השפעות אנטי גידוליות ואנטי דלקתיות של אוליגוסכרידים מתמצית Cistanche Deserticola על פגיעה בחוט השדרה

איש קשר: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 דוא"ל:audrey.hu@wecistanche.com

Hong Zhang, et al

תַקצִיר

במחקר הנוכחי, ההשפעות הפרמקולוגיות של אוליגוסכרידים מCistancheמדבריתלחלץעַלדַלֶקֶת, מתח חמצוני ואפופטוזיס בחולדות לבקנים זכרים עם פגיעה בחוט השדרה נחקרו. חמצון שומנים, GSH, קטלאז, סופרוקסיד דיסמוטאז, אצטילכולין אסטראז, GPx, ROS וחומצה חנקתית שונו משמעותית בחולדות עם פגיעה בחוט השדרה. רמות ביטוי ה-mRNA של IL-6, TNF-, cyclooxygenase-2, iNOS,p53, caspase-3, Bax ו-pro-NGF הופחתו ב-N20 אחוזים בעקבות תוספת תמצית. רמות ביטוי החלבון של קספס-3 ופרו-NGF הופחתו גם הן ב-N20 אחוז. מספר התאים החיוביים ל-p53 היה 1, 79, 54, 33 ו-19 בקבוצות GI–GV, בהתאמה, והמספרים המקבילים של תאים חיוביים לקספאז-3 היו 2, 87, 51,23 ו-14. בהתבסס על התוצאות הנוכחיות, השימוש באוליגוסכרידים מCistancheמדבריתתמצית הייתה יעילה נגדדַלֶקֶת, מתח חמצוני ואפופטוזיס בחולדות לבקנים זכרים שנפגעו בחוט השדרה.

מילות מפתח:Cistanche deserticola, Inflammation Stress חמצוני, Apoptosis Rats

1. הקדמה

פגיעה בחוט השדרה כוללת נזק לחוט השדרה שמוביל לשינוי תפקודי עם אובדן תחושה, שרירים ותפקוד אוטונומי [1]. בנוסף, אפופטוזיס עשוי להיגרם באוליגודנדרוציטים ובנוירונים, מה שמוביל לתפקוד לקוי של חוט השדרה עקב דה-מיילינציה וניוון אקסונלי [2,3]. פגיעה בחוט השדרה גורמת ללחץ חמצוני משמעותי ודַלֶקֶתבעקבות הופעת אפופטוזיס באוליגודנדרוציטים ונוירונים [2,4]. מיני חמצן תגובתיים (ROS) וציטוקינים מעוררי דלקת משתחררים במהלך ניוון עצבי ומיקרוגליה חיוניות במהלך התהליכים הנוירודגנרטיביים והדלקתיים [5-7]. אינטרלוקינים (ILs) הם ציטוקינים חשובים המעורבים בתהליכים אימונולוגיים שונים [8]. Yune et al., [9] דיווחו שגורם גדילה פרו-עצבי (pro-NGF) המשתחרר ממיקרוגליה מוביל למוות של תאים אפופטוטיים. לכן, סוכנים טיפוליים חדשים וחזקים נגד מתח חמצוני ודַלֶקֶתדרושים.

הצמחCistancheמדבריתידוע בכינויו זנב המדבר והוא חבר הולופרזיטי ממשפחת ה-Orobanchaceae [10].Cistanche מדבריתחסר כלורופיל ומשיג מים וחומרי הזנה באופן טפילי מהסקסול הלבן (Haloxylon persicum) והסקסאול השחור (Haloxylon ammodendron). הCistancheמדבריתצמח רב שנתי, המכונה Rou Cong Rong, יכול להגיע לגודל של 160 ס"מ ופרחים צהובים. הוא נמצא בשפע בסין ובמונגוליה [11] ורפואה סינית תוך-מסורתית היא משאב מצוין לטיפול במספר מחלות. הוא משמש גם כטיפול צמחי עיקרי להמרצת היאנג וחיטוב הכליה [11]. Koo et al. [12] דיווח כי הגליקוזידים שלCistancheמדבריתפועלים כחומרים יעילים במערכת העצבים המרכזית (CNS). מספר חוקרים דיווחו על תכונות אנטי-אפופטוטיות, אנטי דלקתיות ונוגדי חמצון שלCistancheמדברית[13,14]. נוגדי חמצון המופקים ממזון ומולקולות אנטי דלקתיות יכולים לשמש חומרים מונעים כימיים נגד מחלות כרוניות [15]. בהינתן היתרונות הטיפוליים האמורים לעיל, היעילות הטיפולית של אוליגוסכרידים מCistancheמדבריתלחלץ נגדדַלֶקֶת, מתח חמצוני ואפופטוזיס נחקרו במחקר הנוכחי באמצעות מודל של חולדה זכר לבקנית שנפגעה בחוט השדרה.

