משטר תחול AZD1222 הטרולוגי ו-BNT162b2 חיזוק יעיל יותר מעורר נוגדנים מנטרלים, אך לא תאי זיכרון T, מאשר משטר BNT162b2 ההומולוגי
Aug 07, 2023
תַקצִיר
רקע: נדרשים ניתוחים השוואתיים של תגובות חיסוניות ספציפיות ל-SARS-CoV-2- הנגרמות על ידי משטרי דחיפה מגוונים כדי לקבוע משטרי שליטה יעילים ב-COVID-19. שיטה: במחקר עוקבה תצפית פרוספקטיבי זה, אימונוגלובולין G (IgG) ספציפי לספייק ונוגדנים מנטרלים (nAbs) לצד תגובות תאי T ספציפיות לספייק בקבוצות תואמות גיל של חיסון BNT162b2/BNT162b2 הומולוגי או AZD1222/AZD1222/AZ, heterolog הוערכו חיסון BNT162b2 וזיהום/חיסון מסוג SARS-CoV-2 קודם מסוג פראי. תוצאות: שיא התגובה החיסונית הושגה לאחר מנת החיסון השנייה בקבוצות המחוסנות הנאיביות ולאחר המנה הראשונה בקבוצת ההדבקה/החיסון הקודמת. שיא טיטר של IgG ו-nAb נגד ספייק היו גבוהים משמעותית בקבוצות החיסון AZD1222/BNT162b2 וזיהומים/חיסונים קודמים מאשר בקבוצות BNT162b2/BNT162b2 או AZD1222/AZD1222. עם זאת, התדירות של תאי CD4 פלוס T המייצרים אינטרפרון C הייתה הגבוהה ביותר בקבוצת החיסון BNT162b2/BNT162b2. תוצאות דומות נצפו בניתוח של תאי T רב תפקודיים. כאשר נותחו תגובות nAb ו-CD4 פלוס תאי T כנגד וריאנט ה-Delta, קבוצת ההדבקה/החיסון הקודמת הראתה תגובות גבוהות יותר מהקבוצות של משטרי חיסון הומולוגיים או הטרולוגים אחרים. מסקנה: nAbs מתעוררים ביעילות על ידי חיסון הטרולוגי AZD1222/BNT162b2, כמו גם זיהום/חיסון קודם, בעוד שתגובות CD4 פלוס תאי T ספציפיות לספייק מתעוררות ביעילות על ידי חיסון הומולוגי BNT162b2. חסינות מזהה וריאנטים נוצרת ביעילות רבה יותר על ידי זיהום/- חיסון קודם מאשר משטרי החיסון ההומולוגיים או ההטרולוגים האחרים.
cistanche tubulosa- לשפר את המערכת החיסונית
1. הקדמה
תסמונת נשימה חריפה חמורה coronavirus 2 (SARS-CoV-2) התפשטה ברחבי העולם מאז הופעתה בדצמבר 2019, ופיתוח חיסונים יעילים נגד מחלת הקורונה 2019 (COVID-19) הואץ [1 ]. הצלחת המאמץ נראתה במהירות יחסית, וכמה חיסונים המשתמשים בחלבון ספייק (S) כאנטיגן חיסון הוכיחו בהצלחה בטיחות ויעילות במניעת COVID סימפטומטי-19. באופן ספציפי, חיסון מבוסס mRNA BNT162b2 (Comirnaty, Pfifizer-BioNTech) וחיסון וקטור מבוסס אדנוווירוס AZD1222 (Vaxzevria, AstraZeneca) אושרו בתחילה וניתנו באופן נרחב כמשטר דחיפה של שתי מנות. לשתי מנות של BNT162b2 הייתה יעילות של 95 אחוז (95 אחוז רווח בר סמך [CI], 90-98 אחוז) נגד COVID סימפטומטי-19 [2], ולשתי מנות AZD1222 היה 70 אחוז (95 אחוז CI, 55-81 אחוז ) יעילות [3]. באופן מסקרן, משטרי דחיפה הטרולוגיים של חיסונים מורשים ל-COVID-19 זכו לעניין משמעותי ולאחר מכן החלו במספר מדינות למרות נתונים לא מספיקים לגבי אימונוגניות ובטיחות. BNT162b2 שניתן כמנת דחיפה ביחידים שחוסנו עם AZD1222 גררו טיטרים חזקים של נוגדנים מסוג אימונוגלובולין G (IgG) חזקים (Ab), מנטרלים תגובות נוגדנים (nAb), ותאי T של אינטרפרון-c פלוס (IFN-c פלוס ) [4 ,5]. עם זאת, מחקרים מעטים העריכו את היעילות של חיסון הטרולוגי AZD1222/BNT162b2 בהשוואה לחיסון הומולוגי BNT162b2/BNT162b2 [6-8], ומחקרים אלו חסרו הערכה מקיפה של תגובות תאי T ספציפיות. לפיכך, האם חיסון הטרולוגי AZD1222/BNT162b2 גורם לתגובות nAb או תאי T חוצות עוצמה, עדיין לא ברור. ניתן לראות דוגמה נוספת להגברת פרימה הטרולוגית אצל אנשים שנדבקו ב-SARS-CoV-2 ולאחר מכן חוסנו נגד הנגיף. מספר מחקרים העלו כי רמות Ab ו-nAb קושרות ספציפיות מתגלות ברמות גבוהות אצל אנשים עם זיהום וחיסון קודם, אם כי לא היו ניתוחים השוואתיים [9,10]. לעובדי שירותי בריאות עם זיהום קודם ב-SARS-CoV-2 יש טיטרי Ab גבוהים יותר בתגובה למינון יחיד של חיסון mRNA מאשר לאלה שלא נדבקו בעבר [11]. יתרה מכך, אנשים עם זיהום קודם מציגים תגובות משופרות של תאי T ספציפיים ל-S ותגובות B-cell זיכרון בזיכרון לאחר המינון הראשוני ללא מנת הגברת [12]. במחקר הנוכחי, בדקנו באופן מקיף את האימונוגניות ההומורלית והתאית של משטרי דחיפה הומולוגיים והטרולוגיים בקבוצת תצפית פרוספקטיבית עם השוואות זו לצד זו של תגובות קושרות ספציפיות ל-S, nAb ו-Sspecifific CD4 פלוס תאי T. . הערכנו גם את התוצאות האימונולוגיות במשתתפים שנדבקו ב-SARS-CoV מסוג wild-2 וקיבלו חיסוני COVID-19 כדי לקבוע אם זיהום וחיסון קודמים מעוררים ביעילות תגובות חיסוניות נגד וריאנט ה-Delta.
