אפוצינין משפר מונוסודיום גלוטמט נזק לאשך על ידי פגיעה במחסום הדם-אשך ופרמטרים של מתח חמצוניⅢ

4. דיון

במחקר זה, ההשפעה המרפאת של APO על נזק האשכים המושרה על ידי MSG הוערכה על ידי פרמטרים ביוכימיים, מיקרוסקופיים ואימונוהיסטוכימיים. רמות הטסטוסטרון וה-LH ירדו ורמות ה-FSH עלו, פרמטרים של עקה חמצונית כמו רמת MDA עלו, בעוד שרמות ה-GSH וה-SOD ירדו בקבוצת ה-MSG. בפגיעה באשכים הנגרמת על ידי MSG, הניקוד ההיסטופתולוגי ומספר האבובות הזרע והזרע הפגומות עלו. מדד השגשוג היה נמוך והאינדקס האפופטוטי היה גבוה יותר בקבוצת MSG. אפיתל הנבט של צינוריות הזרע ירד בעובי.

לחץ כדי ג'ייד cistanche עבור טסטוסטרון

השינויים הניווניים הללו הופנו על ידי הממשל של APO. קבוצת MSG תיארה ירידה בהתפלגות של ZO-1 והסתגרות כחלבוני צומת הדוקים של מחסום הדם-אשך. MSG השפיע על סמני הלחץ החמצוני. בקבוצה זו חלה עלייה בהפצה של החלבון NOX-2, שהיה מעורב בסינתזה של ROS. בדיקות אולטרה-מבנה של קבוצת MSG הצביעו על נזק בולט בציטופלזמה של תאי אפיתל נבט של צינוריות זרע של צינוריות זרע עם חיבורים הדוקים מופרדים. ניתוחים ביוכימיים, היסטולוגיים, אימונוהיסטוכימיים ואולטרה-סטרוקטורליים הראו כי פרמטרים אלו השתפרו עם טיפול ב- APO בקבוצת MSG plus APO.

מחקרים ניסיוניים הראו כי בליעה פומית של MSG יכולה להיות רעילה לרבייה; עם זאת, בשל המינונים הגבוהים בהם נעשה שימוש במחקרים, ההשפעות הרעילות על מערכת הרבייה עקב צריכת MSG לא היו סבירות שיתורגמו לצריכה אנושית [33,34] המינון היומי של MSG שנבלע בבני אדם נחשב בין 1200 ל- 3000 מ"ג/ק"ג [35]. במחקר זה, המינון של 120 מ"ג/ק"ג משקל גוף של MSG שימש לתכנון ניסוי, בהתבסס על אקסטרפולציה אלומטרית של הצריכה היומית הממוצעת של חומר זה בבני אדם [5].

לציר ההיפותלמוס-היפופיזה-גונדאלי (HPG) תפקיד מפתח בתהליכים הקשורים להתפתחות והבשלה של מערכת הרבייה הגברית. FSH הוא גורם בתחזוקה של סינתזת טסטוסטרון תוך-גונדלית ו-spermatogenesis. LH ממלא תפקיד בהתפתחות מערכת המין הגברית ובתהליך קביעת המין על ידי גירוי תאי ליידיג [36]. הגירוי גורם לתאי ליידיג להפריש את הרמות הנחוצות של טסטוסטרון. רמת הטסטוסטרון הנכונה נשלטת על ידי פעילות GnRH באמצעות מנגנון משוב שלילי [36].

עם מנגנון זה, ציר ה-HPG מתפקד בצורה מבוקרת [37,38]. בכמה מחקרים מבוססי אוכלוסייה, הורמוני מין הוכחו כמשפיעים על מורפולוגיה, ריכוז ותנועתיות של הזרע. במחקר על זוגות תת-פוריים, נמצא קשר הפוך בין LH לבין תנועתיות ומורפולוגיה של הזרע [39]. במחקרים קליניים, רמות FSH נמצאו בקורלציה שלילית עם ריכוז הזרע [40]. במחקרים ניסויים אחרים, בעקבות מתן MSG, נחשפה ירידה בתנועתיות הזרע, ריכוז ורמות הורמון ה-LH. מחקרים הראו גם ש-MSG גורם לירידה ברמות הורמון הטסטוסטרון ובריכוזי הזרע [34,41].