2. חומרים ושיטות

2.1. חומרים

פריימרים של גורם נמק גידול-אלפא (TNF-), IL-6, cyclooxygenase, סינתאז תחמוצת חנקן מושרה (iNOS), p53, Bax, caspase-3, BCL-2,pro-NGF , וגליצראלדהיד 3-פוספט דהידרוגנאז (GAPDH) נרכשו מ-Thermo Fisher Scientific (בייג'ינג, סין). נוגדנים ראשוניים לקספאז-3 (AV00021), p53 (P5813-100UL), מונוקלונאלנטי-עז/כבשה IgG–פרוקסידאז (A9452), ו-IgG פלואורססאין איזוטיוציאנאט נגד עכברים (FITC; F{{15} }ML) נרכשו מ-Sigma-Aldrich China, Inc. (Shanghai, PR China).

2.2. חולדות

חולדות זכר מזן Wistar לבקנות (180-220 גרם) נרכשו מבית החיות של בית החולים מערב סין, אוניברסיטת סצ'ואן, סין. חולדות קיבלו מזון ומים באופן חופשי. מחזור כהה של 12-שעות: 12-שעות נשמר בכלובי חולדות מפוליפרופילן תחת לחות יחסית. כל ניסויי החולדות אושרו על ידי הוועדה האתית של בית החולים WestChina, אוניברסיטת סצ'ואן, סין. כל ההנחיות הבינלאומיות, הלאומיות והמוסדיות הרלוונטיות לטיפול ושימוש בבעלי חיים בוצעו.

2.3. אינדוקציה של פגיעה בחוט השדרה

פגיעה בחוט השדרה נגרמה על ידי חתך ניתוחי אורכי לאחר חשיפה להלוטן (1.5 אחוז). כל ההליך הכירורגי נערך בטמפרטורת החדר. החתך נעשה מהחוליות התחתונה עד אמצע החזה בצד האחורי של החיה. משקל A20-25 גרם הונח על משטח Th12 החשוף למשך 30 דקות כדי לגרום לפציעה. עור ושרירים נתפרו לאחר הסרת משקל ממשטח Th12, ושיתוק זמני הניתן לשחזור נגרם בגפיים התחתונות [16,17]. חולדות נשמרו במשך 2400 תנאים מתאימים ובקרה וטרינרית.

2.4. הכנת תמצית Cistanche deserticola וניתוח כמותי

הצמחCistancheמדברית(1 ק"ג) נאסף מגנסופרובינציה, סין, מיובש באוויר ואבקה באמצעות מטחנה חשמלית. האבקה חולצה באתנול (70 אחוז) למשך 60 דקות, סוננה ורוכזה בלחץ מופחת. התרכיז מיובש בוואקום בתוך אבקה [18]. ניתוח כמותי שלCistancheמדבריתהתמצית בוצעה באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC), כפי שתוארה בעבר [11].

2.5. יַחַס

קבוצות הניסוי היו כדלקמן: קבוצה I (GI), חולדות ביקורת רגילות; קבוצה II (GII), חולדות פגיעות חוט שדרה (בקרות מדומה); וקבוצות III–V (GIII–V), חולדות פגועות חוט שדרה המקבלות 100, 200 או 400 מ"ג/ק"ג של אוליגוסכרידיםCistancheמדבריתלחלץ, בהתאמה. כל קבוצה הכילה שש חולדות וCistancheמדבריתהתמצית ניתנה דרך הפה לחולדות במשך 6 שבועות רצופים.

2.6. איסוף דם

בסיום הטיפול, דם (5-6 מ"ל) נאסף על ידי מזרק 5 מ"ל עם מחט 23G1 דרך ניקור הלב, וחולדות הורדמו על ידי קטמין הידרוכלוריד (100 מ"ג/ק"ג משקל גוף) וקסילאזין (10 מ"ג/ק"ג גוף) משקל) והוקרב בעריפת ראשים.

2.7. הכנת הומוגנית רקמות

בסיום הטיפול, חולדות הורדמו על ידי קטמין הידרוכלוריד (100 מ"ג/ק"ג משקל גוף) וקסילאזין (10 מ"ג/ק"ג משקל גוף) והוקרבו על ידי עריפת ראשים. דגימות חוט השדרה (12 מ"מ) נאספו מהאזור המנותח. רקמות חוט השדרה נחתכו לחתיכות קטנות והומוגגו במאגר Tris-HCl (pH 7.4, 50 mM) ב-6000 סל"ד למשך 5 דקות. ההומוגנט עבר צנטריפוגה והסופרנטנט נאסף לניסויים נוספים. כל ההכנות ההומוגניות והסופרנטנטות בוצעו ב-4 מעלות.

