Cistanche Rb1 מחליש ליקוי כלי דם הקשורים לגיל על ידי מווסת נתיב Gas6

תוצאות Rb1 הקלה על הזדקנות באבי העורקים של עכברים מזדקנים

כדי לזהות את השפעת האנטי-זדקנות של Rb1, חקרנו תחילה הזדקנות תאית, המתאפיינת בביטוי של חלבונים המעורבים בעיכוב מחזור התא ובעצירת גדילה בלתי הפיכה (Yang et al. 2019). מכיוון שתוצאות האימונוהיסטוכימיה מוצגות באיור 1(A,B), בהשוואה לאלו בקבוצת Young, עכברים מקבוצת Old þ Vehicle הראו כי ההזדקנות האצה את הוויסות העליונה של p21Cip1 ו-p16INK4a בתאי אבי העורקים החזה. עם זאת, טיפול Rb1 הקל על הזדקנות תאית בכלי דם, במיוחד בקבוצת Old þ Rb1-20. בנוסף, תוצאות הכתם המערבי היו בהתאם ל-תוצאות אימונוהיסטוכימיה. כפי שמוצג באיור 1(C), ביטוי החלבון של p21Cip1 ו-p16INK4a גדל באופן משמעותי פי 2- בערך באבי העורקים החזה של עכברים מבוגרים בהשוואה לעכברים צעירים. לאחר טיפול ב-20 מ"ג/ק"ג Rb1, רמות החלבון של p21Cip1 ו-p16INK4a רק עלו ב-41.92% וב-37.52% בהשוואה לאלו של קבוצת הצעירים, שהיו נמוכות משמעותית מאלו של קבוצת Old plus Vehicle. בנוסף, לא היה הבדל משמעותי בביטוי של p21Cip1 או p16INK4a בין עכברים צעירים עם ובלי טיפול Rb1.

איור 1. השפעת Rb1 על הזדקנות אבי העורקים החזה. תמונות של צביעה אימונוהיסטוכימית (400) של p21Cip1 (A) ו-p16INK4a (B) בחתכים של אבי העורקים החזה של עכברים. (ג) ניתוח כתם מערבי של ביטוי p21Cip1 ו-p16INK4a של אבי העורקים החזה של עכבר. הנתונים מבוטאים כממוצע ± SD. p < 0.01 לעומת הקבוצה הצעירה; # p < 0.05 לעומת קבוצת הרכב Oldþ.

Rb1 שיפר את תגובתיות כלי הדם בעכברים מבוגרים

נעשה שימוש בניסוי טבעת כלי דם כדי להעריך הרחבת כלי דם תלוית אנדותל. כפי שמוצג באיור 2, בכל טבעות אבי העורקים בבית העכבר, מתן Ach גרם להרפיית כלי דם. בריכוזים מקסימליים (10-5 מול/ליטר), Ach גרמה לכ-88.84 אחוזים ± 1.20 אחוזים ו-58.35 אחוזים ± 2.50 אחוזים להרפיית כלי דם בקבוצת Young ו- Old þ Vehicle, בהתאמה, מה שמוכיח שהזדקנות קשורה לפגיעה בתגובתיות כלי הדם. עם זאת, טיפול של 10 ו-20 מ"ג/ק"ג Rb1 הביא להרפיה של כ-70.48 אחוזים ± 2.20 אחוזים ו-80.90 אחוזים ± 3.24 אחוזים, בהתאמה, בטבעות אבי העורקים החזה של עכברים מזדקנות בתגובה ל-10 5 mol/L Ach.