במחקר הנוכחי שלנו, רמות FSH, LH וטסטוסטרון בקבוצת APO היו דומות לקבוצת הביקורת. נצפתה ירידה מובהקת סטטיסטית בהורמון הטסטוסטרון בקבוצת MSG. עלייה משמעותית ברמות הורמון FSH נצפתה בקבוצת MSG. בקבוצת MSG פלוס APO, רמת FSH הייתה נמוכה יותר מאשר בקבוצת MSG. למרות שנצפתה ירידה בהורמון LH בקבוצת MSG, לא היה הבדל סטטיסטי בהורמון LH בין קבוצות הניסוי. MSG עלול לגרום נזק לתאי ליידיג להפרשת טסטוסטרון. ירידה ברמות הטסטוסטרון וה-LH קשורות גם לספירת זרע. לפיכך, רמות נמוכות של טסטוסטרון ו-LH יכולות להיות קשורות לירידה בספירת הזרע ומורפולוגיה לא תקינה של הזרע [42].

לעומת זאת, רמה מוגברת של FSH מצביעה על כך שיש הפרעה ב-spermatogenesis הגורמת לשינוי איתות FSH. MSG הוכח שהוא עלול לגרום להפרעה במסלולים ההורמונליים בהיפותלמוס [4]. כתוצאה מהמחקר שלנו, נצפה כי מתן MSG הפריע לציר HPG על ידי השפעה על רמות FSH, LH וטסטוסטרון, כמו גם מורפולוגיה של האשכים והזרע, ריכוז הזרע ותנועתיות. מתן אפוצינין הפחית את רמות הטסטוסטרון, FSH ו-LH הפגומות לכדי רמות נורמליות ושיפור זה ברמות ההורמונים השפיע גם על הפרמטרים המורפולוגיים. SOD הוא אנזים חשוב המגן על התאים מפני נזק הנגרם על ידי יוני סופראוקסיד פנימיים וחיצוניים [43].

MDA הוא אלדהיד הנוצר מרדיקלים חופשיים במהלך חמצון שומנים ומהווה אינדיקטור הן לפגיעה בקרום התא והן לחומרת ההשפעה של רדיקלי חמצן על תאים תגובתיים. ירידה ב-SOD ועלייה ב-MDA יכולים לעורר עקה חמצונית, להוביל לנזק לתאים ולמוות של תאים [24]. GSH מעורב בהפחתת ROS כגון מי חמצן בתא [44]. NOX הוא מקור ל-ROS ואפוצינין ידוע בתור מעכב NOX [45].

במחקרים על פגיעה באשכים הנגרמת על ידי MSG, רמות MDA ברקמת האשכים עלו ורמות SOD ירדו כאשר MSG ניתנה [4,46]. במחקר אחר, הוכח כי בליעה של MSG גם מפחיתה את רמות GSH ברקמת האשכים [4]. במחקר שבו אפוצינין שימש כחומר מרפא, הוכח כי אפוצינין הפחית את רמות ה-MDA, שעלו עקב נזק לרקמות וגרם לעלייה ברמות GSH ו-SOD בקבוצת הנזק באשכים [27]. במחקר ניסיוני אחר של מודל ניוון האשכים המושרה על ידי היפוקסיה, הפעלת NOX-2 ורמות ה-MDA עלו ורמות GSH ירדו עקב השפעת היפוקסיה. עם זאת, הוכח כי נזק לרקמת האשכים מופחת על ידי יישום APO [47].

