רפואה סינית Cistanche הרכב כימי וניתוח של רכיבים בגוף Ⅱ

נוֹטָרִיקוֹן

Cistancheנחשב לרפואה סינית מסורתית חזקה ומזינה מאז ימי קדם. זה ידוע כ "ג'ינסנג מדברי". זה הוקלט לראשונה ב"Materia Medica של שן נונג" והוא רשום כציון העליון. יש לו את הפונקציות שליאנג כליות מזין,מילוי תמצית ודם, לחות למעייםועשיית צרכים, ועיכוב ההזדקנות. הוא משמש לעתים קרובות לטיפול באימפוטנציה גברית, אי פוריות נשית, קור ושלשולים, כאבי קור במותניים וברכיים, יובש בדם ועצירות. ה-Cistanze שנרשם בחלק 1 של "הפרמקופיה הסינית (מהדורת 2015)" הוא הגבעולים הבשרניים היבשים עם עלים קשקשים שלCistanche deserticola YCMaוCistanche tubulosa (Schenk) R. Wight. בשל הבלבול של חומרי הרפואה של Cistanche המסתובבים כיום בשוק, רוב בקרת האיכות של Cistanche מתמקדת רק בגליקוזידים פנילתנואידים. כדי להעריך טוב יותר את האיכות שלCistancheולהבטיח את היעילות של חומרים ומוצרים רפואיים, מאמר זה סוקר את התקדמות המחקר של ניתוח הרכב כימי וניתוח הרכב in vivo של Cistanche, כדי לבסס שיטת ניתוח מקיפה ויעילה יותר כדי לפצות על ניתוח האיכות הנוכחי והחסרונות של in vivo לימודים.

מוסף Cistanche

סעיף 1 התקדמות מחקר בניתוח רכיבים כימיים שלרפואה סינית מסורתית Cistanche

הסביבה הטבעית והתנאים האזוריים משפיעים ישירות על איכותם של חומרים או תכשירים רפואיים סיניים, ואיכותם של חומרים או תכשירים רפואיים סיניים קשורה קשר הדוק לבטיחות התרופות הקליניות. לכן, כדי לשפר את רמת בקרת האיכות של חומרים או תכשירים רפואיים של Cistanche, חשוב במיוחד לבסס שיטות קביעה מדויקות, אמינות ומהירות. בשנים האחרונות, חוקרים מקומיים וזרים עשו עבודה רבה על ניתוח רכיבים כימיים של Cistanche, וניסו גם מגוון שיטות ניתוח, כולל טביעת אצבע, קולורימטריה, HPLC-DAD, HPLC-ELSD, LC-MS, ו-GC-MS. , FT-IR ו-2D-IR וכו'.

1. תבנית טביעת אצבע

שיטת טביעת האצבע עולה בקנה אחד עם מושג ה"שלמות" ברפואה הסינית המסורתית. זוהי שיטת בקרת איכות מעשית לזיהוי האותנטיות של הרפואה הסינית המסורתית והערכת עקביות האיכות שלה. זה מוכר מאוד בקהילה הבינלאומית.

Zhu Nailiang et al! השתמש ב-UPLC כדי לקבוע טביעות אצבע של חומרי מרפא Cistanche ו- Cistanche tubulosa במדבר, כייל 15 פסגות נפוצות וזיהה 5 מהפסגות הנפוצות, מה שמצביע על כך שטביעות האצבע של שני Cistanche שנאספו בפרמקופיה שונות באופן משמעותי. שיטה זו פשוטה וניתנת לשחזור וניתן להשתמש בה כדי להבחין בין חומרי מרפא Cistanche ו-Cistanche tubulosa ולהעריך את איכות החומרים הרפואיים. Zhu Xujiang et al.12 השתמשו ב-HPLC כדי ליצור טביעות אצבע של 10 קבוצות של Lanzhou Cistanche כדי לחקור את ההבדל האיכות המובנה בין Lanzhou Cistanche ל-Cistanche deserticola.

התוצאות מראות שבהשוואה ל-Cistanche, ל-Lanzhou Cistanche חסרים הרבה פסגות אופייניות, במיוחד היעדר פסגות אופייניות של echinaceaside: והדמיון בין לנז'ו Cistanche ו-Cistanche control חומרים רפואיים הוא רק בערך {{0}}}.04 , מה שמצביע על כך שלנז'ו צ'יסטאנצ'י שונה מ-Cistanche אמיתי. יש הבדל גדול. Ma Zhiguo et al. השתמש ב-HPLC כדי ליצור טביעות אצבע של 10 קבוצות של מנות מרתח של Sha Rong, וכייל 7 פסגות נפוצות. תוצאות הערכת הדמיון היו כולן גדולות מ-0.92, מה שמצביע על כך שטביעות האצבעות של חלקי מרתח Sha Rong הן ספציפיות ויכולות לספק רמה מסוימת של בקרת איכות עבור חתיכות מרתח של Sha Rong. התייחסות. Xiong Yuanjun et al. השתמשו בכרומטוגרפיה HPLC והשתמשו ב-6 גליקוזידים פנילאתנואידים כהתייחסויות לביסוס טביעות אצבע ושיטות ניתוח עבור Cistanche מ-9 מקורות שונים באזור האוטונומי של שינג'יאנג אויג'ור. התוצאות הראו שהשיטה הייתה יציבה, אמינה וניתנת לשחזור. יש לו תכונות טובות וניתן להשתמש בו כדי להעריך את האיכות של Cistanche.

