תמצית Cistanche Deserticola מגבירה את היווצרות העצם באוסטאובלסטים--חלק א'

איש קשר:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

טה-מאו לי^aet a

תַקצִיר
מטרות חקרנו את ההשפעה שלCistancheמדבריתאִמָא. (CD) פועלעֶצֶםהיווצרותעל ידי אוסטאובלסטים מתורבתים. שיטות מבחן היווצרות גושים מינרלים שימש כדי לבחון את ההשפעות החוץ-גופניות של CD(CistancheDeserticola)עַלעֶצֶםהיווצרות. פוספטאז אלקליין (ALP), חלבונים מורפוגנטיים של עצם (BMP)-2 וביטוי mRNA של אוסטאופונטין (OPN) נותחו על ידי תגובת שרשרת פולימראז כמותית בזמן אמת. מנגנון הפעולה של CD(CistancheDeserticola)תמצית נחקרה באמצעות Western blotting. ההשפעה האנטי-אוסטיאופורטית in-vivo של CD(CistancheDeserticola)תמצית הוערכה בעכברים שעברו שחלות.
ממצאי מפתח

CD(CistancheDeserticola)לתמצית לא הייתה השפעה על שגשוג, הגירה או ריפוי פצעים של אוסטאובלסטים מתורבתים, אך הגבירו את ALP, BMP-2 ו-OPN mRNA ומינרליזציה של עצם. מעכבי חלבון קינאז המופעל על ידי מיטוגן (MAPK) או מעכבי גורם גרעיני (NF)-kB הפחיתו CD(CistancheDeserticola)המושרה בתמציתהיווצרות עצםוביטוי ALP, BMP-2 ו-OPN. עם זאת, CD(CistancheDeserticola)תמצית לא השפיעה על אוסטאוקלסטוגנזה. בנוסף, CD(CistancheDeserticola)תמצית מנעה את אובדן העצם שנגרם על ידי כריתת שחלות in vivo.
מסקנות

CD(CistancheDeserticola)יכול להיות רומןהיווצרות עצםסוכן לטיפול באוסטיאופורוזיס.

מילות מפתחהיווצרות עצם; Cistancheמדברית; עשב סיני; אוסטאובלסטים

Cistanche deserticola is good for bone formation

Cistanche deserticolaהוא טוב עבורהיווצרות עצם

מבוא

עצם היא רקמה מורכבת המורכבת ממספר סוגי תאים העוברים תהליך מתמשך של חידוש ותיקון המכונה 'שיפוץ עצם'. שני סוגי תאים עיקריים האחראים לעיצוב מחדש של העצם הם אוסטאוקלסטים, שסופגים עצם, ואוסטאובלסטים, היוצרים עצם חדשה. שיפוץ העצם מווסת על ידי מספר הורמונים מערכתיים (למשל הורמון פארתירואיד, 1, 25-דיהידרוקסי ויטמין D3, הורמוני מין וקלציטונין) וגורמים מקומיים (כגון תחמוצת חנקן, פרוסטגלנדינים, גורמי גדילה וציטוקינים).[1] אוסטאופורוזיס נוצר כאשר ספיגה והיווצרות עצם אינם מתואמים ועודף פירוק עצם עולה על בניית העצם.[2] הטיפולים הנוכחיים לאוסטאופורוזיס כוללים ביספוספונטים, קלציטונין ואסטרוגן, שהם מעכבי ספיגת עצם השומרים על מסת העצם על ידי עיכוב פעילות אוסטאוקלסט.[3] עם זאת, השפעתן של תרופות אלו בהגדלת או שחזור מסת העצם קטנה יחסית, בוודאי לא יותר מ-2 אחוזים בשנה.[3] יש, אם כן, צורך בחומרים בוני עצם, כגון טריפארטיד, המעוררים חדשיםעֶצֶםהיווצרותולתקן את השינוי במיקרו-ארכיטקטורה טרבקולרית האופיינית לאוסטאופורוזיס מבוסס.[4,5] כי חדשעֶצֶםהיווצרותהוא בעיקר פונקציה של האוסטאובלסט, חומרים הפועלים על ידי הגברת התפשטות התאים של השושלת האוסטאובלסטית או השראת התמיינות של האוסטאובלסטים יכולים לשפר את היווצרות העצם.[5,6]
למרות שהמנגנונים של אוסטאופורוזיס עדיין לא ברורים, הם כנראה קשורים לירידה בזמינות או להשפעות של גורמי צמיחת עצם, כגון חלבונים מורפוגנטיים של העצם (BMPs).[7] BMPs, הקשורים מבחינה מבנית למשפחת גורמי הגדילה-b המשתנה, זוהו במקור על ידי יכולתם לגרום לחוץ רחמי.עֶצֶם היווצרותבמכרסמים.[8] BMPs ממלאים תפקיד חשוב בעֶצֶםהיווצרותוהתמיינות תאי עצם על ידי גירוי פעילות פוספטאז אלקליין (ALP) וכן סינתזה של פרוטאוגליקן, קולגן ואוסטאופונטין (OPN).[9] מחקר שנערך לאחרונה מצא קשר בין אוסטאופורוזיס ופולימורפיזמים ספציפיים בגנים BMP-2, ALP ו-OPN, מה שמרמז שהם קשורים להתפתחות אוסטאופורוזיס.[10]