המחקר הנוכחי שלנו סיכם עלייה ברמות MDA עם ירידה ברמות GSH ו- SOD בקבוצת MSG. אנו יכולים להציע כי APO שיפר את הפרמטרים הללו בקבוצת MSG plus APO באמצעות עיכוב NOX-2. כמה מחקרים פרה-קליניים חשפו את ההשפעות הרעילות של MSG על מערכות איברים רבות, כגון הכבד, הכליות ומערכות הרבייה [3]. מחקר ניסיוני קובע כי MSG יכול לגרום לאי פוריות בשל השפעתו המזיקה על השחלות והביציות [48]. ההשפעה הרעילה של MSG על האשכים עם חוסר איזון של הורמוני המין צוינה [34]. במחקר דומה, רמות סמני הלחץ החמצוני עלו ברקמות האשכים של חולדות שקיבלו MSG, וגם מורפולוגיה של האשכים ומורפולוגיה של הזרע הושפעו לרעה על ידי MSG [41].

נצפה כי MSG מוביל לניוון במורפולוגיה של האשכים עם השפעה שלילית על הטסטוסטרון [4,49]. במודלים של פגיעה באשכים, הודגמה ירידה בעובי של אפיתל הנבט של צינור הזרע [50,51]. במודל של פגיעה באשכים המושרה על ידי MSG, עובי האפיתל של צינור הזרע ירד [52]. במחקר שלנו, עובי האפיתל הנבט הצינורי הזרע של קבוצת MSG ירד בהשוואה לקבוצות הניסוי האחרות. הייתה עלייה בעובי האפיתל הנבט של קבוצת MSG פלוס APO בהשוואה לקבוצת MSG. נאמר כי MSG מוביל להשמנה, כמתאבן [53]. ישנם סימני שאלה לגבי האם צריכת MSG יכולה להוות גורם סיכון לעלייה המהירה בהשמנת יתר מגיפה.

במחקר עוקבה פתוח בקרב מבוגרים סינים, הוכח שאלו שהשתמשו ב-MSG היו בעלי אינדקס מסת גוף גבוה יותר בהשוואה לאלו שלא השתמשו ב-MSG [54]. במחקרים ניסויים אחרים, נצפה כי המשקל של חולדות שניתנו MSG עלה וגרם להן נטייה להשמנה [55,56]. עם זאת, במחקר שלנו, לא היה הבדל מובהק סטטיסטית במשקל הגוף בין קבוצות הניסוי, בשקלול כל שבוע במהלך הניסוי. במחקר קשור שבו MSG ניתן לחולדות, נצפתה ירידה במשקל האשכים בקבוצת MSG בהשוואה לקבוצת הביקורת [4,52]. עם זאת, יחסי משקל אשכים/משקל גוף של המחקר הנוכחי שלנו, הצביעו על ירידה בקבוצת MSG בהשוואה לקבוצות ניסוי אחרות, כבלתי מובהקות סטטיסטית. במחקרים שבדקו את ההשפעות של MSG על ריכוזי הזרע, MSG נמצא כגורם לירידה בכדאיות הזרע [4,49,52].

במודל נזק אשכים אחר, נבדקה ההשפעה המרפאת של אפוצינין על פרמטרי הזרע, ונצפתה עלייה בריכוז הזרע בקבוצת ריפוי אפוצינין בהשוואה לקבוצת הנזק [27]. במחקר שלנו, בהשוואת ספירת זרע בין קבוצות ניסוי, נמצא שספירת הזרע הייתה הנמוכה ביותר בקבוצת MSG, בעוד שספירת הזרע בקבוצת MSG פלוס APO הייתה גבוהה יותר מבחינה סטטיסטית מאשר בקבוצת MSG. נאמר כי השימוש באפוצינין בטוח במחקרים בבעלי חיים. בנוסף, ל- APO יש השפעות נוגדות חמצון ואנטי דלקתיות חזקות במודלים ניסיוניים רבים [57]. מודלים ניסיוניים של פגיעה באשכים דיווחו על השפעת אפוצינין על הפחתת הלחץ החמצוני [58,59].