יתרונות cistanche לגברים מחזקים את המערכת החיסונית
2. שיטות
2.1. ללמוד עיצוב
קבוצה פרוספקטיבית רב-מרכזית הוקמה במרץ 2021 כדי לחקור את התגובות החיסוניות לחיסון נגד COVID-19. המשתתפים בקבוצה זו גויסו מרצון בקרב עובדי שירותי בריאות ובתחילה תוכננו לקבל שתי מנות של BNT162b2 במרווח של 3-שבוע או AZD1222 במרווח של 12-שבוע. עם זאת, חלק מהיחידים שחוסנו עם AZD1222 קיבלו את מנת הדחף של BNT162b2 בין מאי ליוני 2021 ונכללו בקבוצת החיסון AZD1222/BNT162b2. בין המשתתפים בקבוצה, אלו שסבלו מזיהום קודם מסוג SARSCoV-2 וקיבלו BNT162b2 או AZD1222 נכללו כקבוצת ההדבקה/החיסון הקודמת. כל מקבלי החיסונים שנותחו במחקר זה היו תואמים לגיל בין הקבוצות. דגימות דם היקפי נאספו מכל המשתתפים בקבוצה בכל נקודת זמן (T): לפני ו-3 שבועות לאחר מנת החיסון הראשונה (T1 ו-T2, בהתאמה), 5 שבועות לאחר המנה הראשונה של BNT162b2, או 11 שבועות לאחר המנה הראשונה. מנת AZD1222 (T3), ו-14 שבועות לאחר מנת החיסון הראשונה (T4). ייצוג סכמטי של פרוטוקול המחקר מסופק באיור 1. לשם השוואה, דגימות הבראה התקבלו מחולים לא מחוסנים שנדבקו בווריאציה של SARSCoV-2 Delta שאושרה על ידי תגובת שרשרת של שעתוק הפוך בזמן אמת של פולימראז באמצעות Seegene Allplex { {38}}ערכת ניסוי nCoV (Seegene, קוריאה) ו-Illumina BTSeq SARS-CoV-2 ערכת רצף גנום שלם (Celemics Inc, קוריאה) ברצף MiSeq (150-bp מצב קצה זוגי; אילומינה, סן דייגו, קליפורניה, ארה"ב). רצף הבסיס שהושג באמצעות BTseq הושווה לרצף הייחוס של NCBI NC_045512.2 באמצעות תוכנת IGV 2.10 כדי לאשר את וריאנט ה-Delta. המחקר אושר על ידי מועצות הביקורת המוסדיות של כל מכון משתתף ונערך על פי עקרונות הצהרת הלסינקי. כל המשתתפים סיפקו הסכמה מדעת בכתב לפני ההרשמה.
2.2. משתתפי המחקר
קבוצה זו כללה 22 משתתפים שקיבלו חיסון הומולוגי BNT162b2/BNT162b2 (גיל ממוצע, 38.0 שנים; 31.8 אחוז גברים), 20 משתתפים שקיבלו חיסון הומולוגי AZD1222/AZD1222 (גיל ממוצע, 39.7 אחוזים; גברים) , ו-9 משתתפים שקיבלו חיסון הטרולוגי AZD1222/BNT162b2 (גיל ממוצע, 38.2 שנים; 33.3 אחוז גברים). מתוך 11 המשתתפים עם זיהום פראי מסוג SARS-CoV-2 קודם (גיל ממוצע, 38.5 שנים; 27.3 אחוז גברים), 2 ו-9 חוסנו עם BNT162b2/BNT162b2 ו-AZD1222/AZD1222, בהתאמה. הנתונים הדמוגרפיים של הקבוצות המחוסנות השונות מסופקות בטבלה משלימה 2. כל המשתתפים עם זיהום פראי מסוג SARS-CoV-2 קודם לכן חוו COVID אסימפטומטי או קל-19, ול-3 מהם הייתה דלקת ריאות. הזמן החציוני מאישור COVID-19 ועד לחיסון הראשון היה 121.5 (טווח בין-רבעוני [IQR], 102.3-252.5) ימים. הנתונים הדמוגרפיים של המשתתפים עם זיהום וחיסון מסוג SARS-CoV-2 קודמים מסופקים בטבלה משלימה 1. דגימות הבראה התקבלו מ-17 חולים (גיל ממוצע, 53 שנים; 52.9 אחוז גברים) שנדבקו ב-SARS -CoV-2 וריאנט דלתא ומאושפז בשל נגיף הקורונה בינוני עד קריטי-19 (בינוני, 17.6 אחוז; קשה, 35.3 אחוז; חולה קריטי, 47.1 אחוז). הזמן החציוני מהופעת התסמינים הקשורים ל-COVID ועד לדגימה היה 24 (IQR, 22-32) ימים. הנתונים הדמוגרפיים של משתתפי ההבראה של SARS-CoV-2 Delta מסופקים בטבלה משלימה 2 ובטבלה 3.
2.3. נוגדנים קושרים
ABs מחייבים ספציפיים ל-SARS-CoV-2 נותחו באמצעות בדיקת אימונו מסחרית. מבחן חלבון אנטי-S של Elecsys (Roche Diagnostics, גרמניה) הוא מבחן חיסוני אלקטרוכימי-לומיננסצנטי המשמש לאיתור נוגדנים ספציפיים ל-SARS-CoV-2 במנתח Cobas e411 (Roche Diagnostics, גרמניה), עם טווח מדידה של { {8}}.4 U/mL עד 250 U/mL (עד 2500 U/mL עם דילול 1:10 מובנה, ועד 12,500 U/mL עם דילול 1:50 מובנה). תחום הקושר לקולטן הרקומביננטי של חלבון S שימש עם עקרון כריך אנטיגן כפול. האנטיגנים במגיב לוכדים בעיקר anti-SARSCoV-2 IgG. בדיקת חלבון אנטי-נוקלאוקפסיד של Elecsys (Roche Diagnostics, גרמניה) שימשה לזיהוי זיהומים קודמים של SARS-CoV-2, עם אינדקס חתך של 1.0.