Xie Jieina וחב' [השתמשו בעמודה כרומטוגרפית של Agilent Zorbax Extend-C8 (150mmx4.6 מ"מ, 5μm), תוך שימוש בתמיסה מימית של 0.095% חומצה זרחתית-0.095% פוספורית תמיסת אצטוניטריל חומצית כתמיסת שיפוע ליניארי שלב נייד, שיפוע הפליטה היה 0~18 דקות, 96% A-4% B; 18~40 דקות, 88%A-12%B; 40~65 דקות, 85% A-15% B; 65~75 דקות, 85% A-15% B; 75~ 90 דקות, 80 %A-20%B; 90~ 100 דקות, 80%A-20%B; 100 דקות, 96%A-4%B, אורך גל זיהוי 330nm; זרימת נפח: 1 מ"ל/דקה; הטמפרטורה היא 30 מעלות. הוקמו טביעות אצבע HPLC של 16 קבוצות של ציסטאנצ'ה מדברית ממקורות שונים. התוצאות הראו שהאיכות הפנימית של חומרי מרפא של ציסטאנצ'י מדברי ממקורות שונים השתנתה מאוד. ניתן להשתמש בשיטה זו כדי להעריך את האיכות של חומרי מרפא של ציסטאנצ'י מדברי. טו פנגפיי ואח'. (השתמשו בכרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים עם ביצועים הפוכים כדי לחקור את הגליקוזידים הפנילאתנואידים הכלולים ב-4 חומרי מרפא מתוצרת מקומית ו-1 וריאציה ו-25 חומרים רפואיים מסחריים Cistanche, וניתחו את ספקטרום ה-HPLC שלהם. התוצאות הראו כי חומרי הגלם הרפואיים הללו מכילים כולם. סוגים רבים של גליקוזידים phenylethanoid, ביניהם phenylethanoid glycosides הכלולים Cistanche, Cistanche halophylla, Cistanches alba, ו-Cistanches tubulosa יש גליקוזידים phenylethanoid דומים, בעוד Cistanche שונה למדי ממינים אחרים התוכן של echinacoside ו-verbascoside הוא הגבוה ביותר Yang Hanchun וחב' השתמשו ב-verbascoside כחומר ייחוס ובעמודה כרומטוגרפית של Shim-pack (150 מ"מ x 4.6 מ"מ, 5 מיקרומטר) כדי ליצור שיטת ניתוח טביעות אצבע של HPLC עבור 22 קבוצות של טביעת אצבעות מדברית שיאים של חומרי מרפא Cistanche כיילו התוצאות הראו שטביעות האצבעות של קבוצות שונות של חומרי מרפא Cistanche היו שונות באופן משמעותי, כפי שמוצג בהבדלים הברורים במספר הפסגות הכרומטוגרפיות ובאזורי השיא הכרומטוגרפיים של קבוצות שונות של חומרי מרפא Cistanche. תוצאות הערכת הדמיון הראו כי הדמיון של מספר קטן של דגימות אינו גבוה. Yang Jianhua et al. 8 בחרו ב-RP-HPLC כדי לבסס את טביעת האצבע של גליקוזידים של פנילטנול ב-Cistanche, והשוו את טביעות האצבע של מוצרים מעובדים עם מוצרי בר, ​​שלבי גדילה שונים וחלקים רפואיים שונים. המחקר כייל 19 פסגות כרומטוגרפיות נפוצות ומצא שטביעות האצבעות של הילה Cistanche התרבותית והפראי דומות מאוד.

הסוגים והתכולה היחסית של רכיבים כימיים יציבים. גם לטביעות אצבע בשלבי גדילה שונים או בחלקים שונים יש עקביות טובה, אבל יש הבדלים ברורים בתכולת הפסגות האופייניות. לשיטה זו יכולת שחזור טובה ויכולה לשקף טוב יותר את האיכות הפנימית של המרכיבים האופייניים של סיסטאנצ'ה סלינה. שי ואח'. 9 השוו את טביעות האצבע של HPLC וטביעות האצבעות של הגן ISSR (בין-פשוט של רצף) של Cistanche, Cistanche tubulosa, Cistanche מלוח ו-Cistanches, וגילו ששתי טביעות האצבע טובות לחומרים רפואיים של Cistanche. בצע בידול ובקרת איכות, והמחבר סבור כי בשל התוכן הנמוך של אכינצאה ב-Cistanche, Cistanche אינו יכול להחליף את Cistanche או Cistanche tubulosa בפרמקופיה. Jiang et al. (101 הקים שיטת HPLC-DAD-MS לביצוע ניתוח טביעות אצבע על 36 חומרים רפואיים של משחת בשר ממקורות שונים (כולל 14 משחת בשר מדברית, 14 סיסטאנצ'ה צינורית, 2 סיסטאנצ'ה מלוחה ו-6 אמרנטוס) טביעות אצבע. ניתוח וזיהוי של 18 תרכובות פנילתנול גליקוזיד התוצאות הראו כי ל- Cistanches tubularis, Cistanche halophylla ו- Cistanche יש את הדמיון הגבוה ביותר, בעוד שהדמיון של Cistanche נמוך יותר, רק 0.053.