Cistancheמדבריתאִמָא. (Orobanchaceae; בקיצור CD)(CistancheDeserticola)הוא עשב מקומי בסין ונמצא בשימוש נרחב ברפואה המסורתית כסוכן טיפולי בשל תכונותיו המרגיעות, משככי כאבים וממריצים חיסוניים.[11] מחקרים פרמקולוגיים מודרניים הראו כי CD(CistancheDeserticola)תמציות יכולות לעורר חסינות,[12] לנקות רדיקלים חופשיים[13], ולהגביר את הפעילות של סופראוקסיד דיסמוטאז.[14] לחומרים נוגדי דלקת ונוגדי חמצון יש פוטנציאל לטפל באוסטיאופורוזיס על ידי הגדלתעֶצֶם היווצרותו/או דיכוי ספיגת עצם.[15,16] עם זאת, ההשפעה של CD(CistancheDeserticola)על תפקוד תאי העצם טרם נקבע. הנה, אנו מדווחים על התקליטור הזה(CistancheDeserticola)תמצית לא השפיעה על פעילות ההתרבות, ההגירה או ריפוי הפצעים של אוסטאובלסטים מתורבתים, אך כן הגבירו את ALP, BMP-2 וביטוי OPN ומינרליזציה של העצם. בנוסף, אנו מראים שמסלולי האיתות של חלבון קינאז המופעל על ידי מיטוגן (MAPK) ו-Nclear Factor (NF)-kB עשויים להיות מעורבים בעלייה בתיווך CD בביטוי גנים ובמינרליזציה של העצם. לעומת זאת, התקליטור(CistancheDeserticola)תמצית לא דיכאה אוסטאוקלסטוגנזה במבחנה. במיוחד, טיפול בעכברים עם CD(CistancheDeserticola)תמצית מנעה אובדן עצם שנגרם על ידי כריתת שחלות in vivo. הנתונים שלנו, אם כן, מצביעים על התקליטור הזה(CistancheDeserticola)ניתן להשתמש כדי לעוררעֶצֶםהיווצרותלטיפול באוסטיאופורוזיס.

Cistanche deserticola boost the immunity

Cistanche deserticolaלהגביר את החסינות

חומרים ושיטות

תמצית וחומרי Cistanche deserticola

CD(CistancheDeserticola)תמצית נרכשה מחברת התרופות Chuang Song-Zong (Kaohsiung, טייוואן). חילוץ ובידוד של CD(CistancheDeserticola)עקבו כמתואר קודם לכן (על בסיס נתונים ספקטרליים הם זיהו את ההרכב הכימי כולל בטא-סיטוסטרול, דאקוסטרול, חומצה סוקסינית, טריאקונטנול, אקטאוזיד, בטאין ופוליסכריד).[17] נוגדנים polyclonal ארנבים ספציפיים עבור p-extracellular signal-regulatored kinases (ERK), ERK, p-p38, p38, pc-Jun N-terminal kinases (JNK), JNK, p-p65 ו-p65 נרכשו מ-Santa Cruz Biotechnology ( סנטה קרוז, ארה"ב). ערכת osteocalcin ELISA נרכשה מ-Biosource Technology (ניוולס, בלגיה). הטלופפטידים מסוף C של ערכת קולגן מסוג I הושגו מ-Cross Laps (Herlev, דנמרק). המוטנט p38 הדומיננטי-שלילי סופק על ידי ד"ר ג'יי האן (מרכז רפואי דרום-מערבי, דאלאס, ארה"ב). המוטנט הדומיננטי-שלילי של JNK סופק על ידי ד"ר מ. קארין (אוניברסיטת קליפורניה, סן דייגו, ארה"ב). המוטנט הדומיננטי-שלילי של ERK2 סופק על ידי ד"ר מ. קוב (מרכז רפואי דרום-מערבי). כל שאר הריאגנטים הושגו מסיגמה-אלדריץ' (סנט לואיס, ארה"ב).