תוסף תוסף cistanche-הגברת חסינות
2.4. בדיקת נטרול הפחתת פלאק
מבחני נטרול הפחתת פלאק עבור וירוסי SARS-CoV- 2 מסוג פרא (BetaCoV/Korea/KCDC03/2020) וזן ה-Delta YS117 (מספר גישה ל-GenBank MZ798798 ומספר גישה ל-GISAID EPI{ {8}}ISL_3411836) בוצעו באמצעות דגימות פלזמה. הנגיף גודל על תאי Vero E6 במעבדת ביו-בטיחות ברמה 3 במרכז המחקר הביו-רפואי של Avison בסיאול, קוריאה. דגימות פלזמה מושבתות (135 ליטר) של דגימות פלזמה לא מופעלות דוללו בדילול סדרתי 2-פיפול (1:40 עד 1:1280) והוספו לנפח שווה של פי 100 מהמינון הזיהומי של תרבית רקמה של 50 אחוז (TCID50) של נגיף. הבידודים המכילים פי 100 TCID50 הודגרו בפלטות של 96-בארות למשך 60 דקות ב-37 C. תערובות וירוס-פלזמה הודגרו במשך 60 דקות ב-37 C באינקובטור CO2. לאחר מכן נוספו תערובות הווירוס-פלזמה לתאי Vero E6 שנזרעו בצלחת 24-באר עם 1x105 תאים/באר והודגרו למשך שעה אחת ב-37 C. מדיית כיסוי המורכבת מ-2% סרום בקר עוברי (FBS) ב-DMEM ו-1 אחוז אגר הוסיפו לתאי E6 והודגרו במשך 3 ימים ב-37 C בחממת CO2. לאחר היווצרות רובד, נעשה שימוש בתמיסת פורמלדהיד של 10 אחוז ו-0.33 אחוז אדום נייטרלי במי מלח מפוצץ פוספט (PBS) לקיבוע וצביעה של שכבת תרבית התאים. דילול מנטרל של כל דגימה נקבע על ידי זיהוי הבאר עם דילול הפלזמה הגבוה ביותר ללא אפקט ציטופטי שניתן לראות. מינוני הנטרול של 50 אחוז (ND50) באו לידי ביטוי כדילול הדדי של פלזמה, מה שהביא להפחתה של 50 אחוז במספר הפלאק בהשוואה לבקרת הנגיף החיובית. שיטת Spearman-Kärber שימשה לחישוב טיטר ND50. בהשוואה לסרה הסטנדרטית הבינלאומית של WHO (NIBSC 20–136; טיטר nAb: 1000 IU/mL), טיטר nAb הומרו ליחידות בינלאומיות למיליליטר (IU/mL).
איור 1. ייצוג סכמטי של קבוצות מקבלי החיסון. ערכת מחקר לאיתור נוגדנים קושרים ספציפיים ל-SARS-CoV-2, נוגדנים מנטרלים ותגובות תאי T בדגימות דם היקפי מאנשים שחוסנו ל-COVID-19. המחקר כולל את BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n=9), ו-SARS-CoV מסוג פראי קודם{{20 }} קבוצות של זיהום/חיסון (n=11). בין הזיהום/חיסון הקודמים מסוג SARS-CoV-2, 2 ו-9 חוסנו עם BNT162b2/BNT162b2 ו-AZD1222/AZD1222, בהתאמה. היסטוריה של זיהום ב-SARS-CoV-2 אושרה על ידי בדיקת נוגדנים נוקלאוקפסיד נגד SARS-CoV-2 חיובית. T, נקודת זמן; שבועות, שבועות.
2.5. מבחני תאי T
תאים מונו-גרעיניים בדם היקפיים (PBMCs) בודדו על ידי צנטריפוגה של שיפוע צפיפות באמצעות צינורות Leucosep (Greiner Bio-One) המכילים מדיום הפרדת לימפוציטים. לאחר צנטריפוגה ב-800 גרם למשך 15 דקות עם הבלימה, חלק התאים המועשר המורכב מ-PBMCs נקצר ונשטף עם 20 מ"ל של PBS. לאחר צנטריפוגה ב-300 גרם למשך 10 דקות, גלולת התא הושעתה מחדש ב-10 מ"ל של PBS לצורך ספירה. לאחר צנטריפוגה ב-300 גרם למשך 10 דקות, תאים נשמרו בהקפאה ב-FBS עם 10 אחוז דימתיל sulfoxide ב-180 C עד לשימוש. עבור צביעת ציטוקינים תוך תאית (ICS) של IFN-c, אינטרלוקין-2 (IL-2) ו-tumor necrosis factor (TNF), השתמשנו במאגרי פפטידים של 15-mer פפטידים החופפים ב-11 חומצות אמינו המכסות את החלקים האימונודומיננטיים של חלבון SARS-CoV-2 Wuhan S (aa 304–338, 421–475, 492–519, 683–707, 741–770, 785–802 ו-885–1273; ביוטק). כדי להשוות תגובות של תאי T כנגד זני ווהאן ודלתא, השתמשנו בשתי קבוצות שונות של בריכות פפטיד S הכוללות אזורים לא משומרים של רצפי S בין זני ווהאן ודלתא (שושלת B.1.617.2) (Miltenyi Biotec). לאחר הפשרת PBMCs והנחתם למשך הלילה, PBMCs 1 106 עוררו באמצעות בריכות פפטידים בריכוז סופי של 1 מ"ג/מ"ל ואנטי-אנושי CD28/CD49d (1 מ"ג/מ"ל; BD Biosciences) למשך שעה אחת ב-{ {45}}צלחת היטב במדיה RPMI-1640 המכילה 1 אחוז פניצילין-סטרפטומיצין, 2 מ"מ L-גלוטמין ו-10 אחוז FBS. תרבית PBMC הודגרה למשך 5 שעות נוספות לאחר הוספת ברפלדין A ומוננסין (BD Biosciences) ב-37 C ב-5 אחוז CO2. לאחר הגירוי, התאים נשטפו עם PBS והוצבעו עם Live/Dead-Aqua (Invitrogen) למשך 20 דקות בטמפרטורת החדר, ולאחר מכן קוקטייל של Abs משטח למשך 20 דקות בטמפרטורת החדר, כולל אנטי-CD14- BV510, anti-CD19-BV510, anti-CD4- BV650, anti-CD3-BV786, ואנטי CD8-APC-Cy7 (BD Bioscience). תאים נקבעו וחוללו באמצעות Foxp3/Transcription Factor Staining Buffer Set (eBioscience) ולאחר מכן נצבעו בקוקטייל של Abs תוך תאי, כולל אנטי-TNF-FITC, אנטי-IL-2-PE (eBioscience), ואנטי- IFN-c-APC (BD Biosciences) למשך 20 דקות בטמפרטורת החדר. עם השלמת הצביעה, התאים נותחו במכשיר LSR II עם FACSDiva (BD Biosciences), והנתונים נותחו בתוכנת FlowJo (FlowJo LLC).
מערכת חיסון מגבירה צמח cistanche
2.6. ניתוח סטטיסטי
נתונים שצוירו בקנה מידה ליניארי הובאו כממוצע ± סטיית תקן. נתונים שצולמו בסולמות לוגריתמיים הובאו כממוצע גיאומטרי ± סטיית תקן גיאומטרית. בדיקות Mann–Whitney U או Wilcoxon יושמו עבור השוואות לא מזווגות או זוגיות, בהתאמה. ניתוחים סטטיסטיים היו בעלי זנב {{0}}, כאשר P < 0.05 נחשב מובהק. כל הניתוחים בוצעו ב-R studio או GraphPad Prism v9.0.