לחץ כאן כדי לקבל Cistanche לאנטי אייג'ינג

Rb1 הפחית את ביטוי מולקולת הידבקות תאית באבי העורקים החזה של עכברים מזדקנים

בחנו את ביטוי החלבון של מולקולות הידבקות מסוימות של תאים כדי לקבוע אתדַלַקתִיוהשפעות אנטי דלקתיותשל Rb1 על עכברים מבוגרים. התוצאות הראו שביטוי החלבון של ICAM-1, VCAM-1 ו-PAI-1 גדל באופן משמעותי פי 2-4 בערך באבי העורקים החזה של עכברים מבוגרים בהשוואה לאלו בקבוצת הצעירים (איור 3). לעומת זאת, טיפול Rb1 עיכב משמעותית את השינויים הללו באבי העורקים החזה של עכברים מבוגרים, אך לא השפיע על קבוצות העכברים הצעירים. הניתוח הכמותי הצביע על כך שטיפול של 20 מ"ג/ק"ג Rb1 הביא לכ-36.58 אחוזים, 46.66 אחוזים ו-49.34 אחוזים להורדת ויסות של ביטוי חלבון ICAM-1, VCAM-1 ו-PAI-1, בהתאמה, ברקמת אבי העורקים החזה המזדקנת, בהשוואה לאלו של עכברים מקבוצת Old plus Vehicle.

Rb1 עיכב הסתיידות כלי דם ופיברוזיס הקשורים לגיל

ביצענו צביעת HE וצביעת S alizarin אדום כדי להעריך את מבנה רקמת אבי העורקים והסתיידות מדיאלית של כלי הדם בעכברים מזדקנים בהתאמה. צביעת HE הראתה כי ניתן להקל על דפנות מעובות של אבי העורקים החזה וחוסר ארגון של המטריצה ​​החוץ-תאית של אבי העורקים על ידי טיפול Rb1 (איור 4(א)). כפי שמוצג באיור 4(B), עכברים מזדקנים פיתחו הסתיידות מדיאלית חמורה יותר (אזור מוכתם באדום) מאשר עכברים צעירים, בעוד שהתערבות Rb1 הפחיתה את השינוי הפתולוגי הזה. לאחר מכן, בדקנו חתכים של אבי העורקים החזה על ידי צביעת טריכרום של מאסון כדי להעריך פיברוזיס כלי דם מדיאלי בעכברים מזדקנים. התוצאות הראו כי הייתה עלייה ניכרת בתצהיר קולגן (אזור מוכתם כחול) בקבוצת הרכב הישן þ בהשוואה לקבוצת הצעירים (איור 4(C)), והשפעה זו נבלמת באופן משמעותי על ידי התערבות Rb1. יתרה מזאת, בדיקת ווסטרן הראתה שהביטוי של קולגן I וקולגן III גדל באופן מובהק בפי 4.34- ו-2.62- בעכברים מקבוצת ה- Old þ Vehicle בהשוואה לעכברים צעירים; עם זאת, טיפול Rb1 הוריד את הביטוי של קולגן I וקולגן III בעכברים מבוגרים (איור 4(D)). יתר על כן, לטיפול ב-Rb1 לא הייתה השפעה על דרגות הסתיידות אבי העורקים החזה ופיברוזיס בעכברים צעירים (איור 4(א-ד)).

Rb1 הסדיר את מסלול האיתות Gas6

עוד חקרנו האם Rb1 תפקד דרך מסלול האיתות Gas6/Axl כדי לשפר את הפגיעה באבי העורקים החזה הקשור לגיל בעכברים. הורדת הוויסות של ביטוי חלבון Gas6 ב-41.72 אחוז וביטוי mRNA ב-52.73 אחוז בעכברים מבוגרים בהשוואה לעכברים צעירים בוטל על ידי טיפול Rb1 (איור 5(A,B)). כמו כן, קבענו את ביטוי החלבון של Axl על ידי Western blotting. מעניין לציין שלא היה הבדל משמעותי בביטוי חלבון Axl בין חמש קבוצות הניסוי (איור 5(A)). כמו כן, לא זיהינו הבדל משמעותי ברמות ה-mRNA של Axl בין הקבוצות (איור 5(B)).