2.8. סמנים ביולוגיים של עקה חמצונית

חמצון ליפידים נקבע על פי תכולת המלונדיאלדהיד (MDA) על ידי מדידת המינים התגובתיים של חומצה thiobarbituric (TBARS). התוצר הסופי נמדד ב-534 ננומטר [19]. ROS נקבעו באמצעות מבחן dichlorofluorescein [20]. תכולת גלוטתיון מופחתת (GSH) נקבעה על ידי מדידת התוצר הסופי ב-405 ננומטר [21]. פעילויות האנזים Superoxide Dismutase (SOD), גלוטתיון פרוקסידאז (Gpx), Catalase ו-Acetylcholinesterase (AChE) נמדדו באמצעות ספקטרופוטומטריה [19].

2.9. סמנים דלקתיים

רמות TNF ו-IL-6 בסרום נקבעו עבור כל הקבוצות [22]. תכולת Ni trite נמדדה כאינדקס של רמת תחמוצת החנקן (NO) שבא לידי ביטוי ב-mM [23,24]. רמות ביטוי ה-mRNA של TNF-, IL-6, iNOS, cyclooxygenase-2 ו-GAPDH נקבעו על פי Moon et al. [25]. הפריימרים המשמשים במחקר זה מוצגים בטבלה 1.

2.10. סמנים ביולוגיים של אפופטוזיס

רמות הביטוי של mRNA של caspase-3, p53, bcl-2, bax, pro-NGF ו-GAPDH נקבעו על פי Moon et al. [25]. רמות ביטוי החלבון של caspase-3, p53, bcl-2, bax, pro-NGF ו-GAPDH נקבעו על פי Lobos וחב'. [26]. צביעת TUNEL ofcaspase-3 ו-p53 בוצעה במקטעים נוירונים [25]. הפריימרים המשמשים ל-RT-PCR ניתנים בטבלה 1.

2.11. ניתוח סטטיסטי

הערכים מוצגים כאמצעים עם שגיאת תקן של הממוצע (SEM). השליטה וCistancheמדבריתקבוצות שטופלו בתמצית הושוו באמצעות מבחן t של Student ללא התאמה. ניתוח שונות של שונות (ANOVA) שימש עבור ההשוואות המרובות. ערכי P ˂0.05 נחשבו כמצביעים על מובהקות סטטיסטית.

3. תוצאות

במחקר הנוכחי, היעילות הטיפולית של אוליגוסכרידים מCistanche מדבריתלחלץ נגדדַלֶקֶת, חמצונילחץנבדקה נוכחות של אוליגוסכרידים (78.68 אחוז), אקטאוזיד (9.29 אחוז), אכינאקוסיד (6.34 אחוז) וחומצה אפילוגנית (5.75 אחוז) 8-.Cistanche מדבריתתמצית (איור 1). תכולת ה-MDA, שנמדדה כתוצר הסופי של חמצון שומנים, הייתה 22.58 ננומול/ג בחולדות בקרה רגילות (GI), ועלתה באופן דרסטי ב-179.5 אחוזים בבקרות דמה (GII). טיפול בחולדות עם אוליגוסכרידים מCistancheמדבריתתמצית הפחיתה באופן משמעותי את תוכן ה-MDA ב-50.1 אחוזים בקבוצת GV (טבלה 2, P b 0.05). תכולת ה-GSH הייתה 85.31 מ"ג/ג בקבוצת ה-GI והצטמצמה באופן דרסטי ב-61.1 אחוזים בקבוצת ה-GII. טיפול עםCistancheמדבריתתמצית בחולדות פגועי חוט שדרה הגדילה באופן משמעותי את תכולת ה-GSH ב-121.6 אחוזים בקבוצת ה-GV (טבלה 2, P b0.05).

פעילות SOD הייתה 6.2 U/mg בקבוצת ה-GI והצטמצמה באופן משמעותי ב-51.1 אחוזים בקבוצת GII. חולדות פגיעות חוט שדרה בתוספת אוליגוסכרידים מCistancheמדבריתתמצית הראתה פעילות SOD מוגברת משמעותית, ב-91.4 אחוזים בקבוצת ה-GV (טבלה 2, P b0.05). פעילות Catalase הייתה 12.8 U/g בקבוצת GI והצטמצמה באופן משמעותי ב-59.3 אחוזים בקבוצת GII. חולדות פגיעות חוט השדרה בתוספת אוליגוסכרידים מCistanche מדבריתתמצית הראתה פעילות קטלאז מוגברת משמעותית, ב-106.1 אחוז בקבוצת GV (טבלה 2, P b 0.05). פעילות GPx הייתה 0.87 (מ"ג/חלבון) בקבוצת ה-GI והצטמצמה ב-55.2 אחוזים בקבוצת ה-GII. פעילות GPx עלתה ב-100 אחוז בקבוצת ה-GV (טבלה 2, P b 0.05). פעילות AChE הייתה 9.3 (מיקרומול/דקה/מ"ג חלבון) בקבוצת GI והצטמצמה ב-54.8 אחוזים בקבוצת GII. חולדות פגיעות חוט השדרה בתוספת אוליגוסכרידים מCistancheמדבריתתמצית הראתה פעילות AChE מוגברת משמעותית, ב-26.2, 57.1 ו-107.1 אחוזים בקבוצות GIII, GIV ו-GV, בהתאמה (טבלה 2, P b 0.05).