3. תוצאות
3.1. קינטיקה של תגובות חיסוניות המתעוררות על ידי משטרי חיסון שונים
ראשית, בדקנו טיטרים נגד S IgG בעקבות חיסון במשטרים שונים. כצפוי, המנה הראשונה העלתה משמעותית את טיטר האנטי-S IgG (T2), והמנה השנייה העלתה משמעותית את טיטר האנטי-S IgG בחיסון ההומולוגי BNT162b2/BNT162b2 (T3) ו-AZD1222/AZD1222 (T4) והטרולוגי AZD1222/ קבוצות חיסון BNT162b2 (T4) (איור 2A). בקבוצת ההדבקה/החיסון הקודמת, המנה הראשונה העלתה בצורה מקסימלית את טיטר האנטי-S IgG (T3), אך המנה השנייה לא העלתה עוד יותר את טיטר האנטי-S IgG (T4). כמו כן, בחנו תגובות CD4 בתוספת תאי T ספציפיות ל-S בעקבות גירוי ישיר ex vivo עם בריכות פפטידים המכסות את רצף החלבון SARSCoV-2 Wuhan פראי S. בהתבסס על ICS, המנה הראשונה העלתה משמעותית את תדירות התאים המייצרים IFN-c בקרב תאי CD4 פלוס T, והמנה השנייה העלתה משמעותית עוד יותר את התדירות בקבוצות החיסון BNT162b2/BNT162b2 (T3) ו-AZD1222/BNT162b2 (T4) (איור 2B). בקבוצות AZD1222/AZD1222 וזיהומים/חיסונים קודמים, המנה הראשונה העלתה משמעותית את התדירות של תאי IFN-c פלוס בין תאי CD4 פלוס T, אך המנה השנייה לא העלתה עוד יותר את התדירות.
3.2. השוואה בין טיטרים של Ab בין משטרים שונים
לאחר מכן, השווינו את השיא של טיטרים של Ab מחייב בין משטרי החיסון השונים. כטיטרי שיא, בחרנו טיטרים נגד S IgG לאחר המנה השנייה בקבוצות החיסון BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 ו-AZD1222/BNT162b2 ולאחר המנה הראשונה בקבוצת החיסון/ההדבקה הקודמת. שיא טיטר של anti-S IgG היו גבוהים משמעותית בקבוצת החיסון AZD1222/BNT162b2 מאשר בקבוצות החיסון BNT162b2/BNT162b2 או AZD1222/AZD1222 (איור 3A). באופן דומה, שיא הטיטרים של anti-S IgG היו גבוהים משמעותית בקבוצת החיסון/הזיהום/החיסון הקודם מאשר בקבוצות החיסון BNT162b2/BNT162b2 או AZD1222/AZD1222. לא היה הבדל בטיטרים של anti-S IgG בין קבוצות החיסון AZD1222/BNT162b2 ו- זיהום קודם. כמו כן, הערכנו טיטרי nAb בנקודות זמן שיא: לאחר המנה השנייה בקבוצות החיסון BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 ו-AZD1222/BNT162b2 ואחרי המנה הראשונה בקבוצת החיסון/ההדבקה הקודמת. באופן מדהים, טיטרי nAb היו גבוהים משמעותית בקבוצת החיסון AZD1222/BNT162b2 מאשר בקבוצות החיסון BNT162b2/BNT162b2 או AZD1222/AZD1222 (איור 3B). בנוסף, טיטרי nAb היו גבוהים משמעותית בקבוצת החיסון/הזיהום/החיסון הקודם מאשר בקבוצות החיסון BNT162b2/BNT162b2 או AZD1222/AZD1222. לא היה הבדל בטיטרי nAb בין קבוצות AZD1222/BNT162b2 וקבוצות זיהום/חיסונים קודמים. רמת התגובה ההומורלית שנוצרה על ידי משטרי חיסונים מגוונים סווגה למגיבים חזקים, בינוניים וללא/חלשים על סמך דירוג האחוזון. שיעור המגיבים החזקים היה הגבוה ביותר בקבוצת הזיהום/החיסון הקודם, ואחריו קבוצת החיסון AZD1222/BNT162b2 בנוגע לניתוח של IgG אנטי-S (איור 3C) ו-nAb (איור 3D). ביחד, תוצאות אלו מצביעות על כך ש-priming ו-boost הטרולוגיים, כולל חיסון AZD1222/BNT162b2 וגם זיהום/חיסון קודם, יעילים יותר ביצירת תגובות הומורליות מאשר תחול והגברה הומולוגיים.
3.3. השוואה של תגובות CD4 ספציפיות ל-S בתוספת תאי T בין משטרים שונים
כמו כן, השווינו תגובות ספציפיות ל-CD4 פלוס תאי T בין משטרי החיסון השונים בנקודות זמן שיא: לאחר המנה השנייה בקבוצות החיסון BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 ו-AZD1222/BNT162b2 ואחרי המנה הראשונה בקבוצות החיסון הקודמות. קבוצת זיהום/חיסונים. שלא כמו טיטר anti-S IgG ו-nAb, התדירות של תאי IFN-c פלוס בקרב תאי CD4 פלוס T הייתה הגבוהה ביותר בקבוצת החיסון BNT162b2/BNT162b2 (איור 4A). שיעור המגיבים החזקים היה גם הגבוה ביותר בקבוצת החיסון BNT162b2/BNT162b2, ואחריו קבוצת החיסון/הזיהום הקודם (איור 4B). תוצאות אלו מראות שחיסון בחיזוק ההומולוגי השני של BNT162b2 מעורר ביעילות רבה יותר תגובות תאי T בזיכרון מאשר חיסון החיזוק ההטרולוגי השני או חיסון המנה הראשונה בעקבות זיהום טבעי ב-SARS-CoV-2. להיפך, משטרי דחיפה הטרולוגיים נוטים יותר לפתח רמות גבוהות יותר של תגובות חיסון הומורליות. כמו כן, ניתחנו את התדירות היחסית של תאי CD4 בתוספת T polyfunctional המייצרים בו-זמנית ציטוקינים מרובים (כלומר, IFN-c, IL-2 ו/או TNF). קבוצת החיסונים BNT162b2/BNT162b2 הציגה תדירות גבוהה משמעותית של תאים רב-פונקציונליים המייצרים 2 ציטוקינים בין תאי CD4 פלוס T ספציפיים ל-S מאשר קבוצות החיסון AZD1222/AZD1222 או AZD1222/BNT162b2 (איור 4C). לא היה הבדל בתדירות בין חיסון BNT162b2/BNT162b2 לבין קבוצות זיהום/חיסונים קודמים. התדירות של תאים רב-פונקציונליים הייתה גבוהה משמעותית בקבוצת החיסון AZD1222/BNT162b2 מאשר בקבוצת החיסון AZD1222/AZD1222. גרפי עוגה המייצגים תאי CD4 פלוס T חיוביים בודדים, כפולים ומשולשים במונחים של ייצור ציטוקינים המגיבים למאגרי פפטידים חופפים S הצביעו גם על שכיחות גבוהה יחסית של תאים חיוביים כפולים או משולשים בחיסון BNT162b2/BNT162b2 וקודם לכן. זיהום/- קבוצות חיסון (איור 4D).