2. ספקטרופוטומטריית ספיגה אטומית

עם ההבנה המקיפה של אנשים לגבי המרכיבים הפעילים של הרפואה הסינית המסורתית, אלמנטים אנאורגניים משכו תשומת לב גוברת. במיוחד בשנים האחרונות, ניתן להסביר כמה השפעות של הרפואה הסינית המסורתית שאינן ניתנות להסבר על ידי תורת הרפואה הסינית המסורתית על ידי ההשפעות הפיזיולוגיות של יסודות קורט. לכן, ללימוד מרכיבי העקבות והמאקרו ב- Cistanche וכיול האלמנטים המתאימים להם ושיטות הזיהוי המתוקנות יש משמעות רבה לביסוס ושיפור מערכת בקרת האיכות והערכת הבטיחות של Cistanche. ספקטרופוטומטריית ספיגה אטומית הפכה בהדרגה לשיטה העיקרית לזיהוי יסודות אנאורגניים בשל רגישותה הגבוהה, הדיוק הגבוה, טווח היישום הרחב, נפח הדגימה הקטן ותפעול המכשיר הקל. Chen Weijun et al. (השתמשו בשיטה הרטובה לעיכול ישיר של אבקת Cistanche, והשתמשו בספקטרומטריית ספיגת אטומית להבה (FAAS) למדידה ישירה של Pb, Cd ו-Cu בה. התוצאות הראו ש- Cistanche משלושת אזורי הייצור העיקריים בשינג'יאנג לא חרגו מהמגבלה טווח והיה בטוח לשימוש קליני Cheng Qilai וחב' (121 השתמשו בספקטרופוטומטריית אטומית של להבה ובשיטת תנור הגרפיט כדי לקבוע ש-Cistanche המדבר מכיל מגוון של יסודות קורט חיוניים לגוף האדם. עד נמוך הוא Ca, Fe, Mg, Cu, Zn, Pb ו-Sn, ויש להם תכולה גבוהה של Mg, Ca, Fe ו-Zn, שיש להם תפקודים פיזיולוגיים חשובים, השפעות תזונתיות ומשמעות לאבחון וטיפול קליני וחב' (3) השתמשו בספקטרופוטומטר של ספיגת אטום להבה כדי לקבוע את יסודות הקורט של מנגן ויסודות קורט ב-Xinjiang Cistanche. התוצאות הראו שלא עיכול יבש ולא עיכול רטוב השפיעו על תוצאות המדידה. שו פאנג וחב'. 4) שימוש בספקטרומטר פליטת פלזמה בשילוב אינדוקטיבי (ICP-AES) מדד את התוכן של עשרה יסודות קורט ב- Cistanche פראי, כולל Li, Mn, Fe, Cu, Zn, Se, Sr, Mo, [ו-Ca].

3. כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים

כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים נמצאת בשימוש נרחב בקביעתפנילטנול גליקוזידיםבבשר טחון בשל יתרונותיו של רגישות גבוהה וטווח ליניארי רחב. Dong et al.15 הקימו שיטת פאזה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים המשתמשת במקדם הספיגה במקום בגובה השיא או באזור השיא, וקבעו באופן רציף את 7 הגליקוזידים של פנילטנול ב-Cistanche tubulosa ו-Cistanche באמצעות היחס בין מקדמי הספיגה של echinaceaside ואחרים. תרכובות. תכולה, כולל צד אכינצאה, סרקובסין A, verbascoside, verbascoside, 2'acetyl verbascoside, 6'-acetyl verbascoside, ו-cistancheoside C. תוצאות שיטה זו תואמות את שיטת הסטנדרט החיצוני, והתוצאות מראות כי היא מדויקת אָמִין. Song Qingqing et al.16 הקימו מערכת מקוונת בלחץ ממס מיקרו-חילוץ-כרומטוגרפיה זרימה סוערת-כרומטוגרפיה נוזלית בביצועים גבוהים-טנדם (onlinePLME-TFC-HPLC). אבקת דגימת עקבות הושמה במיכל המיצוי ולאחר מכן הועמסה לתוך שרוול טרום-עמודה. צינור האתר קטון (PEEK) מחובר לקצה שרוול הטרום-עמודה, והפאזה המימית זורמת דרך צינור ה-PEEK בקצב זרימה גבוה כדי ליצור לחץ גבוה כדי להשיג מיקרו מיצוי ממס בלחץ מקוון של Cistanche. במקביל, שני שסתומי שישה כיוונים אלקטרוניים מוכנסים להשלמת הניתוח כולו. התהליך מחולק לשלב מיצוי ושלב elution כדי להשיג קביעה בו-זמנית של תכולת שלושה phenylethanoid glycosides ב-Cistanche tubulosa: echinacoside, verbascoside ו-isomurabastoside. גואו שיונגפיי וחב'!! 7 השתמש בשיטת HPLC-UV כדי להשוות את תכולת הגליקוזידים הכוללים של echinaceaside, verbascoside ו-phenylethanol בחלקים שונים של Cistanche ממקורות שונים בהוטאן, שינג'יאנג. התוצאות הראו שההבדלים המקסימליים בתכולת הגליקוזידים של echinaceaside, verbascoside וסך הפנילטנול בשורשים ובראשי אותו צמח Cistanche היו גבוהים עד פי 22.4, פי 16.7 ו-8.7 פעמים, בהתאמה. החומרים הפעילים של Cistanche מופצים בעיקר בשורשים. Ma Zhiguo et al. 118 השתמש בשיטת פאזה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים עם ביצועים גבוהים כדי לקבוע בו-זמנית שלושה גליקוזידים של פנילאתנואידים (verbascoside, chrysophyte ו-2'-acetyl chrysophyte) ב-Amaranthus aurantiacus. התוצאות הראו שתכולת הכריסופיט ב-A הייתה הגבוהה ביותר. , התוכן של verbascoside הוא הנמוך ביותר, והאיכות של Amaranth vulgaris שנרכש מבתי מרקחת שונים משתנה מאוד. Zhao Kuijun et al.119 השתמשו בשיטת HPLC-ELSD לניתוח גלקטיטול ב-20 קבוצות של Cistanche ו- Cistanches tubulosa.

4. LC-MS

לכרומטוגרפיה נוזלית-ספקטרומטריית מסה (LC-MS) יש את היתרונות של מהירות מהירה, סלקטיביות חזקה, גבול זיהוי נמוך ויכולות איכותיות וכמותיות חזקות. זהו כלי אידיאלי לניתוח רכיבים כימיים של הרפואה הסינית המסורתית ומשמש בעיקר לקביעה איכותית של הרכיבים הכימיים של בשר טחון. ומחקר כמותי.

שיר ועוד. 20] השתמש בטכנולוגיית HPLC-Qtrap-MS כדי לבסס שיטה להבחנה כמותית בין קבוצות התרכובות של Cistanches tubularis (CT) ו-Cistanche (CD). זרימת העבודה כולה מחולקת לשלושה חלקים: ראשית, באמצעות סריקה מלאה משופרת (EMS), סריקת אובדן ניטרלי (NL), סריקת יונים מקדימים (Prec) וסריקת יונים מוגברת של המוצר (EPI), בשילוב עם בקרת חומר סטנדרטית, ספקטרומטריית מסה משנית נעשה שימוש במידע ומידע קשור המדווח במאגרי מידע קיימים כדי לסנן מקיף את התרכובות בבשר הטחון; שנית, שיטת HPLC-SMRM שימשה לביצוע כימות יחסי של 513 התרכובות שנבדקו; לבסוף, נעשה שימוש בשיטת ניתוח סטטיסטי רב משתנים בשילוב עם נתונים כמותיים כדי להבחין בין קבוצת ההרכב הכימי של CT ו-CD. התוצאות הראו כי בטאין, תוצרי ביניים ממחזור תלת חומצה, גליקוזידים פנילתנואידים ואירידואידים היו סמנים להבחנה בין תרכובות CT ו-CD. לו וחב'. אחד השתמש בספקטרומטריית מסה ברזולוציה גבוהה (HPLC-DAD-HRMS) עם ביצועים גבוהים של כרומטוגרפיה נוזלית-גלאי דיודות לזיהוי 4 מינים ובסך הכל 36 קבוצות של Cistanche (כולל 14 קבוצות של Cistanche מדבריות, 10 קבוצות של Cistanche צינורי ו-12 קבוצות של Cistanche). ) ומדד את התוכן של 10 התרכובות הללו. שתי שיטות כיומטריות, ניתוח אשכולות היררכי וניתוח רכיבים עיקריים, שימשו כדי להבחין בבירור בין ארבעת הסוגים של Cistanche. Zhou Ye et al! 221 השתמש ב-HPLC-ESI-MS כדי לזהות את התוכן של שבעה מרכיבים פעילים ברפואה הסינית המסורתית Cistanche מחמישה מקורות שונים, כולל סרקוסיד מדברי A, echinaceaside, verbascoside, isolebascoside, 2'- Acetyl verbascoside, cistanche noside C ו-tubulin B. במקביל, נעשה שימוש בספקטרוסקופיה של טרנספורמציה אינפרא-אדום של פורייה כדי לקבוע טביעות אצבע של חמישה סוגים של Cistanche, וקצב השיא השכיח שלהם וקצב שיא הווריאציה חושבו. התוצאות הראו שתוצאות ההערכה של חומרים רפואיים בשתי השיטות היו עקביות. Song et al.123] הקימו שיטת מיצוי ממס בלחץ מקוונת - כרומטוגרפיה זרימה סוערת - כרומטוגרפיה נוזלית בביצועים גבוהים (online PLE-TFC-HPLC). אם לוקחים את ציסטאנצה המדברית כדוגמה, הם השיגו את קביעת התוכן של שמונה גליקוזידים של פנילטנול בציסטאנצ'ה המדברית. נמדד בו זמנית. במקביל, נעשה שימוש בשיטת HPLC-DAD-IT-TOF-MS לזיהוי 91 תרכובות בתמצית המדברית Cistanche המקוונת, והושוו דיאגרמות שיא הבסיס של התמצית המקוונת והחילוץ האולטראסוני, מה שמצביע על כך שיעילות המיצוי עלה בקנה אחד עם שיטת החילוץ האולטרסאונד. Wang Yiming et al.124) השתמשו בשיטת LC/ESI-MS/MS כדי לחקור 7 גליקוזידים של פנילטנול ב-Cistanche מדברי, במלח Cistanche וב-Cistanche tubular. כתוצאה מכך, זוהו 7 מינים ב-Cistanche המדבר וב-Cistanche המלח הגולמי. נמצאו 6 מינים, ומיני Cistanche הכילו רק 5 מינים. Cao Zhenjie et al. (25) השתמש בשיטת LC-MS כדי לחקור את תכולת הפנילטנול גליקוזידים ב-Cistanche המדבר בעונות קציר שונות. התוצאות הראו כי התוכן של echinacoside, Cistanches A ו-2-acetyl verbascoside השתנה עם עונות הקציר. הבדל גדול.