תרבית תאים

קו התאים האוסטאובלסטים העכברי MC3T3-E1 נרכש מ-American Type Culture Collection (ATCC; Rockville, ארה"ב). תאים תורבו ב-95 אחוז אוויר, 5 אחוז CO2 עם a-MEM שנוספו עם 20 מ"מ HEPES ו-10 אחוזים סרום עגל עוברי מושבת חום, 2 מ"מ גלוטמין, פניצילין (100 U/ml) וסטרפטומיצין (100 מ"ג /ml).

מדידה של היווצרות גושים מינרליים

היווצרות גושים מינרליים הוערכה כמתואר.[18] בקצרה, אוסטאובלסטים תורבו במדיום המכיל ויטמין C (50 מ"ג/מ"ל) ו-b-glycerophosphate (10 מ"מ) במשך שבועיים, והמדיום הוחלף כל שלושה ימים. לאחר דגירה עם CD(CistancheDeserticola)תמצית במשך 12 ימים, התאים נשטפו פעמיים עם 20 מ"מ תמיסת מלח מלוחה טריס המכילה 0.15 מ' NaCl (pH 7.4), מקובעים באתנול קר כקרח 75 אחוז (v/v) למשך 30 דקות, ואוויר- מיובש. שקיעת סידן נקבעה באמצעות צביעת alizarin red-S. בקצרה, תאים ומטריצה מקובעים באתנול נצבעו במשך שעה אחת ב-40 מ"מ alizarin red-S (pH 4.2) ונשטפו בהרחבה במים. הכתם הנקשר נחלץ עם 10 אחוז (w/v) cetylpyridinium chloride ו- alizarin red-S בדגימות כמתה על ידי מדידת ספיגה ב-550 ננומטר והשוותה לעקומה סטנדרטית. שומה אחת של alizarin red-S קושרת באופן סלקטיבי כשתי מולים של סידן.

Cistanche is good for bone formation

Cistanche deserticolaהוא טוב עבורהיווצרות עצם

תגובת שרשרת פולימראז כמותית בזמן אמת

סך ה-RNA הופק מאוסטאובלסטים באמצעות ערכת TRIzol (MDBio Inc., Taipei, Taiwan). שעתוק הפוך בוצע באמצעות 2 מ"ג כולל RNA ופריימר אוליגו(dT).[19,20] תגובת שרשרת פולימראז כמותית בזמן אמת (qPCR) בוצעה באמצעות TaqMan® One-Step PCR Master Mix (Applied Biosystems, Carlsbad, ארה"ב). סך ה-cDNA התווסף (100 ng לכל תגובה של 25-ml) עם פריימרים ספציפיים לרצף ובדיקות Taqman®. כל הפריימרים והבדיקות של גני המטרה נרכשו באופן מסחרי, כולל b-actin כבקרה פנימית (Applied Biosystems). מבחני qPCR בוצעו בשלושה עותקים על מערכת זיהוי רצף StepOnePlus (Applied Biosystems). תנאי המחזור היו 10-מינימום הפעלת פולימראז ב-95 מעלות ואחריה 40 מחזורים של 95 מעלות למשך 15 שניות ו-60 מעלות למשך 60 שניות. הסף נקבע מעל לרקע הבקרה שאינו תבנית ובתוך השלב הליניארי של הגברה של גן מטרה כדי לחשב את מספר המחזור שבו התעתיק זוהה (מסומן CT).