איור 2. טיפול ב-Rb1 החליש את הפגיעה בהרפיית כלי הדם התלויה באנדותל הקשורה לגיל בטבעות כלי הדם של אבי העורקים החזה. איורים המציגים את תוצאות הניתוח. הנתונים מבוטאים כממוצע ± SD. p < 0.05, p < 0.01 לעומת הקבוצה הצעירה; # p < 0.05, ##p < 0.01 לעומת קבוצת הרכב הישן þ.

איור 3. Rb1 מופחת ביטוי מולקולת הידבקות תאית באבי העורקים החזה של עכברים מבוגרים. ניתוח כתם מערבי של ביטוי ICAM-1, VCAM-1 ו-PAI-1 ברקמות אבי העורקים החזה. הנתונים מבוטאים כממוצע ± SD. p < 0.01 לעומת הקבוצה הצעירה; # p < 0.05, ##p < 0.01 לעומת קבוצת הרכב Oldþ.

דִיוּן

במחקר הנוכחי, הוכחנו ש-Rb1 השתפרפגיעה בכלי הדם הקשורים לגילעל ידי דיכוי הסתיידות ופיברוזיס באמצעות ויסות ביטוי Gas6 אך לא ביטוי Axl, המספק אסטרטגיה טיפולית פוטנציאלית למניעת מחלות כלי דם הקשורות לגיל. מקובל היטב כי הזדקנות תאי כלי דם, המתאפיינת בחוסר תפקוד אנדותל ובמעבר פנוטיפי של תאי שריר חלק, יכולה לגרום להגברת נוקשות כלי הדם ולעובי מוגבר של דפנות כלי הדם (Liu et al. 2019). הזדקנות תאי כלי דם היא תכונה שכיחה של מחלות מורכבות שונות הקשורות לגיל, במיוחד מחלות לב וכלי דם (O'Rourke et al. 2010). עם התפתחות הזדקנות תאי כלי דם, תפקוד כלי הדם נפגע (Gong et al. 2014). תפקוד לקוי של כלי הדם הקשור לגיל מודגם על ידי שינויים פתופיזיולוגיים, כולל ירידה מתקדמת בהרחבת כלי הדם תלויה באנדות (Herrera et al. 2010; Gong et al. 2014). במחקר שלנו, אישרנו הזדקנות תאית באבי העורקים החזה של עכברים מבוגרים, מה שצוין על ידי ביטוי מוגבר של החלבונים הקשורים לגיל p21Cip1 ו-p16INK4a, כמו גם ירידה בהרחבת כלי הדם התלויים באנדותל. העקביות של התוצאות שלנו עם המחקרים שהוזכרו לעיל מרמזת שהיו כמה מנגנונים מולקולריים חשובים הקשורים לשינויים בפתופיזיולוגיה של תאי כלי הדם במהלך ההזדקנות. סוכנים הפועלים על מנגנונים אלה כנראה יפחיתו ויעכבו מאוד את הזדקנות תאי כלי הדם.

איור 4. טיפול ב-Rb1 שיפר הסתיידות כלי דם ופיברוזיס שמקורם בהזדקנות. (א) צביעה של המטוקסילין ואאוזין (HE) (400), (ב) צביעה אדומה של Alizarin S (400), ו-(C) צביעה טריכרום של מאסון (400 ) של חתכים מייצגים של אבי העורקים החזה בכל קבוצה. (ד) ניתוח כתם מערבי של ביטויי קולגן I וקולגן III ברקמות אבי העורקים החזה. הנתונים מבוטאים כממוצע ± SD. p < 0.01 לעומת הקבוצה הצעירה; # p < 0.05, ##p < 0.01 לעומת קבוצת הרכב Oldþ

איור 5. השפעת Rb1 על מסלול האיתות Gas6/Axl. (א) סופג ווסטרן בוצע כדי לבחון את ביטוי החלבון של Gas6 ו-Axl. (ב) qPCR בוצע כדי לבחון את ביטוי ה-mRNA של Gas6 ו-Axl. הנתונים מבוטאים כממוצע ± SD. p < 0.05, p < 0.01 לעומת הקבוצה הצעירה; # p < 0.05 לעומת קבוצת הרכב הישנה.