5. ספקטרוסקופיה אינפרא אדום

ספקטרוסקופיה אינפרא אדום היא שיטה ספקטרוסקופית המשתמשת בספקטרום הרציף של גלים אלקטרומגנטיים באזור האינפרא אדום כמקור קרינה כדי להקרין דגימה ולתעד את עקומת הקליטה של ​​הדגימה. זוהי שיטה בשימוש נרחב בניתוח תרכובות אורגניות. היישום שלו בבשר טחון הוא בעיקר כדי להבחין בין חלקים שונים של בשר טחון. שו רונג וחב'. (261 השתמשו בטכנולוגיית FT-IR כדי לחקור את ההבדלים בהרכב של חלקים שונים של זרעי Cistanche לאחר טיפול ריבוד. התוצאות הראו שיש פחמימות, חלבונים, שומנים, פקטין וחומרים ארומטיים בזרעי Cistanche. למינציה לאחר הטיפול, שיא הספיגה של שומנים בגרעין הזרע נחלש באופן משמעותי, ורכיבי החלבון המסיסים והסוכר גדלו, מה שסיפק בסיס חומרי יותר לנביטת הזרעים 27 השתמשו בטכנולוגיית F-TIR בשילוב עם טכנולוגיית זיהוי מסדר שני של ספקטרום נגזר וטכנולוגיית 2D-IR ללימוד תמציות אתנול בריכוזים שונים (10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%) של Cistanche המדבר שאריות תרופתיות תואמות התוצאות מראות שהחומרים הפעילים כגון פנילתנואידים בבשר הטחון המופק עם אתנול משתקפים בספקטרום האינפרא אדום, ונמצא כי לתמצית האתנול של 70% יש את התכולה הגבוהה ביותר של גליקוזידים פנילתנואידים. בשיטה זו ניתן לנתח מרכיבים של נוזלי מרפא ושאריות מרפא ולהבחין בהבדלים העדינים במרכיבי תמציות ושאריות מרפא בריכוזים שונים. זה יכול גם לשלב מרכיבים של תמציות ושאריות רפואיות בריכוזים שונים כדי לספק מידע כולל על החומרים הרפואיים של משחת בשר. חן ג'ון ואח'. ( 28 ] השתמש בטכנולוגיית FT-IR בשילוב עם טכנולוגיית 2D-IR כדי לזהות את Cistanche המדבר ואת המוצר המבולבל שלה Cynomorium cynomolgus. נמצא שספקטרום ה-IR של השלושה הראה הבדלים מסוימים, וההבדל בספקטרום הנגזרת מסדר שני היה 2D ספקטרים ​​הם לא רק שונים, אלא גם אינטואיטיביים. שיטה זו יכולה לממש את הזיהוי המהיר והמדויק של Cistanche והמוצרים המבלבלים שלה ההבדלים המקרוסקופיים של משחת בשר מדברית בשיטות עיבוד שונות, ניתוח ו-180 דגימות Cistanche מדבריות שעובדו ב-3 עיבוד מפעל שלם ו-5 שיטות שונות לעיבוד פרוסות הוערכו וניתוח אשכולות בוצע באמצעות תוכנת Assure ID. התוצאות הראו שהדגימות עם שיטות עיבוד שונות היו שונות באופן משמעותי. שיטה זו יכולה לזהות במהירות וביעילות שיטות עיבוד שונות. דוגמאות של Cistanche. שו רונג וחב'. [30] השתמש בטכניקות FT-IR ו- 2D-IR כדי לנתח ולהעריך את חלקי העור, האמצע והעור של Cistanche המדבר, כמו גם תמצית האלכוהול ותמצית המים שלו. שיטה זו יכולה לזהות במהירות ובאופן מקיף הבדלים עדינים בחלקים שונים של אותו חומר תרופתי. Xu Rong et al.31 השתמשו בשיטת FT-IR כדי לחקור חלקים שונים של זרעי Cistanche במדבר ואת המאפיינים הספקטרליים שלהם והבדלים בהרכב לאחר טחב או טיפול בטמפרטורה גבוהה. המחקר מצא שהרכב קליפת הזרע וגרעין הזרע היה שונה באופן משמעותי. כמו כן, נמצא כי החלבון וחלק מתכולת הסוכר בזרעים, הקשורים באופן הדוק לחיוניות, הופחתו באופן משמעותי לאחר טחב או טיפול בטמפרטורה גבוהה. שו רונג וחב'. 32 גם ביצע ניתוח ספקטרום על Cistanche מדברי, Cistanche צינורי ו-Salt Cistanche. התוצאות הראו כי דפוסי ה-IR של Cistanche מדברי ו-Cistanche צינורי היו שונים באופן משמעותי, והספקטרום הנגזרת מסדר שני של Cistanche מדברי ו-Sistanche מלח היו ברורים. הבדלים, ספקטרום 2D-IR משקף בצורה אינטואיטיבית יותר את ההבדלים בין השלושה. ליו יוגאנג ואחרים. 133 השתמשו בטכנולוגיית FT-IR כדי לנתח את התוכן של גליקוזידים של פנילטנול ב-Cistanche המדבר, Cistanche tubulosa, ותמציות האתנול שלהם 95%. התוצאות הראו שתכולת הפנילטנול גליקוזידים ב- Cistanche tubuliflora הייתה גבוהה משמעותית מזו שב- Cistanche המדברית. נמצא שגליקוזידים של פנילטנול הועשרו ביעילות בתמצית האלכוהול.