ניתוח כתם מערבי

תאי תאים הוכנו כמתואר קודם. [21,22] חלבונים נפתרו על ידי SDS-PAGE והועברו לממברנות Immobilon polyvinyl difluoride (Millipore, Billerica, ארה"ב). הכתמים נחסמו עם 4 אחוז אלבומין בסרום בקר למשך שעה אחת בטמפרטורת החדר ולאחר מכן נבדקו עם נוגדנים אנטי-אנושיים של ארנב נגד p-65, או p-p65 (1:1000) למשך שעה אחת בטמפרטורת החדר. לאחר שלוש שטיפות, הכתמים הודגרו עם נוגדן משני לחמור אנטי-ארנבת מצומדת לפרוקסידאז (1:1000) למשך שעה אחת בטמפרטורת החדר. הכתמים הומחזו על ידי כימילומינסנציה מוגברת באמצעות סרט X-OMAT LS (Eastman Kodak, Rochester, ארה"ב).

אוסטאופורוזיס הנגרמת על ידי כריתת שחלות

נקבות עכברי ICR, בנות ארבעה שבועות, 22~28 גרם, שימשו למחקר זה. עכברים עברו כריתת שחלות דו-צדדית בהרדמה של טריכלורואצטלדהיד (100 מ"ג/ק"ג) ועכברי ביקורת עברו ניתוח דמה (דמה) לשם השוואה. צפיפות מינרל העצם ותכולת מינרל העצם נמדדו לאחר מתן פומי של ריכוזים שונים של CD(CistancheDeserticola)לחלץ כל יומיים במשך ארבעה שבועות. צפיפות המינרלים הכוללת של העצם בגוף ותכולת המינרלים של העצם נקבעו באמצעות מד קליטת קרני רנטגן בעל אנרגיה כפולה (DEXA; XR-26; נורלנד, פורט אטקינסון, ארה"ב) תוך שימוש במצב עבור נבדקים קטנים כפי שתואר קודם לכן.[18, 23] כל הפרוטוקולים עמדו בהנחיות המוסדיות ואושרו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים של האוניברסיטה הרפואית בסין.

ניתוח סטטיסטי

ניתוח סטטיסטי בוצע באמצעות תוכנת Prism 4.01. (GraphPad Software Inc., סן דייגו, ארה"ב). הערכים שניתנו הם SEM ממוצע. ניתוח סטטיסטי בין שתי דגימות בוצע באמצעות מבחן t של הסטודנט. השוואות סטטיסטיות של יותר משתי קבוצות בוצעו תוך שימוש בניתוח חד-כיווני של שונות עם הבדיקה הפוסט-הוקית של Bonferroni. בכל המקרים, P <0.05 נחשב="">

cistanche is good for bone formation

Cistanche deserticolaהוא טוב עבורהיווצרות עצם

תוצאות

Cistanche מדבריתתמצית מגבירה מינרליזציה של העצם על ידי אוסטאובלסטים תוספת של CD(CistancheDeserticola)תמצית במשך 24 או 48 שעות לא השפיעה על התפשטות תאי אוסטאובלסט MC3T3-E1 של עכברים במבחן MTT (נתונים לא מוצגים). מכיוון שהתמיינות אוסטאובלסט היא תהליך מורכב הכולל שגשוג ונדידה של תאים, בדקנו גם את יכולת הנדידה של תאי MC3T3-E1 לאחר טיפול ב-CD(CistancheDeserticola)לחלץ. באמצעות טרנסוול ומבחני ריפוי פצעים, מצאנו את התקליטור הזה(CistancheDeserticola)תמצית לא השפיעה על נדידת אוסטאובלסטים (נתונים לא מוצגים). היווצרות של גושים מינרליים היא אחד הסמנים של התבגרות אוסטאובלסטים. צביעה אדומה S של Alizarin הראתה שגושים מינרליים נוצרו כאשר אוסטאובלסטים תורבו במשך שבועיים במדיום המכיל ויטמין C (50 ug/ml) ו-glycerophosphate (10 מ"מ), באופן התלוי בריכוז על ידי הוספת CD(CistancheDeserticola)(איור 1א). לכן, CD(CistancheDeserticola)לחלץ היווצרות גושי עצם על ידי אוסטאובלסטים מתורבתים, אך לא התפשטותם או נדידתם. בדקנו גם את תפקידו של CD(CistancheDeserticola)תמצית באוסטאוקלסטוגנזה המושרה על ידי RANKL אך לא מצאה השפעה (נתונים לא מוצגים).