במחקרים ניסיוניים מבוססי כימותרפיה, השפעת הריפוי של אפוצינין הודגשה גם על רקמת האשכים. במחקרים אלו נצפה כי אפוצינין מוביל לירידה במספר התאים האפופטוטיים ולעלייה ברמות הטסטוסטרון [27,60]. כאחד הגורמים לאי-פוריות הגבר, מתח חמצוני מוביל לתפקוד לקוי של הזרע. נזק לזרע שנגרם כתוצאה מלחץ חמצוני משפיע על 30-80 אחוז מהגברים העקרים [61]. אנזימים ממשפחת NOX אחראים לסינתזת ROS תאית, ואפוצינין הוא מעכב NOX [45]. במודל ניסיוני של פגיעה באשכים שבו נעשה שימוש באפוצינין כחומר מרפא, נצפתה ה-NOX-2-אימונראקטיביות הגבוהה ביותר בקבוצת הפגיעה באשכים. טיפול ב-APO הסתיים בירידה במספר התאים האימונו-חיוביים של NOX-2 [27].

נתוני ספרות חשפו מספר מוגבל של מחקרי נזק באשכים ניסיוניים שהעריכו את הכמות וההפצה של NOX-2. במחקר שלנו, הפעילות החיסונית של NOX-2 הייתה הגבוהה ביותר בקבוצת MSG, עם ירידה בפעילות החיסונית בקבוצת MSG פלוס APO בהשוואה לקבוצת MSG. לא היה הבדל משמעותי בין קבוצת APO לקבוצת הביקורת, שהציגה את הפעילות החיסונית הנמוכה ביותר של NOX-2. אפופטוזיס הוא מוות תאי מתוכנת, שהוא חיוני להומאוסטזיס של רקמות [62]. ויסות אפופטוזיס הוא גורם קריטי בהתפתחות, התמיינות ותפקוד של תאי נבט [61]. חשיפה לגורמים שמובילים ללחץ חמצוני משפיעה לרעה על הזרע על ידי השפעה שלילית על מבנה הכרומטין בזרעונים [63].

נמצא כי לגברים עקרים יש מתח חמצוני ותאים אפופטוטיים בנוזל הזרע שלהם גבוה יותר בהשוואה לגברים פוריים. במודלים ניסיוניים של נזק לאשכים, המספר המוגבר של תאים אפופטוטיים ברקמת האשך הפגועה התהפך על ידי מתן APO כחומר מרפא [23,51]. במחקר ניסיוני של פגיעה באשכים, הוכח כי לאפוצינין יש השפעה מרפאת על נזקי DNA הנגרמים על ידי מתח חמצוני המושרה על ידי NOX [64]. באופן דומה, במחקר שלנו, מדד ההתפשטות ירד בקבוצת MSG, עם עלייה במדד האפופטוטי.

בקבוצת MSG plus APO, הוערכו ירידה במדד האפופטוטי ועלייה במדד השגשוג. מחסום הדם-אשך מגן על תאי הנבט המתפתחים מפני הסביבה החיצונית ומספק תמיכה לתאי הנבט להתחלק ולהתפתח, דבר שחשוב מאוד לפוריות [65]. תאי סרטולי, שהם תאי אפיתל מיוחדים המצויים בצינוריות הזרע, מהווים את הבסיס למחסום הדם-אשך עם צמתים הדוקים. אוקלודין, ZO-1, ZO-2 ו-ZO-3 הן מולקולות שנמצאות בצמתים הדוקים של מחסום הדם-אשך. חלבוני ZO מעורבים בקשירה של חלבוני האוקלודין לאקטין בשלד הציטוס [66,67]. נצפה כי spermatogenesis הושפעה לרעה, וצינוריות זרע אטרופית נוצרו במודל עכבר נוק-אאוט אוקלודין.

