביים של קולטן דמוי אגרה באנדוסטטייל של urochordate Styela plicata (Lesueur, 1823). Microsc Res Tech, https://doi.org/10.1002/jemt.24119.
15. Alesci A, Pergolizzi S, Lo Cascio P, Fumia A, Lauriano ER. התחדשות עצבית: סקירה השוואתית של חולייתנים ופרספקטיבות חדשות למחלות נוירודגנרטיביות. Acta Zoologica. 2021. https://doi.org/10. 1111/azo.12397.
16. Alesci A, Pergolizzi S, Savoca S, Fumia A, Mangano A, Albano M, Messina E, Aragona M, Lo Cascio P, Capillo G, Lauriano ER. זיהוי תאי גביע מעיים של הגפש רחב הזימים Eptatretus Cirrhatus (Forster, 1801): הערכת מיקרוסקופיה קונפוקלית. ביולוגיה. 2022;11(9):1366.https://doi.org/10.3390/biology11091366.
17. Alturkistani HA, Tashkandi FM, Mohammedsaleh ZM. כתמים היסטולוגיים: סקירת ספרות ומחקר מקרה. Global J Health Sci. 2015;8(3):72.https://doi.org/10.5539/gjhs.v8n3p72.
18. Beschin A, Bilej M, Brys L, Torreele E, Lucas R, Magez S, De Baetselier P. Convergent evolution of cytokines. טֶבַע. 1999;400(6745):627–8.https://doi.org/10.1038/23164.
19. Bilej M, De Baetselier P, Beschin A. הגנה אנטי-מיקרוביאלית של תולעת האדמה. Folia Microbiol. 2000;45(4):283–300. https://doi.org/10.1007/BF028 17549.
20. Bilej M, Procházková P, Šilerova M, Josková R (2010) חסינות נגד תולעי אדמה. בתוך: Söderhäll K, edotiro. חסינות חסרי חוליות, כרך. 708. בוסטון: ספרינגר; ע. 66–79). https://doi.org/10.1007/978-1-4419-8059-5_4.
21. Blanco GAC, Escalade AM, Alvarez E, Hajos S. גירוי המושרה על ידי LPS של פגוציטוזיס בתולעת ה-sipunculan Themiste petricola: מעורבות אפשרית של מולקולות צולבות CD14, CD11B ו-CD11C. Dev Comp Immunol. 1997;21(4):349–62. https://doi.org/10.1016/ S0145-305X(97)00007-4.
22. Bodó K, Boros Á, Rumpler É, Molnár L, Böröcz K, Németh P, Engelmann P. זיהוי של הומולוגים חדשים של lubricin ב-Eisenia andrei תולעי אדמה. Dev Comp Immunol. 2019;90:41–6.
23. Bodó, K., Ernszt, D., Németh, P., & Engelmann, P. (2018). טביעות אצבע מולקולריות מובהקות של מערכת החיסון וההגנה בתת-קבוצות מופרדות של תולעי אדמה של אייזנייה אנדריי. הישרדות חסרי חוליות J, 338–345.
24. Bodó K, Kellermayer Z, László Z, Boros Á, Kokhanyuk B, Németh P, Engelmann P. Injury-Induced Immune Response Inate Under Regeneration Segment of the Earthworm, Eisenia andrei. Int J Mol Sci. 2021;22(5):2363.
25. בוכמן, ק' (2014). אבולוציה של חסינות מולדת: רמזים מחסרי חוליות דרך דגים ליונקים. גבולות באימונולוגיה.
For more information:1950477648nn@gmail.com