תמצית Cistanche deserticola מגבירה פוספטאז אלקליין, חלבון מורפוגנטי של העצם-2 וביטוי אוסטאופונטין באוסטאובלסטים מתורבתים

אוסטאובלסטים מובחנים מפגינים פעילות ALP מוגברת, המתאם עם רמות גבוהות של ביטוי אנזים.[18] מצאנו את הטיפול הזה עם CD(CistancheDeserticola)תמצית במשך 72 שעות הגדילה משמעותית את פעילות ALP אוסטאובלסט (איור 1ב). בהתחשב בתפקיד המכריע של BMP-2, ALP ו-OPN בהבחנה בין אוסטאובלסטים, בדקנו אם CD(CistancheDeserticola)תמצית מפעילה את השפעתה על התמיינות אוסטאובלסט על ידי ויסות ביטוי BMP-2, ALP ו-OPN. טיפול בתאים באמצעות CD(CistancheDeserticola)תמציות הגבירו את ביטוי ה-mRNA של ALP, BMP-2 ו-OPN באופן תלוי ריכוז (איור 1c), מה שמוכיח כי CD(CistancheDeserticola)לחלץ התמיינות מושרה של אוסטאובלסטים על ידי הגברת ביטוי ALP, BMP-2 ו-OPN.

Cistanche deserticola is good for bone formation

תמצית Cistanche deserticola מגבירה יצירת קשרי עצם באמצעות מסלול חלבון קינאז המופעל על ידי מיטוגן

דווח כי MAPK ממלא תפקיד חשוב בעֶצֶםהיווצרות[24,25] אז בדקנו לאחר מכן האם מסלול האיתות הזה מעורב ב-CD(CistancheDeserticola)מינרליזציה של עצם המושרה בתמצית. טיפול מקדים בתאים עם מעכב ERK U0126, מעכב p38 SB203580, או מעכב JNK SP600125 CD מופחת(CistancheDeserticola)מינרליזציה של עצם מוגברת בתמצית (איורים 2a, 3a ו-4a). יתר על כן, המעכבים גם חסמו CD(CistancheDeserticola)ביטוי ALP, BMP-2 ו-OPN המושרה על ידי מיצוי (איורים 2b-4c). טרנספקציה של תאים עם ERK2, p38, או JNK מוטציה CD מופחת(CistancheDeserticola)עלייה של תמצית בביטוי mRNA של ALP, BMP-2 ו-OPN (איורים 2c, 3c ו-4c). לאחר מכן, בדקנו ישירות את ההפעלה של ERK, p38 ו-JNK לאחר CD(CistancheDeserticola)טיפול בתמצית. דגירה של תאים עם CD(CistancheDeserticola)תמצית מושרה של ERK, p38 ו-JNK זרחון (איורים 2d, 3d ו-4d). לכן, ERK, p38 ו-JNK מתווכים את הגידולעֶצֶםהיווצרותהמושרה על ידי CD(CistancheDeserticola)טיפול באוסטאובלסטים.

FIGURE 2-1

Cistanche deserticola is good for bone formation

figure 3-1

figure 3-2

Cistanche deserticola is good for bone formation

תמצית Cistanche deserticola מגבירה את היווצרות גושי עצם דרך מסלול הגורם הגרעיני-kB

כפי שהוזכר קודם לכן, הפעלת NF-kB נחוצה עבורעֶצֶםהיווצרות[26,27] לאחר מכן טיפלנו באוסטאובלסטים עם מעכבי theNF-kB pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC) ו-N-tosyl-L-phenylalanine chloromethyl ketone (TPCK) נרכשו מ-Calbiochem (Darmstadt, גרמניה) כדי לקבוע אם הפעלת NF-kB היא מעורב בתקליטור(CistancheDeserticola)מינרליזציה של עצם המושרה בתמצית. איור 5א מראה שטיפול מקדים של אוסטאובלסטים עם PDTC או TPCK מעכב CD(CistancheDeserticola)היווצרות גושי עצם המושרה על ידי מיצוי, וכן הפחיתה את העלייה בביטוי ALP, BMP-2 ו-OPN (איור 5b ו-5c). זרחון של תת-יחידת המשנה NF-kB p65 הוא אינדיקטור להפעלת NF-kB;[28] בהתאם לכך, מצאנו ש-CD(CistancheDeserticola)תמצית מוגברת של זרחון p65 באוסטאובלסטים (איור 5ד). תוצאות אלו הצביעו על כך שהפעלת NF-kB חשובה לביטוי ALP, BMP-2 ו-OPN המושרה בתמצית CD ויצירת קשרי עצם.