3.4. תגובות חיסוניות נגד וריאנט הדלתא בין משטרי שונות
לבסוף, ניתחנו תגובות חיסוניות נגד וריאנט הדלתא. בניתוח זה כללנו אנשים מבריאים שהחלימו מזיהום SARS-CoV-2 Delta לצורך השוואה. טיטרי nAb הספציפיים ל-Delta היו גבוהים משמעותית בקבוצת החיסון/הזיהום/החיסון הקודם מאשר בקבוצות החיסון BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 או AZD1222/BNT162b2, והיו אפילו גבוהים יותר מאלה ביחידי ההחלמה של Delta (איור 5A). . כמו כן, בחנו תגובות CD4 פלוס תאי T כנגד חלבון S של וריאנט ה-Delta. בניתוח זה, ביצענו ICS של IFN-c בעקבות גירוי ישיר ex vivo באמצעות שתי קבוצות שונות של בריכות S פפטיד הכוללות אזורים לא משומרים של רצפי S בין זני ווהאן ו-Delta וחישבנו את היחס בין התדירות של Delta Sspecificific IFN-c plus תאים לתדירות של תאי IFN-c פלוס ספציפיים ל-Wuhan S. כצפוי, היחס היה הגבוה ביותר בפרטי הבראה של דלתא. באופן מסקרן, היחס היה גבוה יותר בקבוצת הזיהום/החיסון הקודם מאשר בקבוצת החיסונים BNT162b2/BNT162b2 (איור 5B), אם כי תגובות CD4 ו-T ספציפיות ל-Wuhan היו הגבוהות ביותר בקבוצת החיסון BNT162b2/BNT162b2 (איור. 4א). יחד, תוצאות אלו מצביעות על כך שתגובות nAb ו-CD4 פלוס תאי T שמזהות את וריאנט הדלתא נוצרות ביעילות רבה יותר על ידי זיהום/חיסון קודם מאשר משטרי החיסון ההומולוגי או ההטרולוגי.
איור 2. תגובות נוגדנים ותאי T המתעוררות על ידי משטרי דחיפה מגוונים. תגובות חיסוניות אורכיות בהתאם ללוח הזמנים של הדגימה מלפני החיסון ועד 14 שבועות לאחר החיסון הראשון. (א) נוגדנים קושרים ספציפיים ל-SARS-CoV-2 נמדדו ב-BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n {{ 20}}), וקבוצות זיהומים/חיסון קודמים (n=6). (ב) תגובות CD4 בתוספת תאי T ספציפיות ל-SARS-CoV-2 נמדדו ב-BNT162b2/BNT162b2 (n=19), AZD1222/AZD1222 (n=18), AZD1222/BNT162b2 (n=9), וקבוצות זיהום/חיסון קודם (n=7). הנתונים מוצגים כממוצע גיאומטרי ± SD גיאומטרי (A) או ממוצע ± SD (B). ניתוחים סטטיסטיים בין נקודות זמן בתוך כל קבוצה בוצעו באמצעות מבחן דרגה חתומה של Wilcoxon. ns, לא משמעותי; *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0.001, ****P < 0.0001.
איור 3. תגובות חיסון הומורליות בנקודות זמן שיא. (א) נוגדנים קושרים ספציפיים ל-SARS-CoV-2 הושוו בין BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n {{ 15}}), וקבוצות זיהום/חיסון קודם (n=6) בנקודות זמן שיא. (ב) נוגדנים מנטרלים הושוו בין BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n=9) וזיהום/חיסון קודם ( n=11) קבוצות בנקודות זמן שיא. נקודות זמן שיא נבחרו באופן הבא: לאחר המנה השנייה בקבוצות החיסון BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 ו-AZD1222/BNT162b2 ולאחר המנה הראשונה בקבוצת החיסון/ההדבקה הקודמת. הנתונים מוצגים כממוצע גיאומטרי ± SD גיאומטרי ומנתחים עבור מובהקות באמצעות מבחן Mann-Whitney. (C ו-D) אחוזי המשתתפים עם רמות שונות של תגובות חיסון הומורליות. כימות סוג המגיב (חזק, בינוני וחסר/חלש) מתבטא כשבריר ממספר מקבלי החיסון בכל קבוצה. סוגי המגיבים נקבעו לפי ציון האחוזון שחושב מכל המשתתפים המחוסנים. ns, לא משמעותי; *P < {{40}}.05, **P < 0.01, ***P < 0.001, ****P < 0.0001.