ROS נמדדו ובאו לידי ביטוי ביחידות פלואורסצנטי יחסי (RFUs): ROS תוך תאי היה 44.23 בקבוצת GI, אשר גדל ב-349 אחוז בקבוצת GII. תוספת עם אוליגוסכרידים מCistancheמדבריתתמציות הפחיתו באופן משמעותי את רמות ה-ROS התוך-תאיות ב-61.9 אחוזים בקבוצת ה-GV (איור 2A, P b 0.05). תכולת Ni trite נמדדה כאינדקס של רמת ה-NO ובטא inmM. רמת ה-NO הייתה 3.7 (mM) בקבוצת ה-GI, שעלתה ב-349 אחוזים בקבוצת ה-GII. תוספת עם אוליגוסכרידים מCistancheמדבריתתמצית הפחיתה באופן משמעותי את רמות NO ב-63.6 אחוזים בקבוצת GV (איור 2B, P b 0.05).

רמות ה-IL-6 וה-TNF- נמדדו והובאו כ-pg/mg של חלבון. רמות IL-6 ו-TNF- עלו באופן משמעותי, ב-912.7 וב-695.4 אחוזים, בהתאמה, בקבוצת GII. עם זאת, תוספת עם אוליגוסכרידים מCistancheמדבריתתמצית הפחיתה משמעותית את רמת ה-IL{{0}} ו-TNF- ב-N60 אחוז בקבוצת ה-GI בהשוואה לקבוצת ה-GII (איור 3, P b 0.{{16 }}5). ביטוי ה-mRNA של סמנים דלקתיים, כגון IL-6, TNF-, cyclooxygenase-2 ו-iNOS, כמתם ובא לידי ביטוי כשינויי קיפול. רמות ביטוי ה-mRNA של IL 6, TNF- , cyclooxygenase-2 ו-iNOS עלו ב-0.72-, 0.81-,0.54- , ו-0.67-קפל בקבוצת GII, בהתאמה. השלמה עםCistancheמדבריתתמצית הפחיתה את רמות ביטוי ה-mRNA של IL{{0}}, TNF-, cyclooxygenase-2 ו-iNOS ב-N20 אחוז בקבוצת GV בהשוואה לקבוצת GII (איור 4, P b 0.05).

נקבע גם ביטוי ה-mRNA של הסמנים האפופטוטיים caspase{{0}}, p53,bcl-2, bax ו-pro-NGF. רמות הביטוי של mRNA של p53, caspase-3, bax ו-pro-NGF עלו ב-0.97-,1.{{10}}, 1.{ {12}} ו-0.76-קיפול בקבוצת GII, בהתאמה, ורמת ביטוי ה-mRNA של thebcl-2 הופחתה ב-0.67-פיפול . טיפול בתמצית הפחית באופן משמעותי את רמות ביטוי ה-mRNA של p53,caspase-3, bax ו-pro-NGF ב-N30 אחוז, בעוד שרמת הביטוי bcl-2 mRNA עלתה ב-178 אחוז (איור 5, P b 0.05). בהתבסס על ניתוח סתימות מערבית, רמות חלבון קספאז-3 ופרו-NGF עלו באופן משמעותי, פי 0.95-ופי 0.68- בקבוצת GII, בהתאמה. תוספת עם אוליגוסכרידים מCistancheמדבריתתמצית הפחיתה משמעותית את רמות ביטוי החלבון של caspase{{0}} ופרו-NGF ב-N20 אחוזים בקבוצת GI בהשוואה לקבוצת GII (איור 6, P b 0.05). מבחן צביעת TUNEL שימש כדי לזהות את מספר התאים החיוביים של p53- ו-caspase-3-. מספר התאים p53-חיוביים היה 1, 79, 54, 33 ו-19 בקבוצות GI–GV, בהתאמה. מספר התאים החיוביים לקספאז-3-היה 2, 87, 51, 23 ו-14 בקבוצותGI-GV, בהתאמה (איורים 7-8, P b 0.05).