6. GC-MS

גז כרומטוגרפיה-מסה ספקטרומטריית (GC-MS) משתמשת בהפצצת אלקטרונים או יינון כימי כממשק, בשילוב עם מסד נתונים מסחרי מקיף יחסית של ספקטרומטריית מסה, המשפר מאוד את היכולות האנליטיות של ספקטרומטריית מסה ובעל יתרונות של רגישות גבוהה וחזרה טובה. משמש בעיקר למחקר על חומרים קשים לנדיפים וחומרים לא יציבים מבחינה תרמית. Zhou Yubi et al.141 השתמשו בכרומטוגרפיה עמודה כדי לחלק את הרכיבים המסיסים בשומן של Cistanche המדבר לשלושה חלקים: לא קוטבי, קוטבי חלש וקוטבי. הם ניתחו את שלושת החלקים הללו בשיטת GC-MS וזיהו בסך הכל 73 תרכובות. נערך ניתוח מקיף של הרכיבים המסיסים בשומן של משחת הבשר המדברית. Qiao Haili et al. [35] השתמש בשיטת ספיחה דינמית של מרחב ראשי בשילוב עם טכנולוגיית GC-MS כדי לחקור את המרכיבים הנדיפים של תפרחת Cistanche המדברית משלב ניצני עד לשלב הפריחה המלא. כתוצאה מכך, זוהו 40 תרכובות נדיפות מתפרחת Cistanche. העיקריים בשלב הניצנים היו פחמימנים וחומרי עלים ירוקים, והסוגים והתכולה היחסית משתנים עם פתיחת הפרחים על התפרחת. הרכיבים הנדיפים בשלבי הפריחה המוקדמים והמלאים הם בעיקר אסטרים ארומטיים ותרכובות טבעות בנזן, והתכולה היחסית גבוהה משמעותית מאלה שבשלב הניצנים. להגביר.