4. דיון
חיסוני ה-mRNA והחיסונים הווקטוריים של אדנו-וירוס המורשים כיום הראו יעילות יוצאת דופן במניעת COVID-19. עם זאת, חיסון ראשי-בוסט הטרולוגי נחשב לשיפור האימונוגניות ולמתן מחסור באספקה לסירוגין [13]. בנוסף, בעיות בטיחות הועלו עם החיסונים הווקטוריים של אדנו-וירוס לאחר זיהוי של תופעות לוואי חמורות, כולל פקקת ורידים מסכנת חיים הקשורה לחיסון AZD1222, במיוחד בנשים צעירות יותר [14,15]. אלה הובילו לחיסון הטרולוגי למאיץ mRNA עבור אלה שכבר קיבלו את המנה הראשונה של AZD1222. למרות שלא היו נתונים על יעילות, רשויות בריאות לאומיות רבות אימצו משטרים הטרוגניים של חיסונים מורשים ל-COVID-19. לפיכך, מחקר השוואתי של תגובות חיסוניות הומוראליות ותאיות המתעוררות על ידי משטרי חיסונים מגוונים של פריים-בוסט הוא אינפורמטיבי ומסייע בהבנה טובה יותר של אתגרים בעולם האמיתי. במחקר הנוכחי, הדגמנו אינדוקציה דיפרנציאלית של חסינות הומורלית ותאית על ידי חיסוני דחיפה הטרולוגיים (טבלה משלימה 4). בניגוד גמור הן לרמות Ab מחייב ספציפי והן לטיטרי הנטרול, שהיו הגבוהים ביותר בקבוצת החיסון AZD1222/BNT162b2, תגובות CD4 ספציפיות S בתוספת תאי T היו הגבוהות ביותר בקבוצת החיסון BNT162b2/BNT162b2, לא בחיסון AZD1222/BNT162b2 קְבוּצָה. הרמות הנמוכות יחסית של תגובות CD4 ו-T ספציפיות ל-S במשתתפים שחוסנו AZD1222/BNT162b2-היו בלתי צפויות ועשויות עדיין להעמיד אנשים אלו בסיכון לזיהום חמור ב-SARS-CoV-2. הממצאים שלנו שונים מאלה שדווחו על ידי שמידט ועמיתיו, שהציעו כי לאחר הגברת BNT162b2 הטרוגנית, טיטרי nAb ותגובות תאי T עלו באופן משמעותי באנשים בעלי קדם AZD1222- [7]. עם זאת, התדירות המוחלטת של תאי CD69 פלוס IFN-c פלוס בקרב תאי CD4 פלוס T גדלה רק באופן שולי, ומחקר זה מנע ניתוחים מעמיקים של הפוליפונקציונליות של תגובות תאי T ספציפיות. עבור אנשים שנדבקו בעבר, מנת החיסון הראשונה עשויה לשמש כחיסון מאיץ ולעורר תגובות הומורליות ותאיות בעוצמה [16,17]. מכיוון שמניחים כי טיטר nAb הוא מתאם מפתח להגנה מפני זיהום SARS-CoV-2 [18], התוצאות שלנו מתאימות היטב לממצא האחרון של חיזוק מועיל לחסינות הנרכשת בזיהום, עם יעילות חיסון מותאמת של > 90 אחוז לאחר המנה הראשונה במקבלי חיסון שסבלו מזיהום קודם ב-SARS-CoV-2 [19]. יתר על כן, למרות הבריחה הניכרת של תגובות nAb כנגד וריאנט הדלתא בקרב משתתפי המחקר, צפינו ברמות הגבוהות ביותר של nAb המזהה את וריאנט הדלתא בקבוצת המשתתפים עם זיהום SARS-CoV-2 קודם חיסון. עם זאת, בהתאם לקבוצת החיסון ההטרולוגית AZD1222/BNT162b2, לאלו עם זיהום קודם שחוסנו הייתה תגובה חלשה יותר של CD4 בתוספת תאי T ספציפית ל-S מאשר אנשים עם חיסון הומולוגי BNT162b2/BNT162b2 ללא זיהום קודם. יש לציין, התוצאות שלנו מראות ששתי מנות של BNT162b2 מובילות להשראת אמינה וחזקה של תגובות CD4 ספציפיות ל-S בתוספת תאי T, גבוהות משמעותית משטרי חיסונים אחרים של דחיפה ראשונית. ממצאים אלה עולים בקנה אחד עם דוח שנערך לאחרונה על ארבעה חיסונים שונים ל-COVID-19 [20], בעוד שהניתוח שלנו כלל משטרי דחיפה הטרולוגיים וחסינות היברידית מפני זיהום וחיסונים קודמים. בהתאם לכך, פלטפורמות חיסון mRNA עשויות להיבחר בשל יכולתן לגרום לתגובת זיכרון חזקה של CD4 פלוס תאי T. ככל שהשכיחות של זיהום פורץ דרך לאחר חיסון עולה ברחבי העולם, יש עניין גובר בהגנה על חסינות מפני נגיף הקורונה הקשה-19. מכיוון שגרסאות חדשות של SARS-CoV-2 ממשיכות להופיע ולהתחמק מהגנה חיסונית הומורלית, חסינות תאית, המכוונת לספקטרום רחב של אפיטופים של SARS-CoV-2 המוכרים על ידי תאי T, עשויה לספק חסינות הגנה יציבה [21 ], אם כי הקובעים של תגובות סלולריות בהגנה מתווכת חיסון עדיין אינם מוגדרים במדויק. לכן, אם האימונוגניות ההומורלית המוגברת של חיסון הטרולוגי AZD1222/BNT162b2 מתורגמת באופן עקבי להגנה משופרת, עדיין לא ברור, וזה דורש מחקר נוסף. בנוסף, יש לחקור האם אנשים שפיתחו תגובות Tcell גרועות לאחר חיסון, כגון אלו המופנים עם AZD1222, עשויים להפיק תועלת מתכשירי חיסון תאי T [22]. גם החסינות הנגרמת על ידי זיהום וגם חסינות הנגרמת על ידי חיסון דועכת באופן טבעי עם הזמן; עם זאת, נראה כי ניתנת הגנה רבה יותר לאנשים שנדבקו בעבר ב-SARS-CoV-2 [23]. באנשים מחוסנים, זיהום פורץ דרך בווריאציה של Omicron גורם לתגובות nAb קטנות יותר מאשר זיהום בוריאנט Delta [24], ומעט יחסית ידוע על ההשלכות הפוטנציאליות של חסינות היברידית הניתנת מזיהום וחיסון עם זנים שונים. אף על פי כן, נוכחותם של תאי T ספציפיים S polyfunctional במשתתפים שנדבקו בעבר וחוסנו במחקר שלנו עולה בקנה אחד עם ירידה איטית יותר בהגנה מפני COVID-19 חמור באוכלוסייה זו ועשויה לתרום לשינוי חומרת המחלה בעקבות הדבקה חוזרת ב-SARS -CoV{100}} גרסאות [25,26]. למחקר הנוכחי יש מספר מגבלות. ראשית, גדלי המדגם הקטנים בקבוצה הופכים ניתוח סטטיסטי חזק למאתגר; לכן, הממצאים שלנו יצטרכו לעבור אימות נוסף בקבוצות גדולות יותר. שנית, לא הצלחנו לבדוק דגימות בנקודות זמן מאוחרות יותר כדי לקבוע את העמידות והדעיכה של תגובות חיסון הומורליות ותאיות. שלישית, התוצאות שלנו עשויות לזלזל בהשפעה של אפיטופים תת-דומיננטיים של תאי T מחוץ לאפיטופים הדומיננטיים. רביעית, חקרנו רק לימפוציטים במחזור, וייתכן שיידרשו מחקרים עתידיים של ניקוז בלוטות לימפה לאחר חיסון כדי להבין את המנגנונים העומדים בבסיס התגובות הדיפרנציאליות שנצפו כאן. לסיכום, המחקר הנוכחי עם השוואות ישירות ותואמות גיל שופך אור על האימונוגניות ההומורלית והתאית המגוונת של תחול והגברה הטרולוגיים בהקשר של חשיפת אנטיגן SARS-CoV{106}. הממצאים שלנו מדגישים כיצד חוויה אימונולוגית אינדיבידואלית מעצבת את התגובה החיסונית העוקבת שנוצרה על ידי חיסון{107}} נגד COVID. נתוני יעילות נוספים בעולם האמיתי וחקירות מעבדה יסייעו עוד יותר לאסטרטגיית החיסון המתאימה ביותר להגנה מפני גרסאות של SARS-CoV{110}}, עם השלכות על פיתוח פלטפורמות חיסונים מהדור הבא.