עדויות מצטברות גילו כי Rb1 נחשבת לתרופה מבטיחה למניעת נזק לכלי דם (Zhou et al. 2017, 2019a, 2019b; Zheng et al. 2020). מחקרים קודמים גילו כי Rb1 מונע הזדקנות תאי כלי דם ומעכב הסתיידות כלי דם (Nanao-Hamai et al. 2019; Zhou et al. 2019b; Zheng et al. 2020). עם זאת, עדיין לא בטוח אם Rb1 יכול להגן על תפקודים עורקים מפני הזדקנות והמנגנון המולקולרי הרלוונטי. כאן, מצאנו ש-Rb1 הפחית ועיכוב הזדקנות עורקים בעכברים מבוגרים, כפי שהוכח על ידי ירידה בביטוי של חלבונים קשורים ושיפור הרחבת כלי הדם, מה שמעיד על כך ש-Rb1 יכול לחסום ביעילות הזדקנות מוגזמת באבי העורקים החזה של עכברים מזדקנים ועשוי לשמש כסוכן יעיל ל לטפל או למנוע ליקוי עורקי הקשור לגיל.

עדויות קודמות הדגימו הצטברות של דלקת עורקים כרונית בדרגה נמוכה עם העלייה בגיל, אשר תורמת לשינויים מבניים ותפקודיים של כלי דם הקשורים לגיל (Wang et al. 2014). מחקרים נוספים הצביעו על כך שמיקרו-סביבה מועשרת בפרופילים דלקתיים גורמת לשינוי פנוטיפי ב- VSMCs מהסוג המתכווץ לסינטטי. שינוי פנוטיפי זה מאופיין בביטוי מוחלש של חלבוני התכווצות ספציפיים ל-SMC והפרשת ציטוקינים פרו-דלקתיים נוספים, כימוקינים, חלבוני ECM ומולקולות היצמדות לתאים, כגון קולגן, ICAM-1, VCAM-1 ו-PAI-1 (Wang et al. 2011; Lacolley et al. 2018). יתרה מכך, מולקולות הידבקות תורמות לעיצוב מחדש של העורקים המושרה על ידי דלקת, במיוחד על ידי ארגון מחדש של אינטראקציות ECM-VSMC והשפעה על אפנון פנוטיפי של VSMCs (Intengan et al. 1999). יתר על כן, מחקרים הראו של-Rb1 יש השפעות אנטי דלקתיות in vivo ו-in vitro (Miao et al. 2017; Zhou et al. 2017). במחקר הנוכחי, מצאנו שטיפול ב-Rb1 יכול להפחית באופן משמעותי את רמות הביטוי של מולקולות היצמדות תאים הקשורות לתהליכים דלקתיים בעכברים מבוגרים, מה שמצביע על כך ש-Rb1 עשוי לפעול כתרופה אנטי דלקתית ולהגן על כלי הדם במהלך ההזדקנות.