7. אחרים

מכיוון שהקבוצה הפנולית של גליקוזידים פנילטנול יכולה לפתח צבע עם מלחי חנקתי אלומיניום ודיאזוניום. Du Niansheng et al. 136] השתמש בשיטת אלומיניום חנקתי-קולורימטרית כדי לקבוע את תכולת סך הגליקוזידים של פנילאתנואידים ב-Cistanche המדבר. התוצאות מראות ששיטה זו פשוטה לתפעול, רגישה ומדויקת, עם שיעור התאוששות ממוצע של 100.7% (n=5) ומקדם וריאציה (cv) של 1.09%. Li et al1371 ניתחו את התוכן של phenylethanoid glycosides ב-Cistanche המדבר באמצעות השיטה המלח-קולורימטרית דיאזוניום. התוצאות הראו שתכולת הגליקוזידים של פנילתנול בדגימה הייתה 1.275%, שיעור ההחלמה הממוצע היה 101.3% וה-RSD היה 3.7% (n =4). גונג לידונג ואחרים. 38) השתמש במערכת זיהוי אלקטרופורזה נימית-אלקטרוכימית (CE-ED) כדי לחקור את הרכב החד-סוכרים של רב-סוכרים של Cistanche (Cistanche מדברי המיוצר במונגוליה הפנימית, Cistanche פרח צינור Xinjiang ו-Cistanche פרח צינור מעובד באופן מלאכותי) ולקבוע את תכולת החד-סוכרים. לי יוקסיה וחב'! 39 השתמש בנתח חומצות אמינו כדי לנתח את ההרכב של חומצות אמינו שונות ב-Cistanche במדבר שינג'יאנג. המחקר מצא כי דגימת Cistanche הכילה בסך הכל 17 סוגים של חומצות אמינו לאחר טיפול הידרוליזה חומצה, עם חלק כולל של מסת חומצות אמינו של 7.87% וחלבון של 16.38%. ביניהם, גוף האדם שבע חומצות האמינו החיוניות נמצאות ביחס סביר, E/T=38.5%, E/N=62.6%. לי בין וחב'. [40] השתמש בספקטרופוטומטר גלוי אולטרה סגול (UV) בשילוב עם ריאגנט Nash כדי לקבוע את אורך הגל המרבי של מניטול כ-413 ננומטר ומדד את תכולת המניטול ב-6 קבוצות של Cistanche מלוח. Ma Xizhong [4] השתמש בטכנולוגיית מיצוי נוזל סופר-קריטי (SFE) כדי לחלץ רכיבים נדיפים מהרפואה הסינית המסורתית Rouhuanrong, ושילב כרומטוגרפיה של גז נימי (CGC) וכרומטוגרפיה גז/ספקטרומטריית מסה (GC/MS) כדי לקבוע את תוכנם.

סעיף 2 התקדמות המחקר על ניתוח רכיבים ברפואה הסינית המסורתית Cistanche

המרכיבים הכלולים ברפואה הסינית המסורתית הם מורכבים ביותר, והשפעותיהם הרב-מרכיביות, מרובות המסלולים, הרב-מטרות וההשפעות הרגולטוריות המשולבות שלהם הפכו לקונצנזוס בתעשייה. זה הביא אתגרים גדולים להבהרת החומרים הפעילים ומנגנון הפעולה של הרפואה הסינית המסורתית. עם ההקדמה והשיפור של תיאוריית הכימיה הרפואית בסרום של הרפואה הסינית המסורתית על ידי חוקר הבית פרופסור וואנג שייג'ון, החוקרים הבינו בהדרגה שלאחר שהרפואה הסינית המסורתית ניתנת בדרכים המתאימים, היא עוברת ספיגה, חילוף חומרים ותהליכים אחרים בגוף. ומה שנספג לבסוף בדם הוא לרוב מונומרים פולי. קבוצת החומרים הפעילים נוצרת על ידי מרכיבים, המבנה שלה יכול להיות מרכיב אב טיפוס, מטבוליט של מונומר המרכיב, או מרכיב כימי חדש שנוצר על ידי האינטראקציה בין מרכיבי המונומרים ברפואה הסינית המסורתית, או שהוא יכול להיווצר על ידי גוף תחת פעולת תרופות של חומרים אנדוגניים פעילים פיזיולוגית.

1. ניתוח הרכב In vivo של הרכיבים הכימיים העיקריים של Cistanche

Cistanche הוא טוניק ידוע ברפואה הסינית המסורתית. למרות שהוא נמצא בשימוש נרחב ביישומים קליניים, המחקר על חילוף החומרים שלו בגוף מתמקד בעיקר במחקר של מספר מרכיבים פעילים בודדים, כגון אכינצאזיד, ורבסקוסיד וכריסופילין. נכון לעכשיו, הרכב הגוף של Cistanche המדווח בספרות הוא השיטות האנליטיות העיקריות הן HPLC-UV ו-LC-MS.