איור 4. תגובות חיסוניות סלולריות בנקודות זמן שיא. (א) התדרים של תאי IFN-c פלוס ספציפיים לספייק בין תאי CD4 פלוס T הושוו בין BNT162b2/BNT162b2 (n=19), AZD1222/AZD1222 (n=18), AZD1222/BNT162b2 ( n=9), וקבוצות זיהום/חיסון קודם (n=7) בנקודות זמן שיא. נקודות זמן שיא נבחרו באופן הבא: לאחר המנה השנייה בקבוצות החיסון BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 ו-AZD1222/BNT162b2 ולאחר המנה הראשונה בקבוצת החיסון/ההדבקה הקודמת. (ב) אחוזי המשתתפים עם רמות שונות של תגובות חיסון תאי. כימות סוג המגיב (חזק, בינוני וחסר/חלש) מתבטא כשבריר ממספר מקבלי החיסון בכל קבוצה. סוגי המגיבים נקבעו לפי ציון האחוזון שחושב מכל המשתתפים המחוסנים. (ג) התדרים של תאי CD4 פלוס T ספציפיים לספייק רב-פונקציונליים המייצרים כל שילוב של IFN-c, IL-2 או TNF בכל קבוצה של משתתפים מחוסנים. (ד) החלק של תאי CD4 פלוס T ספציפיים לספייק חיובי עבור מספר נתון של ציטוקינים. הנתונים מוצגים כממוצע ± SD. המובהקות נותחה באמצעות מבחן מאן-וויטני (A ו-C). ns, לא משמעותי; *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0.001, ****P < 0.0001.
יתר על כן, מרכיב הרפואה הסינית המסורתיתעשב cistancheיכול גם לשפר את החסינות, המנגנון של Cistanche deserticola בשיפור החסינות
יתרונות תוסף cistanche-איך לחזק את המערכת החיסונית
לחץ כאן לצפייה במוצרי Cistanche Enhance Immunity
【בקש עוד】 דוא"ל:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Cistanche tubulosaפוליסכרידים יכולים לקדם שגשוג של לימפוציטים מסוג T ו-B, אך השפעת ההתפשטות של לימפוציטים B חזקה משמעותית מזו של לימפוציטים מסוג T. פוליסכרידים של Cistanche deserticola מקדמים את שחרור הציטוקין IL22 מלימפוציטים, הקשור לקידום שגשוג לימפוציטים בטחול. Cistanche deserticola יכול להפעיל מקרופאגים ולווסת את מערכת החיסון. לפוליסכרידים Cistanche deserticola, echinaside ופילוסיד יש השפעות משמעותיות על היווצרות ופעילות של לימפוציטים אנושיים. זה יכול להגביר את תגובת ההתפשטות של לימפוציטים, ובכך לשפר את התפקוד החיסוני של הגוף.
תמצית cistanche
המרכיבים הפונקציונליים שלCistanche tubulosaלגליקוזידים יש השפעה משמעותית על התאוששות התא לאחר נזקי קרינה 60Coy, ויכולים גם לשפר את התפקוד החיסוני מפני נזקי קרינה.
תמצית Cistanche tubulosa יכולה לא רק לפצות על חוסר חיסוני מולד אלא גם לשפר חסינות נרכשת.
איור 5. תגובות חיסוניות צולבות נגד הדלתא הנגרמות על ידי משטרי דחיפה מגוונים. (א) דגימות פלזמה נותחו על ידי מבחני נטרול הפחתת פלאק עבור וריאנט ה-SARS-CoV-2 Delta ב-BNT162b2/BNT162b2 (n {{10}}), AZD1222/AZD1222 (n {{ 13}}), AZD1222/BNT162b2 (n=9), זיהום/חיסון קודם (n=11), וקבוצות הבראה דלתא (n {{20}}). נוגדנים מנטרלי דלתא הושוו בין הקבוצות בנקודות הזמן הבאות: לאחר המנה השנייה בקבוצות החיסון BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 ו-AZD1222/BNT162b2 ולאחר המנה הראשונה בקבוצת החיסון/הזיהום הקודם. (ב) PBMCs נותחו על ידי צביעה תוך תאית עבור IFN-c בעקבות גירוי ישיר ex vivo באמצעות שתי קבוצות שונות של בריכות S פפטיד הכוללות אזורים לא משומרים של רצפי ספייק בין זני ווהאן ודלתא ב-BNT162b2/BNT162b2 (n {{37} }), AZD1222/AZD1222 (n {{40}}), AZD1222/BNT162b2 (n=9), זיהום/חיסון קודם (n=7), ודלתא-הבראה ( n=17) קבוצות. היחס בין התדירות של תאי CD4 פלוס T המייצרים IFN-c מול ספייק הדלתא לבין התדירות של תאי CD4 פלוס T המייצרים IFN-c כנגד ספייק Wuhan חושב בכל קבוצה. הנתונים מוצגים כממוצע גיאומטרי ± SD גיאומטרי (A) או ממוצע ± SD (B) ומנתחים עבור מובהקות באמצעות מבחן Mann-Whitney. ns, לא משמעותי; *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0.001, ****P < 0.0001.
הפניות
[1] Bok K, Sitar S, Graham BS, et al. פיתוח חיסון מואץ לקורונה-19: אבני דרך, לקחים וסיכויים. חסינות 2021;54:1636–51. https://doi. org/10.1016/j.immuni.2021.07.017.
[2] Polack FP, Thomas SJ, Kitchin N, et al. בטיחות ויעילות של חיסון BNT162b2 mRNA Covid-19. N Engl J Med 2020;383:2603–15. https://doi.org/ 10.1056/NEJMoa2034577.
[3] Falsey AR, Sobieszczyk ME, Hirsch I, et al. שלב 3 בטיחות ויעילות של חיסון AZD1222 (ChAdOx1 nCoV-19) Covid-19. N Engl J Med 2021;385:2348–60. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2105290.