4. דיון

במחקר הנוכחי, היעילות הטיפולית של אוליגוסכרידים מCistancheמדבריתלחלץ נגדדַלֶקֶת, מתח חמצוני ואפופטוזיס בחולדות לבקנים זכרים שנפגעו בחוט השדרה נחקרו. ליואט אל. [27] דיווח שתוסף עם נוגד חמצון יכול להיות יעיל נגד מספר מחלות ניווניות. נוכחות של אכינאקוסיד (פנילתאנואיד גליקוזיד) דווחה ב-Cistancheמדבריתתמצית [10], וכמה חוקרים הדגימו את התכונות האנטי-דלקתיות והאנטי-נוסיספטיביות שלCistanche מדברית[28,29]. במחקר הנוכחי, אוליגוסכרידים, אקטאוזיד, אכינאקוסיד וחומצה אפילוגנית נצפו כמרכיבים העיקריים של תמצית Cistanche deserticola.

פגמים התנהגותיים משופרים ב-TNF ואפופטוזיס נצפו בתאי עצב SH-SY5Y בעקבות טיפול ב-echinacoside [30,31]. נאן וחב'. [32] דיווח על ירידה ברמות TNF-, T-tau ו-IL-1 בחולי מחלת אלצהיימר, ושיפור התאוששות של ניוון ההיפוקמפוס ויכולות קוגניטיביות לאחר תוספת עם Cistanche herba. ההשפעות הטיפוליות שלCistancheמדבריתלחלץ עלדַלֶקֶת, עקה חמצונית ואפופטוזיס לא דווחו בעבר. זהו הדיווח הראשון על ההשפעות הפרמקולוגיות שלCistancheמדבריתתמצית בדגם פצוע חוט שדרה.

מספר חוקרים דיווחו כי הטיפול באקטאוזיד הפחית באופן משמעותי את הלחץ החמצוני ואת המעייםדַלֶקֶתעכברים הנגרמות ממחלות מעי דלקתיות [33]. נאם וחב'. [34] דיווחו שהפעילות האנטי-דלקתית של איזואקטאוזיד מ-Abeliophyllum distichum בתאי פיטום אנושיים. במודל העכברים דווחו גליקוזידים אנטי דלקתיים מ-Clerodendron trichotomum leaves [35]. Zhou et al. [36] דיווחו שהפעילות האנטי דלקתית של אוליגוסכרידים בתאי מקרופאגRAW 264.7. מונומרים אוליגוסכרידים דווחו לעיכוב שלדַלֶקֶתבמקרופאגים מעוררי LPS באמצעות דיכוי של מסלולי MAPK ו-NF-KB [37].

פאהנשטוק וחב'. [38] דיווח כי פרו-NGF הוא הצורה השולטת במוח ומוגברת בחולי מחלת אלצהיימר. מספר חלבונים מפוצלים, בנוסף לפרו-NGF, מפעילים תגובות אנטי-אפופטוטיות תאיות [39]. היחס בין NGF בוגר ופרו-NGF ממלא תפקיד קריטי באיזון הישרדות תאים ושיעור מוות [40]. Ke Zhang et al. [18] דיווחו על היווצרות גידול מופחתת ועל עכברים עם תוחלת חיים ארוכה יותר בתוספתCistancheמדבריתלחלץ. השפעות עצביות שלCistancheמדבריתתמצית על פגיעה הנגרמת על ידי נוירוטוקסין דווחה בעבר [41]. שואן וליו ואחרים. [42] דיווחו על שיפורים בתפקוד החיסוני, זיכרון, למידה ונוגדי חמצון בעכברים בתוספתCistancheמדבריתלחלץ. תוספת עם תמצית Cistanche deserticola הפחיתה את ה-MDA והעלאת רמות GPxand SOD במודל של עכברוש איסכמיה-רפרפוזיה. יתר על כן, נצפתה הורדת ויסות של קספאז-3, עם עלייה נלווית ביחס bax/BCL-2, [43], מה שעולה בקנה אחד עם הממצאים שלנו המראים רמות מופחתות של סמנים חמצוניים, דלקתיים ואפופטוטיים בעמוד השדרה חולדות פציעה בחבל בתוספתCistancheמדבריתלחלץ.

5. מסקנה

לסיכום, ניתוח כמותי גילה נוכחות של אוליגוסכרידים, אקטאוזיד, אכינאקוסיד וחומצה אפילוגנית ב-8-Cistancheמדבריתלחלץ.דַלֶקֶת, עקה חמצונית וסמני אפופטוזיס הופחתו באופן משמעותי בחולדות פגועי חוט שדרה בתוספת אוליגוסכרידים מתמצית Cistanche deserticola.

מגבלות הלמידה

מחקר זה, למרות שחשף את ההשפעות האנטי-גידוליות והאנטי דלקתיות,Cistancheמדבריתלחלץ יש כמה מגבלות. הערכנו את ההשפעה החריפה שלCistancheמדבריתתמצית על גידול ודַלֶקֶתבפגיעה בחוט השדרה.