Jia et al. [{{0}}] הקימה שיטת HPLC-UV לחקור את הפרמקוקינטיקה והמטבוליזם של echinaceaside in vivo והוציאה, הפרידה וסקרה את המטבוליטים ליעילות. וואנג וחב'. I44 השתמש בטכנולוגיית LC/MS-IT-TOF בשילוב עם אסטרטגיות גילוי מטבוליטים יעילות כדי לבצע סקר הולוגרפי וזיהוי של המטבוליטים in vivo של אכינצאה. Cui et al. 145] השתמש בטכנולוגיית UPLC-ESI-Q-TOF-MS כדי לחקור את ההרכב הכימי in vivo של echinaceaside ו-verbascoside, המרכיבים הפעילים של Cistanche, ולבסוף זיהה 29 תרכובות מפלזמה, שתן, צואה ומרה. מטבוליט. Deng et al.146 השתמשו בטכנולוגיית HPLC/Q-TOF-MS כדי לנתח באופן שיטתי את המטבוליטים והמסלולים המטבוליים של chrysophyllin בגוף וסינו וזיהו 66 מטבוליטים מצואה של חולדה. המחקר הראה כי chrysophyllin הופך בקלות לאיזוכריזוזיד, והוא עובר הידרוליזה בקלות לתוצרי פירוק. המסלולים המטבוליים העיקריים של כלורופילין הם הידרוליזה, הידרוקסילציה, אצטילציה, סולפפון, הפחתה, דהידרוגנציה ודימתילציה. Qi et al147 השתמשו ב-UPLC/ESI-QTOF-MS בשילוב עם טכנולוגיית MSE כדי לנתח את הרכיבים הכימיים של verbascoside in vivo וזיהו 35 מטבוליטים משתן של חולדה, כולל 19 מטבוליטים של תרופות אב ו-16 מטבוליטים של תוצרי פירוק. דברים. שיטה זו מהירה ואמינה, מספקת מידע אמין על חילוף החומרים של verbascoside, וניתן להשתמש בה רבות בחקר מטבוליטים של מוצרים טבעיים. Yang et al.48] השתמשו ב-LC-MS/MS כדי לחקור את התהליך הפרמקוקינטי in vivo של אכינצאה. וו וחב'. 149] השתמשו בטכנולוגיית LC-MS/MS בשילוב עם שיטת מיצוי פאזה מוצקה פשוטה (SPE) כדי לקבוע את התוכן של verbascoside בפלסמה ורקמות הומוגניות ולחקור את התפלגותו במוח ותהליכים פרמקוקינטיים in vivo. יאנג וחב'. (0) יישם בהצלחה את טכנולוגיית LC-MS/MS במחקר הפרמקוקינטיקה in vivo של ganglioside B באמצעות מתן תוך ורידי.

2. ניתוח רכיבים ב-vivo של תמצית Cistanche

נכון לעכשיו, עדיין קיים חוסר במחקר שיטתי על מרכיבי תמצית Cistanche. שיטות הניתוח העיקריות הן HPLC ו-UPLC-Q-TOF-MS.

Zhou et al[51 השתמשו בשיטת HPLC, תוך שימוש במיקרו-אמולסיה כשלב הנייד, כדי להפריד ולזהות ארבעה גליקוזידים פנילתנואידים (echinacoside, anthocyanside B, verbascoside ו- isorebascoside) במרכיבי הדם של Amaranthus mange. שיטה זו מבטלת את שלבי הטיפול המקדים המסובכים של דגימות ביולוגיות ומאפשרת ניתוח ישיר של דגימות ביולוגיות רק לאחר דילול עם השלב הנייד של המיקרו-אמולסיה. Li Wenlan et al. 152-53] השתמש בטכנולוגיית כרומטוגרפיה נוזלית-קוודרופול זמן-טיסה (HPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS) בטכנולוגיית ביצועים גבוהים כדי לחקור את ההרכב הכימי של חולדות לאחר מתן אוראלי של Cistanche מדברי. על ידי השוואת קבוצת הביקורת ועל פי הכרומטוגרמה של קבוצת המינון, זוהו בסך הכל 24 תרכובות בשתן ובנסיוב של חולדות, כולל 9 רכיבי אב טיפוס ו-15 מטבוליטים. במקביל, נגזרו המסלולים המטבוליים העיקריים של Cistanche בגוף (סה"כ 9 סוגים), כולל תגובת מתילציה, תגובת דה-מתילציה, תגובת הידרוליזה, תגובת הידרוקסילציה, תגובת אצטילציה, תגובת גלוקורונידציה, תגובת דה-הידרוגנציה, תגובות סולפונציה ו-esterification. . לי וחב'! 54 השתמשו בטכנולוגיית UPLC-Q-TOF-MS בשילוב עם שיטת ההבחנה האורתוגונלית החלקית הפחות ריבועית (OPLS-DA) כדי לסנן במהירות את הפלזמה, השתן והצואה של חולדות לאחר מתן אוראלי של Cistanche tuberose ו-Desert Cistanche. אבות טיפוס ומטבוליטים. תוצאות: 71 רכיבים כימיים זוהו מ-Cistanche המדבר, כולל 25 אבות טיפוס ו-46 מטבוליטים; 45 רכיבים כימיים זוהו מ-Cistanche tubulosa, כולל 18 אבות טיפוס ו-27 מטבוליטים. המחקר הראה כי phenylethanoid glycosides חומרים מפורקים בעיקר לתרכובות מולקולריות קטנות במערכת העיכול של חולדות; Cistancheside B, Cistancheoside C, Cistancheside D ו-Cistancheoside E קיימים רק ב-Cistanche המדברי ועוברים חילוף חומרים בקלות לתוך הידרוקסיטירוסול מתיל. ניתן להבחין בין המטבוליטים של Cistanche ו- Cistanche.