[4] Borobia AM, Carcas AJ, Pérez-Olmeda M, et al. אימונוגניות ותגובתיות של מאיץ BNT162b2 במשתתפים ב-ChAdOx1-S-primed (CombiVacS): ניסוי שלב 2 רב-מרכזי, פתוח, אקראי, מבוקר. Lancet 2021;398:121–30. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(21) 01420-3.
[5] Barros-Martins J, Hammerschmidt SI, Cossmann A, et al. תגובות חיסון נגד גרסאות SARS-CoV-2 לאחר חיסון הטרולוגי והומולוגי ChAdOx1 nCoV-19/BNT162b2. Nat Med 2021;27:1525–9. https://doi.org/ 10.1038/s41591-021-01449-9.
[6] Hillus D, Schwarz T, Tober-Lau P, et al. בטיחות, ריאקטוגניות ואימונוגניות של חיסון ראשי-בוסט הומולוגי והטרולוגי עם ChAdOx1 nCoV-19 ו-BNT162b2: מחקר עוקבה פרוספקטיבי. The Lancet Respir Med 2021;9:1255–65. https://doi.org/10.1016/S2213-2600(21)00357- X.
[7] Schmidt T, Klemis V, Schub D, et al. אימונוגניות וריאקטוגניות של חיסון ChAdOx1 nCoV-19/mRNA הטרולוגי. Nat Med 2021;27:1530–5. https://doi.org/10.1038/s41591-021-01464-w.
[8] Liu X, Shaw RH, Stuart ASV, et al. בטיחות ואימונוגניות של לוחות זמנים הטרולוגיים לעומת דחיפה הומולוגית עם חיסון וקטור אדנו-ויראלי ו-mRNA COVID-19 (Com-COV): ניסוי חד-סמיות, אקראי, ללא נחיתות. Lancet 2021;398:856–69. https://doi.org/10.1016/S0140- 6736(21)01694-9.
[9] Krammer F, Srivastava K, Alshammary H, et al. תגובות נוגדנים באנשים סרו-חיוביים לאחר מנה אחת של חיסון SARS-CoV-2 mRNA. N Engl J Med 2021;384:1372–4. https://doi.org/10.1056/NEJMc2101667.
[10] Bradley T, Grundberg E, Selvarangan R, et al. תגובות נוגדנים לאחר מנה אחת של חיסון SARS-CoV-2 mRNA. N Engl J Med 2021;384:1959–61. https://doi.org/10.1056/NEJMc2102051.
[11] Saadat S, Rikhtegaran Tehrani Z, Logue J, et al. טיטרי נוגדנים כרוכים וניטרול לאחר מנת חיסון בודדת בעובדי שירותי בריאות שנדבקו בעבר ב-SARS-CoV-2. JAMA 2021;325:1467–9. https://doi.org/ 10.1001/jama.2021.3341.
[12] Reynolds CJ, Pade C, Gibbons JM, et al. זיהום SARS-CoV-2 קודם מציל תגובות תאי B ו-T לגרסאות לאחר מנת החיסון הראשונה. מדע 2021;372:1418–23. https://doi.org/10.1126/science.abh1282.
[13] Ledford H. האם ייתכן ששילוב חיסוני COVID מגביר את התגובה החיסונית? טבע 2021;590:375–6. https://doi.org/10.1038/d41586-021-00315-5.
[14] Schultz NH, Sorvoll IH, Michelsen AE, et al. טרומבוזיס וטרומבוציטופניה לאחר חיסון ChAdOx1 nCoV-19. N Engl J Med 2021;384:2124–30. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2104882.
[15] Greinacher A, Thiele T, Warkentin TE, et al. טרומבוציטופניה טרומבוטית לאחר חיסון ChAdOx1 nCov-19. N Engl J Med 2021;384:2092–101. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2104840.
[16] Mazzoni A, Di Lauria N, Maggi L, et al. חיסון mRNA במנה ראשונה מספיק כדי להפעיל מחדש את הזיכרון האימונולוגי ל-SARS-CoV-2 בנבדקים שהחלימו מ-COVID-19. J Clin Invest 2021;131:e149150.
[17] Samanovic MI, Cornelius AR, Gray-Gaillard SL, et al. תגובות חיסוניות חזקות נצפו לאחר מנה אחת של מנת החיסון BNT162b2 mRNA באנשים מנוסים ב-SARS-CoV-2-. Sci Transl Med 2022;14:eabi8961.. https://doi.org/ 10.1126/scitranslmed.abi8961.
[18] Khoury DS, Cromer D, Reynaldi A, et al. רמות נוגדנים מנטרלים מנבאות מאוד הגנה חיסונית מפני זיהום SARS-CoV-2 סימפטומטי. Nat Med 2021;27:1205–11. https://doi.org/10.1038/s41591-021-01377-8.
[19] אולם V, Foulkes S, Insalata F, et al. הגנה מפני SARS-CoV-2 לאחר חיסון Covid- 19 וזיהום קודם. N Engl J Med 2022;386:1207–20. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2118691.
[20] Zhang Z, Mateus J, Coelho CH, et al. זיכרון חיסוני הומורלי ותאי לארבעה חיסוני COVID-19. תא 2022;185:2434–51. https://doi.org/10.1016/ j.cell.2022.05.022.
[21] Vardhana S, Baldo L, Morice WG, et al. הבנת התגובות של תאי T ל-COVID-19 חיונית להסברה של אסטרטגיות בריאות הציבור. Sci Immunol 2022;7:eabo1303.. https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo1303.
[22] Moss P. התגובה החיסונית של תאי T נגד SARS-CoV-2. Nat Immunol 2022;23:186–93. https://doi.org/10.1038/s41590-021-01122-w.
[23] גולדברג י, מנדל מ, בר און י"מ, ואח'. הגנה ודעיכה של חסינות טבעית והיברידית ל-SARS-CoV-2.N Engl. J Med 2022;386:2201–12. https://doi. org/10.1056/NEJMoa2118946.
[24] Rossler A, Knabl L, von Laer D, et al. פרופיל נטרול לאחר התאוששות מזיהום SARS-CoV-2 Omicron. N Engl J Med 2022;386:1764–6. https://doi. org/10.1056/NEJMc2201607.
[25] Guerrera G, Picozza M, D'Orso S, et al. חיסון BNT162b2 משרה תאי T ספציפיים ל-SARS-CoV-2-עמידים עם פנוטיפ זיכרון של תאי גזע. Sci Immunol 2021;6(eabl5344). https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abl5344.
[26] Goldblatt D. SARS-CoV-2: מחסינות עדר לחסינות היברידית. Nat Rev Immunol 2022;22:333–4. https://doi.org/10.1038/s41577-022-00725-0.