בנוסף לנזק דלקתי, שיפוץ של דופן העורק המאופיין בהסתיידות ופיברוזיס הוא השינוי הפתופיזיולוגי העיקרי האחר בשינויים אווסקולריים הקשורים לגיל וגורם לנוקשות כלי הדם התורמת לירידה בהרחבת כלי הדם (McEniery et al. 2005; Iyemere et al. 2006; Kovacic et al. . 2011). מחקרים בקנה מידה גדול הוכיחו כי הסתיידות טרשת עורקים כליליים עולה עם הגיל (Tesauro et al. 2017). מחקר אחר הראה גם נוכחות של הסתיידות מוגברת עם ההזדקנות באזור עורק הצוואר (Wendorff et al. 2015). באופן דומה, התוצאות שלנו הצביעו על כך שעכברים מזדקנים פיתחו הסתיידות כלי דם מדיאלית חמורה יותר מאשר עכברים צעירים. התערבות Rb1 עיכבה משמעותית את השינויים הללו. תוצאה זו העלתה כי מתן Rb1 הקל על מידת הסתיידות כלי הדם הקשורים לגיל in vivo. ראיות מספיקות הראו שהסתיידות כלי דם כרוכה במגוון תהליכים פתוביולוגיים ולא בשקיעה פשוטה של ​​סידן, שביניהם המעבר של VSMC לתאים דמויי אוסטאובלסט ממלא תפקיד קריטי (Zhou et al. 2019b). מגבלה אחת של המחקר שלנו היא שלמרות שגילתה שהתערבות Rb1 עיכבה באופן משמעותי הסתיידות כלי דם בעכברים מזדקנים של אבי העורקים החזה, סמני VSMC מתכווצים (כגון אקטין A-שריר חלק וקלפונין) וסמני VSMC אוסטאוגניים (כגון גורם שעתוק 2 הקשור ל-runs ) דורשים חקירה נוספת.

יתרה מכך, במחקר הנוכחי, ראינו גם ירידה ברמות הקולגן הבין-רקתי וירידה בביטוי חלבון קשור בעכברים מבוגרים שטופלו ב-Rb1- בהשוואה לעכברים מבוגרים שטופלו בכלי רכב, מה שהצביע על כך של-Rb1 עשויה להיות השפעה מועילה על תפקוד כלי הדם. בהזדקנות אבי העורקים החזה על ידי שיפור פיברוזיס כלי דם הנגרמת על ידי גיל. הארווי ואחרים. (2016) דיווחו כי התקשות עורקים הנגרמת על ידי פיברוזיס מוגזמת ותצהיר קולגן מוגבר עלולה לגרום להגברת טונוס כלי הדם ולשינוי בזלוף הרקמה. חומרים המחלישים פיברוזיס נחשבים כמגנים מפני מחלות כלי דם הקשורות לגיל (Kim et al. 2018).

ניתן להסיק מכךפגיעה בכלי הדם הקשורים לגילהוא תהליך מורכב הכולל שינויים חריגים שונים, כולל דלקת, הסתיידות ופיברוזיס. חשוב מכך, מצאנו ש-Rb1 הצליח לעכב את השינויים החריגים הידועים הללו באבי העורקים החזה של עכברים מבוגרים. עם זאת, המנגנון הבסיסי עדיין לא ידוע. Gas6 זוהה כ-lig ועבור משפחת קולטני TAM, במיוחד קולטני Axl טירוזין קינאז (Rothlin et al. 2015). מחקר קודם הדגים את התפקידים של Gas6/Axl בוויסות פונקציות תאים מרובות (Chen et al. 2019). מחקר שנערך לאחרונה העלה כי ל-Gas6/Axl תפקיד מכריע בהסתיידות כלי הדם (Son et al. 2010; Kaesler et al. 2016; Nanao-Hamai et al. 2019) ועשויים להיות מעורבים גם בהורדת ויסות של סינתזת קולגן כתוצאה מטיפול. VSMCs ורקמת לב מזדקנת (Chen et al. 2016; 2019). יתרה מכך, מחקרים קודמים חשפו ש-Rb1 הפעיל את שעתוק Gas6 באתר ה-ARE הספציפי באזור הפרומטור (Son et al. 2010; Nanao-Hamai et al. 2019). כאן, הדגמנו שביטוי חלבון Gas6 היה מווסת מטה בעכברים מזדקנים, אך התהפך על ידי טיפול Rb1, מה שמצביע על כך ש- Gas6 עשוי להשתתף בוויסות 1-מתווך של Rb של פגיעה בעורקים בעכברים מבוגרים. עם זאת, התוצאות שלנו מראות שלא היה שינוי בביטוי חלבון ו-mRNA של Axl, דבר שלא היה עקבי עם מחקר קודם (Chen et al. 2019). משפחת קולטני TAM כוללת את Tyro3, ​​Axl ו-MerTK. למרות ש- Gas6 מראה את הזיקה החזקה ביותר לאקסל מבין שלושת החברים (Rothlin et al. 2015), Sun et al. (2019) מצא שהפעלת Gas6 החלישה פציעה דלקתית ואפופטוזיס בעכברים, אך לא התרחשו שינויים בהפעלת Axl בקרב קבוצות הניסוי. מחקר אחר הציע שביטוי Axl, המעכב אפופטוזיס ובכך הסתיידות כלי דם, לא השתנה גם בעכברי Gas6–/– (Kaesler et al. 2016). התוצאות שלנו הצביעו בבירור על כך ש-Rb1 החליש באופן ספציפי את הורדת הוויסות של Gas6 הקשור לגיל, אך לא הייתה לו השפעה על הביטוי של Axl, שדווח כאירוע העיקרי שאחראי להסתיידות כלי דם ופיברוזיס, לשיפור דלקת כלי דם הקשורה לגיל והרחבת כלי דם תלוית אנדותל. . הביטוי היציב של Axl עשוי לנבוע מכמות מספקת לפני הפעלת Gas6 או להצביע על כך ש- Gas6 מתפקד דרך קולטנים אחרים. יש צורך בחקירה נוספת שתחקור את ההשפעות של Rb1 על TAMs אחרים שיכולים להיות מופעלים גם על ידי Gas6, כגון Tyro3 ו- MerTK.