Cistanche deserticola is good for bone formation

איור 4 מעורבות של c-Jun N-terminal kinases (JNK) בCistancheמדברית(CD) מינרליזציה של עצם המושרה בתמצית באוסטאובלסטים. (א) תאים צופו בצלחות של 24-בארים ותופחו במדיום המכיל ויטמין C (50 מ"ג/מ"ל) ו-b-גליצרופוספט (10 מ"מ) למשך שבועיים. התאים טופלו במקביל עם CD(CistancheDeserticola)תמצית (26 מ"ג/מ"ל) בתוספת SP600125 (3 מ"מ). היווצרות הגושים המינרלים הוערכה על ידי צביעה אדומה-S של אליזרין (n=5). (ב, ג) תאים טופלו מראש עם SP600125 למשך 30 דקות או הועברו עם מוטציה JNK או 24 שעות ולאחר מכן גירוי עם תמצית CD, ופעילות פוספטאז אלקליין (ALP) ו-ALP, חלבון מורפוגנטי של עצם (BMP)-2 ו ביטוי mRNA של osteopontin (OPN) נמדד על ידי ערכת ALP ותגובת שרשרת פולימראז כמותית בזמן אמת. (ד) תאים טופלו בתמצית CD עבור מרווחי זמן מצוינים, וביטוי p-JNK נבדק על ידי Western blotting. *פ< 0.05,="" compared="" with="" control="" group;="">< 0.05,="" compared="" with="" cd="">(CistancheDeserticola)קבוצה שטופלה בתמצית.

figure 5-1

figue 5-2

עיכוב אובדן עצם על ידי תמצית Cistanche deserticola בעכברים שעברו ניתוח שחלות

לבחינת ההשפעה של CD(CistancheDeserticola)תמצית על אובדן עצם, אוסטאופורוזיס נגרמה בעכברים נקבות על ידי כריתת שחלות. כצפוי, עכברים שעברו שחלות הראו ירידה בצפיפות העצם הכוללת של העצם ובתכולת המינרלים העצם (איור 6a ו-6b). טיפול בתקליטור(CistancheDeserticola)תמצית במשך ארבעה שבועות עיכבה את אובדן צפיפות מינרל העצם ותכולת מינרל העצם באופן תלוי מינון (איור 6a ו-6b). ריכוזי ALP בדם יכולים לשקף את הפעילות האוסטאובלסטית.[29] כפי שמוצג באיור 6c, CD(CistancheDeserticola)תמצית עיכבה את הירידה בפעילות ALP בסרום הנגרמת על ידי כריתת שחלות. בנוסף, CD(CistancheDeserticola)תמצית גם העלתה את רמת האוסטאוקלצין, סמן שלעֶצֶםהיווצרות, והפחית את רמת הטלופפטידים מסוף C של קולגן מסוג I, סמן של ספיגת עצם (איור 6d ו-6e). ממצאים אלה תומכים אפוא בעוצמה וביעילות של CD(CistancheDeserticola)תמצית במניעת אובדן עצם in vivo.

figure 6-2

figure 6-3

איור 6 עיכוב של כריתת שחלות הגורם לירידה בצפיפות מינרל העצם ותכולת מינרל העצם על ידיCistancheמדבריתתמצית (CD). נקבות עכברי ICR עברו ניתוח מדומה או בוצעו כריתת שחלות. עכברים שעברו שחלות טופלו בריכוזים המצוינים של CD(CistancheDeserticola)תמצית על ידי האכלה דרך הפה. צפיפות המינרלים הכוללת של העצם בגוף (a), תכולת מינרל העצם (ב), פעילות פוספטאז אלקליין בסרום (ALP) (ג), אוסטאוקלצין בסרום (ד), וטלופפטידים C-טרמינליים בסרום מסוג I קולגן (e), נקבעו ארבעה שבועות לאחר הניתוח. הנתונים מוצגים כממוצע SE, n=8–10 עכברים/קבוצה. *P < 0.05,="" לעומת="" דמה;="" #p="">< 0.05,="" בהשוואה="" לקבוצה="" שעברה="" ניתוח="">

Cistanche products