מימון

מחקר זה נתמך על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מענק מס' 31370984, 81501879, 31870961, GZ1219), המחלקה למדע וטכנולוגיה של מחוז סצ'ואן (מס' 2015HH004) פרויקט מחקר מדעי על ידי הוועדה לתכנון בריאות ומשפחה של מחוז סצ'ואן (No. . 100097).

אינטרסים מתחרים

כל המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים מתחרים.

תרומות מחברים

הונג ג'אנג, ג'ואו שיאנג, שין דואן וחואן לי ג'יאנג ערכו ניסויים וניסחו את כתב היד. Yi Ming Xing, Cheng Zhu ו-Qiang Song אספו סקירות ספרות, ערכו ניתוח נתונים גולמיים ופרשנות נתונים. צ'ין רונג יו תיקן את התוכן האינטלקטואלי של כתב היד.

מתוך: 'אנטי גידול ואַנְטִי-דַלַקתִיהשפעות של אוליגוסכרידים מCistancheמדבריתתמצית על פגיעה בחוט השדרה' על ידיHong Zhang, et al

---H. Zhang et al. / International Journal of Biological Macromolecules 124 (2019) 360–367

הפניות

[1] MO Krucoff, S. Rahimpour, MW Slutzky, VR Edgerton, DA Turner, Enhancing System nervous through neurobiology, training interface neural, and neurorehabilitation, Front. Neurosci. 10 (2016) 584.
[2] TY Yune, JY Lee, MH Jiang, DW Kim, SY Choi, TH Oh, ניהול מערכתי של חלבון היתוך PEP-1-SOD1 משפר התאוששות תפקודית על ידי עיכוב מוות של תאי עצב לאחר פגיעה בחוט השדרה, Free Radic. ביול. Med. 45 (2008) 1190–1200.

[3] . 20 (2003) 1017–1027.

[4] F. Bao, D. Liu, Peroxynitrite שנוצר בחוט השדרה של חולדה גורם למוות של נוירונים ולחסרים נוירולוגיים, Neuroscience 115 (2002) 839–849.