מסקנות

במחקר הנוכחי, אישרנו ש-Rb1 עיכב הסתיידות כלי דם ופיברוזיס והפחית את הביטוי של מולקולות הידבקות תאית, כולן שיפרו לאחר מכן את הרחבת כלי הדם התלויה באנדותל כלי דם הקשורה לגיל, לפחות בחלקה על ידי ויסות ביטוי Gas6 אך לא ביטוי Axl. עם הזדקנות בלתי נשלטת, יש חשיבות רבה למציאת חומרים שיכולים למנוע או לטפל בהפרעות בתאי כלי דם הקשורים לגיל. המחקר שלנו מספק ראיות המאמתות את ההשפעות של Rb1 על פגיעה בדירוג כלי דם בעכברים מזדקנים.

הצהרת גילוי

לא דווח על ניגודי עניינים אפשריים על ידי המחבר/ים.

מימון עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין [81370447], פרויקט תכנון המדע והטכנולוגיה של מחוז גואנגדונג בסין [2016A050502014], הקרן לבניית משמעת רפואית מפתח של שנזן [SZXK002], והמחקר המדעי הרפואי קרן מחוז גואנגדונג בסין [A2019079].

הצהרת זמינות נתונים

נתונים וחומרים זמינים על פי בקשה למחבר המתאים.

תרומות מחבר

SYK, DHL ו-XXQ תרמו לתפיסה ולעיצוב של עבודה זו. LW, GYS ו-MW תרמו לניתוח נתונים. SYK, LW ו-JMZ כתבו את כתב היד. כל המחברים קראו ואישרו את הגרסה הסופית.

הפניות

Acosta JC, O'Loghlen A, Banito A, Guijarro MV, Augert A, Raguz S, Fumagalli M, Da Costa M, Brown C, Popov N, et al. 2008. איתות כימוקין דרך הקולטן CXCR2 מחזק את ההזדקנות. תָא. 133(6): 1006–1018.

Brandes RP, Fleming I, Busse R. 2005. הזדקנות אנדותל. Cardiovasc Res. 66(2):286–294.