המחקר שלנו חשף את הפעילות החיסונית הגבוהה ביותר של ZO-1 ואוקלודין בקבוצת הביקורת ובקבוצת ה-APO, בעוד שלקבוצת MSG הייתה פעילות חיסונית נמוכה משמעותית. הפעילות החיסונית של ZO-1 ו-occludin הייתה גבוהה יותר בקבוצת MSG פלוס APO, בהשוואה לקבוצת MSG. בדיקות מיקרוסקופיות של העברת אלקטרונים של מחקרים ניסיוניים תיארו תאי אפיתל נבט אשכים מנוונים וטיפות שומנים [41,54] עם צומתים הדוקים שהתדרדרו במחסום הדם-אשך [68]. במחקר שלנו, בדיקות מיקרוסקופיות של שידור אלקטרוני חשפו מבנה אולטרה-מבנה תקין של צינורות זרע באשכים בקבוצות הבקרה וה-APO. ואקואוליזציה, טיפות שומנים וניוון בצמתים הדוקים של מחסום הדם-אשך היו ברורים בקבוצת MSG. בקבוצת MSG plus APO, לאפוצינין נמצאה אפקט מרפא ברמה של נזק אולטרה-סטרוקטורלי.

5. סיכוםשימושים

המחקר שלנו הסתכם בתפקיד ויסות של APO, ליצירת נגזרות חמצן תגובתיות וציר ה-HPG בפציעה באשכים של חולדה הנגרמת על ידי MSG. APO שמרה על האיזון בין האינדקסים הפרוליפרטיביים והאפופטוטיים, שימרה את שלמות מחסום הדם-אשך ותרמה לריפוי של נזק לרקמת האשך שנגרם על ידי נזק חמצוני. הוא גם חושב שלמתן אפוצינין עשוי להיות השפעה מרפאת על אי פוריות על ידי היפוך ההשפעות המזיקות של MSG הן על תנועתיות הזרע והן על מספרם.

איך Cistanche מגביר את הטסטוסטרון?

Cistanche הוא עשב המשמש באופן מסורתי ברפואה הסינית כדי להגביר את האנרגיה, החשק המיני והחיוניות הכללית. מאמינים כי Cistanche עשוי להעלות את רמות הטסטוסטרון על ידי עיכוב פעילותו של אנזים הנקרא ארומטאז, אשר הופך טסטוסטרון לאסטרוגן. כמו כן נמצא כי Cistanche מגביר את הייצור של הורמון luteinizing (LH) בגוף. LH ממלא תפקיד מכריע בוויסות ייצור הטסטוסטרון באשכים. על ידי הגדלת רמות LH, Cistanche עשוי להגביר בעקיפין את ייצור הטסטוסטרון. יתר על כן, Cistanche מכיל גם כמה פיטוכימיקלים כגון echinacoside ו-acteoside, בעלי תכונות נוגדות חמצון. תרכובות אלו עשויות לסייע בהגנה על האשכים ואיברי רבייה אחרים מפני נזקי חמצון, ובכך לשפר את תפקודם ולהגביר את ייצור הטסטוסטרון. בסך הכל, המנגנונים המדויקים שבאמצעותם Cistanche מגביר את רמות הטסטוסטרון אינם מובנים במלואם, אך ככל הנראה מדובר במשחק גומלין של עיכוב ארומטאז, הגברת ייצור LH ומתן תמיכה נוגדת חמצון למערכת הרבייה.

Merve Acikel-Elmas 1,*, Salva Asma Algilani 1, Begum Sahin 1, Ozlem Bingol Ozakpinar 2, Mert Gecim 2, Kutay Koroglu 3 ו Serap Arbak 1

1 המחלקה להיסטולוגיה ואמבריולוגיה, בית הספר לרפואה, אוניברסיטת Acibadem Mehmet Ali Aydinlar, Icerenkoy Mah., Kayisdagi Cad. מס' 32, Atasehir, איסטנבול 34752, טורקיה

2 המחלקה לביוכימיה, הפקולטה לרוקחות, אוניברסיטת מרמרה, Basibuyuk Yolu, 4/A, Basibuyuk, איסטנבול 34854, טורקיה

3 המחלקה להיסטולוגיה ואמבריולוגיה, בית הספר לרפואה, אוניברסיטת מרמרה, Basibuyuk Yolu מס' 9 D:2, Maltepe, איסטנבול 34854, טורקיה