[5] L. Qin, Y. Liu, T. Wang, SJ Wei. . Chem. 279 (2004) 1415–1421.
[6] ML Block, JS Hong, Microglia andדַלֶקֶתניוון עצבי בתיווך: טריגרים מרובים עם מנגנון משותף, פרוג. נוירוביול. 76 (2005) 77–98.
[7] KJ Min, HK Pyo, MS Yang, KA Ji, I. Jou, EH Joe, Gangliosides מפעילים מיקרוגליה באמצעות חלבון קינאז C ו-NADPH אוקסידאז, Glia 48 (2004) 197–206.
[8] J. Hussein, M. El-Banna, TA Razik, ME El-Naggar, Biocompatible zinc oxide nanocrystals מיוצב באמצעות תאית הידרוקסיאתיל להפחתת סיבוכי סוכרת, Int. ג'יי ביול. מקרומול. 107 (Pt A) (2018) 748–754.
[9] TY Yune, JY Lee, GY Jung, SJ Kim, MH Jiang, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, Minocycline מקל על מוות של אוליגודנדרוציטים על ידי עיכוב ייצור גורמי גדילה פרו-עצביים במיקרוגליה לאחר פגיעה בחוט השדרה, J. Neurosci. 27 (2007) 7751–7761.
[10] GQ Sheng, JR Zhang, XP Pu, J. Ma, CL Li, Protective Effect of verbascoside על נוירוטוקסיות הנגרמת על ידי 1-מתיל-4-פנילפירידיניום בתאי PC12, Eur. J.Pharmacol. 451 (2002) 119–124.
[11] Y. Jiang, PF Tu, Analysis of Chemical Constituents in Cistanche species, J. Chromatogr. 1216 (2009) 1970–1979.
[12] KA Koo, SH Sung, JH Park, SH Kim, KY Lee, YC Kim, In vitro neuroprotective activities of phenylethanoid glycosides from Callicarpa dichotoma, Planta Med. 71 (2005) 778–780.
[13] Q. Dong, J. Yao, JN Fang, K. Ding, Structural אפיון ופעילות אימונולוגית של שני פוליסכרידים הניתנים למיצוי מים קרים מCistancheמדבריתYC Ma, Carbohydr. מילון 342 (2007) 1343–1349.
[14] LW Lin, HT Lin, FH Tsai, WH Wang, CR Wu, פעילות אנטי-ציספטיבית ואנטי-דלקתית הנגרמת על ידיCistancheמדבריתבמכרסמים, J. Ethnopharmacol. 83 (2002) 177–182.
[15] J. Hussein, M. El-Bana, E. Refaat, ME El-Naggar, Synthesis of carvacrol-based nanoemulsion for treatment disorders neurodegenerative in diabetes experimentally, J. Funct. מזונות 37 (2017) 441–448.
[16] M. Sakanaka, P. Zhu, B. Zhang, TC Wen, F. Cao, YJ Ma, K. Samukawa, N. Mitsuda, J. Tanaka, M. Kuramoto, H. Uno, R. Hata, Intravenous עירוי של dihydro-ginsenoside Rb1 מונע פציעת חוט שדרה דחיסה ונזק מוחי איסכמי באמצעות וויסות עלייה של VEGF ו-Bcl-xL, J. Neurotrauma 24 (2007) 1037-1054.
[17] S. Naruo, K. Okajima, Y. Taoka, M. Uchiba, T. Nakamura, H. Okabe, K. Takagi, Prostaglandin E1 מפחית פגיעת חוט שדרה הנגרמת על ידי דחיסה בחולדות בעיקר על ידי עיכוב הפעלת נויטרופילים, J Neurotrauma 20 (2) (2003) 221-228.
[18] K. Zhang, X. Ma, W. He, H. Li, S. Han, Y. Jiang, H. Wu, L. Han, T. Ohno, N. Uotsu, K. Yamaguchi, Z. Ma , פ' טו, תמציות שלCistancheמדבריתיכול לנטרל חיסון ולהאריך את תוחלת החיים בעכברים מואצים של עכברים 8 (SAM-P8), Evid. משלים מבוסס. אלטרנטיבה. Med. 2014 (2014), 601383.
[19] T. Kaddour, K. Omar, AT Oussama, H. Nouria, B. Iméne, A. Abdelkader, Aluminiuminduced neurotoxicity acute neurotoxicity in rats: treatment with aqueous extract of Arthrophytum (Hammada scoparia), J. Acute Dis. 5 (6) (2016) 470–482.
[20] TV Arutyunyan, AF Korystova, LN Kublik, MKh Levitman, VV Shaposhnikova, YN Korystov, Taxifolin ו-fucoidan מבטלים את העלייה הנגרמת על ידי קרינה בייצור מיני חמצן תגובתיים באבי העורקים של חולדה, בול. Exp. ביול. Med. 160 (2016) 635–638.
[21] M. Erden Inal, A. Akgün, A. Kahraman, ההשפעות של גלוטתיון אקסוגני על רמת גלוטתיון מופחתת, גלוטתיון פרוקסידאז ופעילות גלוטתיון רדוקטאז של חולדות עם גילאים ומין שונים לאחר הקרנת Γ של כל הגוף, J. Am . Aging Assoc. 26 (2003) 55–58.
[22] J. Tavakkol Afshari, N. Ghomian, A. Shameli, MT Shakeri, MA Fahmidehkar, E. Mahler, R. Khoshnavaz, M. Emadzadeh, Determination of Interleukin-6 and Tumor Necrosis Factor-alpha. חולים איראניים-חוראסניים עם רעלת הריון, BMC Pregnancy Childbirth 5 (2005) 14.
[23] D. Medhat, J. Hussein, ME El-Naggar, MF Atia, M. Anwar, YA Latif, HF Booles, S. Morsy, AR Farrag, WKB Khalil, Z. El-Hayat, Effect of Au-dextran NPS כחומר נוגד גידולים נגד EAC וגידול מוצק בעכברים על ידי הערכות ביוכימיות וחקירות היסטופתולוגיות, Biomed. פרמקוטר. 91 (2017) 1006–1016.
[24] TI Shaheen, MI El-Naggar, JS Hussein, M. El-Bana, E. Emara, Z. El-Hayat, MMG Fouda, H. Ebaid, A. Hebeish, Assessment Antidiabetic; מחקר in vivo של ננו-חלקיקי זהב וננו-מעטפת כסף-זהב על חולדות סוכרתיות הנגרמות על ידי סטרפטוזוטוצין, Biomed. פרמקוטר. 83 (2016) 865–875.
[25] YJ Moon, JY Lee, MS Oh, YK Pak, KS Park, TH Oh, TY Yune, Inhibition ofדַלֶקֶתולחץ חמצוני על ידי תמצית Angelica dahuricae radix מפחית מוות של תאים אפופטוטיים ומשפר התאוששות תפקודית לאחר פגיעה בחוט השדרה, J. Neurosci. מילון 90 (1) (2012) 243–256.
[26] E. Lobos, C. Gebhardt. 1922–1929.
[27] J. Liu, E. Head, AM Gharib, W. Yuan, RT Ingersoll, TM Hagen, CW Cotman, BN Ames, אובדן זיכרון בחולדות ישנות קשור לדעיכה המיטוכונדריאלית במוח ולחמצון RNA/DNA: היפוך חלקי על ידי הזנת אצטיל-ל-קרניטין ו/או חומצה ליפואית R-_-, Proc. נאטל. אקד. Sci. ארה"ב 99 (2002) 2356–2361.
[28] ZD Nan, KW Zeng, SP Shi, MB Zhao, Y. Jiang, PF Tu, Phenylethanoid גליקוזידים עם פעילות אנטי דלקתית מהגבעולים שלCistancheמדבריתמתורבת במדבר טארים, Fitoterapia 89 (2013) 167–174.
[29] XM Wu, XM Gao, KWK Tsim, PF Tu, An arabinogalactan מבודד מהגבעולים שלCistancheמדבריתגורם להתרבות של לימפוציטים מתורבתים, Int. ג'יי ביול. מקרומול. 37 (2005) 278–282.
[30] M. Deng, JY Zhao, PF Tu, Y. Jiang, ZB Li, YH Wang, Echinacoside מציל את תאי העצב SHSY5Y מאפופטוזיס המושרה על ידי TNF-alpha, Eur. J. Pharmacol. 505 (2004) 11–18.
[31] X. Geng, X. Tian, ​​P. Tu, X. Pu, Neuroprotective effects of echinacoside in the mouse MPTP model of Parkinson's disease, Eur. J. Pharmacol. 564 (2007) 66–74.