Chen FF, Song FQ, Chen YQ, Wang ZH, Li YH, Liu MH, Li Y, Song M, Zhang W, Zhao J, et al. 2019. טסטוסטרון אקסוגני מקל על פיברוזיס לבבי ואפופטוזיס דרך מסלול Gas6/Axl בעכברים מתבגרים. Exp Gerontol. 119:128–137.

Chen YQ, Zhao J, Jin CW, Li YH, Tang MX, Wang ZH, Zhang W, Zhang Y, Li L, Zhong M. 2016. טסטוסטרון מעכב את הזדקנות תאי השריר החלק בכלי הדם ומעכב סינתזת קולגן דרך מסלול האיתות Gas6/Axl . גיל. 38(3):60.

Fridell YW, Villa J, Attar EC, Liu ET. 1998. GAS6 משרה כימוטקסיס בתיווך Axl של תאי שריר חלק של כלי הדם. J Biol Chem. 273(12): 7123–7126.

Gong X, Ma Y, Ruan Y, Fu G, Wu S. 2014. אטרבסטטין לטווח ארוך משפר תפקוד לקוי של האנדותל הקשור לגיל על ידי שיקום מתח חמצוני ונורמליזציה של חוסר איזון eNOS/iNOS באבי העורקים של חולדה. Exp Gerontol. 52:9–17.

הארווי A, Montezano AC, Lopes RA, Rios F, Touyz RM. 2016. פיברוזיס כלי דם בהזדקנות ויתר לחץ דם: מנגנונים מולקולריים והשלכות קליניות. יכול ג'יי קרדיול. 32(5):659–668.

Herrera MD, Mingorance C, Rodriguez-Rodriguez R, Alvarez de Sotomayor M. 2010. תפקוד לקוי של אנדותל והזדקנות: עדכון. Aging Rev. 9(2):142–152.

Hsu JJ, Lu J, Umar S, Lee JT, Kulkarni RP, Ding Y, Chang CC, Hsiai TK, Hokugo A, Gkouveris I, Tetradis S, et al. 2018. השפעות של teriparatide על המורפולוגיה של הסתיידות אבי העורקים בעכברים היפרליפידמיים מבוגרים. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 314(6):H1203–H1213.

Hurtado B, Abasolo N, Munoz X, Garcia N, Benavente Y, Rubio F, Garcia de Frutos P, Krupinski J, Sala N. 2010. מחקר קשר בין פולימורפים בגנים GAS6-TAM וטרשת עורקים בעורקים. Thromb Haemost. 104(3):592–598.

Intengan HD, Thibault G, Li JS, Schiffrin EL. 1999. מכניקת עורק התנגדות, מבנה ורכיבים חוץ-תאיים בחולדות בעלות יתר לחץ דם ספונטנית: השפעות של אנטגוניזם של קולטן אנגיוטנסין ועיכוב אנזימים המרה. מחזור. 100(22):2267–2275.

Iyemere VP, Proudfoot D, Weissberg PL, Shanahan CM. 2006. פלסטיות פנוטיפית של תאי שריר חלק כלי דם וויסות הסתיידות כלי דם. J מתמחה מד. 260(3):192–210.

Kaesler N, Immendorf S, Ouyang C, Herfs M, Drummen N, Carmeliet P, Vermeer C, Floege J, Kruger T, Schlieper G. 2016. Gas6 protein: its role in cardiovascular calcification. BMC Nephrol. יז(1):52. Kim EN, Kim MY, Lim JH, Kim Y, Shin SJ, Park CW, Kim YS, Chang YS, Yoon HE, Choi BS. 2018. ההשפעה המגנה של רזברטרול על הזדקנות כלי הדם על ידי אפנון של מערכת הרנין-אנגיוטנסין. טרשת עורקים. 270: 123–131. Korshunov VA, Mohan AM, Georger MA, Berk BC. 2006. Axl, קולטן טירוזין קינאז, מתווך שיפוץ כלי דם המושרה על ידי זרימה. Circ Res. 98(11):1446–1452.