[32] L. Nan, W. Jianping, M. Jun, G. Zhiqiang, J. Chao, Y. Lie, F. Xiaojie, Neuroprotective effects of cistanches herba therapy on patients with Alzheimer's disease moderate, Evid. משלים מבוסס. אלטרנטיבה. Med. (2015) 103985.

[33] M. Hausmann, F. Obermeier, DH Paper, K. Balan, N. Dunger, K. Menzel, K. Rogler, In vivo treatment with the herbal phenylethanoid acteoside משפר את המעייםדַלֶקֶתבקוליטיס הנגרמת על ידי דקסטרן סולפט נתרן, Clin. Exp. אימונול. 148 (2) (2007) 373–381.

[34] SY Nam, HY Kim, MS Yoou, AH Kim, BJ Park, HJ Jeong, HM Kim, Effects Antiinflammatory of isoacteoside from Abeliophyllum distichum, Immunopharmacol. אימונוטוקסיקול. 37 (3) (2015) 258–264.
[35] KH Kim, S. Kim, MY Jung, IH Ham, WK Whang, Anti-inflammatory phenylpropanoid glycosides from Clerodendron trichotomum leaves, Arch. פארם. מילון 32 (1) (2009) 7–13.
[36] R. Zhou, X. Shi, Y. Gao, N. Cai, Z. Jiang, X. Xu, Activity Anti-inflammatory of guluronate oligosaccharides המתקבלים על ידי פירוק חמצוני מאלגינט בתאי מקרופאג עכברי RAW 264.7 המופעלים על ידי ליפופוליסכריד, J. Agric. Food Chem. 14;63 (1) (2015) 160–168.
[37] W. Wang, P. Liu, C. Hao, L. Wu, W. Wan, X. Mao, מונומרים Neoagaro-oligosaccharide מעכביםדַלֶקֶתבמקרופאגים מעוררי LPS באמצעות דיכוי של מסלולי MAPK ו-NF-κB, Sci. נציג 7 (7) (2017), 44252.
[38] M. Fahnestock, B. Michalski, B. Xu, MD Coughlin, The precursor pronerve growth factor הוא הצורה השלטת של גורם הגדילה העצבי במוח ומוגבר במחלת אלצהיימר, Mol. תָא. Neurosci. 18 (2001) 210–220.
[39] R. Lee, P. Kermani, KK Teng, BL Hempstead, Regulation of cell survival by secreted proneurotrophins, Science 294 (2001) 1945–1948.
[40] MV Chao, M. Bothwell, Neurotrophins: to cleave or not to cleave, Neuron 33 (2002) 9–12.
[41] Q. Xiong, K. Hase, Y. Tezuka, T. Tani, T. Namba, S. Kadota, Hepatoprotective activity of phenylethanoids fromCistancheמדברית, פלנטה מד. 64 (2) (1998) 120–125.
[42] GD Xuan, CQ Liu, מחקר על ההשפעה של phenylethanoid glycosides (PEG) שלCistancheמדבריתעל אנטי אייג'ינג בעכברים מבוגרים המושרה על ידי D-galactose, J. Chin. Med. מאטר. 31 (9) (2008) 1385–1388.
[43] Q. Yu, X. Li, X. Cao, השפעות הגנה על הלב של תמצית עשירה בגליקוזידים ב-phenylethanoid.Cistancheמדבריתבאוטם שריר הלב המושרה על ידי איסכמיה-פרפוזיה בחולדות, אן. Vasc. Surg. 34 (2016) 234–242.